SECTOR DE LA TÉCNICA

La presente invención describe:

1. Un método nuevo para la obtención de materiales constituidos por una matriz silícea que incluye en su seno nanopartículas de oro biosintetizadas y grafito.

2. Un procedimiento de obtención de un material compuesto de matriz silícea, mediante sonocatálisis, utilizando como catalizador un extracto vegetal que contiene nanopartículas de oro biosintetizadas mediante dicho extracto.

3. El uso de este material en la fabricación de sensores y biosensores amperométricos modificados.

4. El uso de este material en su utilización como bactericida.

ESTADO DE LA TÉCNICA

La fabricación del material objeto de la invención incluye la utilización de dos tecnologías desarrolladas en los últimos años: por un lado, la sonocatálisis aplicada a la tecnología sol-gel con la obtención de sonogeles y por otro, la síntesis de nanopartículas de oro.

El método sol-gel consiste básicamente en la formación de redes tridimensionales compuestas por elementos inorgánicos a través de dos reacciones químicas simultáneas: hidrólisis y condensación. La primera etapa es la hidrólisis del alcóxido precursor a baja temperatura, que puede ser catalizada por medio de un ácido o una base, obteniéndose una suspensión de partículas coloidales denominada sol, con la formación de grupos silanoles (Si-OH) y la liberación del alcohol correspondiente. La policondensación de los grupos silanoles, al irse eliminando el agua y el alcohol, forma una estructura tridimensional unida por enlaces siloxanos (Si-O-Si) denominada gel. Todo el proceso descrito se realiza a temperatura ambiente, siendo ésta una de las características del método. Las ventajas que pueden obtenerse del proceso sol-gel para la síntesis de materiales son la gran variedad de estructuras que se pueden obtener y la posibilidad de incorporar en su interior diversas especies, lo que determinan diferentes y múltiples aplicaciones.

La utilización de ultrasonidos de alta potencia constituye una alternativa para sintetizar geles basada en la sonocatálisis que evita el uso del disolvente y proporciona materiales con características especiales llamados "sonogeles" (Esquivias, L. and Zarzycki, J., in Current Topics on Non-Crystalline solids, M.D. Baró and M. Clavagueras Eds., World Scientific (1986) 409) (L. Esquivias and J. Zarzycki, Ultraestructure Procesing of advances materials, Ullman D.R., Ulrich D.R., Eds.; John Wiley & Sons, Inc., New York 1988, p 255).

En las últimas décadas, las nanopartículas metálicas y muy especialmente las de oro, han sido ampliamente utilizadas en diversos tipos de sensores y biosensores. Las AuNPs tienen la capacidad de producir la inmovilización de biomoléculas reteniendo su bioactividad, esta es una de las mayores ventajas para su utilización en biosensores. Debido a sus inusuales propiedades, el papel de las nanopartículas de oro ha sido múltiple, destacando entre otros la inmovilización y el marcado de biomoléculas (Y. Zhuo, R. Yuan, Y. Q. Chai, D. P. Tang, Y. Zhang, N.Wang, X. L. Li, Q. Zhu, Electrochem Commun., 7 (2005) 355) (D. T. Nguyen, D.-J. Kim, K.-S. Kim Micron, 42 (2011) 207), la catálisis de reacciones (J. Ftouni, M. Penhoat, J.S. Girardon, A. Addad, E. Payen, C. Rolando, Chem. Eng. J. 227 (2013) 103), la mejora de la transferencia electrónica directa (S. Liu, D. Leech, H. Ju, Anal. Lett., 36 (2003) 1), la funcionalización de su superficie mediante entrecruzamiento (E. Chow, T. R. Gengenbach, L. Wieczorek, B. Raguse, Sensors Act. B: Chem., 143 (2010) 704) (P. V. Baptista, G. Doria, P. Quaresma, M. Cavadas, C. S. Neves, I. Gomes, P. Eaton, E. Pereira, R. Franco Prog. Mol. Biol Transí., 104 (201 1) 427), etc. Por otro lado también son destacables las propiedades bactericidas y antimicrobianas de las nanopartículas (R. Guerra, E. Lima, A. Guzmán Microp. Mesop. Mat. 170 (2013) 62), que en este caso se encuentran potenciadas por la presencia de las biomoléculas que provienen del extracto vegetal con el que han sido sintetizadas. DESCRIPCIÓN DE LA INVENCIÓN.

El objeto de esta solicitud de patente lo constituye un procedimiento nuevo para la obtención de materiales constituidos por una matriz silícea que incluyen en su seno nanopartículas de oro biosintetizadas y grafito, los materiales obtenidos por el citado procedimiento y los usos del mismo.

En este procedimiento se utiliza la sonocatálisis, basada en el empleo de ultrasonidos de alta potencia sobre la mezcla precursora alcóxido-agua. En la fase inicial se obtiene un sol, utilizando como catalizador un extracto vegetal que contiene nanopartículas de oro biosintetizadas mediante dicho extracto, siguiendo el procedimiento descrito en la adición (P201300240) solicitada a la patente ES2364914. Posteriormente se añade grafito de alta pureza y grado espectroscópico, obteniendo, tras el proceso de gelificación y secado, un material compuesto sonogel

Como se ha apuntado anteriormente, la introducción de nanopartículas de oro en el interior del material sonogel se lleva a cabo utilizando como catalizador del proceso una disolución de nanopartículas de oro en el extracto vegetal que se ha utilizado para su síntesis. El valor de pH de las nanopartículas de oro, impide la gelificación del material Sonogel, por tanto su introducción en el interior del mismo no es viable. Las nanopartículas introducidas en la síntesis del Sonogel utilizando como vehículo el extracto vegetal con el que han sido obtenidas, tienen un pH más acido (entre 2,20 y 2,30) que permite la síntesis del Sonogel. Por otro lado, mediante el procedimiento presentado, incluyendo la nanopartículas en el proceso previo a la insonación, las nanopartículas quedan distribuidas uniformemente en el seno del material, haciendo que su superficie sea fácilmente renovable conservando su composición, estructura y propiedades.

Las nanopartículas de oro incluidas en el interior del material se han sintetizado siguiendo el procedimiento descrito en la adición (P201300240) solicitada a la patente ES2364914 (L.M. Cubillana Aguilera, M. Franco Romano, M.L.A. Gil Montero, I. Naranjo Rodríguez, J.L. Hidalgo Hidalgo de Cisneros and J.M. Palacios Santander, Ultrason. Sonochem., 18 (2011) 789). Este procedimiento permite sintetizar nanopartículas de oro partiendo de una disolución acuosa de un oxoácido u oxisal de oro, utilizando extracto de geranio (Pelargonium Zonale) como agente reductor y estabilizador, mediante la utilización de ultrasonidos de alta potencia. El procedimiento de fabricación de materiales mediante tecnología sonogel catalizada por extractos vegetales propuesto comprende al menos las siguientes etapas:

• Mezcla de metiltrimetoxisilano (MTMOS) con una disolución coloidal de nanopartículas de oro sintetizadas a partir de extractos vegetales.

• Insonación de la mezcla anterior durante 10 segundos y obtención del sol.

• Adición de grafito de alta calidad y grado espectroscópico.

• Rellenado del molde o del capilar (en el caso de sensores).

• Secado durante un tiempo rnínimo de cuatro horas y obtención del material sonogel.

La novedad de la invención que se presenta reside en los siguientes aspectos principales:

• Inclusión de nanopartículas de oro en el interior de la estructura del sonogel, utilizando como vehículo el extracto vegetal con el que se han obtenido, lo que simultáneamente modifica la naturaleza del material reticulado y uniformiza la distribución de las nanopartículas.

• Utilización de un extracto vegetal en la sonocatálisis del sonogel, confiriendo un carácter más ecológico al proceso mediante la sustitución del ácido mineral por un catalizador bioorgánico.

• Renovación de la superficie del material sin que se produzca un cambio en sus propiedades.

• Facilidad para incorporar nuevos modificantes en la superficie del material mediante entrecruzamiento (cross-linking) tales como rióles, enzimas, etc.

• Disminución de los tiempos de gelificación y secado del material.

En el caso de la utilización para la fabricación de electrodos, aumento de la superficie de respuesta, la sensibilidad electroquímica y disminución de la corriente capacitiva con respecto a otros materiales de electrodo. MODO DE REALIZACIÓN DE LA INVENCIÓN

Aparatos, materiales y reactivos

La insonación se llevó a cabo con un generador de ultrasonidos de alta potencia SONICATOR 4000 (Misonix Inc., Farmingdale, NY), que opera a 20 kHz con una potencia máxima de 600 W y está equipado con una punta de titanio de media pulgada de diámetro. Aunque la potencia máxima de salida del instrumento es de 600 W, en ningún momento, durante el proceso, se llegan a alcanzar potencias superiores a los 25 W.

Se utilizaron los siguiente reactivos:

• Metiltrimetilsiloxano (MIMOS) (Merck).

· Grafito de grado espectroscopia) (GMBH).

• Disolución coloidal de nanopartículas de oro en extracto de hojas de geranio {Pelargonium Zonale) utilizado para su síntesis, siguiendo el procedimiento descrito en la adición solicitada a la patente P201000284.

Procedimiento de preparación del material

a) En un recipiente de vidrio se adicionan 600 μL de metiltrimetoxisilano (MTMOS) y 50 μL de una disolución coloidal de nanopartículas de oro, sintetizadas a partir del extracto de hojas de geranio {Pelargonium Zonale), según el procedimiento descrito en la adición (P201300240) solicitada a la patente ES2364914.

b) A continuación, protegido por una camisa de agua con el fin de dispersar la energía sobrante suministrada, se introduce en el recipiente la sonda del generador de ultrasonidos, de forma que la punta quede levemente introducida en la muestra, y se procede a la insonación durante 10 segundos, comunicándole una energía de 0.083 J-mL ^-1 .

c) Como resultado de la hidrólisis se obtiene la fase sol, a la que se le añaden 600 mg de grafito, homogeneizando el conjunto. Posteriormente, comienza el proceso de gelificación. En este momento, el material adopta cualquier forma deseada con la utilización de un molde o bien se puede utilizar para la obtención de electrodos, rellenando capilares de vidrio.

d) El proceso de secado es de al menos cuatro horas.

APLICACIÓN INDUSTRIAL

Actualmente, la investigación científica encaminada hacia la fabricación de nuevos materiales presenta una elevada demanda. En este caso, la incorporación de nanopartículas de oro biosintetizadas puede dar lugar a diversas aplicaciones. Estas aplicaciones pueden llevarse a cabo tanto mediante el empleo directo del material en sí, como para la fabricación de sensores y biosensores adaptados a una amplia gama de muestras de interés de muy diverso tipo: biológico, agroalimentario, medioambiental, y un amplio etcétera. En este caso, además, la incorporación de nanopartículas metálicas mediante un proceso de biosíntesis podría permitir la aplicación del material fabricado como bactericida, con el valor añadido que el extracto de geranio pueda aportar de forma sinérgica.