La recherche d'inhibiteurs de protéases agissant sur le clivage gamma de la protéine APP et utilisables dans la maladie d'Alzheimer représente un enjeu thérapeutique majeur.

L'un des signes constants de la maladie d'Alzheimer est l'existence chez les patients de dépôts amyloïdes (plaques séniles) dont le principal constituant est le peptide amyloïde p (peptide Ap, notamment Ap42, qui se rencontre majoritairement dans la formation de là plaque sénile).

Le peptide Ap est issu d'un processus protéolytique d'un ou plusieurs isoformes de l'APP. Les isoformes de l'APP sont des sialoglycoprotéines transmembranaires qui sont codées par un simple gène sur le chromosome 21 qui contient 19 exons. Les 3 isoformes de l'APP sont APP69s, APP7, et l'APP77o. Le clivage proteolytique de l'APP fait intervenir 3 protéases, appelées secretases a, (3 et y. Le peptide Ap résulte du clivage p et y (Murphy et al (1999)"y secretase, evidence for multiple proteolytic activities and influence of <BR> <BR> <BR> <BR> <BR> <BR> membrane positioning of substrate on generation of amyloid vS peptides of varying length" J. Biol. Chem. 274 (17) 11914-11923).

Le peptide Ap (forme Ap42 ou Ap40) est toxique pour les neurones ainsi que d' autres fragments du clivage par la y secrétase, libérés dans le cytoplasme. Il serait donc particulièrement avantageux de disposer de composés capables d'inhiber la production de ces peptides, qui ne soient pas toxiques sur les organes ou les processus qui mettent en jeu les mêmes enzymes ou des enzymes similaires. Cet objectif n'est pas trivial car les preuves

se sont accumulées tendant à rapprocher ou à identifier la y sécretase et la présélinine-1, ce qui laisse à penser que les inhibiteurs de la y secrétase seront aussi des inhibiteurs des voies métaboliques où intervient la préséniline-1, notamment la voie Notch Delta. Cette voie se retrouve dans le développement embryonnaire et dans l'hématopoïèse. A cet égard, les inhibiteurs de la y secrétase décrits jusqu'ici sont également toxiques pour la voie Notch- Delta et sont le plus souvent peu spécifiques, inhibant aussi bien la chymotrypsine, l'élastase ou les calpaïnes.

Il existe donc un réel besoin pour des composés ayant des propriétés pharmacologiques améliorées, assurant une meilleure sélectivité et une toxicité moindre lors d'utilisations thérapeutiques. De façon surprenante la demanderesse maintenant a trouvé, en utilisant une méthode originale, des composés inhibiteurs ayant des propriétés biologiques améliorées, du point de vue de l'efficacité, la sélectivité et/ou de la toxicité. Plus particulièrement, la présente demande décrit une nouvelle sous famille d'iso-coumarines ayant des propriétés améliorées inhibitrices de la production de peptide amyloïde ß. Il s'agit plus spécifiquement des composés de formule générale (I) ci-après : dans laquelle : - Rl et R2, identiques ou différents, sont choisis parmi un atome d'hydrogène, un groupe (C1-C12) alkyle, (Cl-C12) halogénoalkyle, (C2-C12) alkényle, (C2- C 12) alkynyle, (C3-C 15) cycloalkyle, (C5-C18) aryle, (C5-C12) aryle (C 1-C 12) alkyle, (C5-C12) aryle (C2-C 12) alkényle, (C 1-C 12) alkoxy, hétérocycle, (C 1- C15) thioalkoxy,-COR,-COOR,-CONHR et-S02R, le groupe R étant un groupe (C1-C12) alkyle, (Cl-C12) halogénoalkyle, (C2- C12) alkényle, (C2-C12) alkynyle, (C3-C15) cycloalkyle, (C5-C12) aryle, (C5- C 12) aryle (Cl-CI2) alkyle, (C5-C 12) aryle (C2-C 12) alkényle, hétérocycle ou (C 1-

C15) thioalkoxy, le groupement R-CO pouvant également être un acide gras, saturé ou insaturé, un acide aminé ou un peptide, protégé ou non, - Z représente un groupe choisi parmi-CH2-CH2-O-CH3 et-CH2-CH2-O-CHZ- CH2-O-CH3, éventuellement substitué par un acide gras, saturé ou insaturé, un acide aminé ou un peptide, protégé ou non, - A représente un atome d'azote, de phosphore ou un groupe CX dans lequel X est un atome d'halogène (de préférence un atome de chlore) ou un groupe OB, B étant un atome d'hydrogène ou un groupement (C5-C12) aryle, (Cl-C6) alkyle ou tosyle, et - Y représente un atome d'oxygène, de soufre ou d'azote, les groupes alkyle, alkényle, cycloalkyle, aryle, alkoxy, hétérocycle et thioalkoxy étant éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis de préférence parmi un atome d'halogène, un groupe hydroxyle, (Cl-C6) alkyle, (C3-C15) cycloalkyle, (C5- C12) aryle, (Cl-C15) alkoxy, (Cl-C15) thioalkoxy, hétérocycle, amino, amino (Cl- C15) (cyclo) alkyle, aminodi (Cl-C15) (cyclo) alkyle, nitro, cyano, trifluorométhyle, (C1- C15) acyle,-OS02R',-OCOR',-COOR'et-OCOOR', où R', identique ou différent, représente un atome d'hydrogène ou un radical (Cl-C6) alkyle, ainsi que leurs sels et, le cas échéant, leurs énantiomères.

L'invention a donc pour objet les composés ci-dessus en tant qu'inhibiteurs de la production de peptide amyloïde Ap. L'invention a en outre pour objet des composés nouveaux particuliers répondant à la formule générale (I) ci-dessus, ayant des propriétés avantageuses. Elle concerne également des compositions pharmaceutiques comprenant de tels composés, et leurs utilisations, notamment dans des méthodes de traitement thérapeutique.

Selon l'invention, le terme"alkyle"désigne un radical hydrocarboné linéaire ou ramifié ayant typiquement de 1 à 12 atomes de carbone. Il peut s'agir d'un alkyle inférieur ayant de 1 à 6 atomes de carbone, tel que méthyle, éthyle, propyle, isopropyle, butyle, isobutyle, tert-butyle, pentyle, néopentyle ou n-hexyle. Les groupes alkyle peuvent éventuellement être interrompus par un hétéroatome. Les groupes en C,-C4 sont préférés. Le terme alkyle,

au sens large, désigne également les groupes alkyle cycliques (cycloalkyle).

Selon l'invention, le terme"alkényle"désigne un radical hydrocarboné insaturé, linéaire ou ramifié, ayant typiquement de 2 à 12 atomes de carbone. Il peut comporter une ou plusieurs doubles liaisons. Il peut s'agir d'un alkényle inférieur ayant de 2 à 6 atomes de carbone, tel que éthylène, propylène, butylène, etc.

Selon l'invention, le terme"alkynyle"désigne un radical hydrocarboné comportant une ou plusieurs triple liaisons, linéaire ou ramifié, ayant typiquement de 2 à 12 atomes de carbone. Il peut s'agir d'un alkynyle inférieur ayant de 2 à 6 atomes de carbone.

Le terme « cycloalkyle » désigne tout système hydrocarboné cyclique, pouvant comprendre typiquement de 3-15 atomes de carbone et être mono-ou poly-cyclique. Des exemples de groupes cycloalkyle sont les groupes cyclopropyle, cyclobutyle, 1-adamantyle ou 2- adamantyle. Les groupes cycloalkyle peuvent éventuellement présenter une insaturation éthylénique. A ce titre, on peut notamment citer le radical norbornène-5 yle-2.

Les groupes « aryle » sont des systèmes hydrocarbonés aromatiques mono-, bi-ou tri- cycliques ayant de 2 à 18 atomes de carbone et éventuellement un ou plusieurs hétéroatomes, de préférence de 5 à 18 atomes de carbone, plus préférentiellement de 5 à 12 atomes de carbone. Il peut s'agir plus particulièrement du groupe phényle, naphtyle, anthracényle, pyridinyle, dihydropyridinyle, pyrimidyle, pyrazolyle, pyrrolyle, furyle, thiényle, thiazolyle, quinoxalinyle, quinoléinyle, indolyle, isoindolyle, quinolyle, imidazolyle, benzofurazannyle ou carbazolyle. Par ailleurs, comme indiqué ci-avant, les groupes aryle peuvent être substitués par un ou plusieurs substituants, identiques ou différents, qui peuvent être cycliques ou non, aromatiques ou non.

A titre d'exemples de groupes aryles substitués ou non substitués particuliers, on peut citer notamment les groupes methylpyridinium, pyridinyl-N-Oxide, 2-pyrrolyl, 2 [Nmethyl pyrrolyl] ; 2 furanyl ; 2- (5bromofuranyl), 2- (3 Nitrofuranyl) ; 3 acrylofuranyl ; 2-thiophenyl, 3-thiophenyl ; 2- (5-methylthiophenyl), [2-thienyl] methyl], 3- (2-thienyl propyl) ; 2 thiophenylcarbonyl- ; urocanyl, et 3 [[2 amino thiazolyl]-methyl3.

Parmi les aryles polycycliques, substitués ou non, notamment parmi les hétérocycles aromatiques à 5 membres, couplés à un cycle à 6 membres, on peut citer de préférence les groupes : 2-indolyl ; 4-indolyl ; N-methyl 2-indolyl ; indolyl 3-methylenyl, indolyl3- methylenyl- ; 2 [5-fluoro-indolyl] ; 2- [5-chloro-indolyl] ; 2- [5-bromoindolyl] ; 2- benzofuranyl ; 5-benzotriazolyl et 5-benzimidazolyl.

Parmi les hétérocycles aromatiques à 6 membres, éventuellement substitués, on préfère dans le cadre de l'invention les groupes : 3-pyridinyl, 4-pyridinyl, 2-chloropyridinyl, 2 [ [3- (trifluoromethyl) phenyl]-amino]-3 pyridinyl, 3- (pyridinyl methylenyl)- ; 4 [piperidinylthio methylenyl], 3- [2-chloropyridinyl] ; 3- [5-bromo pyridinyl] ; 3- [6 chloropyridinyl], 3- [2, 6- dichloropyridinyl] ; 2-pyrazinyl ; 2- [5-methyl pyrazinyl] ; 2-quinolinyl ; 3-quinolinyl ; 4- quinolinyl ; 8-quinolinyl ; 2- [4-methoxyl quinolinyl] ; 4- [2-phenylquinolinyl] et 2- [1, 4 benzodiazinyl].

D'autres exemples préférés d'aryles éventuellement substitués sont les groupes furfuryl ; 3- [furanmethylenyl] ; 2- (thiophenemethylenyl)-3- (thiophenemethylenyl) ; 2- [ (2-thienyl) ethylenyl]- ; 2- [ (3-thienyl) ethylenyl] ; 3-indoleethylenyl ; 4-imidazolemethylenyl ; 4- indolyl ; 5-indolyl ; 3 [ (3-indole) propylidenly]- ; 2-benzimidazolyl ; 1-benzotriazolyl- ; 2- pyridinemethylenyl ; 2-pyridinepropylenyl ; 3-pyridinemethylenyl ; 2- [ (6 methyl-pyridine) methylenyl] ; (furfuryl)-, (2-thiophenemethylenyl)- ;- [1 (3-imidazole propylidenyl)]- ; 2- [ (4 imidazolyl) ethylidenyl]- ;- [ (2-pyridine 2 ethylidenyl]-; 3-pyridinemethylenyl ; 3- [ (5 methyl isoxazolyl)]- ; 2- [ (5 bromothiazolyl)]- ; 3- [ (4 carbonitrile pyrrazolyl)]- ; 2- [ (1- methylpyrrolyl)]- ; 2-pyrrolyl ; 2-furanyl ; 2- [ (5 methyl) furrinyl]-; 2-thiophenyl, 3- thiophenyl ; 2 [ (3-bromothiophenyl]- ; 2- [ (5-nitro) thiophenyl] ; 3- (indolyl) ; 3- [ (5-methoxy) indolyl]-2-pyidinyl, 3-pyridinyl, 4-pyridinyl, 2-quinoleyl, 3-quinoleyl, 4-quinoleyl, 4 pyridinyl N oxide, Benzyl ; phenyl ; trans styrenyl, 2 nitrophenyl, (4-methyl) phenyl- ; (4 methoxy) phenyl- ; (4 amino) phenyl ; 2,4-dichlorophenyl ; (2-nitro, 4 trifluoromethyl) phenyl- ; 1-napthyl ; 2-naphtyl et (3 amino-2chloro) phenyl-.

Le terme « arylalkyle » ou « arylalkylène » désigne tout groupe alkyle ou alkylène tel que défini ci-avant, dans lequel est incorporé un ou plusieurs groupes aryle tels que définis ci- avant.

Les groupes"acyle"sont des groupes-CO- (cyclo) alkyle ou-CO-aryle, (cyclo) alkyle et aryle étant tels que définis ci-avant.

Les groupes « alkoxy » correspondent aux groupes (cyclo) alkyle définis ci-dessus reliés au noyau par l'intermédiaire d'une liaison-0- (éther).

Les groupes « thioalkoxy » correspondent aux groupes (cyclo) alkyle définis ci-dessus reliés au noyau par l'intermédiaire d'une liaison-S- (thio).

Par « hétérocycle », on entend tout système mono-ou multicyclique carboné, aromatique ou non, contenant avantageusement de 3 à 15 chaînons, dont éventuellement 1 à 4 hétéroatomes choisis de préférence parmi O, N et S. On peut citer notamment les groupes pyridinyle, pyrimidyle, imidazolyle, benzymidazolyle, isoxazole, pipéridyle, pyrazolidinyle, piperazinyle, dihydropyridinyle, methylpyridinium, pyridinyl-N-Oxide, morpholinyle. Comme indiqué, ces groupes hétérocycliques peuvent être substitués par un ou plusieurs substituants, identiques ou différents. A titre d'exemples particuliers d'hétérocycles, aromatiques ou non, substitués ou non, on peut citer de préférence les groupes suivants : 2-pyrrolyl, 2 [Nmethyl pyrrolyl] ; 2 furanyl ; 2- (5bromofuranyl) ; 2- (3 Nitrofuranyl) ; 3 acrylofuranyl ; [2-thienyl] methyl] ; 3- (2-thienyl propyl) ; urocanyl et 3 [ [2 amino thiazolyl]-methyl].

On peut également citer les hétérocyles aromatiques à 5 membres, couplés à un cycle à 6 membres tels que de préférence : 2-indolyl ; 4-indolyl ; N-methyl 2-indolyl ; indolyl 3-methylenyl ; indolyl3-methylenyl-; 2 [5-fluoro-indolyl] ; 2 [5-chloro-indolyl] ; 2 [5-bromoindolyl] ; 2-benzofuranyl ; 5- benzotriazolyl et 5-benzimidazolyl ; ou des hétérocyles aromatiques à 6 membres, tels que de préférence : 3-pyridinyl, 4-pyridinyl, 2-chloropyridinyl ; 2 [ [3- (trifluoromethyl) phenyl]-amino]-3 pyridinyl ; 3- (pyridinyl methylenyl)- ; 4 [piperidinylthio methylenyl] ; 3- [2- chloropyridinyl] ; 3- [5-bromo pyridinyl] ; 3- [6 chloropyridinyl] ; 3- [2, 6-dichloropyridinyl] ; 2-pyrazinyl ; 2- [5-methyl pyrazinyl] ; 2-quinolinyl ; 3-quinolinyl ; 4-quinolinyl ; 8- quinolinyl ; 2- [4-methoxyl quinolinyl] ; 4- [2-phenylquinolinyl] et 2- [1, 4 benzodiazinyl].

D'autres groupes hétérocycliques préférés sont les suivants : Furfuryl ; 3- [furanmethylenyl] ; 2- (thiophenemethylenyl)- ; 3- (thiophenemethylenyl) ; 2- [ (2-

thienyl) ethylenyl]- ; 2- [ (3-thienyl) ethylenyl] ; 3-indoleethylenyl ; 4-imidazolemethylenyl ; 4-indolyl ; 5-indolyl ; 3 [ (3-indole) propylidenly]- ; 2-benzimidazolyl ; 1-benzotriazolyl- ; 2- pyridinemethylenyl ; 2-pyridinepropylenyl ; 3-pyridinemethylenyl ; 2-[(6 methyl-pyridine) methylenyl] ; (furfuryl)-, (2-thiophenemethylenyl)- ;- [1 (3-imidazole propylidenyl)]- ; 2- [ (4 imidazolyl) ethylidenyl]- ;- [ (2-pyridine 2 ethylidenyl]- ; 3-pyridinemethylenyl ; 3- [ (5 methyl isoxazolyl)]- ; 2- [ (5 bromothiazolyl)]- ; 3- [ (4 carbonitrile pyrrazolyl)]- ; 2- [ (1- methylpyrrolyl)]- ; 2-pyrrolyl ; 2-furanyl ; 2- [ (5 methyl) furrinyl]- ; 3- (indolyl) ; 3- [ (5- methoxy) indolyl]- ; 2-pyidinyl, 3-pyridinyl, 4-pyridinyl, 2-quinoleyl ; 3-quinoleyl, 4- quinoleyl et 4 pyridinyl N oxide.

Par « halogène », on entend un atome de fluor, de chlore, de brome ou d'iode.

Par"halogénoalkyle", on entend les radicaux alkyle, tels que définis précédemment, dans lesquels les atomes d'hydrogène ont été remplacés par des atomes d'halogène, tels que définis précédemment.

Par « hétéroatome », on entend un atome choisi parmi O, N, S et P.

Par « acide aminé », on entend tout acide aminé naturel ou non-naturel (série D), notamment alanine, valine, leucine, isoleucine, proline, methionine, phenylalanine, tryptophane, glycine, sérine, thréonine, cystéine, tyrosine, asparagine, glutamin, acide aspartique, acide glutamique, lysine, arginine, histidine, beta-alanine, norleucine, norvaline, phénylglycine, acide alpha-aminobutyrique, acide epsilon-aminocaproïque, citrulline, hydroxyproline, ornithine ou sarcosine.

Par peptide, on entend une séquence de 2 à 20 acides aminés tels que définis précédemment.

Par « acides gras » on entend les acides gras saturés ou insaturés. On peut notamment citer l'acide linoléïque, l'acide linolénique, l'acide oléïque, l'acide palmitique, l'acide arachidonique, l'acide rétinoique, l'acide stéarique, l'acide cis-9,10-époxy stéarique ; ou les chaînes grasses du type cholestérol.

A cet égard, les composés de l'invention peuvent être fonctionalisés par tout agent (notamment de type peptide, acide gras, etc.) permettant en outre de faciliter la biodisponibilité ou le passage de la barrière hémato-encéphalique ou d'autres barrières ou

membranes biologiques, notamment des membranes cellulaires.

Parmi les peptides utilisables, on peut citer plus particulièrement ceux décrits par Ch.

Rousselle et coll.,"Enhanced delivery of doxorubicin into the brain via a peptide-vector- mediated strategy" (JPET 296 : 124-131,2001) ; les peptides selon la demande de brevet WO 01/64738 ; ainsi que de nombreux peptides issus de protéines capables de percer les membranes, ces peptides pouvant être extraits de virus (e. g., protéines d'enveloppe), de bactéries, d'insectes, comme les séquences décrites dans la demande de brevet WO 97/12912, ou d'organismes supérieurs. Les séquences peptidiques préférées sont les plus courtes.

Comme il est illustré dans les exemples, les composés préférés selon l'invention sont dotés des propriétés requises d'inhibition de la production de peptide Ap, mais respectent le développement embryonnaire. A cet égard, la présente invention montre en effet de manière avantageuse et inattendue qu'il est possible de discriminer entre l'action sur la production de peptide A (3 et sur d'autres phénomènes où intervient aussi la présénilinel (par exemple la voie Notch Delta, le développement embryonnaire ou l'hématopoïèse), et de produire ou sélectionner des composés présentant un profil pharmacologique particulièrement avantageux. L'invention a donc également pour objet une méthode de sélection, identification, caractérisation ou qualification de composés inhibiteurs de protéase sélectifs, consistant en un double test du composé d'une part sur la production de peptide Ap (à partir d'APP) et d'autre part sur une activité toxique dépendant de protéase.

L'invention a également pour objet des compositions, notamment pharmaceutiques comprenant les composés tels que définis ci-avant, ou obtenus par la méthode décrite ci- avant. L'invention concerne en outre l'utilisation de ces composés ou compositions pour le traitement de pathologies neurodégénératives, notamment pour l'inhibition du clivage de l'APP chez des sujets, en particulier pour traiter ou inhiber ou prévenir l'apparition ou le développement de la maladie d'Alzheimer, ou comme têtes de séries pour des études ou processus d'optimisation ou de modélisation moléculaire.

Des composés inhibiteurs particulièrement préférés au sens de l'invention sont des composés de formule générale (I) ci-avant, dans laquelle : - Y représente O, S ou N, de préférence O, et/ou - A représente un atome d'azote ou un groupe CX dans lequel X est un atome d'halogène (de préférence un atome de chlore) ou un groupe OB, B étant un atome d'hydrogène ou un groupement (Cl-C3) alkyle ou tosyle, plus préférentiellement A représente C-C1, et/ou - Z est le groupe methoxy-ethyl-.

Dans une première variante, l'invention porte sur les composés de formule (I) telle que définie ci-avant, dans laquelle l'un des groupes RI et R2 est un atome d'hydrogène.

Dans une autre variante, l'invention porte sur les composés de formule (I) telle que définie ci-avant, dans laquelle les deux groupes RI et R2 sont différents de l'hydrogène.

Une première famille de composés particulièrement préférés au sens de l'invention est représentée par les composés de formule générale (II) ci-dessous : dans laquelle Rl est un atome d'hydrogène et R2 est un groupe choisi parmi X-CO- ; Xl-0- CO-et X2-NH-CO-, dans lesquels : . X représente un groupe cycloakyle comportant 1, 2 ou 3 cycles ayant chacun de 3 à 6 atomes de carbone, ou un groupe alkényle ou alkynyle en C2-C12, ou un groupe hétérocyclique aromatique à 5 membres choisi parmi 2-pyrrolyl, 2- [N-methyl pyrrolyl] ; 2

furanyl ; 2- (5bromofuranyl) ; 2- (3 Nitrofuranyl) ; 3 acrylofuranyl ; 2-thiophenyl ; 3- thiophenyl ; 2- (5-methylthiophenyl) ; [2-thienyl] methyl] ; 3- (2-thienyl propyl) ; 2 thiophenylcarbonyl- ; urocanyl et 3-[[2-amino thiazolyl]-methyl] ; ou un hétérocyle aromatique à 5 membres couplé à un cycle à 6 membres choisi parmi 2-indolyl ; 4-indolyl ; N-methyl 2-indolyl ; indolyl 3-methylenyl ; indolyl-3-methylenyl- ; 2 [5-fluoro-indolyl] ; 2- [5-chloro-indolyl] ; 2- [5-bromoindolyl] ; 2-benzofuranyl ; 5-benzotriazolyl et 5- benzimidazolyl ; ou un hétérocyle aromatique à 6 membres choisi parmi 3-pyridinyl ; 4- pyridinyl ; 2-chloropyridinyl ; 2-[[3-(trifluoromethyl) phenyl]-amino]-3 pyridinyl ; 3- (pyridinyl methylenyl)- ; 4 [peridinylthio methylenyl] ; 3- [2-chloropyridinyl] ; 3- [5-bromo pyridinyl] ; 3- [6 chloropyridinyl] ; 3- [2, 6-dichloropyridinyl] ; 2-pyrazinyl ; 2- [5-methyl pyrazinyl] ; 2-quinolinyl ; 3-quinolinyl ; 4-quinolinyl ; 8-quinolinyl ; 2- [4-methoxy quinolinyl] ; 4- [2-phenylquinolinyl] et 2- [1, 4 benzodiazinyl] ; . XI représente un groupe cycloakyle comportant 1,2 ou 3 cycles ayant chacun de 3 à 6 atomes de carbone, ou un groupe alkényle ou alkynyle en C2-C12, ou représente un groupe hétérocyclique aromatique choisi parmi furfuryl ; 3- [furamnethylenyl] ; 2- (thiophenemethylenyl)- ; 3- (thiophenemethylenyl) ; 2-[(2-thienyl) ethylenyl]-; 2-[(3- thienyl) ethylenyl] ; 3-indoleethylenyl ; 4-imidazolemethylenyl ; 4-indolyl ; 5-indolyl ; 3 [ (3-indole) propylidenly]- ; 2-benzimidazolyl ; 1-benzotriazolyl- ; 2-pyridinemethylenyl ; 2-pyridinepropylenyl ; 3-pyridinemethylenyl ; 2-[(6 methyl-pyndine) methylenyl] ; 1- adamantyl et 2-adamantyl ; et . X2 représente un groupe cycloakyle comportant 1, 2 ou 3 cycles ayant chacun de 3 à 6 atomes de carbone, ou un groupe alkényle ou alkynyle en C2-C12, ou représente un groupe hétérocyclique aromatique choisi parmi (furfuryl)- ; (2-thiophenemethylenyl)- ;- [1 (3-imidazole propylidenyl)]- ; 2- [ (4 imidazolyl) ethylidenyl]- ;- [ (2-pyridine 2 ethylidenyl]- ; 3-pyridinemethylenyl ; 3- [ (5 methyl isoxazolyl)]- ; 2- [ (5 bromothiazolyl)]-et 3- [ (4 carbonitrile pyrrazolyl)]-.

Une deuxième famille de composés particulièrement préférés au sens de l'invention

est représentée par les composés de formule générale (II) telle que définie ci-dessus dans laquelle : a) RI et R2, identiques ou différents, représentent l'atome d'hydrogène ou un groupe Cl-6alkyle, fluoro-CI-6alkyle, Cl-, alkyle substitué avec K ou fluoro-Cl 6alkyle substitué avec K, K représentant un groupe halogène, OH, CN, NO2, NH2, Cl 6 alkoxy ou C1-6 alkyl-OCO-, étant entendu que lorsque l'un des groupes RI et R2 représente un atome d'hydrogène, l'autre groupe R 1 ou R2 est différent de l'atome d'hydrogène ; ou b) RI et R2, identiques ou différents, représentent l'atome d'hydrogène ou un groupe 9-fluoroenylmethyle, phényle, phényle substitué avec J, phényle disubstitué avec J, phényle trisubstitué avec J, naphtyle, naphtyle substitué avec J, naphtyle disubstitué avec J ou naphtyle trisubstitué avec J, J représentant un groupe halogène, OH, CN, NO2, NH2, C1-6 alkyl ou C1-6 alkoxy, étant entendu que lorsque l'un des groupes RI et R2 représente un atome d'hydrogène, l'autre groupe R1 ou R2 est différent de l'atome d'hydrogène ; ou c) RI et R2, identiques ou différents, représentent l'atome d'hydrogène ou un groupe C1-6 alkyle substitué par un groupement phényle, C1-6 alkyle substitué par 2 groupements phényle, C1-6 alkyle substitué par un groupe phényle lui-même substitué par un groupement J, ou un groupe C1-6 alkyle substitué par 2 groupements phényle dont l'un au moins est substitué avec J, J étant tel que défini ci-dessus, étant entendu que lorsque l'un des groupes RI et R2 représente un atome d'hydrogène, l'autre groupe RI ou R2 est différent de l'atome d'hydrogène ; ou

d) RI et R2, identiques ou différents, représentent l'atome d'hydrogène ou un groupe 2- [ (1-methylpyrrolyl)]- ; 2-pyrrolyl ; 2-furanyl ; 2- [ (5 methyl) furanyl]-; 2- thiophenyl ; 3-thiophenyl ; 2 [ (3-bromothiophenyl]- ; 2- [ (5-nitro) thiophenyl] 3- (indolyl) ; 3- [ (5-methoxy) indolyl]- ; 2-pyidinyl ; 3-pyridinyl ; 4-pyridinyl ; 2-quinoleyl ; 3-quinoleyl ; 4-quinoleyl ou 4-pyridinyl N-oxide, étant entendu que lorsque l'un des groupes RI et R2 représente un atome d'hydrogène, l'autre groupe RI ou R2 est différent de l'atome d'hydrogène ; ou e) RI et R2, identiques ou différents, représentent l'atome d'hydrogène, un groupe cycloaklyle comportant 1,2 ou 3 cycles ayant chacun de 3 à 6 atomes de carbone, ou un groupe alkényle ou alkynyle en C2-C12 ; étant entendu que lorsque l'un des groupes RI et R2 représente un atome d'hydrogène, l'autre groupe RI ou R2 est différent de l'atome d'hydrogène.

Dans cette famille, lorsque RI et R2 sont tous deux différents de l'hydrogène, on préfère les composés dans lesquels RI et R2 sont identiques.

Une troisième famille de composés particulièrement préférés au sens de l'invention est représentée par les composés de formule générale (II) telle que définie ci-dessus dans laquelle R1=H et R2 représente un groupement X3-SO2-dans lequel X3 est un groupe choisi parmi benzyle ; phényle ; trans styrenyl, 2-nitrophényle, (4-methyl) phényle- ; (4-methoxy) phényle- ; (4-amino) phényle ; 2,4-dichlorophényle ; (2-nitro,-4-trifluoromethyl) phényle- ; 1-napthyle ; 2-naphtyle ; (3-amino-2chloro) phényle- ; un groupe cycloaklyle comportant 1,2 ou 3 cycles ayant chacun de 3 à 6 atomes de carbone, et un groupe alkényle ou alkynyle en C2-C12.

Une quatrième famille de composés particulièrement préférés au sens de l'invention est représentée par les composés de formule générale (II) telle que représentée ci-avant dans laquelle RI représente-S02-R3 et R2 représente-S02-R4, les groupes R3 et R4, identiques

ou différents, de préférence identiques, représentant : a) un groupe Cl 6 alkyle, fluoro-CI 6alkyle ; Cul 6 alkyle substitué avec K, ou fluoro- Cl 6alkyle substitué avec K, dans lequel K représente un groupe halogène, OH, CN, NO2, NH2,C,-6 alkoxy ou Cl 6 alkyl-OCO- ; ou b) un groupe 9-fluoroenylmethyl, phényle, phényle substitué avec J, phényle disubstitué avec J, phényle trisubstitué avec J, naphtyle, naphtyle substitué avec J, naphtyle disubstitué avec J, naphtyle trisubstitué avec J, J représentant un groupe halogène, OH, CN, NO2, NH2, Cl_6 alkyl ou Cl_6 alkoxy ; ou c) un groupe C1-6 alkyle substitué par un groupement phényle, Cl 6 alkyle substitué par 2 groupements phényle, C1-6 alkyle substitué par un groupe phényle lui-même substitué par un groupement J, ou un groupe alkyle C1-6 substitué par 2 groupements phényle dont l'un au moins est substitué avec J, J étant tel que défini ci-dessus ; ou d) un groupe cycloaklyle comportant 1,2 ou 3 cycles ayant chacun de 3 à 6 atomes de carbone, ou un groupe alkényle ou alkynyle en C2-C12.

Des composés particuliers de l'invention sont les composés 5-161 décrits dans les exemples. Des composés particulièrement préférés appartiennent aux séries carbamates, amides ou urées substituées par des bras espaceurs (cycliques ou non-cycliques, aromatiques ou non) terminés ou substitués par des groupements donneurs ou accepteurs d'hydrogène (NH-, COOH, OH,..). Ainsi, des composés particulièrement préférés au sens

de l'invention sont des composés de formule générale (I) telle que définie ci-avant, dans laquelle les groupes RI et R2 sont choisis parmi H,-COOR ;-CONHR et-COR, R étant de préférence choisi parmi un groupe (Cl-C12) alkyle, (Cl-C12) halogénoalkyle, hétérocycle, (C2-C12) alkényle, (C2-C12) alkynyle, (C3-C15) cycloalkyle, ou (C5-C12) aryle, ou (C5-C12) aryle (Cl-C12) alkyle, éventuellement substitué, par exemple par un groupe amino ou COOR'.

Des exemples de composés particulièrement préférés sont notamment les composés suivants, ainsi que leurs sels et, le cas échéant, leurs énantiomères : Composé 98 : 7- [5-aminobutyl-1 carbonyl] amino-4-chloro-3- (2-methoxy-ethoxy)- isochromène-1-one Composé 88 : 7- [5-methoxycarbonyl pentyl-1 carbonyl] amino-4-chloro-3- (2-methoxy- ethoxy)-isochromène-1-one Composé 33 : 7- [N-tertio-butyl-methylènyl carbonyl] amino-4-chloro-3- (2-methoxy- ethoxy)-isochromène-1-one Composé 97 : 7- [5-aminopentyl-1 carbonyl] amino-4-chloro-3- (2-methoxy-ethoxy)- isochromène-1-one Composé 101 : 7-[[-(2-amino)-3 [(3-indolyl)] propyl-l carbonyl]]-amino-4-chloro-3-(2- methoxy-ethoxy)-isochromène-1-one Ces composés sont des inhibiteurs importants de la production de peptide Abéta (15-20 % à 1 micromolaire pour les composés 88,98 et 33) et n'inhibent pas la segmentation embryonnaire à des concentrations 50 fois supérieures à la concentration qui inhibe la production de peptide Abéta. Le composé 101 est un inhibiteur puissant de la production de peptide Abéta (25 % à 10 micromolaire) et non inhibiteur de la segmentation embryonnaire à 50, uM.

Les composés de l'invention peuvent être synthétisés à partir de matériaux du commerce, tels que l'acide homophtalique en utilisant des procédés classiques de la chimie organique, comme illustré dans les exemples. Ainsi, il est possible, à partir de l'acide homophtalique, de synthétiser le noyau 7-amino-4-chloro-3-substitué alkyl isocoumarine

selon le protocole décrit par Powers et al. (Powers et al. (1990) Biochemistry, 29,3108- 3118). A partir de ce synthon clé,"l'habillage"de la fonction amine aromatique peut être réalisé selon la réaction d'acylation déjà très longuement décrite à l'aide de chlorure d'acide, et la formation d'urée par l'utilisation d'isocyanates. Il est entendu que toute autre voie de synthèse conventionnelle, connue de l'homme du métier, peut être utilisée pour la réalisation des composés ci-dessus.

En particulier, les composés comprenant un groupe X peuvent être préparés par exemple en partant des acides carboxyliques activés par la DCC comme agent de couplage.

Les composés comprenant un groupe X1 ou X2 peuvent être obtenus par exemple par réaction respectivement de l'alcool ou de l'amine sur le phosgène puis addition du synthon commun 7-amino-4-chloro-3- (2-methoxy-ethoxy)-isochromen-1-one, dont la synthèse est décrite dans les exemples. Des composés (notamment les dérivés amine monosubstituées) peuvent être préparés par condensation d'un aldéhyde (2 eq) sur le substrat isocoumarine (leq), suivie de la réduction par des borohydrures de l'imine correspondante. Les composés disubstitués peuvent aussi être obtenus par condensation d'un aldéhyde (4 eq) dans les mêmes conditions que pour les monosubstitués. Ces différentes méthodes sont illustrées dans les exemples.

Les propriétés biologiques des composés de l'invention peuvent être vérifiées et testées selon différents modèles ou tests. A cet égard, l'activité inhibitrice de la production de peptide Ap peut être déterminée par exemple par l'un des tests suivants, décrits dans la littérature : - Immunoprécipitation-électrophorèse des produits radiomarqués, selon la technique décrite par M. E. Figueiredo-Pereira & al. (1999), Distinct secretases, a cystein protease and a serine protease, generate the C-termini of amyloid ß-proteins Aß 1-40 and Aß 1-42 respectively ; J. Neurochem. 72,1417-1422 ; - ELISA, par détection spectrofluorométrique ou par détection fluorescence, selon la méthode proposée par G. Christie, & al. (1999), Alzheimer disease : correlation of the suppression b-amyloid peptide secretion from cultured cells with inhibition of the ch) motrypsin-like activity of the proteasome ; J. of Neurochemistry, 73,195-204 ; - Immunoprécipitation-spectro de masse, selon la technique de Ron Wang et al.

(1996) The profile of soluble Amyloid 3 Protein in cultured cell media, detection and <BR> <BR> <BR> <BR> quantification of amyloid fl protein and variants by immunopi-ecipitation-mass spectromet7y. J. Biol. Chem. 271,31894-31902 ou de Michael P. Murphy& al. (1999), y- Secretase, evidence for multiple pfoteolytic activities and influence of membrane positioning of substrate on generation of amyloïd ß peptides of varying length, J.

Biol. Chem. 274,11914-11923.

Ces différents tests, seuls ou en combinaison (s), permettent d'évaluer l'activité inhibitrice des composés de l'invention. Il est entendu que le caractère inhibiteur englobe l'inhibition totale ou partielle de l'activité. Toutefois, on préfère, dans le cadre de l'invention, des composés capables d'inhiber au moins 25%, plus préférentiellement au moins 45% de la production de peptide Ap, notamment de la forme Ap42.

Comme indiqué précédemment, les composés selon l'invention sont préférentiellement des inhibiteurs sélectifs de la production de peptide Ap. Le terme sélectif indique que les composés préférés selon l'invention ont une action inhibitrice de l'activité d'hydrolyse de la protéine APP supérieure à leur action inhibitrice éventuelle d'autres processus protéolytiques (autres substrats et/ou autres enzymes, telles que élastase, calpaïne et/ou chymotrypsine, par exemple). Des composés préférés au sens de l'invention sont des composés essentiellement inactifs ou sans effet sur la fonction Notch Delta ou la segmentation ou l'expression du gène lunatic fringe à des concentrations qui inhibent la production de Abéta.

La toxicité ou la non-toxicité sur les voies dépendant des enzymes peuvent s'apprécier par injection à des embryons ou des femelles gestantes, suivie de l'observation des perturbations du développement embryonnaire. Un test préféré selon l'invention est le blocage du développement embryonnaire observé sur un oeuf récemment embryonné, tel que décrit dans R. Jelinek & al. (1985), Indian Journal of experimental biology, 23,588- 595.

Cette propriété peut également être déterminée en testant l'effet des composés sur une fonction connue pour être importante dans l'embryogenèse, telle que la segmentation, comme décrit ci-après. Ainsi, un test préféré de toxicité est basé sur des profils d'expression de gènes durant la somitogénèse de l'embryon de poulet (MJ Mc Grew & al (1998) Curr.

Biol., 8,979-982 ; Caroline Jouve, Thèse Université de la Méditerranée, 28 sept 2000). A cet égard, l'équipe du Dr. Pourquié, inventeur de la présente demande, a mis en évidence l'expression, en vague de propagation, du gène lunatic f nge dans le mésoderme présomitique, qui précède la somitogenèse. Un test particulier au sens de l'invention réside plus particulièrement dans une mesure de l'expression (ou de la vague de propagation) du gène lunatic fringe, à partir d'embryons. La mesure de l'expression de ce gène peut être réalisée par toute technique connue (sondes marquées, amplification, électrophorèse, puces, hybridation in situ, etc.). Pour cela, on sépare des embryons de poulet de 2 jours selon l'axe sagittal en leurs 2 moitiés. Une moitié est fixée immédiatement alors que la moitié contralatérale est mise en culture pendant 90 minutes. On observe la propagation de l'expression de Lunatic Fringe, vue par hybridation in situ, dans la moitié expérimentale par rapport à la moitié contrôle fixée. Selon l'invention on cultive les deux moitiés de l'embryon en parallèle pendant 2 heures, une moitié sert de témoin et l'autre est cultivée en présence d'un composé test sélectionné en b). L'analyse de l'image permet de quantifier l'effet du composé test. Lorsque l'on observe une modification de l'expression de lunatic fringe, il y a présomption de toxicité.

On peut aussi utiliser un test cellulaire de la fonction Notch Delta tel que décrit dans Bart de Strooper & al. (1991) Nature 398,518-525.

Un autre objet de l'invention concerne des méthodes pour la sélection, l'identification, la caractérisation ou la qualification de composés inhibiteurs de protéase sélectifs, en particulier de la production de peptide Ap à partir d'APP. Plus particulièrement, il s'agit de méthodes permettant de sélectionner, identifier, caractériser ou qualifier des composés inhibiteurs de la production de peptide Ap et essentiellement inactif sur le développement embryonnaire, notamment sur l'expression du gène lunatic fringe chez l'embryon ou sur la voie Notch. Comme indiqué précédemment, l'invention montre, de manière inattendue et avantageuse, qu'il est possible de discriminer entre l'action sur la production de peptide Ap et sur d'autres phénomènes où intervient aussi la présénilinel (par exemple la voie Notch Delta, le développement embryonnaire ou l'hématopoïèse), et de produire ou sélectionner des composés présentant un profil pharmacologique particulièrement avantageux.

Les méthodes de l'invention comprennent plus particulièrement :

a) une détermination de l'action d'un ou plusieurs composés tests sur la production de peptide A (3 (par exemple la forme Ap40 ou Ap42, notamment Ap42), en particulier par clivage de l'APP (sauvage ou d'un isoforme ou mutant), b) la sélection de composés tests capables d'inhiber l'activité de production en a), c) une détermination de l'action de composés sélectionnés en b) sur le développement embryonnaire ou l'expression de voies métaboliques associées au développement embryonnaire, et d) la sélection de composés ayant une activité d'inhibition de la production de peptide A (3 en a) pour une concentration inférieure à celle entrainant supérieure l'activité d'inhibition sur le développement embryonnaire en c).

Plus préférentiellement le rapport de concentration entre, l'action d'inhibition de la production de peptide A (3 en a) et l'activité d'inhibition sur le développement embryonnaire en c), et inférieur à un facteur 1/2 et préférentiellement à 1/10. Encore plus préférentiellement, les composés sélectionnés en d) sont essentiellement dépourvus d'effet ou d'action dans le test c), et présentent donc une toxicité faible et une sélectivité élevée pour le clivage de l'APP.

L'effet inhibiteur de la production de peptide A (3 selon l'étape a) peut être déterminé en utilisant une cellule de mammifère, préférentiellement d'origine neuronale (par exemple un neuroblastome), exprimant et/ou transfectée par un acide nucléique codant l'APP humaine, portant ou non une mutation favorisant le (s) clivage (s) ß et/ou y. Une autre réalisation préférée consiste en l'utilisation de neurones corticaux de vertébrés débarrassés des cellules gliales. En effet il est important de vérifier que l'inhibition est efficace sur les neurones mêmes, une inhibition limitée aux cellules gliales ne serait pas suffisante, car même si elle aboutit à une réduction significative des dépôts amyloïdes elle n'empêcherait pas le neurone de mourir des fragments cytoplasmiques de l'APP, dont on a démontré récemment la toxicité (PCT/FR00/02174).

Les produits formés, après extraction et immunoprécitation sont analysés par électrophorèse ou spectrométrie de masse/électro-spray, ou directement par ELISA Dans l'étape b), on réalise une sélection des composés capables d'inhiber au moins partiellement la production de peptide Ap. Préférentiellement, on sélectionne les composés capables d'inhiber au moins 25%, plus préférentiellement au moins 45% de la production de peptide Ap observée dans les mêmes conditions mais en l'absence du composé test.

Encore plus préférentiellement, on sélectionne les composés capables d'inhiber la production du peptide Ap42 ou Ap40, plus préférentiellement Ap42, qui est majoritairement présent dans les plaques séniles.

Dans l'étape c), la détermination de l'action des composés sélectionnés sur le développement embryonnaire ou l'expression de voies métaboliques associées au développement embryonnaire peut être réalisée selon les techniques mentionnées ci-avant.

Un test préféré est basé sur la détermination de l'effet des composés tests sur une fonction ou une voie métabolique impliquée dans l'embryogénèse, notamment sur l'expression du gène lunatic fringe.

La méthode décrite ci-avant peut être appliquée à différents types de composés tests, d'origine et de structure variées. Il peut s'agir d'acides nucléiques, polypeptides ou peptides, lipides, sucres, acides gras, extraits biologiques, échantillons environnementaux, molécules synthétiques ou semi-synthétiques, composés organiques ou minéraux, etc. Les tests peuvent être réalisés sur plusieurs composés en parallèle (ou en mélange), par exemple dans des plaques de dosage (multi-puits) ou tout autre dispositif. La méthode selon l'invention peut être utilisée pour caractériser ou profiler des composés connus pour leur activité inhibitrice de la production de peptide Ap, dans le but de sélectionner des composés ayant un profil de sélectivité/toxicité approprié. Il est entendu que l'ordre des étapes peut être inversé, le test d'inhibition de la production de peptide Ap étant réalisé en second.

D'autre part, le procédé peut inclure des étapes supplémentaires de détermination de l'activité des composés sur d'autres substances (e. g., enzymes) ou d'autres substrats.

A cet égard, un objet de l'invention réside également dans l'utilisation de composés inhibiteurs sélectifs de la production de peptide Ap (en particulier inhibiteurs de l'activité

d'hydrolyse de l'APP par la gamma sécrétase et essentiellement inactifs ou sans effet sur la fonction Notch Delta ou la segmentation ou l'expression du gène lunatic fringe) pour la préparation d'une composition pharmaceutique destinée au traitement de pathologies neurodégénératives, notamment de pathologies associées à l'hydrolyse de l'APP, en particulier de la maladie d'Alzheimer.

Un autre objet de l'invention réside également dans une composition, notamment une composition pharmaceutique, comprenant un composé tel que défini ci-avant. Les compositions pharmaceutiques selon l'invention comprennent avantageusement un véhicule ou excipient ainsi que, le cas échéant, d'autres principes actifs. Ainsi, les composés selon l'invention peuvent être utilisés seuls ou en combinaison (s), notamment avec d'autres agents ou principes actifs sur certains troubles du système nerveux. Les principes actifs peuvent être utilisés simultanément (et dans ce cas conditionnés ensemble ou de manière séparée), ou de façon séparée ou espacée dans le temps.

Les composés ou compositions selon l'invention peuvent être administrés de différentes manières et sous différentes formes. Ainsi, ils peuvent être injectés par voie systémique, comme par exemple par voie intraveineuse, intra-musculaire, sous-cutanée, trans-dermique, intra-artérielle, intracérébrale, etc., ou administrés par voie orale, les voies orales, intraveineuse, intra-musculaire et sous-cutanée étant préférées.

Pour les injections, les composés sont généralement conditionnés sous forme de suspensions liquides, qui peuvent être injectées au moyen de seringues ou de perfusions, par exemple. A cet égard, les composés sont généralement dissous dans des solutions salines, physiologiques, isotoniques, tamponnées, etc., compatibles avec un usage pharmaceutique et connues de l'homme du métier. Ainsi, les compositions peuvent contenir un ou plusieurs agents ou véhicules choisis parmi les dispersants, solubilisants, stabilisants, conservateurs, etc. Des agents ou véhicules utilisables dans des formulations liquides et/ou injectables sont notamment la méthylcellul'ose, l'hydroxyméthylcellulose, la carboxyméthylcellulose, le polysorbate 80, le mannitol, la gélatine, le lactose, des huiles végétales, l'acacia, etc.

Les composés peuvent également être administrés sous forme de gels, huiles,

comprimés, suppositoires, poudres, gélules, capsules, etc., éventuellement au moyen de formes galéniques ou de dispositifs assurant une libération prolongée et/ou retardée. Pour ce type de formulation, on utilise avantageusement un agent tel que la cellulose, des carbonates ou des amidons.

Il est entendu que le débit et/ou la dose administrée peuvent être adaptés par l'homme du métier en fonction du patient, de la pathologie concernée et de son stade d'évolution, du mode d'administration, etc. Typiquement, les composés sont administrés à des doses pouvant varier entre 0. zug et 100 mg/kg de poids corporel, plus généralement de 0,01 à 10 mg/kg, typiquement entre 0,1 et 10 mg/kg. En outre, des administrations répétées peuvent être réalisées, le cas échéant.

La présente invention peut être utilisée pour le traitement ou la prise en charge, à titre préventif ou curatif, de pathologies du système nerveux, notamment de pathologies neurodégénératives, encore plus préférentiellement de pathologies liées à la présence de formes clivées de la protéine APP (notamment du peptide amyloïde A (3), spécifiquement de la maladie d'Alzheimer. Le terme traitement désigne au sens de l'invention le traitement des symptômes, la réduction de la progression ou des symptômes, la diminution du développement ou de l'apparition de la pathologie, l'amélioration de la qualité et/ou de la durée de vie, etc.

Ainsi, un objet particulier de l'invention réside dans l'utilisation d'un composé tel que défini ci-avant pour la préparation d'une composition destinée au traitement de pathologies du système nerveux, notamment de pathologies neurodégénératives, encore plus préférentiellement de pathologies liées à la présence de formes clivées de la protéine APP. L'invention est particulièrement adaptée au traitement de la maladie d'Alzheimer.

Dans ce contexte, l'invention concerne plus généralement l'utilisation d'un composé de formule générale (I) dans laquelle RI, R2, A et Y sont tels que définis ci-avant et dans laquelle Z est un groupe (Cl-C24) alkyle, (C2-C24) alkényle, (C3-C15) cycloalkyle, (C5- C12) aryle, (C5-C12) aryle (Cl-C24) alkyle, (C5-C12) aryle (C2-C24) alkényle, un hétérocyle en (C3-C15) ayant de 1 à 3 hétéroatomes identiques ou différents, lesdits groupes alkyle, alkényle, cycloalkyle, aryle, et hétérocycle étant éventuellement substitués par un ou

plusieurs substituants choisis de préférence parmi un atome d'halogène, un groupe hydroxyle, (Cl-C6) alkyle, (C3-C15) cycloalkyle, (C5-C12) aryle, (Cl-C15) alkoxy, (Cl- C15) thioalkoxy, hétérocycle, amino, amino (Cl-C15) (cyclo) alkyle, aminodi (Cl- C15) (cyclo) alkyle, nitro, cyano, trifluorométhyle, (Cl-C15) acyle, S02R'-OCOR',- COOR', où R', identique ou différent, représente un atome d'hydrogène ou un radical (C1- C6) alkyle, ainsi que leurs sels et, le cas échéant, leurs énantiomères, pour la préparation d'une composition destinée au traitement de pathologies neurodégénératives, notamment pour l'inhibition du clivage de l'APP chez des sujets, en particulier pour traiter ou inhiber ou prévenir l'apparition ou le développement de la maladie d'Alzheimer. De préférence, Z est un groupe alkylealkoxy, encore plus particulièrement un groupe-CH2-CH2-O-CH3 ou-CH2-CH2-O-CH2-CH2-O-CH3, éventuellement substitué par un acide gras, saturé ou insaturé, un acide aminé ou un peptide, protégé ou non.

Un autre objet de l'invention réside dans une méthode de traitement de pathologies du système nerveux, notamment de pathologies neurodégénératives, encore plus préférentiellement de pathologies liées à la présence de formes clivées de la protéine APP, comprenant l'administration à un sujet d'une quantité efficace d'un composé tel que défini ci-avant. Le sujet peut être tout mammifère, de préférence humain. Comme indiqué ci- avant, le procédé de l'invention est particulièrement approprié pour réduire ou ralentir l'apparition, la progression ou le développement de la pathologie, notamment de la maladie d'Alzheimer.

D'autres aspects et avantages de la présente invention seront décrits en détails dans les exemples qui suivent, qui doivent être considérés comme illustratifs et non limitatifs.

EXEMPLES Exemplel-Synthèse de l'acide 4-Nitro-homophtalique Acide 4-Nitro-homophtalique 1 Formule brute : C9H7NO6 Masse moléculaire : 225.15 g/mol 02N COOH COOL

A une solution d'acide nitrique fumant à 0°C est additionné l'acide homophtalique (5g, 31mmol). Le mélange réactionnel est laissé sous agitation magnétique à température ambiante pendant 4 heures. La solution est alors jetée sur 1g de glace pilée. Le solide résultant est filtré puis séché sous pression réduite pour donner 1 (3.88g, 88%) sous la forme d'une poudre blanche.

Rf (méthanol 1/dichlorométhane 1) = 0,6 RMN'H (250 MHz, DMSO) 8 : 8.43 (d, 1H, J=2.4Hz, CH=C-COOH), 8.18 (dd, 1H, J=2.4Hz, J'=8.4Hz, N02-C-CH=CH), 7.48 (d, 1H, J=8.4Hz, NO2-C-CH=CH), 3.93 (s, 2H, Ci2).

IR : 1681,1513,1412,1340,902 cm-1 Spectre de masse (GT-FAB>0) : (M+H) += 226 Mp : 217°C Log P (n-octanol/H2O) = 1. 11 0,33 Exemple 2-Synthèse d'acide 2-(2-Methoxy-ethoxycarbonylmethyl)-5-nitro-benzoïque Acide 2-(2-Methoxy-ethoxycarbonylmethyl)-5-nitro-benzoique 2 Formule brute : C, 2H, 3NO7 02N COOH Masse moléculaire : 283, 24 g/mol1"-'ome 'ut- Schéma réactionnel :

Protocole 1 A une solution de 1 (2.19g, 9.73mmol) dans du 2-Méthoxyéthanol (20ml), on ajoute de l'acide sulfurique (95%, 150gel, 2.76mmol). Le mélange réactionnel est chauffé à 100°C, sous agitation magnétique, pendant 2 heures. 10ml d'AcOEt sont ajouté au mélange et la solution est extraite avec 3xlOml d'une solution de NaHCO3 5%. Les phases aqueuses sont réunies et acidifiées par une solution d'acide citrique jusqu'à obtenir un pH=3. Cette solution est alors extraite avec 3xl5ml d'AcOEt, les phases organiques sont réunies et séchées sur sulfate de magnésium, filtrées et évaporées sous pression réduite. On obtient ainsi 2 (2.40g, 87%) sous la forme d'une poudre blanche.

Rf (méthanol 2/dichlorométhane 14) = 0,70 RMN'H (250 MHz, CD30D) 8 : 8.99 (d, 1H, J=2.51Hz, CH=C-COOH), 8.52 (dd, 1H, J=2.50Hz, J'=8. 41Hz, NO2-C-CH=CH), 7.77 (d, 1H, J=8.43Hz, N02-C-CH=CH), 4.38 (s, 2H, CH-COO), 4.38 (t, 2H, COOCH,-OMe), 3.52 (s, 3H, OCH3) Spectre de masse (NOBA-FAB>0) : (M+H)+=284 Mp : 55°C Log P (n-octanol/H2O) = 1. 58 0,37 Protocole 2 : Une solution sous agitation de nitrodicarboxylate (7,92 g, 35,2 mmol) dans du methoxyethanol (70 ml) a été traitée avec une quantité catalytique d'acide sulfurique concentré (200 µl), puis chauffée à 100 °C pendant la nuit. Le mélange a ensuite été évaporé pour donner une huile, qui cristallise au grattage et au dépôt (rendement 100 %).

Exemple 3-Synthèse de 4-Chloro-3-(2-methoxy-ethoxy)-7-nitro-isochromen-1-one

4-Chloro-3-(2-methoxy-ethoxy)-7-nitro-isochromen-1-one 3 Formule brute : Cl2H1oCIN06 0 OZON Masse moléculaire : 299.66 g/mol 02o . OMe 'O CL Schéma réactionnel : Protocole 1 : A une solution de 2 (2.4g, 8.49mmol) dans du toluène (50ml), on ajoute PCls (4.4g, 21.22mmol). Le mélange réactionnel est porté à reflux pendant 15 heures. Le solvant est évaporé sous pression réduite et 10ml d'eau sont ajoutés au résidu. La solution hétérogène est portée à reflux pendant 1 heure et le mélange est extrait avec 2x20ml d'AcOEt. Les phases organiques sont réunies et lavées avec 3x10ml de brine, puis séchées sur Sulfate de magnésium et évaporées sous vide. Le résidu est recristallisé à chaud dans le méthanol pour donner 3 (1.77mg, 69%) sous la forme d'une poudre jaune.

Rf (Acétate d'éthyle 7/dichlorométhane 3/hexane 12) = 0,37 RMN lH (250 MHz, CDC13) 8 : 8.95 (d, 1H, J=2.32Hz, CH=C-COO-), 8.45 (dd, 1H, J=2.37Hz, J'=8. 97Hz, NO2-C-CH=CH), 7.78 (d, 1H, J=8.95Hz, N02-C-CH=CH), 4.54

(t, 2H, J= 4.40Hz, O-CH2-CH2-OMe), 3.71 (t, 2H, J=4.44Hz,-CH-OMe), 3.37 (s, 3H, OC_3) RMN 13C (250MHz, CDC13) 8 : 157.488,155.788,149.891,143.143,129.819,126.388, 123.683,116.947,90.406,70.508,69.991,59.340 IR : 2919,1737,1102,843 cri' Spectre de masse (NOBA-FAB>0) : (M+H)+=300 Mp : 127°C Log P (n-octanol/H2O) = 2.25 0,75 Protocole 2 : A une suspension sous agitation de l'acide (9,18 g, 39,6 mmol) dans le toluène (60 ml) à température ambiante a été ajoutée du pentachlorure de phosphore (PCls, 20 g, 100 mmol) pendant 15 minutes. Le mélange réactionnel forme une solution complète orange.

Après 3 heures, la réaction de cristallisation du produit commence et après une nuit le produit de la réaction est filtré, lavé avec du toluène puis avec du méthanol, séché pour donner un produit cristallin (4,88 g, 41 %).

Exemple 4-Synthèse de 7-Amino-4-chloro-3-(2-methoxy-ethoxy)-isochromen-1-one 7-Amino-4-chloro-3-(2-methoxy-ethoxy)-isochromen-1-one 4 Formule brute : Cl2Hl2ClNO4 Masse moléculaire : 269.68 g/mol 112N 0 0 atome CL Schéma réactionnel :

Protocole 1 : A une solution de 3 (500g, 1.66mmol) dans du THF (30ml), on ajoute le palladium activé sur charbon (10% Pd, 50mg). Le mélange réactionnel est hydrogéné à température ambiante pendant 6 heures puis filtré sur célite. Le solvant est évaporé sous pression réduite et le résidu est purifié par chromatographie sur colonne de silice (acétate d'éthyle 9/ cyclohexane 12) pour donner 4 (447mg, 100%) sous la forme d'une poudre jaune.

Rf (Acétate d'éthyle 9/hexane 12) = 0,39 RMN'H (250 MHz, CDC13) 8 : 7.48 (d, 1H, J=8.57Hz, NH2-C-CH=CH), 7.38 (d, 1H, J=2.42Hz, NH2-C-CH=C-CO2), 7.05 (dd, 1H, J=2.47Hz, J'=8.57Hz, NH2-C-CH=CH), 4.39 (t, 2H, J=4.52Hz, O-CH-CH2-OMe), 3.68 (t, 2H, J= 4.51Hz,. O-CH2-CH2-OMe), 3.38 (s, 3H, O-CH3) IR : 1799,1748 cm-1 Spectre de masse (NOBA-FAB>0) : (M+H) = 270 Mp : 127°C Log P (n-octanol/H2O) = 1. 37 0,75 Protocole 2 : A une suspension sous agitation du composé nitreux (4,75 g, 15, 9 mmol) dans un mélange 1 : 1 d'acétate d'éthyle et d'isopropanol entre 0 et 5 °C, a été ajouté de chlorure stanneux (15,6 g, 69 mmol) par portions pendant 5 minutes. Le mélange a été amené à température ambiante. Une analyse par TCL et par HPLC a montré une réaction complète après 4 heures. Après agitation pendant la nuit, le mélange a été déposé goutte à goutte sur de la glace pilée et le pH ajusté à 8,5 par addition de bicarbonate de sodium solide. Le

mélange a été extrait avec de l'acétate d'éthyle séché (MgS04), et le solvant par évaporation pour donner l'aniline (2,12 g, 49,5 %).

Exemple 5-Synthèse de 14-Chloro-3-(2-methoxy-ethoxy)-1-oxo-lEt-isochromen-7-yn- carbamic acid adamantan-1-yl ester 4-Chloro-3- (2-methoxy-ethoxy)-1-oxo-lH-isochromen-7-yl]-carbamic acid adamantan-1-yl ester 5 Formule brute : C23H26CINO6 O O NU Masse moléculaire : 447.91 g/mol ! o gi)---oy 0 po CL A une solution de 4 (50g, 0.22mmol) dans du THF (1.25ml), on ajoute le 1-Adamantyl fluoroformate (225mg, 2.1mmol) et la TEA (1401l1, lmmol). Le mélange réactionnel est laissé sous agitation magnétique à température ambiante pendant 3jours. Le solvant est évaporé sous pression réduite et le résidu est solubilisé dans 10ml d'AcOEt. La solution organique est alors lavée avec 2x10ml d'une solution de NaHCO3 5%, puis avec 2x10ml de Brine et enfin avec 2x10ml d'acide citrique puis elle est séchée sur sulfate de magnésium et évaporée sous pression réduite. Le résidu est purifié par chromatographie sur colonne de silice (acétate d'éthyle 6/cyclohexane 12) pour donner 5 (50mg, 50%) sous la forme d'une poudre jaune.

Rf (Acétate d'éthyle 6/hexane 12) = 0.59 RMN'H (250 MHz, CDCl3) 8 : 7.93 (d, 1H, J=2.25Hz, NH-C-CH=C-COO), 7.73 (dd, 1H, J=8.69Hz, NH-C=CH-CH), 7.47 (d, 1H, J=8.74Hz, NH-C=CH-CH), 6.59 (s, 1H,- NH), 4.31 (t, 2H, J=4.45Hz, O-CH2-CH2-OMe), 3.58 (t, 2H, J=4.48Hz, O-CH2-CH- OMe), 3.27 (s, 3H, OCH3) IR : 3335,2912,1820,1755,1732,1651,1064 cm-1

Spectre de masse (NOBA-FAB>0) : (M+H) +-449 Mp : 140°C Log P (n-octanol/H2O) = 5.14 0,75 Exemple 6 : Synthèse de composés de formule (I) de la famille carbamate Cet exemple décrit la synthèse des composés n° 7 à 10 représentés dans le Tableau 1.

Protocole : A une solution de triphosgène (1 eq ; 0,11 mmol) dissoute dans 2,0 ml de DCM anhydre, a été ajouté l'alcool (1 eq : 0,11 mmol) par portions pendant 30 minutes. Le mélange clair a été agité à température ambiante pendant une heure avant l'addition de 7-amino-4-chloro-3- (2-methoxy-éthoxy)-isochromen-1-one (1 eq ; 0,11 mmol). Après une incubation supplémentaire d'une heure à cette température, une base Hunigs (2 eq ; 0,22 mmol) a été ajoutée, entraînant le changement de couleur du mélange depuis un jaune nuageux vers un jaune clair. La réaction a ensuite été agitée à température ambiante pendant 24 heures. Le mélange réactionnel brut a été purifié par HPLC préparative.

Exemple 7-Synthèse de composés de formule (I) de la famille Urée Cet exemple décrit la synthèse des composés n° 11-41 représentés dans le Tableau 2.

Protocole : A une solution de triphosgène (1 eq ; 0,11 mmol) dissoute dans 2,0 ml de DCM anhydre, a été ajoutée l'amine (1 eq ; 0,11 mmol) par portions pendant 30 minutes. Le mélange clair a été agité à température ambiante pendant une heure, avant l'addition de 7-amino-4-chloro- 3-(2-methoxy-ethoxy)-isochromen-1-one (1 eq ; 0,11 mmol). Après une heure supplémentaire à cette température, la base de Hunig (2 eq ; 0,22 mmol) a été ajoutée ce qui

a induit un changement de couleur du mélange depuis le jaune nuageux vers le jaune clair.

La réaction a été agitée à température ambiante pendant 24 heures. Le mélange réactionnel brut a été purifié par HPLC préparative.

Exemple 8 : Synthèse de composés de formule (I) de la famille mono-amine Cet exemple décrit la synthèse des composés n° 42-62 représentés dans le Tableau 3.

Protocole : Une solution de 7-amino-4-chloro-3-(2-methoxy-ethoxy)-isochromen-1-one (1 eq ; 0,065 mmol ; 18 mg) dans 0,4 ml de dichloroéthane anhydre a été ajoutée à l'aldéhyde (2 eq ; 0,13 mmol). Ensuite 50 u. l d'acide acétique pur et de triacétoxyborohydrure de sodium (4 eq ; 0,26 mmol, 56 mg) ont été ajoutés. Le tube a été passé sous azote et mélangé à température ambiante pendant 18 heures. Du DCM a été ajouté (1,5 ml) puis une solution saturée de NaHC03. Après agitation la phase organique a été collectée et concentrée.

Le brut a été purifié par LC/MS.

Exemple 9 : Synthèse de di-amines de formule générale (I) Cet exemple décrit la synthèse des composés n° 63-72 représentés dans le Tableau 4.

Protocole : Une solution de 7-amino-4-chloro-3- (2-methoxy-ethoxy)-isochromen-1-one (1 eq ; 0,065 mmol ; 18 mg) dans 0,4 ml de dichloroéthane anhydre a été ajoutée à l'aldéhyde (4 eq ; 0,26 mmol). Ensuite 50 gel d'acide acétique pur et de triacétoxyborohydrure de sodium (4 eq ; 0,26 mmol, 56 mg) ont été ajoutés. Le tube a été passé sous azote et mélangé à température ambiante pendant 18 heures. Du DCM a été ajouté (1,5 ml) puis une solution saturée de NaHC03. Après agitation la phase organique a été récupérée et concentrée.

Le brut a été purifié par LC/MS.

Exemple 10 : Synthèse de composés de formule a) de la famille amides Cet exemple décrit la synthèse des composés n° 73-105 représentés dans le Tableau 5.

Protocole : La 7-amino-4-chloro-3- (2-methoxy-ethoxy)-isochromen-1-one (1 eq ; 0,074 mmol, 20 mg), l'acide carboxylique (4 eq ; 0,29 mmol) et HOBt (4 eq ; 0,29 mmol, 40 mg) ont été dissous dans 0,6 ml de DCM. Ensuite du 1,3-diisopropylcarbodiimide (4 eq ; 0,29 mmol, 47 jil) a été ajouté. La solution a été agitée à température ambiante pendant 20 heures puis concentrée et purifiée par HPLC préparative.

Exemple 11 : Synthèse de composés de formule (I) de la famille Mono-sulfonamide Cet exemple décrit la synthèse des composés n° 106-135 représentés dans le Tableau 6.

Protocole : Le chlorure de sulphonyle (0,11 mmol) a été dissous dans 0,3 ml de DCM anhydre. Une solution de 7-amino-4-chloro-3- (2-methoxy-ethoxy)-isochromen-1-one (0,11 mmol, 30 mg) et de triethylamine (0,11 mmol, 11 mg) dans 0,5 ml de DCM a été ajoutée. La solution a été agitée à température ambiante pendant 18 heures, puis concentrée et le résidu a été purifié par HPLC préparative.

Exemple 12 : Synthèse de composés de formule (I) de la famille di-sulfonamide Cet exemple décrit la synthèse des composés n° 136-161 représentés dans le Tableau 7.

Protocole :

Le chlorure de sulphonyle (4 eq ; 0,44 mmol) a été dissous dans 0,3 ml de DCM anhydre.

Une solution de 7-amino-4-chloro-3-(2-methoxy-ethoxy)-isochromen-1-one (0,11 mmol, 30 mg) et de 6 eq de base de Hunig dans 0,5 ml de DCM a été ajoutée. La solution a été agitée à température ambiante pendant 18 heures, puis concentrée et le résidu a été purifié par HPLC préparative.

Exemple 13-Inhibition de la production de peptide Ap L'activité des composés sur la production de peptide Ap est mesurée par ELISA.

Les résultats obtenus sont présentés sur le Tableau 8 ci-dessous et démontrent l'activité des composés de l'invention.

Tableau 8 Numéro du composé inhibition Abéta poulet inhibition Abéta rat 97 45 % à 50 microM 20 % à 10 microM 98 60 % à 50 microM 20 % à 1 microM 101 30 % à 50 microM 25 % à 10 microM 102 20% à 10 microM 77 50 % à 50 microM 70 % à 50 microM 88 30% à 100 microM 15 % à micron 87 20% à 10 microM 30% à 10 microM 83 20% à 10 microM 50% à 100 microM 28 20% à micron 29 15% à 10 microM 32 20% à 10 microM 20% à 10 microM 33 30% à 10 microM 20% à 1 microM 38 20% à 10 microM 8 60% à 50 microM 10 25% à 50 microM 69 40% à 1 microM 60 20% à lOmicroM 107 50% à 10 microM 117 20% à 1 microM 20% à 1 microM 119 30% à 1 microM 134 20% à 1 microM 148 30% à 50 microM 30% à 50 microM 156 40% à 50 microM

Exemple 14-Non-inhibition du développement de l'embryon.

On utilise des oeufs (JA57) fraîchement pondus (max 2 jours) ou maintenus à 15°C depuis la ponte. Les oeufs sont incubés pendant 60 heures puis une ouverture est faite dans la coquille à l'endroit où l'embryon aura été localisé par gravité. On injecte 100 µL d'une solution à 1 mM de la substance à tester dans l'embryon. Ensuite, les oeufs sont refermés et on laisse se poursuivre le développement à 37 °C. 24 heures après l'injection, les oeufs sont

ouverts et les embryons observés, on examine alors la toxicité de la substance, puis les oeufs sont refermés et replacés à 37°C pour effectuer un autre point d'observation 4 jours après l'injection. L'activité des composés est comparée à celle de composés de référence MG132 (Calbiochem 474790) et MW167 (Enzyme System DFK-167). Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau 9 et dans le tableau 9 ci-dessous.

Tableau 9 Survie 24 h Survie 4 jours MW 167 0/5 0 MG132 0/9 0 Composé 4 11/15 6/15 Composé 5 10/12 8/12 Les composés de l'invention sont donc beaucoup moins toxiques que les composés de référence sur le développement embryonnaire.

Exemple 15-Non-inhibition de la segmentation embryonnaire.

L'effet de composés de l'invention sur la segmentation embryonnaire a été déterminé. Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau 10 ci-dessous.

Tableau 10 : Inhibition de la segmentation embryonnaire Inhibition de la segmentation embryonnaire Numéro Composé 50 microMolaire 20 microMolaire 97 Inactif Inactif 98 Inactif Inactif 33 Inactif Inactif 88 Inactif Inactif 101 Inactif Inactif Tableau 1 : Carbamates ov w wE structure I\lumero compose 0 O'N D"8 H_ 3 w CI ° vo~OcH, 10 O N \ O U H E . o 0

Tableau 2 : Urées structure Numero composé was ma ) Y 0 0 ' 11 , Ici my M 12 ni 13 cri 0 0 0 tu ut , Cet °-. 13 ° 1° ci 0 0 0 0 0l o a T, I 15 ci f Y w 0 0l o 16 16 . I v Yl M 0-00 17 r Yl Y I I 18 f 18 buzz 18 y 19 cri \20 o-o 0 19 V 21 22 ) 0 ( \ 22 Yl a 0 o I q 23 23 24 0 0 a oui 1 ci 0 0 o kas _ __ o o q w I. o. 33 25 r, o T Jl r i a 28 "il . W 32 26 o YY r-o-oo 0. 33 27 o o nu N,, ou w 28 28 , H, ° a W 35 29 r r v a zea \ 35 0. ° 30 36 FC1 N 1 cri 37 po ci zu ber nu Ber owl "dz Si & i a 0 0' '39 a 0 o q l a 40 I,,, Xa rua 41_ 41 Tableau3 : Mono-Amines structure numero composé ci \ \ 53 o 0 0 CI _JN6o O 54 ç. C N i 42 0 F 53 $ ; u~ai ai3 a--56 HSOn < O_ai _ _ _. 5 7 47 ou Nt o o- <a a tN <~ ~o_as 5 9 s /o --y a 45 N /' 54 5 o \ J 55 PH ci 56 0 0 o o' a ciN<O or 60 o- 56 o crt, a N o-ct 49 ci a 0 60 0 N 0-CH2 \ o 47 jw r f Iv a _ ON I i O 58 48 0 0 Br g QNH a o v o a o a o s \ 0 60 ô --o- a Lr o 50 a o 0-'S 0 0 f o ? \ 57 '' erz 62 f'i ? o 0 Tableau 4 : Di-amines structure numero composé PO y w o i i oo- a 63 t1e 64 64 CX ; °a (, o zozo 0. 66 ° w a o 66 I o "y o o a 66 /; 1S zozo ci 0 °a-_ CI ci CH, 0 0 0 - 69 \I 0 N //o S O lai o 0 0 0 o chez 0 0 0 71 zu \ O ci a H, c 72 Tableau 5 : Amides structure Numero composé CH zizi IN 74 o zu y° i 74 0 0 I < (0 @ 74 ./' 1 ci / 0 77 a ru _ _ 40, CH3 77 a 0. 5 I.. I o 78 I ; o o ci a O O , 4° 0 3 81 a 81 y Xa SOI, rj S, N U 82 ./' Itch 83 0 82 zu U I R \i 5c 83 0 0 C, IN 84 o a I , I a 85 86 ci 86 a 0 0 87 ô o a 88 ai 8 8 H, OH so 89 0 'o''° CF ci 0 q. _ zoo s 8 91 j i_ a Q asz 90 100 o o I 91 °" 101 0 °'0°-° X J 1 HD 92 1 0 0 102 o a o 95 o 94 o o Iw o 0 ° i o0. w a 95 o a, t°M-97 M _ 0 96 vine o 96 I o 0 0/, O <s Y'Yir- ? 103 CH3 9 8 105 a 1 on 99 cri 0 0 o zu \ 98 r ° a 99 99 Tableau 6 : Mono-sulfonamides structure numero composé 0 106 107 v a i 107 0 1ô i i a 5 707 oreo t 108 o w a 108 o, o 0 s i o I i o w I i o^0. -5 109 109 110 4 112 cri 1 ci po a "-° 112 I sô 112 Lo o a o Y/l ov. N i Sô 912 a 113 i a a o oo 1 13 ci Cit 0 Ckt 114 i. __ f° 115 o- Ov nN "115 i i o w w a 116 a °v N q o _ 0 cul 118 0 o o w a 119 0 i o 120 120 121 o-°121 0 /OS\N/I O o I \/00 ô a 121 & \ 1 1 ci O O'' I fo 130 n fi R os"i/w0 vl o vl 922 ° 131 0 1 \10 1 a I/ S ; N \ w o°a- o , a 123 0 ou 132 124 Cor 124 o a sô I w ci 125 o 133 w i 0. 126 0 F F cri !' 0\ 1 a C. 1$4 0 iN /p0 O ''127 F, ° I o', Q 0 0 135 a 's, /I °O 128 129 /S\ \ i a c 0 0 0 129 Tableau 7 : Di-sulfonamides structure numéro compose dJ','L nui\ /ci a ho, C \ a 136 jazz ° o I o i i a 137 . CL, a ar o 0 if / li a 1 139 I a a I w -o i r I ovsl'_ , 9 0 0 ci N 140 ° ° i o o 0 (° /I °oôs s s o 141 --- y\ H3C_a13 M 0, ° I i a o o" 142 143 0 CH3 r5cs\o 0 + 0~ kCH3 ci 144 zizi 0 0\, 1 143 cor cri 'i 44 i a o a o a, i a 144 NI Fut a o=s=o p I | H3 o'w oôs o CH ; a 145 pu 110 o Yi 1 146 sou zanzi CF bru =O O =O O X f 1 H3Co 0~°s + C) 155 &<°~ a43 U V . ^3 a 154 148 154 If o 0 a asz "cl 0 sl'o"40 ça-0 1 156 149 pli s'i o I o I i 0. ou - o 0 os/ 00. 156 150 I o 0 o o I i oo i i ooôs w w 157 i i 151 _ OS SI' a o fo 0--a 0 I% cl i Sô i Sà ôs w i oo o. I I , o 152 158 )"° 0 152 158 ,. ô, n-5 /o ou 159 o i o o w ct 0 s s 153 159 F f zozo 0 F I a O \ a'â 0 160 r 161 1- a s''s a ci 1 10 161