С ДЕТЕРМИНИРОВАННЫМ СОДЕРЖАНИЕМ ЙОДА

Область техники

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу изготовления йо- дированных белков для применения в качестве биологически активных веществ, и может быть использовано для профилактики и лечения йододефицитных состояний человека и животных, в частности при производстве продуктов питания, биологически активных до- бавок к пище, энтерального и парэнтерального питания, лекарственных средств, ветери- нарных препаратов и кормов.

Уровень техники

Известен способ получения биологически активной добавки к пище, включающий осуществление процесса йодирования исходного белкового сырья его смешиванием с водным раствором неорганического йода при соотношении раствора неорганического йо- да к общему белку, выбранном (2-40): 1 , выполнение процесса ферментации исходной смеси сывороточных белков с водным раствором неорганического йода введением в неё буферной смеси реагентов - комплекса минеральных солей NaCI и фосфатов Na и К ре- акционной смесью ферментов, иммобилизованных на полупроницаемых мембранах или на инертных носителях, при этом процесс ферментации проводят при непрерывном кон- троле содержания йода в растворе, водный раствор йодированных белков очищают от макро примесей и микропримесей, в том числе и от неорганического йода, с использова- нием макро фильтрации, микрофильтрации и ультрафильтрации с последующей диа- фильтрацией водного раствора йодированных белков на ультрафильтрационной уста- новке, полученный раствор йодированных белков подвергают стерилизующей микро- фильтрации, затем сублимационной сушке с получением готового порошкового продукта (см. патент РФ N° 2212155, МПК А 23 L 1/30, 20.09.2003).

Однако, известный способ при своем использовании имеет следующие недостатки:

- не обеспечивает получение йодированных белков с содержанием и соотношением в них аминокислот - монойодтирозинов, дийодтирозинов и трийодтирозинов,

- не обеспечивает получение готового порошкового продукта с высоким содержани- ем детерминированного количества ковалентно связанного йода,

- не позволяет обеспечить получение готового порошкового продукта с необходи- мыми характеристиками распределения и аккумуляции органического йода в организме человека и животных,

- не позволяет обеспечить получение готового порошкового продукта с необходи- мыми характеристиками распределения и аккумуляции органического йода при участии дейодиназ в печени и в тканях и органах, - не обеспечивает получение в достаточном количестве промышленных объёмов йо- дированных молочных сывороточных белков,

- не может обеспечить получение йодированных молочных сывороточных белков с гипоаллергенными свойствами.

Раскрытие изобретения

Задачей изобретения является разработка способа изготовления йодированных белков для использования в качестве биологически активных веществ.

Техническим результатом является обеспечение получения йодированных белков (и/или йодированного гидролизата белков) с оптимальным содержанием в них йодиро- ванных аминокислотных остатков - монойодтирозинов, дийодтирозинов и трийодтирози- нов, обеспечение получения готового порошкового продукта с высоким содержанием де- терминированного количества ковалентно связанного йода, обеспечение получение гото- вого порошкового продукта с необходимыми характеристиками распределения и аккуму- ляции органического йода в организме человека и животных при участии дейодиназ в пе- чени, тканях и органах. Кроме того, техническим результатом является получение про- мышленных объёмов йодированных белков (и/или гидродизатов), в частности йодиро- ванных молочных сывороточных белков, в том числе с гипоаллергенными свойствами.

Технический результат достигается тем, что предложен способ получения йодиро- ванных белков и/или гидролизата белков, включающий:

- осуществление процесса йодирования исходного белкового сырья его смешиванием с водным раствором неорганического йода при соотношении раствора неорганического йода к общему белковому сырью, выбранном (2-40):1 ,

- выполнение процесса ферментации исходного белкового сырья с водным раствором неорганического йода введением в него буферной смеси реагентов - комплекса мине- ральных солей NaCI и фосфатов Na и К с реакционной смесью ферментов, иммобилизо- ванных на полупроницаемых мембранах или на инертных носителях,

при этом процесс ферментации проводят при непрерывном контроле содержания йода в растворе, водный раствор йодированных белков и/или гидролизата белков очищают от макропримесей и микропримесей, в том числе и от неорганического йода, с использова- нием макрофильтрации, микрофильтрации с последующей диафильтрацией водного рас- твора йодированных белков и/или гидролизата белков на ультрафильтрационной уста- новке,

- полученный раствор йодированных белков и/или гидролизата белков подвергают стерилизующей микрофильтрации, затем

- сублимационной или распылительной сушке с получением готового порошкового продукта, причем процесс йодирования исходного белкового сырья при его смешивании с вод ным раствором неорганического йода осуществляют при температуре 20°С-40°С введе- нием в него буферной смеси реагентов - комплекса минеральных солей на основе NaCI, содержащей 14-18 масс. % фосфата натрия и 22-28 масс. % ортофосфата калия при ста- бильности pH = 6 - 8 используемого исходного раствора реакционной смеси ферментов, в качестве которой используют смесь на основе лактопероксидазы, содержащей от 16 до 24 масс. % пероксид азы хрена и от 14 до 21 масс. % каталазы,

а ультрафильтрацию водного раствора йодированных белков и/или гидролизата бел- ков на ультрафильтрационной установке осуществляют в тангенциальном проточном ре- жиме с использованием мембранных модулей с пределом отсечения от 300 до 800 Да при pH 6,0 - 8,0.

В частных вариантах изобретения в качестве исходного белкового сырья используют белки животного, растительного и/или микробного происхождения и/или гидролизат таких белков.

В некоторых вариантах изобретения в качестве исходного белкового сырья используют а-лактальбумин, b-лактоглобулин, альбумин сыворотки крови, лактоферрин, иммуногло- булины и/или смесь перечисленных белков и/или гидролизат перечисленных белков.

В некоторых частных вариантах изобретения содержание остатков тирозина в гидро- лизате составляет 2-5 масс.%.

В результате осуществлении способа получают йодированные белки и/или гидролизат белков, представляющие собой готовый порошковый продукт с содержанием детермини- рованного (т.е. однозначно предопределенного, в строго определенных положениях и ко- личестве) ковалентно связанного йода в количестве 0, 5-4,0 масс. % в форме йодирован- ных остатков тирозина - монойодтирозина в количестве 55,0-75,0 масс. %, дийодтирозина - 24,0-43,5 масс. % и трийодтирозина - 1 ,0-1 , 5 масс.%.

Такие йодированные белки и/или гидролизаты белков могут быть использованы для профилактики и/или лечения йододефицитных состояний человека и животных.

Йодированные белки и/или гидролизаты белков по изобретению могут быть использо- ваны для производства продуктов питания, биологически активных добавок к пище, энте- рального и парентерального питания, лекарственных средств, ветеринарных препаратов, кормов для профилактики и/или лечения йододефицитных состояний человека или жи- вотных.

Способ осуществляется следующим образом. Выполняют процесс йодирования ис- ходного белкового сырья его смешиванием с водным раствором неорганического йода при соотношении раствора неорганического йода к общему белку, выбранном (2-40):1 . При осуществлении процесса йодирования могут быть использованы в качестве исходно- го белкового сырья белки животного, растительного и микробиального происхождения и/или их гидролизаты. В качестве исходного белкового сырья при выполнении процесса йодирования в частных случаях осуществления изобретения используют сывороточные белки (и/или их гидролизаты), в некоторых частных случаях осуществления изобретения используют а-лактальбумин, b-лактоглобулин, альбумин сыворотки крови, лактоферрин или иммунные глобулины, и/или смесь всех перечисленных белков и/или гидролизаты перечисленных белков с содержанием в гидрализатах тирозинов природного происхож- дения в количестве от 2 до 5 масс. %. При этом в качестве белков животного происхож- дения (или их гидролизатов) предпочтительно используют белки млекопитающих, в том числе человека, в частности в качестве сывороточных белков могут быть использованы белки сыворотки молока человека, коровы, козы и др.

Выполнение процесса йодирования исходных белков при их смешивании с водным раствором неорганического йода осуществляют при температуре 20°С-40°С введением в неё буферной смеси реагентов - комплекса минеральных солей на основе NaCI, содер- жащей 14-18 масс. % фосфата натрия и 22-28 масс. % ортофосфата калия при стабиль- ности pH = 6 - 8 используемого исходного раствора реакционной смеси ферментов, в том числе иммобилизованных на полупроницаемых мембранах или на инертных носителях. Причем в качестве исходного раствора реакционной смеси ферментов используют смесь на основе лактопероксидазы, содержащей от 16 до 24 масс. % пероксидазы хрена и от 14 до 21 масс. % каталазы, а процесс ферментации проводят при непрерывном контроле содержания йода в растворе.

Водный раствор йодированных белков очищают от макропримесей и микроприме- сей, в том числе и от неорганического йода, с использованием макрофильтрации, микро- фильтрации и ультрафильтрации с последующей диафильтрацией водного раствора йо- дированных белков на ультрафильтрационной установке в тангенциальном проточном режиме с использованием мембранных модулей с пределом отсечения от 300 до 800 Да при pH 6,0 - 8,0.

Полученный раствор йодированных белков (и/или гидролизата) подвергают стери- лизующей микрофильтрации, затем сублимационной или распылительной сушке с полу- чением готового порошкового продукта с содержанием детерминированного количества ковалентно связанного йода в количестве 0, 5-4,0 масс. % в форме содержащихся в йоди- рованных белках смеси йодированных аминокислот (йодированных остатков тирозина) - монойодтирозинов в количестве 55,0-75,0 масс. %, 24,0-43,5 масс. % дийодтирозинов и 1 ,0-1 ,5 масс. % трийодтирозинов.

Среди существенных признаков, характеризующих предложенный способ изготов- ления йодированных белков (и/или гидролизатов белков), в частности йодированных мо- лочных сывороточных белков, для использования в качестве биологически активных ве- ществ (или в составе композиций), отличительными являются:

- использование в предпочтительных вариантах осуществления изобретения в каче- стве исходного белкового сырья при выполнении процесса йодирования а- лактальбумина, b-лактоглобулина, альбумина сыворотки крови, лактоферрина или им- мунных глобулинов, или смеси всех перечисленных белков или гидролизатов перечис- ленных белков с содержанием в гидролизатах остатков тирозина природного происхож- дения (в составе пептидов) в количестве от 2 до 5 масс. %,

- осуществление процесса йодирования исходных белков (гидролизатов) при их смешивании с водным раствором неорганического йода при температуре 20°С-40°С вве- дением в неё буферной смеси реагентов - комплекса минеральных солей на основе NaCI, содержащего 14-18 масс. % фосфата натрия и 22-28 масс. % ортофосфата калия (NaCI - остальное) при стабильности pH = 6 - 8 используемого исходного раствора реак- ционной смеси ферментов, в качестве которой используют смесь на основе лактоперок- сидазы, содержащей от 16 до 24 масс. % пероксидазы хрена и от 14 до 21 масс. % ката- лазы (лактопероксидаза - остальное),

- осуществление ультрафильтрации водного раствора йодированных белков (гидро- лизатов) на ультрафильтрационной установке в тангенциальном проточном режиме с ис- пользованием мембранных модулей с пределом отсечения от 300 до 800 Да при pH 6,0 - 8,0,

- получение после выполнения ультрафильтрации и затем сублимационной или рас- пылительной сушки готового порошкового продукта с содержанием детерминированного ковалентно связанного йода в количестве 0, 5-4,0 масс. % в форме содержащихся в йоди- рованных белках (пептидах) смеси йодированных аминокислот (йодированных остатков тирозина) - монойодтирозинов в количестве 55,0-75,0 масс. %, 24,0-43,5 масс. % дийод- тирозинов и 1 ,0-1 , 5 масс.% трийодтирозинов,

- использование при осуществлении процесса йодирования в качестве исходного белкового сырья белков животного, растительного и микробного происхождения (и/или их гидролизатов).

Экспериментальные исследования предложенного способа изготовления йодиро- ванных белков для использования в качестве биологически активных веществ показали его высокую эффективность. Способ изготовления йодированных белков обеспечивает получение йодированных белков с оптимальным содержанием в них аминокислот - мо- нойодтирозинов, дийодтирозинов и трийодтирозинов, обеспечивает получение готового порошкового продукта с высоким содержанием детерминированного количества кова- лентно связанного йода, обеспечивает получение готового порошкового продукта с необ- ходимыми характеристиками распределения и аккумуляции органического йода в орга- низме человека и животных. Кроме того, предложенный способ обеспечивает получение готового порошкового продукта с необходимыми характеристиками распределения и ак- кумуляции органического йода при участии дейодиназ в печени и в тканях и органах, а также обеспечивает получение промышленных объёмов йодированных белков, в частно- сти йодированных молочных сывороточных белков, в том числе с гипоаллергенными свойствами.

Йодированные белки и/или гидролизаты белков по изобретению могут быть исполь- зованы для профилактики и/или лечения йододефицитных состояний человека и живот- ных. Для этого они могут быть использованы как в качестве биологически активных ве- ществ самостоятельно, так и в составе продуктов питания, биологически активных доба- вок к пище, энтерального и парентерального питания, лекарственных средств, ветери- нарных препаратов, кормов (но не ограничиваясь ими).

Для этого йодированные белки и/или гидролизаты белков по изобретению включают в состав указанных композиций в фармацевтически эффективном количестве, т.е. в коли- честве, эффективном для достижения желаемого результата. Йодированные белки и/или гидролизаты белков по изобретению могут быть включены в композицию вместе с обычно используемыми нетоксичными фармацевтически приемлемыми носителями и/или напол- нителями, хорошо известными специалистам в данной области, пригодными для изготов- ления растворов, таблеток, пилюль, капсул, драже, эмульсий, суспензий и любых других лекарственных форм. Лекарственные формы настоящего изобретения получают по стан- дартным методикам, хорошо известным специалистам в данной области.

Реализация предложенного способа изготовления йодированных белков, в частно- сти йодированных молочных сывороточных белков, для использования в качестве биоло- гически активных веществ (или в составе композиций) иллюстрируется следующими практическими примерами.

Пример 1. Выполнили процесс йодирования исходного белка в виде а- лактальбумина его смешиванием с водным раствором неорганического йода при соотно- шении раствора неорганического йода к общему белку, выбранном 2:1.

Выполнили процесс йодирования исходного сывороточного белка а-лактальбумина при его смешивании с водным раствором неорганического йода при температуре 30°С введением буферной смеси реагентов - комплекса минеральных солей на основе NaCI, содержащей 18 масс. % фосфата натрия и 22 масс. % ортофосфата калия при стабиль- ности pH = 6 используемого исходного раствора реакционной смеси ферментов, иммоби- лизованных на полупроницаемых мембранах. Причем в качестве исходного раствора ре- акционной смеси ферментов использовали смесь на основе лактопероксидазы, содер- жащей 16 масс. % пероксидазы хрена и 21 масс. % каталазы, а процесс ферментации проводили при непрерывном контроле содержания йода в растворе.

Водный раствор йодированных белков очистили от макропримесей и микроприме- сей, в том числе и от неорганического йода, с использованием макрофильтрации, микро- фильтрации и ультрафильтрации с последующей диафильтрацией водного раствора йо- дированных белков на ультрафильтрационной установке в тангенциальном проточном режиме с использованием мембранных модулей с пределом отсечения от 500 Да при pH

8,0.

Полученный раствор йодированных белков подвергли стерилизующей микрофиль- трации, затем сублимационной сушке с получением готового порошкового продукта с со- держанием детерминированного количества ковалентно связанного йода в количестве 2,5 масс. % в форме содержащихся в йодированных белках йодированных аминокислот- ных остатков - монойодтирозинов в количестве 75,0 масс. % с 24,0 масс. % дийодтирози- нов и с 1 ,0 масс.% трийодтирозинов.

Пример 2. Выполнили процесс йодирования исходного белка в виде b- лактоглобулина его смешиванием с водным раствором неорганического йода при соот- ношении раствора неорганического йода к общему белку, выбранном 10:1.

Выполнили процесс йодирования исходного сывороточного белка b-лактоглобулина при его смешивании с водным раствором неорганического йода при температуре 20°С введением буферной смеси реагентов - комплекса минеральных солей на основе NaCI, содержащей 14 масс. % фосфата натрия и 28 масс. % ортофосфата калия при стабиль- ности pH = 7 используемого исходного раствора реакционной смеси ферментов, иммоби- лизованных на инертных носителях. Причем в качестве исходного раствора реакционной смеси ферментов использовали смесь на основе лактопероксидазы, содержащей 18 масс. % пероксидазы хрена и 19 масс. % каталазы, а процесс ферментации проводили при непрерывном контроле содержания йода в растворе.

Водный раствор йодированных белков очистили от макропримесей и микроприме- сей, в том числе и от неорганического йода, с использованием макрофильтрации, микро- фильтрации и ультрафильтрации с последующей диафильтрацией водного раствора йо- дированных белков на ультрафильтрационной установке в тангенциальном проточном режиме с использованием мембранных модулей с пределом отсечения от 300 Да при pH 7,0.

Полученный раствор йодированных белков подвергли стерилизующей микрофиль- трации, затем распылительной сушке с получением готового порошкового продукта с со- держанием детерминированного количества ковалентно связанного йода в количестве 1 ,7 масс. % в форме содержащихся в йодированных белках йодированных аминокислот- ных остатков - монойодтирозинов в количестве 55,0 масс. % с 43,5 масс. % дийодтирози- нов и с 1 ,5 масс.% трийодтирозинов.

Пример 3. Выполнили процесс йодирования исходного белка в виде альбумина сы- воротки крови его смешиванием с водным раствором неорганического йода при соотно- шении раствора неорганического йода к общему белку, выбранном 20:1 .

Выполнили процесс йодирования исходного белка альбумина сыворотки крови при его смешивании с водным раствором неорганического йода при температуре 40°С введе- нием буферной смеси реагентов - комплекса минеральных солей на основе NaCI, содер- жащей 15 масс. % фосфата натрия и 23 масс. % ортофосфата калия при стабильности pH = 8 используемого исходного раствора реакционной смеси ферментов, иммобилизо- ванных на инертных носителях. Причем в качестве исходного раствора реакционной сме- си ферментов использовали смесь на основе лактопероксидазы, содержащей 24 масс. % пероксидазы хрена и 14 масс. % каталазы, а процесс ферментации проводили при не- прерывном контроле содержания йода в растворе.

Водный раствор йодированных белков очистили от макропримесей и микроприме- сей, в том числе и от неорганического йода, с использованием макрофильтрации, микро- фильтрации и ультрафильтрации с последующей диафильтрацией водного раствора йо- дированных белков на ультрафильтрационной установке в тангенциальном проточном режиме с использованием мембранных модулей с пределом отсечения от800 Да при pH 6,0.

Полученный раствор йодированных белков подвергли стерилизующей микрофиль- трации, затем сублимационной сушке с получением готового порошкового продукта с со- держанием детерминированного количества ковалентно связанного йода в количестве 0,7 масс. % в форме содержащихся в йодированных белках йодированных аминокислот- ных остатков - монойодтирозинов в количестве 65,0 масс. % с 34,0 масс. % дийодтирози- нов и с 1 ,0 масс.% трийодтирозинов.

Пример 4. Выполнили процесс йодирования исходного белка в виде лактоферрина его смешиванием с водным раствором неорганического йода при соотношении раствора неорганического йода к общему белку, выбранном 30:1.

Выполнили процесс йодирования исходного сывороточного белка лактоферрина при его смешивании с водным раствором неорганического йода при температуре 25°С введе- нием буферной смеси реагентов - комплекса минеральных солей на основе NaCI, содер- жащей 17 масс. % фосфата натрия и 26 масс. % ортофосфата калия при стабильности pH = 8 используемого исходного раствора реакционной смеси ферментов, иммобилизо- ванных на полупроницаемых мембранах. Причем в качестве исходного раствора реакци- онной смеси ферментов использовали смесь на основе лактопероксидазы, содержащей 22 масс. % пероксидазы хрена и 17 масс. % каталазы, а процесс ферментации проводили при непрерывном контроле содержания йода в растворе.

Водный раствор йодированных белков очистили от макропримесей и микроприме- сей, в том числе и от неорганического йода, с использованием макрофильтрации, микро- фильтрации и ультрафильтрации с последующей диафильтрацией водного раствора йо- дированных белков на ультрафильтрационной установке в тангенциальном проточном режиме с использованием мембранных модулей с пределом отсечения от 600 Да при pH 7,0.

Полученный раствор йодированных белков подвергли стерилизующей микрофиль- трации, затем сублимационной сушке с получением готового порошкового продукта с со- держанием детерминированного количества ковалентно связанного йода в количестве 0,5 масс. % в форме содержащихся в йодированных белках йодированных аминокислот- ных остатков - монойодтирозинов в количестве 60,0 масс. % с 38,5 масс. % дийодтирози- нов и с 1 ,5 масс.% трийодтирозинов.

Пример 5. Выполнили процесс йодирования исходного белка в виде сывороточных иммунных глобулинов их смешиванием с водным раствором неорганического йода при соотношении раствора неорганического йода к общему белку, выбранном 40:1.

Выполнили процесс йодирования исходного сывороточного белка иммунных глобу- линов при их смешивании с водным раствором неорганического йода при температуре 30°С введением буферной смеси реагентов - комплекса минеральных солей на основе NaCI, содержащей 16 масс. % фосфата натрия и 27 масс. % ортофосфата калия при ста- бильности pH = 7 используемого исходного раствора реакционной смеси ферментов, им- мобилизованных на полупроницаемых мембранах. Причем в качестве исходного раство- ра реакционной смеси ферментов использовали смесь на основе лактопероксидазы, со- держащей 21 масс. % пероксидазы хрена и 18 масс. % каталазы, а процесс ферментации проводили при непрерывном контроле содержания йода в растворе.

Водный раствор йодированных белков очистили от макропримесей и микроприме- сей, в том числе и от неорганического йода, с использованием макрофильтрации, микро- фильтрации и ультрафильтрации с последующей диафильтрацией водного раствора йо- дированных белков на ультрафильтрационной установке в тангенциальном проточном режиме с использованием мембранных модулей с пределом отсечения от 400 Да при pH 8,0.

Полученный раствор йодированных белков подвергли стерилизующей микрофиль- трации, затем распылительной сушке с получением готового порошкового продукта с со- держанием детерминированного количества ковалентно связанного йода в количестве 1 ,2 масс. % в форме содержащихся в йодированных белках йодированных аминокислот- ных остатков - монойодтирозинов в количестве 70,0 масс. % с 28,5 масс. % дийодтиро- зинов и с 1 ,5 масс. % трийодтирозинов.

Пример 6. Выполнили процесс йодирования исходного белка в виде смеси а- лактальбумина, b-лактоглобулина, альбумина сыворотки крови, лактоферрина и иммун- ных глобулинов её смешиванием с водным раствором неорганического йода при соотно- шении раствора неорганического йода к общему белковому сырью, выбранном 30:1.

Выполнили процесс йодирования исходного белкового сырья в виде смеси а- лактальбумина, b-лактальбумина, альбумина сыворотки крови, лактоферрина и иммун- ных глобулинов при её смешивании с водным раствором неорганического йода при тем- пературе 35°С введением буферной смеси реагентов - комплекса минеральных солей на основе NaCI, содержащей 18 масс. % фосфата натрия и 24 масс. % ортофосфата калия при стабильности pH = 6 используемого исходного раствора реакционной смеси фермен- тов, иммобилизованных на инертных носителях. Причем в качестве исходного раствора реакционной смеси ферментов использовали смесь на основе лактопероксидазы, содер- жащей 19 масс. % пероксидазы хрена и 16 масс. % каталазы, а процесс ферментации проводили при непрерывном контроле содержания йода в растворе.

Водный раствор йодированных белков очистили от макропримесей и микроприме- сей, в том числе и от неорганического йода, с использованием макрофильтрации, микро- фильтрации и ультрафильтрации с последующей диафильтрацией водного раствора йо- дированных белков на ультрафильтрационной установке в тангенциальном проточном режиме с использованием мембранных модулей с пределом отсечения от 700 Да при pH 6,0.

Полученный раствор йодированных белков подвергли стерилизующей микрофиль- трации, затем сублимационной сушке с получением готового порошкового продукта с со- держанием детерминированного количества ковалентно связанного йода в количестве 2,0 масс. % в форме содержащихся в йодированных белках йодированных аминокислот- ных остатков - монойодтирозинов в количестве 68,0 масс. % с 31 ,0 масс. % дийодтирози- нов и с 1 ,0 масс.% трийодтирозинов.

Пример 7. Выполнили процесс йодирования исходного белкового сырья в виде гид- ролизата a-лактальбумина с содержанием тирозинов природного происхождения в коли- честве 5 масс. % его смешиванием с водным раствором неорганического йода при соот- ношении раствора неорганического йода к общему белковому сырью, выбранном 25:1 .

Выполнили процесс йодирования исходного белкового сырья в виде гидролизата а- лактальбумина при его смешивании с водным раствором неорганического йода при тем- пературе 20°С введением буферной смеси реагентов - комплекса минеральных солей на основе NaCI, содержащей 15 масс. % фосфата натрия и 27 масс. % ортофосфата калия при стабильности pH = 7 используемого исходного раствора реакционной смеси фермен- тов, иммобилизованных на полупроницаемых мембранах. Причем в качестве исходного раствора реакционной смеси ферментов использовали смесь на основе лактопероксида- зы, содержащей 17 масс. % пероксидазы хрена и 20 масс. % каталазы, а процесс фер- ментации проводили при непрерывном контроле содержания йода в растворе.

Водный раствор йодированных пептидов очистили от макропримесей и микроприме- сей, в том числе и от неорганического йода, с использованием макрофильтрации, микро- фильтрации и ультрафильтрации с последующей диафильтрацией водного раствора йо- дированных белков на ультрафильтрационной установке в тангенциальном проточном режиме с использованием мембранных модулей с пределом отсечения от 300 Да при pH 7,0.

Полученный раствор йодированных пептидов подвергли стерилизующей микро- фильтрации, затем распылительной сушке с получением готового порошкового продукта с содержанием детерминированного количества ковалентно связанного йода в количе- стве 4,0 масс. % в форме содержащихся в йодированных пептидах йодированных амино- кислотных остатков на основе монойодтирозинов в количестве 70,0 масс. % с 29,0 масс. % дийодтирозинов и с 1 ,0 масс.% трийодтирозинов.

Пример 8. Выполнили процесс йодирования исходного белкового сырья в виде гид- ролизата b-лактоглобулина с содержанием тирозинов природного происхождения в коли- честве 3,5 масс. % его смешиванием с водным раствором неорганического йода при со- отношении раствора неорганического йода к общему белковому сырью, выбранном 35:1.

Выполнили процесс йодирования исходного белкового сырья в виде гидролизата b- лактоглобулина при его смешивании с водным раствором неорганического йода при тем- пературе 40°С введением буферной смеси реагентов - комплекса минеральных солей на основе NaCI, содержащего 14 масс. % фосфата натрия и 25 масс. % ортофосфата калия при стабильности pH = 7 используемого исходного раствора реакционной смеси фермен- тов, иммобилизованных на инертных носителях. Причем в качестве исходного раствора реакционной смеси ферментов использовали смесь на основе лактопероксид азы, содер- жащей 20 масс. % пероксидазы хрена и 21 масс. % каталазы, а процесс ферментации проводили при непрерывном контроле содержания йода в растворе.

Водный раствор йодированных пептидов очистили от макропримесей и микроприме- сей, в том числе и от неорганического йода, с использованием макрофильтрации, микро- фильтрации и ультрафильтрации с последующей диафильтрацией водного раствора йо- дированных белков на ультрафильтрационной установке в тангенциальном проточном режиме с использованием мембранных модулей с пределом отсечения от 800 Да при pH 8,0.

Полученный раствор йодированных пептидов подвергли стерилизующей микро- фильтрации, затем сублимационной сушке с получением готового порошкового продукта с содержанием детерминированного количества ковалентно связанного йода в количе- стве 3,1 масс. % в форме содержащихся в йодированных пептидах йодированных амино- кислотных остатков - монойодтирозинов в количестве 65,0 масс. % с 33,5 масс. % дийод- тирозинов и с 1 ,5 масс.% трийодтирозинов.

Пример 9. Выполнили процесс йодирования исходного белкового сырья в виде гид- ролизата альбумина сыворотки крови с содержанием тирозинов природного происхожде- ния в количестве 2 масс. % его смешиванием с водным раствором неорганического йода при соотношении раствора неорганического йода к общему белковому сырью, выбранном 15:1 .

Выполнили процесс йодирования исходного гидролизата альбумина сыворотки кро- ви при его смешивании с водным раствором неорганического йода при температуре 30°С введением буферной смеси реагентов - комплекса минеральных солей на основе NaCI, содержащего 16 масс. % фосфата натрия и 22 масс. % ортофосфата калия при стабиль- ности pH = 8 используемого исходного раствора реакционной смеси ферментов, иммоби- лизованных на полупроницаемых мембранах. Причем в качестве исходного раствора ре- акционной смеси ферментов использовали смесь на основе лактопероксидазы, содер- жащей 24 масс. % пероксидазы хрена и 18 масс. % каталазы, а процесс ферментации проводили при непрерывном контроле содержания йода в растворе.

Водный раствор йодированных пептидов очистили от макропримесей и микроприме- сей, в том числе и от неорганического йода, с использованием макрофильтрации, микро- фильтрации и ультрафильтрации с последующей диафильтрацией водного раствора йо- дированных белков на ультрафильтрационной установке в тангенциальном проточном режиме с использованием мембранных модулей с пределом отсечения от 400 Да при pH 6,0.

Полученный раствор йодированных пептидов подвергли стерилизующей микро- фильтрации, затем сублимационной сушке с получением готового порошкового продукта с содержанием детерминированного количества ковалентно связанного йода в количе- стве 1 ,2 масс. % в форме содержащихся в йодированных пептидах йодированных амино- кислотных остатков - монойодтирозинов в количестве 75,0 масс. % с 24,0 масс. % дийод- тирозинов и с 1 ,0 масс.% трийодтирозинов.

Пример 10. Выполнили процесс йодирования исходного белкового сырья в виде гидролизата лактоферрина с содержанием тирозинов природного происхождения в коли- честве 3 масс. % его смешиванием с водным раствором неорганического йода при соот- ношении раствора неорганического йода к общему белковому сырью, выбранном 20:1 .

Выполнили процесс йодирования исходного гидролизата лактоферрина при его смешивании с водным раствором неорганического йода при температуре 20°С введением буферной смеси реагентов - комплекса минеральных солей на основе NaCI, содержащей 18 масс. % фосфата натрия и 20 масс. % ортофосфата калия при стабильности pH = 6 используемого исходного раствора реакционной смеси ферментов, иммобилизованных на полупроницаемых мембранах. Причем в качестве исходного раствора реакционной смеси ферментов использовали смесь на основе лактопероксидазы, содержащей 23 масс. % пероксидазы хрена и 14 масс. % каталазы, а процесс ферментации проводили при непрерывном контроле содержания йода в растворе.

Водный раствор йодированных пептидов очистили от макропримесей и микроприме- сей, в том числе и от неорганического йода, с использованием макрофильтрации, микро- фильтрации и ультрафильтрации с последующей диафильтрацией водного раствора йо- дированных пептидов на ультрафильтрационной установке в тангенциальном проточном режиме с использованием мембранных модулей с пределом отсечения от 500 Да при pH 8,0.

Полученный раствор йодированных пептидов подвергли стерилизующей микро- фильтрации, затем распылительной сушке с получением готового порошкового продукта с содержанием детерминированного количества ковалентно связанного йода в количе- стве 1 ,0 масс. % в форме содержащихся в йодированных пептидах йодированных амино- кислотных остатков - монойодтирозинов в количестве 60,0 масс. % с 39,0 масс. % дийод- тирозинов и с 1 ,0 масс.% трийодтирозинов.

Пример 11. Выполнили процесс йодирования исходного белкового сырья в виде гидролизатов смеси а-лактальбумина, b-лактоглобулина, альбумина сыворотки крови, лактоферрина и иммунных глобулинов с содержанием тирозинов природного происхож- дения в количестве 5 масс. % его смешиванием с водным раствором неорганического йо- да при соотношении раствора неорганического йода к общему белковому сырью, вы- бранном 40:1.

Выполнили процесс йодирования исходного белкового сырья в виде гидролизатов смеси а-лактальбумина, b-лактальбумина, альбумина сыворотки крови, лактоферрина и иммунных глобулинов при их смешивании с водным раствором неорганического йода при температуре 40°С введением буферной смеси реагентов - комплекса минеральных солей на основе NaCI, содержащей 17 масс. % фосфата натрия и 28 масс. % ортофосфата ка- лия при стабильности pH = 7 используемого исходного раствора реакционной смеси ферментов, иммобилизованных на инертных носителях. Причем в качестве исходного раствора реакционной смеси ферментов использовали смесь на основе лактопероксида- зы, содержащей 18 масс. % пероксидазы хрена и 21 масс. % каталазы, а процесс фер- ментации проводили при непрерывном контроле содержания йода в растворе.

Водный раствор йодированных пептидов очистили от макропримесей и микроприме- сей, в том числе и от неорганического йода, с использованием макрофильтрации, микро- фильтрации и ультрафильтрации с последующей диафильтрацией водного раствора йо- дированных пептидов на ультрафильтрационной установке в тангенциальном проточном режиме с использованием мембранных модулей с пределом отсечения от 800 Да при pH 7,0.

Полученный раствор йодированных пептидов подвергли стерилизующей микро- фильтрации, затем распылительной сушке с получением готового порошкового продукта с содержанием детерминированного количества ковалентно связанного йода в количе- стве 3,0 масс. % в форме содержащихся в йодированных пептидах йодированных амино- кислотных остатков - монойодтирозинов в количестве 68,0 масс. % с 30,5 масс. % дийод- тирозинов и с 1 ,5 масс.% трийодтирозинов.

Пример 12. Выполнили процесс йодирования исходного белка животного происхож- дения в виде альбумина сыворотки крови крупного рогатого скота с содержанием тирози- на 2% его смешиванием с водным раствором неорганического йода при соотношении раствора неорганического йода к общему белку, выбранном 20:1.

Выполнили процесс йодирования исходного белка животного происхождения в виде о альбумина сыворотки крови крупного рогатого скота при его смешивании с водным рас- твором неорганического йода при температуре 30°С введением буферной смеси реаген- тов - комплекса минеральных солей на основе NaCI, содержащей 16 масс. % фосфата натрия и 26 масс. % ортофосфата калия при стабильности pH = 8 используемого исход- ного раствора реакционной смеси ферментов, иммобилизованных на полупроницаемых мембранах. Причем в качестве исходного раствора реакционной смеси ферментов ис- пользовали смесь на основе лактопероксидазы, содержащей 22 масс. % пероксидазы хрена и 17 масс. % каталазы, а процесс ферментации проводили при непрерывном кон- троле содержания йода в растворе.

Водный раствор йодированных белков очистили от макропримесей и микроприме- сей, в том числе и от неорганического йода, с использованием макрофильтрации, микро- фильтрации и ультрафильтрации с последующей диафильтрацией водного раствора йо- дированных белков на ультрафильтрационной установке в тангенциальном проточном режиме с использованием мембранных модулей с пределом отсечения от 600 Да при pH 7,0.

Полученный раствор йодированных белков подвергли стерилизующей микрофиль- трации, затем распылительной сушке с получением готового порошкового продукта с со- держанием детерминированного количества ковалентно связанного йода в количестве 0,8 масс. % в форме содержащихся в йодированных белках йодированных аминокислот- ных остатков - монойодтирозинов в количестве 70,0 масс. % с 29,0 масс. % дийодтирози- нов и с 1 ,0 масс.% трийодтирозинов.

Пример 13. Выполнили процесс йодирования исходного белка растительного проис- хождения в виде изолята соевых белков с содержанием тирозина 2% его смешиванием с водным раствором неорганического йода при соотношении раствора неорганического йо- да к общему белку, выбранном 15:1.

Выполнили процесс йодирования исходного растительного белка происхождения в виде изолята соевых белков при его смешивании с водным раствором неорганического йода при температуре 20°С введением буферной смеси реагентов - комплекса мине- ральных солей на основе NaCI, содержащей 15 масс. % фосфата натрия и 23 масс. % ор- тофосфата калия при стабильности pH = 7 используемого исходного раствора реакцион- ной смеси ферментов, иммобилизованных на полупроницаемых мембранах. Причем в качестве исходного раствора реакционной смеси ферментов использовали смесь на ос- нове лактопероксидазы, содержащей 24 масс. % пероксидазы хрена и 14 масс. % катала- зы, а процесс ферментации проводили при непрерывном контроле содержания йода в растворе.

Водный раствор йодированных белков очистили от макропримесей и микроприме- сей, в том числе и от неорганического йода, с использованием макрофильтрации, микро- фильтрации и ультрафильтрации с последующей диафильтрацией водного раствора йо- дированных белков на ультрафильтрационной установке в тангенциальном проточном режиме с использованием мембранных модулей с пределом отсечения от 700 Да при pH

6,0.

Полученный раствор йодированных белков подвергли стерилизующей микрофиль- трации, затем сублимационной сушке с получением готового порошкового продукта с со- держанием детерминированного количества ковалентно связанного йода в количестве 1 ,0 масс. % в форме содержащихся в йодированных белках йодированных аминокислот- ных остатков - монойодтирозинов в количестве 60,0 масс. % с 39,0 масс. % дийодтирози- нов и с 1 ,0 масс.% трийодтирозинов.

Пример 14. Выполнили процесс йодирования исходного белка микробиального про- исхождения в виде белкового изолята пекарских дрожжей с содержанием тирозина 3,5% его смешиванием с водным раствором неорганического йода при соотношении раствора неорганического йода к общему белку, выбранном 40:1.

Выполнили процесс йодирования исходного белка микробиального происхождения в виде белкового изолята пекарских дрожжей при его смешивании с водным раствором не- органического йода при температуре 35°С введением буферной смеси реагентов - ком- плекса минеральных солей на основе NaCI, содержащей 18 масс. % фосфата натрия и 28 масс. % ортофосфата калия при стабильности pH = 8 используемого исходного раствора реакционной смеси ферментов, иммобилизованных на полупроницаемых мембранах. Причем в качестве исходного раствора реакционной смеси ферментов использовали смесь на основе лактопероксидазы, содержащей 24 масс. % пероксидазы хрена и 14 масс. % каталазы, а процесс ферментации проводили при непрерывном контроле содер- жания йода в растворе.

Водный раствор йодированных белков очистили от макропримесей и микроприме- сей, в том числе и от неорганического йода, с использованием макрофильтрации, микро- фильтрации и ультрафильтрации с последующей диафильтрацией водного раствора йо- дированных белков на ультрафильтрационной установке в тангенциальном проточном режиме с использованием мембранных модулей с пределом отсечения от 500 Да при pH 7,0.

Полученный раствор йодированных белков подвергли стерилизующей микрофиль- трации, затем распылительной сушке с получением готового порошкового продукта с со- держанием детерминированного количества ковалентно связанного йода в количестве 1 ,5 масс. % в форме содержащихся в йодированных белках йодированных аминокислот- ных остатков - монойодтирозинов в количестве 70,0 масс. % с 28,5 масс. % дийодтирози- нов и с 1 ,5 масс.% трийодтирозинов.

Несмотря на то, что изобретение описано со ссылкой на раскрываемые варианты во- площения, для специалистов в данной области должно быть очевидно, что конкретные подробно описанные эксперименты приведены лишь в целях иллюстрирования настоя- щего изобретения и их не следует рассматривать как каким-либо образом ограничиваю- щие объем изобретения. Должно быть понятно, что возможно осуществление различных модификаций без отступления от сути настоящего изобретения.