本発明は、NFATシグナル阻害作用、又は育 毛作用を有する、医薬品、外用剤、化粧品等 を提供することに関する。

 本願発明者は、NFATシグナル阻害作用又は 育毛作用を有する物質について鋭意研究を重 ねた結果、上記式(I)で表される化合物、特に アメリカンアンジェリカに含まれていた既知 化合物及び上記式(III)の新規化合物に優れたN FATシグナル阻害作用及び育毛作用があること から、上記式(I)で表される化合物がNFATによ� �転写促進活性の亢進に起因する疾患の予防� �改善或いは治療、又は育毛・養毛、発毛促� �等の効果を発揮する、医薬品、外用剤、化� �品等として有用であることを見出した。

 本発明のNFATシグナル阻害剤及び育毛剤(� �下、「NFATシグナル阻害剤等」とも云う)によ れば、NFATによる転写促進活性の亢進に起因� �る症状や疾患の予防、改善或いは治療又は� �毛・養毛が可能となる。

 本発明に係わるNFATシグナル阻害剤等に使用 する活性成分は、アメリカンアンジェリカ植 物又は当該植物の抽出物などから得ることが できる。ここで、アメリカンアンジェリカと は、学名をAngelica atropurpureaと称し、セリ科� �分類される植物である。
 ここで、「活性成分」とは、次の一般式(I)� ��示されるクマリン誘導体若しくは薬理学的� ��許容されるその塩である。
 一般式(I)に示すように、上記活性成分は、� ��マリン誘導体の中でもアンギュラー型クマ� ��ン誘導体である。後記実施例に示すように� ��アメリカンアンジェリカを分画し、活性成� ��を単離する工程において、インペラトリン� ��キサントトキシン等のリニア型フラノクマ� ��ン誘導体を含む画分にはNFATシグナル阻害活 性が全く或いは殆ど認められなかったのに対 し、本発明に係るアンギュラー型フラノクマ リン誘導体を含む画分、更に単離した成分A� �成分B及び成分Cには強いNFATシグナル阻害活� �が認められたことから、本発明に係るアン� �ュラー型フラノクマリン誘導体は、既知のNF ATシグナル阻害剤であるインペラトリン等の� ��ニア型フラノクマリン誘導体に比し、優れ� ��NFATシグナル阻害活性作用を有するものとし て見出されたものである。

 上記一般式(I)中、R ¹ 及びR ² は、各々同じであっても異なっていてもよく 、水素原子又は一般式(II):

で示される基(上記一般式(II)中、R ³ は炭素数1~20の直鎖又は分枝のアルキル基又� �アルケニル基を示す)である。

 すなわち、上記活性成分として使用できる� ��マリン誘導体は、上述のように規定したR ¹ 、R ² 及びR ³ の範囲で種々の化合物を含むことになる。
 特に、上記R ¹ としては、アンゲロイル基、イソバレロイル 基及びセネシオイル基からなる群から選ばれ る官能基であることが好ましい。また、上記 R ² はアンゲロイル基、イソバレロイル基、2メ� �ルブチル基及びセネシオイル基からなる群� �ら選ばれる官能基であることが好ましい。
 さらに、上記R ² がアンゲロイル基、イソバレロイル基、2メ� �ルブチル基又はセネシオイル基であるクマ� �ン誘導体を、脱アシル化することによって� �マリン骨格の3’位をヒドロキシル基(上記R ² が水素原子の場合に相当)とすることができ� �。

 なかでも、上記活性成分としては、R ¹ がアンゲロイル基であり、R ² がアンゲロイル基であるクマリン誘導体;R ¹ がイソバレロイル基であり、R ² がアンゲロイル基であるクマリン誘導体、及 びR ¹ がセネシオイル基であり、R ² がアンゲロイル基であるクマリン誘導体が好 ましい。また、上記活性成分としては、これ らクマリン誘導体を脱アシル化して得られる アンギュラー型フロクマリン誘導体も好まし い。

 特に、R ¹ がアンゲロイル基であり、R ² がアンゲロイル基であるクマリン誘導体は、 アルカンジェリシンとして抗腫瘍、抗炎症作 用が知られた化合物であり、また、R ¹ がイソバレロイル基であり、R ² がアンゲロイル基であるクマリン誘導体、例 えば3’-angeloyloxy-4’-isovaleryloxy-2’,3’-dihydroo roselolは、公知化合物であるが、これらは、� �記実施例に示すように、本発明において、� �毛活性及びNFATシグナル阻害活性を有するこ� ��が明らかになったものである。
 さらに、R ¹ がセネシオイル基であり、R ² がアンゲロイル基であるクマリン誘導体、例 えば3’-angeloyloxy-4’-senecioyloxy-2’,3’-dihydroor oselolは、後記実施例に示すように、本発明に おいて、NFATシグナル阻害活性を有する新規� �合物として見出されたものである。

 また、上記化学式(I)で示される公知化合物� ��しては、例えば、アサマンチン(Athamantin)、� ��ニフォリンB(Cniforin B)、エデュリシンII(Eduli sin II)及びエデュリシンV(Edulisin V)等が挙げ� �れる。
 なお、上記活性成分として、これら公知化� ��物及び新規化合物から選ばれる1種又は2種� �上のものを使用してもよい。

 ここで、本発明のクマリン誘導体には、� ��述のように、公知の化学合成法により得ら� ��るものや、これを活性の主体成分として含� ��する植物抽出物若しくはその精製物や単離� ��も包含される。

 なお、必要に応じて、上記植物等抽出物� ��、活性炭処理、液体クロマトグラフィー、� ��々分配、ゲルろ過、精密蒸留等の分離精製� ��術に供し、当該抽出物から、不活性な夾雑� ��等を除去し、目的の化合物を精製及び単離� ��てもよい。

 一例として、活性成分であるクマリン誘� ��体、特に上述したアルカンジェリシン、3’ -angeloyloxy-4’-isovaleryloxy-2’,3’-dihydrooroselol及 び3’-angeloyloxy-4’-senecioyloxy-2’,3’-dihydroorose lolについては、セリ科植物(好ましくは、ア� �リカンアンジェリカ植物)又はその抽出物か� ��、上記クマリン誘導体、特にこれら化合物� ��ら選ばれる1種又は2種以上のものを活性の� �体成分として含有する画分(以下、「活性画� ��」とも云う)を得ること又はこれらから目的 の化合物を単離することができる。また、こ れらの中間体を植物から抽出し、次いで化学 合成により目的物を得ても良い。

 ここで、上記植物の全草、葉、茎、花、� ��実、種子、根茎又は根等を、そのまま、破� ��、粉砕、搾取して用いるか、又はこれら処� ��されたものを乾燥若しくは粉末化して用い� ��ことができる。用いる部位としては、根を� ��使用するのが好ましい。

 上記植物の抽出物とは、当該植物を一定� ��度(低温、常温又は加温)下にて抽出するこ� �;又はソックスレー抽出器等の抽出器具を用� ��て抽出すること等の抽出手段により得られ� ��各種溶剤抽出液、その希釈液、その濃縮液� ��はその粉末を意味するものである。抽出手� ��は、具体的には、固液抽出、液液抽出、浸� ��、煎出、浸出、還流抽出、超音波抽出、マ� ��クロ波抽出、攪拌等の手段を用いることが� ��きる。

 上記植物抽出物を得るために用いられる抽� ��溶剤としては、極性溶剤又は非極性溶剤の� ��ずれをも使用することができる。抽出溶剤� ��しては、例えば水;メタノール、エタノール 、プロパノール、ブタノール等のアルコール 類;プロピレングリコール、ブチレングリコ� �ル等の多価アルコール類;アセトン、メチル� ��チルケトン等のケトン類;酢酸メチル、酢酸 エチル等のエステル類;テトラヒドロフラン� �ジエチルエーテル等の鎖状及び環状エーテ� �類;ポリエチレングリコール等のポリエーテ� ��類;スクワラン、ヘキサン、シクロヘキサン 、石油エーテル等の炭化水素類;トルエン等� �芳香族炭化水素類;ジクロロメタン、クロロ� ��ルム、ジクロロエタン等のハロゲン化炭化� ��素類;及び二酸化炭素等が挙げられる。或い は、上記溶剤の2種以上を組み合わせた混合� �を、抽出溶剤として用いることができる。
 好ましくは、アルコール類(好ましくは、炭 素数1~4のアルコール類)、アルコール類・水� �合液であり、このときのアルコール類の濃� �は70~100容量%(好ましくは80~100容量%)であるの� ��好ましい。

 抽出溶剤の使用量は、植物1質量部(乾燥� �換算)に対して、1~50質量部であるのが好まし く、5~40質量部であるのが好ましい。抽出温� �は、0~100℃であるのが好ましく、より4~80℃� �更に10~40℃であるのが好ましい。抽出時間は 、1分~50日間であるのが好ましく、より1時間~ 50日間、更に1~10日間であるのが好ましい。

 更に、上記植物又はその抽出物から、液体� ��ロマトグラフィーや液々分配等の分離技術� ��供し、活性成分である上述したアルカンジ� ��リシン、3’-angeloyloxy-4’-isovaleryloxy-2’,3’- dihydrooroselol及び3’-angeloyloxy-4’-senecioyloxy-2’ ,3’-dihydrooroselolを含有する活性画分を得ても よいし、これらを単離してもよい。
 具体的には、当該抽出物を、オクタデシル� ��シリカゲル、オクチル化シリカゲル、トリ� ��チルシリル化シリカゲル等の逆相樹脂カラ� ��クロマトに付し、アセトニトリル-0.05~0.2%TFA 系溶媒で溶出し、活性成分を含有する活性画 分を得てもよい。
 また、アルカンジェリシンを脱アシル化す� ��ことによって3’-hydroxy-4’-angeloyloxy-2’,3’- dihydrooroselolが得られる。

 ただし、本発明においては、上記化学式( I)で示される化合物であれば、従来公知の化� ��物を活性成分として使用することができる� ��上記化学式(I)で示される公知化合物として� ��、例えば、アサマンチン(Athamantin)、シニフ� ��リンB(Cniforin B)、エデュリシンII(Edulisin II)� ��びエデュリシンV(Edulisin V)を挙げることが� �き、活性成分として使用することができる� �

 また、本発明のクマリン誘導体は、塩に� ��ることにより水溶性を向上させ、生理学的� ��効性を増大させることができる。これらの� ��としては、薬学的に許容される塩であれば� ��い。このような塩形成用の塩基物質として� ��、例えば、水酸化リチウム、水酸化ナトリ� ��ム、水酸化カリウム等のアルカリ金属の水� ��化物;水酸化マグネシウム、水酸化カルシウ ム等のアルカリ土類金属の水酸化物;水酸化� �ンモニウム等の無機塩基、アルギニン、リ� �ン、ヒスチジン、オルニチン等の塩基性ア� �ノ酸;モノエタノールアミン、ジエタノール� ��ミン、トリエタノールアミン等の有機塩基� ��用いられるが、特にアルカリ金属又はアル� ��リ土類金属の水酸化物が好ましい。本発明� ��おいては、これらの塩を調製してから、そ� ��他の成分からなる組成物中に添加したもの� ��もよいし、クロロゲン酸類等と塩形成成分� ��を別々に該組成物中に添加して、この中で� ��を形成せしめたものでもよい。

 本発明のクマリン誘導体又はその塩は、� ��記実施例に示すとおり、NFATシグナル阻害作 用、及び育毛作用を有する。

 ここで、NFATシグナル阻害作用とは、NFATに� �して直接的又は間接的に作用してNFATによる� ��写促進活性を低減させることを意味する。
 また、上述したNFATシグナル阻害作用(活性)� ��、NFATシグナル阻害率を指標として評価する ことができる。

 このNFATシグナル阻害作用(活性)を測定する� ��法としては、特に限定されないが、例えば� ��知のNFAT結合配列と当該NFAT結合配列の下流� �レポーター遺伝子と有するプラスミドを導� �した宿主を用いるレポーターアッセイを挙� �ることができる。
 因みに、NFATの活性はカルシウムイオンに依 存するため、レポーターアッセイはカルシウ ムイオンを宿主に流入させる条件下で行う。 レポーター遺伝子としては、特に限定されず 、従来、生化学実験の分野で使用されている 如何なるレポーター遺伝子も使用することが できる。例えばレポーター遺伝子としては、 ルシフェラーゼ遺伝子、βグルクロニダーゼ� ��伝子(GUS遺伝子)及びグリーンフルオレセン� �プロテイン遺伝子(GFP遺伝子)等を挙げること ができる。

 NFAT結合配列とは、NFATが結合する配列か� �なるオリゴヌクレオチド、例えば、配列番� �1に示すGGAGGAAAAACTGTTTCATACAGAAGGCGT(pNFAT-Luc、Strata gene)といった塩基配列を例示することができ� ��。なお、上述したプラスミドにおいては、� ��のようなNFAT結合配列を1セットとして複数� �ットを連結して導入してもよい。複数のNFAT� ��合配列を連結して使用することによって、N FATによる転写促進活性をより高感度に測定す ることができる。なお、NFATシグナル阻害活� �は、上述したレポーターアッセイから算出� �たNFATシグナル阻害率として評価することが� ��きる。

 また、育毛作用(活性)とは、毛包に作用し� �毛の伸長の促進、太さの増大、毛周期の休� �期から成長期への移行促進、成長期から退� �期への移行阻害などを行なうことにより毛� �量を増加させることを意味する。従って、� �毛には、発毛、養毛及び脱毛予防の概念が� �含されるものとする。
 育毛作用(活性)は、毛伸長促進率を指標と� �て評価することができる。ここで、毛伸長� �進率とは、要するに、クマリン誘導体を作� �させないときの毛伸長率に対して、クマリ� �誘導体を作用させたときの当該毛伸長率の� �進率を意味している。
 この育毛作用(活性)を測定する方法として� �、特に限定されないが、例えば単離毛包を� �官培養し、培養期間中の毛の伸長量を測定� �る方法が挙げられる。

 上述した活性成分は、NFATによる転写促進(� �に制御される転写)活性を低減させることか� ��、細胞や組織におけるNFATシグナルを阻害す ることができる。具体的には、本発明のクマ リン誘導体又はその塩を、対象とする細胞や 組織に接触させることによって、当該細胞や 組織におけるNFATシグナルを阻害することが� �きる。これにより、当該細胞や組織におい� �は、NFATシグナルによって生ずる種々の遺伝� ��発現を転写レベルで抑制することができる� ��
 また、上述した活性成分は、育毛・発毛を� ��進し、種々の脱毛症に有効である。

 従って、本発明のクマリン誘導体又はそ� ��塩は、NFATによる転写促進活性を低減させる こと;育毛・発毛を促進させることから、NFAT� ��グナル阻害剤や育毛・発毛促進剤等として� ��用することができ、これらの製剤を製造す� ��ために使用することができる。

 本発明に係るNFATシグナル阻害剤等は、NFAT� �よる転写促進活性の亢進に起因する症状や� �患に対する治療剤、改善剤又は予防剤とし� �使用することができる。
 NFATによる転写促進活性の亢進に起因する症 状や疾患としては、免疫系疾患、乾癬、アト ピー性皮膚炎、心筋を含む筋肥大症、リウマ チ、骨代謝疾患、各種のガン、各種白血病、 各種肝炎、各種感染症、全身性エリテマトー デス、炎症性腸疾患(潰瘍性大腸炎、クロー� �病)、多発性硬化症、インスリン依存性糖尿� ��、消化性潰瘍、敗血症ショック、結核、不� ��症、動脈硬化、ベーチェット病、喘息、腎� ��、急性バクテリア髄膜炎、急性心筋梗塞、� ��性膵炎、急性ウイルス脳炎、成人呼吸促迫� ��候群、バクテリア肺炎、慢性膵炎、末梢血� ��疾患、敗血症、間質性肝疾患、時局性回腸� ��、多発性硬化症等を挙げることができる。� ��たがって、本発明に係るNFATシグナル阻害剤 等は、免疫抑制剤、乾癬治療剤、(心)筋肥大� ��制剤、抗リウマチ薬及び骨代謝疾患治療剤� ��として使用することができる。

 斯様に、上述した活性成分は、NFATシグナル 阻害作用や育毛作用等を発揮する医薬品、外 用剤、化粧品、食品、飼料等として使用でき る。
 医薬品として使用する場合、その剤形は、� ��に限定されないが、例えば散剤、顆粒剤、� ��プセル剤、丸剤、錠剤等の固形製剤、水剤� ��懸濁剤、乳剤等の液剤、軟膏剤等が挙げら� ��る。
 経口投与の医薬品として使用する場合、上� ��した活性成分を単独で又は、この他、経口� ��与剤の形態に応じて一般に用いられる、賦� ��剤、崩壊剤、結合剤、滑沢剤、界面活性剤� ��アルコール類、水、水溶性高分子、甘味料� ��矯味剤、酸味料等を添加し、常法に従って� ��造することができる。経口投与用医薬品と� ��ては、免疫抑制剤、乾癬治療剤、(心)筋肥� �抑制剤及び抗リウマチ薬等が挙げられる。
 経皮投与の医薬品として使用する場合、上� ��した活性成分を単独で又は、この他、経皮� ��与剤の形態に応じて一般に用いられる、植� ��油、動物油、合成油、脂肪酸、及び天然、� ��成のグリセライド等の油性基剤、滑沢剤、� ��面活性剤、アルコール類、増粘剤等を添加� ��、常法に従って製造することができる。経� ��投与用医薬品としては、免疫抑制剤、乾癬� ��療剤、アトピー性皮膚炎治療剤、発毛促進� ��等が挙げられる。

 また、外用剤及び育毛剤は、例えば皮膚用� ��医薬部外品として使用するものであり、使� ��形態に適した剤形として提供される。具体� ��に剤形としては、特に限定されるものでは� ��いが、例えば、軟膏、水剤、エキス剤、ロ� ��ション剤、トニック剤、スプレー剤及び乳� ��等が挙げられる。
 当該医薬部外品には、上述した活性成分を� ��独で又は、この他に、助剤、安定化剤、湿� ��剤、乳化剤、吸収促進剤及び界面活性剤等� ��薬学的に許容される担体を任意に組合せて� ��合することができる。また、育毛剤におい� ��は、上述した有効成分の他に、通常用いら� ��る養毛薬効剤、例えば、毛包賦活剤、血行� ��進剤、抗菌剤、抗炎症剤、保湿剤、抗脂漏� ��、局所刺激剤、抗男性ホルモン剤、カリウ� ��チャンネルオープナー、抗酸化剤等を必要� ��応じて適宜配合し、育毛効果の向上を図る� ��とができる。毛包賦活剤としては、フラバ� ��ノール類、N-アセチル-L-メチオニン、パン� �テン酸及びその誘導体、アデノシン及びそ� �誘導体、アスパラギン酸カリウム、ペンタ� �カン酸グリセリド、6-ベンジアルアミノプリ ン、モノニトログアヤコールナトリウム等が 挙げられる。血行促進剤としては、二酸化炭 素、ニコチン酸アミド、ニコチン酸ベンジル 、センブリエキス、ニンジンエキス、塩化カ ルプロニウム、ビタミンE及びその誘導体等� �挙げられる。抗菌剤としては、イソプロピ� �メチルフェノール、塩化ベンザルコニウム� �オクトピロックス、ジンクピリチオン、ヒ� �キチオール等が挙げられる。抗炎症剤とし� �は、甘草エキス、グリチルリチン酸及びそ� �誘導体、グリチルレチン酸及びその誘導体� �アズレン、グアイアズレン、オウゴンエキ� �、カミツレエキス、クマザサエキス、シラ� �バエキス、ゼニアオイエキス、桃葉エキス� �セイヨウノコギリソウエキス等が挙げられ� �。保湿剤としては、オトギリソウエキス、� �ーツ麦エキス、グリセリン、チューベロー� �ポリサッカライド、冬虫夏草エキス、延命� �エキス、オオムギエキス、ブドウエキス、� �ロピレングリコール、桔梗エキス、ヨクイ� �ンエキス等が挙げられる。抗脂漏剤として� �、イオウ、レシチン、カシュウエキス、チ� �キソロン等が挙げられる局所刺激剤として� �、カンファー、トウガラシチンキ等が挙げ� �れる。抗男性ホルモン剤としては、サイプ� �テロンアセテート、1 1α-ハイドロキシプロ� ��ステロン、フルタマイド、3-デオキシアデ� �シン、酢酸クロルマジノン、エチニルエス� �ラジオール、スピロノラクトン、エピテス� �ロン、フィナステライド、アロエ、サンシ� �ウ、チョウジエキス、クアチャララーテエ� �ス、オタネニンジン等が挙げられる。カリ� �ムチャンネルオープナーとしては、ミノキ� �ジル、クロマカリム、ジアゾキシド及びそ� �誘導体、ピナシジル等が挙げられる。抗酸� �剤としては、紅茶エキス、茶エキス、エイ� �ツエキス、黄杞エキス、ビタミンC及びその� ��導体、エリソルビン酸、没食子酸プロピル� ��ジブチルヒドロキシトルエン等が挙げられ� ��。

 化粧料として使用する場合には、剤形とし� ��は、特に限定されるものではないが、例え� ��、油中水型又は水中油型の乳化化粧料、ク� ��ーム、ローション、ジェル、フォーム、エ� ��センス、ファンデーション、パック、ステ� ��ック及びパウダー等が挙げられる。
 当該化粧料には、上述した活性成分を単独� ��又は、この他に、化粧料成分として一般に� ��用されている油分、界面活性剤、紫外線吸� ��剤、アルコール類、キレート剤、pH調整剤� �防腐剤、増粘剤、色素類、香料及び各種皮� �栄養剤等を任意に組合せて配合することが� �きる。
 具体的には、皮膚化粧料に配合される薬効� ��分、例えば微粒子酸化亜鉛、酸化チタン、� ��ーソールMCX、パーソール1789等の紫外線吸収 剤、アスコルビン酸等のビタミン類、ヒアル ロン酸ナトリウム、ワセリン、グリセリン、 尿素等の保湿剤、ホルモン剤、及びコウジ酸 、アルブチン、プラセンタエキス、ルシノー ル等の他の美白成分、ステロイド剤、アラキ ドン酸代謝物やヒスタミン等に代表される化 学伝達物質産生・放出抑制剤(インドメタシ� �、イブプロフェン)、レセプター拮抗剤等の� ��炎症剤、抗男性ホルモン剤、ビタミンA酸、 ローヤルゼリーエキス、ローヤルゼリー酸等 の皮脂分泌抑制剤、ニコチン酸トコフェロー ル、アルプロスタジル、塩酸イソクスプリン 、塩酸トラゾリン等の抹消血管拡張剤及び末 梢血管拡張作用のある炭酸ガス等、ミノキシ ジル、塩化カルプロニウム、トウガラシチン キ、ビタミンE誘導体、イチョウエキス、セ� �ブリエキス等の血行促進剤、ペンタデカン� �グリセリド、ニコチン酸アミド等の細胞賦� �化剤、ヒノキチオール、L-メントール、イソ プロピルメチルフェノール等の殺菌剤、グリ チルリチン酸およびその誘導体またはその塩 等の薬剤、セラミド及びセラミド類似化合物 等を添加配合することができる。

 また、上述した医薬品、医薬部外品、化� ��品においては、例えばチョーク、タルク、� ��ラー土、カオリン、デンプン、ゴム、コロ� ��ドシリカナトリウムポリアクリレート等の� ��体;例えば鉱油、植物油、シリコーン油等の 油又は油状物質;例えばソルビタントリオレ� �ート、ソルビタントリステアレート、グリ� �ロールモノオレエート、高分子シリコーン� �面活性剤等の乳化剤;パラ-ヒドロキシベンゾ エートエステル等の防腐剤;ブチルヒドロキ� �トルエン等の酸化防止剤;グリセロール、ソ� ��ビトール、2-ピロリドン-5-カルボキシレー� �、ジブチルフタレート、ゼラチン、ポリエ� �レングリコール等の湿潤剤;トリエタノール� ��ミン又は水酸化ナトリウムのような塩基を� ��う乳酸等の緩衝剤;グリセリン脂肪酸エステ ル、ソルビタン脂肪酸エステル、ショ糖脂肪 酸エステル、アルキルグルコシド等の界面活 性剤;密ろう、オゾケライトワックス、パラ� �ィンワックス等のワックス類;増粘剤;活性増 強剤;着色料;香料等、を必要に応じ適宜組合� ��て用いることができる。

 上述した活性成分を医薬、医薬部外品又� ��化粧料等として使用する場合、上述した活� ��成分の配合量は、クマリン誘導体換算で、� ��常、医薬、医薬部外品又は化粧料等の全組� ��の0.00001~5質量%、特に0.0001~0.1質量%とするこ� ��が好ましい。また、本発明に係るNFATシグナ ル阻害剤を医薬として用いる場合、上述した 活性成分の投与量は、通常の成人(60kg)で0.01mg ~1g/1日とすることが望ましい。