[01] A presente invenção se refere às composições com atividade antimicrobiana de longa duração e de amplo espectro, incluindo atividade bactericida, bacterostática, virucida, virustática, germicida, algicida, fungicida e fungistática. As composições podem ser utilizadas para produção de formulações para uso tópico ou para tratamento de ambiente, higienização de superfícies ou uso odontológico. A composição pode estar em solução, em gel úmido, xerogéis, aerossóis, sprays, sistemas poliméricos e em estado sólido. Em particular, a invenção se refere às composições, como solução aquosa ou solução alcoólica, ou mesmo na forma de gel ou em pó, com atividade antimicrobiana. As composições contêm um ativo catiônico (digluconato de clorexidina, quaternário de amónia ou cetil piridíneo) nanoencapsulado em ciclodextrina (alfa- ciclodextrina, beta-ciclodextrina, gama-ciclodextrina, hidroximetilbeta- ciclodextrina ou hidroxipropilbeta-ciclodextrina, as quais podem opcionalmente conter inserções de grupos alquila ou arila), na razão molar de 1 :1 a 1 :4. Essas composições ainda compreendem excipientes aniônico, além de incluindo umectantes, estabilizantes, sequestrantes, surfactantes, conservantes ou espessantes. Preferencialmente, compreendem o surfactante aniônico lauril sulfato de sódio, ou o espessante aniônico carbômero.

[02] A presente invenção se refere à obtenção de sólidos, géis, ou líquidos, contendo composto de inclusão de ativos catiônicos, como sais de clorexidina e ciclodextrina em variadas razões molares, para aplicação antifúngica, antibacteriana, algicida, germicida e antiviral, incluindo o SARS-COV, combinando o sistema de liberação sustentada do complexo de inclusão, como clorexidina:ciclodextrina (CHX:CD), devido à atividade virucida da clorexidina, especialmente potencializada com o nanoencapsulamento nas razões molares de 1 :1 a 1 :4.

[03] Clorexidina e seus sais são bem conhecidos por sua atividade antimicrobiana e têm sido usados em composições orais de base aquosa para combater a formação de placa dentária e cáries causadas por bactérias na cavidade oral. A clorexidina é ativa contra uma ampla gama de bactérias Gram-positivas e Gram-negativas, além de leveduras, fungos e vírus (Denadai, A.M.L.; Teixeira, K.I.; Santoro, M.M.; Pimenta, A.M.C.; Cortés, M.E.; Sinisterra, R.D. Supramolecular self-assembly of β- cyclodextrin: na effective carrier of the antimicrobial agente chlorhexidine. Carbohydr. Res., 342, 2286-2296, 2007).

[04] É bem conhecido que a clorexidina é um agente antisséptico para pele e mucosa geralmente produzido como sais de diacetato ou digluconato, comumente utilizado como desinfetante em áreas contaminadas por microrganismos como fungos, bactérias e vírus (Bui, L.N.; Swan, J.T.; Perez, K.K.; Johnson, M.L.; Chen, H.; Colavecchia, A.C.; Rizk, E.; Graviss, E.A. Impact of chlorhexidine bathing on antimicrobial utilization in surgical intensive care unit. J. Surg. Res., 250,161-171 , 2020). Além disso, pode ser encontrada em muitos produtos de higiene pessoal, como pasta de dente, produtos cosméticos, lubrificantes, ou como agente conservante.

[05] Porém, encontra-se no estado da arte relatos de reações alérgicas devido à clorexidina, com um amplo espectro de manifestações, desde erupções cutâneas leves até choque anafilático (Moka, E.; Argyra, E.; Siafaka, I.; Vadalouca, A. Chlorhexidine: Hypersensitivity and anaphylactic reactions in the perioperative setting. J. Anaesthesiol. Clin. Pharmacol. 31 , 145-148, 2015). Algumas das reações da clorexidina têm sido associadas à aplicação tópica deste agente em feridas abertas ou mucosa oral, como resultado dos procedimentos de uso. [06] Uma possibilidade estratégica para evitar a reação alérgica à clorexidina é a liberação sustentada deste composto utilizando ciclodextrina, como é proposto na presente invenção. No estado da técnica alguns documentos descrevem o uso de clorexidina em formulação múltipla de candidatos a fármacos para diversas aplicações biológicas ou uso em materiais.

[07] O estado da técnica mostra que a pasta de dentes pode ser usada como um meio para fornecer agentes antimicrobianos. Uma busca constante por melhorias nos dentifrícios existentes resultou na adição de uma série de produtos químicos aos dentifrícios, principalmente antimicrobianos, que oferecem o potencial de benefício adjuvante à saúde gengival, como a clorexidina. Ele pode ser incorporado ao creme dental para aumentar a ação antimicrobiana, ou ser um enxaguante bucal para uso pós-escovação. A clorexidina é uma bis-biguanida catiônica, com ação antiplaca e ampla atividade antibacteriana contra bactérias cariogênicas. A propriedade de substantividade, ou seja, a capacidade da ação prolongada da clorexidina contra microrganismos orais. Mas até o momento, dentrifícios contendo clorexidina não estão amplamente disponíveis comercialmente devido à sua reação com o surfactante lauril sulfato de sódio (SLS) presente em dentifrícios, com a possibilidade de diminuição da atividade antimicrobiana de ambos os ativos (Venu, V., et al., Comparative evaluation of antibacterial property and substantivity of chlorhexidine containing dentifrices with sodium lauryl sulfate and Tween as surfactants: An in vivo study. Indian Journal of Dental Research, vol. 24, no. 4, 2013, p. 521. Accessed 14 Oct. 2020).

[08] A literatura relata que o uso de soluções contendo lauril sulfato de sódio antes ou após o uso de clorexidina reduz a sua ação antimicrobiana em, pelo menos, 4 horas (Elkerbout, T.A, Slot, D.E., Bakker, E.W.]P., Van der Weijden, G.A., Chlorhexidine mouthwash and sodium lauryl sulfate dentifrice: do They mix effectively or interfere?, Int. Dent. Hygiene, 14, 2016, 42-52). Esta desvantagem no uso combinado cria dificuldade na aplicação de enxaguantes bucais contendo a clorexidina ou seus sais após a escovação dental, já que as pastas de dente apresentam o lauril sulfato de sódio em suas formulações. A presente tecnologia traz como vantagem a aplicação conjunta do lauril sulfato de sódio junto com o composto de inclusão ciclodextrina, sem a perda da ação antimicrobiana.

[09] Ainda, há no estado da arte vários documentos de patente que mostram que substâncias aniônicas nas formulações são incompatíveis com ativos catiônicos, tais como relatado no documento de patente WO 2016/059653, de 2014, onde a utilização de corantes azo sulfonados como a azorubina tem, no entanto, a desvantagem de causar a precipitação da clorexidina em soluções hidroalcoólicas, reduzindo drasticamente a sua atividade antimicrobiana. Por este motivo, muitas vezes é necessário preparar a solução antisséptica corante no período imediatamente anterior ao uso, de modo a evitar a rápida precipitação (e, portanto, desativação) dos componentes.

[10] Assim, a presente tecnologia pretende resolver esse problema do estado da técnica, onde os compostos de inclusão dos sais de clorexidina:ciclodextrinas mostram alta atividade e eficiência antimicrobiana de longa duração, mesmo na presença de estabilizantes ou surfactantes aniônicos, como o lauril sulfato de sódio, devido à proteção pelo encapsulamento molecular da clorexidina utilizando as ciclodextrinas.

[1 1] Estudos apresentados na literatura mostram que a os parâmetros entrópicos e entálpicos da interação do gel à base de carbômero e clorexidina são afetados pela inserção de moléculas como surfactantes, emolientes ou aditivos (Buckton, G, Tawburic, S., Drug release form gel bases: a care for enthalpy-entropy compensation. Journal of Controlled Release, 20, 1992, 29-36). Com isso, a possível perda da atividade da clorexidina pela ação do carbômero, devido à interação eletrostática entre o sal e o polímero, pode ser evitada com a utilização de grupos estabilizantes, protetores ou encapsulantes como, por exemplo, as ciclodextrinas e suas variações estruturais que atuam como grupos protetores para a clorexidina e reduzem a interação desta com o carbômero.

[12] Dessa forma, a presente invenção descreve composições antimicrobianas que podem ser utilizadas para produção de géis transparentes utilizando carbômeros, que contenham o ativo clorexidina ou seus sais encapsulados com ciclodextrina ou suas variações estruturais, em proporções molares diversas, sem a perda da propriedade antimicrobiana da clorexidina.

[13] A extensa utilização do carbômero, como principal espessante de gel para uso comercial, remete-se à obtenção de géis transparentes e de uma melhor sensação do tato quando utilizado. Por isso, o estudo da estabilidade de produtos contendo o polímero, que atendam às exigências com ativo antisséptico de amplo espectro, como os sais de clorexidina, especialmente nanoencapsulados em ciclodextrinas, apresentam-se como sistemas de aplicação otimizados para atender às exigências do consumidor, com atividade antimicrobiana e experiência sensorial positiva.

[14] O documento de patente RU2585384C2, de 2014, intitulado “Soluble pharmaceutical composition based on fipronil and yuvemon for treating arachkoentomoses” , refere-se à composição de um fármaco multicomponente de fipronil, yuvemon, prednisolona, clorexidina ou miristina, lidocaína, dimetilsulfóxido, 2-hidroxipropil-p-ciclodextrina e como solventes água e álcool, incluindo álcool isopropílico ou etílico e propilenoglicol, na proporção de volume 1 :3 a 1 :5 (% m/m) com atividade antiparasitária e eficácia terapêutica para o tratamento de aracnoentomose. [15] O documento de patente US5776430, de 1994, intitulado “Topical antimicrobial cleanser containing chlorhexidine gluconate and alcohol’, refere-se à combinação de 0,65 a 0,85 % (m/m) de gluconato de clorexidina, álcool etílico desnaturado e lactato cetílico produzindo um limpador antimicrobiano tópico altamente eficaz com atividade bactericida imediata, persistente e residual. Também se refere a um processo de fabricação de baixa temperatura para a produção de sais de clorexidina em formulações à base de álcool.

[16] Aplicação de géis com sais de clorexidina são observados em aplicação dentária. Savitha e colaboradores (2019) apresentaram um estudo indicando que a inclusão de quitosana em gel contendo 2 % de clorexidina aumenta a eficácia antimicrobiana frente à bactéria Enterococcus faecalis, sendo este material um candidato como um medicamento intracanal para procedimentos endodônticos mal sucedidos (Savitha, A.; SriRekha, A.; Vijay, R.; Asheija, Champa, C.; Jaykumar, T. An in vivo comparative evaluation of antimicrobial efficacy of chitosan, chlorhexidine gluconate gel and theirs combination as an intracanal medicament against Enterococcus faecalis in failed endodontic cases using real time polymerase chain reaction (qPCR). Saudi Dental Journal, 31 , 360-366, 2019).

[17] A utilização de sais de clorexidina a uma concentração de 0, 12 % é bastante comum nos enxaguantes bucais comercializados. Contudo a utilização destes é sugerida por até 14 dias e após 30 minutos da escovação. O primeiro ponto refere-se à variação da coloração dos dentes, de branco a amarelado, pelo uso contínuo de clorexidina em concentrações altas; outro ponto refere-se à perda das propriedades antimicrobianas do sal de clorexidina em contato com algumas substâncias presentes na pasta de dente, como surfactantes. Além do característico sabor dos sais de clorexidina em solução, que tornam os enxaguantes bucais desagradavelmente amargos.

[18] A presente invenção apresenta estudos frente a surfactantes aniônicos que mostram a manutenção da atividade do sal de digluconato de clorexidina, encapsulado em ciclodextrina, para a redução do amargor das soluções contendo sais de clorexidina, quando comparadas à mesma concentração de digluconato de clorexidina livre em solução e a possibilidade da utilização do produto por tempo superior a 30 dias consecutivos de uso, sem ocasionar alteração de coloração nos dentes.

[19] Alguns dos compostos halogenados antimicrobianos especialmente estudados, de amplo espectro antimicrobiano e que são úteis nas composições da presente invenção incluem 1 ,1 '-hexametileno bis (5-(p- clorofenil) biguanida), vulgarmente conhecida como clorexidina e seus sais, por exemplo, com ácidos clorídrico, acético e glucônico. O sal digluconato é altamente solúvel em água, cerca de 70% em água, e o sal diacetato tem uma solubilidade de cerca de 1 ,8% em água.

[20] Outros compostos úteis de biguanida incluem Cosmoci® CQ® e Vantocil® IB que incluem cloridrato de poli(hexametileno biguanida). Outros agentes antimicrobianos catiônicos úteis incluem os alcanos bis- biguanida. Os sais solúveis em água utilizáveis dos anteriores são cloretos, brometos, sulfatos, alquilsulfonatos, tais como metilsulfonato e etilsulfonato, fenilsulfonatos, tais como p-metilfenilsulfonatos, nitratos, acetatos, gluconatos e semelhantes.

[21 ] Exemplos de compostos bis-biguanida adequados são a clorexidina; Dicloridrato de 1 ,6-bis-(2-etil-hexilbiguanido-hexano); Tetra-hidrocloreto de 1 ,6-di-(N1 ,N1 ’-fenildiguanido- N5, N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di- (N1 , N1 '-fenil- N1 ,N1 '-metildiguanido-N5,N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6- di-(N1 ,N1 '-o-clorofenildiguanido-N5,N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di- (N1 ,N1 '-2,6-diclorofenildiguanido-N5,N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di- [N1 , N1 '-Beta-(p-metoxifenil)diguanido-N5, N5']-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di-( N1 , N1 '-Alfa-metil-beta-fenildiguanido-N5, N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di-( N1 , N1 '-p-nitrofenildiguanido-N5,N5')-hexano; Ômega'-di- (N1 , N1 '-fenildiguanido-N5, N5')-di-dicloridrato de éter n-propílico; Ômega'- di-(N1 , N1 '-p-clorofenildiguanido-N5, N5 ')-tetra-hidrocloreto de éter di-n- propilico; Tetra-hidrocloreto de 1 ,6-di-( N1 , N1 ’-2,4-diclorofenildiguanido- N5,N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di-(N1 , N1 '-p-metilfenildiguanido- N5,N5')-hexano; Tetrahidrocloreto de 1 ,6-di-(N1 , N1 '-2,4,5- triclorofenildiguanido-N5,N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di-[N1 , N1 '-Alfa- (p-clorofenil)etildiguanido-N5,N5']-hexano; Omega.: Mega-di-(N1 ,N1 '-p- clorofenildiguanido-N5,N5) dicloridrato de m-xileno; Dicloridrato de 1 ,12- d i- ( N1 , N1 '-p-clorofenildiguanido-N5,N5')-dodecano; 1 , 10-di-( N1 , N1 '- fenildiguanido-N5, N5')-tetra-hidrocloreto de decano; 1 ,12-di-(N1 , N1 '- fenildiguanido-N5, N5') dodecano tetra-hidrocloreto; Dicloridrato de 1 ,6-di- (N1 , N1 '-o-clorofenildiguanido-N5,N5')-hexano; 1 ,6-di-(N1 , N1 '-p- clorofenildiguanido-N5,N5')-hexano tetra-hidrocloreto; Etileno bis(1 -tolil biguanida); Etileno bis(p-tolil biguanida); Etileno bis(3,5-dimetilfenil biguanida); Etileno bis(p-terc-amilfenil biguanida); Etileno bis(nonilfenil biguanida); Etileno bis(fenilbiguanida); Etileno bis(N-butilfenil biguanida); Etileno bis(2,5-dietoxifenil biguanida); Etileno bis(2,4-dimetilfenil biguanida); Etileno bis(o-difenilbiguanida); Etileno bis(amil-naftil biguanida mista); N-butil etileno bis(fenilbiguanida); Bis(o-tolil biguanida) de trimetileno; N-butil trimetileno bis(fenil biguanida) e os sais farmaceuticamente aceitáveis correspondentes de todos os itens acima, tais como os acetatos; gluconatos; cloridratos; bromidratos; citratos; bissulfitos; fluoretos; polialeatos; N-alquilalquilsarcosinatos; fosfitos; hipofosfitos; perfluorooctanoatos; silicates; sorbatos; salicilatos; maleatos; tartaratos; fumaratos; etilenodiaminotetraacetatos; iminodiacetatos; cinamatos; tiocianatos; arginatos; pirromelitos; tetracarboxibutiratos; benzoatos; glutaratos; monofluorofosfatos; e perfluoropropionatos e suas misturas.

[22] Os antimicrobianos e antivirais e os respectivos compostos de inclusão com ciclodextrinas nas proporções molares 1 :1 a 1 :4 ou proporções molares superiores preferidos deste grupo são o tetra- hidrocloreto de 1 ,6-di-(N1 , N1 '-fenildiguanido-N5,N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di-(N1 ,N1 '-o-clorofenildiguanido-N5,N5')-hexano; Dicloridrato de

1 .6-di-( N1 , N1 '-2,6-diclorofenildiguanido- N5, N5 ')-hexano; Tetra- hidrocloreto de 1 ,6-di-( N1 , N1 '-2,4-diclorofen i Idig uan ido- N5, N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di-[N1 , N1 '-.Alfa. -(p-clorofenil)etildiguanido-N5, N5']- hexano; .Ômega.: Dicloridrato de Mega.'di-(N1 ,NT-p-clorofenildiguanido- N5,N5 ')-m-xileno; Dicloridrato de 1 , 12-di-( N1 , N1 '- -clorofenildiguanido- N5,N5') dodecano; Dicloridrato de 1 ,6-di-( N1 , N1 '-o-clorofenildiguanido- N5, N5')-hexano; 1 ,6-di-( N1 , N1 '-p-clorofenildiguanido-N5, N5')-hexano tetra-hidrocloreto e suas misturas; mais preferencialmente, dicloridrato de

1 .6-di-(N1 ,N1 '-o-clorofenildiguanido-N5,N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6- di-( N1 , N1 '-2,6-diclorofenildiguanido-N5,N5')-hexano; Tetra-hidrocloreto de

1 .6-di-(N1 ,N1 '-2,4-diclorofenildiguanido-N5,N5 ')-hexano; Dicloridrato de

1 .6-di-[N1 ,NT-Alfa-(p-clorofenil)etildiguanido-N5,N5']-hexano; .Ômega.: .Mega.'di-(N1 ,NT-p-clorofenildiguanido-N5,N5 ')-m-xileno; Dicloridrato de 1 , 12-di-( N1 , N1 '-p-clorofenildiguanido-N5, N5')-dodecano; Dicloridrato de

1 .6-di-( N1 , N1 '-o-clorofenildiguanido-N5, N5')-hexano; 1 ,6-di-( N1 , N1 '-p- clorofenildiguanido-N5,N5')-hexano tetra-hidrocloreto; e mistura desses.

[23] Uma grande variedade de compostos quaternários também pode ser usada como ativos antimicrobianos e antivirais para as composições com ciclodextrinas e seus compostos de inclusão nas proporções molares 1 :1 a 1 :4 ou proporções molares maiores de compostos quaternários de amônio:ciclodextrinas da presente invenção. Exemplos não limitantes de compostos quaternários úteis incluem: (1 ) cloretos de benzalcônio e/ou cloretos de benzalcônio substituídos, como Barquat® disponível no mercado (disponível na Lonza), Maquat® (disponível na Mason), Variquat® (disponível na Goldschmidt) e Hyamine® (disponível na Lonza); (2) quaternário di-(C6-C14) alquil-di- de cadeia curta (alquil C1 -4 e/ou hidroxialquil), como os produtos Bardac® da Lonza; (3) cloretos de N-(3- cloroalil)hexamina, como Dowicide® e Dowicil ® disponível na Dow; (4) cloreto de benzetônio tal como Hyamine® 1622 da Rohm & Haas; (5) cloreto de metilbenzetônio representado por Hyamine® 10x fornecido pela Rohm & Haas; (6) cloreto de cetilpiridínio, como cloreto de Cepacol, disponível na Merrell Labs. Exemplos dos compostos dialquil quaternários preferidos são o cloreto de di-(C8-C12) dialquil-dimetil-amônio, como cloreto de didecildimetilamônio (Bardac 22) e cloreto de dioctil dimetilamônio (Bardac 2050).

[24] O documento de patente CA1314228, de 1988, intitulado ’’Controlled release agent for cetylpyridinium chloride”, descreve a formulação e a liberação controlada do cloreto de cetilpiridinio em composto de inclusão utilizando a ciclodextrina como agente encapsulante (hospedeiro). O que corrobora a possibilidade de utilizar o ativo catiônico cloreto de cetilpiridínio, presente em enxaguantes bucais, associado a excipientes aniônicos, viabilizando formulações de cremes dentais, espumas, sprays ou géis, ampliando o espectro de aplicações e podendo melhorar suas atividades.

[25] As ciclodextrinas são oligossacarídeos cíclicos que incluem seis, sete ou oito unidades de glucopiranose. Devido às interações esféricas, as ciclodextrinas (CD's) formam uma estrutura na forma de um cone truncado com uma cavidade interna apoiar. Esses são compostos quimicamente estáveis que podem ser modificados de maneira regioseletiva. As ciclodextrinas atuam como hospedeiros para formar complexos com vários convidados em sua cavidade. No caso específico, são os compostos antimicrobianos como clorexidina para obter os compostos nas proporções molares 1 :1 a 1 :4 de clorexidina:ciclodextrina.

[26] O documento EP0306455, de 1987, intitulado “Cyclodextrin complexes of bis-biguanido hexane compounds” fornece complexos de ciclodextrina de compostos de bis-biguanido hexano, como clorexidina e seus sais, que atuam para aumentar a solubilidade em água da clorexidina ou seus sais, mascaram seu sabor amargo e aumentam sua biodisponibilidade. Os complexos de ciclodextrina de compostos de bis- biguanido hexano são formados pela dissolução de um excesso molar de ciclodextrina em água desionizada a temperaturas elevadas e adição de clorexidina ou seus sais. A solução é resfriada, congelada e liofilizada para obtenção do complexo.

[27] As CDs foram usadas para a solubilização e encapsulamento de medicamentos, perfumes e fragrâncias como descrito por SZeitli, J., Chemical Reviews, (1998), 98, 1743-1753 e Szeitli, J., J. Mater. Chem., (1997). De acordo com estudos detalhados de toxicidade, mutagenicidade, teratogenicidade e carcinogenicidade sobre a ciclodextrinas, descritas em Rajewski, R. A., Stella, V., J. Pharmaceutical Sciences, (1996), 85, 1 142- 1 169), e estes apresentaram baixa toxicidade, especialmente da hidroxipropil B-ciclodextrina, conforme relatado por Szetjli, 2004 (J. Cyclodextrins: propriedades e aplicações. Investimento em medicamentos, 20 Suppl. 4: 1 1 -21 , 2 de setembro de 2004). Exceto por algumas concentrações altas de alguns derrames que causam danos aos eritrócitos, esses produtos em geral não são prejudiciais à saúde.

[28] O uso de ciclodextrinas como aditivos em alimentos já foi autorizado em países como Japão e Hungria, e para aplicações mais específicas na França e na Dinamarca. Além disso, eles são obtidos de uma fonte renovável de degradação de amido. Todas essas características são uma grande motivação para os resultados de pesquisas de novas aplicações. Os usos práticos são classificados da seguinte forma: (1 ) transportadores (solubilizadores, estabilizadores) para ativos biologicamente ativos substâncias; (2) modelos de enzimas; (3) agentes separadores (para cromatografia ou processos descontínuos); (4) catalisadores e aditivos e detergentes, modificadores de viscosidade, etc. (L. Szente e J. Szetjli, Adv. Drug Deliv. Rev. 36 (1999), 17).

[29] As CDs são moderadamente solúveis em água, metanol e etanol e facilmente solúvel em solventes polares, como o dimetilsulfóxido e N,N- dimetilformamida, N,N-dimetilacetamida e piridina. Existem numerosos trabalhos de pesquisa na literatura sobre os efeitos do aumento da solubilidade na água dos convidados pouco solúveis em água, usando as ciclodextrinas através dos compostos de inclusão em uso (Szeitli, J., Chemical Reviews, (1998), 98, 1743-1753. Szetjli, J., J. Mater. Chem., (1997), 7.575-587). Assim, os sistemas de liberação controlada usando vários tipos de materiais transportadores de alto desempenho vêm sendo desenvolvidos para fornecer a quantidade necessária de anti microbiano, de forma eficiente e precisa, como os descritos na presente tecnologia, com base nos compostos de inclusão de clorexidina:ciclodextrinas nas proporções molares 1 :1 a 1 :4 ou superiores e outros ativos catiônicos como, por exemplo, o cloreto de cetil piridínio e quaternários de amónio nanoencapsulados em ciclodextrinas.

[30] A aplicação de sais de clorexidina frente a SARS-COV deve-se à observação de que esses materiais apresentarem atividade antiviral em concentrações acima de 0,02 % m/m (KAMPF, G; Todt, D.; Pfaender, S.; Stein man n, E. Persistence of coronaviruses on inanimate surfaces and their inactivation with biocidal agents. J. Hosp. Infect. 104, 246-251 , 2020). BREVE DESCRIÇÃO DAS FIGURAS

[31] A Figura 1 apresenta a curva de liberação em tecido impregnado pela metodologia de foulardagem (AmlibOI equivale à concentração 10 g/L; Amlib02 equivale à concentração 7,5 g/L; Amlib03 equivale à concentração 5,0 g/L, em relação ao ativo catiônico nanoencapsulado em ciclodextrinas na proporção molar de 1 :1 a 1 :4).

DESCRIÇÃO DETALHADA DA TECNOLOGIA

[32] A presente invenção se refere a composições com atividade antimicrobiana de longa duração e de amplo espectro, incluindo atividade bactericida, bacterostática, virucida, virustática, germicida, algicida, fungicida e fungistática. As composições podem ser utilizadas para produção de formulações para uso tópico ou para tratamento de ambiente, higienização de superfícies ou uso odontológico. A composição pode estar em solução, em gel úmido, xerogéis, aerossóis, sprays, sistemas poliméricos e em estado sólido. Em particular, a invenção se refere às composições, como solução aquosa ou solução alcoólica, ou mesmo na forma de gel ou em pó, com atividade antimicrobiana. As composições contêm um ativo catiônico (digluconato de clorexidina, quaternário de amónia ou cetil piridíneo) nanoencapsulado em ciclodextrina (alfa- ciclodextrina, beta-ciclodextrina, gama-ciclodextrina, hidroximetilbeta- ciclodextrina ou hidroxipropilbeta-ciclodextrina, as quais podem opcionalmente conter inserções de grupos alquila ou arila), na razão molar de 1 :1 a 1 :4. Essas composições ainda compreendem excipientes aniônico, além de incluindo umectantes, estabilizantes, sequestrantes, surfactantes, conservantes ou espessantes. Preferencialmente, compreendem o surfactante aniônico lauril sulfato de sódio, ou o espessante aniônico carbômero. As composições antimicrobianas de longa duração compreendem ativos catiônicos, selecionados do grupo compreendendo digluconato de clorexidina, quaternário de amónia ou cetil piridíneo, nanoencapsulados em ciclodextrina, selecionada do grupo compreendendo alfa-ciclodextrina, beta-ciclodextrina, gama-ciclodextrina, hidroximetilbeta-ciclodextrina e hidroxipropilbeta-ciclodextrina, as quais podem opcionalmente conter inserções de grupos alquila ou arila, e excipientes aniônicos, além de umectantes, estabilizantes, sequestrantes, surfactantes, conservantes ou espessantes.

[33] Os ativos catiônicos podem estar na proporção molar de 1 :1 a 1 :4 em relação ao composto de inclusão.

[34] Os conservantes podem ser metilparabeno ou propilparabeno na concentração de 0,1 a 0,3 % m/v.

[35] Os excipientes farmacêuticos aniônicos podem ser o surfactante aniônico lauril sulfato em concentrações entre 0,01 e 0,3 % v/v; ou o espessante carbômero em concentrações entre 0,1 e 3,0 % m/v.

[36] As composições antimicrobianas podem ser utilizadas na produção de sanitizantes em solução aquosa ou solução alcoólica, em gel úmido, xerogéis, aerossóis, sprays, pós, sistemas poliméricos e em estado sólido; na produção de gel transparente; na produção de formulações para uso tópico; na produção de formulações para tratamento de ambiente e higienização de superfícies; ou na produção de enxaguante bucal e creme dental.

[37] As composições farmacêuticas podem conter clorexidina e seu sais como: Dicloridrato de 1 ,6-bis-(2-etil-hexilbiguanido-hexano); Tetra- hidrocloreto de 1 ,6-di-(N1 , N1 '-fenildiguanido-N5, N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di-( N1 , N1 '-fenil-N1 , N1 '-metildiguanido-N5, N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di-(N1 ,N1 '-o-clorofenildiguanido-N5,N5')-hexano; Dicloridrato de

1 .6-di-( N1 , N1 '-2, 6-diclorofen i Idig uan ido- N5, N5')-hexano; Dicloridrato de

1 .6-di-[ N1 , N1 '-Beta-(p-metoxifenil)diguanido-N5, N5']-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di-( N1 , N1 '-Alfa-metil-beta-fenildiguanido-N5, N5')-hexano;

Dicloridrato de 1 ,6-di-( N1 , N1 '-p-nitrofenildiguanido-N5,N5')-hexano; Ômega'-di-(N1 , N1 '-fenildiguanido-N5, N5')-di-dicloridrato de éter n- propílico; Ômega'-di-(N1 ,N1 '-p-clorofenildiguanido-N5,N5 ')-tetra- hidrocloreto de éter di-n-propílico; Tetra-hidrocloreto de 1 ,6-di-( N1 , N1 '-2,4- diclorofenildiguanido-N5, N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di-(N1 ,N1 '-p- metilfenildiguanido-N5,N5')-hexano; Tetrahidrocloreto de 1 ,6-di-(N1 , N1 2,4,5-triclorofen i Idig uan ido- N5, N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di-[N1 , N1 Alfa-(p-clorofenil)etildiguanido-N5, N5']-hexano; Ômega-Mega-di-(N1 , N1 p-clorofenildiguanido-N5,N5) dicloridrato de m-xileno; Dicloridrato de 1 ,12- d i- ( N1 , N1 '-p-clorofenildiguanido-N5,N5')-dodecano; 1 , 10-di-( N1 , N1 fenildiguanido-N5,N5')-tetra-hidrocloreto de decano; 1 ,12-di-(N1 , N1 '- fenildiguanido-N5, N5') dodecano tetra-hidrocloreto; Dicloridrato de 1 ,6-di- (N1 , N1 '-o-clorofenildiguanido-N5,N5')-hexano; 1 ,6-di-(N1 ,NV-p- clorofenildiguanido-N5,N5')-hexano tetra-hidrocloreto; Etileno bis(1 -tolil biguanida); Etileno bis(p-tolil biguanida); Etileno bis(3,5-dimetilfenil biguanida); Etileno bis(p-terc-amilfenil biguanida); Etileno bis(nonilfenil biguanida); Etileno bis(fenilbiguanida); Etileno bis(N-butilfenil biguanida); Etileno bis(2,5-dietoxifenil biguanida); Etileno bis(2,4-dimetilfenil biguanida); Etileno bis(o-difenilbiguanida); Etileno bis(amil-naftil biguanida mista); N-butil etileno bis(fenilbiguanida); Bis(o-tolil biguanida) de trimetileno; N-butil trimetileno bis(fenil biguanida) e os sais farmaceuticamente aceitáveis correspondentes de todos os itens acima, tais como os acetatos; gluconatos; cloridratos; bromidratos; citratos; bissulfitos; fluoretos; polialeatos; N-alquilalquilsarcosinatos; fosfitos; hipofosfitos; perfluorooctanoatos; silicates; sorbatos; salicilatos; maleatos; tartaratos; fumaratos; etilenodiaminotetraacetatos; iminodiacetatos; cinamatos; tiocianatos; arginatos; pirromelitos; tetracarboxibutiratos; benzoatos; glutaratos; monofluorofosfatos; e perfluoropropionatos e suas misturas.

[38] Os antimicrobianos e antivirais e os respectivos compostos de inclusão com ciclodextrinas, nas proporções molares entre 1 :1 e 1 :4 são selecionados do grupo compreendendo tetra-hidrocloreto de 1 ,6-di-( N1 , N1 '-fenildiguanido-N5,N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di-(N1 ,NV-o- clorofenildiguanido-N5, N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di-(N1 , N1 '-2,6- diclorofenildiguanido-N5,N5 ')-hexano; Tetra-hidrocloreto de 1 ,6-di- (N1 ,N1 '-2,4-diclorofenildiguanido-N5,N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di- [N1 , N1 '-.AIfa.-(p-clorofenil)etildiguanido-N5, N5']-hexano; Omega

Dicloridrato de Mega. 'di-(N1 , N1 '-p-clorofenildiguanido-N5,N5 ')-m-xileno; Dicloridrato de 1 ,12-di-(N1 ,N1 '-p-clorofenildiguanido-N5,N5') dodecano; Dicloridrato de 1 ,6-di-(N1 ,N1 '-o-clorofenildiguanido-N5,N5')-hexano; 1 ,6- di-(N1 ,N1 '-p-clorofenildiguanido-N5,N5')-hexano tetra-hidrocloreto e suas misturas; mais preferencialmente, dicloridrato de 1 ,6-di-(N1 ,NV-o- clorofenildiguanido-N5,N5')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di-(N1 , N1 '-2,6- diclorofenildiguanido-N5,N5')-hexano; Tetra-hidrocloreto de 1 ,6-di- (N1 ,N1 '-2,4-diclorofenildiguanido-N5,N5 ')-hexano; Dicloridrato de 1 ,6-di- [N1 , N1 '-Alfa-(p-clorofenil)etildiguanido-N5, N5']-hexano; Omega-Mega.'di- (N1 ,N1 '-p-clorofenildiguanido-N5,N5 ')-m-xileno; Dicloridrato de 1 ,12-di- (N1 ,N1 '-p-clorofenildiguanido-N5,N5')-dodecano; Dicloridrato de 1 ,6-di- (N1 , N1 '-o-clorofenildiguanido-N5, N5')-hexano; 1 ,6-di-( N1 , N1 '-p- clorofenildiguanido-N5,N5')-hexano tetra-hidrocloreto; e mistura desses. [39] Podem ser inseridos na formulação ativos catiônicos de variações do grupo piridinil como: 2-acetilpiridina, 3-acetilpiridina, 4-acetilpiridina, 4- iodopiridina, 4-metilpiridina, 4-aminopiridina,4-cloropiridina, 4-fluorpiridina, 4-bromopiridina, 4-hidroxipiridina, 4-mercaptopiridina, 3-aminopiridina, 3- bromopiridina, 3-iodopiridina, 3-fluorpiridina, 3-cloropiridina, 3- metilpiridina, 2-acetilpiridina, 3-acetilpíridina, 4-acetilpiridina, 4-acetil-2- cloropiridina, 3-acetil-2-cloropiridina, dipiridin-4-ilmetanona, 1 -(4- quinolinil)etanona, pi ridi na-2-i I (pi ridi na-4-i I) metanona, 1 -(2-fluoro-6-

(pirrolidin-1 -i l)pi ridi na-4-i l)etanona, (2E)-4,4,4-trif I uoro-3-h idroxi- 1 -(4- piridinil)-2-buten-1 -ona, 1 ,3-bis(1 -oxi-piridin-4-il)-propenona, dipiridin-4- ilmetanona, cloreto de cetilpiridínio, brometo de cetilpiridínio, iodeto de cetilpiridínio, ácido 2,4-dioxo-4-piridin-4-ilbutanóico, 2-(2-clorophenil)-1 -(4- piridinil)etanona; além, de sais de quaternário de amónia contendo cadeias alifáticas ou aromáticas variando entre 1 a 4 grupos substituintes como: formato de amónia, cloreto de amónio, borohidreto de tetrametilamônio, fluoreto de tetrametilamônio, cloreto de tetrametilamônio, iodeto de tetrametilamônio, fluoreto de tetrabutilamônio, cloreto de tetrabutilamônio, brometo de tetrabutilamônio, iodeto de tetrabutilamônio, nitrato de tetrabutilamônio, cloreto de clorocolina, cloreto de benzilmetilamônio, brometo de benziltrimetilamônio, iodeto de benziltrimetilamônio, nitrato de tetraetilamônio, cloreto de tetraetilamônio, brometo de benzil-octadecil- metil-propilamônio, cloreto de trimetiloctilamônio, brometo de hexiltrimetilamônio, N,N-dimetildodecilamino N-oxido, cloreto de tributilmetilamônio, brometo de trimetilcoctilamônio, cloreto de benzildimetilhexilamônio, cloreto de dodeciltrimetilamônio, brometo de dodeciltrimetilamônio, iodeto de dodeciltrimetilamônio, metilssulfato de tris(2-hidroxietil)metilamônio, clorohidrato de tetrabutilamônio, brometo de allil-benzil-dietil-amônio, N-[2-(dimetilnitroil)etil]dodecanamida, cloreto de trimetil-tetradecilamônio, brometo de trimetil-tetradecilamônio, iodeto de trimetil-tetradecilamônio, acetato de N,N-dimetilmisristilamônio, hidróxido de hexadeciltrimetilamônio, hidróxido de tetrapentilamônio, cloreto de cetilmetilamônio, brometo de cetilmetilamônio, iodeto de cetilmetilamônio, nitrato de cetilmetilamônio, cloreto de dodeciletildimetilamônio, brometo de dodeciletildimetilamônio, iodeto de dodeciletildimetilamônio, nitrato de dodeciletildimetilamônio, cloreto de tetrapentilamônio, brometo de tetrapentilamônio, iodeto de tetrapentilamônio, nitrato de tetrapentilamônio, N-dodecil-N,N-dimetil-3-amônio-1 -propanossulfonato, cloreto de N-(3-cloropropil)-N,N-dimetil-1 -dodecanamônio, brometo de N- (3-cloropropil)-N,N-dimetil-1 -dodecanamônio, iodeto de N-(3-cloropropil)- N,N-dimetil-1 -dodecanamônio, nitrato de N-(3-cloropropil)-N, N-dimetil-1 - dodecanamônio, cloreto de benzildinetil(tetradecilcarbamoilmetil)amônio, brometo de benzildinetil(tetradecilcarbamoilmetil)amônio, iodeto de benzildinetil(tetradecilcarbamoilmetil)amônio, nitrato de benzildinetil(tetradecilcarbamoilmetil)amônio, brometo de bis-decil-dietil- amônio, iodeto de bis-decil-dietil-amônio e nitratoo de bis-decil-dietil- amônio, brometo de propantelina, cloreto de metiltrioctilamônio, brometo de metiltrioctilamônio, iodeto de metiltrioctilamônio, nitrato de metiltrioctilamônio, cloreto de N, N-dimetil-N-[(3, 5,5,8, 8-pentametil-5, 6,7,8- tetrahidro-2-naftalenil)metil]-1 -dodecanamônio, brometo de N, N-dimetil-N- [(3,5,5,8,8-pentametil-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)metil ]-1 - dodecanamônio, iodeto de N, N-dimetil-N-[(3, 5,5,8, 8-pentametil-5, 6,7,8- tetrahidro-2-naftalenil)metil]-1 -dodecanamônio e nitrato de N, N-dimetil-N- [(3,5,5,8,8-pentametil-5,6,7,8-tetrahidro-2-naftalenil)metil ]-1 - dodecanamônio.

[40] A presente tecnologia pode ser mais bem compreendida através dos exemplos a seguir, não limitantes da mesma.

Exemplo 1 - Processos de preparação das composições farmacêuticas

[41] O processo de preparação do gel com carbopol foi possível adicionando AMP (aminometilpropanol) em quantidade adequada em uma solução aquosa do carbopol em concentrações entre 0,1 e 3,0 % m/v.

[42] O processo de preparação das soluções com os compostos de inclusão foram realizados a partir da adição do sal de clorexidina em uma solução aquosa contendo encapsulante da família das ciclodextrina (hidroxipropil beta-ciclodextrina, alfa-ciclodextrina, beta-ciclodextrina, gama-ciclodextrina) a 60 ºC, mantendo-se as proporções molares em 1 :1 , 1 :2, 1 :3 ou 1 :4, respectivamente, seguindo o procedimento relatado na literatura (CORTÉS et al., The chiorhexidine:β-Cydodextrin Inclusion compounds: preparation, characterization and microbial evaluation. Journal of Inclusion Phenomena and Macrocyclic Chemistry, 40, 2001 , 297-302).

[43] A solução aquosa ou alcoólica em concentração adequada do composto de inclusão, contendo surfactante ou emulsificante também em concentrações entre 0,01 % e 0,3 % m/v para o preparo, foi adicionada ao gel em agitação constante. A adição da solução contendo o princípio ativo foi realizada após seu resfriamento do gel a uma temperatura entre 15 ºC e 35 -C a fim de não modificar as propriedades de cada formulação química.

[44] Utilizou-se, quando necessário, metilparabeno ou propilparabeno na concentração de 0,1 % m/v como conservante para prevenir a contaminação de fungos durante a estocagem dos produtos.

Exemplo 2 - Preparação de formulações cosméticas antissépticas usando compostos de inclusão 1 :1 até 1 :4 de sais de clorexidina:ciclodextrinas e excipientes farmacêuticos, incluindo surfactantes aniônicos

[45] As composições farmacêuticas antimicrobiana de longa duração para uso tópico e processos de higienização de superfícies ou uso cosmético foram preparadas usando as seguintes formulações tabeladas (Tabelas 1 a 3).

Exemplo 3 - Preparo de gel transparente usando compostos de inclusão 1 :1 até 1 :4 de sais de clorexidina:ciclodextrinas e excipientes farmacêuticos, incluindo carbômero

[46] As loções foram preparadas fazendo a inserção do carbopol em quantidade adequada de água para sua hidratação. Em seguida, sob agitação, foi adicionado o AMP-95 até total abertura do polímero. Foi adicionada sobre o polímero uma solução aquosa contendo as quantidades desejadas para as formulações dos produtos (Tabela 4 e 5). As soluções foram preparadas adicionando quantidades adequadas de glicerina e cosmoguard sob uma solução aquosa de composto de inclusão, em agitação constante. Posteriormente, a solução foi adicionada, sob agitação constante, ao polímero, a uma temperatura entre 10 ºC e 35 ºC.

Exemplo 4 - Incorporação de solução aquosa contendo o composto de inclusão clorexidina:ciclodextrina e surfactantes em lenço poroso ou TNT (Tecido não Tecido)

[47] As soluções aplicadas nos tecidos-não-tecidos foram obtidas a partir das formulações apresentadas nas Tabelas 6, 7 e 8. A formulação foi realizada com a inserção dos materiais diretamente à solução aquosa do composto de inclusão nas proporções molares entre 1 :1 e 1 :4 de ciclodextrina:sal de clorexidina em agitação constante e temperatura entre 10 ºC e 35 ºC. Para avaliar a incorporação das soluções formuladas a folhas de lenço poroso foi submerso a 10 mL da solução um pedaço de lenço poroso cortado em dimensão igual a 1 ,5 cm ² e deixado imerso por 1 minuto. O material foi levado à estufa com temperatura de 120 ºC e mantido por 10 minutos.

[48] Os pedaços foram transferidos para um recipiente contendo 10 mL de água destilada a temperatura de 35 ºC para avaliar o tempo de liberação da clorexidina no meio. Retirou-se alíquotas em intervalos de 1 em 1 minuto nos primeiros 10 minutos, de 10 em 10 minutos na primeira hora, de hora em hora após a primeira hora e de 24 em 24 horas após o primeiro dia. Todas as medidas foram realizadas em triplicata.

[49] Observou-se a liberação do material até o tempo de 180 horas, sendo que o tipo de gramatura do tecido afeta a liberação do princípio ativo em solução (Figura 1. Curva de liberação TECIDO CREME FOULARD SENAI impregnado pela metodologia de foulardagem (AmlibOI 10 g/L; Amlib02 7,5 g/L; Amlib03 5,0 g/L)).

Exemplo 5 - Análise físico-química da interação beta-ciclodextrina, sal de clorexidina e surfactante por meio da calorimetria de nanotitulação isotérmica [50] Estudos de interação para avaliar a estabilidade do sistema do composto de inclusão foram realizados por análise de nano calorimetria de titulação isotérmica, onde foi possível avaliar a constante de interação/dissociação entre a betaciclodextrina, digluconato de clorexidina, composto de inclusão formado pela proporção molar de 1 :3 (digluconato de clorexidina:betaciclodextrina) e o sirfactante lauril sulfato de sódio.

[51] Os estudos da interação dos sais com a betaciclodextrina mostrou que a força de interação desta com o digluconato de clorexidina é maior do que com o lauril sulfato de sódio. Em valores adimensionais: 1000 x 10 ⁶ e 737 x 10 ⁶ , respectivamente (Tabela 6).

Tabela 6 - Dados do experimento de titulação calorimetria isotérmica da interação entre betaciclodextrina, gluconato de clorexidina e lauril sulfato de sódio.

[52] As análises calorimétricas mostram que a interação da clorexidina com a betaciclodextrina é da ordem de 1000 (mil) vezes maior que a interação lauril sulfato de sódio com a betaciclodextrina. Isto indica que a estrutura do composto de inclusão não é alterada pela presença do surfactante.

Exemplo 6 - Análise físico-química da interação composto de inclusão, digluoconato de clorexidina e carbopol por meio da calorimetria de nanotitulação isotérmica

[53] Estudos de interação para avaliar a estabilidade do sistema do composto de inclusão foram realizados por análise de nano calorimetria de titulação isotérmica, onde foi possível avaliar a constante de interação/dissociação entre a digluconato de clorexidina, composto de inclusão formado pela proporção molar de 1 :3 (digluconato de clorexidina:betaciclodextrina) e carbopol já em estrutura polimérica.

[54] Os estudos da interação do composto de inclusão e sal livre em solução mostraram que não houve interação significativa entre o composto de inclusão e o carbopol quando comparado à interação do sal de clorexidina em solução. (Tabela 7).

Tabela 7 - Dados do experimento de titulação calorimetria isotérmica da interação entre composto de inclusão, gluconato de clorexidina e carbopol.

Exemplo 7 - Estudo da atividade antiviral contra vírus da família SARS-COV e H1N1 do gel alcoólico e spray corporal contendo composto de inclusão

[55] O ensaio da atividade antiviral com os produtos com as formulações descritas anteriormente foram realizados seguindo as recomendações da ANVISA Art.1 e Art. 3 da IN 04/13 e IN 12/16 e metodologias descritivas nas normas (EN14476:2019, ASTM E1053 - 1 1 e do instituto Robert Koch - RKI).

[56] A titulação do coronavirus (Cepa MHV-3) e Influenza Vírus (H1 N1 ) foram realizadas de acordo com o método de doses infectantes de cultivos tecidos 50% (DICT50) frente às células L-929, derivada da cepa L (ATCC CCL-1 ), e MDCK (célula de rim canino de Madin-Darby) (ATCC CCL-34).

[57] Diluições sequenciais do vírus na base 10 foram realizadas em quadruplicada em microplacas estéreis de 96 poços. Em seguida, foram adicionadas as células L929, MDCK em concentração de 2 x 10 ⁵ células/poço. Após 48 horas, verificou-se o efeito citopático (ECP) da infecção viral em comparação com o controle celular e controle virai.

[58] Os produtos foram misturados aos vírus e posteriormente submetidos a diferentes tempos de contato. Em seguida, foram inoculados nas células permissivas de L929 e MDCK. As microplacas com os produtos, vírus e sistemas celulares foram incubadas a 37 ºC em estufa com CO2 a 5 % por 48 horas. Os títulos foram calculados com base no método de Reed e Muench (Reed LJ, Muench H., A simple method of estimating fifty per cent endpoints. Am. J. Hyg. 27,493 - 497,1938.).

[59] Os resultados mostram que 0 spray corporal apresentou atividade antiviral de 99 % até 99,99% após 8 horas da aplicação. O gel não alcoólico apresentou inibição virai de 99,99 % no tempo imediato e 5 minutos após a aplicação e de 99,9 % nos tempos de 2 a 8 horas após a aplicação. Já 0 gel alcoólico apresentou atividade de 99 % a 99,9 % frente ao grupo Coronavirus (Cepa MHV-3) e Influenza Vírus (H1 N1 ) independentemente do tempo de aplicação.

Exemplo 8 - Estudo sensorial de soluções em concentrações variadas de diguconato de clorexidina e do composto de inclusão

[60] A avaliação sensorial da redução do amargor característico da clorexidina foi realizada utilizando soluções em concentrações equivalentes de digluconato de clorexidina puro e encapsulado em betaciclodextrina. Os estudos foram realizados distribuindo em copos plásticos 20ml_ de cada solução - indiscriminadas para os avaliadores. Após a utilização das soluções foi distribuído um questionário aos participantes, onde foi questionado 0 sabor e amargor dos produtos.

[61] Todos os participantes descreveram que 0 sabor da solução contendo 0 composto de inclusão foi mais agradável e de menor amargor em relação à solução de digluconato de clorexidina pura em todas as concentrações testadas.