Mälzungs erfahren Die Erfindung bezieht sich auf ein Mälzungsverfahren, insbesondere im Rahmen der Herstellung von Bier, bei dem Rohfrucht (z.B. Getreide, Gerste, Weizen, Roggen, Dinkel, Reis, Mais u.a.) in Wasser eingeweicht wird. Ein ähnliches Mälzungsverfahren ist aus der chinesischen Offenlegungsschrift CN 102174345 A bekannt. Bei dem vorbekann ^¬ ten Mälzungsverfahren wird Gerste in Wasser eingeweicht und das daraus gebildete Gemisch mittels eines Ultraschallgenera ^¬ tors in Ultraschallschwingungen zwischen 35 und 100 kHz ver- setzt.

Der Erfindung liegt die Aufgabe zugrunde, ein Mälzungsverfahren der oben angegebenen Art weiter zu verbessern. Diese Aufgabe wird erfindungsgemäß durch ein Verfahren mit den Merkmalen gemäß Patentanspruch 1 gelöst. Vorteilhafte Ausgestaltungen des erfindungsgemäßen Verfahrens sind in Unteransprüchen angegeben. Danach ist erfindungsgemäß vorgesehen, dass während zumindest eines Zeitabschnitts des Einweichens das Gemisch in eine me ^¬ chanische Schwingung versetzt wird, deren Schwingfrequenzspektrum zumindest auch eine Frequenz zwischen 50 und 500 Hz aufweist .

Ein wesentlicher Vorteil des erfindungsgemäßen Mälzungsver- fahrens ist darin zu sehen, dass durch die erfindungsgemäß eingebrachten Schwingungen die Reinigung der Rohfrucht ver- bessert, die Wasseraufnahme und die Ankeimung beschleunigt und dadurch eine höhere Malzqualität erreicht wird, weil das Schwingfrequenzspektrum zumindest auch unterhalb des Ultra ^¬ schallbereichs liegt. So kann beispielsweise durch den erfin- dungsgemäß vorgesehenen Frequenzbereich beim fertigen Malz die Keimbelastung durch Bakterien und Schimmelpilze um bis zu 50 % - im Vergleich zu einem Mälzungsverfahren ohne Schwingungsunterstützung - reduziert werden. Ein weiterer wesentlicher Vorteil des erfindungsgemäßen Mälzungsverfahrens ist darin zu sehen, dass durch die erfindungsgemäß eingebrachten Schwingungen der Gehalt an prooxida- tiv wirkenden Metallionen ( insbesondere Eisen) im fertigen Malz deutlich herabgesetzt wird. Auf diesem Wege kann der rohstoffbedingte prooxidativ wirkende Metallioneneintrag

/Eiseneintrag während dem Brauprozess um bis zu 35 % redu ^¬ ziert werden. In Folge wird eine signifikant höhere oxidative Würze- bzw. Bierstabilität erreicht. Ein weiterer wesentlicher Vorteil des erfindungsgemäßen Mälzungsverfahrens ist darin zu sehen, dass das resultierende Malz deutlich homogener ist als Malz, das mit einem Mälzungs- verfahren ohne die erfindungsgemäße Schwingungsunterstützung hergestellt wird.

Ein weiterer wesentlicher Vorteil des erfindungsgemäßen Mälzungsverfahrens ist darin zu sehen, dass die resultierende höhere Homogenität und Malzqualität der Malze nachweislich zu verbesserten Läutereigenschaften führt. Dies ist von besonde- rer Bedeutung da das Läutern den geschwindigkeitsbestimmenden Prozessschritt bei der Würzeproduktion im Brauprozess (im Sudhaus) darstellt. Folglich kann bei Anwendung des erfin- dungsgemäßen Mälzungsverfahrens der Zeit- und Kostenaufwand für die Bierproduktion gesenkt werden.

Mit Blick auf die Reinigung der Rohfrucht, sowie auf die Ho- mogenität des Malzes wird es als besonders vorteilhaft ange ^¬ sehen, wenn das Schwingfrequenzspektrum zumindest auch eine Frequenz zwischen 100 und 300 Hz, insbesondere zwischen 180 und 300 Hz, aufweist. Besonders bevorzugt beträgt der Wert der Schwingfrequenz der mechanischen Schwingung zwischen 180 und 300 Hz.

Vorzugsweise wird die mechanische Schwingung durch den Ein ^¬ satz eines Rüttlers (mechanischer Innenvibrator) im Einweichgefäß - nachfolgend kurz Weichgefäß genannt - erzeugt. Die Anwendung der vom Rüttler erzeugten mechanischen Schwingungen bzw. Schallwellen erfolgt bevorzugt mit einer Rüttelfrequenz zwischen 50 und 500 Hz. Besonders vorteilhaft ist es, wenn die mechanische Schwingung mit einer Rüttelfrequenz zwischen 100 und 300 Hz, insbesondere zwischen 180 und 300 Hz, erzeugt wird.

Vorzugsweise wird die mechanische Schwingung mit einer Rüt ^¬ teleinrichtung, insbesondere einer Rüttelplatte oder einem sogenannten Zementrüttler, von außen erzeugt.

Alternativ oder zusätzlich kann die mechanische Schwingung mit einer in dem Gemisch bzw. in dem Weichgefäß befindlichen Schwingungserzeugungseinrichtung, insbesondere einem Vibrator (mechanischer Innenvibrator), erzeugt werden.

Während zumindest eines Zeitabschnitts des Einweichens oder auch die ganze Einweichzeit über kann das Gemisch mit Sauer ^¬ stoff oder einem sauerstoffhaltigen Gas, insbesondere Luft, belüftet werden. Alternativ kann das Einweichen belüftungslos durchgeführt werden.

Das Einweichen kann ein, zwei- oder mehrphasig erfolgen. Als besonders vorteilhaft wird es angesehen, wenn das Einweichen der Rohfrucht zumindest eine erste Einweichphase, eine auf die erste Einweichphase folgende Rastphase und eine auf die Rastphase folgende zweite Einweichphase umfasst. Erfolgt die erste Einweichphase belüftungslos, so ist es vor ^¬ teilhaft, wenn das Gemisch die letzten drei bis vier Stunden der ersten Einweichphase in die mechanische Schwingung ver ^¬ setzt wird. Erfolgt die zweite Einweichphase belüftungslos, so wird das Gemisch vorzugsweise frühestens nach 30 Minuten, besonders bevorzugt frühestens nach 60 Minuten, in die mechanische Schwingung versetzt. Vorzugsweise wird zur Malzbildung als Rohfrucht (z.B. Getrei ^¬ de, Gerste, Weizen, Roggen, Dinkel, Reis, Mais, etc. einge ^¬ weicht .

Die Erfindung bezieht sich darüber hinaus auf ein Verfahren zum Herstellen von Bier. Erfindungsgemäß wird Malz herge ^¬ stellt, wobei die Rohfrucht in Wasser eingeweicht wird und während zumindest eines Zeitabschnitts des Einweichens das Gemisch in eine mechanische Schwingung versetzt wird, deren Schwingfrequenzspektrum zumindest auch eine Frequenz zwischen 50 und 500 Hz aufweist. Das Bier wird erfindungsgemäß unter Verwendung dieses Malzes gebraut. Die Erfindung bezieht sich darüber hinaus auf eine Mälzeinrichtung mit einem Weichgefäß zum Einweichen von Rohfrucht in Wasser und einer Schwingungserzeugungseinrichtung .

Erfindungsgemäß ist bezüglich einer solchen Mälzeinrichtung vorgesehen, dass die Schwingungserzeugungseinrichtung geeignet ist, das das Wasser und das Rohfrucht aufweisende Gemisch in eine mechanische Schwingung zu versetzen, deren Schwingfrequenzspektrum zumindest auch eine Frequenz zwischen 50 und 500 Hz aufweist.

Bezüglich der Vorteile der erfindungsgemäßen Mälzeinrichtung sei auf die obigen Ausführungen im Zusammenhang mit dem erfindungsgemäßen Mälzungsverfahren verwiesen, da die Vorteile des erfindungsgemäßen Mälzungsverfahrens denen der erfindungsgemäßen Mälzeinrichtung im Wesentlichen entsprechen.

Bezüglich der Mälzeinrichtung wird es als vorteilhaft angese ^¬ hen, wenn die Schwingungserzeugungseinrichtung eine von außen auf das Weichgefäß einwirkende Rütteleinrichtung, insbesonde ^¬ re eine Rüttelplatte und/oder einen in dem Weichgefäß ange ^¬ ordneter Zementrüttler, bzw. angeordneten Vibrator umfasst oder durch eine solche Rütteleinrichtung oder einen solchen Vibrator gebildet ist.

Unter einem Zementrüttler werden im Sinne dieser Anmeldung Einrichtungen verstanden, die unter anderem auch die Form einer Schneckenschraube besitzen.

Die Erfindung wird nachfolgend anhand zweier Ausführungsbei ^¬ spielen näher erläutert; dabei zeigen beispielhaft Figur 1 ein Ausführungsbeispiel für eine metallkatalysierte Bildung von Hydroxylradikalen,

Figur 2 einen Vergleich der Weichwassertrübung über der

Gerste nach der 1. Nassweiche (links mit Rüttler (Schallwelleneintrag) ; rechts ohne Rüttler (Schall ^¬ welleneintrag) ,

Figur 3 einen Trübungsvergleich der Weichwässer der ersten

Nassweiche nach dem Ablauf,

Figur 4 einen Vergleich der Wasseraufnahme durch eine bzw.

zwei Nassweichen mit und ohne Rütteln,

Figur 5 einen Vergleich der Ankeimung der geweichten Proben,

Figur 6 einen Vergleich der mikrobiologischen Belastung auf den fertigen Malzen,

Figur 7 die Eisengehalte der aus den Malzen produzierten

Würzen,

Figur 8 den Sauerstoffverbrauch während einer ersten und zweiten unbelüfteten Nassweiche im Pilotmaßstab, Figur 9 einen Vergleich der Wasseraufnahme durch die zwei

Nassweichen mit und ohne Rütteln - Versuchsreihe 2,

Figur 10 die Ankeimung der geweichten Proben - Versuchsreihe

1,

Figur 11 die Verläufe der Sauerstoffkonzentrationen während den ersten Nassweichen (NW) - Versuchsreihe 2,

Figur 12 die Verläufe der Sauerstoffkonzentrationen während den zweiten Nassweichen (NW) - Versuchsreihe 2 (un- belüftet, erst nach einer Stunde beschallt) ,

Figur 13 einen Vergleich der Homogenität (Carlsberg-Methode und Blattkeimlänge) [13] - Versuchsreihe 1,

Figur 14 einen Vergleich der Homogenität (Carlsberg-Methode und Blattkeimlänge) [13] - Versuchsreihe 2, Figur 15 einen Vergleich der Abiaufzeiten der Kongressmaischen nach MEBAK [13] - Versuchsreihe 1,

Figur 16 die Verläufe der mittels Laborläutertests unter ^¬ suchten Malze - Versuchsreihe 1, Figur 17 die Verläufe der mittels Laborläutertests unter ^¬ suchten Malze - Versuchsreihe 2,

Figur 18 einen Vergleich der mikrobiologischen Belastung auf den fertigen Malzen - Versuchsreihe 1,

Figur 19 einen Vergleich der mikrobiologischen Belastung auf den fertigen Malzen - Versuchsreihe 2,

Figur 20 die Eisengehalte der aus den Malzen produzierten

Kongresswürzen- Versuchsreihe 1,

Figur 21 die Eisengehalte der aus den Malzen produzierten

Würzen (Stammwürze 12 %) - Versuchsreihe 2 und Figur 22 eine EAP-Bestimmung der aus den belüfteten Malzen produzierten Würzen - Versuchsreihe 2.

A) Erstes Ausführungsbeispiel der Erfindung:

Bei dem ersten Ausführungsbeispiel geht es um den Einsatz von Schallwellen mittels Zementrüttler bzw. eines Innenvibrators im Mälzungsprozess zur Verbesserung der Malzqualität.

Einsatz von Schallwellen zur Verbesserung der Malzqualität

Es ist hinreichend bekannt, dass die eingesetzten Rohstoffe Malz, Hopfen und Brauwasser einen entscheidenden Einfluss auf die sich ergebende Qualität eines Bieres haben. Die für ein Bier qualitätsentscheidenden Malzmerkmale werden wesentlich durch den Mälzungsprozess bestimmt. Daher ist es wichtig be- stimmte Mälzungsparameter einzuhalten und die Malzqualität zu überprüfen .

1.1 Herstellung des Malzes

Der Mälzungsprozess kann in drei Prozessabschnitte unterteilt werden, das Weichen, Keimen und Darren. Beim Weichen wird eine schnelle und homogene Wasseraufnahme der Gerste angestrebt und die Keimung der Gerste eingeleitet. Dazu wird die so ge ^¬ nannte Weiche (Weichgefäß) zwei bis dreimal für einige Stun ^¬ den geflutet (Nassweiche) . Zwischen den Nassweichen wird die Gerste ausgiebig belüftet (Luftrast) , um eine ausreichende Sauerstoff ersorgung der Gerste zu gewährleisten und das durch die Keimung entstehende Kohlendioxid abzuführen. Die durch das Weichen hervorgerufene Wasseraufnahme der Gerste wird im Wesentlichen durch den Luftdurchsatz während der Luftrast und die Temperaturen des Weichwassers bzw. der Luft (10 - 17°C) bestimmt. Ebenso ist das Verhältnis der Nasswei ^¬ che- zur Luftrastdauer (z.B. 1:2,5 - 1:4,5) für die Wasseraufnahme von entscheidender Bedeutung

(z.B. 4 h NW / 20 h LR / 3 h NW) . Ist ein Weichgrad von

36 - 38 % erreicht wird das Keimgut entweder nass oder tro ^¬ cken in den Keimkasten ausgeweicht und auf der Horde bis zu einer Höhe von 1 - 1,30 m mittels Schneckenwendern verteilt. Zur Einstellung des angestrebten Weichgrades von 40 - 48 % wird das so genannte Grünmalz in den ersten zwei Keimtagen mit Wasser besprüht.

Ziele des Keimens sind möglichst hohe Enzymaktivitäten zu entwickeln, den Extrakt durch den Abbau der Hüllsubstanzen der Stärkekörner (Gummistoffe) freizulegen und einen definierten Eiweißabbau zu erreichen. Dabei soll das Wachstum möglichst gering gehalten werden, um möglichst wenig Extrakt ^¬ verluste zu haben. Im Allgemeinen führt ein höherer Weichgrad zu gesteigerten Enzymaktivitäten, wodurch eine bessere cytolytische Lösung (Zellwandlösung) und eine verstärkter Eiweißabbau in der Gerste bzw. im Malz erreicht wird. Dadurch werden die Kei- mungsvorgänge beschleunigt, was sich in einem erhöhten Mäl- zungsschwand widerspiegelt. Entsprechend kann durch höhere Weichgrade die Keimdauer verkürzt werden [29] .

Die Keimdauer liegt normalerweise zwischen 4 und 7 Keimtagen. Die Festlegung der Keimdauer ist ein Kompromiss zwischen der angestrebten Malzqualität und der Minimierung der Produktionskosten und Mälzungsschwände durch das Wachstum. Während der Keimung muss das Grünmalz mit temperierter und 100 % befeuchteter Luft belüftet werden, um eine ausreichende Sauer ^¬ stoffVersorgung bzw. Kohlendioxidentfernung zu gewährleisten und die durch Atmung entstehende Wärme abzuleiten. Zur Unterstützung der Belüftung und zur Vermeidung von Klumpenbildung durch das Zusammenwachsen der Wurzelkeime wird das Keimgut anfangs einmal und ab dem dritten Keimtag dreimal täglich mit Hilfe von Schneckenwendern gewendet. Die Parameter der Kei- mung sind die Temperatur des Keimgutes, die Keimdauer, der Weichgrad des Grünmalzes, die Häufigkeit des Wendens, der Luftdurchsatz und der definierte Anteil der Rückluft zur An ^¬ reicherung des C0 ₂ -Gehaltes im Keimgut. Mittels der Anreiche ^¬ rung des C02~Gehaltes in der Zuluft kann das Wachstum zum vorgesehenen Ende der Keimung gehemmt werden. Zum Abbruch der Keimung und um das Malz haltbar zu machen ist ein zusätzlicher Trocknungsschritt, das Darren, erforderlich. Das Darren kann in zwei Phasen unterteilt werden. In der ersten Phase, der Schwelkphase, wird das Grünmalz zur Schonung der Enzyme bei niedrigen Temperaturen (50 - 65°C) bis zu einem Wasserge ^¬ halt von 10 - 14 % vorgetrocknet. Sobald die Temperatur der Abluft über dem Keimgut ansteigt („Durchbruch"), wird die Temperatur der Zuluft abhängig vom Malztyp auf 80 - 110 °C er- höht und das Malz bei erreichter Abdarrtemperatur für

3 - 5 Stunden abgedarrt. Während der Darrphase werden ver ^¬ schiedenste Aroma- und Farbkomponenten durch StoffUmwandlungen (Maillard-Reaktionen, Karamellisierung etc.) gebildet, die Enzyme vorübergehend inaktiviert und der Wassergehalt auf 4 - 5 % gesenkt. Zu den Darrparametern gehören die Höhe der Schwelk- und Abdarrtemperaturen, der Temperaturverlauf, der Luftdurchsatz und das Verhältnis der Zu- und Umluft. Damit die Mälzereien mit möglichst wenig Energie- und Wasser- verbrauch gute Malze bei kurzen Belegungszeiten der Betriebsanlagen herstellen können, ist die Technologie des Mälzens im Laufe der Jahrzehnte weitestgehend optimiert worden. Dadurch war es möglich die steigenden Qualitätsansprüche der Braue ^¬ reien erfüllen zu können [12, 20] . 1.2 Einfluss des Sauerstoffgehaltes beim Mälzen auf die Malzqualität

Generell findet man in der Literatur, dass eine Belüftung beim Weichen sowohl in den Nassweichen als auch in den Luftrasten zu einer schnelleren Ankeimung und aber nach der Kei- mung nur geringfügig zu einer höheren Malzlösung führt.

[30 ,31, 32]

Nach Kretschmer et al . [10] bewirkt eine Sauerstoffreduzie ^¬ rung beim Keimen (Zuluft mit Luft, Stickstoff oder reinem Sauerstoff) neben der Reduzierung des Mälzungsschwandes, dem Absenken des Eiweißlösungsgrades, ein Ansteigen der Rohfett ^¬ gehalte bei gleichzeitiger Erhöhung der LOX-Aktivitäten und eine Verbesserung der Geschmacksstabilität der Biere. Eine Sauerstoffreduzierung beim Schwelken bewirkt neben einer Erhöhung der VZ 45°C hellere Würzefarben. 1.3 Aktivierung von Sauerstoff

Beim Mälzungsprozess, z.B. beim Belüften des Weichgutes und den hohen Luftdurchsatz beim Keimen und Darren, wird das Produkt ständig mit viel molekularem Sauerstoff umströmt. Viele der während des Mälzens stattfindenden Oxidationsprozesse werden durch aktivierte Sauerstoffformen initiiert. D.h. der relativ stabile molekulare Sauerstoff muss erst aktiviert werden, bevor er mit Malzinhaltstoffen reagieren kann. Diese Aktivierung ist temperaturabhängig und erfolgt über verschie- dene Zwischenstufen bis hin zum sehr reaktiven Hydroxylradi- kal, wobei diese Zwischenstufen selbst ebenfalls schon reak ^¬ tiv sind. Man spricht von den so genannten Reactive Oxygen Species (ROS: 0 ₂ ^* , 0 ₂ ² , H0 ₂ ^" , H ₂ 0 ₂ ) . [1, 3, 11, 15, 27]. Das bei der Sauerstoffaktivierung gebildete Wasserstoffpero- xid H ₂ 0 ₂ wird durch im Malz und Weichwasser vorhandene Metal ^¬ lionen (z.B. Fe ²⁺ , Fe ³⁺ , Cu ⁺ ) katalytisiert in ein Hydroxylion und ein sehr reaktives Hydroxylradikal gespalten, das unspe ^¬ zifisch mit Malzinhaltsstoffen wie organische Säuren, Proteine, phenolische Verbindungen etc. reagiert [10, 13, 14] . In Figur 1 sind die beiden Mechanismen der Fenton- und Haber-

Weiss-Reaktion, die für die katalytischen Reaktionen verantwortlich sind, dargestellt [9].

1.4 Enzyme zum Schutz vor aktivierten Sauerstoff

Für den Schutz vor aktivierten Sauerstoffspezies sind in Roh- frucht bzw. Getreide mehrere Enzyme vorhanden. Die Wichtigs ^¬ ten sind im Folgenden aufgelistet: Superoxiddismutase

(SOD) [7, 22], Katalase [2, 7, 23], Peroxidase [20, 21, 22], Polyphenoloxidase [2, 32, 36], Lipoxygenase (LOX)

[1, 16, 17, 18, 19, 24, 25] . 1.4.0 Antioxidative Gersten- und MalzinhaltsStoffe

Des Weiteren sind in Gerste bereits viele antioxidativ wirkende Substanzen, wie Polyphenole [2, 6, 8], Gluthathion [2], Vitamine z.B. Ascorbinsäure und Vitamin E [2], etc. vorhan- den. Weitere entstehen während des Mälzungsprozesses z.B. durch die Maillardreaktionen [26].

Nach Bright et al . [3] kann ein Antioxidans generell als Sub ^¬ stanz, die oxidative Reaktionen inhibiert, definiert werden. Antioxidantien haben verschiedenste Wirkungsweisen. Sie fan- gen molekularen Sauerstoff oder aktivierte Sauerstoffspezies ab, wirken als Reduktionsmittel durch Abgabe von Protonen, die direkt mit Sauerstoff reagieren, oder binden katalytisch wirkende Metallionen durch Chelatbildung [5, 15].

1.4.1 Polyphenole Ein Großteil (~ 80 %) der Polyphenole im Bier stammen aus dem Malz. Sie sind nach Goupy et al . [13, 14] bekannt für ihre reduzierende Wirkung, das Verhindern der Autoxidation durch die Reaktion mit Peroxyradikalen und die Bindung von prooxi- dativ wirkenden Metallionen. Phenolsäuren und Flavonoide sind nach Bamforth et al . [2] in der Lage aufgrund ihres konju ^¬ gierten Doppelbindungssystems durch Elektronenabgabe bestimm ^¬ te Verbindungen zu reduzieren und effektiv Singulettsau- erstoff, Superoxidanionen und Hydroxylradikale abzufangen. Außerdem sind sie Substrat für die Polyphenoloxidasen und Pe- roxidasen und somit auch indirekt an der enzymatischen Verhinderung der Radikalbildung beteiligt [2, 6, 8] .

Nach Woffenden et al . [26] kondensiert ein Teil der oxidier- ten Polyphenole durch die hohen Temperaturen beim Darren, was zu einer höheren antioxidativen Aktivität durch eine erleich- terte Fähigkeit der Moleküle zur Protonenabspaltung und zu einer vermehrten Bindung von Metallionen führt. 1.4.2 Melanoidine und Reduktone

Melanoidine und Reduktone sind antioxidativ wirkende Produkte der Maillard-Reaktion (Nicht-Enzymatische Bräunungsreaktion) , die besonders bei hohen Temperaturen während des Darrprozes- ses und der Würzekochung im Brauprozess entstehen. Die Parameter Wassergehalt beim Darren, Darrtemperatur und -dauer, etc. haben einen direkten Einfluss auf die durch die Mail ^¬ lard-Reaktion entstehenden reduzierenden Substanzen [12]. Maillard-Reaktionen sind Reaktionen von einfachen Zuckern mit Aminosäuren oder kleinen Peptiden zu N-Substituierten Glyco- sylaminen, die zu Amadori- oder Heyns-Produkten umgelagert werden. Die letztgenannten Produkte bilden die Ausgangssubstanzen für eine Reihe von weiteren Reaktionen, die zu Farbpigmenten (Melanoidine) , Reduktonen, Carbonylverbindungen, Röstaromen etc. führen [5, 15] .

Wolffenden et al . [26] und Coghe et al . [4] haben in ihren Untersuchungen herausgefunden, dass die Reduktions- und Radikalfängerfähigkeit der Reduktone und Melanoidine umso höher sind, je höher die Darrtemperatur und je niedriger die rela- tive Luftfeuchtigkeit der Zuluft ist. Nach Forster [9] zeigen Dimethylhydroxyfuranone die stärkste antioxidative Aktivität, gefolgt von Oxazolen und schließlich Thiazolen.

Melanoidine sind in der Lage die Sauerstoffspezies Superoxid- anion, Peroxidanion, und Hydroxylradikale und Peroxylradikale (ROO ^* ) abzufangen [2, 15] .

Neuere Untersuchungen haben jedoch aufgezeigt, dass bestimmte Maillard Intermediärprodukte mit Reduktone, /endiolstruktur die im Verlauf der Mälzung hauptsächlich beim Darren entstehen, aufgrund ihrer stark reduzierenden Eigenschaften gegen- über Metallionen - im speziellen Eisenionen - die Sauerstoffaktivierung und die prooxidative wirkende Radikalgenerierung über das Fenton-/Haber-Weiss Reaktionssystem beschleunigen. Bei diesen Reaktionsmechanismen kommen den reduzierten Metal- lionen aufgrund ihrer aktivierenden und katalytischen Wirkung eine besondere Rolle zu, da ihre prooxidativen Eigenschaften gefördert werden und dadurch die oxidative Geschmackstabili ^¬ tät von Lebensmitteln bzw. Getränken stark herabsetzen

[28, 29] .

1.4.3 Chelatkomplexbildner

Auch Metallkomplexbildner können als indirekte Antioxidantien fungieren, weil sie durch die Bildung von Metallchelaten metallische Katalysatoren wie Eisen oder Kupfer binden, so dass diese nicht mehr zur Sauerstoffaktivierung über das Fenton- Reaktionssystem oder die Haber-Weiss-Reaktion zur Verfügung stehen. Dazu gehören z.B. auch die Polyphenole. Nach Bam- forth et al . [2] kommen im Malz weitere chelatkomplexbildende Substanzen vor. Zum Beispiel sagt man der Aminosäure Glycin, sowie auch der Phytinsäure, als substantieller Bestandteil im Malz, eine gute Affinität zu Kupferionen nach. Ebenso sind einige Melanoidine in der Lage Metallionen als Chelatkomplex zu binden [2, 15] .

1.4.4 Reduzierung von prooxidativ wirkenden Metallionen - Erfindung

Zur Herabsetzung der prooxidativ wirkenden Metallionenkonzentrationen (insbesondere Eisen) im Brauprozess werden heut ^¬ zutage in vielen Brauereien Ionenaustauscher bei der Brauwasseraufbereitung eingesetzt. Des Weiteren wird versucht den Eiseneintrag durch die Rohstoffe (Malz, hopfen) und bei der Bierfiltration durch das Filterhilfsmittel Kieselgur möglichst gering zu halten. Es gehörte zum Stand der Technik bei der Bierfiltration möglichst eisenarme Kieselguren zu verwenden oder durch alternative Filtrationsmethoden wie z.B. Memb- ranfiltration, Crosspure®-Filtration den Eiseneintrag bei der herabzusetzen. Zusätzlich wurden neue Filterhilfsmittel wie z.B. Divergan-HM® entwickelt die in Lage sind gelöste Eiseni- onen zu binden. Neben den nachgewiesenen negativen Produkteigenschaften wie z.B. eine pH-Wert-Erhöhung bei Divergan-HM® Einsatz sind insbesondere die relativ hohen Kosten bei den alternativen Filtrationsmethoden hervorzuheben.

Während die mittlerweile vielzähligen Möglichkeiten der Redu ^¬ zierung des Metallioneneintrags durch die Filtration erst zum Ende des Brauprozesses einsetzen ist der Metallioneneintrag durch die Rohstoffe im gesamten Brauprozess prooxidativ wirksam.

Trotz dem heutigen Einsatz von metallionenreduzierten Pflanzenschutzmittel ist der Metallionengehalt der Rohstoffe und deren Eintrag im Brauprozess stark von Düngung und regionalen Bodengegebenheiten abhängig. Für die Landwirtschaft bestehen daher nur begrenzte Möglichkeiten den Metallionengehalt in den Rohstoffen Malz und Hopfen zu beeinflussen respektive herabzusetzen.

1.5 Ergebnisse

In den Laboratorien und der Forschungsbrauerei des Fachbe ^¬ reichs Brauwesen wurden diverse Untersuchungen zum Eintrag von Schallwellen im Mälzungsprozess mittels eines Zementrütt ^¬ lers durchgeführt. Hierbei wurden die Verhaltensweisen von zwei Gersten untersucht, wobei bei einer Gerste (Marthe 2009) nur in der ersten Nassweiche und bei der anderen Gerste

(Tipple 2010) in beiden Nassweichen eine Schallfrequenz von 200 Hz eingetragen wurde. Im Vergleich wurde jeweils eine

Kontrollweiche ohne Rütteln durchgeführt. Geweicht wurde in Fermentern mit 3,2 kg Gerste und 9,2 L auf 19°C temperiertes Wasser. Im Anschluss an die Nassweiche wurde das Weichgut in eine Schmidt-Seeger- Pilotmälzerei für die weitere Vermälzung verbracht, wobei der Gerste Tipple zwischenzeitlich für die 2. Nassweiche, gerüttelt bzw. ungerüttelt, wieder entnommen worden ist. Das Rütteln wurde in der 1. dreistündigen Nass- weiche halbstündlich und in der 2. dreistündigen Nassweiche erst nach 1,5 Stunden halbstündlich erst zu- und dann wieder abgeschaltet. In der 2. Nassweiche wurde erst später gerüt ^¬ telt, um der Gerste die Möglichkeit zu geben den für ein gu- tes Ankeimen notwendigen gelöste Sauerstoff aufzunehmen

[30, 31], da durch das Rütteln die vorhandenen gelösten Gase ausgetrieben werden [33].

Bei den resultierenden Weichwässern stand die Analytik des Eisengehaltes und der CSB-Werte (nach Fa. Hach) im Vorder- grund. Die eingesetzten Gersten wurden im Hinblick auf die Wasseraufnahme, die Ankeimung sowie ihre Keimenergie unter ^¬ sucht und im Anschluss an die Mälzung die Qualität der Malze anhand konventioneller Malzanalysen gegenübergestellt. Zu ^¬ sätzlich wurden die Eisengehalte in den Malzen und den produ- zierten Bierwürzen bestimmt und auf ihre oxidativen Eigenschaften mittels Elektronenspin-Resonanz-Spektroskopie (ESR) untersucht [11, 34].

1.5.1 Weichwasseranalysen (CSB und Eisen)

Zur Veranschaulichung der Einflüsse von Schallwellen (20 - 200 Hz) auf die Weichwässer sind in Figur 2 die Weichwasser- überstände in den Fermenten zum Ende des Weichens gegenübergestellt.

Die Ergebnisse der CSB-Bestimmungen der Weichwässer sind in der Tabelle 1 zusammengefasst .

Tabelle 1: CSB-Analysen der Weichwässer

nach 2- theoretische Ge ^¬ stündiger Mittelwert

Gerste Versuch samtbelastung CSB

Luftrast [mg/L]

[mg/L]

nach der:

1. Nasswei ^¬

Marthe unbeschallt 1180

che 1. Nasswei ^¬ beschallt 1828

che

1. Nasswei ^¬ unbeschallt 1342

che

1. Nasswei ^¬ beschallt 2148

che

Tipple

2. Nasswei ^¬ unbeschallt 507 1849

che

2. Nasswei ^¬ beschallt 1216 3364

che

Die CSB-Analysen zeigten auf, dass Gerste Marthe mit der ge ^¬ ringeren Belastung im Weichwasser etwas sauberer war. Generell verursachen die Schallwellen eine Mehrverschmutzung des Weichwassers und damit eine gesteigerte Reinigung der Gerste um 34 - 37 % bei der ersten Nassweiche. Bei der zweiten Nassweiche (nur Tipple) war trotz vorheriger ergiebigerer Reinigung wieder mehr Verschmutzung beim gerüttelten Versuch. Betrachtet man die gesamte Verschmutzung beider Weichwässer, zeigt sich, dass bei der zweifach gerüttelten Weiche im Vergleich zur Referenz fast doppelt so viel Dreck von der Gerste entfernt wurde.

Bei der Eisenmessungen der Weichwässer von der Gerste Tipple in Tabelle 2 ergaben sich noch drastischere Unterschiede:

Tabelle 2: Vergleich der Eisengehalte der Weichwässer der

Gerste Tipple

Eisen im Weich¬

Eisen im Eiseneintrag

Gesamt wasser (abzüg ^¬

Probe Weichwasser [mg Eisen pro

[mg/L] lich Eisen aus

[mg/L] kg Gerste] dem Wasser) [mg]

1. NW unbe ^¬

0, 255

schallt 2. NW unbe-

0, 064 0,319 2,5 0,79

schallt

1. NW be¬

2,13

schallt

2. NW be¬

0,858 2 , 988 27, 1 84,6

schallt

Wasser (ohne Gerste 0,044

beschallt)

Der Eiseneintrag ins Weichwasser konnte eindeutig auf die Gerste zurückgeführt werden, weil im Blindversuch ohne Gerste gegenüber den Eisengehalten im verwendeten Leitungswasser (</= 0,03 mg/L) kaum Eisen eingetragen worden ist. Die Analy- se der Weichwässer der Gerste Tipple zeigen deutlich auf, dass durch den Einsatz von Schallwellen etwa der zehnfache Eisengehalt aus der Gerste gewaschen wurde.

1.5.2 Wasseraufnähme

Mittels Wiegemethode wurden die Wassergehalte zwei Stunden nach den Nassweichen ermittelt. Die Ergebnisse sind in der Figur 4 zusammengefasst .

Durch den Einsatz von Schallwellen konnte die Wasseraufnahme gesteigert werden. Die Wassergehalte (Weichgrade) waren nach der ersten Nassweiche um 0,8 - 1,5 % und nach der

2. Nassweiche (nur bei Tipple) um 2 % erhöht. Auf Basis der Ergebnisse der Wasseraufnahme kann der beschallten Gerste ein besseres Ankeimverhalten und eine bessere Malzlösung unterstellt werden. 1.5.3 Ankeimung

Zur Überprüfung der Ankeimgeschwindigkeit wurden nach 24, 30 und 48 Stunden die Anteile der gespitzten - das heißt ein Wurzelkeim wird sichtbar - , die gegabelten - das heißt zwei Wurzelkeime werden sichtbar - und die nicht gekeimten Anteile der Gerstenkörner ausgezählt. Die Ergebnisse sind in der Fi ^¬ gur 5 dargestellt.

Durch den Einsatz von Schallwellen beim Weichen konnte die Ankeimung bei beiden Gersten deutlich beschleunigt werden. Dies ist ein Hinweis auf eine zu erwartende bessere Lösung der Malze bzw. die Möglichkeit einer Keimzeitverkürzung. Basierend auf einem gleichmäßigeren Einsetzen der Keimung konnte zusätzlich eine höhere Homogenität bei den beschallten Malzen aufgezeigt werden.

1.5.4 Malzanalysen

Anhand der durchgeführten Malzanalysen konnte trotz schnellerer Ankeimung keine signifikante Steigerung der Malzqualität aufgezeigt werden. Die beiden Vergleichsmalze unterscheiden sich lediglich in der Farbe und Kochfarbe, wobei die be ^¬ schallten Malze eine geringere Farbe aufweisen. Die niedrige ^¬ ren Kochfarbwerte geben einen ersten Hinweis auf eine höhere oxidative Würzestabilität, die letztendlich zu einer höheren oxidativen Stabilität der Biere führen sollte. Allerdings wa- ren bei den durchgeführten Untersuchungen der beschallten

Malze die Enzymaktivitäten der Protease und ß-Glukanase ge ^¬ ringer als bei den unbeschallten Malzen. Aus der Gesamtbetrachtung der Analysenergebnisse erscheint es wahrscheinlich, dass sich die negativen Effekte der Schallwellen auf die En- zymaktivitäten und der positive Effekt auf die Ankeimung im fertigen Malz aufheben, so dass sich die resultierende Malzqualität bisher nicht signifikant unterscheidet. Die Ergeb ^¬ nisse geben aber auch erste Hinweise darauf, dass es Mittels einer Optimierung der Schallwellenfrequenz, der Dauer und des genauen Zeitpunktes möglich sein wird die Malzlösung und allgemeine Malzqualität zu steigern. Aufgrund des Schwerpunkts bei den Einflüssen zur Verbesserung der oxidativen Bierstabi- lität wurde auf die Darstellung der Ergebnisse der allgemei ^¬ nen Malzanalysen verzichtet.

1.5.5 Mikrobiologische Belastung der Malze

Die fertigen Malze wurden zusätzlich auf ihre mikrobiologi- sehe Belastung hin untersucht. Dazu wurden die Gesamtkeimzahlen mittels Würze und Standard 1-Agar, die Belastung mit co- liformen Keimen mit einem Chromocult-Agar und die Schimmelpilzbelastung mittels CPD-Agar bestimmt. Anhand der im Fol ^¬ genden dargestellten Diagramme lässt sich erkennen, dass der starke Reinigungseffekt , der durch die CSB-Bestimmungen be ^¬ reits dargestellt wurde, bei der stärker belasteten Gerste Tipple zu einer deutlichen Reduzierung der Keimbelastung führte. Hierbei scheint entweder die Schallwellenanwendung während der zweiten Nassweiche deutlich effektiver zu sein oder die von vorne herein geringer Belastung der Gerste Mart- he konnte durch das Weichen nicht mehr signifikant reduziert werden, so dass sich die Belastung durch das Wachstum der Mikroorganismen während der Keimung wieder angeglichen hat. Dennoch konnte bei der Untersuchung der Schimmelbelastung der Gerste Marthe ebenfalls eine signifikante Reduzierung aufge ^¬ zeigt werden. Der stärkere Reinigungseffekt und die damit verbundene Herabsetzung der mikrobiellen Belastung kann als positiver Einfluss der Schallwellenbehandlung eingestuft und hervorgehoben werden. 1.5.6 Eisenmessungen (Gerste, Malz und Würze)

Bei den Versuchen unter Einsatz von Schallwellen in der Nassweiche konnte im Vergleich zur Referenzprobe und dem aus ^¬ schließlichen Einsatz des Rüttlers ohne Gerste ein erhebli ^¬ cher Eiseneintrag ins Weichwasser nachgewiesen werden, so dass eine entsprechende Verringerung des Eisengehaltes in der beschallten Gerste zu erwarten ist. Zur Verifizierung der vermuteten Gegebenheit wurden die Gerste Tipple und die mit und ohne Schallanwendung resultierenden Malze aufgeschlossen und der Gesamteisengehalt bestimmt. In Tabelle 3 sind die entsprechenden Eisengehalte gegenübergestellt.

Tabelle 3: Berechnung und Vergleich der Eisengehalte in der

Gerste und den Malzen

Differenz 18,8 18,6 14,9 16,1

[%] Anhand der Ergebnisse konnte ein deutliches Auswaschen des Eisens durch Schallwelleneinsatz in der Nassweiche nachgewiesen werden. Zur Berücksichtigung der unterschiedlichen Wassergehalte in Gerste und Malz wurden die analysierten Eisen- gehalte zunächst auf die Trockensubstanz der Proben berechnet. Im Weiteren war es notwendig den Gewichtsverlust durch den Mälzungsschwand zu berücksichtigen, um die Werte verglei ^¬ chen zu können bzw. ein prozentuales Auswaschen berechnen zu können. Aus der Differenz der Eisengehalte beider Malze ergab sich rechnerisch eine zusätzliche Eisengehaltsreduzierung von etwa 15 %. Anwendungsrelevant betrachtet ist der Vergleich der beiden Malze, wobei eine Verringerung des Eisengehaltes durch die Schallwellen um die 18,8 % bezogen auf das Malz und 18,6 % bezogen auf die Malz-Trockensubstanz aufgezeigt werden konnte.

Zusätzlich wurden die Eisengehalte der Malzproben theoretisch mittels der Werte zum Eiseneintrag in die Weichwässer (siehe Tab. 2) berechnet. Hierbei mussten die Differenz des Eisenge ^¬ haltes der Gerste und des Eintrags in das Weichwasser gebil- det, wie bei der „tatsächlichen" Betrachtung im Nachhinein auf die Trockensubstanz bezogen und die Werte ebenfalls um den Mälzungsschwand korrigiert werden. Es ergab sich eine theoretische Reduzierung des Eisengehaltes um etwa 16 %. Da ^¬ mit konnte eine Kontrollrechnung aufgestellt werden, die das tatsächlich über die Eisenbestimmung in den Malzen ermittelte Ergebnis bestätigt hat.

Aufgrund der großen Relevanz der Eisengehalte in Getränken bezüglich der Geschmackstabilität wurden aus den Malzen beider Gersten Würzen hergestellt und auf ihren Eisengehalt hin untersucht. Die Ergebnisse sind in der Figur 7 dargestellt. Die Eisengehalte sind aufgrund der Ausfällung von Eiweiß ge ^¬ nerell vor der Würzekochung etwas höher, da Eisen teilweise mit dem Eiweiß entfernt wird. Beim Vergleich der Eisengehalte der gekochten Würzen finden sich bei dem Versuch Marthe 9,4 % und beim Versuch Tipple, bei dem in beiden Nassweichen beschallt worden ist, 16,4 % weniger Eisen wieder. Letztere Differenz stimmt demnach auch annähernd mit der in den Tipp- le-Malzen ermittelten Eisengehalts- Differenz von 14,9 % überein, so dass hiermit ein weiterer Hinweis auf die enorme Re- duzierung des Eisengehaltes gegeben ist.

1.5.7 Oxidative Stabilität mittels ESR-Messungen

Aufgrund der unterschiedlichen Eisengehalte der aus den be ^¬ schallten und unbeschallten Malzen produzierten Würzen wird eine Verbesserung der oxidativen Geschmacksstabilität erwar- tet.

1.6 Zusammenfassung

Generell verursachen die Schallwellen eine Mehrverschmutzung des Weichwassers und damit eine gesteigerte Reinigung der Gerste um 34 - 37 % bei der ersten Nassweiche. Beim wieder- holten Einsatz von Schallwellen in der zweiten Nassweiche kann die Reinigung auf bis zu 50 % gesteigert werden.

Dies konnte mit den mikrobiologischen Untersuchungen bestätigt werden. Durch zwei beschallte Nassweichen konnten die Keime (Bakterien und Schimmelpilze) auf dem fertigen Malz um etwa 50 % reduziert werden.

Außerdem konnte um etwa 15 % mehr Eisen aus der Gerste „gewa ^¬ schen" werden, was nachweislich zu einer gleichwertigen Reduzierung des Eisengehaltes in aus den Malzen produzierten Würzen führte. Technologisch betrachtet ist der Vorteil eines geringeren Eisengehaltes in Getränken eine erhöhte oxidative Geschmackstabilität. Dies wird im Späteren mittels ESR- Messungen untersucht. Ein zusätzlicher Vorteil der Eisenredu- zierung könnte in Zukunft bei der Produktion von dunklen Malzen zum Tragen kommen. Bei Röstprozessen von Gersten und Malzen kommt es nach eigenen neusten Untersuchungen zu einer Freisetzung von Eisen, das zu einem erheblichen Nachteil beim Einsatz von dunklen Malzen bezüglich der oxidativen Geschmackstabilität führt. Der Einsatz von Schallwellen könnte damit nicht nur für die Produktion von normalem Malz, sondern auch insbesondere für die Produktion von Spezialmalzen z.B. Farbmalz zum Einsatz kommen.

Anhand der Prozesskontrolle während der Mälzung konnte eine um 2 % höhere Wasseraufnahme bei den beschallten Gersten auf ^¬ gezeigt werden. Eine geringere mikrobiologische Belastung und der höhere Wassergehalt führten zu einer schnelleren und ho ^¬ mogeneren Ankeimung der Gerste, die jedoch nicht anhand von Malzanalysen bestätigt werden konnte. Die Beschallung resultierte im fertigen Malz zu keinen signifikanten Verbesserungen in der Malzqualität. In weitergehenden Untersuchungen soll das Verfahren in Zukunft weiter optimiert werden. B) Zweites Ausführungsbeispiel der Erfindung:

Auch bei dem zweiten Ausführungsbeispiel der Erfindung geht es um den Einsatz von Schallwellen mittels Zementrüttler bzw. eines Innenvibrators im Mälzungsprozess zur Verbesserung der Malzqualität.

Einsatz von Schallwellen zur Verbesserung der Malzqualität

Es ist hinreichend bekannt, dass die eingesetzten Rohstoffe Malz, Hopfen und Brauwasser einen entscheidenden Einfluss auf die sich ergebende Qualität eines Bieres haben. Die für ein Bier qualitätsentscheidenden Malzmerkmale werden wesentlich durch den Mälzungsprozess bestimmt. Daher ist es wichtig be ^¬ stimmte Mälzungsparameter einzuhalten und die Malzqualität zu überprüfen . 1 Herstellung des Malzes

Der Mälzungsprozess kann in drei Prozessabschnitte unterteilt werden, das Weichen, Keimen und Darren. Beim Weichen wird eine schnelle und homogene Wasseraufnahme der Gerste angestrebt und die Keimung der Gerste eingeleitet. Dazu wird die so ge ^¬ nannte Weiche (Weichgefäß) zwei bis dreimal für einige Stun ^¬ den geflutet (Nassweiche) . Zwischen den Nassweichen wird die Gerste ausgiebig belüftet (Luftrast) , um eine ausreichende Sauerstoff ersorgung der Gerste zu gewährleisten und das durch die Keimung entstehende Kohlendioxid abzuführen. Die durch das Weichen hervorgerufene Wasseraufnahme der Gerste wird im Wesentlichen durch den Luftdurchsatz während der Luftrast und die Temperaturen des Weichwassers bzw. der Luft (10 - 17°C) bestimmt. Ebenso ist das Verhältnis der Nasswei- che- zur Luftrastdauer (z.B. 1:2,5 - 1:4,5) für die Wasseraufnahme von entscheidender Bedeutung

(z.B. 4 h NW / 20 h LR / 3 h NW) . Ist ein Weichgrad von

36 - 38 % erreicht wird das Keimgut entweder nass oder tro ^¬ cken in den Keimkasten ausgeweicht und auf der Horde bis zu einer Höhe von 1 - 1,30 m mittels Schneckenwendern verteilt. Zur Einstellung des angestrebten Weichgrades von 40 - 48 % wird das so genannte Grünmalz in den ersten zwei Keimtagen mit Wasser besprüht.

Ziele des Keimens sind möglichst hohe Enzymaktivitäten zu entwickeln, den Extrakt durch den Abbau der Hüllsubstanzen der Stärkekörner (Gummistoffe) freizulegen und einen definierten Eiweißabbau zu erreichen. Dabei soll das Wachstum möglichst gering gehalten werden, um möglichst wenig Extraktverluste zu haben.

Im Allgemeinen führt ein höherer Weichgrad zu gesteigerten Enzymaktivitäten, wodurch eine bessere cytolytische Lösung (Zellwandlösung) und eine verstärkter Eiweißabbau in der Gerste bzw. im Malz erreicht wird. Dadurch werden die Kei- mungsvorgänge beschleunigt, was sich in einem erhöhten Mäl- zungsschwand widerspiegelt. Entsprechend kann durch höhere Weichgrade die Keimdauer verkürzt werden [29] .

Die Keimdauer liegt normalerweise zwischen 4 und 7 Keimtagen. Die Festlegung der Keimdauer ist ein Kompromiss zwischen der angestrebten Malzqualität und der Minimierung der Produktionskosten und Mälzungsschwände durch das Wachstum. Während der Keimung muss das Grünmalz mit temperierter und 100 % befeuchteter Luft belüftet werden, um eine ausreichende Sauer- stoff ersorgung bzw. Kohlendioxidentfernung zu gewährleisten und die durch Atmung entstehende Wärme abzuleiten. Zur Unterstützung der Belüftung und zur Vermeidung von Klumpenbildung durch das Zusammenwachsen der Wurzelkeime wird das Keimgut anfangs einmal und ab dem dritten Keimtag dreimal täglich mit Hilfe von Schneckenwendern gewendet. Die Parameter der Keimung sind die Temperatur des Keimgutes, die Keimdauer, der Weichgrad des Grünmalzes, die Häufigkeit des Wendens, der Luftdurchsatz und der definierte Anteil der Rückluft zur An ^¬ reicherung des C0 ₂ -Gehaltes im Keimgut. Mittels der Anreiche- rung des C0 ₂ -Gehaltes in der Zuluft kann das Wachstum zum vorgesehenen Ende der Keimung gehemmt werden. Zum Abbruch der Keimung und um das Malz haltbar zu machen ist ein zusätzlicher Trocknungsschritt, das Darren, erforderlich. Das Darren kann in zwei Phasen unterteilt werden. In der ersten Phase, der Schwelkphase, wird das Grünmalz zur Schonung der Enzyme bei niedrigen Temperaturen (50 - 65°C) bis zu einem Wasserge ^¬ halt von 10 - 14 % vorgetrocknet. Sobald die Temperatur der Abluft über dem Keimgut ansteigt („Durchbruch"), wird die Temperatur der Zuluft abhängig vom Malztyp auf 80 - 110 °C er- höht und das Malz bei erreichter Abdarrtemperatur für

3 - 5 Stunden abgedarrt. Während der Darrphase werden ver ^¬ schiedenste Aroma- und Farbkomponenten durch StoffUmwandlungen (Maillard-Reaktionen, Karamellisierung etc.) gebildet, die Enzyme vorübergehend inaktiviert und der Wassergehalt auf 4 - 5 % gesenkt. Zu den Darrparametern gehören die Höhe der Schwelk- und Abdarrtemperaturen, der Temperaturverlauf, der Luftdurchsatz und das Verhältnis der Zu- und Umluft. Damit die Mälzereien mit möglichst wenig Energie- und Wasser ^¬ verbrauch gute Malze bei kurzen Belegungszeiten der Betriebsanlagen herstellen können, ist die Technologie des Mälzens ist im Laufe der Jahrzehnte weitestgehend optimiert worden. Dadurch war es möglich die steigenden Qualitätsansprüche der Brauereien erfüllen können [12, 20] .

1.1 Einfluss des Sauerstoffgehaltes beim Mälzens auf die Malzqualität

Generell findet man in der Literatur, dass eine Belüftung beim Weichen sowohl in den Nassweichen als auch in den Luft- rasten zu einer schnelleren Ankeimung und aber nach der Keimung nur geringfügig zu einer höheren Malzlösung führt.

[30 ,31, 32]

Nach Kretschmer et al . [10] bewirkt eine Sauerstoffreduzie ^¬ rung beim Keimen (Zuluft mit Luft, Stickstoff oder reinem Sauerstoff) neben der Reduzierung des Mälzungsschwandes, dem Absenken des Eiweißlösungsgrades, ein Ansteigen der Rohfett ^¬ gehalte bei gleichzeitiger Erhöhung der LOX-Aktivitäten und eine Verbesserung der Geschmacksstabilität der Biere. Eine Sauerstoffreduzierung beim Schwelken bewirkt neben einer Er- höhung der VZ 45°C hellere Würzefarben.

2 Aktivierung von Sauerstoff

Beim Mälzungsprozess, z.B. beim Belüften des Weichgutes und den hohen Luftdurchsatz beim Keimen und Darren, wird das Produkt ständig mit viel molekularem Sauerstoff umströmt. Viele der während des Mälzens stattfindenden Oxidationsprozesse werden durch aktivierte Sauerstoffformen initiiert. D.h. der relativ stabile molekulare Sauerstoff muss erst aktiviert werden, bevor er mit Malzinhaltstoffen reagieren kann. Diese Aktivierung ist temperaturabhängig und erfolgt über verschiedene Zwischenstufen bis hin zum sehr reaktiven Hydroxylradi- kal, wobei diese Zwischenstufen selbst ebenfalls schon reak ^¬ tiv sind. Man spricht von den so genannten Reactive Oxygen Species (ROS: 0' , 0 ₂ ² , H0 ₂ ^" , H ₂ 0 ₂ ) . [1, 3, 11, 15, 27]. Das bei der Sauerstoffaktivierung gebildete Wasserstoffpero ^¬ xid H ₂ 0 ₂ wird durch im Malz und Weichwasser vorhandene Metal- lionen (z.B. Fe ²⁺ , Fe ³⁺ , Cu ⁺ ) katalytisiert in ein Hydroxylion und ein sehr reaktives Hydroxylradikal gespalten, das unspe ^¬ zifisch mit Malzinhaltsstoffen wie organische Säuren, Proteine, phenolische Verbindungen etc. reagiert [10, 13, 14] . In Figur 1 sind die beiden Mechanismen der Fenton- und Haber- Weiss-Reaktion, die für die katalytischen Reaktionen verantwortlich sind, dargestellt [9].

2.1 Enzyme zum Schutz vor aktivierten Sauerstoff

Für den Schutz vor aktivierten Sauerstoffspezies sind in Ge- treide mehrere Enzyme vorhanden. Die Wichtigsten sind im Fol ^¬ genden aufgelistet: Superoxiddismutase (SOD) [7, 22], Katala ^¬ se [2, 7, 23], Peroxidase [20, 21, 22], Polyphenoloxida- se [2, 32, 36], Lipoxygenase (LOX)

[1, 16, 17, 18, 19 24, 25] . Antioxidative Gersten- und MalzinhaltsStoffe

Des Weiteren sind in Gerste bereits viele antioxidativ wirkende Substanzen, wie Polyphenole [2, 6, 8], Gluthathion [2], Vitamine z.B. Ascorbinsäure und Vitamin E [2], etc. vorhan ^¬ den. Weitere entstehen während des Mälzungsprozesses z.B. durch die Maillardreaktionen [26] . Nach Bright et al . [3] kann ein Antioxidans generell als Sub ^¬ stanz, die oxidative Reaktionen inhibiert, definiert werden. Antioxidantien haben verschiedenste Wirkungsweisen. Sie fangen molekularen Sauerstoff oder aktivierte Sauerstoffspezies ab, wirken als Reduktionsmittel durch Abgabe von Protonen, die direkt mit Sauerstoff reagieren, oder binden katalytisch wirkende Metallionen durch Chelatbildung [5, 15].

2.1.1 Polyphenole

Ein Großteil (~ 80 %) der Polyphenole im Bier stammen aus dem Malz. Sie sind nach Goupy et al . [13, 14] bekannt für ihre reduzierende Wirkung, das Verhindern der Autoxidation durch die Reaktion mit Peroxyradikalen und die Bindung von prooxi- dativ wirkenden Metallionen. Phenolsäuren und Flavonoide sind nach Bamforth et al . [2] in der Lage aufgrund ihres konju- gierten Doppelbindungssystems durch Elektronenabgabe bestimm ^¬ te Verbindungen zu reduzieren und effektiv Singulettsau- erstoff, Superoxidanionen und Hydroxylradikale abzufangen. Außerdem sind sie Substrat für die Polyphenoloxidasen und Pe- roxidasen und somit auch indirekt an der enzymatischen Ver- hinderung der Radikalbildung beteiligt [2, 6, 8] .

Nach Woffenden et al . [26] kondensiert ein Teil der oxidier- ten Polyphenole durch die hohen Temperaturen beim Darren, was zu einer höheren antioxidativen Aktivität durch eine erleichterte Fähigkeit der Moleküle zur Protonenabspaltung und zu einer vermehrten Bindung von Metallionen führt.

2.1.2 Melanoidine und Reduktone

Melanoidine und Reduktone sind antioxidativ wirkende Produkte der Maillard-Reaktion (Nicht-Enzymatische Bräunungsreaktion) , die besonders bei hohen Temperaturen während des Darrprozes- ses und der Würzekochung im Brauprozess entstehen. Die Para ^¬ meter Wassergehalt beim Darren, Darrtemperatur und -dauer, etc. haben einen direkten Einfluss auf die durch die Mail- lard-Reaktion entstehenden reduzierenden Substanzen [12]. Maillard-Reaktionen sind Reaktionen von einfachen Zuckern mit Aminosäuren oder kleinen Peptiden zu N-Substituierten Glyco- sylaminen, die zu Amadori- oder Heyns-Produkten umgelagert werden. Die letztgenannten Produkte bilden die Ausgangssubstanzen für eine Reihe von weiteren Reaktionen, die zu Farbpigmenten (Melanoidine) , Reduktonen, Carbonylverbindungen, Röstaromen etc. führen [5, 15] .

Wolffenden et al . [26] und Coghe et al . [4] haben in ihren

Untersuchungen herausgefunden, dass die Reduktions- und Radikalfängerfähigkeit der Reduktone und Melanoidine umso höher sind, je höher die Darrtemperatur und je niedriger die relative Luftfeuchtigkeit der Zuluft ist. Nach Forster [9] zeigen Dimethylhydroxyfuranone die stärkste antioxidative Aktivität, gefolgt von Oxazolen und schließlich Thiazolen.

Melanoidine sind in der Lage die Sauerstoffspezies Superoxid- anion, Peroxidanion, und Hydroxylradikale und Peroxylradikale (ROO ^* ) abzufangen [2, 15]. Neuere Untersuchungen haben jedoch aufgezeigt, dass bestimmte Maillard Intermediärprodukte mit Reduktone, /endiolstruktur die im Verlauf der Mälzung hauptsächlich beim Darren entstehen, aufgrund ihrer stark reduzierenden Eigenschaften gegenüber Metallionen - im speziellen Eisenionen - die Sauerstoff- aktivierung und die prooxidative wirkende Radikalgenerierung über das Fenton-/Haber-Weiss Reaktionssystem beschleunigen. Bei diesen Reaktionsmechanismen kommen den reduzierten Metallionen aufgrund ihrer aktivierenden und katalytischen Wirkung eine besondere Rolle zu, da ihre prooxidativen Eigenschaften gefördert werden und dadurch die oxidative Geschmackstabili ^¬ tät von Lebensmitteln bzw. Getränken stark herabsetzen

[28, 29] . 2.1.3 Chelatkomplexbildner

Auch Metallkomplexbildner können als indirekte Antioxidantien fungieren, weil sie durch die Bildung von Metallchelaten metallische Katalysatoren wie Eisen oder Kupfer binden, so dass diese nicht mehr zur Sauerstoffaktivierung über das Fenton- Reaktionssystem oder die Haber-Weiss-Reaktion zur Verfügung stehen. Dazu gehören z.B. auch die Polyphenole. Nach Bam- forth et al . [2] kommen im Malz weitere chelatkomplexbildende Substanzen vor. Zum Beispiel sagt man der Aminosäure Glycin, sowie auch der Phytinsäure, als substantieller Bestandteil im Malz, eine gute Affinität zu Kupferionen nach. Ebenso sind einige Melanoidine in der Lage Metallionen als Chelatkomplex zu binden [2, 15] .

2.1.4 Reduzierung von prooxidativ wirkenden Metallionen - Erfindung

Zur Herabsetzung der prooxidativ wirkenden Metallionenkonzentrationen (insbesondere Eisen) im Brauprozess werden heut ^¬ zutage in vielen Brauereien Ionenaustauscher bei der Brauwasseraufbereitung eingesetzt. Des Weiteren wird versucht den Eiseneintrag durch die Rohstoffe (Malz, Hopfen) und bei der Bierfiltration durch das Filterhilfsmittel Kieselgur möglichst gering zu halten. Es gehörte zum Stand der Technik bei der Bierfiltration möglichst eisenarme Kieselguren zu verwenden oder durch alternative Filtrationsmethoden wie z.B. Memb- ranfiltration, Crosspure®-Filtration den Eiseneintrag bei der herabzusetzen. Zusätzlich wurden neue Filterhilfsmittel wie z.B. Divergan-HM® entwickelt die in Lage sind gelöste Eiseni ^¬ onen zu binden. Neben den nachgewiesenen negativen Produkteigenschaften wie z.B. eine pH-Wert-Erhöhung bei Divergan-HM® Einsatz sind insbesondere die relativ hohen Kosten bei den alternativen Filtrationsmethoden hervorzuheben. Während die mittlerweile vielzähligen Möglichkeiten der Reduzierung des Metallioneneintrags durch die Filtration erst zum Ende des Brauprozesses einsetzen ist der Metallioneneintrag durch die Rohstoffe im gesamten Brauprozess prooxidativ wirk- sam.

Trotz dem heutigen Einsatz von metallionenreduzierten Pflanzenschutzmittel sind der Metallionengehalt der Rohstoffe und deren Eintrag im Brauprozess stark von Düngung und regionalen Bodengegebenheiten abhängig. Für die Landwirtschaft bestehen daher nur begrenzte Möglichkeiten den Metallionengehalt in den Rohstoffen Malz und Hopfen zu beeinflussen respektive herabzusetzen.

3 Durchführung

In den Laboratorien und der Forschungsbrauerei des Fachbe- reichs Brauwesen wurden diverse Untersuchungen zum Eintrag von Schallwellen im Mälzungsprozess mittels eines Zementrütt ^¬ lers durchgeführt. In Vorversuche, bei denen Gerste mit Fre ^¬ quenzen zwischen 20 und 200 Hz beschallt wurde, konnte eine Verbesserung der Ankeimung und der Wasseraufnahme der Gerste beim Weichen ab einer Schallfrequenz von 100 Hz aufgezeigt werden (Daten nicht dargestellt) .

In einer Versuchsmälzung wurden die Verhaltensweisen von zwei Gersten untersucht, wobei bei einer Gerste (Marthe 2009) nur in der ersten Nassweiche und bei der anderen Gerste (Tipple 2010) in beiden Nassweichen eine Schallfrequenz von 180 Hz eingetragen wurde. Es wurde jeweils eine Kontrollweiche ohne Rütteln/Beschallung durchgeführt. Geweicht wurde in Fermentern mit 3,2 kg Gerste und 9,2 L auf 19 °C temperiertes Was ^¬ ser. Im Anschluss an die erste Nassweiche wurde das Weichgut in eine Schmidt-Seeger-Pilotmälzerei für die weitere Vermäl- zung verbracht, wobei die Proben der Gerste Tipple zwischen ^¬ zeitlich für die zweite Nassweiche, gerüttelt bzw. ungerüt- telt, wieder entnommen worden ist. Hierbei war nur noch die Hälfte der anfänglich 3,2 kg Gerte im Fermenter für die zweite Nassweiche vorhanden, da die andere Hälfte vor der Luft ^¬ rast verworfen wurde. In Figur 8 ist dargestellt, wie schnell der Sauerstoff während der beiden Nassweichen ohne Schallwel ^¬ leneintrag grundsätzlich verbraucht wird.

Während der ersten Nassweiche ist der Sauerstoff erst nach etwa 5 Stunden nahezu vollständig verbraucht, weil sich das Korn noch im Ruhestadium befindet und noch nicht angekeimt ist. In weiteren Versuchen hat sich herausgestellt, dass auf eine Belüftung in der ersten Nassweiche verzichtet werden kann, ohne dass sich eine Verringerung der Malzqualität ergibt. Während der zweiten Nassweiche wird der Sauerstoff in unbelüfteten Weichsystemen in nahezu unter einer Stunde vollständig verbraucht, weil die Ankeimung eingesetzt hat und die Gerste damit eine deutlich gesteigerte Stoffwechselaktivität aufzeigt. Aufgrund dieser grundsätzlichen Gegebenheiten wurde die eingeweichte Gerste in der ersten Versuchsreihe unter Schallwelleneinsatz in der ersten Nassweiche (3 h) halbstündlich und in der zweiten Nassweiche (3 h) erst nach

1,5 Stunden halbstündlich beschallt. In der zweiten Nassweiche wurde erst später gerüttelt, um der Gerste die Möglich ^¬ keit zu geben den für ein gutes Ankeimen notwendigen gelösten Sauerstoff aufzunehmen [30, 31], da durch das Rütteln die vorhandenen gelösten Gase ausgetrieben werden [33].

Zur Untersuchung der Einflüsse des Schallwelleneintrags wurde in einer zweiten Versuchsreihe ausschließlich die Gerste Tipple verwendet und während der Nassweichen in einem Versuch zusätzlich belüftet, um das Ausmaß der Wascheffekte verglei ^¬ chen zu können, da bei Belüftung grundsätzlich bessere Wascheffekte erreicht werden. Des Weiteren sollte überprüft werden ob bei kontinuierlicher Belüftung ein zusätzlicher Schallwel- leneintrag den vorhandenen Sauerstoffgehalt im Weichwasser signifikant beeinflusst. Der Rüttler wurde hier auf die maxi ^¬ mal mögliche Frequenz von 200 Hz anstatt 180 Hz eingestellt und jeweils nur für 10 min pro 30 min gerüttelt. Bei Belüf- tung der Nassweiche wurde auch in der zweiten Nassweiche von Anfang an gerüttelt, da nicht mit einem Austreiben des Sauerstoffes im Weichwasser gerechnet werden musste. Außerdem wurde auf die zwischenzeitliche Einbringung der Proben in die Kleinmälzung verzichtet, damit in dieser Versuchsreihe die anfänglichen 3,2 kg Gerste in dem Fermenter ein zweites Mal geweicht und somit das Gerste-Wasser-Verhältnis konstant ge ^¬ halten werden konnte.

Bei den resultierenden Weichwässern stand die Analytik der Eisengehalte und der CSB-Werte (nach Fa. Hach) im Vorder- grund. Die eingesetzten Gersten wurden im Hinblick auf die Wasseraufnahme, die Ankeimung sowie ihre Keimenergie unter ^¬ sucht und im Anschluss an die Mälzung die Qualität der Malze anhand konventioneller Malzanalysen gegenübergestellt. Bei den Versuchen unter Belüftung der Nassweichen wurden aus den Malzen produzierten Bierwürzen zusätzlich auf ihre oxidativen Eigenschaften mittels Elektronenspin-Resonanz-Spektroskopie (ESR) untersucht [11, 34] .

4 Ergebnisse

4.1 Weichwasseranalysen (CSB und Eisen) 4.1.1 CSB der Weichwässer

Zur Veranschaulichung der Einflüsse von Schallwellen (180 bzw. 200 Hz) auf die Weichwässer sind in Figur 2 und 3 die Weichwasserüberstände in den Fermenten zum Ende der ersten Nassweiche gegenübergestellt. Die Ergebnisse der CSB-Bestimmungen der Weichwässer sind in der Tabelle 4 zusammengefasst . Hierbei wurden die ermittelten CSB-Werte mit drei multipliziert, weil aufgrund des Ver- suchsaufbaus mit einem Gerste-Wasser-Verhältnis von 1:3 gear ^¬ beitet werden musste. In industriellen Weichen ist dieses Verhältnis jedoch annähernd 1:1. Die Werte der zweiten Nass ^¬ weiche wurden zusätzlich mit zwei multipliziert, da in der zweiten Nassweiche nur noch die Hälfte der in der ersten Nassweiche eingeweichten 3,2 kg geweicht wurden.

Tabelle 4 : CSB-Analysen der Weichwässer - Versuchsreihe 1

Die CSB-Analysen zeigten auf, dass die Gerste Marthe mit der geringeren Belastung im Weichwasser etwas sauberer war. Generell verursachen die Schallwellen bei beiden Versuchsreihen (Tab 4 & 5) eine erhebliche Mehrverschmutzung des Weichwas ^¬ sers und damit eine gesteigerte Reinigung der Gerste bei der ersten Nassweiche. Bei der zweiten Nassweiche (nur Tipple) war trotz vorheriger ergiebigerer Reinigung wieder mehr Verschmutzung beim gerüttelten Versuch festzustellen. Betrachtet man die gesamte Verschmutzung beider Weichwässer, zeigt sich, dass durch die Schallwellenanwendung in beiden Nassweichen im Vergleich zur Referenz 2-3 mal so viel Dreck von der Gerste entfernt wurde. In diesem Zusammenhang sind die Werte der zweiten Versuchsreihe, bei der ein etwa dreifach höhere CSB- Werte durch den Einsatz des Rüttlers ermittelt wurde, reali- 5 tätsnäher, da im Gegensatz zur ersten Versuchsreihe die gleichen Mengen an Weichgut (3,2 kg Gerste anstatt nur 1,6 kg) in der ersten und zweiten Nassweiche verwendet wurden. Außerdem konnte der grundsätzliche Zusammenhang bestätigt werden, dass eine Belüftung zu einem zusätzlichen Reinigungseffekt führt.0 Im Vergleich konnte jedoch bei Schallwelleneintrag ein deut ^¬ lich stärkerer Wascheffekt erreicht werden.

Tabelle 5: CSB-Analysen der Weichwässer - Versuchsreihe 2

(theoretisch) e

Versuch Weichwasser Mittelwert

Gesamtbelastung der : [mg/L]

CSB [mg/L]

1. Nasswei ^¬ ungerüttelt 2725

che

1. Nasswei ^¬ gerüttelt 7319

che

unbelüftet

2. Nasswei ^¬ ungerüttelt 3313 6038

che

2. Nasswei ^¬ gerüttelt 11830 19149

che

1. Nasswei ^¬ ungerüttelt 3629

che

1. Nasswei ^¬ gerüttelt 10888

che

belüftet

2. Nasswei ^¬ ungerüttelt 3728 7357

che

2. Nasswei ^¬ gerüttelt 12866 23754

che 4.1.2 Eisen im Weichwasser

Bei den Eisenmessungen der Weichwässer aus Versuchsreihe 1 (nur Gerste Tipple untersucht) in Tabelle 6 ergaben sich ebenso drastische Unterschiede.

Tabelle 6: Vergleich der Eisengehalte der Weichwässer der

Gerste Tipple - Versuchsreihe 1

Der Eiseneintrag ins Weichwasser konnte eindeutig auf die Gerste zurückgeführt werden, weil im Blindversuch ohne Gerste gegenüber den Eisengehalten im verwendeten Leitungswasser (0,044 mg/L) kaum Eisen eingetragen worden ist. Die Analyse der Weichwässer der Gerste Tipple zeigen auf, dass durch den Einsatz von Schallwellen in Versuchsreihe 1 etwa der neunfa- che Eisengehalt aus der Gerste gewaschen wurde.

In der zweiten Versuchsreihe konnte ein Eiseneintrag durch die Gerste bestätigt werden. Allerdings war hier der Eisen- eintrag der ungerüttelten Versuche deutlich höher als in der ersten Versuchsreihe. Damit wurde in dieser Versuchsreihe nur zweieinhalb bis dreifach mehr Eisen mit Hilfe des Rüttlers aus der Gerste gewaschen. Dies kann eventuell darauf zurück- 5 zuführen sein, dass die Gerste in Versuchsreihe 1 zwischen

den beiden Nassweichen durch die Zufuhr von temperierter Luft in der Labormälzerei stärker zurückgetrocknet wurde und in

Folge weniger Eisen gelöst wurde. 0 Tabelle 7: Vergleich der Eisengehalte der Weichwässer der

Gerste Tipple - Versuchsreihe 2

Eisen im Gesamt-

Eiseneintrag

Weichwasser Eiseneintrag

Eisen im ins Weichwas ^¬

(abzüglich ins Weichwas ^¬

Weichwasser Weichwasser ser [mg Eisen

Eisen aus ser [mg Eisen

[mg/L] pro kg Gers ^¬ dem Wasser) pro kg Gers ^¬ te]

[mg] te]

1. NW ohne Belüftung ohne

0, 63 5, 30 1, 66

Rüttler

2,9

2. NW ohne Belüftung ohne

0,51 4,01 1,25

Rüttler

1. NW ohne Belüftung mit

2, 37 21,31 6,66

Rüttler

10,0

2. NW ohne Belüftung mit

1,25 10, 52 3,29

Rüttler

1. NW mit Belüftung ohne

1,43 12,66 3, 96

Rüttler

5,9

2. NW mit Belüftung ohne

0,775 6, 34 1, 98

Rüttler

1. NW mit Belüftung mit

3,79 34, 37 10, 74

Rüttler

15,1

2. NW mit Belüftung mit

1, 65 14,04 4,39

Rüttler

Wasser 0, 054 4.2 Wasseraufnähme

Mittels Wiegen wurden zwei Stunden nach den Nassweichen die Wassergehalte ermittelt. Die Ergebnisse sind in den Figuren 4 und 9 gegenübergestellt.

Durch den Einsatz von Schallwellen konnte bei beiden Versuchsreihen die Wasseraufnahme gesteigert werden. Die Wasser ^¬ gehalte (Weichgrade) waren nach der ersten Nassweiche um 0,8 - 1,9 % und nach der zweiten Nassweiche bis zu 2,2 % er- höht. Auf Basis der Ergebnisse der Wasseraufnahme kann der beschallten Gerste ein besseres Ankeimverhalten und eine bessere Malzlösung unterstellt werden.

4.3 Ankeimung

Zur Überprüfung der Ankeimgeschwindigkeit wurden nach 24, 30 und 48 Stunden die Anteile der gespitzten - das heißt ein

Wurzelkeim wird sichtbar - , die gegabelten - das heißt zwei Wurzelkeime werden sichtbar - und die nicht gekeimten Anteile der Gerstenkörner ausgezählt. Die Ergebnisse sind in der Fi ^¬ gur 10 dargestellt.

Durch den Einsatz von Schallwellen beim Weichen konnte die Ankeimung bei beiden Gersten deutlich beschleunigt werden. Dies ist ein Hinweis auf eine zu erwartende bessere Lösung der Malze bzw. auf die Möglichkeit einer Keimzeitverkürzung. Basierend auf einem gleichmäßigeren Einsetzen der Keimung konnte zusätzlich eine höhere Homogenität der beschallten Malzen aufgezeigt werden.

Bei der zweiten Versuchsreihe konnten bezüglich der Ankeimung keine Unterschiede festgestellt werden, weil ein durch die Nichtbelüftung verursachter Sauerstoffmangel in der hier

18 , 5- stündigen Luftrast zu einer Ankeimungsverzögerung führte und die Körner der verschiedenen Gerstenchargen nach der Erholung von der langen anaeroben Phase relativ gleich keimten.

4.4 Sauerstoffmessungen während den Nassweichen

In der zweiten Versuchsreihe wurde die Sauerstoffkonzentrati- on im Weichwasser periodisch bestimmt. Die Verläufe sind in den Figuren 11 und 12 dargestellt.

Anhand des unbelüfteten Versuches konnte aufgezeigt werden, dass der Sauerstoff durch die eingesetzte Beschallung grund- sätzlich ausgetrieben wird (Einsatz der Schallwellen 20 bzw. 60 min nach Beginn der 1. bzw. 2. Nassweiche) . Im Gegensatz dazu führt der Schallwelleneinsatz und der damit verbunden Sauerstoffaustrag bei der Versuchsreihe unter Belüftung zu keiner nennenswerten Abnahme im Sauerstoffgehalt des Weich- wassers in der 1. und 2. Nassweiche.

Die Sauerstoffaufnähme der Gerste war in der ersten Nasswei ^¬ che der Versuchsreihen aufgrund der geringeren Stoffwechsel- aktivität gegenüber der zweiten Nassweichen erwartungsgemäß geringer. Dennoch kann man davon ausgehen, dass die Sauer- stoffkonzentration bei dem unbelüfteten und unbeschallten Versuch bei einem realen Gerste-Wasser-Verhältnis von 1:1 statt dem hier angewendeten von 1:3 etwas schneller abgenommen hätte. Dennoch war nach 3 Stunden der ersten Nassweiche etwa ein Drittel der anfänglichen Sauerstoffgehaltes vorhan- den. Bei längeren Nassweichen, als 3 Stunden sollte demnach mit der Beschallung entsprechend gewartet werden.

4.5 Malzanalysen

Anhand der durchgeführten Malzanalysen in Versuchsreihe 1 konnten trotz schnellerer Ankeimung bei Anwendung der Schall- wellen keine signifikante Steigerung der Malzqualität aufge ^¬ zeigt werden. Die beiden Vergleichsmalze unterschieden sich lediglich in der Farbe und Kochfarbe, wobei die beschallten Malze eine geringere Farbe aufwiesen. Die niedrigeren Koch ^¬ farbwerte geben einen ersten Hinweis auf eine höhere oxidati- ve Würzestabilität, die letztendlich zu einer höheren oxida- tiven Stabilität der Biere führen sollte. Allerdings waren bei den durchgeführten Untersuchungen der beschallten Malze die Enzymaktivitäten der Proteinase und ß-Glukanase geringer als bei den unbeschallten Malzen. Aus der Gesamtbetrachtung der Analysenergebnisse erscheint es wahrscheinlich, dass sich die negativen Effekte der Schallwellen auf die Enzymaktivitä ^¬ ten und der positive Effekt auf die Ankeimung im fertigen Malz aufheben, so dass sich die resultierende Malzqualität bisher nicht signifikant unterscheidet.

Bei der zweiten Versuchsreihe wurde der Einsatz des Rüttlers von 50 auf 33 % der Nassweichzeit verkürzt, um eine geringere Enzymschädigungen zu erzielen. Bei den Proben ohne Belüftung waren alle Enzymaktivitäten sogar bei den beschallten Proben geringfügig höher (siehe Tab. 8) . Beim belüfteten Versuch konnte lediglich für die Proteinase ein deutlicher Aktivi- tätsverlust aufgezeigt werden, was sich aber nicht negativ in der Eiweißlösung (Kolbachzahl, FAN-Gehalt widerspiegelte. Alle Parameter der Cytolyse (Viskosität, Mürbigkeit, ß- Glukangehalt , Modifikation, photometrische Jodprobe) zeigten bei unter Belüftung und Schallwelleneinsatz eine weitergehen- de Lösung auf, so dass generell eine höhere Malzqualität nachgewiesen werden konnte.

Tabelle 8 : Malzanalysen der Versuchsreihe 2

Unbelüftet Belüftet

ohne mit ohne mit Rütt ^¬

Analyse Einheit

Rüttler Rüttler Rüttler ler

Wassergehalt 4, 9 4, 9 5, 0 5, 0 Trs . )

ß -Glukanase

U/kg 801 836 923 856 (Malz-Trs . )

Proteinase

U/kg 206 219 238 147 (Malz-Trs . )

4.6 Homogenität der Malze

Der Einsatz der Schallwellen beim Weichen führte bei beiden Malzen in Versuchsreihe 1 und bei beiden Versuchen in Ver- suchsreihe 2 zu einer verbesserten Homogenität. Dies konnte mittels Calcofluor-Methode nach Carlsberg und mittels der Ho ^¬ mogenität der Blattkeimlänge aufgezeigt werden. Die Ergebnis ^¬ se sind in den Figuren 13 und 14 dargestellt.

4.7 Verarbeitbarkeit der Malze Zur Überprüfung der Verarbeitbarkeit der produzierten Malze wurde neben der Abiaufzeit nach MEBAK [13] ein fachgebietsinterner Laborläutertest eingesetzt. Die Verläufe der mittels Läutertest untersuchten Malze sind in den Figuren 15 bis 17 darge stellt .

Generell konnte in der ersten Versuchsreihe mittels beider eingesetzter Analysenmethoden für die Marthe-Malze gegenüber den Tipple-Malzen eine schnelleres Läuterverhalten nachgewiesen werden. Die Beschallung während der Weiche führte bei beiden Gersten zu einer verbesserten Läuterperformance im Vergleich zum Weichen ohne Beschallung.

Dieser Zusammenhang konnte ebenfalls anhand der Ergebnisse der zweiten Versuchsreihe bestätigt werden. Unabhängig von einer Belüftung während der Nassweichen ließen sich die beim Weichen gerüttelten Malze schneller läutern. In der Brauerei ist das Läutern in der Regel der geschwindigkeitsbestimmende Schritt in der Würzeproduktion. Daraus resultiert für die Brauereien ein enormer zeitlicher und finanzieller Vorteil bei Verwendung von Malze die mittels Schallwelleneinsatz beim Weichen produziert wurden. 4.8 Mikrobiologische Belastung der Malze

Die fertigen Malze wurden zusätzlich auf ihre mikrobiologi ^¬ sche Belastung hin untersucht. Dazu wurden die Gesamtkeimzahlen mittels Würze und Standard 1-Agar (ST1), die Belastung mit coliformen Keimen mit einem Chromocult-Agar und die

Schimmelpilzbelastung mittels CPD-Agar bestimmt. Anhand der in Figur 18 und 19 dargestellten Ergebnisse der Versuchsreihe 1 lässt sich erkennen, dass der starke Reinigungseffekt, der durch die CSB-Bestimmungen bereits dargestellt wurde, bei der stärker belasteten Gerste Tipple zu einer deutlichen Reduzie- rung der Keimbelastung führte. Hierbei scheint entweder die

Schallwellenanwendung während der zweiten Nassweiche deutlich effektiver zu sein oder die von vorne herein geringer Belastung der Gerste Marthe konnte durch das Weichen nicht mehr signifikant reduziert werden, so dass sich die Belastung durch das Wachstum der Mikroorganismen während der Keimung wieder angeglichen hat. Dennoch konnte bei der Untersuchung der Schimmelbelastung der Gerste Marthe ebenfalls eine signifikante Reduzierung aufgezeigt werden. Der stärkere Reinigungseffekt und die damit verbundene Herabsetzung der mikro- biellen Belastung kann als positiver Einfluss der Schallwellenbehandlung eingestuft und hervorgehoben werden.

Die deutliche Reduzierung der mikrobiologichen Belastung durch den Wascheffekt der Beschallung mittels Rüttler konnte auch bei der zweiten Versuchsreihe bestätigt werden. 4.9 Eisenmessungen in Gerste und Malz

Bei den Versuchen unter Einsatz von Schallwellen in der ersten Versuchsreihe konnte im Vergleich zur Referenzprobe und dem ausschließlichen Einsatz des Rüttlers ohne Gerste ein er- heblicher Eiseneintrag ins Weichwasser nachgewiesen werden, so dass eine entsprechende Verringerung des Eisengehaltes in der beschallten Gerste zu erwarten ist. Zur Verifizierung der vermuteten Gegebenheit wurden die Gerste Tipple und die mit und ohne Schallanwendung resultierenden Malze der ersten Ver- suchsreihe aufgeschlossen und der Gesamteisengehalt bestimmt. In Tabelle 9 sind die entsprechenden Eisengehalte gegenüber ^¬ gestellt.

Tabelle 9 : Berechnung und Vergleich der Eisengehalte in der Gerstensorte Tipple - Versuchsreihe 1

Differenz 14,9 %

Anhand der Ergebnisse konnte erneut ein deutliches Auswaschen des Eisens durch Schallwelleneinsatz in der Nassweiche nachgewiesen werden. Zur Berücksichtigung der unterschiedlichen Wassergehalte in Gerste und Malz wurden die analysierten Eisengehalte zunächst auf die Trockensubstanz der Proben be ^¬ rechnet. Im Weiteren war es notwendig den Gewichtsverlust durch den Mälzungsschwand zu berücksichtigen, um die Werte vergleichen bzw. ein prozentuales Auswaschen berechnen zu können. Aus der Differenz der Eisengehalte beider Malze ergab sich rechnerisch eine zusätzliche Eisengehaltsreduzierung von etwa 15 %.

4.10 Eisenmessungen in der Würze

Aufgrund der großen Relevanz der Eisengehalte in Getränken bezüglich der Geschmackstabilität wurden aus den Malzen beider Gersten Würzen hergestellt und auf ihren Eisengehalt hin untersucht. Die Ergebnisse sind in der Figur 20 dargestellt. Die Eisengehalte sind aufgrund der Heißtrubausfällung während der Würzekochung generell vor der Würzekochung etwas höher, da Eisen teilweise in dem gebildeten Heißtrub gebunden ist und über diesen Weg entfernt wird. Beim Vergleich der Eisengehalte der gekochten Würzen finden sich bei dem Versuch Marthe 9,4 % und beim Versuch Tipple, bei dem in beiden Nass ^¬ weichen beschallt worden ist, 16,4 % weniger Eisen wieder. Letztere Differenz stimmt demnach auch annähernd mit der in den Tipple-Malzen ermittelten Eisengehalts-Differenz von 14,9 % annähernd überein, so dass hiermit ein weiterer Hin- weis auf die Reduzierung des Eisengehaltes gegeben ist.

In der zweiten Versuchsreihe wurden ebenfalls vor und nach der Würzekochung Proben zur Eisenbestimmung entnommen um weitere Hinweise zum Einfluss des Schallwelleneinsatzes während der Nassweiche auf die oxidative Würzestabilität zu bekommen. In dieser Versuchsreihe wurde gegenüber dem Kongressmaischen- verfahren nach MEBAK ein praxisorientierteres Maischprogramm (Einmaischen bei 55 °C - Rast 10 min, 62 °C - Rast 60 min, 72°C - Rast 20 min, Abmaischen 78 °C) angewendet. Obwohl ein anderes Maischprogramm und ein anderes Schüttungsverhältnis gewählt wurde, ergab sich der gleiche Trend bei den Eisenmes ^¬ sungen. In Analogie zu den Ergebnissen der ersten Versuchsreihe und den höheren Eisengehalten im Weichwasser konnte durch den Einsatz des Rüttlers der Eisengehalt in den Würzen herabgesetzt werden. 4.11 Oxidative Stabilität mittels ESR-Messungen

Aufgrund der unterschiedlichen Eisengehalte der aus den be ^¬ schallten und unbeschallten Malzen produzierten Würzen wird eine Verbesserung der oxidativen Geschmacksstabilität erwartet. Zur Überprüfung dieses Sachverhalts wurde bei den Würzen der zweiten Versuchsreihe unter Belüftung der Nassweichen

Analysen zum Nachweis der oxidativen Würzestabilität mittels ESR-Spektroskopie durchgeführt. Die Ergebnisse der ESR- Messungen sind in Figur 22 dargestellt. Die Ergebnisse der ESR-Messungen zur Bestimmung der oxidativen Würzestabilität zeigen die prooxidativ wirkenden Radikal- generierung in der jeweiligen Würzematrix im Verlauf einer forcierten Alterung bei 60°C auf [34] . Hierbei ist der sogenannte Τχ-Wert ein Maß für die Radikalgenerierung nach einer bestimmten Messzeit (z.B. T ₄₀ o-Wert nach 400 min) . Anhand der niedrigeren Radikalgenerierung in der aus dem beschallten Malz hergestellten Würze, konnte ein eindeutiger Vorteil der Beschallung während der Nassweichen aufgezeigt werden. Durch den ca. 30 % niedrigeren Eisengehalt in der Würze (siehe Fi- gur 21) konnte die Radikalgenerierung um ca. 35 % herabgesetzt werden, was eine höhere oxidative Würzestabilität zur Folge hat. Dies ist ein eindeutiger Hinweis auf eine höhere zu erwartende Geschmacksstabilität von Bieren, die aus Malzen hergestellt werden, die unter Einsatz eines Rüttlers beim Weichen produziert werden.

5 Zusammenfassung Generell verursachen die Schallwellen eine Mehrverschmutzung des Weichwassers und damit eine gesteigerte Reinigung der Gerste. Betrachtet man die gesamte Verschmutzung beider Weichwässer, zeigt sich, dass durch die Schallwellenanwendung in beiden Nassweichen im Vergleich zur Referenz 2-3 mal so viel Verunreinigungen von der Gerste entfernt wurde.

Der Reinigungseffekt konnte anhand von mikrobiologischen Un ^¬ tersuchungen bestätigt werden. Durch zwei beschallte Nasswei ^¬ chen konnte die Keimbelastung (Bakterien und Schimmelpilze) auf dem fertigen Malz um etwa 50 % reduziert werden. Anhand der Prozesskontrolle während der Mälzung konnte eine um bis zu 2,2 % höhere Wasseraufnahme bei den beschallten Gersten aufgezeigt werden.

Die geringere mikrobiologische Belastung und der höhere Was ^¬ sergehalt nach dem Weichen führten zu einer schnelleren und homogeneren Ankeimung der beschallten Gerste, was wiederum in einer höheren cytolytischen Lösung, bei vergleichbarer proteolytischen Lösung führte. Eine höhere cytolytische Lösung von Malzen führt in der Regel zu höheren Sudhausausbeute und zu einer besseren Läuterfähigkeit der Maische und Filtrierbar- keit der Biere.

Der Einfluss der Beschallung auf die Verarbeitbarkeit der produzierten Malze wurde mittels institutseigenem Laborläutertest überprüft, bei allen Versuchen konnte eine deutliche Verbesserung des Läuterverhaltens aufgezeigt werden. Der Ein- satz beschallter Malze könnte somit zu einer Zeit und Kosten ^¬ ersparnis in der Brauerei führen. Neben der generell höheren Malzqualität konnte auch die Homo ^¬ genität der Malze erheblich verbessert werden, was mittels zweier Analysenmethoden (Carlsberg-Methode und Blattkeimlänge) nachgewiesen werden konnte. Heterogene Malze sorgen in Brauereien häufig zu Verarbeitungsschwierigkeiten in Läuterund Filtrationsprozessen, da Teile der Körner stark und Teile gering cytolytisch gelöst sind. Somit können höhere Gehalte an höher molekularen ß-Glukanen innerhalb einer Malzcharge vorhanden sein, was dann zu ß-Glukan-Gelbildung führen kann. Die ß-Glukangele erhöhen die Viskosität und verblocken Fil ^¬ terporen .

Außerdem konnte in der Versuchsreihe 1 um etwa 15 % mehr Ei ^¬ sen aus der Gerste „gewaschen" werden, was nachweislich zu einer in etwa gleichwertigen Reduzierung des Eisengehaltes in aus den Malzen produzierten Würzen führte. Aufgrund der proo- xidative Wirkung von bestimmten Metallionen, wie insbesondere Eisen und Kupfer, durch Sauerstoffaktivierung und die kataly- tische Wirkung im Fenton- /Haber-Weissreaktionssystem ist technologisch betrachtet der Vorteil eines geringeren Eisen- gehaltes eine erhöhte oxidative Getränkestabilität. Bei den Untersuchungen mittels ESR-Spektroskopie konnte anhand der niedrigeren Radikalgenerierung in der aus dem beschallten Malz des belüfteten Versuches der zweiten Versuchsreihe hergestellten Würze ein eindeutiger Einfluss der Beschallung während der Nassweichen auf die oxidative Würzestabilität aufgezeigt werden. Durch den ca. 30 % niedrigeren Eisengehalt in der Würze (siehe Figur 21) konnte die Radikalgenerierung um ca. 35 % herabgesetzt werden, was eine höhere oxidative Würzestabilität zur Folge hat. Dies ist ein eindeutiger Hin- weis auf eine höhere zu erwartende Geschmacksstabilität von Bieren, die aus Malzen hergestellt werden, die unter Einsatz eines Rüttlers beim Weichen produziert werden. Ein zusätzlicher Vorteil der Eisenreduzierung könnte in Zukunft bei der Produktion von dunklen Malzen zum Tragen kommen. Bei Röstprozessen von Gersten und Malzen kommt es nach eigenen neusten Untersuchungen zu einer vermehrten Freiset- zung von Eisen, das zu einem erheblichen Nachteil beim Einsatz vom dunklen Malzen bezüglich der oxidativen Getränkestabilität führt. Der Einsatz von Schallwellen könnte damit nicht nur für die Produktion von normalem Malz, sondern auch insbesondere für die Produktion von Spezialmalzen z.B. Farb- malz zum Einsatz kommen.

Die Schallwellenfrequenz sollte mindestens 100 Hz betragen. Bevorzugt wird eine Frequenz zwischen 180-300 Hz angewendet aber auch Frequenzen > 300 Hz sind denkbar.

Bei Weichsystemen mit Belüftungseinrichtung für die Nasswei- chen kann die Beschallung zu jeder Zeit eingesetzt werden, da der Sauerstoffgehalt des Weichwasser je nach Belüftungsintensität nur sehr langsam sinkt bzw. annähernd konstant bleibt. Ohne Belüftung wird Sauerstoff ausgetrieben, wobei dies auf ^¬ grund der erst im Laufe der Luftrast einsetzenden Keimung der Gerste in der ersten Nassweiche noch nicht von großer Bedeu ^¬ tung ist. In der zweiten Nassweiche hat die Keimung bereits eingesetzt und die Stoffwechselaktivität der Gerste ist schon stark beschleunigt. Deshalb sollte bei Weichsystemen ohne Be ^¬ lüftungseinrichtung in der zweiten Nassw4eiche erst nach ei- ner gewissen Zeit, etwa 60 min, mit der Beschallung begonnen werden, da nach dieser Zeit der anfänglich vorhanden Sauerstoff im Weichwasser erfahrungsgemäß verbraucht, (unbelüftet erste Nassweiche bevorzugt die letzten 3-4 Stunden je nach Gesamtdauer, unbelüftet zweite Nassweiche bevorzugt nach 30 min., insbesondere bevorzugt nach 60 min) Literatur / Patente

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