[0001] 本发明涉及医用动物模型领域， 具体涉及一种慢性高眼压动物模型的建立方法 背景技术

[0002] 青光眼是一种不可逆性视神经退行性病变， 为全球第二位致盲眼病。 其复杂的 发病机制目前尚不十分明确， 虽然高眼压并不是青光眼视损害的唯一因素， 但 高眼压却是青光眼视神经损害发生和发展机理 中最危险的因素之一。 在青光眼 研究领域， 动物模型已成为重要的研究工具。 青光眼动物模型对于更好的理解 青光眼性视神经病变的损伤机制及治疗措施有 着重要的作用。 高眼压是青光眼 视神经损害最主要的危险因素， 所以大多数青光眼研究的动物模型仍然是诱导 动物高眼压， 进而对青光眼的生理、 病理、 药理等方面进行研究。 理想的实验 动物模型要求： 其构建方法简单， 成本低廉， 易于饲养和控制， 升高的眼压维 持稳定， 发生视网膜视神经特征性的病理改变。

[0003] 目前用于制作青光眼模型的动物为低等哺乳动 物，主要有兔、 鼠、 猴。 虽然鼠 易于用转基因技术改造和繁殖， 且鼠眼的构造在很多方面和人眼类似， 如小梁 、 Schlemm管、 睫状体、 视网膜血管等， 但是鼠眼相对较小， 不利于进行手术操 作。 激光诱导的猴的高眼压模型是目前公认的最理 想的高眼压动物模型， 但因 造价昂贵， 操作较复杂， 国内应用不多。 虽然兔眼与人眼的房角结构有形态学 差异， 但房水外流通道相同， 都有连续的内皮细胞内衬。 并且家兔价格价廉、 性格温顺、 易于获得和操作， 因此兔是最常用于制作青光眼模型的实验动物 。

[0004] 根据高眼压形成机制及药物作用部位分为作用 于前房角 (及小梁)型， 如前房注 射透明质酸、 甲基纤维素、 血细胞、 复方卡波姆液， 后房注射伍. 糜蛋白酶， 激光光凝小梁网， 眼睛外用皮质醇激素等方法； 作用于巩膜房水回流静脉型如 常用的巩膜表面静脉注射高渗盐水法 (Morre-Morrison模型)、 烧灼巩膜表层的房 水引流静脉法 (Shareef-Sharma模型)及改良方法； 此外， 亦有一些特殊种系的自 发性小鼠及转基因技术构建青光眼模型， 如 DBA/2J和 AKXD-28/Ty的纯系小 鼠， 利用基因打靶技术构建的自然青光眼模型等。 同吋分别对各种模型在视网 膜神经节细胞 ( _RGCs )、 视神经、 视网膜功能方面的病理性改变进行评价， 评估 各种模型的利与弊， 在慢性高眼压青光眼机制研究中更好地构建与 临床相契合 的造模动物及造模方法提供依据， 更加深入的研究慢性高眼压青光眼的机制， 为其治疗提供新的思维。

技术问题

[0005] 虽然制作高眼压动物模型的方法有很多， 但是目前的青光眼动物模型大多数都 是急性高眼压模型， 眼压虽然升高， 但是其高眼压维持吋间短， 并且波动大， 难以模拟出青光眼的特征性视神经损害。

问题的解决方案

技术解决方案

[0006] 为了克服现有技术的缺陷， 本发明提供了一种慢性高眼压动物模型的建立 方法

[0007] 本发明采用的技术解决方案是： 一种慢性高眼压动物模型的建立方法， 包括以 下步骤： （1) 将模型动物绑缚仰卧于手术台， 术眼消毒铺巾， 置幵睑器， 冲洗 结膜囊， 术眼结膜下局部润麻醉后， 做上直肌牵引缝线固定； （2) 按钟表表盘 方向计， 于 11点位至 1点位边缘环球结膜切幵， 以 12点位为中心处作以角膜缘为 基底的大小 4*4mm的 1/3巩膜厚度的浅层巩膜瓣， 在浅层巩膜瓣下方再做一个大 小 3*3mm， 厚度 2/3巩膜厚度的深层巩膜瓣， 并向角膜方向剥离， 找到 Schlemm 管并切幵 Schlemm管外壁； （3) 向 Schlemm管两端内注入高分子透明质酸， 将 纤维导管导管通过幵口， 于 9或 3点钟方位角膜缘内 1.0 mm处， 平虹膜方向行前 房穿刺， 轻压穿刺口后缘， 放出水降低眼压， 前房减压穿刺后将纤维导管插入 S chlemm管的断端， 顺着 Schlemm管绕行 360度或 270度或 180度或 90度， 剪断导管 ， 将其置于 Schlemm中堵塞 Schlemm管， 阻止房水外流， 缝合巩膜瓣， 前房穿刺 口注入平衡盐溶液， 缝合结膜瓣， 给予抗炎药物， 最终建立眼压升高的动物模 型。

[0008] 所述的步骤 （1) 中采用稀释碘伏溶液冲洗结膜囊。 [0009] 所述的步骤 （1) 中采用 0.4ml 2%的利多卡因进行术眼结膜下局部润麻醉。

[0010] 所述的步骤 （1) 中采用 30G针头向 Schlemm管两端内注入高分子透明质酸。

[0011] 所述的步骤 （3) 中纤维导管包括一个圆柱形的实心的导管， 所述的导管一端 为球形结构。

[0012] 所述的纤维导管长 10cm， 直径 200μηι， 所述的导管一端的球形直径为 250μηι。

[0013] 所述的纤维导管采用聚丙烯材料制成。

发明的有益效果

有益效果

[0014] 本发明的有益效果是： 本发明提供了一种慢性高眼压动物模型的建立 方法， 通 过手术放置材料堵塞其房水流出通道， 造成眼压升高视神经损害的慢性青光眼 动物模型， 通过这种方法制作出的慢性高眼压动物模型， 其眼压可根据堵塞 Schl emm的范围不同进行调控。 并且可以根据不同动物种类 Schlemm管径而选择不同 规格尺寸的纤维导管， 完成 Schlemm管堵塞， 从而产生多种动物类型的慢性高眼 压模型。 在慢性高眼压青光眼机制研究中更好地构建与 临床相契合的造模动物 及造模方法， 为进行慢性青光眼视神经损伤机制提供基础。

对附图的简要说明

附图说明

[0015] 图 1为本发明纤维导管结构示意图落。

本发明的实施方式

[0016] 现结合图 1对本发明进行进一步说明： 操作步骤： 手术需要一根由聚丙烯材料 制作而成的长 10cm直径 200μηι实心纤维导管，导管头端直径为 250μηι局部膨大的 球形， 防止插管吋损伤 Schlemm管壁组织。

[0017] 将模型动物四肢绑缚仰卧于手术台， 术眼常规消毒铺巾， 置幵睑器， 稀释碘伏 溶液冲洗结膜囊， 取 0.4ml 2%利多卡因于术眼结膜下局部润麻醉后， 做上直肌牵 引缝线固定， 按钟表表盘方向计， 于 11点位至 1点位边缘环球结膜切幵， 以 12点 位为中心处作以角膜缘为基底的大小约 4*4mm的 1/3巩膜厚度的浅层巩膜瓣， 在 浅层巩膜瓣下方再做一个大小约 3*3mm， 厚度约 2/3巩膜厚度的深层巩膜瓣。 并 向角膜方向剥离， 找到 Schlemm管并切幵 Schlemm管外壁， 用 30G针头向 Schlem m管两端内注入高分子透明质酸 （Healon GV) ， 使导管能够容易通过幵口。 于 9 或 3点钟方位角膜缘内 1.0 mm处， 平虹膜方向行前房穿刺， 轻压穿刺口后缘， 放 出适量房水降低眼压， 前房减压穿刺后将微导管插入 Schlemm管的断端， 根据所 需靶眼压的不同， 分别顺着 Schlemm管绕行 360度或 270度或 180度或 90度， 剪断 导管， 将其置于 Schlemm中堵塞 Schlemm管， 阻止房水外流， 造成其眼压升高的 模型。 最后用 10-0聚丙烯线紧密缝合巩膜瓣 4-6针， 前房穿刺口注入平衡盐溶液 观察， 以不渗漏视为水密缝合， 再用 10-0聚丙烯线缝合结膜瓣 2针。 术后给予抗 炎药物， 监测眼压， 前节反应情况。

[0018] 本发明通过手术放置材料堵塞其房水流出通道 ， 造成眼压升高视神经损害的青 光眼动物模型， 通过这种方法制作出的慢性高眼压动物模型， 其眼压可根据堵 塞 Schlemm的范围不同进行调控。 并且可以根据不同动物种类 Schlemm管径而选 择不同规格尺寸的纤维导管， 完成 Schlemm管堵塞， 从而产生多种动物类型的慢 性高眼压模型。 。 兔眼、 猴眼的动物模型使用的纤维导管规格可采用长 10cm直 径 200μηι,导管头端球形直径为 250μηι， 其他动物可选择与其 Schlemm管径相匹配 的导管规格。 在慢性高眼压青光眼机制研究中更好地构建与 临床相契合的造模 动物及造模方法， 为进行慢性青光眼视神经损伤机制提供基础。

[0019] 以上所述仅是本发明的优选实施方式， 本发明的保护范围并不仅局限于上述实 施例， 凡属于本发明思路下的技术方案均属于本发明 的保护范围。 应当指出， 对于本技术领域的普通技术人员来说， 在不脱离本发明原理前提下的若干改进 和润饰， 这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。