本発明のラクトコッカス属菌、特にラクト� ��ッカス・ラクチス・サブスピーシーズ・ラ� ��チスは、上記(1)、(2)、及び(3)の特性を有す� ��ものである。
 (1)は、発酵性に関するものである。10%(W/W)� �元脱脂粉乳培地で、25~37℃の温度範囲で16時� ��培養した時に、培地を凝固させることがで� ��るほど増殖が早く、強い発酵性を有する乳� ��菌であれば、発酵乳製造時に、ビフィドバ� ��テリウム・ロンガムの生育性等をより効果� ��に改善することができる。ここで、「培地� ��凝固する」とは、酸発酵により、培地のpH� �乳蛋白質の等電点を下まわり、乳蛋白質が� �集し、培地が凝固することを意味する。ま� �、「10%(W/W)還元脱脂粉乳培地」は、還元脱脂 粉乳(例えば、森永乳業社製)を10質量%濃度で� ��に溶解して調製することができる。

 通常、ラクトコッカス属菌に適した発酵� ��度範囲は、20~30℃であるが、本発明のラク� �コッカス属菌は、25~37℃の温度範囲で強い発 酵性を有する菌である。すなわち、本発明の ラクトコッカス属菌は、ビフィドバクテリウ ム・ロンガムに適した発酵温度範囲(30~40℃)� �おいて、充分な発酵性を有する菌である。

 (2)は、ビフィドバクテリウム・ロンガムの� ��育促進性に関するものである。10%(W/W)還元� �脂粉乳培地等の乳性培地は、pHが4.6付近にな ると、通常、含有されるカゼイン等が沈殿し 、培地全体が凝固し、風味、食感及び外観が 優れたものになる。このため、発酵乳製品を 製造する場合には、一般に、pHが4.6付近に達� ��た時に、急冷等をすることにより発酵を停� ��する。したがって、10%(W/W)還元脱脂粉乳培� �で、ビフィドバクテリウム・ロンガムと混� �培養した場合に、pHが4.4~4.6に達した時に、� �フィドバクテリウム・ロンガムの菌数を5×10 ⁸ CFU/g以上という高濃度にすることができるよ� ��な生育促進性を有する乳酸菌であれば、発� ��乳製造時に、発酵乳中のビフィドバクテリ� ��ム・ロンガム含有量をより効果的に改善す� ��ことができる。

 (3)は、ビフィドバクテリウム・ロンガム� ��保存生残性促進性に関するものである。発� ��乳製品の品質保持期限は、一般に、10℃以� �の保存条件で2週間程度である。したがって� ��10%(W/W)還元脱脂粉乳培地で、ビフィドバク� �リウム・ロンガムと混合培養した場合に、pH が4.4~4.6に達した時に急冷して、10℃で2週間� �持した場合の、ビフィドバクテリウム・ロ� �ガムの生残率を30%以上とすることができる� �うな保存生残性促進性を有する乳酸菌であ� �ば、品質保持期限終了間際においても充分� �のビフィドバクテリウム・ロンガムを含有� �得る発酵乳を製造することができる。

 本発明のラクトコッカス属菌は、例えば� ��下の方法により得ることができる。まず、� ��種の試料から菌株を分離し、この中から10%( W/W)還元脱脂粉乳培地での発酵性が優れたも� �、すなわち、10%(W/W)還元脱脂粉乳培地で、25~ 37℃の温度範囲で16時間培養した時に、培地� �凝固させることができる発酵性を有するも� �を選択する。次いで、選択された菌とビフ� �ドバクテリウム・ロンガムとの混合培養試� �を行い、上記(2)および(3)で規定されるビフ� �ドバクテリウム・ロンガムの生育促進性及� �保存生残性促進性を有する菌株を選択する� �とにより得ることができる。更に、キシロ� �ス資化性を有さず、かつ、ダイアセチル及� �アセトインを生成しない菌株を選択するこ� �が好ましい。

 以下、さらに詳細に説明する。
1.菌株の取得
 本発明者らは、前記の性質を有する菌株を� ��然界から取得すべく、日本国内の自然界か� ��採集したサンプルを嫌気性希釈液(1980年叢� �社発行、光岡知足著「腸内菌の世界」322ペ� �ジ。以下、参考文献1と記載する。)で希釈し 、Briggs liver broth(前記参考文献1、319ページ)� ��平板に塗布し、30℃で嫌気培養した。そし� �得られたコロニーの中で連鎖球菌の形態を� �し、かつ塗布標本の顕微鏡観察によりグラ� �陽性である菌を釣菌した。該釣菌した菌を� �BL寒天培地平板に画線塗布し、前記と同様の 方法で嫌気培養を反復し、純粋単離された菌 株を得た。これらの菌株を下記の方法を用い て、まず、10%(W/W)還元脱脂粉乳培地中での発� ��試験を行い、上記(1)で規定される発酵性を� ��する菌株を20株得た。続いて、ビフィドバ� �テリウム・ロンガムとの混合培養試験を行� �、pHが4.4~4.6に達した時に、ビフィドバクテ� �ウム・ロンガムの菌数を5×10 ⁸ CFU/g以上とすることのできる生育促進性と、p Hが4.4~4.6に達した時に急冷して、10℃で2週間� ��持した場合の、ビフィドバクテリウム・ロ� ��ガムの生残率を30%以上とすることのできる� ��存生残性促進性を有する菌株を5株取得した 。該5菌株はそれぞれ、MCC852、MCC857、MCC859、MC C865、MCC866と名付けられた。

2.菌学的性質
 前記5菌株の菌学的性質を、以下に示す。な お、菌学的性質を測定するための試験は、バ ージェイズ・マニュアル・オブ・システマテ ィック・バクテリオロジー(Bergey's Manual of S ystematic Bacteriology、Peter H. A. Sneath編、第2巻 、Williams and Wilkins Company、1986年)にほぼ従っ て行った。

(I)菌形(BL寒天培地平板で30℃、72時間嫌気培� �した時の光学顕微鏡観察時)
  大きさ:直径1~2μm
  形 状:連鎖球菌
(II)グラム染色性:陽性
(III)リトマスミルク:凝固
(IV)芽胞形成:陰性
(V)グルコースからのガス生成:なし
(VI)運動性:なし
(VII)カタラーゼ活性:陰性
(VIII)アルギニンデカルボキシラーゼ試験:陽� �
(IX)クエン酸からのガス産生:陰性
(X)温度感受性(60℃30分間及び65℃30分間):何れ� ��感受性
(XI)グルコースの分解産物:L-乳酸

 上記(I)~(XI)に示す菌学的性質は、前記5菌� ��全てに共通しており、かつ、ラクトコッカ� ��・ラクチス・サブスピーシーズ・ラクチス� ��タイプストレインであるATCC19435とも共通し� ��いた。(XII)生育温度、(XIII)食塩耐性、(XIV)pH� ��性、(XV)メチレンブルー耐性、(XVI)アルギニ� ��からのアンモニアの産生、及び(XVII)糖の発� ��性については、各々、表1に示す性質を示し た。なお、糖の発酵性は、光岡の糖発酵性用 培地(1974年、光岡知足著「乳酸菌の細菌学」� ��臨床検査18、1163~1172ページ)を用いて、28種� �の糖について試験を行った。

 以上の結果から、前記5菌株は、ラクトコ ッカス・ラクチス・サブスピーシーズ・ラク チス菌種の菌学的性質を、共通して有してい ることが明らかである。すなわち、前記5菌� �は、ラクトコッカス・ラクチス・サブスピ� �シーズ・ラクチス菌種であることが確認さ� �た。一方、上記(XII)~(XVII)に示す菌学的性質� �ら、前記5菌株は、特に、キシロース資化性� ��有さない点で、タイプストレインとは異な� ��ことが明らかである。

 そこで、出願人は、前記5菌株を、独立行 政法人産業技術総合研究所特許生物寄託セン ター(日本国 茨城県つくば市東1丁目1番地1 � ��央第6(郵便番号 305-8566))に新規菌株として� �託した。受託番号は、ラクトコッカス・ラ� �チス・サブスピーシーズ・ラクチスMCC852株� �FERM BP-10742、ラクトコッカス・ラクチス・サ ブスピーシーズ・ラクチスMCC857株がFERM BP-107 57、ラクトコッカス・ラクチス・サブスピー� ��ーズ・ラクチスMCC859株がFERM BP-10744、ラク� �コッカス・ラクチス・サブスピーシーズ・� �クチスMCC865株がFERM BP-10745、ラクトコッカス ・ラクチス・サブスピーシーズ・ラクチスMCC 866株がFERM BP-10746である。なお、寄託日は、� ��クトコッカス・ラクチス・サブスピーシー� ��・ラクチスMCC852、859、865、及び866株が平成1 8年12月1日であり、ラクトコッカス・ラクチ� �・サブスピーシーズ・ラクチスMCC857株が平� �19年1月10日である。

3.10%(W/W)還元脱脂粉乳培地での発酵性試験
 還元脱脂粉乳(森永乳業社製)を水で溶解し� �得た10%(W/W)還元脱脂粉乳培地を95℃で30分間� �菌し、該還元脱脂粉乳培地に対し、各菌株� �スターターを3%(V/V)接種し、25、30、及び37℃� ��各温度で16時間培養した。得られた培養液� �急冷し、凝固状況、pH、及び含有される乳酸 菌数を測定した。乳酸菌数の測定は、市販さ れているBCP加プレートカウント寒天培地(栄� �機材社製)平板で行なった。測定結果を表2に 示す。
 なお、対照株として、特許文献2に記載のラ クトコッカス・ラクチス・サブスピーシーズ ・ラクチスのタイプストレインATCC19435株を用 いた。

 ラクトコッカス・ラクチス・サブスピーシ� ��ズ・ラクチスMCC852、857、859、865、866のそれ� ��れの菌株、すなわち、本発明のラクトコッ� ��ス属菌を用いた場合には、何れの温度条件� ��おいても、pHが4.4~4.6まで低下して培地が凝� ��した。また、含有される乳酸菌数も1×10 ⁹ CFU/g前後であり、非常に増殖・発酵性の良い� ��とが分かった。
 一方、ラクトコッカス・ラクチス・サブス� ��ーシーズ・ラクチスのタイプストレインATCC 19435株を用いた場合には、何れの温度条件に� ��いても、pHが5.5以上であり、培地は凝固し� �かった。また、本発明のラクトコッカス属� �と比較して、特に30℃以上において、乳酸菌 数が顕著に少なかった。

4.ビフィドバクテリウム・ロンガムとの混合� ��養試験
(1)ビフィドバクテリウム・ロンガムFERM BP-778 7株との混合培養試験
 対照株として、ラクトコッカス・ラクチス� ��サブスピーシーズ・ラクチスのタイプスト� ��インATCC19435株を用いた。
 まず、後記実施例1に記載の方法で、ラクト コッカス・ラクチス・サブスピーシーズ・ラ クチスMCC852、857、859、865、866の5菌株のそれ� �れのカルチャー、及び、ビフィドバクテリ� �ム・ロンガムFERM BP-7787株のカルチャーを調� ��した。
 ビフィドバクテリウム・ロンガムFERM BP-7787 株は、独立行政法人産業技術総合研究所特許 生物寄託センター(日本国 茨城県つくば市東 1丁目1番地1 中央第6(郵便番号 305-8566))に平� �13年10月31日に受託されている。
 また、0.2%(W/W)酵母エキス(Difco社製)入り10%(W/ W)還元脱脂粉乳培地1000mLを90℃で30分間殺菌し 、ラクトコッカス・ラクチス・サブスピーシ ーズ・ラクチスのタイプストレインATCC19435株 のカルチャーを30mL接種し、30℃で16時間培養� ��て、ラクトコッカス・ラクチス・サブスピ� ��シーズ・ラクチスのタイプストレインATCC194 35株のカルチャーを調製した。

 10%(W/W)還元脱脂粉乳培地を90℃で10分間殺� ��し、該還元脱脂粉乳培地に対し、上記のよ� ��に調製したラクトコッカス・ラクチス・サ� ��スピーシーズ・ラクチスの各菌株のカルチ� ��ー1%(V/V)と、ビフィドバクテリウム・ロンガ ムFERM BP-7787株のカルチャー1%(V/V)を接種し、3 7℃で16時間培養して発酵乳を得た。該発酵乳 を急冷し、pH及び含有されるビフィドバクテ� ��ウム・ロンガムの菌数を測定した。さらに� ��10℃で2週間保存し、保存後1週間及び2週間� �おけるビフィドバクテリウム・ロンガムの� �数を測定した。ビフィドバクテリウム・ロ� �ガムの菌数の測定は、TOSプロピオン酸寒天� �地(ヤクルト薬品工業社製)平板で行なった。 測定結果を表3に示す。

 ラクトコッカス・ラクチス・サブスピーシ� ��ズ・ラクチスMCC852、857、859、865、866の5菌株 をそれぞれ用いた発酵乳は、発酵後pHがおよ� ��4.5であり、ビフィドバクテリウム・ロンガ� ��の菌数が5×10 ⁸ CFU/g以上に達した。また、該発酵乳を10℃で2� ��間保存した場合のビフィドバクテリウム・� ��ンガムの菌生残率は、何れも80%以上であっ� ��。
 一方、ラクトコッカス・ラクチス・サブス� ��ーシーズ・ラクチスのタイプストレインATCC 19435株を用いた発酵乳は、発酵が進まず、発� ��後pHが5.0以上であり、10℃での保存試験が不 可能であった。また、発酵終了直後のビフィ ドバクテリウム・ロンガムの菌数もおよそ1× 10 ⁸ CFU/gであり、本発明のラクトコッカス属菌と� ��較して、顕著に少なかった。

 すなわち、ラクトコッカス・ラクチス・サ� ��スピーシーズ・ラクチスMCC852、857、859、865� ��及び866の5菌株は、ラクトコッカス・ラクチ ス・サブスピーシーズ・ラクチスの公知の他 の菌株よりも、ビフィドバクテリウム・ロン ガムFERM BP-7787株に対する生育促進性及び保� �生残性促進性が優れていることが明らかで� �る。
 また、特許文献2に記載のダイアセチル及び アセトインを生成しないラクトコッカス・ラ クチス・サブスピーシーズ・ラクチスと、ビ フィドバクテリウム・ロンガムとを、混合培 養した場合には、ビフィドバクテリウム・ブ レーベを用いた場合と異なり、特許文献2に� �載されているような、ビフィドバクテリウ� �・ロンガムの増殖促進効果と生残性改善効� �の何れの効果も得ることができないことも� �らかである。

(2)ビフィドバクテリウム・ロンガム タイプ� ��トレインATCC15707株との混合培養試験
 本発明のラクトコッカス属菌の、ビフィド� ��クテリウム・ロンガムに対する生育促進性� ��び保存生残性促進性を、ビフィドバクテリ� ��ム・ロンガムFERM BP-7787株とビフィドバクテ リウム・ロンガム タイプストレインATCC15707� ��を用いて確認した。
 まず、後記実施例1に記載の方法で、ラクト コッカス・ラクチス・サブスピーシーズ・ラ クチスMCC857株のカルチャー、及び、ビフィド バクテリウム・ロンガムFERM BP-7787株のカル� �ャーを調製した。
 また、後記実施例21に記載の方法で、スト� �プトコッカス・サーモフィルス(Streptococcus t hermophilus)及びラクトバチルス・ブルガリクス (Lactobacillus bulgaricus)の混合カルチャーを調製 した。
 さらに、0.2%(W/W)酵母エキス入り11%(W/W)脱脂� �乳培地を90℃で30分間殺菌し、該脱脂粉乳培� ��に対し、ビフィドバクテリウム・ロンガム� �タイプストレインATCC15707株のスターターを10 %(V/V)接種し、37℃でpHが4.6になるまで培養し� �、ビフィドバクテリウム・ロンガム タイプ ストレインATCC15707株のカルチャーを調製した 。

 10%(W/W)還元脱脂粉乳培地を90℃で10分間殺菌� ��、該還元脱脂粉乳培地に対し、上記のよう� ��調製したラクトコッカス・ラクチス・サブ� ��ピーシーズ・ラクチスMCC857株のカルチャー1 %(V/V)と、ビフィドバクテリウム・ロンガムFER M BP-7787株のカルチャー1%(V/V)若しくはビフィ� ��バクテリウム・ロンガム タイプストレイ� �ATCC15707株のカルチャー1%(V/V)と、ストレプト� ��ッカス・サーモフィルス及びラクトバチル� ��・ブルガリクスの混合カルチャー0.01%(V/V)を 接種し、37℃でpHが4.6になるまで培養して発� �乳を得た。該発酵乳を急冷し、含有される� �フィドバクテリウム・ロンガムの菌数を測� �した。さらに、10℃で2週間保存し、保存後1� ��間及び2週間におけるビフィドバクテリウム ・ロンガムの菌数を測定した。
 一方、対照として、10%(W/W)還元脱脂粉乳培� �を90℃で10分間殺菌し、該還元脱脂粉乳培地� ��対し、上記のように調製したビフィドバク� ��リウム・ロンガムFERM BP-7787株のカルチャー 1.5%(V/V)若しくはビフィドバクテリウム・ロン ガム タイプストレインATCC15707株のカルチャ� ��1.5%(V/V)と、ストレプトコッカス・サーモフ� ��ルス及びラクトバチルス・ブルガリクスの� ��合カルチャー0.4%(V/V)を接種し、37℃でpHが4.6 になるまで培養して得た発酵乳のビフィドバ クテリウム・ロンガムの菌数を同様に測定し た。測定結果を表4に示す。

 ビフィドバクテリウム・ロンガムFERM BP-7787 株と、ビフィドバクテリウム・ロンガム タ� ��プストレインATCC15707株の両株とも、ラクト� ��ッカス・ラクチス・サブスピーシーズ・ラ� ��チスMCC857株と混合培養することにより、発� ��乳中のビフィドバクテリウム・ロンガムの� ��数は顕著に増大した。また、10℃で2週間保� ��後のビフィドバクテリウム・ロンガムの菌� ��残率も、ビフィドバクテリウム・ロンガムF ERM BP-7787株で71%、ビフィドバクテリウム・ロ ンガム タイプストレインATCC15707株で31%と、� ��れも30%以上であった。
 これに対し、ラクトコッカス・ラクチス・� ��ブスピーシーズ・ラクチスMCC857株と混合培� ��しなかった場合には、10℃で2週間保存後の� ��フィドバクテリウム・ロンガムの生残率は� ��ビフィドバクテリウム・ロンガムFERM BP-7787 株で20%であり、ビフィドバクテリウム・ロン ガム タイプストレインATCC15707株では生きて� ��るビフィドバクテリウム・ロンガムは検出� ��れなかった。
 なお、ラクトコッカス・ラクチス・サブス� ��ーシーズ・ラクチスMCC857株に代えて、ラク� ��コッカス・ラクチス・サブスピーシーズ・� ��クチスMCC852、859、865、又は866株をそれぞれ� ��いた場合にも同様の結果が得られた。

 すなわち、ラクトコッカス・ラクチス・� ��ブスピーシーズ・ラクチスMCC852、857、859、8 65、866のそれぞれの菌株は、保存生残性に優� ��たビフィドバクテリウム・ロンガムFERM BP-7 787株以外のビフィドバクテリウム・ロンガム に対しても、優れた生育促進性及び保存生残 性促進性を有することが明らかである。

5.特許文献1記載のラクトコッカス・ラクチス ・サブスピーシーズ・ラクチスとラクトコッ カス・ラクチス・サブスピーシーズ・クレモ リスの混合物との比較試験
 まず、上記4(2)記載の方法で、ラクトコッカ ス・ラクチス・サブスピーシーズ・ラクチス MCC857株のカルチャー、ビフィドバクテリウム ・ロンガム タイプストレインATCC15707株のカ� ��チャー、及び、ストレプトコッカス・サー� ��フィルス及びラクトバチルス・ブルガリク� ��の混合カルチャーを調製した。

 10%(W/W)還元脱脂粉乳培地を90℃で10分間殺菌� ��、該還元脱脂粉乳培地に対し、上記のよう� ��調製したラクトコッカス・ラクチス・サブ� ��ピーシーズ・ラクチスMCC857株のカルチャー1 %(V/V)と、ビフィドバクテリウム・ロンガム � ��イプストレインATCC15707株のカルチャー1%(V/V) と、ストレプトコッカス・サーモフィルス及 びラクトバチルス・ブルガリクスの混合カル チャー0.01%(V/V)を接種し、37℃でpHが4.6になる� ��で培養して発酵乳を得た。該発酵乳を急冷� ��、含有されるビフィドバクテリウム・ロン� ��ムの菌数を測定した。
 一方、対照として、10%(W/W)還元脱脂粉乳培� �を90℃で10分間殺菌し、該還元脱脂粉乳培地� ��対し、上記のように調製したビフィドバク� ��リウム・ロンガム タイプストレインATCC1570 7株のカルチャー1%(V/V)と、ラクトコッカス・� ��クチス・サブスピーシーズ・ラクチスとラ� ��トコッカス・ラクチス・サブスピーシーズ� ��クレモリスの混合物「EZAL MA14」(Rhodia社製)2 %(V/V)を接種し、38℃でpHが4.6になるまで培養� �て得た発酵乳のビフィドバクテリウム・ロ� �ガムの菌数を同様に測定した。なお、「EZAL� �MA14」は、特許文献1に記載の「EZAL MR014」(Rho dia社製)に相当する混合物である。

 ラクトコッカス・ラクチス・サブスピーシ� ��ズ・ラクチスMCC857株を用いた発酵乳では、� ��フィドバクテリウム・ロンガムの菌数は5.5� �10 ⁸ CFU/gであった。これに対し、「EZAL MA14」を用 いた発酵乳を10 ⁶ 倍に希釈した希釈溶液からは、ビフィドバク テリウム・ロンガムが全く検出されず、該発 酵乳に含有されるビフィドバクテリウム・ロ ンガムの菌数は1×10 ⁶ CFU/g以下であることが判明した。

 すなわち、特許文献1記載のラクトコッカ ス・ラクチス・サブスピーシーズ・ラクチス とラクトコッカス・ラクチス・サブスピーシ ーズ・クレモリスを、ビフィドバクテリウム ・ロンガムと、混合培養した場合には、特許 文献1に記載されているような、ビフィズス� �の生育促進及び発酵時間の短縮という効果� �得ることができないことが明らかとなった� �

 以上のように、本発明のラクトコッカス� ��菌は、ビフィズス菌に適した発酵温度範囲� ��おける10%(W/W)還元脱脂粉乳培地で、強い発� �性を示し、さらに、ビフィドバクテリウム� �ロンガムと混合培養した場合に、ビフィド� �クテリウム・ロンガムの生育及び保存生残� �対し、優れた促進効果を示すものであり、� �クトコッカス属の公知の菌株にみられなか� �た性質を有するものである。また、非常に� �い発酵性を有するため、効率よく発酵乳等� �発酵物を製造することができる。また、ダ� �アセチル及びアセトインを生成しないため� �風味の良い発酵物を製造することも期待で� �る。

 特に、ラクトコッカス・ラクチス・サブ� ��ピーシーズ・ラクチスMCC852、857、859、865、8 66の5菌株は、自然界から分離した乳酸菌の中 から、発酵性が良く、ビフィドバクテリウム ・ロンガムの生育促進性及び保存生残性促進 性を有するものを選び出し得られたものであ るため、発酵性食品等をはじめとする様々な 飲食物に、安全に利用することが可能である 。

 本発明のラクトコッカス属菌は、他の乳酸� ��と同様に、菌末の形態で用いることもでき� ��。該菌末は、例えば、食品や飼料に添加し� ��用いることもできる。
 また、本発明のラクトコッカス属菌は、整� ��剤等の医薬品組成物としても好ましい。整� ��剤として用いる場合において、本発明のラ� ��トコッカス属菌の、整腸剤中の含有量や1日 あたりの摂取量等は、整腸効果が期待できる 量であれば、特に限定されるものではない。 例えば、1日あたり、1×10 ⁹ CFU程度のラクトコッカス属菌を摂取すること が好ましい。

 本発明において、ビフィドバクテリウム� ��ロンガムとラクトコッカス属菌の前培養に� ��いられる培地は、通常用いられる培地であ� ��ば、特に限定されるものではないが、乳性� ��地であることが好ましい。取り扱いが簡便� ��あるため、還元脱脂粉乳培地が特に好まし� ��。該還元脱脂粉乳培地の濃度は、3%(W/W)以上 が好ましく、8%(W/W)以上が特に好ましい。そ� �他、前培養に用いられる培地には、酵母エ� �ス等の生育促進物質や、L-システイン等の還 元剤等を添加することができる。特にビフィ ズス菌は乳性培地での増殖性が低いため、生 育促進物質を添加した培地を用いることが好 ましい。例えば、0.1~1%(W/W)の酵母エキスを含� ��した培地を用いることができる。また、前� ��養に用いられる培地は、殺菌処理をしたも� ��を用いる。該殺菌処理は、通常用いられる� ��法で行うことができ、例えば、80~122℃で5~40 分間、好ましくは85~95℃で5~35分間の加熱処理 により行うことができる。

 本発明のビフィドバクテリウム・ロンガ� ��の生育・生残性促進方法により、簡便かつ� ��率よく、ビフィドバクテリウム・ロンガム� ��生育と保存生残性を改善させることができ� ��。該方法は、具体的には、本発明のラクト� ��ッカス属菌とビフィドバクテリウム・ロン� ��ムを混合培養することにより行われる。混� ��培養の際の、ビフィドバクテリウム・ロン� ��ムと本発明のラクトコッカス属菌のスター� ��ーの混合培養用ベースへの接種比率は、特� ��限定されるものではないが、100:1~1:10が好ま しく、10:1~1:1が特に好ましい。また、該ベー� ��へ添加する量も、特に限定されるものでは� ��いが、ビフィドバクテリウム・ロンガムと� ��クトコッカス属菌を合わせた添加量が、該� ��ースに対して0.01~10(V/V)%が好ましく、0.1~5(V/V )%が特に好ましい。

 該ベースは、ビフィズス菌と乳酸菌の混� ��培養に通常用いられるベースであれば、特� ��限定されるものではないが、乳を主成分と� ��るベースであることが好ましい。本発明の� ��フィドバクテリウム・ロンガムの生育・生� ��性促進方法により、ビフィズス菌の生育に� ��まり適さない乳性培地においても、ビフィ� ��バクテリウム・ロンガムの生育・生残性を� ��善することができるためである。該ベース� ��、例えば、牛乳、脱脂乳、生クリーム、バ� ��ー、全粉乳、脱脂粉乳等に、必要に応じて� ��糖等の甘味料、ペクチン、果実、フルーツ� ��ュース、寒天、ゼラチン、油脂、香料、着� ��料、安定剤、還元剤等を配合し、常法に従� ��て殺菌、均質化、冷却等することにより調� ��することができる。特にビフィドバクテリ� ��ム・ロンガムを含有する発酵乳等の製造に� ��いられることが好ましい。

 次に実施例を示して本発明をさらに詳細� ��説明するが、本発明は以下の実施例に限定� ��れるものではない。