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| 权 利 要 求 1、 以下通式 I的核苷氨基磷酸酯化合物、 其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合 其中： (1) 选自 6烷基； (2) R2选自卤素； (3) R3选自 0H、 H和 d-4烷氧基； (4) R4选自 H、 d-6烷基和卤代 CM烷基； (5) R5选自 d-6烷基和卤代 CM烷基； (6) R6选自以下 a) 苯基 -Y -， 其中 Y为不存在或选自 d 烷基、 C2-6烯基、 C2-6炔基、 C2-6烯 基 _(C0)-、 C2-6炔基 _(C0)-、 0、 S、 氨基和 _Ν(( 6烷基）， 其中苯基任选被 ^浣 基、 卤素、 硝基、 d 烷氧基、 氰基、 C2-6烯基、 C2-6炔基、 d 酰氨基、 卤代 d 浣基、 卤代 d 烷氧基、氨基、 Ν(( -6烷基 )^Β( -6烷基 NHC0中的一个或多个取代 或者苯基与五元或六元环一起构成苯并五元环或苯并六元环； b) 杂环基 -Y -， 其中 Y为不存在或选自 d 烷基、 C2-6烯基、 C2-6炔基、 C2-6 烯基 _(C0)-、 C2-6炔基 _(C0)-、 0、 S、 氨基和 -Ν(( -6烷基)或者杂环基与其连接的 Y—起构成双杂环， 其中杂环基任选被 d 烷基、 卤素、硝基、 d 烷氧基、氰基、 C2-6烯基、 C2-6炔基、 d 酰氨基、 卤代 d 烷基、 卤代 d 烷氧基、 氨基、 Wd 浣 基 )2和 烷基 NHC0中的一个或多个取代； c) 烷基 -0-C(0)-C2-6烯基-、 CM烷基 -0-C(0)-C2-6烯基 -C(0)-， 其中 d 浣基任选被 d-6烷基、 卤素、 硝基、 CM烷氧基、 氰基、 C2—6烯基、 C2—6炔基、 d 酰氨基、 卤代 d 烷基、 卤代 d 烷氧基、 氨基、 ^(：1-6烷基)2和（：1-6烷基^1(：0中 的一个或多个取代； 和 (7) R7选自 H、 卤素、 d 烷基、 卤代 d 烷基、 d 烷氧基、 卤代 d 烷氧基、 N02、 CN、 d-6烷基 -NH-C0-、 羟基、 单 CM烷氨基、 双 d-6烷氨基、 CM烷基 -S -、 C2-6烯 基- S -、 C2—炔基 _s -、 院基- S0_、 C2—烯基 _so_、 C2—炔基 _S0_、 院基- so2_、 c2— 6烯基- S02-、 C2— 6炔基- S02-、 d— 6烷基- oso2-、 c2— 6烯基 -oso2-、 c2— 6炔基- oso2- ; (8) 或者 R6、 R7与所连接的苯环一起形成苯并五元环或苯并六元环， 所述的苯并 五元环和苯并六元环可以被卤素、 d 烷基、 d 烷氧基、 卤代 d 烷基、 卤代 d 烷氧基、 苯基、 氰基、 d 烷基 -0C(0)-、 烷基 -0C(0)-CH2-中的一个或多个取 代。 2、 根据权利要求 1的化合物、 其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 其中 选自 烷基， R2为 F， R3选自 0H、 H和甲氧基， R4选自！！和 ^烷基， 和 Rs选自。卜院基。 3、 根据权利要求 1或 2的化合物、 其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结 晶， 其中 R6选自 a) 苯基 -Y -， 其中 Y为不存在或选自 d-4烷基、 C2—4烯基、 C2—4炔基、 （：2—4烯 基 _(C0)-、 C2—4炔基 _(C0)-、 0、 S、氨基和 -N(d-4烷基）或者， 其中苯基任选被 d—4 烷基、 卤素、 硝基、 d—4烷氧基、 氰基、 C2—4烯基、 C2—4炔基、 d—4酰氨基、 卤代 d—4 烷基、 卤代 d—4烷氧基、氨基、 N(d—4烷基 )2和 d—4烷基 NHC0中的一个或多个取代 或者苯基与五元或六元环一起构成苯并五元环或苯并六元环； b) 杂环基 -Y -， 其中 Y为不存在或选自 d—4烷基、 C2—4烯基、 C2—4炔基、 C2—4 烯基 _(C0)-、 C2—4炔基 _(C0)-、 0、 S、 氨基和 -N(d-4烷基)或者杂环基与其连接的 Y—起构成双杂环， 其中杂环基任选被 d—4烷基、 卤素、硝基、 d—4烷氧基、氰基、 C2—4烯基、 C2—4炔基、 d-4酰氨基、 卤代 d—4烷基、 卤代 d—4烷氧基、 氨基、 N(d—4烷 基 )2和 d—4烷基 NHC0中的一个或多个取代； 和 c) d—4烷基 -0-〔（0)_(：2-4烯基-、 d—4烷基 -o-c(o)-c24烯基 -c(o)-， 其中 d—4 烷基任选被 d—4烷基、 卤素、 硝基、 d-4烷氧基、 氰基、 C2—4烯基、 C2—4炔基、 d-4 酰氨基、 卤代 d—4烷基、 卤代 d—4烷氧基、 氨基、 N(d—4烷基 )2和 d—4烷基 NHC0中 的一个或多个取代。 4、 根据权利要求 3的化合物、 其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 其中 R6选自 a) 苯基、 苯基- d— 3院基-、 苯基 _C2— 3烯基-、 苯基 _C2— 3炔基-、 苯基- 0_、 苯 基 -S -、 苯基 -NH-和苯基 --Ν(( 3烷基) -、 苯基 -乙烯 -(CO) _、 萘基 -乙烯 -(CO) -， 其中所述苯基任选被 ( —4烷基、 卤素、 硝基、 d—4烷氧基、 氰基、 C2—4烯基、 （：2—4炔 基、 d-4酰氨基、 卤代 d-4烷基、 卤代 d-4烷氧基、 氨基、 N(d-4烷基 )2和 d—4烷基 NHC0 中的一个或多个取代或者苯基与苯基、 噁唑、 吡嗪或吡咯一起构成萘、 苯 并噁唑基、 苯并 [b]吡嗪基、 苯并 [b]吡咯基； b) 1H-咪唑基 -Y -、 1， 2， 4-三氮唑基 -Y -、 1， 2， 3-三氮唑基 -Y -、 噻唑基 -Y -、 1, 2, 3-噻二唑基 -Y -、 1,2, 4-噻二唑基 -Y -、 1, 3, 4-噻二唑基 -Y -、 噁唑基 -Y -、 1， 2， 4-噁二唑基 -Y -、 1， 2， 3-噁二唑基 -Y -、 1， 3， 4噁二唑基 -Y -、 嘧、啶基- Y -、 吡 嗪基 -Y -、 哒嗪基 -Y -、 喹喔啉基 -Y -、 4H-色烯 -4-酮基 -Y -、 吡啶基 -Y -、 噻吩基 -Y -、 噻吩并 [3，2-b]噻吩基 -Y-, 其中 Y为不存在或选自甲基、 乙基、 乙烯、 乙 炔、 乙烯 _(C0)-、 乙炔 _(C0)-、 0、 S、 氨基和 -NCH2-， 其中这些杂环基任选被 d—4 烷基、 卤素、 硝基、 d—4烷氧基、 氰基、 C2—4烯基、 C2—4炔基、 d—4酰氨基、 卤代 d—4 烷基、卤代 d—4烷氧基、氨基、 N(d—4烷基 )2和 d—4烷基 NHC0中的一个或多个取代； 和 c) 甲基 -oc(o)- = -、 乙基 -oc(o)- = -、 丙基 -oc(o)- = -、 异丙基 -oc(o)-=-、 丁基 -oc(o)-=-、 异丁基 -oc(o)-=-、 叔丁基 -oc(o)-=-。 5、 根据权利要求 4的化合物、 其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 其中 R6选自 a) 苯基、 苯基 -((¾)-、 苯基- = -、 苯基- = -C(0)_、 苯基-≡ -， 其中 所述苯基任选被 d—4烷基、 卤素、 硝基、 d—4烷氧基、 氰基、 C2—4烯基、 C2—4炔基、 d—4酰氨基、 卤代 d—4烷基、 卤代 d—4烷氧基、 氨基、 N(d—4烷基 )2和 d-4烷基 NHC0 中的一个或多个取代或者苯基与噁唑、吡嗪或吡咯一起构成苯并噁唑基、苯并 [b] 吡嗪基、 苯并 [b]吡咯基； b) 1H-咪唑基、 1,2， 4-三氮唑基、 1,2， 3-三氮唑基、 噻唑基、 1， 2， 3_噻二唑 基、 1,2, 4-噻二唑基、 1,3, 4-噻二唑基、 噁唑基、 1,2, 4-噁二唑基、 1, 2, 3_噁二 唑基、 1, 3, 4噁二唑基、 嘧啶基、 吡嗪基、 哒嗪基、 喹喔啉基、 4H-色烯 -4-酮基、 吡啶基-、 噻吩并 [3, 2-b]噻吩基、 1H-咪唑基- (CH2) -、 1, 2, 4-三氮唑基- (CH2) -、 1,2, 3-三氮唑基 -((¾)-、 噻唑基 -((¾)-、 1,2, 3-噻二唑基 -((¾)-、 1,2,4-噻二 唑基- (CH2) -、 1,3, 4-噻二唑基- (CH2)―、噁唑基- (CH2) -、 1,2, 4-噁二唑基- (CH2)―、 1,2, 3-噁二唑基 -((¾)-、 1,3,4 噁二唑基 -((¾)-、 嘧啶基 -((¾)-、 吡嗪基 -((¾)-、 哒嗪基 -((¾)-、 喹喔啉基 -(CH2)-、 4H-色烯 -4-酮基 -((¾)-、 吡啶基 -((¾)-、 噻吩并 [3, 2-b]噻吩基 -(CH2)-、 1H-咪唑基 -= -、 1,2, 4-三氮唑基 -= -、 L 2, 3-三氮唑基- = -、 噻唑基 _ = -、 L 2, 3_噻二唑基_ = -、 1； 2, 4- 噻二唑基- = -、 1,3， 4-噻二唑基- = -、 噁唑基 -= -、 1,2， 4-噁二唑基- = -、 1,2, 3-噁二唑基- = -、 1,3,4 噁二唑基- = -、 嘧啶基 -= -、 吡嗪基 -= -、 哒嗪基 -= -、 喹喔啉基- = -、 4H-色烯 -4-酮基- = -、 吡啶基 _ = -、 噻吩并 [3, 2-b]噻吩基 -= -、 1H-咪唑基 -≡ -、 1, 2, 4-三氮唑基-≡ -、 1, 2, 3-三氮唑 基-≡ -、噻唑基 -≡ -、 1， 2, 3-噻二唑基-≡ -、 1, 2, 4-噻二唑基-≡ -、 1, 3, 4- 噻二唑基-≡ -、 噁唑基 -≡ -、 1, 2， 4-噁二唑基-≡ -、 1， 2， 3-噁二唑基-≡ -、 1, 3, 4 噁二唑基-≡ -、 嘧啶基 -≡ -、 吡嗪基 -≡ -、 哒嗪基 -≡ -、 喹喔啉基 -≡ -、 4H-色烯 -4-酮基-≡ -、 吡啶基 -≡ -、 噻吩并 [3， 2-b]噻吩基 _≡ -， 其 中这些杂环基任选被 d—4烷基、 卤素、 硝基、 d—4烷氧基、 氰基、 C2—4烯基、 （：2—4炔 基、 d-4酰氨基、 卤代 d-4烷基、 卤代 d-4烷氧基、 氨基、 N (d-4烷基 )2和 d—4烷基 NHC0中的一个或多个取代； 和 c) 甲基 -0C (0) - = _。 6、 根据权利要求 1至 5之任一项的化合物、 其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂 合物或结晶， 其中 R6基团 "苯基 -Y- "或 "杂环基 -Y-"与其所连接的苯环上的 氧基成对位或间位。 7、 根据权利要求 1或 2的化合物、 其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结 晶， 其中 R6基团、 R7基团与所连接的苯环一起形成 1， 2， 3， 4-四氢化萘、 2， 3-二 氢 -1H-茚、 B引哚、 苯并呋喃、 喹喔啉、 4H-色烯 -4-酮、 苯并 [d]异噁唑、 苯并 [d] 噁唑、 苯并 [c] [ 1, 2, 5]噻二唑、 苯并 [b]噻吩、 苯并二氢吡喃 -4-酮， 这些稠环可 以被卤素、 烷基、 d 烷氧基、 卤代 d 烷基、 卤代 d 烷氧基、 苯基、 氰基、 烷基 -0C (0) -、 d 烷基 -0C (0) -CH2-中的一个或多个取代。 8、 根据权利要求 1至 7之任一项的化合物、 其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂 合物或结晶， 其中 ¾为（¾， R2为 F， R3为 0H， 为（¾， R5为异丙基。 9、 根据权利要求 8的化合物、 其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 其中 R6为苯基或苄基。 10、 根据权利要求 1的化合物、 其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 89 .OTSCl/MOZ OAV .OTSCl/MOZ OAV 10、 药物组合物， 其包含权利要求 1-9之任一项的化合物、 其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶和药学可接受的载体。 11、 权利要求 1-9之任一项的化合物、 其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物 或结晶或权利要求 10的组合物， 其用于治疗黄病毒科病毒， 尤其是丙型肝炎病 毒感染。 12、 权利要求 1-9之任一项的化合物、 其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或 结晶或权利要求 10的组合物在制备用于治疗黄病毒科病毒， 尤其是丙型肝炎病 毒感染的药物中的应用。 13、 用于治疗和 /或预防黄病毒科病毒， 尤其是丙型肝炎病毒感染的方法， 包括 向需要其的个体给予治疗有效量的权利要求 1-9之任一项的化合物、其立体异构 体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶或权利要求 10的组合物。 |
技术领域
本发明属于医药化学领域， 具体涉及一类新的核苷氨基磷酸酯化合物、 含有 该核苷氨基磷酸酯化合物的组合物，以及所述 化合物或组合物作为病毒感染性疾 病治疗药物的用途， 特别是作为病毒性肝炎治疗药物的用途。
背景技术
丙型肝炎病毒 (HCV)感染是世界范围内流行的疾病， 全球慢性感染者已超 过 2亿， 埃及的慢性感染率为 15%， 巴基斯坦为 4. 8%， 中国为 3. 2%, 位列世界 前三。 丙型肝炎病毒感染的临床表现多样， 轻至炎症， 重至肝硬化、 肝癌。 慢性 丙型肝炎还可以并发某些肝外表现， 包括类风湿性关节炎、 干燥性结膜角膜 炎、 扁平苔藓、 肾小球肾炎、 混合型冷球蛋白血症、 B 细胞淋巴瘤和迟发性 皮肤卟啉症等， 可能是机体异常免疫反应所致。 且丙肝肝硬化失代偿期时， 可以出现各种并发症， 如腹水腹腔感染， 上消化道出血， 肝性脑病， 肝肾综 合征， 肝衰竭等表现。
HCV属于黄病毒科肝病毒属病毒， 其与黄病毒科中的另外两个属即瘟病毒属 和黄病毒属的基因结构相似。 目前， 治疗 HCV感染的标准方法有干扰素以及干扰 素和利巴韦林联合疗法。 不过， 仅 50%的治疗者对该方法有反应， 且干扰素具有 明显的副作用， 例如流行性感冒样症状、体重减低以及疲乏无 力， 而干扰素和利 巴韦林联合疗法则产生相当大的副作用， 包括溶血、 贫血症和疲乏等。
另外，已开发的用于治疗 HCV感染的药物包括蛋白酶抑制剂、噻唑烷衍生 物、 噻唑烷和 N-苯甲酰苯胺、 菲醌、 解旋酶抑制剂、 核苷聚合酶抑制剂和胶霉毒素、 反义硫代磷酸酯寡核苷酸、 依赖于 IRES的翻译的抑制剂、 核酶以及核苷类似物 等。
目前， 核苷磷酸酯类化合物用于治疗黄病毒科病毒尤 其是 HCV感染是本领域 的重要研发方向。 W0 2006/065335公开了一种抑制 HCV病毒的氟化吡咯并 [2， 3, d] 嘧啶核苷化合物。 US 2006/0241064公开了用于治疗黄病毒科家族病毒如 HCV引 起的病毒感染的核苷化合物。 W0 2008/121634 公开了用于治疗哺乳动物病毒性 感染的核苷氨基磷酸酯化合物。
尽管存在上述公开， 目前仍然非常需要用于治疗和 /或预防 HCV感染的有效 化合物。
发明内容
本发明的一个目的是提供用于治疗和 /或预防 HCV感染的通式 I所示的新型 核苷氨基磷酸 结晶:
其中：
(1) 选自 6 烷基；
(2) R 2 选自卤素；
(3) R 3 选自 0H、 H、 d— 4 烷氧基；
(4) R 4 选自 H、 d- 6 烷基、 卤代 C M 烷基；
(5) R 5 选自 d- 6 烷基、 卤代 C M 烷基；
(6) R 6 选自以下
a) 苯基 -Y -， 其中 Y为不存在或选自 d 烷基、 C 2 - 6 烯基、 C 2 - 6 炔基、 C 2 - 6 烯 基 _(C0)-、 C 2 - 6 炔基 _(C0)-、 0、 S、 氨基和 _Ν(( 6 烷基）， 其中苯基任选被 ^浣 基、 卤素、 硝基、 d 烷氧基、 氰基、 C 2 - 6 烯基、 C 2 - 6 炔基、 d 酰氨基、 卤代 d 浣基、 卤代 d 烷氧基、氨基、 Ν(( - 6 烷基 )^Β( - 6 烷基 NHC0中的一个或多个取代 或者苯基与五元环或六元环一起构成苯并五元 环或苯并六元环；
b) 杂环基 -Y -， 其中 Y为不存在或选自 d 烷基、 C 2 - 6 烯基、 C 2 - 6 炔基、 C 2 - 6 烯基 _(C0)-、 C 2 - 6 炔基 _(C0)-、 0、 S、 氨基和 -Ν(( - 6 烷基)或者杂环基与其连接的
Y—起构成双杂环， 其中杂环基任选被 d 烷基、 卤素、硝基、 d 烷氧基、氰基、 C 2 - 6 烯基、 C 2 - 6 炔基、 d 酰氨基、 卤代 d 烷基、 卤代 d 烷氧基、 氨基、 Wd 浣 基 ) 2 和 烷基 NHC0中的一个或多个取代；
c) 烷基 -0-C(0)-C 2 - 6 烯基-、 CM烷基 -0-C(0)-C 2 - 6 烯基 -C(0)-， 其中 d 浣基任选被 d- 6 烷基、 卤素、 硝基、 C M 烷氧基、 氰基、 C 2 — 6 烯基、 C 2 — 6 炔基、 d 酰氨基、 卤代 d 烷基、 卤代 d 烷氧基、 氨基、 ^(： 1 - 6 烷基) 2 和（： 1 - 6 烷基^1(：0中 的一个或多个取代；
(7) R 7 选自 H、 卤素、 d 烷基、 卤代 d 烷基、 d 烷氧基、 卤代 d 烷氧基、 N0 2 、
CN、 d- 6 烷基 -NH-C0-、 羟基、 单 C M 烷氨基、 双 d- 6 烷氨基、 C M 烷基 -S -、 C 2 - 6 烯 基- S -、 C 2 —炔基 -S -、 院基- S0_、 C 2 —烯基 _so_、 C 2 —炔基 _S0_、 院基- so 2 _、 C 2 —烯基- S0 2 -、 C 2 — 6 炔基- S0 2 -、 d— 6 烷基- oso 2 -、 c 2 — 6 烯基 -oso 2 -、 c 2 — 6 炔基 -oso 2 - ;
(8) 或者 R 6 、 R 7 与所连接的苯环一起形成苯并五元环或苯 并六元环， 所述的苯并 五元环和苯并六元环可以被卤素、 d-6烷基、 d-6烷氧基、 卤代 d-6烷基、 卤代 d-6 浣氧基、 苯基、 氰基、 d—6烷基 _0C (0) -、 d—6烷基 -0C (0) -CH 2 -中的一个或多个取 代。
本发明的另一个目的是提供制备本发明的通式 I的核苷氨基磷酸酯化合物 及其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶的方法。
本发明的再一个目的是提供包含本发明的通式 I的核苷氨基磷酸酯化合物 及其立体异构体、盐、水合物、溶剂合物或结 晶和药效可接受的载体的组合物以 及包含本发明的通式 I的核苷 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶和另一种抗病毒药的组合物。
本发明的还一个目的是提供本发明的通式 I的核苷氨基磷酸酯化合物及其 立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶治疗和 /或预防丙型肝炎病毒感染的 方法以及本发明的通式 I的核苷氨基磷酸酯化合物及其立体异构体、 、水合物、 溶剂合物或结晶在制备用于治疗和 /或预防丙型肝炎病毒感染的药物中的应用。
针对上述发明目的， 本发明提供以下技术方案：
第一方面， 本发明提供通式 I所示的新型核苷氨基磷酸酯化合物及其立体 异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶：
其中：
( 1) 选自 d-6烷基； 优选地， 选自 d- 3 烷基； 进一步优选地， 为（¾；
(2) R 2 选自卤素； 优选地， R 2 为 F;
(3) R 3 选自 0H、 H、 d- 4 烷氧基； 优选地， 选自 0H、 H、 甲氧基； 进一步优选地， 为 0H;
(4) R 4 选自 H、 d- 6 烷基、 卤代 d- 6 烷基； 优选地， R 4 选自 H、 d- 6 烷基； 进一步优 选地， R 4 选自 H和 d— 4 烷基；
(5) R 5 选自 d—6烷基、 卤代 CM烷基； 优选地， R 5 选自 d—6烷基； 进一步优选地，
Rs选自 4 院基；
(6) R 6 选自：
a) 苯基 -Y -， 其中 Y为不存在或选自 d—6烷基、 C 2 - 6 烯基、 C 2 - 6 炔基、 C 2 - 6 烯 基 _(C0)-、 C 2 - 6 炔基 _(C0)-、 0、 S、 氨基和 _Ν(( 6 烷基）， 其中苯基任选被 ^烷 基、 卤素、 硝基、 d-6烷氧基、 氰基、 C 2 - 6 烯基、 C 2 - 6 炔基、 d-6酰氨基、 卤代 d-6 烷基、 卤代 d—6烷氧基、氨基、 Ν(( - 6 烷基 )^Β( - 6 烷基 NHC0中的一个或多个取代 或者苯基与五元或六元环一起构成苯并五元环 或苯并六元环；
b) 杂环基 -Y -， 其中 Y为不存在或选自 d-6烷基、 C 2 - 6 烯基、 C 2 - 6 炔基、 C 2 - 6 烯基 _(C0)-、 C 2 - 6 炔基 _(C0)-、 0、 S、 氨基和 -Ν(( - 6 烷基)或者杂环基与其连接的
Y—起构成双杂环， 其中杂环基任选被 d-6烷基、 卤素、硝基、 d-6烷氧基、氰基、 C 2 - 6 烯基、 C 2 - 6 炔基、 d-6酰氨基、 卤代 d-6烷基、 卤代 d-6烷氧基、 氨基、 Ν((^ 6 烷 基 ) 2 和 d—6烷基 NHC0中的一个或多个取代；
c) 烷基 -0-C(0)-C 2 - 6 烯基-、 CM烷基 -0-C(0)-C 2 - 6 烯基 -C(0)-， 其中 d-6 烷基任选被 d- 6 烷基、 卤素、 硝基、 C M 烷氧基、 氰基、 C 2 — 6 烯基、 C 2 — 6 炔基、 d—6 酰氨基、 卤代 d-6烷基、 卤代 d-6烷氧基、 氨基、 ^(： 1 - 6 烷基) 2 和（： 1 - 6 烷基^1(：0中 的一个或多个取代；
优选地， R 6 选自
a) 苯基 -Y -， 其中 Y为不存在或选自 d- 4 烷基、 C 2 — 4 烯基、 C 2 — 4 炔基、 （： 2 — 4 烯 基 _(C0)-、 C 2 — 4 炔基 _(C0)-、 0、 S、 氨基和 _Ν(( 4 烷基）， 其中苯基任选被 d— 4 烷 基、 卤素、 硝基、 d— 4 烷氧基、 氰基、 C 2 — 4 烯基、 C 2 — 4 炔基、 d— 4 酰氨基、 卤代 d— 4 烷基、 卤代 d— 4 烷氧基、氨基、 N(d— 4 烷基 ) 2 和 d— 4 烷基 NHC0中的一个或多个取代 或者苯基与五元或六元环一起构成苯并五元环 或苯并六元环；
b) 杂环基 -Y -， 其中 Y为不存在或选自 d— 4 烷基、 C 2 — 4 烯基、 C 2 — 4 炔基、 C 2 — 4 烯基 _(C0)-、 C 2 — 4 炔基 _(C0)-、 0、 S、 氨基和 -N(d- 4 烷基)或者杂环基与其连接的 Y—起构成双杂环， 其中杂环基任选被 d— 4 烷基、 卤素、硝基、 d— 4 烷氧基、氰基、 C 2 — 4 烯基、 C 2 — 4 炔基、 d- 4 酰氨基、 卤代 d— 4 烷基、 卤代 d— 4 烷氧基、 氨基、 N(d— 4 烷 基 ) 2 和 d— 4 烷基 NHC0中的一个或多个取代；
c) d— 4 烷基 -0-〔（0)_(： 2 - 4 烯基-、 d— 4 烷基 -o-c(o)-c 24 烯基 -c(o)-， 其中 d— 4 烷基任选被 d— 4 烷基、 卤素、 硝基、 d- 4 烷氧基、 氰基、 C 2 — 4 烯基、 C 2 — 4 炔基、 d— 4 酰氨基、 卤代 d— 4 烷基、 卤代 d— 4 烷氧基、 氨基、 N(d— 4 烷基 ) 2 和 d— 4 烷基 NHC0中 的一个或多个取代；
进一步优选地， R 6 选自：
a) 苯基、 苯基- d— 3 院基-、 苯基 _C 2 — 3烯基-、 苯基 _C 2 — 3 炔基-、 苯基- 0_、 苯 基- S -、 苯基 -NH-和苯基 -Ν(( - 3 烷基) -、 苯基 -乙烯 _(C0)-、 萘基 -乙烯 _(C0)-， 其中所述苯基任选被 ( — 4 烷基、 卤素、 硝基、 d— 4 烷氧基、 氰基、 C 2 — 4 烯基、 （： 2 — 4 炔 基、 d- 4 酰氨基、 卤代 d- 4 烷基、 卤代 d- 4 烷氧基、 氨基、 N(d- 4 烷基 ) 2 和 d— 4 烷基 NHCO 中的一个或多个取代或者苯基与苯基、 噁唑、 吡嗪或吡咯一起构成萘、 苯 并噁唑基、 苯并 [b]吡嗪基、 苯并 [b]吡咯基；
b) 1H-咪唑基 -Y -、 1， 2， 4-三氮唑基 -Y -、 1， 2， 3-三氮唑基 -Y -、 噻唑基 -Y -、 1, 2, 3-噻二唑基 -Y -、 1,2, 4-噻二唑基 -Y -、 1, 3, 4-噻二唑基 -Y -、 噁唑基 -Y -、 1， 2， 4-噁二唑基 -Y -、 1， 2， 3-噁二唑基 -Y -、 1， 3， 4噁二唑基 -Y -、 嘧、啶基- Y -、 吡 嗪基 -Y -、 哒嗪基 -Y -、 喹喔啉基 -Y -、 4H-色烯 -4-酮基 -Y -、 吡啶基 -Y -、 噻吩基 -Y -、 噻吩并 [3，2-b]噻吩基 -Y-, 其中 Y为不存在或选自甲基、 乙基、 乙烯基、 乙炔基、 乙烯 _(C0)-、 乙炔 _(C0)-、 0、 S、 氨基和 -NCH 2 -， 其中这些杂环基任选 被 d— 4 烷基、 卤素、 硝基、 d- 4 烷氧基、 氰基、 C 2 — 4 烯基、 C 2 — 4 炔基、 d- 4 酰氨基、 卤代 d— 4 烷基、 卤代 d— 4 烷氧基、 氨基、 N(d— 4 烷基 ) 2 和 d— 4 烷基 NHC0中的一个或 多个取代；
c) 甲基 -oc(o)- = -、 乙基 -oc(o)- = -、 丙基 -oc(o)- = -、 异丙基 -oc(o)-=-、 丁基 -oc(o)-=-、 异丁基 -oc(o)-=-、 叔丁基 -oc(o)-=- ; 更进一步优选地， R 6 选自：
a) 苯基、 苯并噁唑基、 苯并 [b]吡嗪基、 苯并 [b]吡咯基、 苯基 -((¾)-、 苯基- = -、苯基 - = - C(0) -、苯基- ≡ -，其中所述苯基任选被 d— 4 烷基、 卤素、 硝基、 d- 4 烷氧基、 氰基、 C 2 — 4 烯基、 C 2 — 4 炔基、 d- 4 酰氨基、 卤代 d- 4 烷基、 卤代 d— 4 烷氧基、 氨基、 N(d— 4 烷基 ) 2 和 d— 4 烷基 NHC0中的一个或多个取代；
b) 1H-咪唑基、 1,2， 4-三氮唑基、 1,2， 3-三氮唑基、 噻唑基、 1， 2， 3_噻二唑 基、 1,2, 4-噻二唑基、 1,3, 4-噻二唑基、 噁唑基、 1,2, 4-噁二唑基、 1, 2, 3_噁二 唑基、 1, 3, 4噁二唑基、 嘧啶基、 吡嗪基、 哒嗪基、 喹喔啉基、 4H-色烯 -4-酮基、 吡啶基-、 噻吩并 [3, 2-b]噻吩基、 1H-咪唑基- (CH 2 ) -、 1, 2, 4-三氮唑基- (CH 2 ) -、 1,2, 3-三氮唑基 -((¾)-、 噻唑基 -((¾)-、 1,2, 3-噻二唑基 -((¾)-、 1,2,4-噻二 唑基- (CH 2 ) -、 1,3, 4-噻二唑基- (CH 2 )―、噁唑基- (CH 2 ) -、 1,2, 4-噁二唑基- (CH 2 )―、 1,2, 3-噁二唑基 -((¾)-、 1,3,4 噁二唑基 -((¾)-、 嘧啶基 -((¾)-、 吡嗪基 -((¾)-、 哒嗪基 -((¾)-、 喹喔啉基 -(CH 2 )-、 4H-色烯 -4-酮基 -((¾)-、 吡啶基 -((¾)-、 噻吩并 [3, 2-b]噻吩基 -(CH 2 )-、 1H-咪唑基 -= -、 1,2, 4-三氮唑基 -= -、 L 2 , 3 -三氮唑基- = -、 噻唑基 _ = -、 L 2 , 3 _噻二唑基_ = -、 1 ； 2, 4- 噻二唑基- = -、 1,3， 4-噻二唑基- = -、 噁唑基 -= -、 1,2， 4-噁二唑基- = -、 1,2, 3-噁二唑基- = -、 1,3,4 噁二唑基- = -、 嘧啶基 -= -、 吡嗪基 -= -、 哒嗪基 -= -、 喹喔啉基- = -、 4H-色烯 - 4 -酮基- = -、 吡啶基 _ = -、 噻吩并
[3, 2-b]噻吩基 _ = -、 1H-咪唑基 -≡ -、 1,2, 4-三氮唑基-≡ -、 1,2, 3-三氮唑 基-≡ -、噻唑基 -≡ -、 1， 2, 3-噻二唑基-≡ -、 1,2, 4-噻二唑基-≡ -、 1,3,4- 噻二唑基-≡ -、 噁唑基 -≡ -、 1 , 2， 4-噁二唑基-≡ -、 1， 2， 3-噁二唑基-≡ -、 1 , 3, 4 噁二唑基-≡ -、 嘧啶基 -≡ -、 吡嗪基 - ≡ -、 哒嗪基 - ≡ -、 喹喔啉基 -≡ -、 4H-色烯 -4-酮基-≡ -、 吡啶基 - ≡ -、 噻吩并 [3，2-b]噻吩基 _≡ -， 其 中这些杂环基任选被 d— 4 烷基、 卤素、 硝基、 d— 4 烷氧基、 氰基、 C 2 — 4 烯基、 （： 2 — 4 炔 基、 d- 4 酰氨基、 卤代 d- 4 烷基、 卤代 d- 4 烷氧基、 氨基、 N (d- 4 烷基 ) 2 和 d— 4 烷基 NHC0中的一个或多个取代；
c)甲基 -0C (0) - = _; 和
(7) 选自 H、 卤素、 d-6烷基、 卤代 d-6烷基、 d-6烷氧基、 卤代 d-6烷氧基、 N0 2 、
CN、 d—6烷基 -NH-C0-、 羟基、 单 CM烷氨基、 双 d—6烷氨基、 CM烷基 -S -、 C 2 - 6 烯 基- S -、 C 2 — 6炔基 -S -、 6院基- S0_、 C 2 — 6烯基 _so_、 C 2 — 6炔基 _S0_、 6院基- so 2 _、 C 2 — 6烯基- S0 2 -、 C 2 — 6 炔基- S0 2 -、 d— 6 烷基- oso 2 -、 c 2 — 6 烯基 -oso 2 -、 c 2 — 6 炔基- oso 2 - ; 优选地， R 7 选自 H、 卤素、 d-6烷基、 卤代 d-6烷基、 d-6烷氧基、 卤代 d-6烷氧基、
N0 2 、 CN、 CM烷基 -NH-C0- ; 进一步优选地、 R 7 选自 H、 卤素、 d— 4 烷基、 卤代 d— 4 烷基、 d- 4 烷氧基、 卤代 d- 4 烷氧基、 N0 2 、 CN、 d- 4 烷基 -NH-C0- ;
(8)或者 R 6 、 R 7 与所连接的苯环一起形成苯并五元环或苯 并六元环， 所述的苯并 五元环和苯并六元环可以被卤素、 d-6烷基、 d-6烷氧基、 卤代 d-6烷基、 卤代 d-6 烷氧基、 苯基、 氰基、 d—6烷基 _0C (0) -、 烷基 -0C (0) -CH 2 -中的一个或多个取 代； 优选地， R 6 、 R 7 与所连接的苯环一起形成 1， 2， 3， 4-四氢化萘、 2，3-二氢- 111- 茚、 吲哚、 苯并呋喃、 喹喔啉、 4H-色烯 -4-酮、 苯并 [d]异噁唑、 苯并 [d]噁唑、 苯并 [c] [ l，2，5]噻二唑、苯并 [b]噻吩、苯并二氢吡喃 -4-酮， 这些稠环可以被卤 素、 6院基、 6院氧基、 |¾代 d— 6院基、 |¾代 6院氧基、 苯基、 氰基、 6院 基 -0C (0) -、 烷基 -0C (0) -CH 2 -中的一个或多个取代。
在优选的实施方案中， 本发明提供通式 I的化合物及其立体异构体、盐、水 合物、溶剂合物或结晶， 其中 为甲基、 乙基、 丙基或异丙基， 为 F， R 3 为冊、 H或甲氧基， 为11、 甲基、 乙基、 正丙基或异丙基， R 5 为甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 正丁基、 异丁基或叔丁基， R 6 为苯基 -Y-或杂环基 -Y- , 其中 Y为不存在 或选自 3 浣基、 C 2 — 3 烯基、 C 2 — 3 炔基、 C 2 — 3 烯基 _ (C0) -、 C 2 — 3 炔基 _ (C0) -、 0、 S、 氨基和 -Ν (( - 3 烷基)或者， 其中所述苯基或杂环基任选被^烷基、 卤素、 硝基、 d- 3 烷氧基、 氰基、 C 2 - 3 烯基、 C 2 - 3 炔基、 d- 3 酰氨基、 卤代 d- 3 烷基、 卤代 d- 3 烷氧 基、 氨基、 N (d— 3 烷基 ) 2 和 d- 3 烷基 NHC0中的一个或多个取代或者苯基与五元环 或六元环一起构成苯并五元环或苯并六元环。
本发明的发明人惊奇地发现， 当式 I中的 R 6 基团， 特别是选自苯基 -Y-或杂 环基 -Y-时， 其与其所连接的苯环上的氧基成对位或间位的 化合物具有非常优异 的抗 HCV病毒活性。不希望被现有理论所束缚， 本发明的发明人认为， 式 I中的 R 6 基团， 特别是选自苯基 -Y-或杂环基 -Y-时， 在苯基 -Y-苯基 -0-或杂环基 -Y-苯 基 -0-的结构中， 苯环上苯基 -Y-或杂环基 -Y-与 -0-在对位或间位时， 具有优异的 抗 HCV病毒活性。
在进一步优选的实施方案中， 本发明提供通式 I的化合物及其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 其中 为甲基或乙基， 为 F， R 3 为 OH或 H， R 4 为 H、 甲基或乙基， R 5 为甲基、 乙基、 正丙基或异丙基， R 6 为苯基 -Y-, 其中 Y 为不存在或选自 d— 3 烷基、 C 2 - 3 烯基、 C 2 - 3 炔基、 C 2 - 3 烯基 _ (C0) -、 C 2 - 3 炔基 -(co)-， 其中苯基任选被(^ 3 烷基、 卤素、 硝基、 d- 3 烷氧基、 氰基、 C 2 - 3 烯基、 C 2 - 3 炔基、 d- 3 酰氨基、 卤代 d- 3 烷基、 卤代 d- 3 烷氧基、 氨基、 N (d- 3 烷基) 2 和 d- 3 烷基 NHC0 中的一个或多个取代或者苯基与噁唑、吡嗪或 吡咯一起构成苯并噁唑基、苯并 [b] 吡嗪基、 苯并 [b]吡咯基， 其中 R 6 基团 "苯基 -Y-"与其所连接的苯环上的氧基 成对位或间位。
在进一步优选的实施方案中， 本发明提供通式 I的化合物及其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 其中 为甲基， 为 F， R 3 为 0H， 为11、 甲基 或乙基， R 5 为甲基、 乙基、 正丙基或异丙基， R 6 为苯基 -Y-, 其中 Y为不存在或 选自 d- 3 浣基、 C 2 - 3 烯基、 C 2 - 3 炔基、 C 2 - 3 烯基 _ (C0) -、 C 2 - 3 炔基 _ (C0) -， 其中苯基 任选被 d— 3 烷基、 卤素、 硝基、 d- 3 烷氧基、 卤代 d— 3 烷基、 卤代 d— 3 烷氧基、 氰 基、 C 2 - 3 烯基、 C 2 - 3 炔基、 d- 3 酰氨基、 氨基和 d- 3 烷基 NHC0中的一个或多个取代 或者苯基与噁唑、 吡嗪或吡咯一起构成苯并噁唑基、 苯并 [b]吡嗪基、 苯并 [b] 吡咯基， 其中 R 6 基团 "苯基 -Y-"与其所连接的苯环上的氧基成对位或间位
在进一步优选的实施方案中， 本发明提供通式 I的化合物及其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 其中 为甲基， 为 F， R 3 为 0H， 为11或甲基， 为异丙基， R 6 为苯基 -Y -， 其中 Y为不存在或选自 d— 3 烷基、 C 2 - 3 烯基、 C 2 - 3 炔基、 C 2 - 3 烯基 _ (C0) -、 C 2 - 3 炔基- (C0) _， 其中苯基任选被(^ 3 烷基、 卤素、 硝基、 d— 3 烷 氧基、 卤代 d- 3 烷基、 卤代 d- 3 烷氧基、 氰基和 d- 3 烷基 NHC0中的一个或多个取 代或者苯基与噁唑、吡嗪或吡咯一起构成苯并 噁唑基、苯并 [b]吡嗪基、苯并 [b] 吡咯基， 其中 R 6 基团 "苯基 -Y-"与其所连接的苯环上的氧基成对位或间位
在进一步优选的实施方案中， 本发明提供通式 I的化合物及其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 其中 R 6 为苯基或苄基， 优选地， 所述苯基或苄 基与其所连接的苯环上的氧基成对位或间位。
在另外的实施方案中， 根据本发明的通式 I的化合物及其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 其中 R 6 为杂环基 -Y-, 其中所述杂环基还可以为呋喃 基、 吡咯基、 四唑、 呋咱、 二噁二唑、 吡喃、 噻喃、 哌啶、 三嗪、 噁嗪等。 在本发明的实施方案中， 进一步优选地， 提供通式 la的化合物及其立体异 构体、 盐、
(1) R 6 选自：
a) 苯基 -Y -， 其中 Υ为不存在或选自 d 烷基、 C 2 - 6 烯基、 C 2 - 6 炔基、 C 2 - 6 烯 基 _(C0)-、 C 2 - 6 炔基 _(C0)-、 0、 S、 氨基和 _Ν(( 6 烷基）， 其中苯基任选被 ^浣 基、 卤素、 硝基、 d 烷氧基、 氰基、 C 2 - 6 烯基、 C 2 - 6 炔基、 d 酰氨基、 卤代 d 浣基、 卤代 d 烷氧基、氨基、 Ν(( - 6 烷基 )^Β( - 6 烷基 NHC0中的一个或多个取代 或者苯基五元或六元环一起构成苯五元环或苯 并六元环；
b) 杂环基 -Y -， 其中 Y为不存在或选自 d 烷基、 C 2 - 6 烯基、 C 2 - 6 炔基、 C 2 - 6 烯基 _(C0)-、 C 2 - 6 炔基 _(C0)-、 0、 S、 氨基和 -Ν(( - 6 烷基)或者杂环基与其连接的
Y—起构成双杂环， 其中杂环基任选被 d 烷基、 卤素、硝基、 d 烷氧基、氰基、 C 2 - 6 烯基、 C 2 - 6 炔基、 d 酰氨基、 卤代 d 烷基、 卤代 d 烷氧基、 氨基、 Wd 浣 基 ) 2 和 烷基 NHC0中的一个或多个取代；
C) d 烷基 -0-C (0) -C 2 - 6 烯基-或 d 烷基 -0-C (0) -C 2 - 6 烯基 -C (0) -， 其中 d 浣基任选被 d- 6 烷基、 卤素、 硝基、 C M 烷氧基、 氰基、 C 2 — 6 烯基、 C 2 — 6 炔基、 d 酰氨基、 卤代 d 烷基、 卤代 d 烷氧基、 氨基、 ^(： 1 - 6 烷基) 2 和（： 1 - 6 烷基^1(：0中 的一个或多个取代；
优选地， R 6 选自：
a) 苯基 -Y -， 其中 Y为不存在或选自 d- 4 烷基、 C 2 — 4 烯基、 C 2 — 4 炔基、 （： 2 — 4 烯 基 _(C0)-、 C 2 — 4 炔基 _(C0)-、 0、 S、 氨基和 _Ν(( 4 烷基）， 其中苯基任选被 d— 4 浣 基、 卤素、 硝基、 d— 4 烷氧基、 氰基、 C 2 — 4 烯基、 C 2 — 4 炔基、 d— 4 酰氨基、 卤代 d— 4 浣基、 卤代 d— 4 烷氧基、氨基、 N(d— 4 烷基 ) 2 和 d— 4 烷基 NHC0中的一个或多个取代 或者苯基与五元环或六元环一起构成苯并五元 环或苯并六元环；
b) 杂环基 -Y -， 其中 Y为不存在或选自 d— 4 烷基、 C 2 — 4 烯基、 C 2 — 4 炔基、 C 2 — 4 烯基 _(C0)-、 C 2 — 4 炔基 _(C0)-、 0、 S、 氨基和 -N(d- 4 烷基)或者杂环基与其连接的 Y—起构成双杂环， 其中杂环基任选被 d— 4 烷基、 卤素、硝基、 d— 4 烷氧基、氰基、 C 2 — 4 烯基、 C 2 — 4 炔基、 d- 4 酰氨基、 卤代 d— 4 烷基、 卤代 d— 4 烷氧基、 氨基、 N(d— 4 烷 基 ) 2 和 d— 4 烷基 NHC0中的一个或多个取代；
c) d— 4 烷基 -0-〔（0)_(： 2 - 4 烯基-、 d— 4 烷基 -o-c(o)-c 24 烯基 -c(o)-， 其中 d— 4 烷基任选被 d— 4 烷基、 卤素、 硝基、 d- 4 烷氧基、 氰基、 C 2 — 4 烯基、 C 2 — 4 炔基、 d— 4 酰氨基、 卤代 d— 4 烷基、 卤代 d— 4 烷氧基、 氨基、 N(d— 4 烷基 ) 2 和 d— 4 烷基 NHC0中 的一个或多个取代；
进一步优选地， R 6 选自：
a) 苯基、、 苯基- d— 3 院基 -、 苯基 _C 2 — 3烯基-、 苯基 _C 2 — 3炔基-、 苯基- 0_、 苯 基- S -、 苯基 -NH-和苯基 -Ν(( - 3 烷基) -、 苯基 -乙烯 _(C0)-、 萘基 -乙烯 _(C0)-， 其中所述苯基任选被 (— 4 烷基、 卤素、 硝基、 d— 4 烷氧基、 氰基、 C 2 — 4 烯基、 （： 2 — 4 炔 基、 d- 4 酰氨基、 卤代 d- 4 烷基、 卤代 d- 4 烷氧基、 氨基、 N(d- 4 烷基 ) 2 和 d— 4 烷基 NHC0 中的一个或多个取代或者苯基与苯基、 噁唑、 吡嗪或吡咯一起构成萘、 苯 并噁唑基、 苯并 [b]吡嗪基、 苯并 [b]吡咯基；
b) 1H-咪唑基 -Y -、 1， 2， 4-三氮唑基 -Y -、 1， 2， 3-三氮唑基 -Y -、 噻唑基 -Y -、 1, 2, 3-噻二唑基 -Y -、 1,2, 4-噻二唑基 -Y -、 1, 3, 4-噻二唑基 -Y -、 噁唑基 -Y -、 1， 2， 4-噁二唑基 -Y -、 1， 2， 3-噁二唑基 -Y -、 1， 3， 4噁二唑基 -Y -、 嘧、啶基- Y -、 吡 嗪基 -Y -、 哒嗪基 -Y -、 喹喔啉基 -Y -、 4H-色烯 -4-酮基 -Y -、 吡啶基 -Y -、 噻吩基 -Y -、 噻吩并 [3,2-b]噻吩基 -Y-, 其中 Y为不存在或选自 -CH 2 -、 -CH 2 -CH 2 -、 乙烯 基、 乙炔基、 乙烯 _(C0)-、 乙炔 _(C0)-、 0、 S、 氨基和 -NCH 2 -， 其中这些杂环基 任选被 d— 4 烷基、 卤素、 硝基、 d- 4 烷氧基、 氰基、 C 2 — 4 烯基、 C 2 — 4 炔基、 d- 4 酰氨 基、 卤代 d— 4 烷基、 卤代 d— 4 烷氧基、 氨基、 N(d- 4 烷基 ) 2 和 d— 4 烷基 NHC0中的一 个或多个取代；
c) 甲基 -oc(o)- = -、 乙基 -oc(o)- = -、 丙基 -oc(o)- = -、 异丙基 -oc(o)-=-、 丁基 -oc(o)-=-、 异丁基 -oc(o)-=-、 叔丁基 -oc(o)-=- ; 更进一步优选地， R 6 选自：
a) 苯基、 苯基 -((¾)-、 苯基- = -、 苯基- = -C(0)_、 苯基-≡ -， 其中 所述苯基任选被 d— 4 烷基、 卤素、 硝基、 d— 4 烷氧基、 氰基、 C 2 — 4 烯基、 C 2 — 4 炔基、 d- 4 酰氨基、 卤素 d— 4 烷基、 氨基、 N(d— 4 烷基 ) 2 和 d— 4 烷基 NHC0中的一个或多个 取代或者苯基与噁唑、 吡嗪或吡咯一起构成苯并噁唑基、 苯并 [b]吡嗪基、 苯并 [b]吡咯基;
b) 1H-咪唑基、 1,2， 4-三氮唑基、 1,2， 3-三氮唑基、 噻唑基、 1， 2， 3_噻二唑 基、 1,2, 4-噻二唑基、 1,3, 4-噻二唑基、 噁唑基、 1,2, 4-噁二唑基、 1, 2, 3_噁二 唑基、 1, 3, 4噁二唑基、 嘧啶基、 吡嗪基、 哒嗪基、 喹喔啉基、 4H-色烯 -4-酮基、 噻吩并 [3, 2-b]噻吩基、 1H-咪唑基- (CH 2 )―、 1, 2, 4-三氮唑基- (CH 2 )―、 1, 2, 3_三 氮唑基 -((¾)-、 噻唑基 -((¾)-、 1, 2, 3-噻二唑基 -((¾)-、 1, 2, 4-噻二唑基
-((¾)-、 1,3, 4-噻二唑基 -((¾)-、 噁唑基 _((¾)-、 1, 2, 4-噁二唑基 -((¾)-、
1, 2, 3-噁二唑基 -((¾)-、 1, 3, 4 噁二唑基 -((¾)-、 嘧啶基 -((¾)-、 吡嗪基
-((¾)-、 哒嗪基 -((¾)-、 喹喔啉基 -(CH 2 )-、 4H-色烯 -4-酮基 -((¾)-、 吡啶基
-((¾)-、 噻吩并 [3, 2-b]噻吩基 -(CH 2 )-、 1H-咪唑基 -= -、 1, 2, 4-三氮唑基 -= -、 L 2 , 3 -三氮唑基- = -、 噻唑基 _ = -、 L 2 , 3 _噻二唑基_ = -、 1 ； 2, 4- 噻二唑基- = -、 1, 3， 4-噻二唑基- = -、 噁唑基 -= -、 1, 2， 4-噁二唑基- = -、 1, 2, 3-噁二唑基- = -、 1, 3,4 噁二唑基- = -、 嘧啶基 -= -、 吡嗪基 -= -、 哒嗪基 -= -、 喹喔啉基- = -、 4H-色烯 - 4 -酮基- = -、 吡啶基 _ = -、 噻吩并
[3, 2-b]噻吩基 _ = -、 1H-咪唑基 -≡ -、 1, 2, 4-三氮唑基-≡ -、 1, 2, 3-三氮唑 基-≡ -、噻唑基 -≡ -、 1， 2, 3-噻二唑基-≡ -、 1, 2, 4-噻二唑基-≡ -、 1, 3,4- 噻二唑基-≡ -、 噁唑基 -≡ -、 1, 2， 4-噁二唑基-≡ -、 1， 2， 3-噁二唑基-≡ -、 1, 3,4 噁二唑基-≡ -、 嘧啶基 -≡ -、 吡嗪基 - ≡ -、 哒嗪基 - ≡ -、 喹喔啉基 -≡ -、 4H-色烯 -4-酮基-≡ -、 吡啶基 - ≡ -、 噻吩并 [3， 2-b]噻吩基 _≡ -， 其 中这些杂环基任选被 d— 4 烷基、 卤素、 硝基、 d— 4 烷氧基、 氰基、 C 2 — 4 烯基、 （： 2 — 4 炔 基、 d- 4 酰氨基、 卤代 d- 4 烷基、 卤代 d- 4 烷氧基、 氨基、 N(d- 4 烷基 ) 2 和 d— 4 烷基 NHC0中的一个或多个取代； 和
c) 甲基 -0C(0)- = _; 和
(2) R 7 选自 H、 卤素、 d-6烷基、 卤代 d-6烷基、 d-6烷氧基、 卤代 d-6烷氧基、 N0 2 、
CN、 d—6烷基 -NH-C0-; 优选地， R 7 选自 H、 卤素、 d— 4 烷基、 卤代 d— 4 烷基、 d— 4 烷氧基、 卤代 d- 4 烷氧基、 N0 2 、 CN、 d— 4 烷基 -NH-C0-; 进一步优选地， R 7 选自 H、 氟、 氯、 甲基、 乙基、 正丙基、 异丙基、 氟甲基、 二氟甲基、 三氟甲基、 氟乙基、 二氟乙基、 三氟乙基、 甲氧基、 乙氧基、 正丙氧基、 异丙氧基、 氟代甲氧基、 二 氟代甲氧基、 三氟代甲氧基、 氟代乙氧基、 二氟代乙氧基、 三氟代乙氧基、 2 、 CN、 CH烷基 -NH-C0-;
(3) 或者 R 6 、 R 7 与所连接的苯环一起形成苯并五元环或苯 并六元环， 所述的苯并 五元环和苯并六元环可以被卤素、 d-6烷基、 d-6烷氧基、 卤代 d-6烷基、 卤代 d-6 烷氧基、 苯基、 氰基、 d—6烷基 _0C(0)-、 烷基 -0C(0)-CH 2 -中的一个或多个取 代； 优选地， R 6 、 R 7 与所连接的苯环一起形成 1， 2， 3， 4-四氢化萘、 2，3-二氢-111- 茚、 吲哚、 苯并呋喃、 喹喔啉、 4H-色烯 -4-酮、 苯并 [d]异噁唑、 苯并 [d]噁唑、 苯并 [c] [l，2，5]噻二唑、苯并 [b]噻吩、苯并二氢吡喃 -4-酮， 这些稠环可以被卤 素、 6院基、 6院氧基、 |¾代 d— 6院基、 |¾代 6院氧基、 苯基、 氰基、 6院 基 -0C (0) -、 烷基 -0C (0) -CH 2 -中的一个或多个取代。
在优选的实施方案中， 本发明提供通式 la的化合物及其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 其中 R 6 为苯基 -Y-或杂环基 -Y -， 其中 Y为不存在或 选自 3 浣基、 C 2 — 3 烯基、 C 2 — 3 炔基、 C 2 — 3 烯基 _(C0)-、 C 2 — 3 炔基 _(C0)-、 0、 S、 氨 基和 _Ν(( - 3 烷基）， 其中所述苯基或杂环基任选被 d- 3 烷基、 卤素、 硝基、 d- 3 烷 氧基、 氰基、 C 2 - 3 烯基、 C 2 - 3 炔基、 d- 3 酰氨基、 卤代 d- 3 烷基、 卤代 d— 3 烷氧基、 氨基、 NH(d- 3 烷基）、 N(d- 3 烷基 )^Β( - 3 烷基 NHC0中的一个或多个取代或者苯基 与五元环或六元环一起构成苯并五元环或苯并 六元环。优选地，根据本发明的通 式 la的化合物及其立体异构体、盐、水合物、溶 合物或结晶，其中 R 6 基团 "苯 基 -Y-"或 "杂环基 -Y-"与其所连接的苯环上的氧基成对位或间位
根据本发明的通式 la的化合物及其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或 结晶，其中 R 6 为 1H-咪唑基、 1, 2, 4-三氮唑基、 1, 2, 3-三氮唑基、噻唑基、 1, 2, 3- 噻二唑基、 1, 2, 4-噻二唑基、 1, 3, 4-噻二唑基、噁唑基、 1, 2, 4-噁二唑基、 1, 2, 3_ 噁二唑基、 1,3, 4噁二唑基、 嘧啶基、 吡嗪基、 哒嗪基、 喹喔啉基、 4H-色烯 -4- 酮基、噻吩并 [3, 2-b]噻吩基、 1H-咪唑基- (CH 2 )―、 1, 2, 4-三氮唑基- (CH 2 )―、 1, 2, 3- 三氮唑基 -((¾)-、 噻唑基 -((¾)-、 1,2, 3-噻二唑基 -((¾)-、 1,2, 4-噻二唑基
-((¾)-、 1,3, 4-噻二唑基 -((¾)-、 噁唑基 _((¾)-、 1,2, 4-噁二唑基 -((¾)-、
1,2, 3-噁二唑基 -((¾)-、 1,3,4 噁二唑基 -((¾)-、 嘧啶基 -((¾)-、 吡嗪基
-((¾)-、 哒嗪基 -((¾)-、 喹喔啉基 -(CH 2 )-、 4H-色烯 -4-酮基 -((¾)-、 吡啶基
-((¾)-、 噻吩并 [3, 2-b]噻吩基 -(CH 2 )-、 1H-咪唑基 -= -、 1,2, 4-三氮唑基 -= -、 L 2 , 3 -三氮唑基- = -、 噻唑基 _ = -、 L 2 , 3 _噻二唑基_ = -、 1 ； 2, 4- 噻二唑基- = -、 1,3， 4-噻二唑基- = -、 噁唑基 -= -、 1,2， 4-噁二唑基- = -、 1,2, 3-噁二唑基- = -、 1,3,4 噁二唑基- = -、 嘧啶基 -= -、 吡嗪基 -= -、 哒嗪基 -= -、 喹喔啉基- = -、 4H-色烯 - 4 -酮基- = -、 吡啶基 _ = -、 噻吩并
[3, 2-b]噻吩基 _ = -、 1H-咪唑基 -≡ -、 1,2, 4-三氮唑基-≡ -、 1,2, 3-三氮唑 基-≡ -、噻唑基 -≡ -、 1， 2, 3-噻二唑基-≡ -、 1,2, 4-噻二唑基-≡ -、 1,3,4- 噻二唑基-≡ -、 噁唑基 -≡ -、 1,2， 4-噁二唑基-≡ -、 1， 2， 3-噁二唑基-≡ -、 1,3,4 噁二唑基-≡ -、 嘧啶基 -≡ -、 吡嗪基 - ≡ -、 哒嗪基 - ≡ -、 喹喔啉基 -≡ -、 4H-色烯 -4-酮基-≡ -、 吡啶基 - ≡ -、 噻吩并 [3， 2-b]噻吩基 _≡ -， 其 中这些杂环基任选被 d- 3 烷基、 卤素、 硝基、 d- 3 烷氧基、 氰基、 卤代 d- 3 烷基、 卤代 烷氧基、 C 2 - 3 烯基、 C 2 - 3 炔基、 d- 3 酰氨基、 氨基、 NH(d- 3 烷基）、 Ν(( 3 烷 基 ) 2 和 d— 4 烷基 NHC0中的一个或多个取代，其中这些杂环基与 所连接的苯环上 的氧基成对位或间位。 在进一步优选的实施方案中，本发明提供通式 la的化合物及其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 其中 R 6 为苯基 -Y-, 其中 Y为不存在或选自 d— 3 烷基、 C 2 — 3 烯基、 C 2 — 3 炔基、 C 2 — 3 烯基- (C0) _、 C 2 — 3 炔基- (C0) _， 其中苯基任选被(^ 3 烷基、 卤素、 硝基、 d— 3 烷氧基、 氰基、 C 2 - 3 烯基、 C 2 - 3 炔基、 d— 3 酰氨基、 卤代 d— 3 烷基、 卤代 d- 3 烷氧基、 氨基、 NH (d- 3 烷基）、 Ν (( - 3 烷基 ) 2 和 d- 3 烷基 NHC0中的 一个或多个取代或者苯基与噁唑、 吡嗪或吡咯一起构成苯并噁唑基、 苯并 [b]吡 嗪基、 苯并 [b]吡咯基， 其中 R 6 基团与其所连接的苯环上的氧基成对位或 间位。
在进一步优选的实施方案中，本发明提供通式 la的化合物及其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 其中 R 6 为苯基 -Y-, 其中 Y为不存在或选自 d— 3 烷基、 C 2 — 3 烯基、 C 2 — 3 炔基、 C 2 — 3 烯基- (C0) _、 C 2 — 3 炔基- (C0) _， 其中苯基任选被(^ 3 烷基、 卤素、 硝基、 d— 3 烷氧基、 氰基、 C 2 - 3 烯基、 C 2 - 3 炔基、 卤代 d— 3 烷基、 卤代 d— 3 烷氧基、 d— 3 酰氨基、氨基和 d— 3 烷基 NHC0中的一个或多个取代或者苯基与噁 唑、 吡嗪或吡咯一起构成苯并噁唑基、 苯并 [b]吡嗪基、 苯并 [b]吡咯基， 其中 R 6 基团与其所连接的苯环上的氧基成对位或 间位。
在进一步优选的实施方案中，本发明提供通式 la的化合物及其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 其中 R 6 为苯基 -Y-, 其中 Y为不存在或选自 d— 3 烷基、 C 2 — 3 烯基、 C 2 — 3 炔基、 C 2 — 3 烯基- (C0) _、 C 2 — 3 炔基- (C0) _， 其中苯基任选被(^ 3 烷基、 卤素、 硝基、 d— 3 烷氧基、 氰基、 卤代 d— 3 烷基、 卤代 d- 3 烷氧基和 d— 3 烷 基 NHC0中的一个或多个取代或者苯基与噁唑、吡 或吡咯一起构成苯并噁唑基、 苯并 [b]吡嗪基、 苯并 [b]吡咯基， 其中 R 6 基团与其所连接的苯环上的氧基成对 位或间位。
在进一步优选的实施方案中，本发明提供通式 la的化合物及其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 其中 R 6 为苯基-或苄基- (苯基 -(¾-)， 优选地， 所述苯基或苄基与其所连接的苯环上的氧基成 对位或间位。
在另外的实施方案中，根据本发明的通式 la的化合物及其立体异构体、盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 其中 R 6 为杂环基 -Y-, 其中所述杂环基还可以为呋喃 基、 吡咯基、 四唑、 呋咱、 二噁二唑、 吡喃、 噻喃、 哌啶、 三嗪、 噁嗪等。
本发明提供了以下具体化合物：
.OTSCl/MOZ OAV
.OTSCl/MOZ OAV
O z-ssszAV
另一方面， 本发明提供本发明的通式 I和 la化合物的制备方法， 该方法包括以
合成路线
a) 化合物（1)在碱性条件下与三氯氧磷反应后， 加入化合物 (2)反应， 再加入五 氟苯酚反应得到化合物 (3) ;
b) 低温条件下， 化合物 (3)与化合物 (4)反应， 得到目标化合物 (5)。
其中， 、 R 2 、 R 3 、 R 4 、 R 5 、 R 6 、 R 7 如以上通式 I中所定义。
第三方面， 本发明提供药物组合物， 其包含本发明的通式 I和 la所示化合 物、 立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶。
在一些实施方案中， 本发明提供药物组合物， 其包含通式 I和 la所示化合 物、 立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶， 还包含选自下列组成的一种或 多种另外的抗 HCV治疗剂： HCV NS3蛋白酶抑制剂、 HCV NS5B RNA依赖性 RNA 聚合酶抑制剂、 核苷类似物、 干扰素 α、 聚乙二醇化的干扰素、 利巴韦林、 左旋 韦林、 韦拉米啶、 TLR7激动剂、 TLR9激动剂、 亲环蛋白抑制剂、 α葡萄糖苷酶 抑制剂、 NS5A抑制剂和 NS3解螺旋酶抑制剂。
可以将本发明的通式 I和 la所示化合物、 立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂 合物或结晶与药学上可接受的载体、稀释剂或 赋形剂混合制备成药物制剂， 以适 合于经口或胃肠外给药。给药方法包括， 但不限于皮内、肌内、腹膜内、静脉内、 皮下、鼻内和经口途径。所述制剂可以通过任 何途径施用，例如通过输注或推注， 通过经上皮或皮肤粘膜 （例如口腔粘膜或直肠等)吸收的途径施用。 给药可以是 全身的或局部的。经口施用制剂的实例包括固 体或液体剂型， 具体而言， 包括片 剂、 丸剂、 粒剂、 粉剂、 胶囊剂、 糖浆、 乳剂、 混悬剂等。 所述制剂可通过本领 域已知的方法制备， 且包含药物制剂领域常规使用的载体、 稀释剂或赋形剂。
第四方面， 本发明提供本发明的通式 I和 la所示化合物、 立体异构体、 盐、 水合物、溶剂合物或结晶或本发明的药物组合 物治疗黄病毒科病毒感染的受治疗 者的方法， 包括向所述受治疗者施用通式 I和 la的化合物、 立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶或者包含通式 I和 la的化合物、 立体异构体、 盐、 水 合物、溶剂合物或结晶的药物组合物， 以有效减少所述受治疗者中所述病毒的病 毒载量的量施用。 在一个实施方案中， 本发明提供用于治疗和 /或预防 RNA病毒 例如黄病毒科病毒感染的方法， 包括向需要此治疗的个体给予本发明的化合物 、 其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶或其药物组合物。 在另一个实施方 案中，本发明提供抑制 RNA病毒例如黄病毒科病毒感染的方法，包括使 所述病毒 与治疗有效量的本发明的化合物、 其立体异构体、 盐、 水合物、 溶剂合物或结晶 或其药物组合物接触。
"黄病毒科病毒"是指黄病毒科的任何病毒， 包括感染人和非人动物的那些 病毒， 例如黄病毒、 鼠疫病毒和丙型肝炎病毒。本发明的化合物和 组合物可特别 用于治疗或预防性治疗 HCV。
另一方面， 本发明提供本发明的通式 I和 la所示化合物、 立体异构体、 盐、 水合物、溶剂合物或结晶用于预防或治疗病毒 性感染，尤其是黄病毒感染疾病的 应用， 以及在制备预防和 /或治疗病毒性感染疾病的药物中的应用， 特别是在制 备预防和 /或治疗 HCV病毒感染， 如 HCV病毒性肝炎疾病的药物中的应用。 该类 疾病的实例有急性丙型肝炎、慢性丙型肝炎以 及丙型肝炎和乙型肝炎或丁型肝炎 的混合感染。 术语定义
除非另外定义，本文使用的所有技术和科学术 语具有与本发明所属领域的普 通技术人员通常理解的相同的含义。
术语"立体异构体"是指由分子中原子在空间上 列方式不同所产生的异构 体。包括顺反异构体、对映异构体和构象异构 体。所有立体异构体均属于本发明 的范围。本发明的化合物的单独立体异构体可 基本上不含其它异构体或可以混合 成例如外消旋体， 或者与所有其它的立体异构体混合。
术语 "盐"是指本发明所述的化合物与酸形成的药学 可接受的盐， 所述的 酸可选自： 磷酸、 硫酸、 盐酸、 氢溴酸、 柠檬酸、 马来酸、 丙二酸、 扁桃酸、 琥 珀酸、 富马酸、 醋酸、 乳酸、 硝酸、 磺酸、 对甲苯磺酸、 苹果酸、 甲烷磺酸或其 类似物。
术语 "溶剂合物"是指通过与溶剂分子配位形成固态 液态的配合物的本发 明化合物的形式。水合物是溶剂合物的特殊形 式， 其中与水发生配位。在本发明 范围内， 溶剂合物优选是水合物。
术语"结晶"是指本发明所述的化合物形成的各 固体形态， 包括晶型、 无 定形。
术语"烷基"是指直链、 支链或环状的饱和烃基， 优选 6个碳原子以下的烃 基。烷基的实施例包括甲基、 乙基、 正丙基、异丙基、环丙基、 正丁基、异丁基、 叔丁基、 环丁基、 正戊基、 异戊基、 新戊基、 环己基、 正己基、 异己基、 2, 2, - 甲基丁基和 2， 3-二甲基丁基。 术语 "d—6烷基"是指含有 1-6个碳原子的直链、 支链或环状的饱和烃基。 术语 "CH烷基"是指含有 1-4个碳原子的直链、 支链 或环状的饱和烃基。
术语 "烯基"是指含有一个或多个碳碳双键 (C=C)的直链或支链不饱和烃基， 优选含有 2至 6个碳原子的烯基， 更优选含有 2至 4个碳原子的烯基，最优选含 有 2个碳原子的烯基。 术语 " C 2 - 6 烯基"是指含有 1个或 2个碳碳双键且含有 2 至 6个碳原子的不饱和烃基。 术语 " C 2 — 4 烯基"是指含有 1个或 2个碳碳双键且 含有 2至 4个碳原子的不饱和烃基。
术语 "炔基" 指是指含有一个或多个碳碳三键 (C≡C)的直链或支链不饱 和烃基， 优选含有 2至 6个碳原子的炔基， 更优选含有 2至 4个碳原子的炔基， 最优选含有 2个碳原子的炔基。 术语 " C 2 - 6 烯基"是指含有 1个或 2个碳碳三键 且含有 2至 6个碳原子的不饱和烃基。 术语 " C 2 — 4 烯基"是指含有 1个或 2个碳 碳三键且含有 2至 4个碳原子的不饱和烃基。
术语 "烷氧基"是指 -0-烷基。
术语 "卤素"是指氟、 氯、 溴、 碘。
术语 "卤代烷基"是指至少被一个卤素原子取代的烷 。
术语 "杂环基"是指至少含有一个杂原子的环状基团 其中杂原子为 N、 0 或 S， 包括单杂环基和稠杂环基。其中单杂环基包括 但不限于呋喃、噻吩、吡咯、 噻唑、 咪唑、 1 , 2， 3-三氮唑、 1 , 2， 4-三氮唑、 1, 2， 3-噻二唑， 噁唑、 1， 2， 4-噁二 唑、 1 , 3, 4-噁二唑、 吡啶、 嘧啶、 哒嗪、 吡嗪、 四氢呋喃、 四氢吡咯、 哌啶、 哌 嗪、 吗啉、异噁唑啉等。稠杂环基包括但不限于喹 啉、异喹啉、 吲哚、苯并呋喃、 苯并噻吩、 嘌呤、 吖啶、 咔唑、 芴、 色烯酮、 芴酮、 喹喔啉、 3， 4-二氢萘酮、 二 苯并呋喃、 氢化二苯并呋喃、 苯并噁唑基等。
术语 "苯并五元环"和 "苯并六元环"是指稠环基。 具体实施方式
下面结合实施例对本发明作进一步详细阐述， 但本发明不限于这些实施例。 本发明使用的试剂和原料均为商购所得。
实施例 1 (2S)- 2- ((([1, -联苯 ]-4-基氧基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)- 5- (2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1(2H)-基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰 基)氨基)丙酸异丙酯
步骤 1 (2S)- 2- ((((S)-五氟苯氧基）（[1, -联苯 ]-4-基氧基)磷酰基)氨基)丙 酸异丙酯的制备
在反应瓶中加入三氯氧磷 0.9g(5.87mmol), 加二氯甲烷 30ml, 冷却到 -60 。C， 缓慢滴加对苯基苯酚 lg(5.87 ol)和三乙胺 0.6 g (5.87mol)的二氯甲烷溶 液， 滴毕， 室温反应过夜。 将上述混合液冷却到 0°C， 加入 L-丙氨酸异丙酯盐酸 盐 0.9g(5.3 1)， 冷却到 -60°C， 滴加三乙胺 1.34 g (13mm 0 l)的二氯甲烷溶液 20mL,加毕， 升温到 -5°C，将五氟苯酚 lg(5.3 ol)和三乙胺 0.8g(8mmol)的二氯 甲烷溶液 15mL液体滴加到上述溶液中， -5°C搅拌 1小时， 反应完全， 加水萃取， 干燥， 浓缩， 硅胶色谱柱分离， 得到标题化合物。
步骤 2 (2S)- 2- ((([1,1'-联苯] - 4-基氧基）（（(2R,3R,4R,5R)- 5- (2,4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1(2H)-基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰 基)氨基)丙酸异丙酯的制备
在反应瓶中加入（2'R)-2'_脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷（26mg 0. lmmol)、 四氢 呋喃 lmL， 冰浴下， 氮气保护， 滴加 1M 的叔丁基氯化镁的 THF 溶液 0.25ml (0.25mmol) , 加毕， 室温反应 4小时， 冰浴下， 滴加上述对苯基苯酚的磷 酸酯中间体 70mg(0.13mmol)的四氢呋喃溶液 1.5mL， 滴毕， 室温反应过夜， 反应 结束。 在冰浴下， 用 6ml的 2N HC1淬灭， 乙酸乙酯萃取， 饱和碳酸氢钠溶液洗 涤， 干燥， 浓缩， 硅胶色谱柱分离， 纯化得到目标化合物。
¾NMR (300MHz, DMS0) δ： 11· 51 (s 1H pyrimidineN-H) , 7.68—7· 62 (m, 4H Ar— H py rimidine-H) 7.60-7· 56 (d 1H Ar- H) 7.48-7· 43 (t, 2H, Ar- H) 7.38-7· 30 (m, 3H Ar-H) , 6.12-6.00 (m, 2H, tetrahydrofuran-H) , 5.84 (d, 1H pyrimidine- H) , 5.56 ( d 1H P-NH) 4.90-4.82 (m, 1H - (CH3) 2 C_H) 4.62-4.34 (m, 1H tetrahydrofuran- OH)， 4.30-4.22 (m, 1H，（CH3) C (NH) - H)， 4.06-4· 00 (m, 1H， tetrahydrofuran-H)， 3. 88-3.77 (m, 2H, P-0_CH 2 -H) , 1.30-1.20 (m, 9H， 3 X CH 3 ) , 1.58 (d， 3H， CH 3 )。
ESI -MS m/z: [M+H]+ =606.2。
实施例 2 (2S)-2-((([l, -联苯 ]-3-基氧基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)- 5- (2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1(2H)-基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰 基)氨基)丙酸异丙酯
以间苯基苯酚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和（2' R) -2'- 脱氧 _2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合物。
¾NMR (300MHz, DMS0) δ :11.50(s, 1Η， pyrimidineN-H)， 7.68—7· 55 (m, 3H， Ar— H， py rimidine-H)， 7.50-7.36 (m, 6H， Ar- H) , 7.21 (d, 1H， Ar- H)， 6.13-6.00 (m, 2H, tetra hydrofuran-H)， 5.88-5.84 (d, 1H， pyrimidine-H)， 5.57-5.52 (d, 1H， P-NH)， 4.86- 4.82 (m, 1H， - (CH 3 ) 2 C_H) ,
4.40-4.38 (m, 1H， tetrahydrofuran-OH)， 4.28-4· 26 (m, 1H， (CH 3 ) C (NH) - H)， 4.04- 4.02 (m, 1H， tetrahydrofuran-H)， 3.88-3· 80 (m, 2H, P- 0- CH 2 - H)， 1.28-1· 20 (m, 6H , 2XCH 3 ), 1.14-1.11 (d, 6H, 2XCH 3 )。
ESI -MS m/z: [M+H]+ =606.2。
实施例 3 (2S)-2-((([l, -联苯 ]-2-基氧基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)- 5- (2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1(2H)-基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰 基)氨基)丙酸异丙酯
以邻苯基苯酚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和（2' R) -2'- 脱氧 _2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合物。
¾NMR (300MHz, DMS0) δ :11.49(s, 1Η， pyrimidine- Ν- Η) , 7.56-7· 05 (m, 10H, Ar- Η， pyrimidine-H) , 6. 38-5. 89 (m, 2H, tetrahydrofuran-H) , 5. 80 (d, 1H, pyrimidine- H)， 5. 42 (d， 1H， P-NH)， 4. 86-4. 75 (m, 1H， - (CH 3 ) 2 C_H)， 4. 24-4. 18 (m, 1H， tetrahydr ofuran-OH) , 4. 14-4· 08 (m, 1H， (CH 3 ) C (NH) -H) , 3. 99-3· 89 (m, 1H， tetrahydrofura n-H)， 3. 85-3. 72 (m, 2H, P_0_CH 2 _H)， 1. 27-1. 23 (m, 3H， CH 3 )， 1. 19-1. 07 (d， 9H， 3 X CH 3 )。
ESI -MS m/z : [M+H] + =606. 2。
实施例 4 (2S) -2- ( ( (2-苄基苯基- 1-基氧基） ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1 (2H) -基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰 基)氨基)丙酸异丙酯
以邻苄基苯酚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和（2' R) -2' - 脱氧 _2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合物。
¾NMR (300MHz, DMS0) δ : 11. 48 (s, 1Η， pyrimidine- Ν- Η) , 7. 53-7· 05 (m, 10H, Ar-H, pyrimidine-H) , 6. 36-5. 88 (m, 2Η, tetrahydrofuran-H) , 5. 81 (d, 1H, pyrimidine- H) , 5. 43 (d， 1H， P-NH) , 4. 85—4· 71 (m, 1H， - (CH 3 ) 2 C- H) , 4. 21-4· 15 (m, 1H， tetrahydr ofuran-0H)， 4. 12-4· 01 (m, 1H， (CH 3 ) C (NH) - H)， 3. 92-3· 89 (m, 1H， tetrahydrofura n-H)， 3. 81-3. 73 (m, 2H, P- 0- CH 2 - H)， 1. 32-1· 31 (m, 2H, CH 2 ) 1. 23-1· 21 (m, 3H， CH 3 ) , 1. 11-1. 01 (d, 9H, 3 X CH 3 )。
ESI -MS m/z : [M+H] + =620. 2。
实施例 5 (2S) - 2- ( ( ( [4， -氟- 1, 1， -联苯] -4-基)氧基） ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4- 二氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1 (2H) -基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基) 磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
以 4-氟 -4' -羟基联苯、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和 (2'1 -2'-脱氧-2'-氟-2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合 物。
¾NMR (300MHz, CDC13) δ：8.09 (s, 1H， pyrimidineN-H)， 7.55-7· 49 (m, 6H， Ar-H, ) , 7.32 (d， 1H， Ar-H)， 7.17-7· 11 (d， 1H， pyrimidine- H)， 6.23-6· 18 (m, 1H， tetrahydr ofuran-H)， 5.76 (d, 1H， pyrimidine-H)， 5.09-5.00 (m, 1H， P-NH)， 4.62-4.49 (m, 2H ， - (CH 3 ) 2 C-H)， 4.16-4.12 (m, 1H， tetrahydrofuran-OH)， 4.04-3· 97 (m, 2H, (CH 3 ) C ( NH) - H)， 3.78-3.71 (m, 1H， tetrahydrofuran-H)， 1.49 (m, 2H, P- 0- CH 2 - H)， 1.42-1. 39 (m, 6H， 2 X CH 3 ) , 1.30-1.24 (d， 6H， 2 X CH 3 )。
ESI -MS m/z: [M+H]+ =624.3。
实 施 例 6 (2S)-2-((([4'- 硝 基 - Ι, - 联 苯 ]-4- 基 ） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基） 酯
以 4-羟基 -4' -硝基联苯、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和 (2' R) -2'-脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合 物。
¾NMR (300MHz, DMS0) δ :11.48(s, 1Η， pyrimidineN-H) , 8.29 (d， 2Η, Ar-H, )， 7· 94 ( d， 2Η, Ar-H)， 7.82 (d， 2H, Ar-H)， 7.56 (d， 1H， pyrimidine-H)， 7.38-7.34 (m, 2H, Aril) , 6.13-6.04 (m, 2H, tetrahydrofuran-H) , 5.83 (d, 1H， pyrimidine-H) , 5.56 (d, 1 H, P-NH) , 4.88-4.85 (m, 1H， - (CH 3 ) 2 C_H) , 4.40 (m, 1H， tetrahydrofuran-OH) , 4.28 ( m, 1H， (CH3) C (NH) _H)， 4.04-4.02 (m, 1H， tetrahydrofuran-H) 3.86-3.84 (m, 2H, P- 0— CH 2 — H)， 1.28-1.25 (m, 6H, 2XCH 3 ), 1.18—1· 15 (m, 6H, 2XCH 3 )。
ESI -MS m/z: [M+H]+ =651.4。
实施例 7 (2S)-2-(((2-甲氧基 -4-甲氧羰基- (E)-乙烯基苯 -1-基氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
以（E) -3- (4-羟基 -3-甲氧基苯基)丙烯酸甲酯、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯 盐酸盐、 五氟苯酚和（2' R) -2'-脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的 方法， 制得目标化合物。
¾NMR (300MHz, DMSO) δ :11· 48 (s, 1Η pyrimidine- Ν-Η) 7· 62-7· 57 (m, 2 Η Ar_H: pyrimidine-H) 7.46 (s, 1H CH=CH) 7.31-7.22 (m, 2H, Ar-H) 6.63 (d 1H CH=CH) , 6.03-5.93 (m, 2H, tetrahydrofuran-H) , 5.88—5· 79 (m, 1H pyrimidine-H) , 5.57—5 • 50 (m, 1H P-NH) 4.87-4.78 (m, 1H - (CH3) 2C—H) 4.40-4.34 (m, IH,
tetrahydrofuran-OH) , 4.25-4.20 (m, 1H (CH 3 ) C (NH) -H) , 4.05-3.96 (m, 1H tetra hydrofuran-H) 3.75-3· 82 (m, 2H, P- 0- CH 2 - H) 3.80 (s, 3H 0CH 3 ) 3.70 (s, 3H -C00 CH 3 ) 1.26-1.1 (m, 9H, 3XCH 3 )， 1.13—1· 10 (m 3H CH 3 )
ESI -MS m/z: [M+H]+ =644.2
实施例 8 (2S)-2-((((E)-4-(3, 5-二甲氧基苯乙烯基）苯- 1-基氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲 丙酯
以（E)-4-(3 5-二甲氧基苯乙烯基)苯酚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸 盐、五氟苯酚和（2' R) -2'-脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合物。
¾NMR (300MHz, DMS0) δ :11.51(s, 1Η Ν- Η) 8· 19 (d, IH, Ar-H) , 7.59 (t, 2Η, Ar-H), 7.20 (m, 4H Ar-H) 6.76 (s, 2H, Ar-H) 6.41 (s, 1H Ar-H) 6.10 (s, 1H Ar-H) , 6.06 ( m, 1H -CH-) 5.85 (d 1H N-H) 5.57 (d 1H _CH_) 4.85 (q, 1H _CH_) 4.37 (m, 2H, - CH-) 4.27 (m, 1H—OH) , 4.01 (m, 1H， -CH 2 -)， 3.78 (s, 6H， _CH 3 )， 1.29 (s, 3H， _CH 3 )， 1.25 (s, 3H， _CH 3 )， 1.15 (d ,6H， -CH 3 )。
ESI -MS m/z: [M+H]+ =692.2。
实 施 例 9 (2S)-2-(((4- 甲 氧 羰 基 -(E)- 乙 烯 基 苯 - 1- 基 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
以（(E) -3- (4-羟基苯基)丙烯酸甲酯、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和（2' R) -2'-脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制 得目标化合物。
¾NMR (300MHz, DMS0) δ :11.50 (s, 1Η， pyrimidine- Ν- Η) , 7.63 -Ί· 59 (m, 2 Η, Ar- Η: pyrimidine-H)， 7.48 (s, 1Η， CH=CH)， 7.32-7.21 (m, 2H, Ar_H)， 6.65 (d， 1H， CH=CH) , 6.01-5.94 (m, 2H, tetrahydrofuran-H) , 5.84 -5.78 (m, IH, pyrimidine-H), 5.51-5.50 (m, IH, P_通）， 4.88-4.79 (m, IH, - (CH 3 ) 2 C- H)， 4· 42- 4· 33 (m, IH, tetrahydrofuran-OH)， 4.25-4· 18 (m, 1H， (CH 3 ) C (NH) - H)， 4.05-3· 95 (m, 1H， tetra hydrofuran-H)， 3.75-3· 82 (m, 2H, P- 0- CH 2 - H)， 3.72 (s, 3H， - C00CH 3 ) 1.28-1· 12 (m, 9H, 3XCH 3 ), 1.12-1.10 (m, 3H， CH 3 )。
ESI -MS m/z: [M+H]+ =644.2。
实施例 10 (2S) -2- ( ( (3-肉桂酰基苯- 1-基氧基） ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二氧 代 -3, 4-二氢嘧啶 -1(2H)-基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷 酰基)氨基)丙酸异丙酯
以 3-肉桂酰基苯酚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和 (2' R) -2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合 物。
¾NMR (300MHz, DMS0) δ : 11. 52 (s, 1Η， pyrimidineN-H) , 7. 88-7· 82 (m, 1Η， pyrimid ine-H)， 7. 78-7. 72 (m, 3H， Ar-H)， 7. 60-7. 56 (d， 1H， Ar-H)， 7. 46 (s, 1H， CH=CH)， 7. 3 1-7. 22 (m, 4H， Ar-H)， 6. 63 (d， 1H， CH=CH)， 6. 12-6. 00 (m, 2H, tetrahydrofuran-H) , 5. 82 (d， 1H， pyrimidine-H)， 5. 53 (d， 1H， P-NH)， 4. 91-4. 82 (m, 1H， - (CH 3 ) 2 C_H)， 4. 6 3-4. 34 (m, 1H， tetrahydrofuran-OH)， 4. 30-4· 22 (m, 1H， (CH 3 ) C (NH) - H)， 4. 06-4· 0 0 (m, 1H， tetrahydrofuran-H)， 3. 88-3. 77 (m, 2H, P-0_CH 2 -H)， 1. 30-1. 20 (m, 9H， 3 X CH 3 )， 1. 58 (d, 3H， CH 3 )。
ESI -MS m/z : [M+Na] + =682. 1。
实施例 11 (2S) - 2- (( (4- (苯基乙炔基)苯- 1-基)氧基）（（(2R, 3R, 4R, 5R) - 5- (2, 4- 二氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1 (2H) -基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基) 磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
以 1- (4-羟基苯基) -2-苯基乙炔、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五 氟苯酚和（2' R) -2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得 目标化合物。
¾NMR (300MHz, DMS0) δ : 11. 49 (s, 1Η， pyrimidineN-H) , 7. 71 (d， 2Η, Ar-H, ) , 7. 56 ( m, 4H， Ar-H, pyrimidine-H)， 7. 42 (s, 2H, Ar-H, ) , 1. 21 (m, IH)， 7. 04 (m, IH)， 6. 16-6 • 03 (m, 2H, tetrahydrofuran-H) , 5. 84 (d, 1H， pyrimidine— H) , 5. 66—5· 52 (m, 1H， P- NH)， 4. 87-4. 83 (m, 1H， - (CH 3 ) 2 C— H)， 4. 38 (m, 1H， tetrahydrofuran-OH)， 4. 25 (m, IH ， (CH3) C (NH)— H)， 4. 02 (m, 1H， tetrahydrofuran-H)， 3. 79 (m, 2H, P— 0— CH2— H)， 1. 27 -1. 23 (m, 6H, 2 X CH 3 ) , 1. 16-1. 14 (m, 6H, 2 X CH 3 )。
ESI -MS m/z : [M+H] + =630. 3。
实 施 例 12 (2S) -2- (( (4- (l, 2, 3- 噻 二 唑 -4- 基 ） 苯 - 1- 基 ） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H) -基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
以 4- (1， 2， 3-噻二唑 -4-基)苯酚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟 苯酚和（2' R) -2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目 标化合物。
¾NMR (300MHz, DMS0) δ : 11. 50 (s, 1Η， pyrimidineN-H)， 9. 59 (s, 1H， thiadiazole) ,
8. 14-8. 17 (m, 2H, Ar_H)， 7. 57 (m, 1H， pyrimidine-H)， 7. 36-7. 42 (m, 2H, Ar_H)， 6. 1
0-6. 17 (m, 2H, tetrahydrofuran-H) , 5. 90 (d, 1H， pyrimidine-H) , 5. 59 (d, 1H， P-NH
)， 4. 90-4. 82 (m, 1H， - (CH 3 ) 2 C- H)， 4. 68-4· 36 (m, 1H， tetrahydrofuran-OH) ,
4. 31-4. 23 (m, 1H， (CH 3 ) C (NH) - H)， 4. 06-4· 02 (m, 1H， tetrahydrofuran-H)， 3. 89-3
. 77 (m, 2H, P-0-CH 2 -H) , 1. 30-1. 20 (m, 9H， 3 X CH 3 ) , 1. 58 (d， 3H， CH 3 )。
ESI -MS m/z : [M+H] + =614. 5。
实施例 13 (2S) -2- ( ( (2- (喹喔啉- 5-基)苯- 1-基氧基） ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4- 二氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1 (2H) -基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基) 磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
以 2- (喹喔啉 -5-基)苯酚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚 和（2' R) -2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化 合物。
¾NMR (300MHz, DMS0) δ : 11· 48 (s, IH, pyrimidineN-H) , 7. 69-7· 61 (m, IH, pyrimid ine-H)， 7. 69-7. 61 (m, 3H， Ar-H)， 7. 61-7. 58 (d， 1H， Ar-H)， 7. 49-7. 45 (t, 2H, quin oxal ine-H) , 7. 37-7· 32 (m, 3H， Ar-H) , 6. 11-6· 03 (m, 2H, tetrahydrofuran-H) , 5. 82 (d， 1H， pyrimidine-H)， 5. 53 (d， 1H， P-NH)， 4. 90-4. 83 (m, 1H， - (CH 3 ) 2 C_H)， 4. 62- 4. 32 (m, 1H， tetrahydrofuran-OH)， 4. 30-4· 21 (m, 1H， (CH 3 ) C (NH) - H)， 4. 04-4· 01 ( m, 1H， tetrahydrofuran-H) , 3. 83-3· 74 (m, 2H, P- 0- CH 2 - H)， 1. 34-1· 21 (m, 9H， 3 X C H 3 ) , 1. 53 (d, 3H， CH 3 )。
ESI -MS m/z : [M+H] + =658. 2。
实施例 14 (2S) - 2- ( ( (5, 6, 7, 8-四氢萘 -1-基氧基）（（(2R, 3R, 4R, 5R) - 5- (2, 4-二 氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1 (2H) -基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基) 磷酰基)氨基）乙酸甲酯
以 5，6，7，8_四氢萘酚、 三氯氧磷、 L-乙氨酸甲酯盐酸盐、 五氟苯酚和 (2' R) -2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合 物。
¾NMR (300MHz, DMSO) δ : 11. 49 (s, 1Η， pyrimidineN-H) , 7. 58-7· 52 (m, 1Η， pyrimid ine-H)， 7. 46-7. 42 (m, 2H, Ar-H) 7. 40-7. 36 (d， 1H， Ar-H)， 6. 11-6. 00 (m, 2H, tetrah ydrofuran-H)， 5. 82 (d, 1H， pyrimidine-H)， 5. 55 (d, 1H， P-NH)， 4. 91—4. 83 (m, 1H， - (CH3) 2C-H)， 4. 64-4. 31 (m, 1H， tetrahydrofuran-OH)， 4. 31-4. 23 (m, 2H, (CH 3 ) CH 2 ( NH) )， 4. 06-4. 00 (m, 1H， tetrahydrofuran-H)， 3. 88-3. 77 (m, 2H, P- 0- CH 2 - H)， 1. 30 -1.20 (m, 3H, CH 3 )， 1· 5(d， 3H，CH 3 )。
ESI -MS m/z: [M+H]+ =542.2。
实施例 15 (2S) -2- ( ( (5, 6, 7, 8-四氢萘 -1-基氧基） ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二 氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1(2H)-基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基) 磷酰基)氨基)丙酸叔丁
以 5， 6， 7， 8-四氢萘酚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸叔丁酯盐酸盐、 五氟苯酚和 (2' R) -2'-脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合 物。
¾NMR (300MHz, DMS0) δ :11.49(s, 1Η， pyrimidineN-H) , 7.58-7· 52 (m, 1Η， pyrimid ine-H)， 7.46-7.42 (m, 2H, Ar_H) 7.40-7.36 (d， 1H， Ar_H)， 6.11-6.00 (m, 2H, tetrah ydrofuran-H)， 5.82 (d, 1H， pyrimidine— H)， 5.55 (d, 1H， P-NH)， 4.64—4.31 (m, 1H， t etrahydrofuran-OH)， 4.31-4· 23 (m, 1H， (CH 3 ) C (NH) - H)， 4.06-4· 00 (m, 1H， tetrah ydrofuran-H) , 3.88-3· 77 (m, 2H, P- 0- CH 2 - H)， 1.33-1.31 (m, 8H， 4XCH 2 ) 1.30-1.20 (m, 12H, 4XCH 3 ), 1.5(d, 3H， CH 3 )。
ESI -MS m/z: [M-H]+ =596.3。
实施例 16 (2S) -2- ( ( (4- (噻唑 -2-基)苯- 1-基)氧基）（（ (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4- 二氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1(2H)-基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基) 磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
步骤 1 2- (4-甲氧基苯基)噻唑的制备
在 lOOmL 的单口瓶中， 加入对甲氧基苯硼酸 2.2g(0.014mol)， 4-溴噻唑 2g (0. 012mol)， 碳酸铯 7. 8g (0. 024mol) ,二三苯基膦二氯化钯 0. 4g (0. 6隱 ol) , 加 1， 4-二氧六环 30mL和水 8mL， 氮气保护， 加热到 90°C， 反应过夜， 原料基本 反应完全， 停止反应， 冷却到室温， 浓缩， 加水和乙酸乙酯萃取， 合并有机相， 干燥， 浓缩， 硅胶柱层析分离得到标题化合物。
¾NMR (300MHz, CDC13) δ： 7. 90-7. 95 (m, 2H, Ar_H)， 7. 83 (d， 1H， Ar_H)， 7. 26 (d， 1H, Ar-H) , 6. 95-7. 00 (m, 2H, Ar- H)， 3. 88 (s, 3H， 0CH 3 ) 。
ESI -MS m/z : [M+H] + =192. 2。
步骤 2 4- (噻唑 -2-基)苯酚的制备
在 100ml的单口瓶中， 加步骤 1所得产物（0. 9g, 4. 7mmol) , 40%HBr, 全溶， 黄色透明， 乙酸 6mL，加热到 115°C， 反应 20小时， 原料基本消失， 停止反应， 浓缩至干， 硅胶柱层析分离， 得到 0. 42g浅黄色固体。
¾NMR (300MHz, CDC13) δ： 7. 83-7. 88 (m, 3H， Ar-H)， 7. 30 (d， 1H, Ar-H) , 6. 92 (d, 2H, Ar- H)。
ESI -MS m/z : [M+H] + =178. 2。
步骤 3 (2S) -2- ( ( (4- (噻唑 -2-基)苯- 1-基)氧基） ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二氧 代 -3, 4-二氢嘧啶 -1 (2H) -基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷 酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
以 4- (噻唑 -2-基)苯酚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和 (2' R) -2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合 物。
¾NMR (500MHz, DMS0) δ : 11. 47 (s, 1Η， pyrimidineN-H)， 7. 97—7· 90 (m, 3H， Ar— 2H， t hiazole-ΙΗ)， 7. 76 (d, 1H， thiazole- H)， 7. 56 (d, 1H， pyrimidine- H)， 7. 35 (d, 2H, A r-H) , 6. 12-6. 04 (m, 2H, tetrahydrofuran-H) , 5. 82 (d, 1H， pyrimidine— H) , 5. 58-5 • 56 (m, 1H， P-NH)， 4. 88—4· 83 (m, 1H， - (CH 3 ) 2 C— H)， 4. 39 (m, 1H， tetrahydrofuran-OH )， 4. 28-4. 27 (m, 1H， (CH 3 ) C (NH) - H)， 4. 05-4· 01 (m, 1H， tetrahydrofuran-H)， 3. 84 -3. 83 (m, 2H, P- 0- CH 2 - H) , 1. 28-1. 24 (m, 6H， 2 X CH 3 )， 1. 16-1. 14 (m, 6H， 2 X CH 3 ) 。 ESI -MS m/z : [M+H] + =613. 3。
实施例 17 (2S) -2- ( ( (4- (噻唑 -5-基)苯- 1-基)氧基）（（ (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4- 二氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1 (2H) -基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基) 磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
步骤 1 5- (4-甲氧基苯基)噻唑的制备
在 lOOmL 的单口瓶中， 加入对甲氧基苯硼酸 2. 2g (0. 014mol) ， 5_溴噻唑 2g (0. 012mol)， 碳酸铯 7. 8g (0. 024mol) ,二三苯基膦二氯化钯 0. 4g (0. 6隱 ol) , 加 1， 4-二氧六环 30mL和水 8mL， 氮气保护， 加热到 90°C， 反应过夜， 原料基本 反应完全， 停止反应， 冷却到室温， 浓缩， 加水和乙酸乙酯萃取， 合并有机相， 干燥， 浓缩， 硅胶柱层析分离， 得到浅黄色固体产品。
¾NMR (300MHz, CDC1 3 ) δ：8. 74 (s, 1H， Ar— H) , 8. 00 (s, 1H， Ar— H) , 7. 51—7· 54 (m, 2H, Ar-H) , 6. 95-6. 99 (m, 2H, Ar- H)， 3· 87 (s， 3H， 0CH 3 ) 。
ESI -MS m/z : [M+H] + =192. 2。
步骤 2 4- (噻唑 -5-基)苯酚的制备
在 100ml的单口瓶中， 加步骤 1所得物（0. 9g, 4. 7mmol) , 加 40%HBr， 全溶， 黄色透明， 乙酸 6mL，加热到 115°C， 反应 20小时， 原料基本消失， 停止反应， 浓缩至干， 加水和乙酸乙酯萃取， 干燥， 浓缩， 硅胶柱层析分离， 得到 0. 66g 浅黄色固体。
¾NMR (300MHz, CDC1 3 ) δ：8. 72 (s, 1H， Ar-H)， 7. 99 (s, 1H， Ar-H)， 7. 43—7· 49 (m, 2H, A r-H) , 6. 87-6. 90 (m, 2H, Ar_H) 。
ESI -MS m/z : [M+H] + =178. 2。
步骤 3 (2S) -2- ( ( (4- (噻唑 -5-基)苯- 1-基)氧基） ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二 氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1 (2H) -基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基) 磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
以 4- (噻唑 -5-基）苯酚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和 (2' R) -2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合 物。
¾NMR (500MHz, DMS0) δ : 11. 48 (s, 1Η， pyrimidineN-H)， 9. 06 (s, 1H, thiazole— H) 7. 97 (d， 1H， thiazole- 1H)， 7. 70 (d， 2H, Ar-H)， 7. 56 (d， 1H， pyrimidine- H) , 7. 31 (d , 2H, Ar-H) , 6. 09-6· 01 (m, 2H, tetrahydrofuran-H) , 5. 81 (d, 1H， pyrimidine- H) , 5 • 57-5. 56 (m, 1H， P-NH)， 4. 88-4. 83 (m, 1H， - (CH 3 ) 2 C_H)， 4. 38 (m, 1H， tetrahydrofur an- OH)， 4. 28-4· 27 (m, 1H， (CH 3 ) C (NH) - H)， 4. 05-4· 02 (m, 1H， tetrahydrofuran-H) , 3.85-3.83 (m, 2H, P- 0- CH 2 - H) , 1.28-1.23 (m, 6H 2 X CH 3 ) 1.18-1.14 (m, 6H
2XCH 3 )
ESI -MS m/z: [M+H]+ =613.4
实 施 例 18 (2S)-2-((([4'- 氰 基 - Ι, - 联 苯 ]-4- 基 ） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
以 4' -氰基 -4-羟基联苯、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和 (2' R) -2'-脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合 物。
IHNMR (300MHz, DMSO) δ :11.50(s, 1H pyrimidineN-H) , 7.98-7· 82 (m, 8H Ar- H) , 7 .57 (m, IH, pyrimidine-H) , 6.18-6.15 (m, 2H, tetrahydrofuran-H) , 5.91 (d, IH, py rimidine-H) 5.59 (d 1H P-NH) 4.92-4· 87 (m, 1H - (CH 3 ) 2 C- H) 4.68-4· 36 (m, 2H, tetrahydrofuran-OH, (CH 3 ) C (NH) - H) , 4.03-4· 01 (m, 1H tetrahydrofuran-H) , 3. 85-3.82 (m, 2H, P— 0— CH 2 — H) , 1.40-1.29 (m, 9H 3 X CH 3 ) 1· 15— 1· 13 (d 3H CH 3 ) ESI -MS m/z: [M+H] + =631.2
实 施 例 19 (2S) -2- (((4- ((E) -4- 氟 苯 基 乙 烯 基 苯 ）-1- 基 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
步骤 1 (E) -4- (4-氟苯乙烯基)苯酚的制备
将对碘苯酚（1.32g, 6mmol) , 对氟苯乙烯（610mg, 5mmol) , 四三苯基磷钯 (622mg, 0.5 ol)， 碳酸铯（4.89g, 15 ol)加入到 50ml的三颈瓶中， 加入 20ml 1 4-二氧六环， 通氩气， 在 80°C条件下， 反应过夜 (约 10h)， 溶液变黑。 反应 24h后， TLC监测反应完毕。 在 0°C条件下， 缓慢滴加稀盐酸， 乙酸乙酯萃取， 硅胶柱层析， 得到白色固体。
ESI-MS m/z : [M+H] + =215. 2。
步 骤 2 (2S) -2- (( ( (E) -4- (4- 氟 苯 乙 烯 基 苯 ）-1- 基 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H) -基)- 4-氟- 3-羟基 -4 -甲基四氢呋喃- 2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
以（E) -4- (4-氟苯乙烯基)苯酚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸、 五氟苯酚 和（2' R) -2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目 标化合物。
¾NMR (300MHz, DMSO) δ : 11. 46 (s, 1Η， pyrimidineN-H)， 7. 64—7· 58 (m, 5H， Ar— H， py rimidine-H)， 7. 23-7. 15 (m, 6H， Ar- H， - CH=CH- )， 6. 10-6. 15 (m, 2H, tetrahydrofur an-H)， 5. 91 (d， 1H， pyrimidine-H)， 5. 79 (d， 1H， P-NH)， 4. 91-4. 88 (m, 1H， - (CH 3 ) 2 C_ H)， 4. 66-4. 32 (m, 2H, tetrahydrofuran-OH, (CH 3 ) C (NH) - H)， 4. 03-4· 01 (m, 1H， tet rahydrofuran-H) , 3. 85—3· 82 (m, 2H, P— 0— CH 2 — H) , 1. 40-1. 29 (m, 9H， 3 X CH 3 )，1. 15— 1. 13 (d, 3H， CH 3 )。
ESI-MS m/z : [M+H] + =650. 4。
实施例 20 (2S) - 2- (( (IH-吲哚- 5-基氧基）（（(2R, 3R, 4R, 5R) - 5- (2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1 (2H) -基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰 基)氨基)丙酸异丙酯
以 5-羟基 -1H-吲哚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸、 五氟苯酚和 (2' R) _2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标 化合物。
¾NMR (300MHz, DMS0) δ : 11· 54 (s, 1Η， pyrimidine- Ν-Η)， 11. 14 (s， 1H， Indole- N-H )， 7. 55 (d, 1H， pyrimidine-H)， 7. 37-7. 32 (m, 3H， Indole-H)， 6. 96 (d, 1H， Indole- H) , 6. 38 (s, IH, Indole-H) , 6. 05-5. 84 (m, 3H, tetrahydrofuran-H, pyrimidine-H )， 5. 55-5. 48 (m, 1H， P-NH)， 4. 88-4. 80 (m, 1H， - (CH 3 ) 2 C_H)， 4. 38-4. 33 (m, 1H， tetra hydrofuran-OH)， 4. 25-4· 20 (m, 1H， (CH 3 ) C (NH) - H)， 4. 03-4· 00 (m, 1H， tetrahydro furan-H) , 3.82-3· 74 (m, 2H, P- 0- CH 2 - H) , 1.28-1· 21 (m, 3H， CH 3 ) , 1.17-1· 15 (m, 3H: CH 3 )， 1.15-1.12 (m, 6H, 2XCH 3 )。
ESI -MS m/z: [M+H]+ =569.2。
实 施 例 21 (2S)-2-(((4- 氟 -2- 甲 基 - IH- 吲 哚 - 5- 基 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）
以 4-氟 -5-羟基 -2-甲基 -1H-吲哚、三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸、五氟苯 酚和（2' R)-2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得 目标化合物。
¾NMR (500MHz, DMS0) δ :11.48(s, 1H， pyrimidine- N- H)， 11.19(s, 1H， Indole-N-H ), 7.55 (d， 1H， pyrimidine-H)， 7.02 (s, 2H, Ar_H)， 6.17 (d， 1H， Ar_H)， 5.97-5.85 (m , 3H， tetrahydrofuran-H, pyrimidine-H) , 5.56-5.49 (m, 1H， P-NH) , 4.86 (m, 1H， - ( CH 3 ) 2 C-H)， 4.41-4.35 (m, 1H， tetrahydrofuran-OH)， 4.25-4· 20 (m, 1H， (CH 3 ) C (NH) — H)， 4.04-4.00 (m, 1H， tetrahydrofuran-H)， 3.82—3· 78 (m, 2H, P— 0— CH 2 — H) , 2.37 ( s, 3H, CH 3 ), 1.25-1.22 (m, 6H, 2XCH 3 ), 1.16-1.14 (m, 6H，2XCH 3 )。
ESI -MS m/z: [M+H]+ =601.3。
实施例 22 (2S)-2-(((3- 甲 氧羰基 甲 基 -苯并呋喃 - 7-基氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲 基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
以 7-羟基 -3-甲氧基羰基甲基苯并呋喃、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸、 五氟苯酚和（2' R)_2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料，同实施例 1的方法， 制得目标化合物。
¾NMR (500MHz, DMS0) δ : 11. 48 (s, 1H， pyrimidine— N— H) , 7. 95 (s, 1H， Furan-H) , 7. 56
(d， 1H， pyrimidine-H)， 7. 40 (d， 1H， Ar_H)， 7. 28 (s, 1H， Ar_H)， 7. 20 (t, 1H， Ar_H)， 6 . 13 (m, 1H, tetrahydrofuran-H) , 6. 01 (m, 1H, pyrimidine-H) , 5. 82 (m, 1H, tetrahy drofuran-H, ) , 5. 50 (m, 1H， P-NH)， 4. 86 (m, 1H， - (CH 3 ) 2 C_H)， 4. 42 (m, 1H， tetrahydr ofuran-OH) , 4. 31 (m, 1H， (CH 3 ) C (NH) _H)， 4. 02 (m, 1H， tetrahydrofuran-H)， 3. 84- 3. 82 (m, 4H， P-0_CH 2 -H， -CH 2 -)， 3. 65 (s, 3H， CH 3 ) , 1. 27-1. 22 (m, 6H， 2 X CH 3 )，1. 16— 1. 14 (m, 6H, 2 X CH 3 )。
ESI -MS m/z : [M+H] + =642. 2。
实施例 23 (2S) -2- (( (4-氧代 -2-苯基 - 4H-苯并吡喃 - 6-基） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H) -基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-
以 6-羟基黄酮、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸、 五氟苯酚和（2' R) -2' - 脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合物。 ¾NMR (300MHz, DMS0) δ： 13. 22 (s, 1H， N— H) , 8. 59 (s, 1H， Ar— H) , 8. 50 (d， 2H, Ar— H) , , 8. 30 (s, 1H， Ar-H)， 8. 20 (d， 1H， Ar_H)， 8. 03 (d， 1H， Ar_H)， 7. 70 (dd， 2H, Ar_H)， 7. 61 (d， 1H， Ar-H) , 7. 48 (m, 1H， Ar-H)， 7. 38 (d， 1H， Ar-H)， 7. 36 (d， 1H， N-H)， 7. 34 (d， 1H, -CH-) , 7. 26 (m, 1H, -CH-) , 5. 62 (s, 2H, -CH 2 -) , 5. 54 (s, 1H, -OH) , 5. 32 (m, 1H, -CH-) , 4. 59 (m, 1H, - CH- )， 4· 05 (m， 1H， -CH-) , 2. 01 (s, 3H, - CH 3) , 1. 35 (s, 3H, -CH 3 ) , 1. 16 (d, 6H, -CH 3 )。
ESI -MS m/z : [M+H] + =674. 2。
实施例 24 (2S) -2- ( ( (喹喔啉- 5-基氧基） ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二氧代 -3, 4- 二氢嘧啶 -1 (2H) -基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰基)氨 基)丙酸异丙酯
以 5-羟基喹喔啉、三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸、五氟苯酚和（2' R) -2' - 脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合物。 ¾NMR (300MHz, DMS0) δ : 11. 52 (s, IH, pyrimidine-N-H) , 7. 54 (d, IH, pyrimidine- H)， 7. 36-7. 31 (m, 3H， Ar_H)， 6. 95 (d， 1H， Ar_H)， 6. 36 (d， 1H， Ar_H)， 6. 03-5. 82 (m, 3H， tetrahydrofuran-H, pyrimidine- H) , 5. 55-5· 48 (m, 1H， P-NH) , 4. 88-4· 80 (m, 1 H, - (CH 3 ) 2 C-H)， 4. 38-4. 33 (m, 1H， tetrahydrofuran-OH)， 4. 25-4. 20 (m, 1H， (CH 3 ) C (NH) -H) , 4. 03-4. 01 (m, 1H， tetrahydrofuran-H) , 3. 82—3· 74 (m, 2H, P— 0— CH 2 — H) , 1 . 27-1. 25 (m, 3H, CH 3 ) , 1. 18-1. 16 (m, 3H， CH 3 )， 1. 15-1. 12 (m, 6H，2 X CH 3 )。 ESI -MS m/z : [M+Na] + =604. 1。
实施例 25 (2S) -2- ( ( (4-氧代 -2-苯基苯并二氢吡喃 - 7-基） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H) -基) - 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基） 酯
以 7-羟基黄烷酮、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和 (2' R) _2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标 化合物。
¾NMR (300MHz, DMS0) δ : 11. 59 (s, 1Η， pyrimidineN-H) , 8. 06—8· 02 (m, 1Η， Ar— Η) , 7 • 89-7. 86 (m, 3Η， Ar_H) 7. 69-7. 61 (m, 1Η， pyrimidine-H)， 7. 42-7. 41 (m, 2H, Ar_H) , 7. 36-7. 34 (d, 2H, Ar_H)， 6. 12-6. 03 (m, 2H, tetrahydrofuran-H)， 5. 84 (d, 1H， pyri midine-H)， 5. 43 (d， 1H， P-NH)， 4. 90—4· 83 (m, 1H， - (CH 3 ) 2 C— H)， 4. 63—4· 32 (m, 1H， te trahydrofuran-OH) , 4. 30-4· 21 (m, 1H，（CH 3 ) C (NH) - H) , 4· 14-4· l l (m, 1H， tetrahy drofuran-H)， 4. 10-4. 08 (m, 2H, P-0_CH 2 -H)， 3. 98-3. 96 (m, 4H， CH 2 ) 1. 98-1. 95 (m, 1 H, CH) 1.34-1.21 (m, 6H， 2 X CH 3 ) , 1.53 (d， 6H， 2XCH 3 )。
ESI -MS m/z: [M+H]+ = 676.2。
实 施 例 26 (2S)-2-((((4-(lH-l, 2,4- 三 唑 - 1- 基 ） 苯 基 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
以 4-(111-1，2，4-三唑-1-基）苯酚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五 氟苯酚和（2' R) -2'-脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得 目标化合物。
¾NMR (300 MHz, DMSO- δ ppm: 11.48 (s, IH) , 9.18-9.21 (m, 2H) , 8.15—8· 18 (m, IH), 8.05-8.07 (m, IH) , 7.98-8.02 (m, IH) , 7.56-7.58 (m, IH)， 7.15-7.21 (m, IH) , 6.11—6· 15 (m, 2H) , 5.92 (m, IH) , 5.88 (m, IH) , 4.88-4.92 (m, IH), 4.32-4.65 (m, 2H) , 4.01-4.04 (m, IH) , 3.82-3.86 (m, 2H) , 1.13-1.40 (m, 12H)。
LC-MS m/z: [M+H] + = 597。
实 施 例 27 (2S)-2-((((4'- 氯 - [1,1' - 联 苯 基 ]-4- 基 ） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋 -2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
以 4'-氯 -4-羟基 [1，1'-联苯]、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯 酚和（2' R) -2'-脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标 化合物。
¾ NMR (300 MHz, DMS0_c s ) δ ppm: 11.54 (s, IH) , 7.66-7.69 (d， 3H) , 7.55-7.59 (d， IH) , 7.49—7· 52 (d， 2H) , 7.29—7· 33 (m, 3H) , 6.12—6· 16 (m, 2H) , 5.96-5.99 (m, IH) , 5.34 (m, IH) , 4.81—4.89 (m, IH) , 4.38-4.42 (m, 2H) , 3.84 (m, IH), 3.82-3.84 (m, 2H) , 1· 05- 1· 14 (m, 12H)。 LC-MS m/z: [M+H] + = 640。
实 施 例 28 (2S)-2-(((2- 氟 - [Ι, - 联 苯 基 ]-4- 基 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
步骤 1 2-氟- 4-羟基- [1, 1' -联苯]的制备
称取 1.06g苯硼酸、 2.38g 3-氟 -4-碘苯酚、 0.4g Pd (dppf) Cl 2 、 9g碳酸铯于 250mL的茄形瓶中， 加入 50 mL 1, 4-二氧六环和 5 mL水， 氮气保护下 90°C搅拌 1.5 h， 停止反应。 反应液加入乙酸乙酯 100 mL, 50 mL饱和氯化钠水溶液萃取， 水洗 (3X50mL)， 收集有机相， 用无水硫酸钠来干燥， 过滤， 浓缩， 柱层析纯化 得到标题化合物。
LC-MS m/z: [M+H]+ =189。
步骤 2 (2S) -2- ( ( (2-氟- [1,1， -联苯基] -4-基氧基） ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4- 二氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1(2H)-基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基) 磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
以步骤 1制备的化合物 2-氟 -4-羟基 -[1， 1'-联苯]、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异 丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和（2' R) -2'-脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合物。
¾ NMR (400 MHz, DMS0_c s ) δ ppm: 11.49 (s, 1H) , 7.51-7.82 (m, 6H) , 7.15-7.29 (m, 3H) , 6.12-6.15 (m, 1H) , 6.03 (m, 1H) , 5.97—5.99 (m, 1H) , 5.58 (m, 1H), 4.80-4.89 (m, 1H) , 4.38-4.41 (m, 2H) , 4.01 (m, 1H) , 3.82-3.84 (m, 2H), 1.05-1.14 (m, 12H)。
LC-MS m/z: [M+H] + = 624。
实施例 29 (2S) -2- ( ( (4- (嘧啶 -2-基)苯基氧基） ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二氧 代 -3, 4-二氢嘧啶 -1(2H)-基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷 酰基)氨基)丙酸异丙酯
步骤 1 2- (4-甲氧基苯基)嘧啶的制备
以 4-甲氧基苯硼酸、 2-溴嘧啶、 Pd(dppf)Cl 2 和碳酸铯为原料， 按照实施例 28步骤 1的方法制得标题化合物。
LC-MS m/z: [M+H]+ =187。
步骤 2 4- (嘧啶 -2-基)苯酚
在 50 mL圆底烧瓶中， 将 830 mg步骤 1制得的化合物 2_(4_甲氧基苯基)嘧 啶溶解在 10mL二氯甲烷中， -20°C及氮气保护下， 向其中慢慢滴加 8 mL lNBBr 3 , 滴毕， 0°C下搅拌， 反应结束后， 加入 lOmL水淬灭， 二氯甲烷萃取（2X20 mL) , 收集有机相， 依次用水、 饱和食盐水洗， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 浓缩， 柱层析 纯化制得标题化合物。
LC-MS m/z: [M+H]+ = 173。
步骤 3 (2S) -2- ( ( (4- (嘧啶 -2-基)苯基氧基） ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1(2H)-基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰 基)氨基)丙酸异丙酯的制备
以步骤 2制得的化合物 4- (嘧啶 -2-基)苯酚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐 酸盐、 五氟苯酚和（2' R) -2'-脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方 法， 制得目标化合物。
¾ NMR (500 MHz, DMS0_c s ) δ ppm: 11.48 (s, 1H) , 8.88-8.89 (m, 2H) , 8.38-8.40 (m, 2H) , 7.57-7.59 (m, 1H) , 7.43-7.44 (m, 1H) , 7.35-7.28 (m, 2H), 6.13-6.15 (m, 1H) , 6.04 (m, 1H) , 5.86—5.88 (m, 1H) , 5.59 (m, 1H) , 4.81-4.89 (m, 1H) , 4.38-4.41 (m, 2H) , 4.02 (m, 1H) , 3.81-3.84 (m, 2H) , 1.10-1.18 (m, 12H)。
LC-MS m/z: [M+Na] + = 630。
实施例 30 (2S)- 2- ((((3'- (N-甲基甲酰胺基）- [Ι, -联苯基 ]- 4-基）氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
步骤 1 4'—羟基 N—甲基— [1, 1'—联苯基]— 3—甲酰胺
以 4-碘苯酚、 3- (N-甲基甲酰胺)苯基硼酸、 Pd(dppf)Cl 2 和碳酸铯为原料， 按照实施例 28步骤 1的方法制得标题化合物。
LC-MS m/z: [M+H]+ =228。
步骤 2 (2S)- 2- ((((3'- (N-甲基甲酰胺基）- [Ι, -联苯基 ]- 4-基）氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4 -甲基四氢呋喃- 2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
以步骤 1制得的化合物 4' -羟基 -N-甲基 -[1， -联苯基] -3-甲酰胺、三氯氧 磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和（2' R) -2'-脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷为 原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合物。
¾ NMR (400 MHz, DMS0— 4) δ ppm: 11· 46— 11· 50 (s， IH)， 7· 95— 7· 96 (m， IH)， 7.70-7.73 (m, IH)， 7.57-7· 59 (m, IH)， 7.35-7· 37 (m, 2H)， 7.30-7· 32 (m, IH)， 7.28- 7.31 (m, IH)， 7.22-7.26 (m, IH)， 7.18-7.20 (m, IH)， 7.15-7.17 (m, IH)， 6.08-6.10 ( m, IH)， 6.01 (m, IH)， 5.97-6.02 (m, IH)， 5.58 (m, IH)， 4.81-4.88 (m, IH)， 4.38-4.42 (m, 2H)， 4.05 (m, IH)， 3.89-3· 92 (m, 5H) , 1.16-1· 28 (m, 12H)。
LC-MS m/z: [M- H]+ = 661。
实 施 例 31 (2S)-2-((((3'- 氟 - [Ι, - 联 苯 基 ]-4- 基 ） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 - -基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
步骤 1 4- (3-氟苯基)苯酚的制备
以 4-羟基苯硼酸、 3-氟碘苯、 Pd(dppf)Cl 2 和碳酸铯为原料， 按照实施例 28 步骤 1的方法制得标题化合物。
LC-MS m/z: [M+H]+ =189。
步骤 2 (2S)- 2- ((((3' -氟 -[1, -联苯基 ]-4-基）氧基) (((2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基- 4-甲基四氢呋喃 -2 -基)甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
以步骤 1制得的化合物 4- (3-氟苯基)苯酚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐 酸盐、 五氟苯酚和（2' R) -2'-脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方 法， 制得目标化合物。
¾ NMR (400 MHz, DMS0_c s ) δ ppm: 11.49 (s, 1H) , 7.95-7.97 (m, 1H) , 7.70-7.72 (m, 1H) , 7.56-7.58 (m, 1H) , 7.36-7.38 (m, 2H) , 7.31-7.32 (m, 1H)， 7.28-7.30 (m, 1H) , 7.19—7.20 (m, 1H) , 7.16—7.17 (m, 1H) , 6.07—6.10 (m, 1H), 6.03 (m, 1H) , 5.97—6.01 (m, 1H) , 5.56 (m, 1H) , 4.80—4.88 (m, 1H)， 4.38-4.41 (m, 2H) , 4.06 (m, 1H) , 3.82-3.86 (m, 2H) , 1.16-1.27 (m, 12H)。 LC-MS m/z: [M+H] + = 624。
实 施 例 32 (2S)-2-((((3'- 氯 - [Ι, - 联 苯 基 ]-4- 基 ） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-
步骤 1 4- (3-氯苯基)苯酚的制备
以 4-羟基苯硼酸、 3-氯碘苯、 Pd(dppf)Cl 2 和碳酸铯为原料， 按照实施例 28 步骤 1的方法制得标题化合物。
LC-MS m/z: [M+H]+ =205。
步骤 2 (2S)- 2- ((((3' -氯 -[1, -联苯基 ]-4-基）氧基) (((2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基- 4-甲基四氢呋喃 -2 -基)甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
以步骤 1制得的 4- (3-氯苯基)苯酚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和（2' R) -2'-脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制 得目标化合物。
¾ NMR (400 MHz, DMS0_c s ) δ ppm: 11.49 (s, 1H) , 7.51-7.82 (m, 6H) , 7.26-7.35 (m, 3H) , 6.12-6.14 (m, 1H) , 6.11 (m, 1H) , 5.96—5.98 (m, 1H)， 5.88 (m, 1H), 4.80—4.88 (m, 1H) , 4.38-4.42 (m, 2H) , 4.01 (m, 1H) , 3.82-3.87 (m, 2H), 1. 11-1.29 (m, 12H).
LC-MS m/z: [M+H] + = 640。
实施例 33 (2S)-2-(((S)-((4-氟- 1, 2-二甲基 - 1H-吲哚 - 5-基） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)
步骤 1 2- (2, 3-二氟- 6-硝基苯基) -3-氧代丁酸乙酯的制备
在 100 mL圆底烧瓶中， 加入 35 mL四氢呋喃， 冰浴及搅拌下缓慢加入 1150 mg氢化钠后， 缓慢加入 1.43 mL乙酰乙酸乙酯， 加毕， 缓慢加入 4 mL溶解有 2.3 mL 2， 3， 4， -三氟硝基苯的四氢呋喃， 加毕， 室温下反应 24小时， 停止反应， 加 水淬灭， 加入 35 mL 2N HC1调节 pH至中性， 乙酸乙酯萃取， 收集有机层， 无水 硫酸钠干燥， 过滤， 浓缩得标题化合物， 直接用于下一步反应。
步骤 2 1- (2, 3-二氟- 6-硝基苯基)丙- 2-酮的制备
将步骤 1制得的化合物 2- (2， 3-二氟 -6-硝基苯基) -3-氧代丁酸乙酯转移至 反应瓶中， 加入 10 mL浓盐酸和 10 mL冰醋酸的混合液， 100°C反应 12h， 停止 反应， 加入用水、 乙酸乙酯稀释， 取乙酸乙酯层， 加入饱和 NaHC0 3 水溶液调节 pH至中性， 分离乙酸乙酯成层， 水相用乙酸乙酯萃取， 合并有机层， 无水 N¾S0 4 干燥， 过滤， 浓缩， 柱层析纯化得到标题化合物。
¾ NMR (400MHz, DMSO— δ ppm： 8.04—8· 08 (m, 1H)， 7.66—7· 7 (m, 1H)， 4.26—4· 26 (d, 2H)， 2· 30(s， 3H)。
步骤 3 1- (2-氟- 3-甲氧基 -6-硝基苯基)丙- 2-酮的制备
在 lOOmL圆底烧瓶中，将 2 g 步骤 2制得的化合物 1_(2， 3_二氟 _6_硝基苯基) 丙 -2-酮加入 40 mL甲醇钠甲醇溶液中（甲醇钠甲醇溶液的制备 在冰浴及搅拌下 将 2.27 g Na缓慢加入到甲醇中， 加完后， 50°C搅拌 lh)， 室温反应 lh后， 反 应结束， 加 1 mL水淬灭， 二氯甲烷萃取， 有机层用饱和食盐水洗涤， 无水硫酸 钠干燥， 过滤， 浓缩得到标题化合物。
¾ NMR (400MHz, DMS0-4) δ ppm :8.04-8.07 (m, 1H) , 7.31-7.35 (m, 1H) , 4.20-4.21 (d, 2H) , 3.98 (s, 3H) , 2.28 (s, 3H)。
步骤 4 2-甲基 -4-氟 -5-甲氧基 -1H-吲哚的制备
在 100 mL圆底烧瓶中， 将 1.9 g步骤 3制备的化合物 1_ (2-氟 _3_甲氧基 _6_ 硝基苯基）丙 -2-酮加入到 15 mL甲醇中， 溶解后加入 190 mg钯碳， 室温反应 36 h后， 停止反应， 过滤， 浓缩得标题化合物。
¾ NMR (400MHz, DMS0-4) δ ppm: 11.01 (br, 1H) , 6.99-7.01 (d, 1H) , 6.853 (m, 1H) , 6.10-6.11 (t, 1H), 3.79 (s, 3H) , 2.35 (s, 3H)。
步骤 5 1,2-二甲基 -4-氟 -5-甲氧基 -1H-吲哚的制备
在 lOOmL圆底烧瓶中， 将 950 mg步骤 4制备的化合物 2-甲基 -4-氟 _5_甲氧 基 -1H-吲哚溶解在 6 mL四氢呋喃中， 0°C下缓慢加入 87.2 mg氢化钠， 加完继续 搅拌 30 min, 0°C下缓慢加入 0.14 mL碘甲烷， 反应 lh， 停止反应， 0°C下缓慢 加水淬灭， 乙酸乙酯萃取， 饱和食盐水洗涤， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 浓缩， 柱 层析纯化得标题化合物。
步骤 6 1,2-二甲基 -4-氟 -5-羟基 -1H-吲哚的制备
在 lOOmL圆底烧瓶中， 将 210 mg步骤 5制得的化合物 1, 2-二甲基 -4-氟 _5_ 甲氧基 -1H-吲哚溶解在 4 mL无水二氯甲烷中， -70°C下， 缓慢加入 0.2 mL BBr 3 ， -70°C下继续反应 2 h后， 停止反应， 将反应液缓慢倒入冰水中， 减压除去二氯 甲烷， 过滤， 滤饼用甲醇溶解， 浓缩， 得标题化合物。
¾ NMR (400MHz, DMS0_c s ) δ： 8.82 (s, 1H)， 6.97-6.99 (d， 1H)， 6.68-6.72 (t, 1H)， 8.12 (s, 1H) , 3.59 (s, 3H) , 2.35 (s, 3H)。
步骤 7 (2S)-2-(((S)-((4-氟 - 1,2-二 甲 基 - 1H-吲 哚 - 5-基） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
以步骤 6制备的化合物 1， 2-二甲基 -4-氟 -5-羟基 -1H-吲哚、 三氯氧磷、 L- 丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和（2' R) -2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合物。
¾ NMR (400 MHz, DMS0_c s ) δ :11.48(s, 1H) , 7.52-7· 54 (d， 1H) , 7.08-7· 19 (m, 2H) 6.29 (s, 1H)， 5.86-6.08 (m, 3H)， 5.47-5.49 (d, 1H)， 4.84-4.87 (t, 1H)， 4.24-4.36 ( m, 2H)， 3.77-3.86 (m, 3H)， 3.65 (s, 3H)， 2.40 (s, 3H)， 1.21-1· 27 (m, 6H)， 1.14-1· 16 (m, 6H)。
LC-MS m/z: [M+H]+ =615。
实施例 34 (2S)-2-((((6-氟 - 3-甲基苯并 [d] 异恶唑 -5-基） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
步骤 1 3-氟 -4-甲氧基苯甲醛的制备
在 100 mL圆底烧瓶中， 将 1. 3 mL 3, 4-二氟苯甲醛溶解在 30 mL甲醇中， 室 温下缓慢加入 2. 2 g甲醇钠， 反应 12h， 停止反应， 加 3 mL水淬灭， 减压除去 甲醇溶剂，加入二氯甲烷萃取， 收集有机相，饱和食盐水洗涤，无水硫酸钠干 燥， 过滤， 浓缩， 柱层析纯化得标题化合物。
¾ NMR (400 MHz, DMSO— δ ppm : 9. 87—9. 88 (d, 1H) , 7. 81—7. 82 (m, 1H) , 7. 79 (m, 1H) , 7. 40—7. 42 (t, 1H) , 3. 96 (s, 3H)。
步骤 2 甲酸 (3-氟 -4-甲氧基苯基)酯的制备
在 lOOmL圆底烧瓶中， 将 2. 5 g步骤 1制备的化合物 3_氟 _4_甲氧基苯甲酸 溶解在 20 mL无水二氯甲烷中， 加入 4. 7 g间氯过氧苯甲酸， 50°C反应 4h， 停 止反应后， 加入 30mL二氯甲烷稀释， 依次用水， 饱和食盐水洗涤， 无水硫酸钠 干燥， 过滤， 浓缩得标题化合物， 直接用于下一步反应。
步骤 3 3-氟 -4-甲氧基苯酚的制备
称取 2. 4 g 步骤 2制备的化合物甲酸 (3-氟 -4-甲氧基苯基)酯于 lOOmL圆底 烧瓶中， 加入到 10mL 5%氢氧化钠溶液和 20mL甲醇， 室温下反应 1 h， 停止反应， 加入 2 N盐酸调节 pH至 5左右， 减压蒸除甲醇， 加入乙酸乙酯萃取， 依次用水， 饱和食盐水洗涤， 收集有机相， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 浓缩， 柱层析纯化得标 题化合物。
¾ NMR (400 MHz, DMS0-d) δ ppm : 9. 36 (s, 1H) , 6. 93-6. 98 (m, 1H) , 6. 59-6. 62 (m, 1H) , 6. 50-6. 51 (m, 1H) , 3. 73 (s, 3H)。
步骤 4 乙酸 (3-氟- 4-甲氧基苯基)酯的制备
称取 1. 8 g步骤 3制备的化合物 3-氟 -4-甲氧基苯酚于 lOOmL圆底烧瓶中， 力口入 25 mL二氯甲烷溶解，冰浴下加入 1 mL乙酰氯和 1. 9 mL三乙胺， 反应 lOmin 后， 停止反应， 加入 40 mL 乙醚， 过滤， 滤液旋干， 得黄色固体， 再加 30 mL 乙醚， 过滤， 滤液旋干， 得标题化合物， 直接用于下一步反应。 步骤 5 1- (4-氟- 2-羟基- 5-甲氧基苯基)乙酮的制备
将 2 g步骤 4制备的化合物乙酸 (3-氟 -4-甲氧基苯基)酯加入 lOOmL圆底烧瓶 中， 0°C下缓慢加入 6.5 mL三氟甲磺酸， 继续搅拌 5min后， 70°C下反应 75 min, 停止反应， 冷却到 0°C， 加入 20 mL冰水， 过滤， 滤饼用水洗涤， 收集滤饼， 真 空干燥， 得标题化合物。
¾ NMR (400 MHz, DMSO- δ ppm: 11· 95- 11· 95 (d, 1H) , 7.51-7.54 (d， 1H)， 6.89-6.92 (d， 1H) , 3.85 (s, 3H) , 2.65(s，3H)。
LC-MS m/z: [M+H] + = 185。
步骤 6 (E) -1- (4-氟- 2-羟基- 5-甲氧基苯基)乙酮肟的制备
称取 2.4 g步骤 5制备的化合物 1- (4-氟 -2-羟基 -5-甲氧基苯基）乙酮和 1.08 g 盐酸羟胺于 50mL圆底烧瓶中， 加入 15 mL乙醇溶解后， 50°C下缓慢加入 0.6 g氢 氧化钠， 加毕， 回流反应约 lh， 停止反应， 0-4°C下剧烈搅拌， 加入 20 mL水， 过滤， 滤饼用冷水洗涤， 真空干燥， 得标题化合物。
¾ NMR (400 MHz, DMS0_c s ) δ ppm: 11.53(s, 1H) , 11.49 (s, 1H) , 7.14-7.17 (d, 1H), 6.75-6.782 (d, 1H) , 3.81 (s, 3H) , 2.23 (s, 3H)。
LC-MS m/z: [M+H] + = 200。
步骤 7 6-氟 -5-甲氧基 -3-甲基苯并 [d]异噁唑的制备
称取 800 mg步骤 6制备的化合物 (E)-l- (4-氟 -2-羟基 -5-甲氧基苯基）乙酮肟 和 332 mg碳酸钾于 25mL圆底烧瓶中， 加入 5.8 mL N-甲基吡咯烷酮（ NMP)和 0.4 mL 乙酸酐，在氮气保护下 12CTC反应 3h，停止反应，冷却到室温， 向反应液中加 10 mL 水， 过滤， 滤饼用二氯甲烷溶解， 无水硫酸钠干燥， 过滤， 浓缩得标题化合物。 ¾ NMR (400 MHz, DMSO-d) δ ppm: 7.73—7.76 (d， 1H) , 7.55—7.57 (d， 1H)， 3.39 (s, 3H), 2.53 (s, 3H)。
LC-MS m/z: [M+H] + = 182。
步骤 8 3-甲基 -5-羟基 -6-氟 -苯并 [d]异噁唑的制备
称取 400 mg步骤 7制备的化合物 6-氟 -5-甲氧基 -3-甲基苯并 [d]异噁唑于 25mL圆底烧瓶中， 加入 6 mL无水二氯甲烷溶解， 氮气保护下， _70°C下， 缓慢 滴加 0.5 mL三溴化硼， 滴毕， 继续反应 30min后， 停止反应， 将反应液倒入碎 冰中， 减压除去二氯甲烷， 过滤， 柱层析纯化得标题化合物。
¾ NMR (400 MHz, DMSO- δ ppm: 10.11 (s, 1H) , 7.64-7.67 (d, 1H) , 7.21-7.23 (d， 1H), 2.50 (s, 3H)。
LC-MS m/z: [M+H]+ = 168。
步骤 9 (2S)-2-((((6-氟 - 3- 甲基苯并 [d] 异恶唑 -5-基） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4 -甲基四氢呋喃- 2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
以步骤 8制备的化合物 3-甲基 -5-羟基 -6-氟 -苯并 [d]异噁唑、三氯氧磷、 L- 丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和（2' R) -2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合物。
¾ NMR (400 MHz, DMS0- 4) δ ppm: 11.53 (s, 1H) , 7.86 (m, 2H) , 7.57 (s，lH)， 6.28-6.32 (m, 1H) , 5.91
(m, 2H)， 5.56-5.602 (m, 1H)， 4.82-4.86 (m, 1H)， 4.31-4.42 (m, 2H)， 4.01-4.04 (m, 1H)， 3.80-3.85 (m, 2H)， 2.52 (s, 3H) , 1.22-1.29 (m, 6H) , 1.12-1· 15 (m, 6H)。 LC-MS m/z: [M+H]+ = 603。
实施例 35 (2S)-2-((((6-氟苯并 [c] [1,2, 5]噻二唑 - 5-基） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基） 酯
步骤 1 4-氟- 5-甲氧基 -2-硝基苯胺的制备
称取 3.4 g 2-氨基 -4, 5-二氟硝基苯于 100 mL圆底烧瓶中， 加入 30 mL MeOH 溶解， 室温下缓慢加入 2.16 g甲醇钠， 室温下继续反应 12h， 停止反应， 过滤， 滤饼用 10 mL冷 MeOH洗涤， 真空干燥得标题化合物， 直接用于下一步反应。 LC-MS m/z: [M+H]+ =187。
步骤 2 4-氟 -5-甲氧基 -1, 2-苯二胺的制备
称取 2.7 g步骤 1制备的化合物 4-氟 -5-甲氧基 -2-硝基苯胺于 100 mL圆底 烧瓶中， 加入 30mLMe0H， 室温下缓慢加入 270 mg Pd/C， 50°C氢气氛下反应 3 h， 停止反应， 过滤， 滤饼用冷的 MeOH洗涤（10 mLX2), 滤液浓缩得标题化合物， 直接用于下一步反应。
LC-MS m/z: [M+H]+ =157。
步骤 3 5-氟- 6-甲氧基苯并 [c] [1, 2, 5]噻二唑的制备
称取 1.5 g 步骤 2制备的化合物 4-氟 -5-甲氧基 -1， 2-苯二胺于 100 mL圆底 烧瓶中， 加入 20 mL吡啶溶解， 0°C下缓慢加入 2.36 g S0C1 2 ， 50 °C， 氮气保护 下反应 12h， 停止反应， 将反应液倒入 10 g冰中， 乙酸乙酯萃取， 收集有机层， 依次用水， 0.5 N冷的稀盐酸溶液和饱和食盐水洗， 干燥， 浓缩， 柱层析纯化得 标题化合物。
¾ NMR (400 MHz, DMS0_c s ) δ ppm: 7.99-8.02 (d, 1H) , 7.65-7.67 (d, 1H) ,
4.02 (s, 3H)。
LC-MS m/z: [M+H]+ =185。
步骤 4 5-羟基- 6-氟苯并 [c] [1, 2, 5]噻二唑的制备
称取 500 mg步骤 3制备的化合物 5-氟 -6-甲氧基苯并 [c] [1， 2, 5]噻二唑于反 应瓶中， 加入 4 mL40% HBr水溶液， 密封条件下 90 °C反应 12 h， 停止反应， 冷 却至室温， 过滤， 滤饼用水洗， 真空干燥得到标题化合物。
LC-MS m/z: [M+H]+ =171。
步骤 5 (2S)- 2- ((((6-氟苯并 [c] [1,2, 5] 噻二唑 -5-基)氧
基） ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H) -基) -4-氟- 3-羟基
-4 -甲基四氢呋喃- 2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
以步骤 4制备的化合物 5-羟基 -6-氟苯并 [c] [l， 2， 5]噻二唑、 三氯氧磷、 L- 丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和（2' R) -2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合物。
¾ NMR (400 MHz, DMS0-4) δ ppm: 11.54-11.56 (m, 1H) , 8.08-8.20 (m, 2H), 7.57 (m, 1H) , 6.48-6.54 (m, 1H) , 5.91-6.10 (m, 2H) , 5.52-5.18 (m, 1H)， 4.78-4.85 (m, 1H) , 4.35-4.38 (m, 2H), 3.81- 4.07 (m， 3H) , 1.16-1.30 (m, 6H), 1.11-1.13 (m, 6H)。 LC-MS m/z: [M+H]+ =606。
实施例 36 (2S)-2-(((((4'- 甲氧基 - [Ι, -联苯基 ]-4-基） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 - -基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
以 4-羟基 -4'-甲氧基 -1，1'-联苯、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五 氟苯酚和（2' R) -2'-脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得 目标化合物。 ¾NMR (500MHz, DMSO) δ :11· 49 (s, IH) , 7.61-7· 55 (m, 5H) , 7.28-7· 23 (m, 2H) , 7.01 (d， 2H)， 6.05-6.01 (m, 2H)， 5.84-5.82 (m, IH)， 5.57-5.55 (m, IH)， 4.88-4.84 (m, IH )， 4.41-4.37 (m, IH)， 4.27-4· 25 (m, IH)， 4.05-4· 01 (m, IH) 3.84-3· 82 (m, 2H)， 2.33 3.79 (s, 3H) 1.28-1.22 (m, 6H)， 1.18-1· 15 (m, 6H)。
ESI -MS m/z: [M+H]+ =636.1。
实施例 37 (2S)- 2- (((((4'-三氟 甲基 - [Ι, -联苯基 ]- 4-基） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4 -甲基四氢呋喃- 2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
步骤 1 4-羟基- 4' -三氟甲基- [ 1,1' -联苯]的制备
称取 2g4-碘三氟甲苯和 1.2g对羟基苯硼酸于 100mL的单口瓶中， 加入 2g 碳酸钾、 0.26g PdCl 2 (PPh 3 ) 2 、 30mL 1, 4-二氧六环和 10mL水， 氮气保护下 70°C 反应 4h， 停止反应， 浓缩， 加水 10mL， 乙酸乙酯萃取（2X10mL)， 干燥， 过滤， 浓缩， 柱层析纯化得标题化合物。
步骤 2 (2S)- 2- (((((4'- 三氟 甲 基 - [Ι, - 联苯基 ]-4- 基） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4 -甲基四氢呋喃- 2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
以步骤 1制备的化合物 4-羟基 -4' -三氟甲基 -[1，1' -联苯]、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、五氟苯酚和（2' R) -2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合物。
¾NMR (500MHz, DMS0) δ :11.49(s, IH) , 7.87 (d， 2H) , 7.80 (d， 2H) , 7.76 (d， 2H) , 7.5 7 (d， IH)， 7.36 (d， 2H)， 6.11-6· 01 (m, 2H)， 5.88-5· 83 (m, IH)， 5.60-5· 55 (m, IH)， 4. 89-4.84 (m, IH)， 4.42-4· 39 (m, IH)， 4.28-4· 26 (m, IH)， 4.04-4· 02 (m, IH) ， 3.85-3.84 (m, 2H) , 1.28-1.24 (m, 6H) , 1.16-1.14 (m，6H)。
ESI -MS m/z: [M+H]+ =674。
实施例 38 (2S) -2- ( ( (4- (噻唑 -4-基)苯基氧基） ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二氧 代 -3, 4-二氢嘧啶 -1(2H)-基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷 酰基)氨基)丙酸异丙酯
步骤 1 4- (噻唑 -4-基)苯酚的制备
以对羟基苯硼酸、 4-溴噻唑、 碳酸钾、 二 (三苯基膦)二氯化钯为原料， 按 照实施例 37步骤 1的方法制得标题化合物。
¾ NMR (300 MHz, CDCL3- 4) δ ppm: 8. 65 (s, IH) , 7. 83 (s, 12H) , 7. 39 (s, IH) , 6. 90 (d, 2H) , 5. 00 (S, IH) .
步骤 2 (2S) -2- ( ( (4- (噻唑 -4-基)苯基氧基） ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶 -1 (2H) -基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰 基)氨基)丙酸异丙酯的制备
以步骤 1制备的化合物 4- (噻唑 -4-基)苯酚、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐 酸盐、 五氟苯酚和（2' R) -2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方 法， 制得目标化合物。
¾NMR (500MHz, DMS0) δ : 11. 48 (s, IH)， 9. 18 (s, IH) , 8. 12 (s, IH)， 8. 00 (d， 2H) ， 7. 58 (s, IH, ) , 7. 31 (d， 2H)， 6. 08-6. 04 (m, 2H)， 5. 82 (d， IH)， 5. 57 (m, IH)， 4. 87-4. 85 (m, 1H， )， 4. 38-4· 37 (m, IH)， 4. 27 (m, IH)， 4. 02 (m, IH)， 3. 84-3· 82 (m, 2H) , 1. 28-1. 24 (m, 6H) , 1. 16-1· 14 (m, 6H)。
ESI -MS m/z : [M+H] + =613。
实施例 39 (2S) - 2- ( ( ( ( (4' -氯- 2' -氟- [1, 1' -联苯] -4-基)氧
基） ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H) -基) -4-氟- 3-羟基
-4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
步骤 1 4-羟基- 4' -氯- 2' -氟- [1, -联苯]的制备
以 2-氟 -4-氯碘苯、 对羟基苯硼酸、 碳酸钾和 PdCl 2 (PPh 3 ) 2 为原料， 按照实 施例 37步骤 1的方法制得标题化合物。
¾ NMR (300 MHz, CDCL3- δ ppm: 7. 43-6. 83 (m, 7H) , 4. 94 (s, IH)。 步骤 2 (2S) - 2- ( ( ( ( (4' -氯- 2' -氟- [1, -联苯] -4-基)氧 基） ( ( (2R, 3R, 4R, 5R) -5- (2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H) -基) -4-氟- 3-羟基 -4 -甲基四氢呋喃- 2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
以步骤 1制备的化合物 4-羟基 -4'-氯 -2'-氟 -[1，1'-联苯]、三氯氧磷、 L-丙 氨酸异丙酯盐酸盐、 五氟苯酚和（2' R) -2'-脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同 实施例 1的方法， 制得目标化合物。
¾NMR (500MHz, DMSO) δ :11.48(s, IH) , 7.56-7· 52 (m, 5H) , 7.39-7· 30 (m, 3H) , 6.11 -6.01 (m, 2H)， 5.86-5.82 (m, IH)， 5.56-5.54 (m, IH)， 4.87-4.85 (m, IH)， 4.42-4.39 (m, IH)， 4.28-4.26 (m, 1H， )， 4.04-4· 02 (m, IH) 3.85-3· 84 (m, 2H)， 1.28-1· 24 (m, 6H )， 1.16-1.14 (m，6H)。
ESI -MS m/z: [M+Na] + =680o
实施例 40 (2S)-2-(((((3'-氟- 4'-甲基- [Ι, -联苯基 ]-4 -基）氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-
步骤 1 4-羟基- 3' -氟- 4' -甲基- [1, -联苯]的制备
以 3-氟 -4-甲基碘苯、 对羟基苯硼酸、 碳酸钾和 PdCl 2 (PPh 3 ) 2 为原料， 按照 实施例 37步骤 1的方法制得标题化合物。
¾ NMR (300 MHz, CDCL3- ) δ ppm: 7.45-6.87 (m, 7H) , 4.77 (s, IH)， 2.31 (s, 3H)。
步骤 2 (2S)- 2- (((((3'-氟 - 4'-甲基 - [Ι, -联苯基 ]-4-基） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4 -甲基四氢呋喃- 2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
以步骤 1制备的化合物 4-羟基 -3'-氟 -4'-甲基 -[1， -联苯]、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、五氟苯酚和（2' R) -2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合物。
¾匿 (500MHz, DMSO) δ :11.48(s, IH) , 7.68 (d， 2H) , 7.57 (d， IH) , 7.44-7· 29 (m, 5H ) 6.08-6.03 (m, 2H)， 5.85-5.82 (m, IH)， 5.56-5.54 (m, IH)， 4.88-4.83 (m, IH)， 4.42 -4.38 (m, 1H， )， 4.28-4· 26 (m, IH)， 4.04-4· 02 (m, IH)， 3.84-3· 82 (m, 2H)， 2.26 (d， 3 H), 1.28-1.23 (m, 6H) , 1· 19- 1· 14 (m， 6H)。 ESI -MS m/z: [M+Na] + =660。
实施例 41 (2S)- 2- ((((4'-氟 - 3'- 甲基 - [Ι, -联苯 ] - 4-基） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯
步骤 1 4-羟基- 4' -氟- 3' -甲基- [1, -联苯]的制备
以 4-氟 -3-甲基碘、 对羟基苯硼酸、 碳酸钾和 PdCl 2 (PPh 3 ) 2 为原料， 按照实 施例 37步骤 1的方法制得标题化合物。
¾ NMR (300 MHz, CDCL3- δ ppm: 7.52-7.42 (m, 2H) , 7.34-7.26 (m, 2H) , 7.06-6.87 (m, 3H) , 4.67 (s, IH) , 2.32(s，3H)。
步骤 2(2S)- 2- ((((4' -氟- 3' -甲基 - [1, -联苯 ]-4-基)氧基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基- 4-甲基四氢呋喃 -2 -基)甲氧基)磷酰基)氨基)丙酸异丙酯的制备
以步骤 1制备的化合物 4-羟基 -4'-氟 -3'-甲基 -[1， -联苯]、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、五氟苯酚和（2' R) -2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得目标化合物。
¾NMR (500MHz, DMSO) δ： 11.50 (s， IH) , 7.65-7.55 (m, 4H) , 7.47-7.45 (m, IH) , 7.30 -7.17 (m, 3H)， 6.11-5· 99 (m, 2H, )， 5.85-5.83 (m, IH)， 5.57-5.54 (m, IH)， 4.90-4.8 4 (m, 1H， )， 4.38-4.36 (m, IH)， 4.27-4· 25 (m, 1H， )， 4.02-3· 99 (m, 1H， )， 3.87-3· 80 ( m, 2H)， 2.30 (s, 3H) , 1.29-1.21 (m, 6H) , 1.16-1.14 (m, 6H)。
ESI -MS m/z: [M+Na] + =660。
实施例 42 (2S)- 2- ((((4' -甲基 - [1, 1' -联苯基]- 4-基)氧基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二氧代 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基- 4-甲基四氢呋喃 -2-基)甲氧基)磷酰
以 4 -羟基 -- 4' -甲基 -- [1, 1 ' 联苯]、 三氯氧磷、 L-丙氨酸异丙酯盐酸盐、 五 氟苯酚和（2'R)-2'_脱氧 -2'-氟 -2'-甲基尿苷为原料， 同实施例 1的方法， 制得 目标化合物。
¾NMR (500MHz, DMS0) δ :11.49(s, IH) , 7.58 (d, IH, ) , 7.53- 7· 51 (m， 4H)， 7· 29-7.2 5 (m, 4H)， 6.10-6.02 (m, 2H, )， 5.88-5.82 (m, 1H， )， 5.60-5.55 (m, IH)， 4.88-4.84 (m ， 1H，）， 4.41-4.38 (m, IH)， 4.27 (m, IH)， 4.04-4· 02 (m, IH)， 3.84-3· 82 (m, 2H)， 2.33 (s, 3H) , 1.28-1.23 (m, 6H) , 1.18-1· 14 (m, 6H)。
ESI -MS m/z: [M+H]+ =620。
实施例 43 (2S)-2-(((R)-((4-氟- 1, 2-二甲基 - IH-吲哚 - 5-基） 氧 基）（（(2R, 3R, 4R, 5R)-5-(2, 4-二 -3, 4-二氢嘧啶- 1 (2H)-基)- 4-氟- 3-羟基 -4-甲基四氢呋喃 -2-基）
同实施例 33的方法制得标题化合物。
¾ NMR (400 MHz, DMSO- δ： 11.49 (s, IH) , 7.55-7.57 (d, IH) . 7.07-7.19
(m, 2H), 6.27 (s, IH) , 5.91—6.11 (m, 3H) , 5.14—5.56 (d， IH) , 4.82-4.88
(t, IH), 4.41-4.45 (m, IH) , 4.24-4.28 (m, IH) , 4.04-4.06 (m, IH)，
3.74-3.82 (m, 2H) , 3.647 (s, 3H) , 2.39 (s, 3H) , 1.20-1.25 (m, 6H) , 1.14-1.16 (m, 6H)。
LC-MS m/z: [M+H]+ =615。 药理和药代活性研究： 实验例 1本发明的化合物在 HCV复制子 (HCV replicon)系统中的抗病毒活性检 测
1. 实验材料
1.1 试剂：
表 1. 试剂列表
L-谷氨酰胺 Invitrogen
青霉素 -链霉素溶液 Invitrogen
DPBS/Modified Hyclone
胰蛋白酶 /EDTA Invitrogen 二甲基亚砜（DMS0) Si ma
Bright-Glo Promega
细胞生长荧光滴定检测试
Promega
剂
1. 2 Huh7 lb细胞系:
Huh7 lb细胞系由上海药明康德新药开发有限公司提 ， 为包含带有稳定的 荧光素酶 (Luc)报告子的 HCV lb复制子的 Huh7细胞系。 其通过基因重组技术将 HCV非结构蛋白基因、 neo (G418抗性)及荧光素酶报告基因克隆入 pBR载体构建。 然后将携带有 HCV复制子的载体转染入 huh7细胞， 通过 G418抗性筛选， HCV复 制子可稳定复制且相关蛋白和荧光素酶在 huh7细胞内稳定表达。 该细胞模型用 于抗 HCV化合物体外筛选。通过检查荧光素酶的表达 水平而测定化合物的抗 HCV 的活性。 参见 Lohmann V, et al. 1999. Repl ication of subgenomic hepatitis C virus RNAs in a hepatoma cel l l ine. Science. 285 (5424)： 110-113. 1. 3 阳性对照药：
本发明实验例中使用的对照药为 WO 2008/121634 (PCT/US2008/058183)实施 例 25的化合物， 即（S) -2- { [ (2R, 3R, 4R, 5R) _5_ (2, 4-二氧代 _3, 4-二氢 -2H-嘧啶 -1-基) -4-氟 -3-羟基 -4-甲基 -四氢 -呋喃 -2-基甲氧基] -苯氧基-磷酰基氨基} -丙 酸异丙酯（ (S) -2- { [ (2R, 3R, 4R, 5R) _5_ (2, 4-dioxo_3， 4-dihydro-2H-pyrimidin -1-yl) -4-f luoro-3-hydroxy-4-methyl-tetrahydro-furan-2-ylmethoxy] -phen oxy-phosphorylamino} -propionic acid isopropyl ester) 0 该化合物参照 J. Org. chem, 2011, 76, 8311-8319中描述的方法制得并通过氢谱和质谱鉴 定。
2.实验步骤：
2.1化合物准备： 用 P0D 810全自动微孔板预处理系统 (LabCyte公司， 美国）将 表 2中所列化合物分别加入到孔板中， 化合物起始终浓度均为 10 μ Μ， 每个 化合物做双复孔， 3倍稀释 10个点， DMS0终浓度 0. 5%;
2.2细胞准备: 分别种 Huh7 lb细胞到 96孔板， 125 μ 1体系， 8 X 10 3 个细胞 /孔， 37°C， 5% C0 2 培养箱培养细胞 72小时； 2.3细胞活性检测： 每孔加 30 μ 1细胞生长荧光滴定检测试剂， 37 °C 5% C0 2 培养箱培养细胞 1小时， 分光光度仪上检测荧光信号值， 所得数据用于化合 物细胞毒性计算；
2.4 Bright-Glo检测： 每孔加 100 μ 1荧光素酶发光底物 Bright_Glo 5分钟内 用化学发光检测系统 EnVision (PerkinElmer公司， 美国）检测荧光信号值， 所得数据用于化合物效力计算。
2.5数据处理：使用如下公式将所得数据转换为 细胞活力百分比 (Viabi l ity%)
CPD
Viability % = x lOO
ZPE
CPD: 化合物孔的荧光信号值
ZPE (Zero percent effect)： 无效作用对照荧光信号值
使用如下公式将原始数据处理为抑制百分数（ Inhibition)
, , . 0/ CPD - HPE
Inhibition % = x 100
ZPE - HPE
CPD: 化合物孔的荧光信号值
HPE (Hundred percent effect) 100%有效作用对照荧光信号值
ZPE (Zero percent effect)： 无效作用对照荧光信号值
将抑制百分数导入 GraphPad Prism进一步处理得出对应曲线和 EC 5 。值。 数 据见表 2
表 2
实施例 9 人 V。 v 待测
实施例 10 待测
实施例 11 0. 189
实施例 12 0. 637 人 '、"、 o O V, 1 o
实施例 13 待测
〇
、o
实施例 14 、。 V 0. 2231
00 H "。
人
。
实施例 15 y。
、。 V >3. 33
00 H "。
实施例 43 0. 069
以上实验结果表明，本发明的化合物具有高效 的抑制 HCV病毒的能力， 与阳 注对照药相比， EC 5 。具有相当或更优异的效果。 实验例 2 本发明的化合物对 HCV 细胞感染模型（Cell-culture-derived infectious HCV, HCVcc)的抗病毒活性检测
1 实验材料
1. 1 化合物
本实验例使用以上实施例 1制备的本发明的化合物， 用 DMS0配制成 10 mM 母液后， 用含 0. 5% DMS0的 DMEM完全培养液稀释至 500 nM， 然后依次 4倍稀释， 共 6个浓度； 阳性对照药用含 0. 5% DMS0的 DMEM完全培养液稀释至 10 μ M， 然 后依次 4倍稀释， 共 6个浓度。
1. 2 细胞
Huh 7. 5. 1细胞， 由中国科学院上海药物研究所提供。
1. 3 病毒
J399EM (HCV genotype 2a) 病毒， 即转染了 EGFP (增强型绿色荧光蛋白） 的 HCV全长突变株， 与 JFH-1野生型具有相同的感染能力， 同时通过在 NS5A区 域插入 EGFP编码序列， 可以直接在感染细胞内观察 NS5A-EGFP融合蛋白荧光， 由中国科学院上海药物研究所提供。
1. 4 试剂
DMEM细胞培养液 (DMEM medium), 购自美国 Invitrogen公司；
胎牛血清 (Fetal bovine serum, FBS)， 购自美国 Sigma公司；
L-谷氨酰胺 (L (+) -Glutamine), 购自美国 Invitrogen公司；
青霉素-链霉素 （Pen-Str印）， 购自美国 Invitrogen公司；
磷酸盐缓冲液 (Phosphate buffered saline, PBS), 购自美国 Hyclone公 司；
胰酶 (Trypsin), 购自美国 Invitrogen公司；
二甲基亚砜 (Dimethyl sulfoxide, DMS0), 购自美国 Sigma公司； 细胞裂解液 (lysis buffer), 购自美国 Promega公司;
MTT, 购自美国 Sigma公司。
1.4 仪器
EnVision多功能酶标仪， 购自美国 Perk in-Elmer公司。
2 实验方法
1) Huh 7.5.1细胞准备： 收集对数期的 Huh 7.5.1细胞， 用 DMEM完全培养液重 悬后， 接种于 96孔板中 （7X10 3 个细胞 /孔）， 置于 37°C， 5%C0 2 培养箱中培 养 24 h ;
2) 病毒感染： J399EM病毒用 DMEM完全培养液重悬后，加入病毒上清 (M0I « 0.1) 至上述 96孔板中。 感染 8小时后， 以 PBS清洗；
3) 药物处理： 在 J399EM病毒感染的 Huh7.5.1细胞中加入各浓度的化合物， 每 个浓度设双复孔； 同时设立无效作用对照组 （Zero percent effect, ZPE) 和 100%有效作用对照组 (Hundred percent effect, HPE): ZPE组用含 0.5% DMSO的完全培养液代替化合物， HPE组孔为无病毒感染的细胞；
4) 细胞培养： 将 96孔板置于 37°C， 5% C0 2 培养箱中培养 72 hr ;
5) 抗 HCV病毒活性检测： 培养结束后， 用 EnVision多功能酶标仪读取每孔相对 荧光强度 （RFU)， 所得数据用于化合物抗 HCV活性计算， 计算公式为：
Inhibit ion% = (RFU ZPE - RFU CPD ) / (RFU ZPE - RFU HPE ) X 100 其中， RFU ZPE 表示无效作用对照组的相对荧光强度， RFU™表示对应化合物的 相对荧光强度， RFU HPE 表示 100%有效作用对照组的相对荧光强度。
6) 细胞活力检测： 向每孔中加入 MTT， 37°C， 5% C0 2 培养箱培养 4hr后， 加入 MTT溶解液， 6hr后在多功能酶标仪上读取每孔 570nm处的光密度值 （0D)， 所得数据用于化合物细胞毒性计算， 计算公式为：
Viability% = 0D CPD / 0D ZPE X 100
其中， 0D ZPE 表示无效作用对照组的光密度值， 0D ePD 表示对应化合物的光密度 值；
7) 数据处理： 将 Inhibition 0 / 土&1^1 %分别导入 GraphPad Prism软件进行 数据处理， 得出化合物对 HCVcc GT2a病毒的半数有效浓度 EC 5 。和半数细胞毒 性浓度 CC 5 。， 实验结果见表 3。
表 3
阳性对照 0. 173 〉10
人
实施例 1 0. 039 〉10
Η0 F ° 从表 3可以看出，对于 HCV体外细胞感染模型，本发明实施例 1的化合物与 阳性对照药相比， 具有优异的抗病毒活性， 同时对细胞毒性小。
另外， 实验还表明， 使用 HCV体外细胞感染模型， 本发明的实施例制备的其 他化合物如实施例 2、 5、 12、 16、 18、 28、 38等的化合物对 HCVcc GT2a病毒具 有低的半数有效浓度 EC 5 。以及高的半数细胞毒性浓度 CC 5 。， 显示出良好的抑制活 性以及小的细胞毒性。 实验例 3 本发明的化合物在 SD大鼠体内的药代动力学研究
1 实验材料
1. 1 化合物
本实验例使用以上实施例 1制备的本发明的化合物， 阳性对照药同上，将各 化合物加至 0. 5%羧甲基纤维素钠（CMC)中， 涡旋后制备成 10 mg/ml混悬液， 用于灌胃给药。
GS-461203标准品， 为测试药物的代谢物， 化学名为（2' R) ~2' -脱氧 -2' -氟 -2' -甲基尿苷三磷酸， 购自美国 TriLink BioTechnologies公司
1. 2 动物
雄性 SD大鼠， 6-8周龄， 体重 237. 0-268. 4 g， 由上海西普尔 -必凯实验动 物有限公司提供。
1. 3 试剂
甲醇 （色谱纯）， 购自美国 Spectrum公司；
乙腈 （色谱纯）： 购自美国 Spectrum公司。
1. 4 仪器
API 5500型液质联用仪， 购自美国 AB 公司。
2 实验方法
1) 给药： SD大鼠分为 4组， 每组 18只， 分别灌胃给予各化合物， 给药量为 50 mg/kg。 灌胃给药前禁食 10-15小时， 给药后 4小时恢复进食；
2) 采样： 于给药后 0. 5 h、 1 h、 2 h、 4 h、 6 h、 12 h， 处死大鼠 （n=3/时间 点 /组别）， 分别采集各大鼠肝脏 1 g左右， 加入 3倍体积的预冷甲醇， 匀浆 30 s , 制备的肝脏匀浆样品分析前存放于 -8CTC ;
3) 标准曲线配制： 取适量 GS-461203储备液， 分别用甲醇逐级稀释， 配制成浓 度为 30、 27、 10、 5、 2、 1、 0. 5、 0. 2、 0. 1 μ g/mL的标准溶液， 取标准溶液 各 10 μ L平行加入至 90 μ L大鼠空白肝脏匀浆中， 制得浓度为 3000、 2700、 1000、 500、 200、 100、 50、 20、 10 ng/mL的标准曲线样品;
4) 样品处理:取 30 μ 1肝脏匀浆样品或标准曲线样品加入至 150 μ 1含内标（ 100 ng/ml ) 的乙腈中， 涡旋 2 min后离心 lO min ( 6000转 /min)， 将上清液转移 至进样瓶中；
5) 样品数据分析：取 5 μ L上清液，进样，采用 UPLC-MS/MS检测样品中 GS-461203 的浓度。 根据所得的肝匀浆药物浓度 -时间数据， 使用药代动力学计算软件 WinNonl in 6. 2. 1非房室模型分别计算各测试化合物的代谢物 GS-461203的 药代动力学参数， 结果见表 4。
从表 4的数据可以看出，本发明实施例 1的化合物的代谢物在肝组织中的峰 浓度以及药时曲线下面积均优于阳性对照药， 具有较好的体内暴露量。
以上实验结果表明，本发明的化合物具有高效 的抑制 HCV病毒的能力， 与阳 性对照药相比， EC 5 。具有相当或更优异的效果， 而对宿主细胞的毒性较小， CC 5 。 较高， 安全性好， 对于治疗 HCV感染具有好的前景。
尽管以上已经对本发明作了详细描述，但是本 领域技术人员理解，在不偏离 本发明的精神和范围的前提下可以对本发明进 行各种修改和改变。本发明的权利 范围并不限于上文所作的详细描述， 而应归属于权利要求书。