La presente invención se refiere a un procedimiento de estabilización de poliaminas biogénicas, en particular putrescina, espermidina y cadaverina. Más concretamente, la invención se refiere a un procedimiento de estabilización de poliaminas biogénicas donde dichas poliaminas biogénicas se fijan en galactomananos con el fin de aumentar su estabilidad en tierra o en enmiendas orgánicas o en compoisiciones fertilizantes, esto es facilitando una concentración de estas poliaminas biogénicas que es más estable frente a la degradación en el tiempo.

Las poliaminas son moléculas de pequeño tamaño que se están presentes bacterias, plantas y tejidos animales, y ejercen importantes funciones biológicas, siendo esenciales en los procesos de crecimiento y diferenciación de células eucariotas en los seres vivos. Por sus características bioquímicas estén implicadas en un gran número de procesos celulares, como son en el crecimiento, el desarrollo vegetativo y, en determinadas situaciones, como respuesta al estrés. Por estos motivos pueden ser catalogadas como reguladoras del crecimiento vegetal (fitohormonas). Por su carácter básico, interactúan con los ácidos nucleicos, con papel estabilizante o como factores de crecimiento, de ahí que cada vez se les atribuya mayor importancia en la proliferación celular.

Las poliaminas más eminentes en plantas son la diamina putrescina, la triamina espermidina y la tetraamina espermina. Debido a su naturaleza policatiónica, pueden unirse y estabilizar a polímeros ricos en cargas negativas como es el ADN (Prescott, L.M. (199). Microbiología. McGraw-Hill Interamericana de España, S.A.U. ISBN 84-486-0261 -7), pero también a fosfolípidos y proteínas (Azcón-Bieto, J y Talón, M. (2000). Fundamentos de Fisiología Vegetal. Me Graw Hill Interamericana de España SAU. ISBN 84-486-0258-7). Dichas funciones se postulan igualmente para animales y microorganismos. En animales, las poliaminas derivan del metabolismo de los aminoácidos o bien proceden del metabolismo de bacterias intestinales o de la dieta, entrando en el organismo por circulación enterohepática. En mamíferos, los ejemplos más importantes de poliaminas son la espermina (cuatro grupos amino) y la espermidina (tres grupos amino), ambas formadas a partir de la descarboxilación de la omitiría, la cual forma un intermediario de dos grupos amino, la putrescina.

Con estas características las poliaminas influyen en la actividad celular y en gran número de procesos fisiológicos como son el crecimiento, desarrollo vegetal, el estrés biótico y abiótico (Guye et al., "Polyamine titre in relation to chill-sensitivity in Phaseolus sp", Journal of Experimental Botany 1986 v. 37, p. 1036 -1043,1986; Evans P.T. , Makmerg, R. "Do polyamines have role in plant development?" Annual Review of Plant Physiology and Molecular Biology, 1989. v. 87, p.519 -522; Faust M., Wang S.; "Polyamines in horticulturally important plants", Horticultural Reviews, 1992 v.14, p. 333 - 356; Bais H.P., Ravishankar G.A, "Role of polyamines in the ontogeny of plants and their biotechnological applications", Plant Cell Tissue and Organ Culture, 2002. v.69, p. 1-34).

Se encuentran en todas las células vegetales en tres estados diferentes (Evans y Malmberg 1989 supra; Galston. A.W., Kaur-Shawney, R., "Polyamines in plant physiology", Plant Physiology, 1990, v.94, p. 406 - 410):

- Estado libre, en el cual son activas electrostáticamente, es decir, tienen la posibilidad de asociarse con moléculas cargadas negativamente (técnicamente llamadas aniones).

- Estado ligado soluble, en el cual las poliaminas están formando complejos con compuestos de bajo peso molecular y son solubles en el citoplasma de la célula y están protegidas contra la degradación durante su transporte a través de la planta.

- Estado ligado insoluble, cuando están unidas a macromoléculas como la celulosa de la pared celular y a sitios aniónicos de las membranas. Debido al alto peso molecular de este complejo, las poliaminas en este estado no se presentan en el citoplasma celular.

Así, las poliaminas biogénicas actualmente se consideran como reguladores del crecimiento y desarrollo de plantas por su efecto demostrado sobre el crecimiento, la división y la diferenciación celular a bajas concentraciones. Por ejemplo, por su carácter policatiónico, pueden unirse a moléculas cargadas negativamente como ácidos nucleicos, proteínas o fosfolípidos, alterando la expresión génica y la actividad de ciertos enzimas, así como vanando la fluidez y la permeabilidad de las membranas biológicas. En algún caso, las poliaminas actúan como reserva de nitrógeno, constituyendo la única fuente del mismo. Su biosíntesis está muy relacionada con la de la fitohormona gaseosa etileno, ya que la S- adenosilmetionina es el intermediario común de ambas rutas metabólicas. Este reparto de la S-adenosilmetionina puede tener importantes implicaciones fisiológicas. Las poliaminas pueden conjugarse con ácidos hidroxicinámicos y desempeñar funciones, todavía poco claras, en los procesos de diferenciación, floración y maduración; por otra parte, tienen efecto sobre la resistencia a virus y hongos en ciertas plantas. La pared celular es uno de los compartimentos celulares más importantes en relación con el metabolismo degradativo de poliaminas, destacando el aumento de la conjugación de poliaminas en la pared celular durante el envejecimiento celular (Gallardo, M., Matilla, A., Muñoz de Rueda, P. y Sánchez Calle, I.M. Departamento de Biología Vegetal. Universidad de Granada, Ars Pharm.37(1 ), 17-27, (1996)). Las poliaminas biogénicas son también un elemento importante en la respuesta a estrés de las plantas además de promover la germinación de las semillas. Por ejemplo, Muhammad Farooq y col. demuestran que la aplicación de espermidina o putrescina o espermina estimula la germinación en plantas de trigo ("Evaluating surface drying and re-drying for wheat seed pnming with polyamines: effects on emergence, early seedling growth and starch metabolism", Muhammad Farooq et al., Acta Physiol Plant (201 1 ) 33:1707-1713 DOI 10.1007/s1 1738-010-0707-31 ).

Por otro lado, Hammad Aziz Khan y col. demuestran que la aplicación de diferentes poliaminas induce también la germinación de semillas de pimiento ("Exogenous application of polyamines improves germination and early seedling growth of hot pepper", Hammad Aziz Khan et al.). Otros investigadores han demostrado que la aplicación de poliaminas aumenta la resistencia al frió ("Seed polyamines metabolism induced by seed priming with spermidine and 5-aminolevulinic acid for chilling tolerance improvement in rice (Oryza sativa L.) seedlings", Mohamed Sheteiwya, B. et al.). La aplicación de las poliaminas a las plantas se puede realizar de diferentes formas. Se pueden aplicar de forma foliar (Ame can-Eurasian J. Agrie. & Environ. Sci., 13 (4): 479-497, 2013 ISSN 1818-6769© IDOSI Publications, 2013; E. Darwish, Plant Physiology Section, Agricultural Botany Department, Faculty of Agriculture, Cairo University, "Effect of Putrescine and Humic Acid on Growth, Yield and Chemical Composition of Cotton Plants Grown under Saline Soil Conditions"; Communications in Soil Science and Plant Analysis ISSN: 0010-3624 (Print) 1532- 2416 (Online) Journal, "Effects of Putrescine Foliar Spray on Nutrient Accumulation, Physiology, and Yield of Wheat", Tamoor Ul Hassan & Asghari Baño) o se pueden aplicar sobre la semilla o directamente en el suelo ("Effect of biofertilizers and putrescine amine on the physiological features and productivity of date palm (Phoenix dactylifera, L.) grown on reclaimed-salinized soil", Helaly M. et al., Trees DOI 10.1007/S00468-016-1353-16).

Sin embargo, estas poliaminas biogénicas son degradadas con gran facilidad por la gran mayoría de microorganismos. Por ello, la aplicación se acostumbra a realizar vía foliar o mediante aplicación directa sobre la raíz. Si la aplicación es directamente al suelo se tiene que aplicar una dosis muy superior (10X a 100X) para que el efecto sea visible. Esto es debido a la corta vida media que tienen en el suelo. Por este mismo motivo, la incorporación de este tipo de productos en enmiendas orgánicas es inviable puesto que la alta actividad biológica de estas las degrada rápidamente y cuando la enmienda se aplica al suelo ya no presenta estas poliaminas. Dados los efectos beneficiosos que estas poliaminas biogénicas tienen sobre las plantas descritos anteriormente, un objeto de la presente invención es proporcionar un procedimiento de estabilización de dichas poliaminas que permita que éstas mantengan su concentración en tierra o en enmiendas orgánicas, haciéndolas más estables frente a la degradación con el tiempo. Así un objetivo de la invención es un procedimiento de estabilización de las poliaminas biogénicas putrescina, espermidina y cadaverina que evite su rápida degradación una vez son aplicadas a la tierra o a algún sustrato orgánico, como diferentes tipos de compost, turbas, sustratos fibrosos de uso en invernadero, y similares, facilitando que éstas mantengan su concentración en el tiempo. Este objetivo se logra mediante un procedimiento de estabilización en el que las poliaminas biogénicas putrescina, cadaverina y espermidina se estabilizan mediante su fijación en galactomananos. Sin aludir a ninguna teoría en particular, y dado que los galatomananos son polisacáridos de muy alta viscosidad a muy baja concentración, se piensa que la entrada y el libre movimiento de las bacterias en su seno podría resultar dificultoso y lento. Por otra parte, las poliaminas pueden quedar retenidas en la matriz del polisacárido, liberándose de forma gradual y lenta.

A este respecto, los galactomananos son biopolímeros de tipo polisacárido formados por un esqueleto de mañosa con ramificaciones formadas por unidades de galactosa. Más específicamente el esqueleto está formado por unidades β-D- manopiranosa unidas por enlaces (1→4), con ramificaciones a-D-galactopiranosa unidas por enlaces (1→6). En orden creciente de relación manosa:galactosa, estos biopolímeros se disinguen en:

• goma de fenogreco, manosa:galactosa ~1 : 1

• goma guar, manosa:galactosa ~2: 1

· goma tara, manosa:galactosa ~3: 1

• goma garrofín, manosa:galactosa ~4: 1

Es bien conocido el uso de galactomananos en productos alimenticios para aumentar la viscosidad de la fase acuosa como estabilizantes. Así, por ejemplo, la goma guar y la goma garrofín se utilizan frecuentemente en la fabricación de helados para mejorar la textura y reducir el goteo. La goma garrofín se utiliza ampliamente en los quesos crema, preparaciones de frutas y aderezos para ensalada. La goma tara está experimentando una creciente aceptación como ingrediente alimentario, pero aún se utiliza mucho menos que la guar o garrofín. La goma guar es la que tiene mayor uso en alimentos. Los galactomananos son componentes de la pared celular de los hongos Aspergillus y se liberan durante su crecimiento. La detección de galactomananos en sangre es un método útil para el diagnóstico de aspergilosis invasiva en humanos.

En el artículo de Fairchild RM, Ellis PR, Byrne AJ, Luzio SD, Mir MA, "A new breakfast cereal containing guar gum reduces postprandial plasma glucose and insulin concentrations in normal-weight human subjects", Br J Nutr . 1996; 76: 63- 73) se indica que la goma guar, por ejemplo, debido a su viscosidad, retarda la absorción intestinal de nutrientes..

En el artículo "Effect of a galactomannan coating on mango postharvest physicochemical quality parameters and physiology", Roseane P. Aguiar et. Al., Fruits, 201 1 , vol.66, p. 269-278 © 201 1 Cirad/EDP Sciences, se describe la eficiencia de un revestimiento de galactomanano para reducir la pérdida de peso y el retraso en la maduración del mango.

Por ejemplo en la US 2891050 se describe un proceso para la obtención de galactomanano a partir de semillas de leguminosas. Así, el procedimiento de estabilización de las poliaminas biogénicas putrescina, cadaverina y espermidina de la invención se caracteriza por la incorporación de galactomanano a una solución acuosa de las poliaminas citadas.

En las figuras se describen diversos los resultados de diversos ejemplos de realización de la invención: Figura 1 : Gráfico que muestra la estabilidad de una solución acuosa de putrescina en tierra por la adición de goma guar frente a una solución control de putrescina;

Figura 2: Gráfico que muestra la estabilidad de una solución acuosa de putrescina en estiércol compostado por la adición de goma guar frente a una solución control de putrescina;

Figura 3: Gráfico que muestra la estabilidad de una solución acuosa de putrescina en materia orgánica procedente de desechos urbanos compostados por la adición de goma guar frente a una solución control de putrescina; Figura 4: Gráfico que muestra la estabilidad de una solución acuosa de putrescina en materia orgánica proveniente de lodos de depuradora compostados por la adición de goma guar frente a una solución control de putrescina; Figura 5: Gráfico que muestra la estabilidad de una solución acuosa de cadaverina en tierra por la adición de goma garrofín frente a una solución control de cadaverina;

Figura 6: Gráfico que muestra la estabilidad de una solución acuosa de cadaverina en materia orgánica proveniente de estiércol de vaca compostado por la adición de goma garrofín frente a una solución control de cadaverina;

Figura 7: Gráfico que muestra la estabilidad de una solución acuosa de cadaverina en materia orgánica procedente de desechos urbanos compostados por la adición de goma garrofín frente a una solución control de cadaverina;

Figura 8: Gráfico que muestra la estabilidad de una solución acuosa de cadaverina en materia orgánica proveniente de lodos de depuradora compostados por la adición de goma garrofín frente a una solución control de cadaverina;

Figura 9: Gráfico que muestra la estabilidad de una solución acuosa de cadaverina en tierra por la adición de posos de café deshidratados, 27,36% de riqueza en galactomananos, frente a una solución control de cadaverina; Figura 10: Gráfico que muestra la estabilidad de una solución acuosa de cadaverina en materia orgánica proveniente de estiércol de vaca compostado por la adición de posos de café deshidratados, 27,36% de riqueza en galactomananos, frente a una solución control de cadaverina; Figura 1 1 : Gráfico que muestra la estabilidad de una solución acuosa de cadaverina en materia orgánica proveniente de desechos urbanos compostados por la adición de posos de café deshidratados, 27,36% de riqueza en galactomananos, frente a una solución control de cadaverina; Figura 12: Gráfico que muestra la estabilidad de una solución acuosa de cadaverina en materia orgánica proveniente de lodos de depuradora compostados por la adición de posos de café deshidratados, 27,36% de riqueza en galactomananos, frente a una solución control de cadaverina.

Tal como se ha indicado anteriormente, el procedimiento de estabilización, en tierra o en enmiendas orgánicas o en composiciones fertilizantes, de las poliaminas biogénicas, en particular putrescina, cadaverina y espermidina, de la invención se caracteriza por la incorporación de galactomananos a una solución acuosa al menos una de las poliaminas citadas. En este contexto, por tierra o enmiendas orgánicas se entiende bien suelos como tales o bien materia orgánica proveniente, por ejemplo, de estiércol de vaca compostado, desechos urbanos compostados, lodos de depuradora compostados, y similares.

En una forma de realización de la invención, el galactomanano es goma guar deshidratada. En otra forma de realización, el galactomanano es goma garrofín deshidratada. Aun en otra forma de realización, los galactomananos se aportan a la solución acuosa de las poliaminas biogénicas en forma de posos de café deshidratados, ya que estos contienen en general más de un 25% de galactomananos. En una realización preferente, la proporción de goma guar o de goma garrofín deshidratada añadida a la solución acuosa de poliaminas biogénicas es del 25% en peso.

Dados los efectos beneficiosos que estas poliaminas biogénicas tienen sobre las plantas, otro objeto de la presente invención es el uso de galactomananos como estabilizadores de una solución de poliaminas biogénicas en una composición fertilizante o en una enmienda orgánica, así como aquella composición fertilizante o enmienda orgánica que incluye una solución de poliaminas biogénicas estabilizadas con glucomananos, al igual que el uso de la solución estabilizada copn galactomananos de poliaminas biogénicas como fertilizante. Ejemplo 1

Se prepara una muestra de 25 gramos de goma guar deshidratada a la que se incorporan 70 gramos de agua mezclada con 5 gramos de putrescina (Producto GGP), siendo la riqueza en putrescina del 5%. Se prepara un producto control consistente en agua con un 5% de putresceina (Producto CP). Se aplican convencionalmente la muestra y el control (GGP y CP) en tierra a razón de 1 gramo por kilogramo de tierra, realizándose un control de la concentración de putrescina en tierra durante 7 días. Los resultados se muestran en la figura 1 . Como se deriva de esta figura, a partir del tercer día la estabilidad del control es nula, mientras que la de la muestra conteniendo goma guar apenas disminuye.

Ejemplo 2

Los productos GGP y CP preparados anteriormente se aplican ahora en materia orgánica proveniente de estiércol de vaca compostado a razón de 1 gramo por kilogramo de compost, realizándose un control de la concentración de putrescina en el compost durante 7 días. Los resultados se muestran en la figura 2. Como se deriva de esta figura, a partir del segundo día la estabilidad del control es nula, mientras que la de la muestra conteniendo goma guar apenas disminuye.

Ejemplo 3

Los productos GGP y CP preparados anteriormente se aplican ahora en materia orgánica proveniente de desechos urbanos compostados a razón de 1 gramo por kilogramo de compost, realizándose un control de la concentración de putrescina en el compost durante 7 días. Los resultados se muestran en la figura 3. Como se deriva de esta figura, a partir del segundo día la estabilidad del control es nula, mientras que la de la muestra conteniendo goma guar apenas disminuye. Ejemplo 4

Los productos GGP y CP preparados anteriormente se aplican ahora en materia orgánica proveniente de lodos de depuradora compostados a razón de 1 gramo por kilogramo de compost, realizándose un control de la concentración de putrescina en el compost durante 7 días. Los resultados se muestran en la figura 4. Como se deriva de esta figura, a partir del tercer día la estabilidad del control es nula, mientras que la de la muestra conteniendo goma guar apenas disminuye. Ejemplo 5

Se prepara una muestra de 25 gramos de goma garrofín deshidratada a la que se incorporan 70 gramos de agua mezclada con 5 gramos de cadaverina (Producto GGC), siendo la riqueza en cadaverina del 5%. Se prepara un producto control consistente en agua con un 5% de cadaverina (Producto CC). Se aplican convencionalmente la muestra y el control (GGC y CC) en tierra a razón de 1 gramo por kilogramo de tierra, realizándose un control de la concentración de putrescina en tierra durante 7 días. Los resultados se muestran en la figura 5. Como se deriva de esta figura, a partir del tercer día la estabilidad del control es nula, mientras que la de la muestra conteniendo goma garrofín apenas disminuye.

Ejemplo 6

Se aplican convencionalmente la muestra y el control (GGC y CC) en materia orgánica proveniente de estiércol de vaca compostado a razón de 1 gramo por kilogramo de tierra, realizándose un control de la concentración de putrescina en tierra durante 7 días. Los resultados se muestran en la figura 6. Como se deriva de esta figura, a partir del segundo día la estabilidad del control es nula, mientras que la de la muestra conteniendo goma garrofín apenas disminuye.

Ejemplo 7

Se aplican convencionalmente la muestra y el control (GGC y CC) en materia orgánica proveniente de desechos urbanos compostados a razón de 1 gramo por kilogramo de compost, realizándose un control de la concentración de cadaverina en tierra durante 7 días. Los resultados se muestran en la figura 7. Como se deriva de esta figura, a partir del segundo día la estabilidad del control es nula, mientras que la de la muestra conteniendo goma garrofín apenas disminuye. Ejemplo 8

Se aplican convencionalmente la muestra y el control (GGC y CC) en materia orgánica proveniente de lodos de depuradora compostados a razón de 1 gramo por kilogramo de compost, realizándose un control de la concentración de cadaverina en tierra durante 7 días. Los resultados se muestran en la figura 8. Como se deriva de esta figura, a partir del tercer día la estabilidad del control es nula, mientras que la de la muestra conteniendo goma garrofín apenas disminuye. Ejemplo 9

Se prepara una muestra de 75 gramos de posos de café deshidratados (análisis: 27,36% de nqueza en galactomananos) a la que se incorporan 22 gramos de agua mezclada con 3 gramos de cadaverina (Producto GCC), siendo la riqueza en cadaverina del 3%. Se prepara un producto control consistente en agua con un 3% de cadaverina (Producto CC). Se aplican convencionalmente la muestra y el control (GCC y CC) en tierra a razón de 1 gramo por kilogramo de tierra, realizándose un control de la concentración de cadaverina en tierra durante 7 días. Los resultados se muestran en la figura 9. Como se deriva de esta figura, a partir del tercer día la estabilidad del control es nula, mientras que la de la muestra conteniendo galactomananos apenas disminuye.

Ejemplo 10

Se aplican convencionalmente la muestra y el control (GCC y CC) en materia orgánica proveniente de estiércol de vaca compostado a razón de 1 gramo por kilogramo de compost, realizándose un control de la concentración de cadaverina en tierra durante 7 días. Los resultados se muestran en la figura 10. Como se deriva de esta figura, a partir del segundo día la estabilidad del control es nula, mientras que la de la muestra conteniendo galactomananos apenas disminuye.

Ejemplo 11 Se aplican convencionalmente la muestra y el control (GCC y CC) en materia orgánica proveniente de desechos urbanos compostados a razón de 1 gramo por kilogramo de compost, realizándose un control de la concentración de cadaverina en tierra durante 7 días. Los resultados se muestran en la figura 1 1 . Como se deriva de esta figura, a partir del segundo día la estabilidad del control es nula, mientras que la de la muestra conteniendo galactomananos apenas disminuye.

Ejemplo 12

Se aplican convencionalmente la muestra y el control (GCC y CC) en materia orgánica proveniente de lodos de depuradora compostados a razón de 1 gramo por kilogramo de compost, realizándose un control de la concentración de cadaverina en tierra durante 7 días. Los resultados se muestran en la figura 12. Como se deriva de esta figura, a partir del cuarto día la estabilidad del control es nula, mientras que la de la muestra conteniendo galactomananos apenas disminuye.