一种芒果苷 -6-0-钙盐及其制备方法与用 ^ 技术领域

[0001] 本发明涉及一种芒果苷 -6-0-钙盐及其制备方法。

[0002] 也涉及芒果苷 -6-0-钙盐作为中间体在制备芒果苷 -6-0-小檗碱盐中的用途。

背景技术

[0003] 芒果苷 (mangiferin)是天然多酚类化合物， 分子式： C ₁₉ H ₁₈ 0„， 分子量： 422, 其化学结构如下：

[0004] 关于芒果苷钙盐， WO2009065287 Al、 WO2008061480 Al、 9 、 C N101919839的公幵内容包括： 1) 结构方面： 芒果苷钙盐的通式化合物 （a) 、 芒果苷 -3-0-钙盐 （b) 、 芒果苷 -3， 7-0-钙盐 （c) ， 结构式如下：

[0006] 2) 用途方面： 作为胰岛素增敏剂、 ΑΜΡΚ激动剂、 过氧化物酶增殖物激活受 体激动剂的医药用途。

[0007] WO2010/145192A1披露一种芒果苷小檗碱盐， 根据 WO2010/145192A1说明书 第 5页-第 7页第 2段所披露的核磁数据分析获知， 其所披露的芒果苷小檗碱盐应为 芒果苷 -3-0-小檗碱盐与芒果苷 -7-0-小檗碱盐的组合物， 但关于芒果苷 -3-0-小檗 碱盐与芒果苷 -7-0-小檗碱盐的比例如何， WO2010/145192A1并未予以阐述。 技术问题

[0008] 按照药物注册的要求， 上市药物所提供的原料药结构必须是明确的， 如果原料 药是组合物， 其比例也必须是确定的， 才能符合药物质量可控的要求。 可见 W0 2010/145192A1所披露的芒果苷小檗碱盐若做为原� �药， 还需解决进一步明确结 构的问题。 而分析芒果苷结构可知， 芒果苷分子结构中有 4个酚羟基， 所以芒果 苷成盐位点存在多种可能性， 这使得获得单一成盐位点的芒果苷盐的技术难 度 大大增加。

[0009] 另外， WO2010/145192A1披露的芒果苷小檗碱盐的制备方法 【详见说明书第 4 页， 第 8-10页的实施例】 ， 皆采用将芒果苷与碱性钠 （钾） 盐反应制备成芒果苷 单钠 （钾） 盐， 再将芒果苷单钠 （钾） 盐与小檗碱反应生成芒果苷小檗碱盐的 方法。 该方法存在以下问题：

[0010] 由于芒果苷原料是来源于植物的提取物， 可能因植物品种、 采集吋间或采集地 域的不同以及提取工艺的差异， 芒果苷原料中新芒果苷等芒果苷类似物以及鞣 质等杂质批次间的含量差异会较大； 在此情况下， WO2010/145192A1披露的芒 果苷小檗碱盐的制备方法， 采用芒果苷原料投料制成芒果苷单钠 （钾） 盐溶液 ， 直接与盐酸小檗碱溶液反应制备芒果苷小檗碱 盐， 极易出现芒果苷小檗碱盐 批次间质量一致性差异较大的问题； 同吋还会存在着芒果苷投料准确性的问题 。 若以芒果苷单钠 （钾） 盐固体物投料制备芒果苷小檗碱盐， 则需使用乙醇、 丙酮等结晶溶媒将其沉淀析出， 这样则会导致制备过程中较大量的乙醇、 丙酮 、 乙酸乙酯等有机溶剂的使用， 这些有机溶剂不仅成本高， 还会增加芒果苷小 檗碱盐的溶剂残留风险， 而且在工业生产中会带来沉重的环保压力。 如若采用 高纯度芒果苷 （含量≥98%) 作为原料也可以解决芒果苷小檗碱盐质量问题 ， 但 由于高纯度芒果苷制备工艺复杂， 会大大提高芒果苷小檗碱盐的生产成本。 问题的解决方案

技术解决方案 [0011] 为了解决芒果苷小檗碱盐做为原料药， 需明确结构的问题； 同吋也为了解决 W O2010/145192A1披露的芒果苷小檗碱盐的制备方法� ��存在的批次间质量一致性 差等问题， 发明人经过大量研究， 获得芒果苷 -6-0-钙盐这一新的单一成盐位点 的芒果苷钙盐， 并且研究出以芒果苷 -6-0-钙盐为中间体制备单一成盐位点的芒 果苷 -6-0-小檗碱盐的方法。 该技术方案解决了前文所述的以下问题：

[0012] 1、 采用芒果苷 -6-0-钙盐为中间体制备芒果苷 -6-0-小檗碱盐， 解决了芒果苷 小檗碱盐结构不明确的问题；

[0013] 2、 采用芒果苷 -6-0-钙盐为中间体制备芒果苷 -6-0-小檗碱盐， 解决了制备芒 果苷小檗碱盐批次间质量一致性差的问题。

[0014] 具体技术方案如下：

[0015] 本发明提供一种芒果苷 -6-0-钙盐， 其特征在于： 所述芒果苷 -6-0-钙盐具有下 式 (I) 的结构：

( I )

[0016] 本发明所述的芒果苷 -6-0-钙盐的制备方法， 其特征在于：

[0017] ①将碱性钠盐或碱性钾盐加入水中， 制备碱性钠盐溶液或碱性钾盐溶液， 浓度

¾0.1%-2% (w/v) ；

[0018] ②将芒果苷加入二甲基亚砜中溶解， 制成芒果苷溶液；

[0019] ③将芒果苷溶液缓慢加入碱性钠盐溶液或碱性 钾盐溶液中， 充分搅拌， 50°C-10 o°c反应完全， 得芒果苷钠盐溶液或芒果苷钾盐溶液；

[0020] ④取水溶性钙盐加水溶解， 制成钙盐溶液；

[0021] ⑤将钙盐溶液与芒果苷钠盐溶液或芒果苷钾盐 溶液充分混合， 反应完全， 析出 沉淀， 过滤， 得固体物； 将固体物加入适量热水中溶解， 滤过， 析出沉淀， 过 滤得固体物； [0022] ⑥固体物干燥， 得芒果苷 -6-0-钙盐。

[0023] 本发明所述的芒果苷 -6-0-钙盐的制备方法， 其特征在于： 所述芒果苷与二甲基 亚砜的配比为 1:0.2-5 (w/v) 。

[0024] 本发明所述的芒果苷 -6-0-钙盐的制备方法， 其特征在于： 所述芒果苷与碱性钠 盐或碱性钾盐的摩尔配比为 1:0.5-1。

[0025] 本发明所述的芒果苷 -6-0-钙盐的制备方法， 其特征在于： 所述芒果苷与水溶性 钙盐摩尔比为 1:0.5-1。

[0026] 本发明所述的芒果苷 -6-0-钙盐的制备方法， 其特征在于： 所述碱性钠盐或碱性 钾盐选自碳酸钠、 碳酸氢钠、 碳酸钾、 碳酸氢钾中的一种或两种以上的混合物 ， 所述水溶性钙盐选自氯化钙、 葡萄糖酸钙、 乳酸钙、 戊酮酸钙中的一种或两 种以上的混合物。

[0027] 本发明所获得的芒果苷 -6-0-钙盐可以是每分子芒果苷 -6-0-钙盐中含有小于 9个 水的水合物。

[0028] 本发明所述的芒果苷 -6-0-钙盐作为中间体在制备芒果苷 -6-0-小檗碱盐 （式 Π) 中的用途：

其中 0¾x≤4

( II )

[0029] 本发明所述的用途， 其特征在于： 所述芒果苷 -6-0-钙盐作为中间体制备芒果苷 - ₆ _0_小檗碱盐的具体方法如下：

[0030] ①取芒果苷 -6-0-钙盐加 50- 100°C水溶解， 制成芒果苷 -6-0-钙盐溶液；

[0031] ②取盐酸小檗碱加 50-100°C水溶解， 制成盐酸小檗碱溶液；

[0032] ③将盐酸小檗碱溶液与芒果苷 -6-0-钙盐溶液充分混合， 反应完全， 析出沉淀， 过滤， 洗涤， 得固体物； [0033] ④固体物干燥， 得芒果苷 -6-0-小檗碱盐。

[0034] 本发明所述芒果苷 -6-0-钙盐作为中间体制备芒果苷 -6-0-小檗碱盐的具体方法 中所述芒果苷 -6-0-钙盐溶液浓度为 0.1-3%， 优选 1-2% ; 所述盐酸小檗碱溶液浓 度为 0.1-4%， 优选 1-2%。

[0035] 本发明所述芒果苷 -6-0-钙盐作为中间体制备芒果苷 -6-0-小檗碱盐的具体方法 中芒果苷 -6-0-钙盐与盐酸小檗碱摩尔比为 0.5 : 1； 所述盐酸小檗碱可由硫酸小 檗碱或其它小檗碱医学上可接受的盐替代。

[0036] 芒果苷 -6-0-钙盐的理化性质：

[0037] 芒果苷 -6-0-钙盐， 分子式： C ₃₈ H ₃₄ 0 ₂₂ Ca， 淡黄绿色或淡黄色粉末状物， 微溶 于水， 溶解于热水， 在稀盐酸溶液中略溶。 结构式如下：

( I )

[0039] 芒果苷 -6-0-钙盐的波谱数据：

[0040] ESI-MS (+) m/z 883(M+H)。

[0041] ΉΝΜΚ(400ΜΗζ , DMSO-d ₆

)5： 4.60 (Η- 1 ' ) ， 6.35 (Η-5),6.23 (Η-4),7.11 (Η-8)。 ¹³

CNMR(400MHz， DMSO-d ₆ ) (5ppm) ： 161.62(C- 1) , 106.97(C-2)， 163.62(C-3) ， 93.25(C-4)， 155.98 (C-4a)， 100.53(C-4b) , 100.89C-5) , 164.74(C-6)， 147.10( C-7)， 103.27(C-8)， 106.22 (C-8a) ， 153.52 (C-8b) ， 177.79(C-9)

， 73.51(C-1 ')， 70.34(C-2')， 79.14(C-3') ， 70.34(C-4')， 81.37(C-5') ， 60.27(C-6，）。

[0042] 附： 芒果苷的波谱数据： ESI-MS m/z 421 (M -)， ΉΝΜΚ(400ΜΗζ , DMSO-d ₆ ) 5： 4.60 (Η-1 ' ) ， 6.01 (Η-5),6.10 (Η-4),6.96 (Η-8)。 ¹³ CNMR(400MHz， DMSO-d ₆ ) (5ppm) ： 161.68(C-1), 107.54(C-2)， 163.73(C-3) ， 93.27(C-4)， 156.15 (C-4a)， 101.25(C-4b) , 102.54C-5) , 153.91(C-6), 143.63( C-7)， 108.05(C-8)， 111.68 (C-8a) ， 150.7 (C-8b) ， 179.02(C-9) ， 73.04(C-1') ， 70.24(C-2，）， 78.90(C-3')， 70.56(C-4，）， 81.44(C-5，）， 61.41(C-6')=

[0043] 采用等离子体发射光谱测定芒果苷钙盐中 Ca ) 元素含量： 4.5x10 ⁴ mg/kg。

[0044] 结构分析如下：

[0045] 芒果苷钙盐与芒果苷的碳核磁数据比较： 芒果苷 B环碳原子的化学位移均出现 较大变化， 其中 C-6， C-7碳原子的化学位移由于去屏蔽作用而发生显 著改变， C -6化学位移变化最大； C-5、 C-8、 C-8a、 C-8b碳原子的化学位移由于屏蔽作用均 有不同程度的改变， 其中处于 C-6原子间位的 C-8和对位的 C-8a化学位移变化较大

[0046] 芒果苷钙盐与芒果苷的氢核磁数据比较： H-8、 H-5、 H-4氢原子的化学位移由 于屏蔽作用均有不同程度的改变， 其中 H-5原子化学位移变化最大。

[0047] 电喷雾质谱 （+) ESI: 883(M+H)

[0048] 质谱数据显示芒果苷钙盐的分子量为 882， 表明是 2分子的芒果苷离子与 1分子 的钙连接。

[0049] 采用等离子体发射光谱测定芒果苷钙盐中 Ca (钙） 元素含量： 4.5x10 ⁴ mg/kg ( 理论值 4.5x10 ⁴ mg/kg) 。

[0050] 根据以上波谱数据， 芒果苷钙盐化学结构是： 2分子芒果苷 -6-0 -与 Ca 2+结合， 形成了芒果苷 -6-0-钙盐。

发明的有益效果

有益效果

[0051] 1) 可以使用粗芒果苷原料 （如芒果苷含量约为 80%、 90%的提取物） 制备高纯 度、 稳定、 便于贮存的芒果苷 -6-0-钙盐作为中间体原料； 使用粗芒果苷原料制 备芒果苷 -6-0-钙盐， 可以大大降低生产成本 （芒果苷含量为 80%-90<¾的粗芒果 苷原料价格为高纯度芒果苷 （含量≥98%) 的三分之一甚至更低） ， 同吋又可以 降低环保压力。

[0052] 2) 采用芒果苷 -6-0-钙盐为中间体制备芒果苷 -6-0-小檗碱盐， 可以提高芒果苷 -6_0_小檗碱盐的纯度， 简化芒果苷 -6-0-小檗碱盐的纯化工艺 （WO2010/145192 A1披露的芒果苷小檗碱盐纯度 <99%， 若获得 99%以上的芒果苷小檗碱盐， 则另 需进行纯化） ， 降低芒果苷 -6-0-小檗碱盐的制备成本。

[0053] 试验例 1: 芒果苷 -6-0-小檗碱盐的理化性质研究结果

[0054] 芒果苷 -6-0-小檗碱盐， 分子式： C ₂ 。H ₁₈ N0 ₄ .C ₁₉ H ₁₇ O _{i r} xH ₂ 0， 橙黄色粉末状 物， 熔点： 177-179°C， 结构式如下：

其中 0¾ χΐ4

[0056] 芒果苷 -6-0-小檗碱盐的波谱数据： ESI-MS (-) m/z 756(M ),421； ESI-MS (+) m/z 336, 423； 芒果苷基团 ¹ HNMR(400MHz， DMSO-d ₆

)5： 4.56 (Η-1') ， 6.01 (Η-5),6.15 (Η-4),6.88 (Η-8)。 ¹³

CNMR (400MHz, DMSO-d ₆ )δ: 161.51 (C-l) ， 106.58 (C-2) ， 163.06 (C-3 ) ， 92.77 (C-4) ， 155.55 (C-4a) ， 103.74 (C-4b) ， 98.64 (C-5) ， 166.93 ( C-6) ， 147.03 (C-7) ， 100.47 (C-8) ， 100.53 (C-8a) ， 154.37 (C-8b) ， 176 .73 (C-9) ， 73.51 (C-Γ) ， 70.34 (C-2，) ， 79.14 (C-3，) ， 70.34 (C-4，) ， 8 1.37 (C-5') ， 61.27 (C-6，) 。 小檗碱基团 ¹ HNMR(400MHz， DMSO-d ₆ )δ: 3.2 (Η-5)， 4.03 (-OCH3) , 4.07 (-OCH3) , 4.89 (Η-6)， 6.13 (-0-CH2-0-) , 7.01 (Η-4)， 7.69 (Η-1)， 7.86 (Η-12)， 8.07 (Η-11)， 8.78 (Η-13) , 9.78 (Η-8)。 ¹³ CNMR (400MHz, DMSO-d ₆ )δ: 105.33 (C-l) ， 120.29 (C-la) ， 147.56 (C-2 ) ， 149.71 (C-3) ， 108.22 (C-4) ， 130.45 (C-4a) ， 26.28 (C-5) ， 55.07 (C -6) ， 145.06 (C-8) ， 121.24 (C-8a) ， 143.51 (C-9) ， 150.15 (C-Ιθ) ， 126. 55 (C-11) ， 123.33 (C-12) ， 132.87 (C-12a) ， 120.08 (C-13) ， 137.3 (C-13 a) ， 56.93 (C10(-OCH ₃ )) ， 61.74 (C9(-OCH ₃ )) ， 101.96 (-O-CH ₂ -0-) 。 [0057] 附： 芒果苷的波谱数据： ESI-MS m/z 421(M - ); ΉΝΜΚ(400ΜΗζ, DMSO-d ₆ ) 5： 4.60 (Η-1') ， 6.37 (Η-5),6.86 (Η-4),7.39 (Η-8)。 ³

CNMR (400MHz, DMSO-d ₆ )δ: 161.68 (C-l) ， 107.54 (C-2) ， 163.73 (C-3 ) ， 93.27 (C-4) ， 156.15 (C-4a) ， 101.25 (C-4b) ， 102.54 (C-5) ， 153.91

(C-6) ， 143.63 (C-7) ， 108.05 (C-8) ， 111.68 (C-8a) ， 150.7 (C-8b) ， 17 9.02 (C-9) ， 73.04 (C-Γ) ， 70.24 (C-2，) ， 78.9 (C-3，) ， 70.56 (C-4，) ， 8 1.44 (C-5') ， 61.41 (C-6，) 。

[0058] 小檗碱的波谱数据： ESI-MS m/z 336(M); ΉΝΜΚ(400ΜΗζ, DMSO-d ₆

)5： 3.26 (Η-5)， 4.11 (-OCH3) , 4.21 (-OCH3) , 4.92 (Η-6)， 6.11 (-0-CH2-0-) ， 6.96 (Η-4)， 7.66 (Η-1)， 8.0 (Η-12)， 8.11 (Η-11)， 8.7 (Η-13), 9.76 (Η-8) 。 ¹³ CNMR (400MHz, DMSO-d ₆ )δ: 106.54 (C-l) ， 121.49 (C-la) ， 149.92

(C-2) ， 152.17 (C-3) ， 109.40 (C-4) ， 131.90 (C-4a) ， 28.24 (C-5) ， 57. 20 (C-6) ， 145.73 (C-8) ， 123.33 (C-8a) ， 146.42 (C-9) ， 152.02 (C-Ιθ) ， 128.04 (C-11) ， 124.55 (C-12) ， 135.13 (C-12a) ， 121.86 (C-13) ， 139.6 5 (C-13a) ， 57.61 (C10(-OCH ₃ )) ， 62.56 (C9(-OCH ₃ )) ,103.68 (-0-CH ₂ -0-

[0059] 结构分析如下：

[0060] 与小檗碱原型化合物比较， 芒果苷 -6-0-小檗碱盐中小檗碱基团碳谱数据各碳原 子的化学位移由于屏蔽作用均发生明显改变。

[0061] 与芒果苷原型化合物比较， 芒果苷 -6-0-小檗碱盐中芒果苷基团碳谱数据中 C ₆

， C ₇ ， C _8b 碳原子的化学位移由于去屏蔽作用而发生 显著改变， C ₆ 化学位移变化 最大； C ₅ 、 C ₈ 、 c _8a 碳原子的化学位移由于屏蔽作用均有不同 程度的改变， 其中 处于 C ₆ 原子间位的 C ₈ 和对位的 C _8a 化学位移变化较大。

[0062] 根据以上波谱数据分析显示： 芒果苷 -6-0 -与小檗碱 -N +

结合， 形成了芒果苷 -6-0-小檗碱盐。

[0063] 芒果苷 -6-0-小檗碱盐及其水合物的元素分析数据：

[0064] 试验例 2: 芒果苷 -6-0-小檗碱盐批次间质量考察

[0065] 采用芒果苷含量 80%、 90%、 98%不同规格的芒果苷原料， 分别通过两种制备 方法制备芒果苷 -6-0-小檗碱盐， 比较不同方法所获得芒果苷 -6-0-小檗碱盐的纯

[0066] 1、 将芒果苷制备成芒果苷 -6-0-钙盐， 然后将芒果苷 -6-0-钙盐溶液与盐酸小 檗碱溶液反应制备芒果苷 -6-0-小檗碱盐 （简称钙盐途径， 即本发明内容中所述 芒果苷 -6-0-小檗碱盐制备方法） ；

[0067] 2、 将芒果苷制备成钠盐溶液， 直接与盐酸小檗碱溶液反应制备芒果苷 -6-0-小 檗碱盐 （简称钠盐途径， 附下） 。

[0068] "钠盐途径"制备芒果苷 -6-0-小檗碱盐：

[0069] ①将碱性钠盐或碱性钾盐加入水中， 制备碱性钠盐溶液或碱性钾盐溶液， 浓度

.1%-2% (w/v) ；

[0070] ②将芒果苷加入二甲基亚枫中溶解， 制成芒果苷溶液；

[0071] ③将芒果苷溶液缓慢加入碱性钠盐溶液或碱性 钾盐溶液中， 充分搅拌， 50°C-10 0°C反应完全， 得芒果苷 -6-0-钠盐溶液或芒果苷 -6-0-钾盐溶液；

[0072] ④取盐酸小檗碱加 50°C-100°C水溶解， 制成盐酸小檗碱溶液；

[0073] ⑤将盐酸小檗碱溶液与芒果苷 -6-0-钠盐溶液或芒果苷 -6-0-钾盐溶液充分混合， 反应完全， 析出沉淀， 过滤， 得固体物；

[0074] ⑥固体物干燥， 得芒果苷 -6-0-小檗碱盐。 „ ： ¾^ ¾ ^: ·*¾¾¾ϋ» * 零爽 黎： ： m :

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01

Ζ.εΖ.900/8ΪΟΖ OAV [0086] 结论： 芒果苷 -6-0-钙盐在室温条件下放置 12个月性质稳定。

[0087] 2、 加速试验

[0088] 取芒果苷 -6-0-钙盐原料样品， 铝塑复合袋密闭包装， 置 40°C±2°C、 75%RH±5

%RH条件下， 分别于 0、 3、 6个月取样， 对其性状、 含量检测， 结果如下表。

^[] 速试龜考察 II：漀（揿号 1 0β18) 、：

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[0089] 结论： 芒果苷 -6-0-钙盐在加速试验条件下放置 6个月性质稳定。

对附图的简要说明

附图说明

[0090] 无。

实施该发明的最佳实施例

本发明的最佳实施方式

[0091] 实施例 1 : 芒果苷 -6-0-钙盐的制备

[0092] 在反应器中加水 1680ml， 将碳酸氢钠 O.lmol力卩入水中制成浓度为 0.5<¾(w/v)的碳 酸氢钠溶液； 将 O.lmol芒果苷 （含量 95%) 加入 85ml DMSO (芒果苷与 DMSO的 配比为 l:2(w/v)) 加热溶解， 制成芒果苷溶液； 将芒果苷溶液缓慢加入碳酸氢钠 溶液中， 充分搅拌， 85°C保温反应完全， 滤过备用； 称取无水氯化钙 0.05mol加 入 500ml水中溶解， 将氯化钙溶液加入芒果苷反应液中， 充分搅拌， 降温析出沉 淀， 降至室温， 静置过夜， 将反应液抽滤； 沉淀物加热水溶解， 过滤， 滤液降 温析出沉淀， 室温静置过夜， 抽滤， 沉淀物 60°C真空干燥， 粉碎， 得淡黄色粉末 芒果苷 -6-0-钙盐， 收率为 74.5%， 样品纯度经 HPLC测定为 99.5%。

本发明的实施方式

[0093] 本发明所述的芒果苷采用市售品 （西安瑞林生物科技有限公司， 具有相应提取 设备的厂家均可以生产） 。 盐酸小檗碱、 硫酸小檗碱等均为市售品 （西安小草 植物科技有限公司） 。 碳酸氢钠、 碳酸钠、 碳酸氢钾、 碳酸钾、 二甲基亚砜 （D MSO) 、 无水氯化钙、 氯化钙、 葡萄糖酸钙、 乳酸钙、 戊酮酸钙等试剂均采用 市售品。

[0094] 实施例 2: 芒果苷 -6-0-钙盐的制备

[0095] 在反应器中加水 2000ml， 将碳酸氢钠 0. lmol力卩入水中制成浓度为 0.4<¾(w/v)的碳 酸氢钠溶液； 将 O.lmol芒果苷 （含量 90%) 加入 127ml DMSO (芒果苷与 DMSO 的配比为 l:3(w/v)) 加热溶解， 制成芒果苷溶液； 将芒果苷溶液缓慢加入碳酸氢 钠溶液中， 充分搅拌， 80°C保温反应完全， 滤过备用， 称取无水氯化钙 0.05mol 和 0.025mol葡萄糖酸钙加入 1000ml水中溶解， 将该氯化钙与葡萄糖酸钙混合溶液 加入芒果苷反应液中， 充分搅拌， 降温， 析出沉淀， 降至室温， 静置过夜， 将 反应液抽滤； 沉淀物加热水溶解， 过滤， 滤液降温， 析出沉淀， 室温静置过夜 ， 抽滤， 沉淀物 50°C真空干燥， 粉碎， 得淡黄色粉末芒果苷 -6-0-钙盐， 收率为 7 0.5%， 样品纯度经 HPLC测定为 99.6%。

[0096] 实施例 3: 芒果苷 -6-0-钙盐的制备

[0097] 在反应器中加水 3500ml， 将碳酸钠 0.05mol力卩入水中制成浓度为 0.3<¾(w/v)的碳 酸钠溶液； 将 O.lmol芒果苷 （含量 80%) 加入 169ml DMSO (芒果苷与 DMSO的 配比为 l:4(w/v)) 溶解， 制成芒果苷溶液； 将芒果苷溶液缓慢加入碳酸钠溶液中 ， 充分搅拌， 100°C保温反应完全， 滤过备用； 称取葡萄糖酸钙 0.06mol加入 100 ml热水中溶解， 将葡萄糖酸钙溶液加入芒果苷反应液中， 充分搅拌， 降温， 析 出沉淀， 降至室温， 静置过夜， 将反应液抽滤； 沉淀物加热水溶解， 过滤， 滤 液降温， 析出沉淀， 室温静置过夜， 抽滤， 沉淀物 55°C真空干燥， 粉碎， 得淡黄 色粉末芒果苷 -6-0-钙盐， 收率为 70.1%， 样品纯度经 HPLC测定为 99.3%。

[0098] 实施例 4: 芒果苷 -6-0-钙盐的制备

[0099] 在反应器中加水 13800ml， 将碳酸钾 0.06mol力卩入水中制成浓度为 0.1<¾(w/v)的碳 酸钾溶液； 将 O.lmol芒果苷 （含量 98%) 加入 210ml DMSO (芒果苷与 DMSO的 配比为 l:5(w/v)) 溶解， 制成芒果苷溶液； 将芒果苷溶液缓慢加入碳酸钾溶液中 ， 充分搅拌， 50°C保温反应完全， 滤过备用； 称取乳酸钙 0.07mol加入 100ml热水 中溶解， 将乳酸钙溶液加入芒果苷反应液中， 充分搅拌， 降温， 析出沉淀， 降 至室温， 静置过夜， 将反应液抽滤； 沉淀物加热水溶解， 过滤， 滤液降温， 析 出沉淀， 室温静置过夜， 抽滤， 沉淀物 55°C真空干燥， 粉碎， 得淡黄色粉末芒果 苷 -6-0-钙盐， 收率为 65.7%， 样品纯度经 HPLC测定为 99.4%。

[0100] 实施例 5: 芒果苷 -6-0-钙盐的制备

[0101] 在反应器中加水 670ml， 将碳酸氢钾 O.lmol加入水中制成浓度为 1.5<¾(w/v)的碳 酸氢钾溶液； 将 O.lmol芒果苷 （含量 90%) 加入 21ml DMS0 (芒果苷与 DMSO的 配比为 l:0.5(w/v)) 加热溶解， 制成芒果苷溶液； 将芒果苷溶液缓慢加入碳酸氢 钾溶液中， 充分搅拌， 70°C保温反应完全， 滤过备用； 称取戊酮酸钙 0.055mol加 入 1000ml水中溶解， 将戊酮酸钙溶液加入芒果苷反应液中， 充分搅拌， 降温， 析出沉淀， 降至室温， 静置过夜， 将反应液抽滤； 沉淀物加热水溶解， 过滤， 滤液降温， 析出沉淀， 室温静置过夜， 抽滤， 沉淀物 55°C真空干燥， 粉碎， 得淡 黄色粉末芒果苷 -6-0-钙盐， 收率为 72.5%， 样品纯度经 HPLC测定为 99.4%。

[0102] 实施例 6: 芒果苷 -6-0-钙盐的制备

[0103] 在反应器中加水 800ml， 将碳酸氢钠 O.lmol加入水中制成浓度为 l<¾(w/v)的碳酸 氢钠溶液； 将 O.lmol芒果苷 （含量 90%) 加入 8.5ml DMSO (芒果苷与 DMSO的配 比为 l:0.2(w/v)) 加热溶解， 制成芒果苷溶液； 将芒果苷溶液缓慢加入碳酸氢钠 溶液中， 充分搅拌， 90°C保温反应完全， 滤过， 备用； 称取氯化钙 0.05mol加入 8 00ml水中溶解， 将氯化钙溶液加入芒果苷反应液中， 充分搅拌， 降温， 析出沉 淀， 降至室温， 静置过夜， 将反应液抽滤； 沉淀物加热水溶解， 过滤， 滤液降 温， 析出沉淀， 室温静置过夜， 抽滤， 沉淀物 55°C真空干燥， 粉碎， 得淡黄色粉 末芒果苷 -6-0-钙盐， 收率为 73.2%， 样品纯度经 HPLC测定为 99.6%。

[0104] 实施例 7: 芒果苷 -6-0-钙盐的制备

[0105] 在反应器中加水 380ml， 将碳酸钠 0.03mol和 0.04mol碳酸氢钠加入水中制成浓度 为 2<¾(w/v)的溶液； 将 O.lmol芒果苷 （含量 80%) 加入 42ml

DMSO (芒果苷与 DMSO的配比为 l:l(w/v)) 加热溶解， 制成芒果苷溶液； 将芒 果苷溶液缓慢加入碱性钠盐溶液中， 充分搅拌， 95°C保温反应完全， 备用； 称取 无水氯化钙 O.lmol加入 1500ml水中溶解， 将氯化钙溶液加入芒果苷反应液中， 充 分搅拌， 降温， 析出沉淀， 降至室温， 静置过夜， 将反应液抽滤； 沉淀物加热 水溶解， 过滤， 滤液降温， 析出沉淀， 室温静置过夜， 抽滤， 沉淀物 55°C真空干 燥， 粉碎， 得淡黄色粉末芒果苷 -6-0-钙盐， 收率为 65.2%， 样品纯度经 HPLC测 定为 99.0<¾。

[0106] 制备例 1 : 芒果苷 -6-0-小檗碱盐的制备

[0107] 称取上述实施例所得芒果苷 -6-0-钙盐 0.05mol， 加入适量 100°C水中溶解， 制成 浓度为 3% (w/v)的溶液， 滤过备用； 称取硫酸小檗碱 O.lmol, 加入适量 50°C水中 溶解， 制成浓度为 0.1% (w/v)的溶液， 滤过备用； 将盐酸小檗碱溶液缓慢加入中 芒果苷 -6-0-钙盐溶液， 充分搅拌， 反应完全， 降温， 析出沉淀， 过滤， 沉淀物 用纯水充分洗涤， 固体物 50°C真空干燥， 粉碎， 得橙黄色固体芒果苷 -6-0-小檗 碱盐， 收率为 71.8%。 样品纯度经 HPLC测定为 99.6%。

[0108] 制备例 2: 芒果苷 -6-0-小檗碱盐四水合物的制备

[0109] 称取上述实施例所得芒果苷 -6-0-钙盐 0.05mol， 加入适量 50°C水中溶解， 制成 浓度为 0.1% (w/v)的溶液， 滤过备用； 称取盐酸小檗碱 O.lmol, 加入适量 100°C 水中溶解， 制成浓度为 4% (w/v)的溶液， 滤过备用； 将盐酸小檗碱溶液缓慢加 入中芒果苷 -6-0-钙盐溶液， 充分搅拌， 反应完全， 降温， 析出沉淀， 过滤， 沉 淀物用纯水充分洗涤， 固体物 55°C真空干燥， 粉碎， 得橙黄色固体芒果苷 -6-0- 小檗碱盐四水合物， 收率为 71.5%。 样品纯度经 HPLC测定为 99.5%。

[0110] 制备例 3: 芒果苷 -6-0-小檗碱盐二水合物的制备

[0111] 称取上述实施例所得芒果苷 -6-0-钙盐 0.05mol， 加入适量 80°C水中溶解， 制成 浓度为 1% (w/v)的溶液， 滤过备用； 称取盐酸小檗碱 O.lmol, 加入适量 70°C水中 溶解， 制成浓度为 2% (w/v)的溶液， 滤过备用； 将芒果苷 -6-0-钙盐溶液缓慢加 入中盐酸小檗碱溶液， 充分搅拌， 反应完全， 降温， 析出沉淀， 过滤， 固体物 6 0°C真空干燥， 粉碎， 得橙黄色固体芒果苷 -6-0-小檗碱盐二水合物， 收率为 76.2 %。 样品纯度经 HPLC测定为 99.5%。

[0112] 制备例 4: 芒果苷 -6-0-小檗碱盐的制备

[0113] 称取上述实施例所得芒果苷 -6-0-钙盐 0.05mol， 加入适量 70°C水中溶解， 制成 浓度为 2% (w/v)的溶液， 滤过备用； 称取盐酸小檗碱 O.lmol, 加入适量 90°C水中 溶解， 制成浓度为 1% (w/ 的溶液， 滤过备用； 将芒果苷 -6-0-钙盐溶液缓慢加 入中盐酸小檗碱溶液， 充分搅拌， 反应完全， 降温， 析出沉淀， 过滤， 沉淀物 用纯水充分洗涤， 固体物 50°C真空干燥， 粉碎， 得橙黄色固体芒果苷 -6-0-小檗 碱盐， 收率为 76.2%。 样品纯度经 HPLC测定为 99.6%。

[0114] 制备例 5: 芒果苷 -6-0-小檗碱盐的制备

[0115] 称取上述实施例所得芒果苷 -6-0-钙盐 0.05mol， 加入适量 90°C水中溶解， 制成 浓度为 1.5% (w/v)的溶液， 滤过备用； 称取盐酸小檗碱 0.05mol和硫酸小檗碱 0.0 5mol， 加入适量 80°C水中溶解， 制成浓度为 1.5% (w/v)的溶液， 滤过备用； 将芒 果苷 -6-0-钙盐溶液缓慢加入中盐酸小檗碱溶液， 充分搅拌， 反应完全， 析出沉 淀， 过滤， 沉淀物用纯水充分洗涤， 固体物 55°C真空干燥， 粉碎， 得橙黄色固体 芒果苷 -6-0-小檗碱盐， 收率为 78.2%。 样品纯度经 HPLC测定为 99.6%。

[0116] 上述具体实施方式对本发明作进一步说明， 但不限于此。

工业实用性

[0117] 本发明的化合物的制备方法解决大量有机溶剂 的使用带来的环保压力与降低芒 果苷 -6-0-小檗碱盐制备成本问题， 从而更适合工业化生产。