Oxo-heterocvclisch substituierte Alkylcarbonsäuren und ihre Verwendung

Die vorliegende Anmeldung betrifft neue Alkylcarbonsäuren mit einer oxo-substituierten aza- heterocyclischen Partialstruktur, Verfahren zu ihrer Herstellung, ihre Verwendung zur Behandlung und/oder Prävention von Krankheiten sowie ihre Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln zur Behandlung und/oder Prävention von Krankheiten, insbesondere zur Behandlung und/oder Prävention kardiovaskulärer Erkrankungen.

Eines der wichtigsten zellulären Übertragungssysteme in Säugerzellen ist das cyclische Guanosin- monophosphat (cGMP). Zusammen mit Stickstoffmonoxid (NO), das aus dem Endothel freigesetzt wird und hormonelle und mechanische Signale überträgt, bildet es das NO/cGMP-System. Die Guanylatcyclasen katalysieren die Biosynthese von cGMP aus Guanosintriphosphat (GTP). Die bisher bekannten Vertreter dieser Familie lassen sich sowohl nach strukturellen Merkmalen als auch nach der Art der Liganden in zwei Gruppen aufteilen: Die partikulären, durch natriuretische Peptide stimulierbaren Guanylatcyclasen und die löslichen, durch NO stimulierbaren Guanylatcyclasen. Die löslichen Guanylatcyclasen bestehen aus zwei Untereinheiten und enthalten höchst- wahrscheinlich ein Häm pro Heterodimer, das ein Teil des regulatorischen Zentrums ist. Dieses hat eine zentrale Bedeutung für den Aktivierungsmechanismus. NO kann an das Eisenatom des Häms binden und so die Aktivität des Enzyms deutlich erhöhen. Hämfreie Präparationen lassen sich hingegen nicht durch NO stimulieren. Auch Kohlenmonoxid (CO) ist in der Lage, am Eisen-Zentralatom des Häms anzugreifen, wobei die Stimulierung durch CO deutlich geringer ist als die durch NO.

Durch die Bildung von cGMP und der daraus resultierenden Regulation von Phosphodiesterasen, Ionenkanälen und Proteinkinasen spielt die Guanylatcyclase eine entscheidende Rolle bei unterschiedlichen physiologischen Prozessen, insbesondere bei der Relaxation und Proliferation glatter Muskelzellen, der Plättchenaggregation und -adhäsion und der neuronalen Signalübertragung sowie bei Erkrankungen, welche auf einer Störung der vorstehend genannten Vorgänge beruhen. Unter pathophysiologischen Bedingungen kann das NO/cGMP-System supprimiert sein, was zum Beispiel zu Bluthochdruck, einer Plättchenaktivierung, einer vermehrten Zellproliferation, endothelialer Dysfunktion, Atherosklerose, Angina pectoris, Herzinsuffizienz, Thrombosen, Schlaganfall und Myokardinfarkt führen kann.

Eine auf die Beeinflussung des cGMP-Signalweges in Organismen abzielende NO-unabhängige Behandlungsmöglichkeit für derartige Erkrankungen ist aufgrund der zu erwartenden hohen Effizienz und geringen Nebenwirkungen ein vielversprechender Ansatz. Zur therapeutischen Stimulation der löslichen Guanylatcyclase wurden bisher ausschließlich Verbindungen wie organische Nitrate verwendet, deren Wirkung auf NO beruht. Dieses wird durch Biokonversion gebildet und aktiviert die lösliche Guanylatcyclase durch Angriffe am Eisen- Zentralatom des Häms. Neben den Nebenwirkungen gehört die Toleranzentwicklung zu den ent- scheidenden Nachteilen dieser Behandlungsweise [O.V. Evgenov et al., Nature Rev. Drug Disc. 5_ (2006), 755].

In den letzten Jahren wurden Substanzen identifiziert, die die lösliche Guanylatcyclase direkt, d.h. ohne vorherige Freisetzung von NO stimulieren. Mit dem Indazolderivat YC-I wurde erstmals ein NO-unabhängiger, jedoch Häm-abhängiger Stimulator der sGC beschrieben [Evgenov et al., ibid.]. Ausgehend von YC-I wurden weitere Substanzen gefunden, welche eine höhere Potenz als YC-I besitzen und keine relevante Hemmung von Phosphodiesterasen (PDE) aufweisen. Dies führte zur Identifizierung der Pyrazolopyridin-Derivate BAY 41-2272, BAY 41-8543 und BAY 63-2521. Diese Verbindungen bilden gemeinsam mit den kürzlich publizierten, strukturell diversen Substanzen CMF-1571 und A-350619 die neue Klasse der sGC-Stimulatoren [Evgenov et al., ibid.]. Gemeinsames Charakteristikum dieser Substanzklasse ist eine NO-unabhängige und selektive Aktivierung der hämhaltigen sGC. Darüber hinaus zeigen die sGC-Stimulatoren in Kombination mit NO einen synergistischen Effekt auf die sGC-Aktivierung, welcher auf einer Stabilisierung des Nitrosyl-Häm-Komplexes basiert. Die genaue Bindungsstelle der sGC-Stimulatoren an der sGC ist bis heute Gegenstand der Diskussion. Entfernt man von der löslichen Guanylatcyclase die Häm- Gruppe, zeigt das Enzym immer noch eine nachweisbare katalytische Basalaktivität, d.h. es wird nach wie vor cGMP gebildet. Die verbleibende katalytische Basalaktivität des Häm-freien Enzyms ist durch keinen der vorstehend genannten Stimulatoren stimulierbar [Evgenov et al., ibid.].

Darüber hinaus wurden NO- und Häm-unabhängige sGC-Aktivatoren, mit BAY 58-2667 als Prototyp dieser Klasse, identifiziert. Gemeinsame Charakteristika dieser Substanzen sind, dass sie in Kombination mit NO nur einen additiven Effekt auf die Enzymaktivierung ausüben, und dass die Aktivierung des oxidierten oder hämfreien Enzyms im Vergleich zum hämhaltigen Enzym deutlich stärker ist [Evgenov et al., ibid.; J.P. Stasch et al., Br. J. Pharmacol. 136 (2002), 773; J.P. Stasch et al., J. Clin. Invest. 116 (2006), 2552]. Spektroskopische Untersuchungen lassen erkennen, dass BAY 58-2667 die oxidierte Hämgruppe verdrängt, die durch Schwächung der Eisen-Histidin- Bindung nur schwach an der sGC gebunden ist. Auch wurde gezeigt, dass das charakteristische sGC-Hämbindungsmotiv Tyr-x-Ser-x-Arg sowohl für die Interaktion der negativ geladenen Propionsäuren der Hämgruppe als auch für die Wirkung von BAY 58-2667 zwingend erforderlich ist. Vor diesem Hintergrund wird angenommen, dass die Bindungsstelle von BAY 58-2667 an der sGC identisch zur Bindungsstelle der Hämgruppe ist [J.P. Stasch et al., J. Clin. Invest. 1 16 (2006), 2552]. Die in der vorliegenden Erfindung beschriebenen Verbindungen sind nun ebenfalls in der Lage, die Häm-freie Form der löslichen Guanylatcyclase zu aktivieren. Dies wird auch dadurch belegt, dass diese neuartigen Aktivatoren einerseits am Häm-haltigen Enzym keine synergistische Wirkung mit NO zeigen und andererseits sich ihre Wirkung nicht durch den Häm-abhängigen Inhibitor der löslichen Guanylatcyclase, lH-l,2,4-Oxadiazolo[4,3-a]chinoxalin-l-on (ODQ), blockieren lässt, sondern durch diesen sogar potenziert wird [vgl. O.V. Evgenov et al., Nature Rev. Drug Disc. 5 (2006), 755; J.P. Stasch et al., J. Clin. luvest. 116 (2006), 2552].

Aufgabe der vorliegenden Erfindung war somit die Bereitstellung neuer Verbindungen, welche in der oben beschriebenen Weise als Aktivatoren der löslichen Guanylatcyclase wirken und als solche insbesondere zur Behandlung und zur Prävention kardiovaskulärer Erkrankungen eingesetzt werden können.

Die Verbindungen der vorliegenden Erfindung zeichnen sich strukturell durch eine terminale Alkylcarbonsäure-Gruppierung aus, welche auf die im Folgenden dargestellte Weise mit einem oxo-substituierten Aza-Ηeterocyclus als Kopfgruppe verknüpft ist.

In EP 0 719 763 -Al, EP 0 779 279-A1 und EP 0 802 192-Al werden verschiedene Phenylacet- amid-Derivate mit azaheterocyclischer Partialstruktur als Apolipoprotein B-Inhibitoren zur Behandlung von Atherosklerose und koronaren Ηerzerkrankungen beschrieben, und in EP 0 608 709- Al werden 2-Oxochinolinylmethyl-substituierte Phenylacetamide als Angiotensin II- Antagonisten zur Behandlung von arterieller Hypertonie und Atherosklerose offenbart. In EP O 842 943-A2, EP 0 842 944-A2, EP 0 842 945-A2, EP 0 918 059-A1 und WO 99/60015-Al werden unter anderem oxo-heterocyclisch substituierte Alkylcarbonsäuren als VLA-4-Antagonisten und Inhibitoren der Leukozyten- Adhäsion beansprucht. Ferner werden in WO 01/57002-A1 bestimmte kondensierte Azol-Derivate als hypoglykämisch wirksame Agentien beschrieben.

Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der allgemeinen Formel (I)

in welcher der Ring A für einen N-verknüpften 5- bis 7-gliedrigen, gesättigten oder partiell ungesättigten, oxo-substituierten Azaheterocyclus steht,

der (/) ein oder zwei weitere Heteroatome aus der Reihe N, O und/oder S als Ringglieder enthalten kann,

der (//) mit einem Rest ausgewählt aus der Reihe Fluor, Chlor, (Ci-Co)-AIlCyI, Trifluor- methyl, (C ₃ -C ₇ )-Cycloalkyl, 4- bis 7-gliedriges Heterocyclyl und Phenyl substituiert ist oder der benzo-anelliert ist,

wobei der Phenyl-Substituent und der anellierte Phenylring ihrerseits bis zu zweifach, gleich oder verschieden, mit einem Rest ausgewählt aus der Reihe Halogen, Cyano, (Ci-C ₄ )-Alkyl, (C ₂ -C ₄ )-Alkenyl, Trifluormethyl, (C _r C ₄ )-Alkoxy und Tri- fluormethoxy substituiert sein können,

und

der (Uf) darüber hinaus bis zu zweifach, gleich oder verschieden, mit weiteren Resten ausgewählt aus der Reihe Fluor, Chlor, (Ci-C ₆ )-Alkyl, Trifluormethyl, Oxo, (C ₃ -C ₇ )-Cyclo- alkyl, 4- bis 7-gliedriges Heterocyclyl und Phenyl substituiert sein kann,

wobei Phenyl seinerseits bis zu zweifach, gleich oder verschieden, mit einem Rest ausgewählt aus der Reihe Halogen, Cyano, (Q-GO-Alkyl, (C ₂ -C ₄ )-Alkenyl, Trifluormethyl, (C]-C ₄ )-Alkoxy und Trifluormethoxy substituiert sein kann,

R ¹ für Wasserstoff, (C _r C ₄ )-Alkyl oder Cyclopropyl steht,

R ² für Wasserstoff, Halogen, Cyano, (C _r C ₄ )-Alkyl oder Trifluormethyl steht,

R ³ für (C ₃ -C ₆ )-Alkyl oder (C ₃ -C ₆ )-Alkenyl, welche jeweils mit Cyano, (Ci-C ₄ )-Alkoxy oder Trifluormethoxy und bis zu sechsfach mit Fluor substituiert sein können,

oder

für (C ₃ -C ₇ )-Cycloalkyl oder (C ₃ -C ₇ )-Cycloalkenyl, welche jeweils bis zu zweifach, gleich oder verschieden, mit (C _r C ₄ )-Alkyl, Trifluormethyl und (Ci-C ₄ )-Alkoxy sowie bis zu vierfach mit Fluor substituiert sein können,

oder

für Oxetanyl, Tetrahydrofuranyl oder Tetrahydropyranyl steht, und

L für geradkettiges (C ₃ -C ₇ )-Alkandiyl oder (C ₃ -C ₇ )-Alkendiyl steht, welche jeweils bis zu vierfach, gleich oder verschieden, mit einem Rest R ⁴ substituiert sein können, worin

R ⁴ Fluor, Trifluormethyl oder bedeutet

oder

zwei an dasselbe Kohlenstoffatom gebundene Reste R ⁴ miteinander verknüpft sind und zusammen mit diesem Kohlenstoffatom einen (C ₃ -C ₆ )-Cycloalkan-l,l-diyl- Ring bilden,

sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.

Erfindungsgemäße Verbindungen sind die Verbindungen der Formel (I) und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze, die von Formel (I) umfassten Verbindungen der nachfolgend genannten Formeln und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze sowie die von Formel (I) umfassten, nachfolgend als Ausführungsbeispiele genannten Verbindungen und deren Salze, Solvate und Solvate der Salze, soweit es sich bei den von Formel (I) umfassten, nachfolgend genannten Verbindungen nicht bereits um Salze, Solvate und Solvate der Salze handelt.

Die erfϊndungsgemäßen Verbindungen können in Abhängigkeit von ihrer Struktur in stereoisomeren Formen (Enantiomere, Diastereomere) existieren. Die Erfindung umfasst deshalb die Enantiomeren oder Diastereomeren und ihre jeweiligen Mischungen. Aus solchen Mischungen von Enantiomeren und/oder Diastereomeren lassen sich die stereoisomer einheitlichen Bestandteile in bekannter Weise isolieren.

Sofern die erfindungsgemäßen Verbindungen in tautomeren Formen vorkommen können, umfasst die vorliegende Erfindung sämtliche tautomere Formen.

Als Salze sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen bevorzugt. Umfasst sind auch Salze, die für pharmazeutische Anwendungen selbst nicht geeignet sind, jedoch beispielsweise für die Isolierung oder Reinigung der erfindungsgemäßen Verbindungen verwendet werden können.

Physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen umfassen Säureadditionssalze von Mineralsäuren, Carbonsäuren und Sulfonsäuren, z.B. Salze der Chlorwasserstoffsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure, Phosphorsäure, Methansulfonsäure, Ethan- sulfonsäure, Toluolsulfonsäure, Benzolsulfonsäure, Naphthalindisulfonsäure, Essigsäure, Trifluor- essigsaure, Propionsäure, Milchsäure, Weinsäure, Äpfelsäure, Zitronensäure, Fumarsäure, Maleinsäure und Benzoesäure.

Physiologisch unbedenkliche Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen umfassen auch Salze üblicher Basen, wie beispielhaft und vorzugsweise Alkalimetallsalze (z.B. Natrium- und Kalium- salze), Erdalkalisalze (z.B. Calcium- und Magnesiumsalze) und Ammoniumsalze, abgeleitet von Ammoniak oder organischen Aminen mit 1 bis 16 C-Atomen, wie beispielhaft und vorzugsweise Ethylamin, Diethylamin, Triethylamin, Ethyldiisopropylamin, Monoethanolamin, Diethanolamin, Triethanolamin, Dicyclohexylamin, Dimethylaminoethanol, Prokain, Dibenzylamin, N-Methyl- morpholin, Arginin, Lysin, Ethylendiamin und N-Methylpiperidin.

Als Solvate werden im Rahmen der Erfindung solche Formen der erfϊndungsgemäßen Verbindungen bezeichnet, welche in festem oder flüssigem Zustand durch Koordination mit Lösungsmittelmolekülen einen Komplex bilden. Hydrate sind eine spezielle Form der Solvate, bei denen die Koordination mit Wasser erfolgt. Als Solvate sind im Rahmen der vorliegenden Erfindung Hydrate bevorzugt.

Außerdem umfasst die vorliegende Erfindung auch Prodrugs der erfindungsgemäßen Verbindungen. Der Begriff "Prodrugs" bezeichnet hierbei Verbindungen, welche selbst biologisch aktiv oder inaktiv sein können, jedoch während ihrer Verweilzeit im Körper zu erfindungsgemäßen Verbindungen umgesetzt werden (beispielsweise metabolisch oder hydrolytisch).

Insbesondere umfasst die vorliegende Erfindung hydrolysierbare Ester-Derivate der erfindungs- gemäßen Carbonsäuren der Formel (I). Hierunter werden Ester verstanden, die in physiologischen Medien, unter den Bedingungen der im weiteren beschriebenen biologischen Tests und insbesondere in vivo auf enzymatischem oder chemischem Wege zu den freien Carbonsäuren, als den biologisch hauptsächlich aktiven Verbindungen, hydrolysiert werden können. Als solche Ester werden (Ci-C ₄ )-Alkylester, in welchen die Alkylgruppe geradkettig oder verzweigt sein kann, bevorzugt. Besonders bevorzugt sind Methyl-, Ethyl- oder tert.-Butylester.

Im Rahmen der vorliegenden Erfindung haben die Substituenten, soweit nicht anders spezifiziert, die folgende Bedeutung:

(C ₁ -Cg)-AIkVl und (C ₁ -Ca)-AIkVl stehen im Rahmen der Erfindung für einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 1 bis 6 bzw. 1 bis 4 Kohlenstoffatomen. Bevorzugt ist ein geradkettiger oder verzweigter Alkylrest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Methyl, Ethyl, «-Propyl, Isopropyl, «-Butyl, iso-Butyl, sec.-Butyl, tert.-Buty\, w-Pentyl, 2-Pentyl, 3-Pentyl, w-Hexyl, 2-Hexyl und 3-Hexyl. (dVCfiVAlkyl steht im Rahmen der Erfindung für einen geradkettigen oder verzweigten Alkylrest mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen. Bevorzugt ist ein geradkettiger oder verzweigter Alkylrest mit 3 bis 5 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: w-Propyl, Isopropyl, «-Butyl, /5O-Butyl, sec.-Buty\, tert.-Butyl, «-Pentyl, 2-Pentyl, 3-Pentyl, »-Hexyl, 2-Hexyl und 3-Hexyl.

(CyC^-Alkenyl und (C ₂ -C4)-Alkenyl stehen im Rahmen der Erfindung für einen geradkettigen oder verzweigten Alkenylrest mit einer Doppelbindung und 3 bis 6 bzw. 2 bis 4 Kohlenstoffatomen. Bevorzugt ist ein geradkettiger oder verzweigter Alkenylrest mit 3 bis 5 Kohlenstoffatomen bzw. ein geradkettiger Alkenylrest mit 2 oder 3 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Vinyl, Allyl, Isopropenyl, w-But-2-en-l-yl, 2-Methylprop-2-en-l-yl und

((_VC ₂ )-Alkandiyl und (CyCgVAlkandiyl stehen im Rahmen der Erfindung für einen geradkettigen, α,ω-divalenten Alkylrest mit 3 bis 7 bzw. 3 bis 6 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Propan-l,3-diyl (1,3-Propylen), Butan- 1,4-diyl (1,4-Butylen), Pentan-l,5-diyl (1,5-Pentylen), Hexan- 1,6-diyl (1,6-Hexylen) und Heptan-l,7-diyl (1,7-Heptylen).

(C ₂ -C ₂ )-Alkendiyl und (C _r Cfi)-Alkendiyl stehen im Rahmen der Erfindung für einen geradkettigen, α,ω-divalenten Alkenylrest mit 3 bis 7 bzw. 3 bis 6 Kohlenstoffatomen und einer Doppelbindung. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Propen-l,3-diyl, But-2-en- 1,4-diyl, Pent-2-en-l,5- diyl, Hex-2-en- 1,6-diyl, Hex-3-en- 1,6-diyl, Hept-2-en-l,7-diyl und Hept-3-en-l,7-diyl.

(CKCV)-A lkoxy steht im Rahmen der Erfindung für einen geradkettigen oder verzweigten Alkoxy- rest mit 1 bis 4 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Methoxy, Ethoxy, «-Propoxy, Isopropoxy, w-Butoxy und tert.-Butoxy.

(CyC ₂ VCyClOaIkVl und ( ^" CyQyCycloalkyl stehen im Rahmen der Erfindung für eine mono- cyclische, gesättigte Cycloalkylgruppe mit 3 bis 7 bzw. 3 bis 6 Kohlenstoffatomen. Bevorzugt ist ein Cycloalkylrest mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Cyclopropyl, Cyclobutyl, Cyclopentyl, Cyclohexyl und Cycloheptyl.

(C ₂ -C ₂ )-Cycloalkenyl und (C^-GQ-Cycloalkenyl stehen im Rahmen der Erfindung für eine mono- cyclische Cycloalkylgruppe mit 3 bis 7 bzw. 4 bis 6 Ring-Kohlenstoffatomen und einer Ring- Doppelbindung. Bevorzugt ist ein Cycloalkenylrest mit 4 bis 6, besonders bevorzugt mit 5 oder 6 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Cyclopropenyl, Cyclobutenyl, Cyclopentenyl, Cyclohexenyl und Cycloheptenyl.

(QrCfi)-Cvcloalkan- 1.1 -diyl steht im Rahmen der Erfindung für eine 1 , 1 -divalente monocyclische, gesättigte Cycloalkylgruppe mit 3 bis 6 Kohlenstoffatomen. Beispielhaft und vorzugsweise seien genannt: Cyclopropan-l,l-diyl, Cyclobutan-l,l-diyl, Cyclopentan-l,l-diyl und Cyclohexan-1,1- diyl.

4- bis 7-gliedriges Heterocyclyl und 4- bis 6-gliedriges Heterocyclyl stehen im Rahmen der Erfindung für einen monocyclischen, gesättigten Heterocyclus mit insgesamt 4 bis 7 bzw. 4 bis 6 Ring- atomen, der ein oder zwei Ring-Heteroatome aus der Reihe N, O und/oder S enthält und über ein Ring-Kohlenstoffatom oder gegebenenfalls ein Ring-Stickstoffatom verknüpft ist. Bevorzugt ist 4- bis 6-gliedriges Heterocyclyl mit ein oder zwei Ring-Heteroatomen aus der Reihe N und/oder O. Beispielhaft seien genannt: Azetidinyl, Oxetanyl, Pyrrolidinyl, Pyrazolidinyl, Tetrahydrofuranyl, Piperidinyl, Piperazinyl, Tetrahydropyranyl, Morpholinyl, Thiomorpholinyl, Hexahydroazepinyl und Hexahydro-l,4-diazepinyl. Bevorzugt sind Azetidinyl, Oxetanyl, Pyrrolidinyl, Tetrahydrofuranyl, Piperidinyl, Piperazinyl, Tetrahydropyranyl und Morpholinyl.

Halogen schließt im Rahmen der Erfindung Fluor, Chlor, Brom und Iod ein. Bevorzugt sind Chlor, Fluor oder Brom, besonders bevorzugt Fluor oder Chlor.

Ein Oxo-Substituent steht im Rahmen der Erfindung für ein Sauerstoffatom, das über eine Doppel- bindung an ein Kohlenstoffatom gebunden ist.

Wenn Reste in den erfindungsgemäßen Verbindungen substituiert sind, können die Reste, soweit nicht anders spezifiziert, ein- oder mehrfach substituiert sein. Im Rahmen der vorliegenden Erfindung gilt, dass für alle Reste, die mehrfach auftreten, deren Bedeutung unabhängig voneinander ist. Eine Substitution mit ein, zwei oder drei gleichen oder verschiedenen Substituenten ist bevor- zugt. Besonders bevorzugt ist die Substitution mit einem oder zwei Substituenten.

Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind insbesondere Verbindungen der Formel (I), in welcher

der Ring A für einen oxo-substituierten Azaheterocyclus der Formel

steht, worin

* die Verknüpfungsposition mit dem restlichen Teil des Moleküls kennzeichnet,

R ⁵ Chlor, (C _r C ₆ )-Alkyl, Trifluormethyl, (C ₃ -C ₆ )-Cycloalkyl, 4- bis 6-gliedriges Heterocyclyl oder Phenyl bedeutet, wobei Phenyl seinerseits bis zu zweifach, gleich oder verschieden, mit einem Rest ausgewählt aus der Reihe Fluor, Chlor, Brom, Cyano, (Ci-C ₄ )-Alkyl, Vinyl, Trifluormethyl, (C _r C ₄ )-Alkoxy und Trifluor- methoxy substituiert sein kann,

R ⁶ Wasserstoff bedeutet oder die oben genannte Bedeutung von R ⁵ hat und

R und R unabhängig voneinander Wasserstoff, Fluor oder Chlor bedeuten,

sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.

Bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel (I), in welcher

der Ring A für einen oxo-substituierten Azaheterocyclus der Formel

steht, worin

* die Verknüpfungsposition mit dem restlichen Teil des Moleküls kennzeichnet,

R ⁵ Chlor, (C,-C ₆ )-Alkyl, Trifluormethyl, (C ₃ -C ₆ )-Cycloalkyl oder Phenyl bedeutet, wobei Phenyl seinerseits bis zu zweifach, gleich oder verschieden, mit einem Rest ausgewählt aus der Reihe Fluor, Chlor, Cyano, (Ci-C ₄ )-Alkyl, Trifluormethyl, (C _r Gι)-Alkoxy und Trifluormethoxy substituiert sein kann,

R ⁶ Wasserstoff bedeutet oder die zuvor genannte Bedeutung von R ⁵ hat

und

R ^7A und R ^7B unabhängig voneinander Wasserstoff, Fluor oder Chlor bedeuten,

R ¹ für Wasserstoff oder (C _r C ₄ )-Alkyl steht,

R ² für Wasserstoff, Fluor, Chlor oder Trifluormethyl steht, R ³ für (C ₃ -C ₆ )-Alkyl oder (C ₃ -C ₆ )-Alkenyl, welche jeweils mit Cyano, Methoxy, Ethoxy oder Trifluormethoxy und bis zu sechsfach mit Fluor substituiert sein können,

oder

für (C ₃ -C6)-Cycloalkyl oder (G _t -C ₆ )-Cycloalkenyl, welche jeweils bis zu zweifach, gleich oder verschieden, mit Methyl, Ethyl und Trifluormethyl sowie bis zu vierfach mit Fluor substituiert sein können,

oder

für Oxetanyl steht,

und

L für geradkettiges (C ₃ -C ₆ )-Alkandiyl oder (C ₃ -C ₆ )-Alkendiyl steht, welche jeweils bis zu vierfach, gleich oder verschieden, mit einem Rest R ⁴ substituiert sein können, worin

R ⁴ Fluor, Trifluormethyl, Methyl oder Ethyl bedeutet

oder

zwei an dasselbe Kohlenstoffatom gebundene Reste R ⁴ miteinander verknüpft sind und zusammen mit diesem Kohlenstoffatom einen Cyclopropan-l,l-diyl- oder

Cyclobutan-l,l-diyl-Ring bilden,

sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.

Besonders bevorzugt im Rahmen der vorliegenden Erfindung sind Verbindungen der Formel (I), in welcher

der Ring A für einen oxo-substituierten Azaheterocyclus der Formel

steht, worin

* die Verknüpfungsposition mit dem restlichen Teil des Moleküls kennzeichnet, R ⁵ Chlor, Trifluormethyl oder Phenyl bedeutet, wobei Phenyl seinerseits bis zu zweifach, gleich oder verschieden, mit einem Rest ausgewählt aus der Reihe Fluor, Chlor, Methyl und Trifluormethyl substituiert sein kann,

und

R ^7A und R ^7B unabhängig voneinander Wasserstoff oder Fluor bedeuten,

R ¹ für Wasserstoff steht,

R ² für Wasserstoff steht,

R ³ für Propan-2-yl, Butan-2-yl, Pentan-2-yl, 3,3,3-Trifluorpropan-l-yl, 1,1,1-Trifluorpropan- 2-yl, l,l,l-Trifluorbutan-2-yl, 4,4,4-Trifluorbutan-2-yl, 4,4,4-Trifluor-2-methylbutan-l-yl, Cyclopentyl oder 3,3-Difluorcyclopentyl steht,

und

L für geradkettiges (C ₃ -C ₆ )-Alkandiyl oder (C ₃ -C ₆ )-Alkendiyl steht, welche jeweils bis zu vierfach, gleich oder verschieden, mit einem Rest R ⁴ substituiert sein können, worin

R ⁴ Methyl darstellt

oder

zwei an dasselbe Kohlenstoffatom gebundene Reste R ⁴ miteinander verknüpft sind und zusammen mit diesem Kohlenstoffatom einen Cyclopropan-l,l-diyl-Ring bilden,

sowie ihre Salze, Solvate und Solvate der Salze.

Die in den jeweiligen Kombinationen bzw. bevorzugten Kombinationen von Resten im einzelnen angegebenen Reste-Definitionen werden unabhängig von den jeweiligen angegebenen Kombinationen der Reste beliebig auch durch Reste-Definitionen anderer Kombinationen ersetzt.

Ganz besonders bevorzugt sind Kombinationen von zwei oder mehreren der oben genannten Vorzugsbereiche.

Weiterer Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen der Formel (I), dadurch gekennzeichnet, dass man zunächst entweder

[A] eine Verbindung der Formel (II)

in welcher R ¹ und R ² die oben angegebenen Bedeutungen haben

und

T ¹ für (C _r C ₄ )-Alkyl steht,

in einem inerten Lösungsmittel in Gegenwart einer Base mit einer Verbindung der Formel (III)

R— X (III),

in welcher R ³ die oben angegebene Bedeutung hat

und

X für eine Abgangsgruppe wie beispielsweise Halogen, Mesylat, Tosylat oder Triflat steht,

in eine Verbindung der Formel (IV)

in welcher R , R , R und T jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben,

überführt

oder

[B] eine Verbindung der Formel (V)

in welcher R ³ und T ¹ die oben angegebenen Bedeutungen haben,

in einem inerten Lösungsmittel, nach Deprotonierung mittels einer Base, mit einer Verbindung der Formel (VI)

in welcher R ¹ und R ² die oben angegebenen Bedeutungen haben

und

Z für Chlor, Brom oder Iod steht,

in Gegenwart eines geeigneten Palladium-Katalysators gleichfalls zu einer Verbindung der Formel (IV)

in welcher R ¹ , R ² , R ³ und T ¹ jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben,

umsetzt, indung der Formel (FV) dann in einem inerten Lösungsmittel mit elementarem Brom oderromsuccinimid zu einer Verbindung der Formel (VII)

in welcher R ¹ , R ² , R ³ und T ¹ jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben,

bromiert, anschließend in einem inerten Lösungsmittel in Gegenwart einer Base mit einer Verbindung der Formel (VIII)

(VIII),

in welcher der Ring A für einen oxo-substituierten Azaheterocyclus, wie oben definiert, steht,

zu einer Verbindung der Formel (IX)

in welcher der Ring A, R ¹ , R ² , R ³ und T ¹ jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben,

umsetzt, nachfolgend den Ester-Rest T ¹ in (IX) unter basischen oder sauren Bedingungen abspaltet, die resultierende Carbonsäure der Formel (X)

in welcher der Ring A, R , R und R jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben, dann in einem inerten Lösungsmittel in Gegenwart eines Kondensationsmittels oder über die Zwischenstufe des entsprechenden Carbonsäurechlorids in Gegenwart einer Base mit einem Amin der Formel (XI)

in welcher L die oben angegebene Bedeutung hat

und

T ² für (C _r C ₄ )-Alkyl steht,

zu einer Verbindung der Formel (Xu)

in welcher der Ring A, R , R , R , L und T jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben,

kuppelt und abschließend den Ester-Rest T ² in (Xu) durch erneute basische oder saure Solvolyse zur Carbonsäure der Formel (I) abspaltet

und die Verbindungen der Formel (I) gegebenenfalls nach dem Fachmann bekannten Methoden in ihre Enantiomere und/oder Diastereomere trennt und/oder gegebenenfalls mit den entsprechenden (i) Lösungsmitteln und/oder (ii) Basen oder Säuren zu ihren Solvaten, Salzen und/oder Solvaten der Salze umsetzt.

Bei der zuvor beschriebenen Reaktionssequenz kann es gegebenenfalls zweckmäßig sein, die Reihenfolge einzelner Transformationen zu vertauschen. So ist es beispielsweise möglich, die Verbindung der Formel (VD-A) [T ¹ in (VII) = tert.-Butyl]

in welcher R ¹ , R ² und R ³ die oben angegebenen Bedeutungen haben,

zunächst durch Behandlung mit einer Säure in eine Carbonsäure der Formel (XHL)

in welcher R ¹ , R ² und R ³ die oben angegebenen Bedeutungen haben,

zu überführen und diese anschließend in einem inerten Lösungsmittel in Gegenwart eines Kondensationsmittels oder über die Zwischenstufe des entsprechenden Carbonsäurechlorids in Gegenwart einer Base mit einem Amin der Formel (XI)

in welcher L die oben angegebene Bedeutung hat

und

T ² für (Ci-C ₄ )-Alkyl steht,

zu einer Verbindung der Formel (XIV)

(XIV), in welcher R ¹ , R ² , R ³ , L und T ² jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben,

zu kuppeln, welche dann in einem inerten Lösungsmittel in Gegenwart einer Base mit einer Verbindung der Formel (VIII)

in welcher der Ring A für einen oxo-substituierten Azaheterocyclus, wie oben definiert, steht,

zu der Verbindung der Formel (XII)

in welcher der Ring A, R ¹ , R ² , R ³ , L und T ² jeweils die oben angegebenen Bedeutungen haben,

umgesetzt und durch Abspaltung des Ester-Restes T ² in (XII) in die Carbonsäure der Formel (I) überführt wird.

Eine Trennung der erfindungsgemäßen Verbindungen in die entsprechenden Enantiomere und/ oder Diastereomere kann gegebenenfalls, je nach Zweckmäßigkeit, auch bereits auf der Stufe der Verbindungen (IX), (X) oder (XII) erfolgen, welche dann in separierter Form entsprechend den zuvor beschriebenen Verfahrenssequenzen weiter umgesetzt werden. Eine solche Auftrennung der Stereoisomeren läßt sich nach üblichen, dem Fachmann bekannten Methoden durchführen; vorzugsweise werden chromatographische Verfahren oder eine Trennung über diastereomere Salze verwendet.

Inerte Lösungsmittel für den Verfahrensschritt (II) + (III) → (TV) sind beispielsweise Ether wie Diethylether, Methyl-tert.-butylether, Dioxan, Tetrahydrofuran, Glykoldimethylether oder Di- ethylenglykoldimethylether, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Xylol, Hexan, Cyclohexan oder Erdölfraktionen, oder dipolar-aprotische Lösungsmittel wie Dimethylformamid (DMF), Dimethylsulfoxid (DMSO), NN'-Dimethylpropylenharnstoff (DMPU) oder N-Methylpyrrolidinon (NMP). Ebenso ist es möglich, Gemische der genannten Lösungsmittel einzusetzen. Bevorzugt werden Tetrahydrofuran, Dimethylformamid oder Gemische hiervon verwendet.

Als Basen für den Verfahrensschritt (II) + (III) — » (FV) eignen sich übliche starke anorganische oder organische Basen. Hierzu gehören insbesondere Alkalialkoholate wie Natrium- oder Kalium- methanolat, Natrium- oder Kaliumethanolat oder Natrium- oder Kalium-/er/.-butylat, Alkalihydride wie Natrium- oder Kaliumhydrid, oder Amide wie Lithium-, Natrium- oder Kalium-bis- (trimethylsilyl)amid oder Lithiumdiisopropylamid. Bevorzugt wird Kalium-ter/.-butylat, Natriumhydrid oder Lithiumdiisopropylamid verwendet.

Die Umsetzung (II) + (III) → (IV) erfolgt im Allgemeinen in einem Temperaturbereich von -100 ⁰ C bis +30 ⁰ C, bevorzugt bei -78°C bis 0 ⁰ C.

Die Ester-Arylierung im Verfahrensschritt (V) + (VI) → (TV) wird vorzugsweise in Toluol oder Toluol/Tetrahydrofuran-Gemischen in einem Temperaturbereich von +20 ⁰ C bis +100 ⁰ C durchgeführt. Als Base zur Deprotonierung eignet sich für diese Reaktion insbesondere Lithium-bis(tri- methylsilyl)amid. Geeignete Palladium-Katalysatoren sind beispielsweise Palladium(II)acetat oder Tris-(dibenzylidenaceton)-dipalladium in Kombination mit elektronenreichen, sterisch anspruchsvollen Phosphin-Liganden wie 2-Dicyclohexylphosphino-2'-(N,N-dimethylamino)biphenyl oder 2- Di-terf.-butylphosphino-2'-(NN-dimethylamino)biphenyl [vgl. z.B. W.A. Moradi, S.L. Buchwald, J. Am. Chem. Soc. 123, 7996-8002 (2001)].

Die Bromierung im Verfahrensschritt (FV) — > (VII) wird vorzugsweise in einem Halogenkohlen- Wasserstoff als Lösungsmittel, insbesondere in Dichlormethan oder Tetrachlormethan, in einem Temperaturbereich von +40 ⁰ C bis +100 ⁰ C durchgeführt. Als Bromierungsmittel eignen sich elementares Brom in Gegenwart von Licht sowie insbesondere N-Bromsuccinimid (ΝBS) unter Zusatz von α,α'-Azobis(isobutyronitril) (AIBΝ) oder Dibenzoylperoxid als Initiator [vgl. z.B. R.R. Kurtz, DJ. Houser, J. Org. Chem. 46, 202 (1981); Z.-J. Yao et al., Tetrahedron 55, 2865 (1999)].

Inerte Lösungsmittel für die Verfahrensschritte (VII) + (VIII) → (IX) und (XIV) + (Vffl) → QW) sind beispielsweise Ether wie Diethylether, Methyl-ter/.-butylether, Dioxan, Tetrahydrofuran, Glykoldimethylether oder Diethylenglykoldimethylether, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Xylol, Hexan, Cyclohexan oder Erdölfraktionen, Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan, Trichlormethan, Chlorbenzol oder Chlortoluol, oder andere Lösungsmittel wie Dimethylformamid (DMF), Dimethylsulfoxid (DMSO), NN'-Dimethylpropylenharnstoff (DMPU), N-Methylpyrroli- dinon (ΝMP), Acetonitril oder Pyridin. Ebenso ist es möglich, Gemische der genannten Lösungsmittel einzusetzen. Bevorzugt werden Tetrahydrofuran, Dimethylformamid oder Gemische hiervon verwendet. Als Basen für diese Umsetzungen eignen sich die üblichen anorganischen oder organischen Basen. Hierzu gehören insbesondere Alkalihydroxide wie beispielsweise Lithium-, Natrium- oder Kaliumhydroxid, Alkalicarbonate wie Lithium-, Natrium-, Kalium- oder Cäsiumcarbonat, Alkali- alkoholate wie Natrium- oder Kaliummethanolat, Natrium- oder Kaliumethanolat oder Natrium- oder Kalium-ter/.-butylat, Alkalihydride wie Natrium- oder Kaliumhydrid, oder Amide wie Lithium-, Natrium- oder Kalium-bis-(trimethylsilyl)amid oder Lithiumdiisopropylamid. Bevorzugt wird Cäsiumcarbonat oder Natriumhydrid eingesetzt.

Die Reaktionen (VII) + (VIII) → (IX) und (XIV) + (VIII) → (XII) erfolgen im Allgemeinen in einem Temperaturbereich von -2O ⁰ C bis +120 ⁰ C, bevorzugt im Bereich von O ⁰ C bis +80 ⁰ C.

Die Abspaltung der Ester-Gruppen T ¹ bzw. T ² in den Verfahrensschritten (DC) → (X), (XII) → (I) und (VII-A) -» (XHT) wird nach üblichen Methoden durchgeführt, indem man die Ester in inerten Lösungsmitteln mit Säuren oder Basen behandelt, wobei bei letzterem die zunächst entstehenden Salze durch Behandeln mit Säure in die freien Carbonsäuren überführt werden. Im Falle der tert.- Butylester erfolgt die Esterspaltung bevorzugt mit Säuren.

Als inerte Lösungsmittel eignen sich für diese Reaktionen Wasser oder die für eine Esterspaltung üblichen organischen Lösungsmittel. Hierzu gehören bevorzugt Alkohole wie Methanol, Ethanol, n-Propanol, Isopropanol, n-Butanol oder ter/.-Butanol, oder Ether wie Diethylether, Tetrahydro- furan, Dioxan oder Glykoldimethylether, oder andere Lösungsmittel wie Aceton, Dichlormethan, Dimethylformamid oder Dimethylsulfoxid. Ebenso ist es möglich, Gemische der genannten Lösungsmittel einzusetzen. Im Falle einer basischen Ester-Hydrolyse werden bevorzugt Gemische von Wasser mit Dioxan, Tetrahydrofuran, Methanol und/oder Ethanol eingesetzt. Im Falle der Umsetzung mit Trifluoressigsäure wird bevorzugt Dichlormethan und im Falle der Umsetzung mit Chlorwasserstoff bevorzugt Tetrahydrofuran, Diethylether, Dioxan oder Wasser verwendet.

Als Basen sind die üblichen anorganischen Basen geeignet. Hierzu gehören insbesondere Alkali- oder Erdalkalihydroxide wie beispielsweise Lithium-, Natrium-, Kalium- oder Bariumhydroxid, oder Alkali- oder Erdalkalicarbonate wie Natrium-, Kalium- oder Calciumcarbonat. Bevorzugt sind Lithium-, Natrium- oder Kaliumhydroxid.

Als Säuren eignen sich für die Esterspaltung im Allgemeinen Schwefelsäure, Chlorwasserstoff/ Salzsäure, Bromwasserstoff/Bromwasserstoffsäure, Phosphorsäure, Essigsäure, Trifluoressigsäure, Toluolsulfonsäure, Methansulfonsäure oder Trifluormethansulfonsäure oder deren Gemische gegebenenfalls unter Zusatz von Wasser. Bevorzugt sind Chlorwasserstoff oder Trifluoressigsäure im Falle der /er/.-Butylester und Salzsäure im Falle der Methylester. Die Esterspaltung erfolgt im Allgemeinen in einem Temperaturbereich von -20 ⁰ C bis +100 ⁰ C, bevorzugt bei 0 ⁰ C bis +60 ⁰ C.

Inerte Lösungsmittel für die Verfahrensschritte (X) + (XI) → (XH) und (XIII) + (XI) → (XIV) [Amid-Kupplung] sind beispielsweise Ether wie Diethylether, tert.-Butyl-methylether, Dioxan, Tetrahydrofuran, Glykoldimethylether oder Diethylenglykoldimethylether, Kohlenwasserstoffe wie Benzol, Toluol, Xylol, Hexan, Cyclohexan oder Erdölfraktionen, Halogenkohlenwasserstoffe wie Dichlormethan, Trichlormethan, Tetrachlormethan, 1 ,2-Dichlorethan, Trichlorethylen oder Chlorbenzol, oder andere Lösungsmittel wie Aceton, Acetonitril, Ethylacetat, Pyridin, Dimethyl- sulfoxid (DMSO), Dimethylformamid (DMF), NN'-Dimethylpropylenharnstoff (DMPU) oder N- Methylpyrrolidinon (ΝMP). Ebenso ist es möglich, Gemische der genannten Lösungsmittel zu verwenden. Bevorzugt sind Dichlormethan, Tetrahydrofuran, Dimethylformamid oder Gemische dieser Lösungsmittel.

Als Kondensationsmittel bei diesen Kupplungsreaktionen eignen sich beispielsweise Carbodiimide wie NN'-Diethyl-, NN'-Dipropyl-, NN'-Diisopropyl-, NN'-Dicyclohexylcarbodiimid (DCC) oder N-(3-Dimethylaminoisopropyl)-N'-ethylcarbodiimid-Hydrochlori d (EDC), Phosgen-Derivate wie NN'-Carbonyldiimidazol (CDI), 1 ,2-Oxazoliumverbindungen wie 2-Ethyl-5-phenyl-l,2-oxazoli- um-3-sulfat oder 2-tert.-Butyl-5-methylisoxazolium-perchlorat, Acylaminoverbindungen wie 2- Ethoxy-l-ethoxycarbonyl-l,2-dihydrochinolin, oder Isobutylchlorformiat, Propanphosphonsäure- anhydrid, Cyanophosphonsäurediethylester, Bis-(2-oxo-3-oxazolidinyl)-phosphorylchlorid, Benzo- triazol- 1 -yloxy-tris(dimethylamino)phosphonium-hexafluorophosphat, Benzotriazol- 1 -yloxy-tris- (pyrrolidino)phosphonium-hexafluorophosphat (PyBOP), 0-(Benzotriazol-l-yl)-N,N,N',N'-tetra- methyluronium-tetrafluoroborat (TBTU), 0-(Benzotriazol-l -yl)-N,NN' N'-tetramethyluronium- hexafluorophosphat (HBTU), 2-(2-Oxo- 1 -(2H)-pyridyl)- 1 , 1 ,3 ,3-tetramethyluronium-tetrafluoro- borat (TPTU), O-(7-Azabenzotriazol- 1 -y\)-N,N,N',N -tetramethyluronium-hexafluorophosphat (ΗATU) oder O-(lH-6-Chlorbenzotriazol-l-yl)-l,l,3,3-tetramethyluronium-t etrafluoroborat (TCTU), gegebenenfalls in Kombination mit weiteren Ηilfsstoffen wie 1 -Ηydroxybenzotriazol (ΗOBt) oder N-Ηydroxysuccinimid (ΗOSu), sowie als Basen Alkalicarbonate, z.B. Natrium- oder Kaliumcarbonat, oder organische Basen wie Triethylamin, N-Methylmorpholin, N-Methylpiperi- din, N,N-Diisopropylethylamin, Pyridin oder 4-NN-Dimethylaminopyridin. Bevorzugt eingesetzt werden O-(7-Azabenzotriazol-l-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium-hexa fluorophosphat (ΗATU) oder 0-(Benzotriazol-l-yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium-tetrafluo roborat (TBTU), jeweils in Kombination mit Pyridin oder NN-Diisopropylethylamin, oder N-(3-Dimethylaminoisopropyl)-N- ethylcarbodümid-Ηydrochlorid (EDC) in Verbindung mit 1 -Ηydroxybenzotriazol (ΗOBt) und Triethylamin. Die Kupplungen (X) + (XI) → (XII) und (XIII) + (XI) → (XIV) werden in der Regel in einem Temperaturbereich von 0 ⁰ C bis +60 ⁰ C, bevorzugt bei +10 ⁰ C bis +40 ⁰ C durchgeführt.

Beim Einsatz eines der Verbindung (X) bzw. (XIII) entsprechenden Carbonsäurechlorids wird die Kupplung mit der Amin-Komponente (XI) in Gegenwart einer üblichen organischen Hilfsbase wie Triethylamin, N-Methylmorpholin, N-Methylpiperidin, N,N-Diisopropylethylamin, Pyridin, 4-NN- Dimethylaminopyridin, l,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-en (DBU) oder 1,5-Diazabicyclo[4.3.0]- non-5-en (DBΝ) durchgeführt. Bevorzugt wird Triethylamin oder NN-Diisopropylethylamin verwendet.

Die Reaktion des Amins (XI) mit dem Carbonsäurechlorid erfolgt im Allgemeinen in einem Tem- peraturbereich von -20 ⁰ C bis +60 ⁰ C, bevorzugt im Bereich von 0 ⁰ C bis +40 ⁰ C.

Die Herstellung der Carbonsäurechloride selbst erfolgt auf übliche Weise durch Behandlung der Carbonsäuren (X) bzw. (XIH) mit Thionylchlorid.

Die genannten Umsetzungen können bei normalem, bei erhöhtem oder bei erniedrigtem Druck durchgeführt werden (z.B. von 0.5 bis 5 bar). Im Allgemeinen arbeitet man jeweils bei Νormal- druck.

Die Verbindungen der Formeln (II), (III), (V), (VI), (VHI) und (XI) sind kommerziell erhältlich, als solche in der Literatur beschrieben oder können in Analogie zu üblichen, literaturbekannten Verfahren hergestellt werden [zu Verbindungen der Formel (XI) siehe auch nachfolgende Syntheseschemata 3-5].

Die Herstellung der erfmdungsgemäßen Verbindungen kann durch die folgenden Reaktionsschemata beispielhaft veranschaulicht werden:

Schema 1

Schema 2

LiHMDS / Pd(OAc) ₂ / B

Phosphin-Ligand

Schema 3

Schema 4

DIBAH Phthalimid

DCM/Hexan Ph ₃ P, DEΞAD THF/Toluol

Schema 5

THF/Et ₂ O

Die erfindungsgemäßen Verbindungen besitzen wertvolle pharmakologische Eigenschaften und können zur Vorbeugung und Behandlung von Erkrankungen bei Menschen und Tieren verwendet werden. Die erfindungsgemäßen Verbindungen stellen potente Aktivatoren der löslichen Guanylatcyclase dar. Sie fuhren zu einer Gefaßrelaxation, zu einer Thrombozytenaggregationshemmung und zu einer Blutdrucksenkung sowie zu einer Steigerung des koronaren Blutflusses. Diese Wirkungen sind über eine direkte, Häm-unabhängige Aktivierung der löslichen Guanylatcyclase und einen intrazellulären cGMP-Anstieg vermittelt.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können daher in Arzneimitteln zur Behandlung von kardiovaskulären Erkrankungen wie beispielsweise zur Behandlung des Bluthochdrucks und der Herzinsuffizienz, stabiler und instabiler Angina pectoris, pulmonaler Hypertonie, renaler Hypertonie, peripheren und kardialen Gefäßerkrankungen, Arrhythmien, zur Behandlung von thromboembo- lischen Erkrankungen und Ischämien wie Myokardinfarkt, Hirnschlag, transistorischen und ischämischen Attacken, peripheren Durchblutungsstörungen, zur Verhinderung von Restenosen wie nach Thrombolysetherapien, percutan-transluminalen Angioplastien (PTA), percutan-translumina- len Koronarangioplastien (PTCA) und Bypass sowie zur Behandlung von Arteriosklerose, asthmatischen Erkrankungen, Krankheiten des Urogenitalsystems wie beispielsweise Prostatahypertro- phie, erektile Dysfunktion, weibliche sexuelle Dysfunktion und Inkontinenz, von Osteoporose, Glaukom und Gastroparese eingesetzt werden.

Außerdem können die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung von primärem und sekundärem Raynaud-Phänomen, von Mikrozirkulationsstörungen, Claudicatio, peripheren und autonomen Neuropathien, diabetischen Mikroangiopathien, diabetischer Retinopathie, diabeti- sehen Geschwüren an den Extremitäten, CREST-Syndrom, Erythematose, Onychomykose sowie von rheumatischen Erkrankungen verwendet werden.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können darüber hinaus zur Verhinderung von ischämie- und/oder reperfusionsbedingten Schädigungen von Organen oder Geweben sowie als Zusatzstoffe für Perfusions- und Konservierungslösungen von Organen, Organteilen, Geweben oder Gewebe- teilen menschlichen oder tierischen Ursprungs insbesondere bei chirurgischen Eingriffen oder im Bereich der Transplantationsmedizin Verwendung finden.

Ferner eignen sich die erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung von Respiratory Distress-Syndromen und chronisch-obstruktiven Atemwegserkrankungen (COPD), von akuter und chronischer Niereninsuffizienz sowie zur Förderung der Wundheilung.

Die in der vorliegenden Erfindung beschriebenen Verbindungen stellen auch Wirkstoffe zur Bekämpfung von Krankheiten im Zentralnervensystem dar, die durch Störungen des NO/cGMP- Systems gekennzeichnet sind. Insbesondere sind sie geeignet zur Verbesserung der Wahrnehmung, Konzentrationsleistung, Lernleistung oder Gedächtnisleistung nach kognitiven Störungen, wie sie insbesondere bei Situationen/Krankheiten/Syndromen auftreten wie "Mild cognitive impairment", altersassoziierten Lern- und Gedächtnisstörungen, altersassoziierten Gedächtnisverlusten, vaskulärer Demenz, Schädel-Hirn-Trauma, Schlaganfall, Demenz, die nach Schlaganfällen auftritt ("post stroke dementia"), post-traumatischem Schädel-Hirn-Trauma, allgemeinen Konzentrations- Störungen, Konzentrationsstörungen bei Kindern mit Lern- und Gedächtnisproblemen, Alzhei- mer'scher Krankheit, Demenz mit Lewy-Körperchen, Demenz mit Degeneration der Frontallappen einschliesslich des Pick's-Syndroms, Parkinson'scher Krankheit, progressiver nuclear palsy, Demenz mit corticobasaler Degeneration, Amyolateralsklerose (ALS), Huntington'scher Krankheit, Multipler Sklerose, Thalamischer Degeneration, Creutzfeld-Jacob-Demenz, HIV-Demenz, Schizophrenie mit Demenz oder Korsakoff-Psychose. Sie eignen sich auch zur Behandlung von Erkrankungen des Zentralnervensystems wie Angst-, Spannungs- und Depressionszuständen, zentral-nervös bedingten Sexualdysfunktionen und Schlafstörungen sowie zur Regulierung krankhafter Störungen der Nahrungs-, Genuss- und Suchtmittelaufnahme.

Weiterhin eignen sich die erfindungsgemäßen Verbindungen auch zur Regulation der cerebralen Durchblutung und stellen wirkungsvolle Mittel zur Bekämpfung von Migräne dar. Auch eignen sie sich zur Prophylaxe und Bekämpfung der Folgen cerebraler Infarktgeschehen (Apoplexia cerebri) wie Schlaganfall, cerebraler Ischämien und des Schädel-Hirn-Traumas. Ebenso können die erfin- dungsgemäßen Verbindungen zur Bekämpfung von Schmerzzuständen eingesetzt werden.

Zudem besitzen die erfindungsgemäßen Verbindungen anti-inflammatorische Wirkung und können daher als entzündungshemmende Mittel eingesetzt werden.

Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen zur Behandlung und/oder Prävention von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen.

Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Ver- bindungen zur Herstellung eines Arzneimittels zur Behandlung und/oder Prävention von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen.

Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung der erfindungsgemäßen Verbindungen in einem Verfahren zur Behandlung und/oder Prävention von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen.

Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung ist ein Verfahren zur Behandlung und/oder Prävention von Erkrankungen, insbesondere der zuvor genannten Erkrankungen, unter Verwendung einer wirksamen Menge von mindestens einer der erfindungsgemäßen Verbindungen. Die erfindungsgemäßen Verbindungen können allein oder bei Bedarf in Kombination mit anderen Wirkstoffen eingesetzt werden. Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Arzneimittel, enthaltend mindestens eine der erfindungsgemäßen Verbindungen und einen oder mehrere weitere Wirkstoffe, insbesondere zur Behandlung und/oder Prävention der zuvor genannten Er- krankungen. Als geeignete Kombinationswirkstoffe seien beispielhaft und vorzugsweise genannt:

• organische Nitrate und NO-Donatoren, wie beispielsweise Natriumnitroprussid, Nitroglycerin, Isosorbidmononitrat, Isosorbiddinitrat, Molsidomin oder SEN-I, sowie inhalatives NO;

• Verbindungen, die den Abbau von cyclischem Guanosinmonophosphat (cGMP) inhibieren, wie beispielsweise Inhibitoren der Phosphodiesterasen (PDE) 1, 2 und/oder 5, insbesondere

PDE 5-Inhibitoren wie Sildenafil, Vardenafil und Tadalafil;

• NO-unabhängige, jedoch Häm-abhängige Stimulatoren der Guanylatcyclase, wie insbesondere die in WO 00/06568, WO 00/06569, WO 02/42301 und WO 03/095451 beschriebenen Verbindungen;

• antithrombotisch wirkende Mittel, beispielhaft und vorzugsweise aus der Gruppe der Thrombozytenaggregationshemmer, der Antikoagulantien oder der profϊbrinolytischen Substanzen;

• den Blutdruck senkende Wirkstoffe, beispielhaft und vorzugsweise aus der Gruppe der Calcium-Antagonisten, Angiotensin Aü-Antagonisten, ACE-Hemmer, Endothelin-Antagonisten, Renin-Inhibitoren, alpha-Rezeptoren-Blocker, beta-Rezeptoren-B locker, Mineralo- corticoid-Rezeptor-Antagonisten sowie der Diuretika; und/oder

• den Fettstoffwechsel verändernde Wirkstoffe, beispielhaft und vorzugsweise aus der Gruppe der Thyroidrezeptor-Agonisten, Cholesterinsynthese-Lnhibitoren wie beispielhaft und vorzugsweise HMG-CoA-Reduktase- oder Squalensynthese-Inhibitoren, der ACAT-Inhibitoren, CETP-Inhibitoren, MTP-Inhibitoren, PPAR-alpha-, PPAR-gamma- und/oder PPAR-delta- Agonisten, Cholesterin-Absorptionshemmer, Lipase-Inhibitoren, polymeren Gallensäure- adsorber, Gallensäure-Reabsorptionshemmer und Lipoprotein(a)-Antagonisten.

Unter antithrombotisch wirkenden Mittel werden vorzugsweise Verbindungen aus der Gruppe der Thrombozytenaggregationshemmer, der Antikoagulantien oder der profibrinolytischen Substanzen verstanden. Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Thrombozytenaggregationshemmer, wie beispielhaft und vorzugsweise Aspirin, Clopidogrel, Ticlopidin oder Dipyridamol, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem Thrombin-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Ximela- gatran, Melagatran, Bivalirudin oder Clexane, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem GPIIb/IIIa-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Tiroflban oder Abciximab, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Faktor Xa-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Riva- roxaban, Apixaban, Fidexaban, Razaxaban, Fondaparinux, Idraparinux, DU-176b, PMD-3112, YM-150, KFA-1982, EMD-503982, MCM-17, MLN-1021, DX 9065a, DPC 906, JTV 803, SSR- 126512 oder SSR-128428, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit Heparin oder einem low molecular weight (LMW)-Heparin-Derivat verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Vitamin K-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Coumarin, verabreicht.

Unter den Blutdruck senkenden Mitteln werden vorzugsweise Verbindungen aus der Gruppe der Calcium-Antagonisten, Angiotensin AU-Antagonisten, ACE-Hemmer, Endothelin-Antagonisten, Renin-Inhibitoren, alpha-Rezeptoren-B locker, beta-Rezeptoren-B locker, Mineralocorticoid-Rezep- tor-Antagonisten sowie der Diuretika verstanden.

Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Calcium-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Nifedipin, Amlodipin, Verapamil oder Diltiazem, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem alpha- 1 -Rezeptoren-Blocker, wie beispielhaft und vorzugsweise Prazosin, verabreicht. Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem beta-Rezeptoren-B locker, wie beispielhaft und vorzugsweise Propranolol, Atenolol, Timolol, Pindolol, Alprenolol, Oxprenolol, Penbutolol, Bupranolol, Meti- pranolol, Nadolol, Mepindolol, Carazalol, Sotalol, Metoprolol, Betaxolol, Celiprolol, Bisoprolol, Carteolol, Esmolol, Labetalol, Carvedilol, Adaprolol, Landiolol, Nebivolol, Epanolol oder Bucin- dolol, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Angiotensin AII-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Losartan, Candesartan, Valsartan, Telmisartan oder Embursatan, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem ACE-Hemmer, wie beispielhaft und vorzugsweise Enalapril, Captopril, Lisinopril, Ramipril, Delapril, Fosinopril, Quinopril, Perindopril oder Trandopril, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem Endothelin-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Bosentan, Darusentan, Ambrisentan oder Sitaxsentan, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Renin-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Aliskiren, SPP-600 oder SPP-800, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Mineralocorticoid-Rezeptor-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Spironolacton oder Eplerenon, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Diuretikum, wie beispielhaft und vorzugsweise Furosemid, ver- abreicht.

Unter den Fettstoffwechsel verändernden Mitteln werden vorzugsweise Verbindungen aus der Gruppe der CETP-Inhibitoren, Thyroidrezeptor-Agonisten, Cholesterinsynthese-Inhibitoren wie HMG-CoA-Reduktase- oder Squalensynthese-Inhibitoren, der ACAT-Inhibitoren, MTP-Inhibi- toren, PPAR-alpha-, PPAR-gamma- und/oder PPAR-delta-Agonisten, Cholesterin-Absorptions- hemmer, polymeren Gallensäureadsorber, Gallensäure-Reabsorptionshemmer, Lipase-Inhibitoren sowie der Lipoprotein(a)-Antagonisten verstanden. Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem CETP-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Torcetrapib (CP-529414), JJT-705 oder CETP-vaccine (Avant), verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem Thyroidrezeptor-Agonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise D-Thyroxin, 3,5,3'-Triiodothyronin (T3), CGS 23425 oder Axitirome (CGS 26214), verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem HMG-CoA-Reduktase-Inhibitor aus der Klasse der Statine, wie beispielhaft und vorzugsweise Lovastatin, Simvastatin, Pravastatin, Fluvastatin, Atorvastatin, Rosuvastatin oder Pitavastatin, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Squalensynthese-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise BMS-188494 oder TAK-475, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem ACAT-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Avasimibe, Melinamide, Pactimibe, Eflucimibe oder SMP-797, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem MTP-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Implitapide, BMS-201038, R-103757 oder JTT-130, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem PPAR-gamma-Agonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise Pioglitazone oder Rosiglitazone, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem PPAR-delta-Agonisten, wie beispielhaft und vorzugsweise GW 501516 oder BAY 68-5042, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Cholesterin-Absorptionshemmer, wie beispielhaft und vorzugsweise Ezetimibe, Tiqueside oder Pamaqueside, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem Lipase-Inhibitor, wie beispielhaft und vorzugsweise Orlistat, verabreicht. Bei einer bevorzugten Ausfuhrungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem polymeren Gallensäureadsorber, wie beispielhaft und vorzugsweise Cholestyramin, Colestipol, Colesolvam, CholestaGel oder Colestimid, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbin- düngen in Kombination mit einem Gallensäure-Reabsorptionshemmer, wie beispielhaft und vorzugsweise ASBT (= IBAT)-Inhibitoren wie z.B. AZD-7806, S-8921, AK-105, BARI-1741, SC-435 oder SC-635, verabreicht.

Bei einer bevorzugten Ausführungsform der Erfindung werden die erfindungsgemäßen Verbindungen in Kombination mit einem Lipoprotein(a)-Antagonisten, wie beispielhaft und vorzugs- weise Gemcabene calcium (CI- 1027) oder Nicotinsäure, verabreicht.

Weiterer Gegenstand der vorliegenden Erfindung sind Arzneimittel, die mindestens eine erfindungsgemäße Verbindung, üblicherweise zusammen mit einem oder mehreren inerten, nichttoxischen, pharmazeutisch geeigneten Hilfsstoffen enthalten, sowie deren Verwendung zu den zuvor genannten Zwecken.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können systemisch und/oder lokal wirken. Zu diesem Zweck können sie auf geeignete Weise appliziert werden, wie z.B. oral, parenteral, pulmonal, nasal, sublingual, lingual, buccal, rectal, dermal, transdermal, conjunctival, otisch oder als Implantat bzw. Stent.

Für diese Applikationswege können die erfindungsgemäßen Verbindungen in geeigneten Appli- kationsformen verabreicht werden.

Für die orale Applikation eignen sich nach dem Stand der Technik funktionierende, die erfindungsgemäßen Verbindungen schnell und/oder modifiziert abgebende Applikationsformen, die die erfindungsgemäßen Verbindungen in kristalliner und/oder amorphisierter und/oder gelöster Form enthalten, wie z.B. Tabletten (nicht-überzogene oder überzogene Tabletten, beispielsweise mit magensaftresistenten oder sich verzögert auflösenden oder unlöslichen Überzügen, die die Freisetzung der erfindungsgemäßen Verbindung kontrollieren), in der Mundhöhle schnell zerfallende Tabletten oder Filme/Oblaten, Filme/Lyophylisate, Kapseln (beispielsweise Hart- oder Weichgelatinekapseln), Dragees, Granulate, Pellets, Pulver, Emulsionen, Suspensionen, Aerosole oder Lösungen.

Die parenterale Applikation kann unter Umgehung eines Resorptionsschrittes geschehen (z.B. intravenös, intraarteriell, intrakardial, intraspinal oder intralumbal) oder unter Einschaltung einer Resorption (z.B. intramuskulär, subcutan, intracutan, percutan oder intraperitoneal). Für die par- enterale Applikation eignen sich als Applikationsformen u.a. Injektions- und Infusionszubereitungen in Form von Lösungen, Suspensionen, Emulsionen, Lyophilisaten oder sterilen Pulvern.

Für die sonstigen Applikationswege eignen sich z.B. Inhalationsarzneiformen (u.a. Pulverinhalatoren, Nebulizer), Nasentropfen, -lösungen oder -sprays, lingual, sublingual oder buccal zu appli- zierende Tabletten, Filme/Oblaten oder Kapseln, Suppositorien, Ohren- oder Augenpräparationen, Vaginalkapseln, wäßrige Suspensionen (Lotionen, Schüttelmixturen), lipophile Suspensionen, Salben, Cremes, transdermale therapeutische Systeme (z.B. Pflaster), Milch, Pasten, Schäume, Streupuder, Implantate oder Stents.

Bevorzugt sind die orale oder parenterale Applikation, insbesondere die orale und die intravenöse Applikation.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können in die angeführten Applikationsformen überführt werden. Dies kann in an sich bekannter Weise durch Mischen mit inerten, nichttoxischen, pharmazeutisch geeigneten Hilfsstoffen geschehen. Zu diesen Hilfsstoffen zählen u.a. Trägerstoffe (beispielsweise mikrokristalline Cellulose, Lactose, Mannitol), Lösungsmittel (z.B. flüssige PoIy- ethylenglycole), Emulgatoren und Dispergier- oder Netzmittel (beispielsweise Natriumdodecyl- sulfat, Polyoxysorbitanoleat), Bindemittel (beispielsweise Polyvinylpyrrolidon), synthetische und natürliche Polymere (beispielsweise Albumin), Stabilisatoren (z.B. Antioxidantien wie beispielsweise Ascorbinsäure), Farbstoffe (z.B. anorganische Pigmente wie beispielsweise Eisenoxide) und Geschmacks- und/oder Geruchskorrigentien.

Im Allgemeinen hat es sich als vorteilhaft erwiesen, bei parenteraler Applikation Mengen von etwa 0.001 bis 1 mg/kg, vorzugsweise etwa 0.01 bis 0.5 mg/kg Körpergewicht zur Erzielung wirksamer Ergebnisse zu verabreichen. Bei oraler Applikation beträgt die Dosierung etwa 0.01 bis 100 mg/kg, vorzugsweise etwa 0.01 bis 20 mg/kg und ganz besonders bevorzugt 0.1 bis 10 mg/kg Körpergewicht.

Trotzdem kann es gegebenenfalls erforderlich sein, von den genannten Mengen abzuweichen, und zwar in Abhängigkeit von Körpergewicht, Applikationsweg, individuellem Verhalten gegenüber dem Wirkstoff, Art der Zubereitung und Zeitpunkt bzw. Intervall, zu welchem die Applikation erfolgt. So kann es in einigen Fällen ausreichend sein, mit weniger als der vorgenannten Mindestmenge auszukommen, während in anderen Fällen die genannte obere Grenze überschritten werden muss. Im Falle der Applikation größerer Mengen kann es empfehlenswert sein, diese in mehreren Einzelgaben über den Tag zu verteilen.

Die nachfolgenden Ausführungsbeispiele erläutern die Erfindung. Die Erfindung ist nicht auf die Beispiele beschränkt. Die Prozentangaben in den folgenden Tests und Beispielen sind, sofern nicht anders angegeben, Gewichtsprozente; Teile sind Gewichtsteile. Lösungsmittelverhältnisse, Verdünnungsverhältnisse und Konzentrationsangaben von flüssig/flüssig-Lösungen beziehen sich jeweils auf das Volumen.

A. Beispiele

Abkürzungen und Akronyme:

abs. absolut

Ac Acetyl

AIBN 2,2'-Azobis-(2-methylpropionitril) aq. wässrig, wässrige Lösung

ATP Adenosin-5'-triphosphat

Brij ^® Polyethylenglycol-dodecylether

BSA bovines Serumalbumin

Bsp. Beispiel

Bu Butyl c Konzentration

CI chemische Ionisation (bei MS) d Tag(e)

DBU l,8-Diazabicyclo[5.4.0]undec-7-en

DC Dünnschichtchromatographie

DCI direkte chemische Ionisation (bei MS)

DCM Dichlormethan de Diastereomerenüberschuss

DEAD Diethylazodicarboxylat

DIBAH Diisobutylaluminiumhydrid

DIEA Diisopropylethylamin

DMF Dimethylformamid

DMSO Dimethylsulfoxid d. Th. der Theorie (bei Ausbeute)

DTT Dithiothreitol

EDC N'-(3-Dimethylaminopropyl)-N-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid ee Enantiomerenüberschuss

EI Elektronenstoß-Ionisation (bei MS) ent enantiomerenrein, Enantiomer eq. Äquivalent(e)

ESI Elektrospray-Ionisation (bei MS)

Et Ethyl

GC Gaschromatographie

GTP Guanosin-5'-triphosphat h Stunde(n)

HATU 0-(7-Azabenzotriazol- 1 -yl)-N,N,N',N'-tetramethyluronium-

Hexafluorophosphat

HOBt 1 -Hydroxy-7H-benzotriazol-Hydrat

HPLC Hochdruck-, Hochleistungsflüssigchromatographie

¹ Pr Isopropyl

KO ¹ Bu Kalium-tert.-butylat

LC-MS Flüssigchromatographie-gekoppelte Massenspektroskopie

LDA Lithiumdiisopropylamid

LiHDMS Lithiumhexamethyldisilazid [Lithium-bis(trimethylsilyl)amid]

Me Methyl min Minute(n)

MS Massenspektroskopie

NBS N-Bromsuccinimid

NMR Kernresonanzspektroskopie

Pd/C Palladium auf Aktivkohle

PDC Pyridiniumdichromat

Ph Phenyl

Pr Propyl rac racemisch, Racemat

Rf Retentionsindex (bei DC)

RP reverse phase (Umkehrphase, bei HPLC)

RT Raumtemperatur

R. Retentionszeit (bei HPLC) s.o. siehe oben

¹ Bu tert.-Butyl

TBTU 0-(Benzotriazol-l-yl)-NN,N',N'-tetramethyluronium-

Tetrafluoroborat

TCTU O-( lH-6-Chlorbenzotriazol- 1 -y I)- 1 , 1 ,3,3-tetramethyluronium-

Tetrafluoroborat

TEA Triethanolamin

TFA Trifluoressigsäure

THF Tetrahydrofuran

UV Ultraviolett-Spektroskopie v/v Volumen zu Volumen-Verhältnis (einer Lösung) zus. zusammen GC-MS- und LC-MS-Methoden:

Methode 1 (GC-MS)

Instrument: Micromass GCT, GC 6890; Säule: Restek RTX-35, 15 m x 200 μm x 0.33 μm; konstanter Fluss mit Helium: 0.88 ml/min; Ofen: 70 ⁰ C; Inlet: 250 ⁰ C; Gradient: 70 ⁰ C, 30°C/min → 310 ⁰ C (3 min halten).

Methode 2 (LC-MS)

Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: Waters Alliance 2795; Säule: Phenomenex Syn- ergi 2.5 μ MAX-RP 100A Mercury 20 mm x 4 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90% A -> 0.1 min 90% A → 3.0 min 5% A → 4.0 min 5% A → 4.01 min 90% A; Fluss: 2 ml/min; Ofen: 50 ⁰ C; UV-Detektion: 210 nm.

Methode 3 (LC-MS)

Instrument: Micromass Quattro Premier mit Waters UPLC Acquity; Säule: Thermo Hypersil GOLD 1.9 μ 50 mm x 1 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90% A → 0.1 min 90% A → 1.5 min 10% A → 2.2 min 10% A; Fluss: 0.33 ml/min; Ofen:50°C; UV-Detektion: 210 nm.

Methode 4 (LC-MS)

Gerätetyp MS: Micromass ZQ; Gerätetyp HPLC: HP 1100 Series; UV DAD; Säule: Phenomenex Gemini 3 μ 30 mm x 3.00 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90% A → 2.5 min 30% A → 3.0 min 5% A -» 4.5 min 5% A; Fluss: 0.0 min 1 ml/min -> 2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 ml/min; Ofen: 50 ⁰ C; UV-Detektion: 210 nm.

Methode 5 (LC-MS)

Instrument: Waters Acquity SQD UPLC System; Säule: Waters Acquity UPLC HSS T3 1.8 μ, 50 mm x 1 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.25 ml 99%-ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 0.25 ml 99%-ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 90% A → 1.2 min 5% A → 2.0 min 5% A; Fluss: 0.40 ml/min; Ofen: 50 ⁰ C; UV-Detektion: 210-400 nm. Methode 6 CLC-MS)

Gerätetyp MS: Waters Micromass Quattro Micro; Gerätetyp HPLC: Agilent 1 100 Serie; Säule: Thermo Hypersil GOLD 3 μ 20 mm x 4 mm; Eluent A: 1 1 Wasser + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure, Eluent B: 1 1 Acetonitril + 0.5 ml 50%-ige Ameisensäure; Gradient: 0.0 min 100% A → 3.0 min 10% A → 4.0 min 10% A → 4.01 min 100% A (Fluss 2.5 ml/min) → 5.00 min 100% A; Ofen: 50 ⁰ C; Fluss: 2 ml/min; UV-Detektion: 210 nm.

Ausgangsverbindungen und Intermediate:

Beispiel IA

Cyclopropancarbonsäure-te/Y.-butylester

50.99 g (454.4 mmol) Kalium-tert.-butylat wurden in 454 ml abs. THF gelöst und auf 0 ⁰ C gekühlt. Die kräftig gerührte Lösung wurde tropfenweise mit 50 g (478.3 mmol) Cyclopropancarbonsäure- chlorid versetzt, so dass die Reaktionstemperatur nicht über 50 ⁰ C stieg (Kühlung erforderlich). Nach Ende der Zugabe wurde die entstandene Suspension noch 30 min gerührt. Nach Abkühlen wurde die Reaktionsmischung im Vakuum auf ca. ein Drittel des Ausgangsvolumens eingeengt und dann auf 2 Liter gesättigte wässrige Ammoniumchlorid-Lösung gegeben. Nach Einstellen des pH- Wertes auf 8 durch Zugabe von gesättigter Natriumhydrogencarbonat-Lösung wird dreimal mit Diethylether extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum ohne Erhitzen eingeengt (kaltes Wasserbad). Der Rückstand wurde bei ca. 85°C Badtemperatur und 42 mbar destilliert. Es wurden 43.1 g (63.2% d. Th.) der Zielverbin- düng als klare Flüssigkeit erhalten.

GC-MS (Methode 1): R, = 1.8 min.

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 1.52-1.48 (m, IH), 1.41 (s, 9H), 0.82-0.72 (m, 4H).

Beispiel 2A

l-(4-Brombutyl)cyclopropancarbonsäure-?er/.-butylester

Zu einer auf -78°C gekühlten Lösung von 7.4 ml (52.7 mmol) Diisopropylamin in 20 ml abs. THF wurden 21.2 ml (52.7 mmol) einer 2.5 M Lösung von «-Butyllithium in «-Hexan getropft, wobei die Reaktionstemperatur unter -60 ⁰ C gehalten wurde. Nach 30 min Rühren bei -60 ⁰ C bis -70 ⁰ C wurde diese Lösung zu einer auf -78°C gekühlten Lösung von 5.0 g (35.2 mmol) Cyclopropan- carbonsäure-tert.-butylester und 15.2 g (70.3 mmol) 1 ,4-Dibrombutan in 20 ml abs. THF getropft. Nach Ende der Zugabe wurde die Kühlung entfernt und die Mischung unter Rühren langsam auf RT erwärmt. Nach weiteren 5 h Rühren bei RT wurde das Reaktionsgemisch auf gesättigte wäss- rige Ammoniumchlorid-Lösung gegeben. Es wurde dreimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Das Produkt wurde durch Chromatographie an Silicagel gereinigt (Laufmittel Cyclohexan/Dichlor- methan 50: 1). Es wurden 4.62 g (44.6% d. Th.) der Zielverbindung erhalten.

MS (DCI): m/z = 294/296 (M+NH,) ⁺ .

GC-MS (Methode 1): R, = 4.70 min; m/z = 220 (M-C ₄ Hg) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 3.54 (t, 2H), 1.72-1.65 (m, 2H), 1.57-1.42 (m, 4H), 1.39 (s, 9H), 0.98 (m, 2H), 0.66 (m, 2H).

Beispiel 3A

6-Brom-2,2-dimethylhexansäure-tert.-butylester

Die Titelverbindung wurde auf zu Beispiel 2A analoge Weise ausgehend von 2-Methylpropan- säure-te/-/.-butylester und 1 ,4-Dibrombutan erhalten.

GC-MS (Methode 1): R, = 4.25 min; m/z = 205 (M-75) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 3.54 (t, 2H), 1.81-1.72 (m, 2H), 1.49-1.39 (m, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.35-1.28 (m, 2H), 1.08 (s, 6H).

Beispiel 4A

(+/-)- 1 -(4-Brompentyl)cyclopropancarbonsäure-/er/.-butylester

Zu einer auf -78°C gekühlten Lösung von 7.4 ml (52.7 mmol) Diisopropylamin in 20 ml abs. THF wurden 21.2 ml (52.7 mmol) einer 2.5 M Lösung von w-Butyllithium in n-Hexan getropft, wobei die Reaktionstemperatur unter -60 ⁰ C gehalten wurde. Nach 30 min Rühren bei -60 ⁰ C bis -70 ⁰ C wurde diese Lösung zu einer auf -78°C gekühlten Lösung von 5.0 g (35.2 mmol) Cyclopropan- carbonsäure-tert.-butylester und 16.2 g (70.3 mmol) 1 ,4-Dibrompentan in 20 ml abs. THF getropft. Nach Ende der Zugabe wurde die Kühlung entfernt und die Mischung unter Rühren langsam auf RT erwärmt. Nach weiteren 4 h Rühren bei RT wurde das Reaktionsgemisch auf gesättigte wäss- rige Ammoniumchlorid-Lösung gegeben. Es wurde dreimal mit Dichormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Das Produkt wurde durch Chromatographie an Silicagel gereinigt (Laufmittel-Gradient Cyclo- hexan/Dichlormethan 50:1 bis 5:1). Es wurden in zwei Chargen zusammen 5.73 g (53.6% d. Th.) der Zielverbindung erhalten.

MS (DCI): m/z = 308/310 (M+NH,) ⁺ .

GC-MS (Methode 1): R, = 4.82 min; m/z = 234 (M-C ₄ Hg) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 4.29 (q, IH), 1.78-1.71 (m, 2H), 1.67 (d, 3H), 1.65-1.43 (m, 4H), 1.39 (s, 9H), 0.98 (m, 2H), 0.67 (m, 2H).

Allgemeine Vorschrift 1 : Darstellung von Aziden ausgehend von aliphatischen Bromiden

Zu einer Lösung des entsprechenden Bromids in DMF (ca. 0.2 bis 1 mol/1) wird bei RT ein Über- schuss an Natriumazid (ca. 4-6 eq.) gegeben. Die Suspension wird bei 50-80 ⁰ C für 2-18 h kräftig gerührt. Nach Abkühlen auf RT wird die Reaktionsmischung verdünnt (z.B. mit Ethylacetat oder Dichlormethan) und nacheinander mit gesättigter Natriumhydrogencarbonat-Lösung und gesättig- ter Natriumchlorid-Lösung gewaschen. Nach vorsichtigem Einengen im Vakuum kann das Rohprodukt, falls erforderlich, durch Chromatographie an Silicagel gereinigt werden (typisches Laufmittelgemisch z.B. Cyclohexan/Ethylacetat 100:1 bis 10: 1).

Die folgenden Beispiele wurden gemäß der Allgemeinen Vorschrift 1 hergestellt:

(t,

3.31

3.54

Beispiel 9A

(+/-)-6-Azido-2-methylhexansäureethylester

Zu einer auf -78°C gekühlten Lösung von 0.32 ml (2.28 mmol) Diisopropylamin in 2 ml abs. THF wurden 0.91 ml (2.28 mmol) einer 2.5 M Lösung von w-Butyllithium in «-Hexan getropft, wobei die Reaktionstemperatur unter -60 ⁰ C gehalten wurde. Nach 30 min Rühren bei -60 ⁰ C bis -70 ⁰ C wurde diese Lösung zu einer auf -78°C gekühlten Lösung von 352 mg (1.9 mmol) 6-Azidohexan- säureethylester in 2 ml abs. THF getropft. Nach Ende der Zugabe wurde die Mischung auf -20 ⁰ C erwärmt und 20 min nachgerührt, bevor 0.18 ml (2.85 mmol) Methyliodid zugetropft wurden. Nach Ende der Zugabe wurde die Mischung langsam auf RT erwärmt und weitere 2 h gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde dann auf gesättigte wässrige Ammoniumchlorid-Lösung gegeben. Man extrahierte dreimal mit Dichlormethan, trocknete die vereinigten organischen Phasen über Magnesiumsulfat und konzentrierte im Vakuum. Das Produkt wurde durch Chromatographie an Silicagel gereinigt (Laufmittel Cyclohexan/Dichlormethan 60:1). Es wurden 96.4 mg (25.5% d. Th.) der Zielverbindung erhalten.

MS (DCI): m/z = 200 (M+H) ⁺ .

GC-MS (Methode 1): R, = 4.05 min.

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 4.05 (q, 2H), 3.31 (t, 2H), 2.45-2.39 (m, IH), 1.58-1.49 (m, 4H), 1.34-1.28 (m, 2H), 1.19 (t, 3H), 1.07 (d, 3H).

Beispiel IQA

1 -[4-(1 ,3-Dioxo-l ,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)butyl]cyclopropancarbonsäure-/e ^.-butylester

4.2 g (15.15 mmol) l-(4-Brombutyl)cyclopropancarbonsäure-/er/.-butylester wurden unter Argon in 50 ml DMF vorgelegt, mit 3.34 g (22.72 mmol) Phthalimid sowie 4.19 g (30.3 mmol) Kalium- carbonat versetzt und 2 h bei 90 ⁰ C gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde danach filtriert, das FiI- trat mit Wasser verdünnt und dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum konzentriert. Das Produkt wurde durch Chromatographie an Silicagel gereinigt (Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 10:1). Es wurden 4.23 g (81.3% d. Th.) der Zielverbindung erhalten.

LC-MS (Methode 2): R ₄ = 2.46 min; m/z = 342 (M-H) ^" .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 7.86 (m, 4H), 3.57 (t, 2H), 1.56 (m, 2H), 1.40 (m, 4H), 1.27 (s, 9H), 0.94 (q, 2H), 0.64 (q, 2H).

Beispiel IIA

6-Oxoheptansäure-terf.-butylester

10.0 g (ca. 90%-ig, 62.4 mmol) 6-Oxoheptansäure wurden in 71.8 ml Cyclohexan vorgelegt und mit 20.46 g (93.6 mmol) tert.-Butyl-2,2,2-trichloracetimidat und 15 ml Dichlormethan versetzt. Zu der Lösung wurden bei -10 ⁰ C langsam 0.55 ml (6.24 mmol) Trifluormethansulfonsäure getropft. Die resultierende Suspension wurde über Nacht unter Erwärmung auf RT gerührt. Der unlösliche Niederschlag wurde dann durch Filtration entfernt. Das Filtrat wurde zweimal mit Natriumhydro- gencarbonat-Lösung und mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde durch Chromatographie an Silicagel gereinigt (Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 5:1). Aus dem so erhaltenen Produkt fiel beim Stehen über Nacht ein Feststoff aus, der durch Absaugen entfernt und verworfen wurde. Das Ziel- produkt in Form des Filtrats wurde nicht weiter aufgereinigt. Es wurden 4.51 g (36.1% d. Th.) der Titelverbindung erhalten.

GC-MS (Methode 1): R, = 4.1 min; m/z = 144 (M-C ₄ Hg) ⁺ .

MS (DCI): m/z = 218 (M+NR,) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 2.46-2.42 (m, 2H), 2.20-2.15 (m, 2H), 2.08 (s, 3H), 1.47-1.40 (m, 4H), 1.41 (s, 9H).

Beispiel 12A

(+/-)-6-Aminoheptansäure-te>7.-butylester

Zu einer Lösung von 2.0 g (9.99 mmol) 6-Oxoheptansäure-/e/"Λ-butylester in 10 ml Methanol wurden bei RT 7.70 g (99.86 mmol) Ammoniumacetat und 941 mg (14.98 mmol) Natriumcyanobor- hydrid gegeben. Die Mischung wurde über Nacht bei RT gerührt und dann auf Wasser gegeben. Mithilfe von 10%-iger Natronlauge wurde der pH auf ca. 10 eingestellt und die Mischung dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Man vereinigte die organischen Phasen, trocknete über Magnesiumsulfat und engte im Vakuum ein. Nach Trocknen im Hochvakuum wurden 1.95 g (ca. 80% Reinheit, ca.78% d. Th.) der Zielverbindung erhalten.

MS (DCI): m/z = 202 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (500 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 2.95-2.89 (m, IH), 2.19 (t, 2H), 1.52-1.43 (m, 2H), 1.41 (s, 9H), 1.35-1.25 (m, 4H), 1.04 (d, 3H).

Allgemeine Vorschrift 2: Reduktion von Aziden zu primären Aminen

Zu einer Lösung des entsprechenden Azids in Ethanol oder Methanol (gegebenenfalls unter Zusatz von Wasser) wird Hydrier-Katalysator (z.B. 5% oder 10% Palladium auf Kohle) gegeben. Die Reaktionsmischung wird kräftig bis zum vollständigen Umsatz unter einer Wasserstoffatmosphäre bei Normaldruck gerührt und dann über Kieselgur abfiltriert. Der Filter-Rückstand wird mit Ethanol oder Methanol gewaschen, die erhaltenen Filtrate vereinigt, vorsichtig im Vakuum eingeengt und der Rückstand kurz im Hochvakuum getrocknet. Das so erhaltene Amin kann ohne weitere Reinigung in den Folgereaktionen eingesetzt werden.

Die folgenden Beispiele wurden gemäß der Allgemeinen Vorschrift 2 hergestellt:

Beispiel 16A

l-(4-Aminobutyl)cyclopropancarbonsäure-/er/.-butylester

Die Titelverbindung konnte alternativ zum obigen Verfahren auch ausgehend von l-[4-(l,3-Dioxo- 1 ,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)butyl]cyclopropancarbonsäure-/e r/.-butylester hergestellt werden:

Zu einer Lösung von 1.0 g (2.91 mmol) l-[4-(l,3-Dioxo-l,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)butyl]cyclo- propancarbonsäure-ter/.-butylester in 20 ml Ethanol wurden bei RT 0.29 g (5.8 mmol) Ηydrazin- hydrat gegeben. Die Mischung wurde 45 min unter Rückfluss gerührt. Das Reaktionsgemisch wur- de danach filtriert und das Filtrat bei 20 ⁰ C am Rotationsverdampfer eingeengt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan aufgenommen und zweimal mit gesättigter wässriger Natriumhydrogen- carbonat-Lösung gewaschen. Man trocknete die organische Phase über Magnesiumsulfat und engte bei 20 ⁰ C im Vakuum ein. Es wurden 0.6 g (97.2% d. Th.) der Zielverbindung erhalten. Die Substanz wurde bei -20 ⁰ C gelagert oder direkt weiter umgesetzt.

GC-MS (Methode 1): R, = 4.2 min; m/z = 138. MS (DCI): m/z = 214 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ = 2.69 (t, 2H), 1.44 (m, 15H), 1.25 (s, 2H), 1.1 (q, 2H), 0.6 (q, 2H).

Beispiel 17A

[3 -( 1 ,3-Dioxo- 1 ,3 -dihydro-2H-isoindol-2-yl)propyl](triphenyl)phosphoniumbromi d

2.50 g (9.33 mmol) 2-(3-Brompropyl)-lH-isoindol-l,3(2H)-dion in 25 ml Xylol wurden mit Argon entgast und mit 2.45 g (9.33 mmol) Triphenylphosphin versetzt. Es wurde 24 h unter Rückfluss gerührt und die Mischung anschließend bei 70 ⁰ C filtriert. Der Filterkuchen wurde mit etwas Di- ethylether nachgewaschen und im Hochvakuum getrocknet. Es wurden 3.50 g (70.8% d. Th.) der Titelverbindung erhalten.

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 7.86 (m, 7H), 7.76 (m, 12H), 3.76 (t, 2H), 3.7 (m, 2H), 1.94 (m, 2H).

Beispiel 18A

l-Formylcyclopropancarbonsäureethylester

Eine Lösung von 1.225 g (8.5 mmol) 1-Hydroxymethyl-cyclopropancarbonsäueethylester [Herstellung siehe z.B. T.A. Ayers, Tetrahedron Lett. 40 (30), 5467-5470 (1999)] in 43 ml Dichlormethan wurde bei O ⁰ C mit 5.05 g (11.9 mmol) Dess-Martin-Periodan-Reagens versetzt und anschließend 6 h bei RT gerührt. Zu dem Reaktionsgemisch wurde dann eine Lösung von 6.7 g (42.5 mmol) Natriumthiosulfat in 60 ml gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gegeben. Es wurde 20 min bei RT gerührt und dann die Phasen getrennt. Die organische Phase wurde zweimal mit Wasser gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und bei 20 ⁰ C im Vakuum eingeengt. Es wurden 1.139 g (80.0% d. Th.) der Zielverbindung erhalten.

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 10.17 (s, IH), 4.20 (q, 2H), 1.58 (q, 2H), 1.47 (q, 2H), 1.24 (t, 3H).

Beispiel 19A

1 -[( 1 £yZ)-4-( 1 ,3-Dioxo- 1 ,3 -dihydro-2H-isoindol-2-yl)but- 1 -en- 1 -y ljcyclopropancarbonsäure- ethylester

Unter Argon wurden 600 mg (3.377 mmol) l-Formylcyclopropancarbonsäureethylester und 1.79 g (3.377 mmol) [3-(l,3-Dioxo-l,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)propyl](triphenyl )phosphoniumbromid in 12 ml trockenem DMSO vorgelegt und bei 6°C mit einer Lösung von 379 mg (3.377 mmol) Kalium-tert.-butylat in 3 ml DMSO versetzt. Es wurde 25 min bei 6°C gerührt, dann auf RT erwärmt und weitere 4 h nachgerührt. Das Reaktionsgemisch wurde danach mit 25 ml Wasser und 35 ml Essigsäureethylester versetzt und extrahiert. Die organische Phase wurde je zweimal mit Wasser und gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen. Es wurde über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Das Produkt wurde durch Chromatographie an Silicagel gereinigt (Laufmittel Cyclohexan/Ethylacetat 5:1). Es wurden 504 mg (47.6% d. Th.) der Titelverbindung als ü/Z-Isomerengemisch (ca. 1 :2.5) erhalten.

LC-MS (Methode 3): R, = 1.24 min; m/z = 314 (M+Η) ⁺ .

Beispiel 2OA

l-fOii/Z^-Aminobut-l-en-l-ylJcyclopropancarbonsäureethyl ester

Zu einer Lösung von 255 mg (0.18 mmol) l-[(l£/Z)-4-(l,3-Dioxo-l,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)- but-l-en-l-yljcyclopropancarbonsäureethylester in 5.1 ml Ethanol wurden 48 μl (0.99 mmol) Hydrazinhydrat gegeben und die Mischung für 1 h unter Rückfluss gerührt. Der resultierende Niederschlag wurde abgesaugt, mit Ethanol nachgewaschen und das Filtrat bei 20 ⁰ C im Vakuum eingeengt. Man erhielt 220 mg der rohen Titelverbindung (£/Z-Isomerengemisch), welche ohne weitere Aufreinigung in Folgereaktionen eingesetzt wurde.

MS (DCI): m/z = 184 (M+H) ⁺ .

Beispiel 21A

Methyl-[ 1 -(prop-2-en- 1 -yl)cyclopropyl]acetat

45.69 g (222.2 mmol) Kupfer(I)bromid-Dimethylsulfid-Komplex und 9.42 g (222.2 mmol) wasser- freies Lithiumchlorid wurden in 300 ml THF gelöst, auf -78°C gekühlt und langsam mit 100 ml (200 mmol) einer 2 M Lösung von Allylmagnesiumbromid in Diethylether versetzt. Anschließend wurden zu der Reaktionslösung nacheinander 28.2 ml (222.2 mmol) Chlortrimethylsilan und 11.21 g (100 mmol) Methylcyclopropylidenacetat [CAS Registry-Nr. 110793-87-8] getropft und die Mischung für ca. 5 min nachgerührt (DC-Kontrolle, Laufmittel Cyclohexan/Essigsäureethyl- ester 20:1). Die Reaktionslösung wurde dann mit 50 ml einer wässrigen Lösung von Ammoniak/Ammoniumchlorid (1 :9) versetzt und über Kieselgur filtriert. Die organische Phase wurde abgetrennt und die wässrige Phase noch zweimal mit Diethylether extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden anschließend mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde in 100 ml THF gelöst und mit 222 ml (222 mmol) einer 1 M Lösung von Tetrabutylammoniumfluorid in THF versetzt. Die Reaktionslösung wurde noch 10 min nachgerührt und dann bis zur Trockene eingeengt. Das erhaltene Rohprodukt wurde über Kieselgel chromatographisch gereinigt (Laufmittel Cyclo- hexan/Essigsäureethylester 20:1). Es wurden 6.92 g (45 mmol, 45% d. Th.) der Titelverbindung erhalten.

GC-MS (Methode 1): R, = 2.48 min; m/z = 155 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ , δ/ppm): 5.84-5.69 (IH, m), 5.02 (2H, d), 3.58 (3H, s), 2.24 (2H, s), 2.05 (2H, d), 0.45-0.35 (4H, m).

Beispiel 22A

Methyl-[l-(3-brompropyl)cyclopropyl]acetat

Unter Argon wurden 1542 mg (10 mmol) Methyl-[l-(prop-2-en-l-yl)cyclopropyl]acetat in 10 ml wasserfreiem THF bei 0 ⁰ C tropfenweise mit 3.4 ml (3.4 mmol) Boran-THF-Komplex-Lösung (I M in THF) versetzt. Nach 30 min bei 0 ⁰ C wurde der Ansatz für weitere 30 min bei RT gerührt und dann mit 22 μl (0.54 mmol) Methanol versetzt. Bei -5°C wurden anschließend sukzessive 0.62 ml (12 mmol) Brom sowie 2971 mg (16.5 mmol) Natriummethylat-Lösung (30% in Methanol) zur Reaktionsmischung getropft. Nachdem der Ansatz Raumtemperatur erreicht hatte, wurden 10 ml gesättigte Natriumhydrogencarbonat-Lösung hinzugefügt, die organische Phase abgetrennt und die wässrige Phase noch dreimal mit te/Ϋ.-Butylmethy lether extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Nach Entfernen des Lösungsmittels im Vakuum wurden 683 mg (2.9 mmol, 29% d. Th.) der Titelverbindung als gelbes Öl erhalten.

GC-MS (Methode 1): R, = 4.29 min; m/z = 205 (M-OCH ₃ +H) ⁺ , 155 (M-Br) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ , δ/ppm): 3.68 (3H, s), 3.41 (2H, t), 2.24 (2H, s), 2.01-1.91 (2H, m), 1.51-1.44 (2H, m), 0.50-0.38 (4H, m).

Beispiel 23A

Methyl- [ 1 -(3 -azidopropy l)cyclopropy 1] acetat

680 mg (2.89 mmol) Methyl-[l-(3-brompropyl)cyclopropyl]acetat und 1128 mg (17.35 mmol) Natriumazid in 5 ml DMF wurden 2 h bei 60 ⁰ C gerührt. Die Reaktionsmischung wurde dann im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde in Essigsäureethylester aufgenommen und die Lösung mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen und über wasserfreiem Magnesiumsulfat getrocknet. Nach Entfernen des Lösungsmittels im Vakuum wurden 389 mg (1.97 mmol, 68% d. Th.) der Titelverbindung als gelbes Öl erhalten.

MS (DCI): m/z = 198 (M+H) ⁺ , 215 (M+NH,) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ , δ/ppm): 3.59 (3H, s), 3.30 (2H, t), 2.26 (2H, s), 1.64-1.53 (2H, m), 1.36-1.29 (2H, m), 0.43-0.30 (4H, m). Beispiel 24A

Methyl-[ 1 -(3-aminopropyl)cyclopropyl]acetat-Hydrochlorid

Eine Mischung aus 389 mg (1.97 mmol) Methyl-[l-(3-azidopropyl)cyclopropyl]acetat, 40 mg 10% Palladium auf Kohle und 1.97 ml (1.97 mmol) 1 M Salzsäure in 10 ml Ethanol wurde über Nacht bei Raumtemperatur unter Normaldruck hydriert. Nach Beendigung der Umsetzung wurde der Ansatz filtriert und das Filtrat bis zur Trockene eingeengt. Es wurden 313 mg (1.51 mmol, 76% d. Th.) der Titelverbindung als farbloses Öl erhalten.

MS (DCI): m/z = 172 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ , δ/ppm): 3.60 (3H, s), 2.79-2.66 (2H, m), 2.26 (2H, s), 1.68-1.55 (2H, m), 1.39-1.27 (2H, m), 0.45-0.28 (4H, m).

Beispiel 25A

1 -(Prop-2-en- 1 -yOcyclopropancarbonsäure-tert.-butylester

In 35 ml THF wurden 9.9 ml (70.32 mmol) Diisopropylamin vorgelegt, bei -40 ⁰ C mit 28.1 ml (70.32 mmol) einer 2.5 M Lösung von «-Butyllithium in «-Hexan versetzt und 30 min gerührt. Man kühlte die Reaktionsmischung dann auf -78°C herunter und tropfte eine Lösung von 10 g (70.32 mmol) Cyclopropancarbonsäure-tert.-butylester in 5 ml THF hinzu. Es wurde 4 h bei -78°C gerührt und anschließend eine Lösung von 5.8 ml (66.81 mmol) Allylbromid in 5 ml THF zuge- tropft. Die Reaktionsmischung wurde über Nacht langsam auf RT erwärmt und dann vorsichtig mit wässriger Ammoniumchlorid-Lösung versetzt. Es wurde dreimal mit Methyl-tert.-Butylether extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Es wurden 10.7 g (83.5% d. Th.) der Zielverbindung erhalten.

GC-MS (Methode 1): R, = 2.5 min; m/z = 126 (M-C ₄ Hg) ⁺ . ¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 5.82 (m, IH), 4.98 (d, 2H), 2.21 (d, 2H), 1.37 (s, 9H), 0.99 (q, 2H), 0.69 (q, 2H).

Beispiel 26A

l-(2-Oxoethyl)cyclopropancarbonsäure-^/*/.-butylester

4.0 g (21.9 mmol) l-(Prop-2-en-l-yl)cyclopropancarbonsäure-/er/.-butylester wurden in 70 ml Methanol und 30 ml Dichlormethan gelöst. Bei -78°C wurde mit Hilfe eines Ozon-Generators für 45 min Ozon im O ₂ -Strom durch die Reaktionslösung geleitet. Nachdem die Lösung leicht blau geworden war, wurde reiner Sauerstoff zum Spülen durch die Reaktionslösung geleitet, bis die Lösung sich wieder entfärbt hatte. Die Reaktionslösung wurde dann mit 6.5 ml (88.9 mmol) Dimethylsulfid versetzt und langsam auf RT erwärmt. Es wurde am Rotationsverdampfer eingeengt, und der Rückstand wurde durch Chromatographie an Silicagel gereinigt (Laufmittel-Gradient Cyclohexan/Ethylacetat 50:1, 30:1, 20:1, 10: 1). Es wurden 1.87 g (44.1% d. Th.) der Zielverbindung erhalten.

GC-MS (Methode 1): R, = 3.3 min; m/z = 184 (M) ⁺ .

Beispiel 27A

c/V/raws-l-[4-Methoxy-4-oxobut-2-en-l-yl]cyclopropancarbo nsäure-tert.-butylester

0.425 g (10.63 mmol) Natriumhydrid wurden in 40 ml THF vorgelegt und bei O ⁰ C mit 1.6 ml (11.11 mmol) Phosphonoessigsäuretrimethylester versetzt. Es wurde 1 h bei 0 ⁰ C gerührt, dann mit 1.78 g (9.66 mmol) l-(2-Oxoethyl)cyclopropancarbonsäure-/e/*/.-butylester versetzt und die Reaktionsmischung langsam auf RT erwärmt. Es wurde 2 h bei RT nachgerührt und der Ansatz anschließend mit Wasser versetzt und dreimal mit Dichlormethan extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde durch Chromatographie an Silicagel gereinigt (Laufinittel-Gradient Dichlormethan/Ethylacetat 100:0 → 100:0.1). Es wurden 1.32 g (56.7% d. Th.) der Titelverbindung erhalten (trans-lsomer im deutlichen Überschuss).

GC-MS (Methode 1): R, = 4.57 min, m/z = 184 (M-C ₄ Hg) ⁺ c/s-Isomer; R, = 4.82 min, m/z = 184 (M-C ₄ Hg) ⁺ trans-lsomeτ.

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ = 6.91 (dt, IH), 6.88 (d, IH), 3.65 (s, 3H), 2.37 (d, 2H), 1.36 (s, 9H), 1.05 (q, 2H), 0.77 (q, 2H).

Beispiel 28A

cw/frα«5-l-[4-Hydroxybut-2-en-l-yl]cyclopropancarbonsä ure-/er?.-butylester

Zu einer Lösung von 1.185 g (4.93 mmol) c/s//ra«s-l-[4-Methoxy-4-oxobut-2-en-l-yl]cyclo- propancarbonsäure-ter/.-butylester in 15 ml Dichlormethan wurden bei -90 ⁰ C langsam 9.7 ml (9.86 mmol) Diisobutylaluminiumhydrid als 1 M Lösung in Hexan zugetropft. Es wurde 2 h bei -90 ⁰ C gerührt und dann in der Kälte ca. 10 ml 20%-ige wässrige Kaliumtartrat-Lösung zugetropft. Man verdünnte anschließend mit Wasser und Dichlormethan, extrahierte nach Phasentrennung die orga- nische Phase mehrmals mit Wasser und trocknete die organische Phase über Natriumsulfat. Es wurde im Vakuum eingeengt und der Rückstand durch Chromatographie an Silicagel gereinigt (Laufmittel-Gradient Cyclohexan/Ethylacetat 10:1, 8:1, 4:1, 2:1). Es wurden 0.279 g (26.7% d. Th.) der Zielverbindung erhalten (trans-lsomer im deutlichen Überschuss).

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 5.55 (m, 2H), 3.88 (t, 2H), 2.18 (d, 2H), 1.37 (s, 9H), 0.97 (q, 2H), 0.68 (q, 2H).

Beispiel 29A

cis/trans-l -[4-(l,3-Dioxo-l, 3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)but-2-en-l-yl]cyclopropancarbons� �ure- ter/.-butylester

302.6 mg (1.43 mmol) c/s/fr"αws-l-[4-Hydroxybut-2-en-l-yl]cyclopropancarbonsäur e-ter/.-butyl- ester wurden in 2 ml THF gelöst und mit 251.7 mg (1.71 mmol) Phthalimid sowie 41 1.3 mg (1.57 mmol) Triphenylphosphin versetzt. Die Reaktionsmischung wurde auf -10 ⁰ C abgekühlt, und lang- sam wurden 713.7 mg (1.639 mmol) einer 40%-igen Lösung von Diethylazodicarboxylat in Toluol zugetropft. Anschließend wurde auf RT erwärmt und 1.5 h nachgerührt. Das Reaktionsgemisch wurde dann auf Wasser gegeben und mit Dichlormethan extrahiert. Die organische Phase wurde über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde durch Chromatographie an Silicagel gereinigt (Laufmittel-Gradient Cyclohexan/Ethylacetat 6:1, 4:1, 2:1). Es wur- den 121 mg (24.8% d. Th.) der Zielverbindung erhalten (trans-lsomer im deutlichen Überschuss).

LC-MS (Methode 2): R, = 2.35 min; m/z = 364 (M+Na) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 7.89 (m, 4H), 5.61 (m, IH), 5.51 (m, IH), 4.14 (d, 2H), 2.14 (d, 2H), 1.24 (s, 9H), 0.94 (q, 2H), 0.66 (q, 2H).

Beispiel 3OA

cis/trans-l -[4-Aminobut-2-en-l -ylJcyclopropancarbonsäure-ter/.-butylester

Zu einer Lösung von 120 mg (0.351 mmol) c/s//ra«s-l-[4-(l,3-Dioxo-l,3-dihydro-2H-isoindol-2- yl)but-2-en-l-yl]cyclopropancarbonsäure-/er/.-butylester in 2.4 ml Ethanol wurden bei RT 34 μl (0.703 mmol) Ηydrazinhydrat gegeben. Die Mischung wurde 20 min unter Rückfluss gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde dann filtriert und das Filtrat bei 20°C am Rotationsverdampfer eingeengt. Der Rückstand wurde in Dichlormethan aufgenommen und zweimal mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen. Die organische Phase wurde über Magnesiumsulfat getrocknet und bei 20 ⁰ C im Vakuum eingeengt. Erhalten wurden 81.2 mg leicht verunreinigtes Rohprodukt (ca. 109% d. Th.; /nms-Isomer im deutlichen Überschuss). Die Substanz wurde bis zum Einsatz in Folgereaktionen im Tiefkühlschrank gelagert.

MS (DCI): m/z = 212 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, CDCl ₃ ): δ = 8.06 (q, IH), 7.82 (q, IH), 5.51 (m, 2H), 3.11 (d, 2H), 2.17 (m, 2H), 1.37 (s, 9H), 0.97 (q, 2H), 0.67 (q, 2H).

Beispiel 31A

tert. -Buty 1-5 , 5 ,5 -trifluor-2-(4-methylphenyl)pentanoat

Unter Sauerstoffausschluss wurden 0.88 ml (6.3 mmol) Diisopropylamin in 20 ml THF vorgelegt, auf -78°C abgekühlt und langsam mit 2.52 ml (6.3 mmol) einer 2.5 M Lösung von n-Butyllithium in Hexan versetzt. Anschließend wurde die Reaktionslösung auf -10 ⁰ C erwärmt und 10 min bei dieser Temperatur nachgerührt. Die Reaktionslösung wurde dann wieder auf -78°C abgekühlt und langsam mit 1 g (4.85 mmol) /ert.-Butyl-(4-methylphenyl)acetat, gelöst in 10 ml THF, versetzt. Die Reaktionslösung wurde anschließend langsam auf -30 ⁰ C erwärmt und danach erneut auf -78°C abgekühlt. Nach Erreichen dieser Temperatur wurden 0.62 ml (5.82 mmol) 3 -Brom- 1,1,1 -trifluor- propan langsam zugetropft. Nach beendeter Zugabe wurde die Lösung langsam auf Raumtemperatur erwärmt und über Nacht gerührt. Nach DC-Kontrolle (Laufmittel Cyclohexan/Essigsäureethyl- ester 10:1) wurde der Ansatz mit gesättigter Ammoniumchlorid-Lösung versetzt und in Essigsäure- ethylester aufgenommen. Die wässrige Phase wurde zweimal mit Essigsäureethylester extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet. Nach Filtration wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde über Kieselgel chromatographisch gereinigt (Laufmittel Cyclohexan/Essigsäureethylester 10: 1). Es wurden 542 mg (1.79 mmol, 37% d. Th.) eines gelblichen Öls isoliert.

GC-MS (Methode 1): R, = 4.41 min; m/z = 246 (M-C ₄ H ₉ +H) ⁺ . Beispiel 32A

ter/.-Butyl-3-methyl-2-(4-methylphenyl)pentanoat

Unter Argon wurden 19.58 g (174.5 mmol) Kalium-tert.-butylat in 200 ml DMF vorgelegt, auf 0 ⁰ C abgekühlt, langsam mit 30 g (145.4 mmol) terf.-Butyl-(4-methylphenyl)acetat, gelöst in 50 ml DMF, versetzt und anschließend 30 min bei O ⁰ C gerührt. Nachfolgend wurden 18.95 ml (174.5 mmol) 2-Brombutan langsam zugetropft und die Lösung 4 h bei 0 ⁰ C nachgerührt. Danach wurde die Reaktionslösung mit 200 ml Wasser und 200 ml Diethylether versetzt. Die wässrige Phase wurde zweimal mit Diethylether extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magne- siumsulfat getrocknet. Nach Filtration wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde über Kieselgel chromatographisch gereinigt (Laufmittel Cyclohexan/Essigsäureethyl- ester 20:1). Es wurden 15.5 g (59.1 mmol, 40.6% d. Th.) einer farblosen Flüssigkeit isoliert.

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ , δ/ppm): 7.17 (2H, d), 7.11 (2H, d), 3.11 (IH, d), 2.27 (3H, s), 2.04-1.90 (IH, m), 1.55-1.42 (IH, m), 1.35 (9H, s), 1.24-1.10 (IH, m), 0.99-0.86 (3H, m), 0.77- 0.51 (3 H, m).

GC-MS (Methode 1): R, = 5.04 min; m/z = 206 (M-C ₄ H ₉ +H) ⁺ .

Auf analoge Weise wurde die in der folgenden Tabelle aufgeführte Verbindung erhalten:

Beispiel 34A

Ethyl-4,4,4-trifluor-3-methyl-2-(4-methylphenyl)butanoat

Unter Argon wurden 196.9 mg (0.88 mmol) Palladium(II)acetat und 724.8 mg (1.84 mmol) 2-Di- cyclohexylphosphino-2'-(N,N-dimethylamino)biphenyl in 50 ml wasserfreiem Toluol vorgelegt. Die Reaktionslösung wurde anschließend langsam mit 43.8 ml (43.8 mmol) einer 1 M Lösung von Lithiumhexamethyldisilazid in THF versetzt und 10 min bei Raumtemperatur gerührt. Nachfolgend wurde die Reaktionslösung auf -10 ⁰ C abgekühlt, langsam mit 7 g (38.0 mmol) Ethyl-4,4,4- trifluor-3-methylbutanoat versetzt und 10 min bei -10 ⁰ C nachgerührt. Danach wurden 5 g (29.2 mmol) 4-Bromtoluol, gelöst in 50 ml Toluol, zugetropft und die Reaktionslösung erst auf Raumtemperatur und dann auf 80 ⁰ C erwärmt. Das Gemisch wurde 2 h bei dieser Temperatur gerührt, dann auf Raumtemperatur abgekühlt und über Nacht nachgerührt. Nach erfolgter Umsetzung (DC- Kontrolle, Laufmittel Cyclohexan/Dichlormethan 2:1) wurde die Reaktionsmischung über Kiesel- gur filtriert, der Rückstand mehrfach mit Essigsäureethylester und Dichlormethan gewaschen und die vereinigten Filtrate im Vakuum eingeengt. Das erhaltene Rohprodukt wurde über Kieselgel chromatographisch gereinigt (Laufmittel Petrolether/Dichlormethan 4: 1 → 3:1). Es wurden 3.91 g (14.3 mmol, 48.8% d. Th.) der Titelverbindung als farblose Flüssigkeit isoliert.

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ , δ/ppm): 7.26 (2H, d), 7.20-7.12 (2H, m), 4.17-3.95 (2H, m), 3.74 (0.25H, d), 3.66 (0.75H, d), 3.35-3.07 (IH, m), 2.29 (2.25H, s), 2.28 (0.75H, s), 1.17 (0.75H, d), 1.11 (3H, t), 0.76 (2.25H, d) (Diastereomerengemisch).

GC-MS (Methode 1): R, = 4.20 min, m/z = 275 (M+H) ⁺ (Diastereomer 1); R, = 4.23 min, m/z = 275 (M+H) ⁺ (Diastereomer 2).

Beispiel 35A

tert. -Butyl-2-[4-(brommethy l)pheny 1] -5,5,5 -trifiuorpentanoat

540 mg (1.79 mmol) ter/.-Butyl-5,5,5-trifluor-2-(4-methylphenyl)pentanoat, 333.8 mg (1.78 mmol) N-Bromsuccinimid und 14.7 mg (0.09 mmol) 2,2'-Azobis-2-methylpropannitril in 10 ml Tetrachlormethan wurden 2 h unter Rückfluss gerührt. Nach vollständiger Umsetzung wurde das Suc- cinimid abfiltriert und der Filterrückstand mit Dichlormethan nachgewaschen. Das Filtrat wurde im Vakuum eingeengt. Das Rohprodukt wurde über Kieselgel chromatographisch gereinigt (Laufmittel Cyclohexan/Essigsäureethylester 10: 1). Es wurden 659 mg (1.72 mmol, 97% d. Th.) eines gelblichen Öls isoliert.

GC-MS (Methode 1): R, = 5.91 min; m/z = 301 (M-Br) ⁺ .

Beispiel 36A

/er/.-Butyl-2-[4-(brommethyl)phenyl]-3-methylpentanoat

15 g (59.1 mmol) terΛ-Butyl-3-methyl-2-(4-methylphenyl)pentanoat, 11 g (62 mmol) N-Brom- succinimid und 97 mg (0.59 mmol) 2,2'-Azobis-2-methylpropannitril in 150 ml Dichlormethan wurden 2 h unter Rückfluss gerührt. Nach vollständiger Umsetzung wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Das Rohprodukt wurde über Kieselgel chromatographisch gereinigt (Laufmittel Cyclohexan/Essigsäureethylester 20:1). Es wurden 16.22 g (47.5 mmol, 80% d. Th.) eines farblosen Öls isoliert.

GC-MS (Methode 1): R, = 6.41 min; m/z = 261 (M-Br) ⁺ .

MS (DCI): m/z = 358/360 (M+NH,) ^* .

Auf analoge Weise wurde die in der folgenden Tabelle aufgeführte Verbindung erhalten:

Beispiel 38A

Ethyl-2-[4-(brommethyl)phenyl]-4,4,4-trifluor-3-methylbut anoat

2.25 g (8.2 mmol) Ethyl-4,4,4-trifluor-3-methyl-2-(4-methylphenyl)butanoat, 1.53 g (8.6 mmol) N- Bromsuccinimid und 67 mg (0.41 mmol) 2,2'-Azobis-(2-methylpropannitril) in 36 ml Trichlor- methan wurden über Nacht unter Rückfluss gerührt. Nach vollständiger Umsetzung wurde das Succinimid abfiltriert und der Filterrückstand mit Dichlormethan nachgewaschen. Das Filtrat wurde im Vakuum eingeengt. Das Rohprodukt wurde über Kieselgel chromatographisch gereinigt (Laufmittel Cyclohexan/Essigsäureethylester 40:1). Es wurden 2.667 g (7.5 mmol, 92% d. Th.) eines gelblichen Öls isoliert.

GC-MS (Methode 1): R, = 5.72 min, m/z = 373 (M-Br) ⁺ (Diastereomer 1); R, = 5.74 min, m/z = 373 (M-Br) ⁺ (Diastereomer 2).

Beispiel 39A

N'-(2-Chloracetyl)benzolcarbohydrazid

Eine Suspension von 500 g (3.67 mol) Benzolcarbohydrazid in 3.75 Liter THF wurde auf Rückfluss erhitzt, wobei sich das Benzolcarbohydrazid löste. Zu dieser Lösung wurden 497.7 g (4.41 mol) Chloracetylchlorid, gelöst in 125 ml THF, getropft und die Lösung 30 min unter Rückfluss nachgerührt. Nach vollständiger Umsetzung (DC-Kontrolle, Laufmittel Dichlormethan/Methanol 9:1) wurde der Ansatz mit 22.5 Liter Wasser und 10 Liter Essigsäureethylester versetzt und mit festem Natriumhydrogencarbonat auf pH 7 eingestellt. Die wässrige Phase wurde einmal mit 2.5 Liter Essigsäureethylester extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden getrocknet und die Lösung anschließend im Vakuum bis zur Trockene eingeengt. Der erhaltene weiße Feststoff wurde in einem l :l-Gemisch aus Dichlormethan und Methanol gelöst und auf 3 kg Kieselgel aufgezogen. An zwei Kieselgel-Portionen (jeweils 8 kg) wurde zunächst mit 50 Liter Dichlor- methan/Essigsäureethylester 7:3 und dann mit 125 Liter Dichlormethan/Essigsäureethylester 1 :1 als Laufmittel chromatographiert. Nach Einengen der Produktfraktionen wurden 424 g (1.99 mol, 54% d. Th.) der Titelverbindung als weißer Feststoff erhalten.

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ , δ/ppm): 10.56-10.32 (2H, breit), 7.88 (2H, d), 7.58 (IH, t), 7.50 (2H, t), 4.21 (2H, s).

MS (DCI): m/z = 213 (M+H) ⁺ , 230 (M+NH^.

Beispiel 4OA

2-Phenyl-4H- 1 ,3,4-oxadiazin-5(6H)-on

812 g (3.82 mol) N'-(2-Chloracetyl)benzolcarbohydrazid wurden in 13 Liter trockenem DMF ge- löst und mit 384.95 g (4.58 mol) Νatriumhydrogencarbonat versetzt. Anschließend wurde die Reaktionslösung auf 100 ⁰ C erhitzt und über Nacht bei dieser Temperatur gerührt. Nach vollständiger Umsetzung (DC-Kontrolle, Laufmittel Dichlormethan/Essigsäureethylester 9: 1) wurde die Reaktionslösung auf Raumtemperatur abgekühlt, auf 65 Liter Wasser gegossen und dreimal mit jeweils 17.5 Liter Essigsäureethylester extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit 13.8 Liter gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung gewaschen, getrocknet und im Vakuum bis zur Trockene eingeengt. Der erhaltene Feststoff wurde in einem 9:1 -Gemisch aus Dichlormethan und Methanol gelöst und auf 17 kg Kieselgel aufgezogen. An zwei Kieselgel- Portionen (jeweils 8 kg) wurde mit 260 Liter Dichlormethan/Essigsäureethylester 9:1 als Laufmittel chromatographiert. Die vereinigten Produktfraktionen wurden eingeengt, und der erhaltene Feststoff wurde mit 3 Liter Diethylether ausgerührt. Nach Filtration wurden 247 g (1.40 mol, 35% d. Th.) der Titelverbindung als weißer Feststoff erhalten.

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ , δ/ppm): 11.04 (IH, s), 7.78 (2H, d), 7.53-7.41 (3H, m), 4.79 (2H, s).

MS (DCI): m/z = 177 (M+H) ⁺ .

Beispiel 41A

6-Pheny lpyridazin-3 (2H)-on

19.6 g (162.95 mmol) 1 -Phenylethanon und 5 g (54.32 mmol) Oxoessigsäure-Monohydrat wurden

2 Stunden bei 100 ⁰ C gerührt. Die Reaktionslösung wurde anschließend auf 4O ⁰ C abgekühlt und mit 20 ml Wasser und 4 ml Ammoniak versetzt. Nachfolgend wurde das Gemisch zweimal mit 50 ml Dichlormethan extrahiert. Die erhaltene wässrige Phase wurde dann mit 2.64 ml (53.32 mmol) Hydrazin-Monohydrat versetzt und 2 Stunden bei 100 ⁰ C gerührt. Nach Umsetzung wurde die Reaktionslösung auf Raumtemperatur abgekühlt. Die ausgefallenen Kristalle wurden abgesaugt, mit Wasser gewaschen und über Nacht im Vakuumtrockenschrank bei 50 ⁰ C getrocknet. Es wurden 4.3 g (24.97 mmol, 15% d. Th.) der Titelverbindung als farblose Kristalle erhalten.

LC-MS (Methode 4): R. = 1.39 min; m/z = 173 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ , δ/ppm): 13.2 (s, 1 H), 8.04 (d, 1 H), 7.86 (d, 2 H), 7.53-7.41 (m,

3 H), 7.00 (d, 1 H).

Beispiel 42A

/er?.-Butyl-cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H -l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}- acetat

Darstellungsmethode 1:

9.9 g (28.0 mmol) ter/.-Butyl-[4-(brommethyl)phenyl](cyclopentyl)acetat, 5.92 g (33.6 mmol) 2-Phenyl-4H-l,3,4-oxadiazin-5(6H)-on und 13.70 g (42.03 mmol) Cäsiumcarbonat wurden in 100 ml DMF 12 h lang bei 60 ⁰ C gerührt. Nach dem Abkühlen wurde der Ansatz auf Eiswasser ge- geben und mit Diethylether extrahiert. Die organische Phase wurde über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum bis zur Trockene eingeengt. Das Rohprodukt wurde über Kieselgel chromatographisch gereinigt (Laufmittel Cyclohexan/Essigsäureethylester 20:1). Es wurden 6.6 g (14.7 mmol, 52% d. Th.) der Titelverbindung erhalten.

Darstellungsmethode 2:

8.16 g (23.1 mmol) /er/.-Butyl-[4-(brommethyl)phenyl](cyclopentyl)acetat, 3.7 g (21 mmol) 2- Phenyl-4H-l,3,4-oxadiazin-5(6H)-on und 7.53 g (23.1 mmol) Cäsiumcarbonat wurden in 147 ml DMF 12 h lang bei Raumtemperatur gerührt. Anschließend wurde die Reaktionslösung mit gesättigter wässriger Natriumhydrogencarbonat-Lösung verrührt und zweimal mit Essigsäureethylester extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum bis zur Trockene eingeengt. Das erhaltene Rohprodukt wurde über Kieselgel chromatographisch gereinigt (Laufmittel Cyclohexan/Essigsäureethylester 5:1). Es wurden 6.51 g (14.5 mmol, 69% d. Th.) der Titelverbindung erhalten.

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ , δ/ppm): 7.76 (2H, d), 7.55-7.42 (3H, m), 7.31 (4H, s), 4.94 (2H, s), 4.87 (2H, s), 3.19 (IH, d), 2.45-2.31 (IH, m), 1.88-1.74 (IH, m), 1.69-1.46 (3H, m), 1.45-1.15 (3H, m), 1.34 (9H, s), 1.03-0.89 (IH, m).

LC-MS (Methode 4): R, = 3.27 min; m/z = 449 (M+H) ⁺ .

Auf analoge Weise wurden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Verbindungen erhalten:

Beispiel Name / Struktur Analytische Daten

43A ter/.-Butyl-5,5,5-trifluor-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6- LC-MS (Methode 2): dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methy ljphenyl } - R, = 2.69 min; m/z = 477 pentanoat (M+Η) ⁺ .

44A tert.-Butyl-3-methyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6- LC-MS (Methode 4): dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl } - R, = 3.24 min; m/z = 437 pentanoat (M+Η) ⁺ .

Beispiel 47A und Beispiel 48A

/er/.-Butyl-cyclopentyl{4-[(6-oxo-3-phenylpyridazin-l(6H) -yl)methyl]phenyl}acetat (Enantiomer I und2)

7.42 g (16.69 mmol) des racemischen ter/.-Butyl-cyclopentyl{4-[(6-oxo-3-phenylpyridazin-l(6H)- yl)methyl]phenyl}acetats (Beispiel 45A) wurden mittels präparativer ΗPLC an chiraler Phase in die Enantiomere aufgetrennt [Säule: Daicel Chiralpak AS-Η, 5 μm, 250 mm x 20 mm; Elutions- mittel: Isohexan/Isopropanol 75:25 (v/v); Fluss: 15 ml/min; UV-Detektion: 220 nm; Temperatur: 3O ⁰ C]:

Beispiel 47A (Enantiomer 1):

Ausbeute: 4.1 g

R, 5.28 min; Reinheit >99%; >99% ee [Säule: Daicel Chiralpak AS-Η, 5 μm, 250 mm x 4.6 mm; Elutionsmittel: Isohexan/Isopropanol 75:25 (v/v); Fluss: 1 ml/min; UV-Detektion: 220 nm; Temperatur: 40 ⁰ C].

Beispiel 48A (Enantiomer 2):

Ausbeute: 2.8 g

R, 5.84 min; Reinheit >98%; >96% ee [Säule: Daicel Chiralpak AS-Η, 5 μm, 250 mm x 4.6 mm; Elutionsmittel: Isohexan/Isopropanol 75:25 (v/v); Fluss: 1 ml/min; UV-Detektion: 220 nm; Temperatur: 40 ⁰ C].

Beispiel 49A

rac-Cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H-l,3,4-o xadiazin-4-yl)methyl]phenyl}- essigsäure

Eine Lösung von 6.6 g (14.7 mmol) /er?.-Butyl-cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H- l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}acetat in 90 ml Dichlormethan wurde bei Raumtemperatur langsam mit 22.67 ml (294.3 mmol) Trifluoressigsäure versetzt und die Mischung über Nacht ge- rührt. Danach wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt, der Rückstand in 100 ml Essigsäure- ethylester aufgenommen und mit 50 ml Wasser ausgeschüttelt. Die organische Phase wurde über Magnesiumsulfat getrocknet. Nach Filtration wurde das Lösungsmittel im Vakuum entfernt. Es wurden 4.8 g (12.23 mmol, 83% d. Th.) eines farblosen Feststoffs erhalten.

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ , δ/ppm): 12.35-12.15 (IH, br. s), 7.78 (2H, d), 7.54-7.40 (3H, m), 7.29 (4H, s), 4.91 (2H, s), 4.83 (2H, s), 3.22 (IH, d), 2.48-2.35 (IH, m), 1.89-1.76 (IH, m), 1.68- 1.46 (3H, m), 1.45-1.32 (IH, m), 1.32-1.14 (2H, m), 1.01-0.89 (IH, m).

LC-MS (Methode 4): R, = 2.75 min; m/z = 393 (M+H) ⁺ .

Auf analoge Weise wurden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Verbindungen erhalten:

(IH, br.

Beispiel 54A und Beispiel 55A

e«/-Cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H-l,3,4- oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}essig- säure {Enantiomer 1 und 2)

75 g (191.1 mmol) racemische Cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H-l,3,4-oxadiazi n- 4-yl)methyl]phenyl} essigsaure (Beispiel 49A) wurden mittels präparativer ΗPLC an chiraler Phase in die Enantiomere aufgetrennt [Säule: chirale Kieselgel-Phase basierend auf dem Selektor PoIy- (N-methacryloyl-L-isoleucin-3-pentylamid), 430 mm x 40 mm; Elutionsmittel: Isohexan/ Ethylacetat 1 :1 (v/v); Fluss: 50 ml/min; Temperatur: 24°C; UV-Detektion: 270 nm]:

Beispiel 54A (Enantiomer J):

Ausbeute: 35 g

LC-MS (Methode 4): R ₄ = 2.75 min; m/z = 393 (M+Η) ⁺

R ₄ 5.73 min; Reinheit >99%; >99% ee

[Säule: chirale Kieselgel-Phase basierend auf dem Selektor Poly(N-methacryloyl-L-isoleucin-3- pentylamid), 250 mm x 4.6 mm; Elutionsmittel: Isohexan/Ethylacetat 1 : 1 (v/v); Fluss: 2 ml/min; Temperatur: 24°C; UV-Detektion: 270 nm].

Beispiel 55A (Enantiomer 2):

Ausbeute: 32 g

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ , δ/ppm): 12.35-12.15 (IH, breites s), 7.78 (2H, d), 7.54-7.40 (3H, m), 7.29 (4H, s), 4.91 (2H, s), 4.83 (2H, s), 3.22 (IH, d), 2.48-2.35 (IH, m), 1.89-1.76 (IH, m), 1.68-1.46 (3H, m), 1.45-1.32 (IH, m), 1.32-1.14 (2H, m), 1.01-0.89 (IH, m).

LC-MS (Methode 4): R ₄ = 2.75 min; m/z = 393 (M+H) ⁺

R, 6.86 min; Reinheit >99%; >99% ee

[Säule: chirale Kieselgel-Phase basierend auf dem Selektor Poly(N-methacryloyl-L-isoleucin-3- pentylamid), 250 mm x 4.6 mm; Elutionsmittel: Isohexan/Ethylacetat 1 :1 (v/v); Fluss: 2 ml/min; Temperatur: 24°C; UV-Detektion: 270 nm].

[α] _D ²⁰ = +37.6°, c = 0.445, Methanol.

Beispiele 56A - 59A

3-Methyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H-l,3,4-oxadi azin-4-yl)methyl]phenyl}pentansäure {Isomer 1 — 4)

11.8 g (31.02 mmol) des Isomerengemisches von 3-Methyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H- l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}pentansäure (Beispiel 51A) wurden mittels präparativer ΗPLC an chiraler Phase zunächst in die Diastereomere aufgetrennt [Säule: chirale Kieselgel-Phase basierend auf dem Selektor Poly(N-methacryloyl-D-valin-3-pentylamid), 500 mm x 75 mm; Elutionsmittel: Isohexan/Essigsäureethylester 30:70 (v/v); Fluss: 200 ml/min; UV-Detektion: 290 nm; Temperatur: 25 ⁰ C]. Es wurden 4.11 g bzw. 5.2 g der beiden Diastereomere erhalten.

Trennung von Diastereomer 1:

4.11 g des Diastereomers 1 wurden mittels präparativer ΗPLC an chiraler Phase in die Enantio- mere {Isomere 1 und 2) aufgetrennt [Säule: Daicel Chiralpak AD-Η, 5 μm, 250 mm x 20 mm; Elutionsmittel: Isohexan/Isopropanol 95:5 (v/v); Fluss: 25 ml/min; UV-Detektion: 230 nm; Temperatur: 24 ⁰ C]:

Beispiel 56A {Isomer 1):

Ausbeute: 865 mg R, 7.36 min; Reinheit >91%; >93% ee

[Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μm, 250 mm x 4 mm; Elutionsmittel: Isohexan/Isopropanol

80:20 (v/v); Fluss: 1 ml/min; UV-Detektion: 230 nm; Temperatur: 25 ⁰ C].

LC-MS (Methode 2): R, = 2.16 min; m/z = 381 (M+H) ⁺ .

Beispiel 57A (Isomer 2):

Ausbeute: 1662 mg

R, 7.91 min; Reinheit >99%; >97% ee

[Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μm, 250 mm x 4 mm; Elutionsmittel: Isohexan/Isopropanol

80:20 (v/v); Fluss: 1 ml/min; UV-Detektion: 230 nm; Temperatur: 25 ⁰ C].

LC-MS (Methode 4): R ₄ = 2.53 min; m/z = 381 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ , δ/ppm): 12.35-12.15 (IH, br. s), 7.78 (2H, d), 7.54-7.40 (3H, m), 7.31 (4H, q), 4.92 (2H, s), 4.86 (2H, s), 3.19 (IH, d), 2.09-1.95 (IH, m), 1.59-1.43 (IH, m), 1.25- 1.09 (IH, m), 0.89 (3H, t), 0.58 (3H, d).

[α] _D ²⁰ = +21.7°, c = 0.525, Methanol.

Trennung von Diastereomer 2:

5.2 g des Diastereomers 2 wurden mittels präparativer HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere (Isomere 3 und 4) aufgetrennt [Säule: Daicel Chiralcel OJ-H, 5 μm, 250 mm x 20 mm; Elutionsmittel: Isohexan/Isopropanol 95:5 (v/v); Fluss: 25 ml/min; UV-Detektion: 230 nm; Temperatur:

24 ⁰ C]:

Beispiel 58A (Isomer 3):

Ausbeute: 2970 mg

R, 7.21 min; Reinheit >94%; >99% ee

[Säule: Daicel Chiralcel OJ-H, 5 μm, 250 mm x 4 mm; Elutionsmittel: Isohexan/Isopropanol 80:20

(v/v); Fluss: 1 ml/min; UV-Detektion: 230 nm; Temperatur: 25 ⁰ C].

LC-MS (Methode 4): R, = 2.53 min; m/z = 381 (M+H) ⁺ .

Beispiel 59A (Isomer 4):

Ausbeute: 1350 mg R, 7.77 min; Reinheit >90%; >84% ee

[Säule: Daicel Chiralcel OJ-H, 5 μm, 250 mm x 4 mm; Elutionsmittel: Isohexan/Isopropanol 80:20

(v/v); Fluss: 1 ml/min; UV-Detektion: 230 nm; Temperatur: 25 ⁰ C].

LC-MS (Methode 2): R, = 2.17 min; m/z = 381 (M+H) ⁺ .

Beispiel 6OA

4,4,4-Trifluor-3-methyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro -4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]- phenyl } butansäure

Eine Lösung von 1283 mg (2.86 mmol) Ethyl-4,4,4-trifluor-3-methyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6- dihydro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}butanoat in 10 ml Dioxan wurde mit 1 1.4 ml (11.4 mmol) 1 N Natronlauge versetzt und über Nacht bei 80 ⁰ C gerührt. Nach vollständiger Umsetzung wurde das Dioxan im Vakuum abgezogen, die verbleibende Lösung mit Wasser verdünnt und anschließend mit 1 M Salzsäure auf pH 2 gestellt. Der ausgefallene Feststoff wurde abfϊltriert, mit Wasser gewaschen und über Nacht im Vakuum bei 45°C getrocknet. Es wurden 1058 mg (2.52 mmol, 88% d. Th.) der Titelverbindung als Isomerengemisch erhalten.

LC-MS (Methode 5): R, = 1.12 min, m/z = 421 (M+Η) ⁺ (Diastereomer 1); R ₄ = 1.13 min, m/z = 421 (M+H) ⁺ (Diastereomer 2).

Beispiele 61A - 64A

4,4,4-Trifluor-3-methyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro -4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]- phenyl} butansäure {Isomer 1 - 4)

630 mg (1.50 mmol) des Isomerengemisches von 4,4,4-Trifluor-3-methyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl- 5,6-dihydro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}butansäur e wurden mittels präparativer ΗPLC an chiraler Phase in die Isomere aufgetrennt [Säule: Daicel Chiralpak AD-Η, 5 μm, 250 mm x 20 mm; Elutionsmittel: Isohexan/(Isopropanol + 0.2% Trifluoressigsäure + 1% Wasser) 75:25 (v/v); Fluss: 15 ml/min; UV-Detektion: 220 nm; Temperatur: 3O ⁰ C]:

Beispiel 61A (Isomer I):

Ausbeute: 26 mg

R, 6.17 min; Reinheit >99%; >99% ee [Säule: Daicel Chiralpak AD-Η, 5 μm, 250 mm x 4.6 mm; Elutionsmittel: Isohexan/(Isopropanol + 0.2% Trifluoressigsäure + 1% Wasser) 75:25 (v/v); Fluss: 1 ml/min; UV-Detektion: 220 nm; Temperatur: 25 ⁰ C].

Beispiel 62A (Isomer 2):

Ausbeute: 35 mg

R, 6.57 min; Reinheit >98%; >99% ee

[Säule: Daicel Chiralpak AD-Η, 5 μm, 250 mm x 4.6 mm; Elutionsmittel: Isohexan/(Isopropanol + 0.2% Trifluoressigsäure + 1% Wasser) 75:25 (v/v); Fluss: 1 ml/min; UV-Detektion: 220 nm; Temperatur: 25 ⁰ C].

Beispiel 63A (Isomer 3):

Ausbeute: 236 mg R, 8.03 min; Reinheit >99%; >99% ee

[Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μm, 250 mm x 4.6 mm; Elutionsmittel: Isohexan/(Isopropanol + 0.2% Trifluoressigsäure + 1% Wasser) 75:25 (v/v); Fluss: 1 ml/min; UV-Detektion: 220 nm; Temperatur: 25 ⁰ C].

LC-MS (Methode 5): R, = 1.12 min; m/z = 421 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ , δ/ppm): 12.60-12.81 (IH, br. s), 7.78 (2H, d), 7.41-7.53 (3H, m), 7.37 (4H, s), 4.93 (2H, s), 4.89 (2H, s), 3.61 (IH, d), 3.18-3.32 (IH, m), 0.77 (3 H, d).

[α] _D ²⁰ = +45.6°, c = 0.565, Methanol.

Beispiel 64A (Isomer 4):

Ausbeute: 247 mg

R, 9.17 min; Reinheit >99%; >98% ee

[Säule: Daicel Chiralpak AD-H, 5 μm, 250 mm x 4.6 mm; Elutionsmittel: Isohexan/(Isopropanol + 0.2% Trifluoressigsäure + 1% Wasser) 75:25 (v/v); Fluss: 1 ml/min; UV-Detektion: 220 nm; Temperatur: 25 ⁰ C].

[α] _D ²⁰ = -45.8°, c = 0.305, Methanol.

Beispiel 65A

(+/-)-Cyclopentyl{4-[(l-oxo-l,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl) methyl]phenyl}essigsäure-?er/.-butyl- ester

2.035 g (15.3 mmol) 1-Oxoindolin in 12 ml DMF wurden bei 0 ⁰ C mit 61 1.3 mg (15.3 mmol, 60%-ig) Natriumhydrid versetzt. Es wurde 25 min gerührt und dann bei 0 ⁰ C 6.0 g (12.7 mmol, ca. 75% Reinheit) (+/-)-[4-(Brommethyl)phenyl](cyclopentyl)essigsäure-/e/-/.- butylester zugegeben. Man rührte das Reaktionsgemisch weitere 4 h unter langsamer Erwärmung auf RT, versetzte dann mit Wasser und extrahierte zweimal mit Dichlormethan. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und eingeengt. Das Rohprodukt wurde im Ultraschallbad mit Diethylether behandelt und der Feststoff abgesaugt und getrocknet. Es wurden 3.40 g (65.2% d. Th.) der Zielverbindung erhalten.

LC-MS (Methode 4): R, = 1.05 min; m/z = 406 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ ): δ = 7.73 (d, IH), 7.63-7.48 (m, 3H), 7.31 (d, 2H), 7.22 (d, 2H), 4.71 (s, 2H), 4.39 (s, 2H), 3.18 (d, IH), 2.47 (m, IH), 1.82 (m, IH), 1.65-1.36 (m, 4H), 1.35 (s, 9H), 1.30-1.20 (m, 2H), 0.95 (m, IH).

Beispiel 66A

(+)-Cyclopentyl{4-[(l -oxo-1, 3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)methyl]phenyl}essigsäure-/er/.-b utylester

Das in Beispiel 65A erhaltene Racemat wurde durch präparative HPLC an chiraler Phase in die Enantiomere getrennt [Säule: Daicel Chiralpak IA-H, 5 μm, 250 mm x 20 mm; Fluss: 15 ml/min; UV-Detektion: 220 nm; Injektionsvolumen: 0.25 ml; Temperatur: 30 ⁰ C; Eluent: 20% Acetonitril / 80% Methyl-tert.-butylether]. Ausgehend von 3.40 g Racemat wurden 1.50 g des (+)-Enantiome- ren erhalten (das andere Enantiomer wurde nicht rein isoliert).

LC-MS (Methode 3): R, = 1.58 min; m/z = 350 (M-C ₄ H ₈ +H) ⁺ , 406 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-J ₆ ): δ = 7.73 (d, IH), 7.63-7.48 (m, 3H), 7.31 (d, 2H), 7.22 (d, 2H), 4.71 (s, 2H), 4.39 (s, 2H), 3.18 (d, IH), 2.47 (m, IH), 1.82 (m, IH), 1.65-1.36 (m, 4H), 1.35 (s, 9H), 1.30-1.20 (m, 2H), 0.95 (m, 1 H).

[α] _D ²⁰ = + 8.2°, c = 0.38, Chloroform.

Beispiel 67A

(+)-Cyclopentyl{4-[(l-oxo-l,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)me thyl]phenyl}ethansäure

Zu einer Lösung von 300 mg (0.740 mmol) (+)-Cyclopentyl{4-[(l-oxo-l,3-dihydro-2H-isoindol-2- yl)methyl]phenyl}ethansäure-/er/.-butylester in 1.5 ml Dichlormethan wurden 640 μl (7.4 mmol) Trifluoressigsäure getropft. Nach 1 h Rühren wurde das Reaktionsgemisch im Vakuum eingeengt und der Rückstand im Hochvakuum getrocknet. Es wurden 267 mg (100% d. Th.) der Titelverbindung erhalten.

LC-MS (Methode 5): R, = 1.05 min; m/z = 350 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 7.73 (d, IH), 7.57 (q, 2H), 7.50 (t, IH), 7.31 (d, 2H), 7.22 (d, 2H), 4.71 (s, 2H), 4.37 (s, 2H), 3.22 (d, IH), 2.41 (m, IH), 1.83 (m, IH), 1.65-1.16 (m, 6H), 0.94 (m, IH).

Beispiel 68A

6- { [2-Cyclopentyl-2- {4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl } - acetyl]amino}heptansäure-ter/.-butylester {Diastereomerengemisch)

Zu einer Lösung von 100 mg (0.255 mmol) (+)-Cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H- l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}essigsäure und 76.9 mg (0.382 mmol) (+/-)-6-Aminoheptan- säure-/erΛ-butylester in 0.3 ml DMF wurden bei RT 41.3 mg (0.306 mmol) ΗOBt und 126 μl (0.764 mmol) DIEA gegeben. Die resultierende Mischung wurde auf 0 ⁰ C gekühlt, bevor 116.3 mg (0.306 mmol) ΗATU hinzugefügt wurden. Die Reaktionsmischung wurde langsam auf RT er- wärmt, 1 h bei RT nachgerührt und dann mit Ethylacetat verdünnt. Die organische Phase wurde mit gesättigter Natriumhydrogencarbonat-Lösung und mit gesättigter Natriumchlorid-Lösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde durch präparative RP-HPLC (Acetonitril/Wasser-Gradient) aufgereinigt. Es wurden 118 mg (ca. 83% Reinheit, ca. 67% d. Th.) der Zielverbindung als Diastereomerengemisch erhalten.

LC-MS (Methode 3): R, = 1.59 min; m/z = 576 (M+H) ⁺ .

Beispiel 69A

(+)-l-(4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydr o-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]- phenyl}acetyl]amino}butyl)cyclopropancarbonsäure-tert.-buty lester

Zu einer Lösung von 545.8 mg (1.39 mmol) (+)-Cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H- l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}essigsäure und 445 mg (ca. 2.09 mmol, Rohmaterial) l-(4- Aminobutyl)cyclopropancarbonsäure-/er/.-butylester in ca. 5 ml DMF wurden bei RT 266 μl (1.53 mmol) DIEA gegeben. Die resultierende Mischung wurde auf 0 ⁰ C gekühlt, bevor in vier Portionen insgesamt 687.4 mg (2.09 mmol) ΗATU hinzugefügt wurden. Die Reaktionsmischung wurde lang- sam auf RT erwärmt, 1 h bei RT nachgerührt und dann auf Wasser gegeben und dreimal mit Ethyl- acetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Das Rohprodukt wurde zunächst durch Chromatographie an Silicagel vorgereinigt (Laufmittel-Gradient Cyclohexan/Ethylacetat 5:1 bis 3:1). Nach anschließender prä- parativer RP-ΗPLC (Acetonitril/Wasser-Gradient) wurden 378 mg (46.2% d. Th.) der Zielverbin- düng erhalten.

LC-MS (Methode 2): R, = 2.73 min; m/z = 588 (M+Η) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 7.94 (t, IH), 7.78 (d, 2H), 7.52-7.44 (m, 3H), 7.30 (d, 2H), 7.27 (d, 2H), 4.90 (s, 2H), 4.83 (s, 2H), 3.10 (d, IH), 3.10-3.01 (m, IH), 2.89-2.81 (m, IH), 2.51- 2.45 (m, IH), 1.73-1.67 (m, IH), 1.65-1.28 (m, HH), 1.35 (s, 9H), 1.22-1.15 (m, IH), 0.95 (m, 2H), 0.94-0.86 (m, IH), 0.56 (m, 2H). [α] _D ²⁰ = +5.4°, c = 0.525, Chloroform.

Beispiel 7OA

(+)-6-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4 H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]- phenyl } acetyljamino} -2,2-dimethy lhexansäure-tert.-butylester

Zu einer Lösung von 328.1 mg (0.836 mmol) (+)-Cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H- l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}essigsäure und 270 mg (ca. 1.25 mmol, Rohmaterial) 6- Amino-2,2-dimethylhexansäure-tert.-butylester in 3 ml DMF wurden bei RT 160 μl (0.919 mmol) DEEA gegeben. Die resultierende Mischung wurde auf 0 ⁰ C gekühlt, bevor in vier Portionen insge- samt 413.2 mg (1.09 mmol) ΗATU hinzugefügt wurden. Die Reaktionsmischung wurde langsam auf RT erwärmt, 16 h bei RT nachgerührt und dann auf Wasser gegeben und dreimal mit Ethyl- acetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Nach präparativer RP-ΗPLC-Reinigung (Acetonitril/Wasser-Gradient) des Rückstands wurden 179.8 mg (36.5% d. Th.) der Zielverbindung erhalten.

LC-MS (Methode 3): R, = 1.68 min; m/z = 590 (M+Η) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 7.94 (t, IH), 7.79 (d, 2H), 7.51-7.42 (m, 3H), 7.31 (d, 2H), 7.27 (d, 2H), 4.90 (s, 2H), 4.85 (s, 2H), 3.11 (d, IH), 3.10-3.01 (m, IH), 2.88-2.80 (m, IH), 2.51- 2.45 (m, IH), 1.75-1.68 (m, IH), 1.60-1.07 (m, 12H), 1.36 (s, 9H), 1.22-1.15 (m, IH), 0.98 (s, 6H), 0.92-0.85 (m, IH).

[α] _D ²⁰ = +9.6°, c = 0.570, Chloroform.

Beispiel 71A

6- { [2-Cyclopentyl-2- {4-[(5-oxo-2-phenyl-5 ,6-dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methyl]pheny 1 } - acetyl]amino}-2-methylhexansäureethylester (Diastereomerengemisch)

Zu einer Lösung von 148 mg (0.377 mmol) (+)-Cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H- l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl} essigsaure und 98 mg (ca. 0.66 mmol, Rohmaterial) 6-Amino-

2-methylhexansäureethylester in 1.0 ml DMF wurden bei RT 72 μl (0.415 mmol) DDEA gegeben. Die resultierende Mischung wurde auf 0 ⁰ C gekühlt, bevor in vier Portionen insgesamt 186.4 mg

(0.49 mmol) ΗATU hinzugefügt wurden. Die Reaktionsmischung wurde langsam auf RT erwärmt,

16 h bei RT nachgerührt und dann auf Wasser gegeben und dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt.

Nach präparativer RP-ΗPLC-Reinigung (Acetonitril/Wasser-Gradient) des Rückstands wurden 134.0 mg (64.9% d. Th.) der Zielverbindung als Diastereomerengemisch erhalten.

LC-MS (Methode 3): R, = 1.51 min; m/z = 548 (M+Η) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 7.93 (t, IH), 7.78 (d, 2H), 7.53-7.43 (m, 3H), 7.30 (d, 2H), 7.27 (d, 2H), 4.91 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 4.02 (q, 2H), 3.10 (d, IH), 3.10-3.01 (m, IH), 2.88-2.80 (m, IH), 2.51-2.45 (m, IH), 2.20 (q, IH), 1.75-1.68 (m, IH), 1.62-1.39 (m, 5H), 1.36-1.25 (m, 4H), 1.20-1.12 (m, darin t, zus. 5H), 0.99 (d, 3H), 0.93-0.85 (m, IH).

Beispiel 72A und Beispiel 73A

6-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H-l, 3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}- acetyl]amino}-2-methylhexansäureethylester (Diastereomer 1 und 2)

Das oben erhaltene Diastereomerengemisch (95 mg) wurde durch präparative HPLC an chiraler Phase aufgetrennt [Säule: Daicel Chiralpak IA, 5 μm, 250 mm x 20 mm; Injektionsvolumen: 3 ml; Eluent: 90% ter/.-Butyl-methylether / 10% Methanol; Fluss: 25 ml/min; Temperatur: RT; Detek- tion: 260 nm]:

Beispiel 72A ( Piaster eomer 1):

Ausbeute: 24 mg

LC-MS (Methode 3): R, = 1.51 min; m/z = 548 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (500 MHz, CDCl ₃ ): δ = 7.82 (d, 2H), 7.48-7.30 (m, 7H), 5.48 (t, IH), 4.91 (s, 2H), 4.75 (s, 2H), 4.11 (q, 2H), 3.30-3.20 (m, IH), 3.14-3.08 (m, IH), 2.94 (d, IH), 2.61-2.55 (m, IH), 2.39- 2.34 (m, IH), 1.96-1.91 (m, IH), 1.65-1.58 (m, 2H), 1.48-1.35 (m, 4H), 1.20-1.10 (m, darin t, zus. 5H), 1.10 (d, 3H), 0.99-0.84 (m, 2H).

[α] _D ²⁰ = +2°, c = 0.280, Chloroform.

Beispiel 73A (Diastereomer 2):

Ausbeute: 23 mg

LC-MS (Methode 3): R ₁ = 1.51 min; m/z = 548 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (500 MHz, CDCl ₃ ): δ = 7.83 (d, 2H), 7.47-7.30 (m, 7H), 5.48 (t, IH), 4.91 (s, 2H), 4.75 (s, 2H), 4.10 (q, 2H), 3.30-3.23 (m, IH), 3.11-3.05 (m, IH), 2.92 (d, IH), 2.61-2.55 (m, IH), 2.39- 2.34 (m, IH), 1.96-1.90 (m, IH), 1.65-1.58 (m, 2H), 1.48-1.35 (m, 4H), 1.20-1.10 (m, darin t, zus. 5H), 1.10 (d, 3H), 1.00-0.84 (m, 2H).

[α] _D ²⁰ = +13°, c = 0.30, Chloroform. Beispiel 74A

l-(4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H -l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}- acetyl]amino}pentyl)cyclopropancarbonsäure-ter/.-butylester (Diastereomerengemisch)

Zu einer Lösung von 517.9 mg (1.32 mmol) (+)-Cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H- l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}essigsäure und 450 mg (ca. 1.98 mmol, Rohmaterial) l-(4- Aminopentyl)cyclopropancarbonsäure-/er/.-butylester in 2.5 ml DMF wurden bei RT 253 μl (1.45 mmol) DIEA gegeben. Die resultierende Mischung wurde auf 0 ⁰ C gekühlt, bevor in vier Portionen insgesamt 186.4 mg (0.49 mmol) ΗATU hinzugefügt wurden. Die Reaktionsmischung wurde lang- sam auf RT erwärmt, 16 h bei RT nachgerührt und dann auf Wasser gegeben und dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Nach präparativer RP-ΗPLC-Reinigung (Acetonitril/Wasser-Gradi- ent) des Rohprodukts wurden 540.0 mg (68.0% d. Th.) der Zielverbindung als Diastereomerengemisch erhalten.

LC-MS (Methode 2): R, = 2.79 min, m/z = 602 (M+Η) ⁺ und R, = 2.83 min, m/z = 602 (M+H) ⁺ .

Beispiel 75A und Beispiel 76A

l-(4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H -l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}- acetyl]amino}pentyl)cyclopropancarbonsäure-ter/.-butylester (Diastereomer 1 und 2)

Das oben erhaltene Diastereomerengemisch (536 mg) wurde durch präparative HPLC an chiraler Phase aufgetrennt [Säule: Daicel Chiralpak IA, 5 μm, 250 mm x 20 mm; Injektionsvolumen: 2 ml; Eluent: 90% ter/.-Butyl-methylether / 10% Methanol; Fluss: 20 ml/min; Temperatur: RT; Detek- tion: 260 nm]:

Beispiel 75A (Diastereomer 1):

Ausbeute: 253 mg

LC-MS (Methode 2): R, = 2.87 min; m/z = 602 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ = 7.80-7.75 (m, 3H), 7.54-7.43 (m, 3H), 7.30 (d, 2H), 7.26 (d, 2H), 4.91 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 3.67 (m, IH), 3.09 (d, IH), 2.52-2.43 (m, IH), 1.76-1.68 (m, IH), 1.63-1.56 (m, IH), 1.55-1.28 (m, darin s, zus. 19H), 1.27-1.17 (m, IH), 0.98 (s, 2H), 0.97-0.85 (m, IH), 0.88 (d, 3H), 0.62 (d, 2H).

[α] _D ²⁰ = +3.3°, c = 0.550, Chloroform.

Beispiel 76A (Diastereomer 2):

Ausbeute: 273 mg

LC-MS (Methode 2): R, = 2.82 min; m/z = 602 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 7.80-7.72 (m, 3H), 7.52-7.42 (m, 3H), 7.30 (d, 2H), 7.26 (d, 2H), 4.90 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 3.65 (m, IH), 3.10 (d, IH), 2.52-2.43 (m, IH), 1.75-1.68 (m, IH), 1.63-1.57 (m, IH), 1.56-1.10 (m, darin s, zus. 20H), 1.01 (d, 3H), 0.95-0.85 (m, IH), 0.82 (d, 2H), 0.39 (dq, 2H).

[α] _D ²⁰ = +5.2°, c = 0.555, Chloroform. Beispiel 77A

(-)- 1 -(4- { [3-Methyl-2- {4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl} - pentanoyl]amino}butyl)cyclopropancarbonsäure-/er?.-butylest er

Zu einer Lösung von 210 mg (0.552 mmol) (+)-3-Methyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H- l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}pentansäure (Isomer 2) und 177 mg (0.828 mmol) l-(4- Aminobutyl)cyclopropancarbonsäure-/erΛ-butylester in 2.0 ml DMF wurden bei RT 106 μl (0.607 mmol) DIEA gegeben. Die resultierende Mischung wurde auf 0 ⁰ C gekühlt, bevor in vier Portionen insgesamt 273 mg (0.718 mmol) ΗATU hinzugefügt wurden. Die Reaktionsmischung wurde lang- sam auf RT erwärmt, 16 h bei RT nachgerührt und dann auf Wasser gegeben und dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Nach präparativer RP-ΗPLC-Reinigung (Acetonitril/Wasser-Gradient) des Rückstands wurden 264.0 mg (83.1% d. Th.) der Zielverbindung erhalten.

LC-MS (Methode 2): R ₁ = 2.75 min; m/z = 576 (M+Η) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 7.94 (t, IH), 7.77 (d, 2H), 7.49 (q, IH), 7.44 (t, 2H), 7.27 (q, 4H), 4.90 (s, 2H), 4.83 (s, 2H), 3.04 (m, 2H), 2.83 (m, IH), 2.05 (m, IH), 1.46 (m, IH), 1.39-1.23 (m, 15H), 1.08 (m, IH), 0.90 (s, 2H), 0.86 (t, 3H), 0.53 (m, 5H).

[α] _D ²⁰ = -1.4°, c = 0.5, Chloroform.

Beispiel 78A

l-[(l^/Z)-4-{[-2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-di hydro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]- phenyl}acetyl]amino}but-l-en-l-yi]cyclopropancarbonsäureeth ylester

200 mg (0.51 mmol) (+)-Cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H-l,3,4-oxad iazin-4-yl)- methyl]phenyl} essigsaure wurden in 0.5 ml DMF und 0.31 ml (3.82 mmol) Pyridin vorgelegt, mit 213.2 mg (0.561 mmol) l-[Bis-(dimethylamino)methylen]-5-chlor-3-oxy-lH-benzotriazo l-l-ium- Tetrafluoroborat sowie 93.4 mg (0.51 mmol) l-[(l£/Z)-4-Aminobut-l-en-l-yl]cyclopropancarbon- säureethylester versetzt und bei RT über Nacht gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde danach mit wenig Acetonitril verdünnt und direkt über präparative RP-ΗPLC aufgereinigt (Acetonitril/Was- ser-Gradient). Es wurden 123 mg (41.8% d. Th.) der Zielverbindung als £/Z-Isomerengemisch (ca. 1 :4) erhalten.

LC-MS (Methode 3): R, = 1.51 min; m/z = 558 (M+Η) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 8.00 (t, IH), 7.77 (d, 2H), 7.47 (m, 3H), 7.28 (q, 4H), 5.47 (m, IH), 4.90 (s, 2H), 4.83 (s, 2H), 3.98 (m, 2H), 3.09 (d, 2H), 2.92 (m, IH), 2.12 (m, 2H), 1.70 (m, IH), 1.64-1.36 (m, 4H), 1.34-1.07 (m, 7H), 0.89 (m, IH), 0.80 (d, 2H).

Beispiel 79A

(+)-l -(4- { [2-Cyclopentyl-2- {4-[(l -oxo- 1 ,3-dihydro-2H-isoindol-2-yl)methyl]phenyl} acetyl]- amino}butyl)cyclopropancarbonsäure-/er/.-butylester

Zu einer Lösung von 260 mg (0.744 mmol) (+)-Cyclopentyl{4-[(l-oxo-l,3-dihydro-2H-isoindol-2- yl)methyl]phenyl}ethansäure und 120.7 mg (0.893 mmol) 1-Ηydroxy-lH-benzotriazol-Ηydrat in 2 ml DMF wurden bei 0 ⁰ C unter Argon 390 μl (2.232 mmol) NN-Diisopropylethylamin, 206.3 mg (0.967 mmol) l-(4-Aminobutyl)cyclopropancarbonsäure-/er/.-butylester und dann in Portionen ins- gesamt 339.5 mg (0.893 mmol) HATU gegeben. Es wurde zunächst 1 h bei 0 ⁰ C und anschließend 2 h bei RT gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde dann auf Wasser gegossen und dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet und am Rotationsverdampfer eingeengt. Der Rückstand wurde mit wenig Acetonitril versetzt und über präparative RP-HPLC aufgereinigt (Acetonitril/Wasser-Gradient). Es wurden 325 mg (80.3% d. Th.) der Zielverbindung erhalten.

LC-MS (Methode 2): R, = 2.51 min; m/z = 545 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 7.93 (t, IH), 7.72 (d, IH), 7.67 (q, 2H), 7.50 (t, IH), 7.30 (d, 2H), 7.17 (d, 2H), 4.68 (s, 2H), 4.36 (s, 2H), 3.09 (d, IH), 3.05 (m, IH), 2.85 (m, IH), 1.69 (m, IH), 1.62-1.24 (m, 21H), 1.18 (m, IH), 0.90 (q, 2H), 0.88 (m, IH), 0.57 (q, 2H).

[α] _D ²⁰ = +20.7°, c = 0.345, Chloroform.

Beispiel 8OA

c/5/frαn5-l-[4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6 -dihydro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)- methyl]phenyl}acetyl]amino}but-2-en-l-yl]cyclopropancarbons� �ure-ter/.-butylester

Zu einer Lösung von 107.2 mg (0.273 mmol) (+)-Cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H- l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}ethansäure und 44.3 mg (0.328 mmol) 1-Ηydroxy-lH-benzo- triazol-Ηydrat in 1.5 ml DMF wurden bei 0 ⁰ C unter Argon 143 μl (0.819 mmol) NN-Diisopropylethylamin, 75.0 mg (ca. 0.35 mmol, Rohmaterial) c/V/ra«j-l-[(2£/Z)-4-Aminobut-2-en-l-yl]cyclo- propancarbonsäure-/er/.-butylester und dann in Portionen insgesamt 124.9 mg (0.328 mmol) HATU gegeben. Es wurde zunächst 1 h bei 0 ⁰ C und anschließend 2 h bei RT gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde dann auf Wasser gegossen und dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde mit wenig Acetonitril versetzt und über präparative RP-HPLC aufgereinigt (Acetonitril/Wasser-Gradient). Es wurden 121 mg (75.5% d.Th.) der Zielverbindung erhalten (tram-lsomeτ im deutlichen Überschuss).

LC-MS (Methode 3): R, = 1.63 min; m/z = 530 (M-C ₄ H ₈ +H) ⁺ .

Beispiel 81A

/ra«5-l-[(2^)-4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5, 6-dihydro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)- methyl]phenyl}acetyl]amino}but-2-en-l-yl]cyclopropancarbons� �ure-ter/.-butylester

Das oben erhaltene c/s/fraws-Isomerengemisch (120 mg) wurde durch präparative HPLC aufgetrennt [Säule: Kromasil 100 C 18, 5 μm, 250 mm x 20 mm; Injektionsvolumen: 2 ml; Eluent: 70% Acetonitril / 30% wässrige Ameisensäure (0.2%); Fluss: 25 ml/min; Temperatur: 35°C; Detektion: 210 nm]:

Ausbeute: 67 mg

LC-MS (Methode 5): R. = 1.43 min; m/z = 530 (M-C ₄ H ₈ +H) ⁺ , 608 (M+Na) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 8.11 (t, IH), 7.78 (d, 2H), 7.53-7.42 (m, 4H), 7.34-7.26 (m, 4H), 5.50-5.41 (m, IH), 5.39-5.30 (m, IH), 4.92 (s, 2H), 4.83 (s, 2H), 3.68-3.61 (m, IH), 3.51-3.44 (m, IH), 3.14 (d, IH), 2.54-2.45 (m, IH), 2.11 (d, 2H), 1.87-1.37 (m, 6H), 1.35 (s, 9H), 1.34-1.15 (m, 2H), 0.92 (m, 2H), 0.93-0.85 (m, IH), 0.60 (m, 2H). Beispiel 82A

c/s/fra«5-l-[4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(6-oxo-3-phenylpyri dazin-l(6H)-yl)methyl]phenyl}acetyl]- aminojbut-l-en-l-yljcyclopropancarbonsäureethylester

200 mg (0.515 mmol) (+)-(2S)-Cyclopentyl{4-[(6-oxo-3-phenylpyridazin-l(6H)-yl)me thyl]- phenyl}ethansäure wurden in 1.2 ml DMF gelöst, auf 0 ⁰ C gekühlt und nacheinander mit 83.5 mg (0.618 mmol) ΗOBt, 0.27 ml (1.55 mmol) DIEA, 113.2 mg (ca. 0.618 mmol, Rohmaterial) 1- [(l^/^^-Aminobut-l-en-l-yljcyclopropancarbonsäureethylester sowie portionsweise mit insgesamt 234.9 mg (0.618 mmol) ΗATU versetzt. Die Reaktionsmischung wurde 1 h bei 0 ⁰ C gerührt und anschließend langsam auf RT erwärmt. Das Reaktionsgemisch wurde dann auf Wasser gegeben und mehrfach mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Das Rohprodukt wurde mittels präparativer RP-ΗPLC gereinigt (Acetonitril/Wasser-Gradient). Es wurden 160 mg (56.1% d. Th.) der Zielverbindung als c/s/fraΗS-Isomerengemisch erhalten.

LC-MS (Methode 2): R, = 2.41 min, m/z = 554 (M+Η) ⁺ und R, = 2.45 min, m/z = 554 (M+H) ⁺ .

Beispiel 83A

/ranj-l-[(l£)-4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(6-oxo-3-phenylpyr idazin-l(6H)-yl)methyl]phenyl}acetyl]- aminojbut-l-en-l-yljcyclopropancarbonsäureethylester

Das oben erhaltene cw/fnms-Isomerengemisch wurde durch präparative HPLC aufgetrennt [Säule: Kromasil 100 C 18, 5 μm, 250 mm x 20 mm; Injektionsvolumen: 0.5 ml; Eluent: 75% Acetonitril / 25% Wasser; Fluss: 25 ml/min; Temperatur: 34.5°C; Detektion: 210 nm]. Ausgehend von 160 mg Gemisch wurden 11 mg des /nms-Isomeren und 95 mg des cw-Isomeren (siehe Beispiel 84A) erhalten.

LC-MS (Methode 3): R, = 1.46 min; m/z = 554 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (500 MHz, CDCl ₃ ): δ = 7.78 (d, 2H), 7.49-7.40 (m, 3H), 7.31 (d, 2H), 7.01 (d, IH), 6.02 (d, IH), 5.59 (t, IH), 5.48 (s, 2H), 5.22 (dt, IH), 4.11 (q, 2H), 3.28 (m, IH), 3.14 (m, IH), 2.95 (d, IH), 2.58 (m, IH), 2.13 (m, 2H), 1.92 (m, IH), 1.55-1.38 (m, 5H), 1.35 (s, 2H), 1.24 (t, 3H), 1.24- 1.18 (m, 2H), 0.99-0.87 (m, 3H).

Beispiel 84A

(-)-cis- 1 - [( 1 Z)-A- { [2-Cyclopenty 1-2- { 4- [(6-oxo-3 -phenylpyridazin- 1 (6H)-y l)methy 1] pheny 1 } acety 1] - amino} but- 1 -en- 1 -yl]cyclopropancarbonsäureethylester

LC-MS (Methode 5): R ₁ = 1.31 min; m/z = 554 (M+Η) ⁺ . ¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 8.08 (d, IH), 8.01 (t, IH), 7.89 (d, 2H), 7.51-7.43 (m, 3H), 7.32-7.27 (m, 4H), 7.08 (d, IH), 5.49-5.43 (m, 2H), 5.30 (s, 2H), 3.99 (q, 2H), 3.13-3.05 (m, 2H), 2.92 (m, IH), 2.52-2.43 (m, IH), 2.15-2.10 (m, 2H), 1.75-1.65 (m, IH), 1.52-1.11 (m, 8H), 1.10 (t, 3H), 0.91-0.82 (m, IH), 0.79 (m, 2H).

[α] _D ²⁰ = -21.1°, c = 0.520, Chloroform.

Beispiel 85A

Methyl-(l-{3-[(cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro -4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]- phenyl}acetyl)amino]propyl}cyclopropyl)acetat

Eine Lösung von 591 mg (1.51 mmol) Cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H-l,3,4-oxa- diazin-4-yl)methyl]phenyl}essigsäure (Enantiomer 2), 376 mg (1.81 mmol) Methyl-[l-(3-amino- propyl)cyclopropyl]acetat-Ηydrochlorid, 859 mg (2.26 mmol) HATU und 1 ml N,N-Diisopropyl- ethylamin in 10 ml DMF wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wurde der Ansatz auf Eiswasser gegossen, die Phasen getrennt und die wässrige Phase dreimal mit tert.-Butyl-methylether extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, und nach Filtration wurde das Lösungsmittel im Vakuum bis zur Trockene entfernt. Das erhaltene Rohprodukt wurde über präparative RP-HPLC gereinigt. Es wurden 233 mg (0.43 mmol, 28.5% d. Th.) der Titelverbindung als farbloses Öl erhalten.

LC-MS (Methode 2): R ₁ = 2.41 min; m/z = 546 (M+H) ⁺ .

Beispiel 86A

tert. -Buty 1- 1 - { 4- [(cyclopenty 1 {4- [(6-oxo-3 -pheny lpyridazin- 1 (6H)-y l)methy ljpheny 1 } acety I)- amino]butyl}cyclopropancarboxylat

Eine Lösung von 113 mg (0.29 mmol) Cyclopentyl{4-[(6-oxo-3-phenylpyridazin-l(6H)-yl)- methyl]phenyl} essigsaure (Enantiomer 1), 75 mg (0.35 mmol) ter/.-Butyl-l-(4-aminobutyl)cyclo- propancarboxylat, 167 mg (0.44 mmol) ΗATU und 0.15 ml (0.88 mmol) NN-Diisopropylethyl- amin in 3.5 ml DMF wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wurde der Ansatz auf Eiswasser gegossen, die Phasen getrennt und die wässrige Phase dreimal mit tert.-Butyl-methylether extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, und nach Filtration wurde das Lösungsmittel im Vakuum bis zur Trockene entfernt. Es wurden 197 mg der rohen Titelverbindung erhalten, welche ohne weitere Aufreinigung in der Folgeraktion eingesetzt wurde.

LC-MS (Methode 5): R, = 1.42 min; m/z = 584 (M+Η) ⁺ , 528 (M-C ₄ H ₈ +H) ⁺ .

Beispiel 87A

Methyl-7-[(cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H- l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}- acetyl)amino]heptanoat

Eine Lösung von 72 mg (0.18 mmol) Cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H-l,3,4-oxa- diazin-4-yl)methyl]phenyl}essigsäure (Enantiomer 2), 30 mg (0.15 mmol) Methyl-7-amino- heptanoat-Ηydrochlorid, 87 mg (0.23 mmol) ΗATU und 0.8 ml Pyridin in 3.2 ml DMF wurde über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Nach Beendigung der Reaktion wurde der Ansatz auf Eis- wasser gegossen, die Phasen getrennt und die wässrige Phase dreimal mit tert.-Butyl-methy lether extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet, und nach Filtration wurde das Lösungsmittel im Vakuum bis zur Trockene entfernt. Das erhaltene Rohprodukt wurde über präparative RP-HPLC gereinigt. Es wurden 13 mg (0.02 mmol, 13% d. Th.) der Titelverbindung als farbloses Öl erhalten.

LC-MS (Methode 4): R, = 2.79 min; m/z = 534 (M+H) ⁺ .

In Analogie zu Beispiel 85A wurden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Verbindungen erhalten:

Beispiel Name / Struktur / Edukte Analytische Daten

88A Methyl-4-[(cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6- LC-MS (Methode 4): dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl } - R, = 2.62 min; m/z = 492 acety l)amino] butanoat (M+Η) ⁺ .

(aus Cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-

4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl } essigsaure

(Enantiomer 2) und Methyl-4-aminobutanoat-

Ηydrochlorid)

89A Methyl-5-[(cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6- LC-MS (Methode 4): dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl } - R, = 2.62 min; m/z = 506 acetyl)amino]pentanoat (M+Η) ⁺ .

(aus Cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-

4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl } essigsaure

(Enantiomer 2) und Methyl-5-aminopentanoat-

Ηydrochlorid) Beispiel Name / Struktur / Edukte Analytische Daten

9OA Methyl-6-[(cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6- LC-MS (Methode 4): dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl } - R ₄ = 2.70 min; m/z = 520 acetyl)amino]hexanoat (M+Η) ⁺ .

(aus Cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-

4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}essigsäure

(Enantiomer 2) und Methyl-6-aminohexanoat-

Ηydrochlorid)

91A Methyl-6-[(5,5,5-trifluor-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6- LC-MS (Methode 2): dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methyl]pheny 1 } - R, = 2.24 min; m/z = 548 pentanoyl)amino]hexanoat (M+Η) ⁺ .

(aus 5,5,5-Trifluor-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-

4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl } pentansäure und Methyl-6-aminohexanoat-Ηydrochlorid) 616

Ausfuhrungsbeispiele:

Allgemeine Vorschrift 3: Spaltung von fert.-Butylestern zu den entsprechenden Carbonsäuren

Zu einer Lösung des ter/.-Butylesters in Dichlormethan (Konzentration 0.1 bis 1.0 mol/1; zusätzlich optional ein Tropfen Wasser) wird bei 0 ⁰ C bis RT tropfenweise Trifluoressigsäure (TFA) hin- zugefügt, bis ein Verhältnis Dichlormethan/TFA von ca. 2:1 bis 1 :2 erreicht ist. Die Reaktionsmischung wird 1-18 h bei RT gerührt (gegebenenfalls wird die Mischung auf 40 ⁰ C erwärmt, bis vollständiger Umsatz erreicht ist) und dann im Vakuum eingeengt. Das Reaktionsprodukt kann, falls erforderlich, durch Kristallisation aus Wasser/Acetonitril-Gemischen oder durch präparative RP-HPLC (Eluent: Acetonitril/Wasser-Gradient) gereinigt werden.

Die folgenden Beispiele wurden gemäß der Allgemeinen Vorschrift 3 hergestellt:

Beispiel Name / Struktur / Ausgangsmaterial Analytische Daten

(+)-6-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6- LC-MS (Methode 3): R, = dihydro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}- 1.37 min; m/z = 534 (M+Η) ⁺ . acetyl]amino}-2,2-dimethylhexansäure

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ): δ = 12.00 (br. s, IH), 7.95 (t, IH), 7.79 (d, 2H), 7.51-7.42 (m, 3H), 7.31 (d, 2H), 7.27 (d, 2H), 4.90 (s, 2H), 4.34 (s, 2H), 3.11 (d, IH), 3.09-3.02 (m, IH), 2.88- 2.80 (m, IH), 2.51-2.45 (m, IH), 1.76-1.66 (m, IH), 1.63- aus (+)-6-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl- 1.24 (m, 10H), 1.23-1.09 (m, 5 ,6-dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-y l)methy 1] phenyl } - 4H), 1.01 (s, 6H), 0.95-0.80 acetyl]amino}-2,2-dimethylhexansäure-tert.-butylester (m, 2H).

[α] _D ² ° = +15.2°, c = 0.520, Chloroform.

l-(4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6- LC-MS (Methode 2): R, = dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl } - 2.22 min; m/z = 546 (M+Η) ⁺ . acetyl]amino}pentyl)cyclopropancarbonsäure

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO- dβ): δ = 11.99 (s, IH), 7.80- 7.75 (m, 3H), 7.53-7.43 (m, 3H), 7.31 (d, 2H), 7.27 (d, 2H), 4.90 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 3.67 (m, IH), 3.09 (d, IH), 2.52-2.46 (m, IH), 1.77- 1.67 (m, IH), 1.66-1.28 (m, HH), 1.25-1.15 (m, IH), aus (+)-l-(4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl- 1.01 (m, 2H), 0.94-0.85 (m,

5,6-dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-y l)methy l]phenyl } - IH), 0.89 (d, 3H), 0.64 (m, acetyl]amino}pentyl)cyclopropancarbonsäure- 2H). tert.-butylester (Diastereomer 1) Beispiel Name / Struktur / Ausgangsmaterial Analytische Daten

(+)-l-(4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6- LC-MS (Methode 2): R, = dihydro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}- 2.25 min; m/z = 546 (M+Η) ⁺ . acetyl]amino}pentyl)cyclopropancarbonsäure

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ): δ = 11.92 (s, IH), 7.80- 7.74 (m, 3H), 7.53-7.43 (m, 3H), 7.31 (d, 2H), 7.28 (d, 2H), 4.90 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 3.65 (m, IH), 3.09 (d, IH), 2.52-2.46 (m, IH), 1.75- 1.65 (m, IH), 1.62-1.10 (m, 12H), 0.99 (d, 3H), 0.94-0.85 aus (+)- 1 -(4- { [2-Cyclopentyl-2- {4-[(5-oxo-2-phenyl- (m, IH), 0.87 (s, 2H), 0.59

5 ,6-dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methyl] pheny 1 } - (dq, 2H). acetyl]amino}pentyl)cyclopropancarbonsäure-

[α] _D ²⁰ = +22.1°, c = 0.490, ter/.-butylester (Diastereomer 2) Chloroform.

(+)-l-(4-{[3-Methyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6- LC-MS (Methode 2): R, = dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-y l)methyl] phenyl } - 2.15 min; m/z = 520 (M+Η) ⁺ . pentanoy 1] amino } buty Ocyclopropancarbonsäure

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ): δ = 7.96 (t, IH), 7.77 (d, 2H), 7.47 (m, 3H), 7.28 (t, 4H), 4.90 (s, 2H), 4.83 (s, 2H), 3.06 (d, 2H), 2.80 (m, IH), 2.06 (m, IH), 1.47 (m, IH), 1.36 (m, 2H), 1.29 (m, 4H), 1.09 (m, IH), 0.97 (m, 2H), 0.87 (t, 3H), 0.56 (m, aus (+)-l-(4-{[3-Methyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6- 5H). dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl } -

[α] _D ²⁰ = +5.5°, c = 0.495, pentanoyljaminojbuty^cyclopropancarbonsäure- tert.-butylester Chloroform. R, =

(t,

2H).

= = 520

Beispiel 8 und Beispiel 9

(+)-6-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4 H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]- phenyl}acetyl]amino}heptansäure (Diastereomer 1 und 2)

Das in Beispiel 7 erhaltene Diastereomerengemisch (50 mg) wurde durch präparative ΗPLC an chiraler Phase aufgetrennt [Säule: Daicel Chiralpak OJ-Η, 5 μm, 250 mm x 20 mm; Injektionsvolumen: 0.6 ml; Eluent: 70% /so-Ηexan / 30% Ethanol; Fluss: 20 ml/min; Temperatur: RT; De- tektion: 230 nm]:

Beispiel 8 (Diastereomer 1):

Ausbeute: 21.8 mg

LC-MS (Methode 3): R, = 1.32 min; m/z = 520 (M+Η) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 11.91 (br. s, IH), 7.79-7.71 (m, 3H), 7.52-7.42 (m, 3H), 7.31 (d, 2H), 7.27 (d, 2H), 4.91 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 3.63 (m, IH), 3.10 (d, IH), 2.52-2.46 (m, IH), 2.00 (t, 2H), 1.75-1.68 (m, IH), 1.65-1.25 (m, 10H), 1.05-0.98 (m, 2H), 1.00 (d, 3H), 0.93-0.82 (m, IH).

[α] _D ²⁰ = +13.0°, c = 0.250, Chloroform.

Beispiel 9 (Diastereomer 2):

Ausbeute: 22.7 mg

LC-MS (Methode 4): R ₄ = 2.53 min; m/z = 520 (M+H) ⁺ . ¹ H-NMR (500 MHz, CDCl ₃ ): δ = 7.83 (d, 2H), 7.48-7.29 (m, 7H), 5.22 (br. d, IH), 4.93 (s, 2H), 4.78 (s, 2H), 3.92 (m, IH), 2.98 (d, IH), 2.58-2.50 (m, IH), 1.95-1.88 (m, IH), 1.70-1.51 (m, 5H), 1.50-1.37 (m, 4H), 1.33-1.20 (m, 4H), 1.00 (d, 3H), 1.00-0.95 (m, IH).

[α] _D ²⁰ = +5.0°, c = 0.265, Chloroform.

Allgemeine Vorschrift 4: Hydrolyse von Methyl- oder Ethylestern zu den entsprechenden Carbonsäuren

Zu einer Lösung des Methyl- oder Ethylesters in THF, THF/Methanol oder THF/Ethanol (Konzentration ca. 0.05 bis 0.5 mol/1) werden bei 0°C bis RT 1.5 bis 5 eq. Lithiumhydroxid gegeben. Die Mischung wird für einen Zeitraum von 0.5-18 h gerührt (dabei Erwärmung auf RT) und dann mit I N Salzsäure neutralisiert oder schwach angesäuert. Kommt es dabei zum Ausfallen eines Feststoffs, kann das Produkt durch Filtration, Waschen mit Wasser und Trocknen im Hochvakuum isoliert werden. Alternativ wird die Zielverbindung direkt aus dem Rohprodukt oder nach extraktiver Aufarbeitung mit Dichlormethan oder Ethylacetat durch präparative RP-HPLC isoliert (Eluent: Wasser/Acetonitril-Gradient).

Die folgenden Beispiele wurden gemäß der Allgemeinen Vorschrift 4 hergestellt:

Beispiel Name / Struktur / Ausgangsmaterial Analytische Daten

10 (+)-6-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6- LC-MS (Methode 4): R ₁ = dihydro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}- 2.51 min; m/z = 520 (M+Η) ⁺ . acetyl]amino}-2-methylhexansäure (Diastereomer 1)

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO- d ₆ ): 12.00 (br. s, IH), 7.95 (t, IH), 7.78 (d, 2H), 7.53-7.43 (m, 3H), 7.30 (d, 2H), 7.27 (d, 2H), 4.91 (s, 2H), 4.84 (s, 2H), 3.11 (d, IH), 3.10-3.02 (m, IH), 2.53-2.46 (m, IH), 2.22 (m, 2H), 1.75-1.65 (m, IH), 1.62-1.15 (m, 12H), aus (+)-6-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6- 0.99 (d, 3H), 0.95-0.84 (m, dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl } - IH). acetyl]amino}-2-methylhexansäureethylester

[α] _D ²⁰ = +l l°, c = 0.405,

(Diastereomer 1) Chloroform. Beispiel Name / Struktur / Ausgangsmaterial Analytische Daten

11 (+)-6-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6- LC-MS (Methode 2): R ₄ = dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl } - 2.12 min; m/z = 520 (M+Η) ⁺ . acetyl]amino}-2-methylhexansäure {Diastereomer 2)

¹ H-NMR (500 MHz, CDCl ₃ ): δ = 7.85 (d, 2H), 7.48-7.23 (m, 7H), 5.50 (br. s, IH), 4.94 (s, 2H), 4.79 (s, 2H), 3.28-3.12 (m, 2H), 2.99 (d, IH), 2.63-2.52 (m, IH), 2.43- 2.33 (m, IH), 2.00-1.91 (m, IH), 1.68-1.31 (m, 8H), 1.30- 1.05 (m, 6H), 1.04-0.93 (m, aus (+)-6-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6- IH). dihydro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}-

[α] _D ²⁰ = +20°, c = 0.255, acetyl]amino}-2-methylhexansäureethylester Chloroform.

{Diastereomer 2)

Beispiel 12

c/5/fra«5-l-[(4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5, 6-dihydro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)- methyl]phenyl}acetyl]amino}but-l-en-l-yl]cyclopropancarbons� �ure

Zu einer Lösung von 120 mg (0.215 mmol) c/V/ra«5-l-[4-{[(+)-2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2- phenyl-Sjό-dihydro^H-l^^-oxadiazin^-y^methylJphenylJacetylJ aminoJbut-l-en-l-ylJcyclo- propancarbonsäureethylester in 0.23 ml TΗF und 0.56 ml Ethanol wurden 86 mg (2.15 mmol) Natriumhydroxid gegeben. Die Suspension wurde 20 min bei RT gerührt und dann mit 1 N Salzsäure schwach angesäuert. Es wurde dreimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden mit gesättigter wässriger Ammoniumchlorid-Lösung gewaschen, über Magnesiumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Es wurden 112 mg der Zielverbindung als czV/rαtts-Isomerengemisch isoliert.

Das erhaltene c/s/fra?«-Gemisch wurde anschließend durch präparative HPLC aufgetrennt [Säule: Kromasil 100 C 18, 5 μm, 250 mm x 20 mm; Injektionsvolumen: 0.7 ml; Eluent: 40% 0.2%-ige Trifluoressigsäure / 60% Acetonitril; Fluss: 25 ml/min; Temperatur: 40 ⁰ C; Detektion: 210 nm]. Ausgehend von 112 mg Stereoisomerengemisch wurden 66 mg des c/s-Isomeren (siehe Beispiel 13) und 11 mg des /ra«s-Isomeren (siehe Beispiel 14) erhalten.

Beispiel 13

cw-l-[(lZ)-4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-di hydro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)- methyl]phenyl}acetyl]amino}but-l-en-l-yl]cyclopropancarbons� �ure

LC-MS (Methode 4): R, = 2.52 min; m/z = 530 (M+Η) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 7.98 (t, IH), 7.77 (d, 2H), 7.46 (m, 3H), 7.28 (q, 4H), 5.50 (d, IH), 5.40 (m, IH), 4.90 (s, 2H), 4.82 (s, 2H), 3.09 (m, 2H), 2.90 (m, IH), 2.47 (m, IH), 2.15 (m, 2H), 1.69 (m, IH), 1.62-1.34 (m, 4H), 1.28 (m, IH), 1.22 (q, 2H), 1.16 (m, IH), 0.88 (m, IH), 0.77 (q, 2H).

Beispiel 14

?ra«5-l-[(l^)-4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5, 6-dihydro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)- methyl]phenyl}acetyl]amino}but-l-en-l-yl]cyclopropancarbons� �ure

LC-MS (Methode 4): R, = 2.50 min; m/z = 530 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ = 7.91 (t, IH), 7.77 (d, 2H), 7.46 (m, 3H), 7.28 (q, 4H), 5.99 (d, IH), 5.17 (m, IH), 4.90 (s, 2H), 4.83 (s, 2H), 3.07 (m, 2H), 2.87 (m, IH), 2.45 (m, IH), 2.03 (q, 2H), 1.69 (m, IH), 1.62-1.26 (m, 5H), 1.20 (d, 2H), 1.18 (m, IH), 0.88 (m, IH), 0.85 (q, 2H).

Beispiel 15

(-)-/ra«5-l-[(2 _J £)-4-{[(2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihyd ro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)- methy l]pheny 1 } acety 1] amino } but-2-en- 1 -y 1] cyclopropancarbonsäure

Zu einer Lösung von 61 mg (0.104 mmol) (-)-?ra«5-l-[(2£)-4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(5-oxo-2- phenyl-5,6-dihydro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}ace tyl]amino}but-2-en-l-yl]cyclopro- pancarbonsäure-tert.-butylester in 0.1 ml Dichlormethan wurden bei RT 0.12 ml Trifluoressigsäure getropft. Die Mischung wurde 1 h bei RT gerührt und danach nochmals 0.12 ml Trifluoressigsäure hinzugefügt. Nach weiteren 2 h bei RT wurde die Reaktionsmischung im Vakuum eingeengt und der Rückstand durch präparative RP-ΗPLC (Acetonitril/Wasser-Gradient) gereinigt. Es wurden 42 mg (76.2% d. Th.) der Zielverbindung erhalten. LC-MS (Methode 3): R, = 1.33 min; m/z = 530 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ ): δ = 12.08 (br. s, IH), 8.09 (t, IH), 7.88 (d, 2H), 7.53-7.42 (m, 3H), 7.33-7.26 (m, 4H), 5.53-5.45 (m, IH), 5.38-5.30 (m, IH), 4.91 (s, 2H), 4.83 (s, 2H), 3.70-3.60 (m, IH), 3.49-3.40 (m, IH), 3.18 (m, IH), 2.12 (d, 2H), 1.77-1.15 (m, 7H), 0.98 (m, 2H), 0.96-0.86 (m, IH), 0.62 (m, 2H).

[α] _D ²⁰ = -1.1°, c = 0.53, Chloroform.

Beispiel 16

(-)-CM-l-[(lZ)-4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(6-oxo-3-phenylpyr idazin-l(6H)-yl)methyl]phenyl}- acetyl]amino}but-l -en-1 -yljcyclopropancarbonsäure

90 mg (0.163 mmol) cw-l-[(lZ)-4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(6-oxo-3-phenylpyridazin- l(6H)-yl)- methyl]phenyl}acetyl]amino}but-l-en-l-yl]cyclopropancarbons� �ureethylester wurden in einer Mischung aus 100 μl Wasser, 100 μl TΗF und 100 μl Methanol gelöst und bei 0 ⁰ C mit 17.1 mg (0.406 mmol) Lithiumhydroxid versetzt. Die Mischung wurde auf RT erwärmt. Da keine Umset- zung erkennbar war, wurde das Reaktionsgemisch mit einem größeren Überschuss an Natriumhydroxid versetzt und über Nacht bei RT gerührt. Die Reaktionsmischung wurde dann auf Eiswasser gegeben und mit 1 N Salzsäure schwach angesäuert. Der ausgefallene Feststoff wurde abgesaugt, mehrmals mit Wasser gewaschen und im Hochvakuum getrocknet. Es wurden 78 mg (91.3% d. Th.) der Zielverbindung erhalten.

LC-MS (Methode 5): R, = 1.13 min; m/z = 526 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 12.09 (s, IH), 8.09 (d, IH), 7.98 (t, IH), 7.89 (m, 2H), 7.52- 7.44 (m, 3H), 7.33-7.26 (m, 4H), 7.08 (d, IH), 5.52-5.48 (m, IH), 5.43-5.35 (m, IH), 5.29 (s, 2H), 3.12-3.05 (m, 2H), 2.90 (m, IH), 2.49 (m, IH), 2.20-2.10 (m, 2H), 1.74-1.23 (m, 6H), 1.21 (m, 2H), 1.20-1.12 (m, IH), 0.91-0.84 (m, IH), 0.78 (m, 2H).

[α] _D ²⁰ = -22.9°, c = 0.520, Chloroform.

Beispiel 17

{-)-trans- 1 -[( 1 E)-A- { [2-Cyclopentyl-2- {4-[(6-oxo-3-phenylpyridazin- 1 (6H)-yl)methyl]phenyl} - acety l]am ino } but- 1 -en- 1 -y 1] eye lopropancarbonsäure

11.0 mg (0.020 mmol) /ra«5-l-[(l£)-4-{[2-Cyclopentyl-2-{4-[(6-oxo-3-phenylpyrid azin-l(6H)-yl)- methyl]phenyl}acetyl]amino}but-l-en-l-yl]cyclopropancarbons� �ureethylester wurden in einer Mischung aus 50 μl Wasser, 50 μl TΗF und 50 μl Methanol gelöst und mit 8 mg (0.2 mmol) Natriumhydroxid versetzt. Die Reaktionsmischung wurde 3 h bei RT gerührt, bevor mit Wasser verdünnt und mit 1 N Salzsäure auf pH 2 eingestellt wurde. Die wässrige Phase wurde zweimal mit Ethylacetat extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Der Rückstand wurde in ca. 0.5 ml 1,4-Dioxan aufgenommen, bei -78°C eingefroren und im Hochvakuum lyophilisiert. Es wurden 9.6 mg (91.9% d. Th.) der Zielverbindung erhalten.

LC-MS (Methode 5): R, = 1.12 min; m/z = 526 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ ): δ = 12.18 (br. s, IH), 8.07 (d, IH), 7.95-7.88 (m, 3H), 7.53-7.44 (m, 3H), 7.34-7.27 (m, 4H), 7.09 (d, IH), 5.99 (d, IH), 5.29 (s, 2H), 5.18 (dt, IH), 3.12-3.05 (m, IH), 3.07 (d, IH), 2.48 (m, IH), 2.54-2.46 (m, IH), 2.08-2.02 (m, 2H), 1.75-1.24 (m, 8H), 1.24- 1.16 (m, 2H), 0.91-0.82 (m, 3H).

[α] _D ²⁰ = -12.0°, c = 0.235, Chloroform. Beispiel 18

( 1 - { 3 - [(Cyclopenty 1 { 4- [(5 -oxo-2-pheny 1-5 ,6-dihydro-4H- 1 ,3 ,4-oxadiazin-4-y l)methy 1] pheny 1 } - acetyl)amino]propyl}cyclopropyl)essigsäure

Eine Lösung von 230 mg (0.42 mmol) Methyl-(l-{3-[(cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-di- hydro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}acetyl)amino]pro pyl}cyclopropyl)acetat in 2.8 ml TΗF und 1.4 ml Wasser wurde mit 71 mg (1.69 mmol) Lithiumhydroxid-Monohydrat versetzt und über Nacht bei RT gerührt. Nach vollständiger Umsetzung wurde das TΗF im Vakuum abgezogen, die Reaktionslösung mit Wasser verdünnt und anschließend mit 1 M Salzsäure auf pH 2 gestellt. Der ausgefallene Feststoff wurde abfϊltriert, mit Wasser gewaschen und über Nacht im Vakuum bei 45°C getrocknet. Es wurden 217 mg (0.41 mmol, 97% d. Th.) der Titelverbindung als weißer Feststoff erhalten.

LC-MS (Methode 2): R, = 2.14 min; m/z = 532 (M+Η) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ , δ/ppm): 12.20-11.80 (IH, br. s), 7.92 (IH, t), 7.77 (2H, d), 7.53- 7.42 (3H, m), 7.28 (4H, q), 4.90 (2H, s), 4.83 (2H, s), 3.09 (IH, d), 3.06-2.97 (IH, m), 2.88-2.77 (IH, m), 2.56-2.44 (IH, m), 2.07 (2H, s), 1.75-1.65 (IH, m), 1.64-1.25 (7H, m), 1.23-1.10 (3H, m), 0.94-0.82 (IH, m), 0.34-0.25 (2H, m), 0.20-0.11 (2H, m).

Beispiel 19

6-[(Cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H-l,3,4-o xadiazin-4-yl)methyl]phenyl}acetyl)- amino] hexansäure

Eine Lösung von 160 mg (0.31 mmol) Methyl-6-[(cyclopentyl{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro- 4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}acetyl)amino]hexanoat in 4 ml TΗF und 4 ml Wasser wurde mit 15 mg (0.62 mmol) Lithiumhydroxid-Monohydrat versetzt und über Nacht bei 60 ⁰ C gerührt. Der Ansatz wurde danach mit 1 M Salzsäure auf pH 4 gestellt und zweimal mit Essig- säureethylester extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet und anschließend im Vakuum bis zur Trockene eingeengt. Es wurden 120 mg (0.24 mmol, 77% d. Th.) der Titelverbindung als weißer Feststoff erhalten.

LC-MS (Methode 3): R ₁ = 1.26 min; m/z = 506 (M+Η) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ , δ/ppm): 11.96 (IH, s), 7.92 (IH, t), 7.77 (2H, d), 7.54-7.41 (3H, m), 7.28 (4H, q), 4.90 (2H, s), 4.83 (2H, s), 3.10 (IH, d), 3.07-2.99 (IH, m), 2.89-2.77 (IH, m), 2.52-2.41 (IH, m), 2.12 (2H, t), 1.76-1.65 (IH, m), 1.65-1.25 (9H, m), 1.25-1.10 (3H, m), 0.95- 0.82 (IH, m).

Beispiel 20

1 - { 4- [(Cyclopentyl { 4-[(6-oxo-3 -pheny lpyridazin- 1 (6H)-yl)methy 1] phenyl } acetyl)amino] buty 1 } - cyclopropancarbonsäure

Zu einer Lösung von 197 mg (0.34 mmol) ter/.-Butyl-l-{4-[(cyclopentyl{4-[(6-oxo-3-phenyl- pyridazin-l(6H)-yl)methyl]phenyl}acetyl)amino]butyl}cyclopro pancarboxylat in 10 ml Dichlor- methan wurden 0.52 ml (6.74 mmol) Trifluoressigsäure getropft und die Mischung über Nacht bei RT gerührt. Anschließend wurde die Reaktionslösung im Vakuum bis zur Trockene eingeengt. Der Rückstand wurde über präparative RP-ΗPLC gereinigt. Es wurden 99 mg (0.19 mmol, 56% d. Th.) der Titelverbindung erhalten.

LC-MS (Methode 3): R, = 1.31 min; m/z = 528 (M+Η) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ , δ/ppm): 12.10-1 1.75 (IH, br. s), 8.07 (IH, d), 7.95-7.85 (3H, m), 7.53-7.42 (3H, m), 7.28 (4H, q), 7.08 (IH, d), 5.29 (2H, s), 3.09 (IH, d), 3.07-2.97 (IH, m), 2.89- 2.76 (IH, m), 2.52-2.39 (IH, m), 1.75-1.64 (IH, m), 1.64-1.24 (HH, m), 1.21-1.10 (IH, m), 0.99- 0.93 (2H, m), 0.93-0.82 (IH, m), 0.62-0.50 (2H, m).

Auf analoge Weise wurden die in der folgenden Tabelle aufgeführten Verbindungen erhalten:

s), (IH,

Beispiel 25

(+/-)-6-[(5,5,5-Trifluor-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydr o-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]- phenyl}pentanoyl)amino]hexansäure

Eine Lösung von 109 mg (0.20 mmol) Methyl-6-[(5,5,5-trifluor-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-di- hydro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}pentanoyl)amino] hexanoat in 2 ml TΗF und 1 ml Wasser wurde mit 33 mg (0.80 mmol) Lithiumhydroxid-Monohydrat versetzt und über Nacht bei RT gerührt. Der Ansatz wurde danach mit 1 M Salzsäure auf pH 2 gestellt und zweimal mit Essig- säureethylester extrahiert. Die vereinigten organischen Phasen wurden über Magnesiumsulfat getrocknet und anschließend im Vakuum bis zur Trockene eingeengt. Das Rohprodukt wurde über präparative RP-HPLC gereinigt. Es wurden 59 mg (0.11 mmol, 56% d. Th.) der Titelverbindung als farbloses Öl erhalten.

LC-MS (Methode 2): R, = 2.00 min; m/z = 534 (M+H) ⁺ .

¹ H-NMR (400 MHz, DMSOd ₆ , δ/ppm): 12.20-11.75 (IH, br. s), 8.04 (IH, t), 7.77 (2H, d), 7.53- 7.41 (3H, m), 7.34-7.25 (4H, m), 4.91 (2H, s), 4.85 (2H, s), 3.48 (IH, t), 3.09-2.98 (IH, m), 2.97- 2.85 (IH, m), 2.18-2.00 (5H, m), 1.84-1.71 (IH, m), 1.47-1.36 (2H, m), 1.36-1.27 (2H, m), 1.21- 1.10 (2H, m).

Beispiel 26 und Beispiel 27

6-[(5,5,5-Trifluor-2-{4-[(5-oxo-2-phenyl-5,6-dihydro-4H-l ,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}- pentanoyl)amino]hexansäure (Enantiomer 1 und 2)

52 mg (0.097 mmol) der oben erhaltenen racemischen (+/-)-6-[(5,5,5-Trifluor-2-{4-[(5-oxo-2- phenyl-5,6-dihydro-4H-l,3,4-oxadiazin-4-yl)methyl]phenyl}pen tanoyl)amino]hexansäure wurden mittels präparativer ΗPLC an chiraler Phase weiter aufgetrennt [Säule: Daicel Chiralpak AD-Η, 5 μm, 250 mm x 20 mm; Elutionsmittel: Isohexan/(Isopropanol + 0.2% Trifluoressigsäure + 1% Wasser) 75:25 (v/v); Fluss: 15 ml/min; UV-Detektion: 220 nm; Temperatur: 30 ⁰ C]:

Beispiel 26 (Enantiomer 1):

Ausbeute: 10 mg

R, 6.78 min; Reinheit >99%; >99% ee

[Säule: Daicel Chiralpak AD-Η, 5 μm, 250 mm x 4.6 mm; Elutionsmittel: Isohexan/(Isopropanol + 0.2% Trifluoressigsäure + 1% Wasser) 75:25 (v/v); Fluss: 2 ml/min; UV-Detektion: 220 nm; Temperatur: 25 ⁰ C] ¹ H-NMR (400 MHz, DMSO-d ₆ , δ/ppm): 12.20-11.75 (IH, br. s), 8.04 (IH, t), 7.77 (2H, d), 7.53- 7.41 (3H, m), 7.34-7.25 (4H, m), 4.91 (2H, s), 4.85 (2H, s), 3.48 (IH, t), 3.09-2.98 (IH, m), 2.97- 2.85 (IH, m), 2.18-2.00 (5H, m), 1.84-1.71 (IH, m), 1.47-1.36 (2H, m), 1.36-1.27 (2H, m), 1.21- 1.10 (2H, m).

Beispiel 27 (Enantiomer 2):

Ausbeute: 26 mg

R ₄ 7.41 min; Reinheit >98%; >99% ee (analytische Säule s.o.)

LC-MS (Methode 6): R, = 2.28 min; m/z = 534 (M+H) ⁺ .

B. Bewertung der pharmakologischen Wirksamkeit

Die pharmakologische Wirkung der erfindungsgemäßen Verbindungen kann in folgenden Assays gezeigt werden:

B-I . Gefäßrelaxierende Wirkung in vitro:

Kaninchen werden durch intravenöse Injektion von Thiopental-Natrium narkotisiert bzw. getötet (ca. 50 mg/kg) und entblutet. Die Arteria Saphena wird entnommen und in 3 mm breite Ringe geteilt. Die Ringe werden einzeln auf je einem triangelförmigen, am Ende offenen Häkchenpaar aus 0.3 mm starkem Spezialdraht (Remanium ^® ) montiert. Jeder Ring wird unter Vorspannung in 5 ml- Organbäder mit 37°C warmer, carbogenbegaster Krebs-Henseleit-Lösung folgender Zusammenset- zung gebracht: NaCl 119 mM; KCl 4.8 mM; CaCl ₂ x 2 H ₂ O 1 mM; MgSO ₄ x 7 H ₂ O 1.4 mM; KH ₂ PO ₄ 1.2 mM; NaHCO ₃ 25 mM; Glucose 10 mM; Rinderserumalbumin 0.001%. Die Kontraktionskraft wird mit Statham UC2-Zellen erfasst, verstärkt und über A/D-Wandler (DAS-1802 HC, Keithley Instruments, München) digitalisiert sowie parallel auf Linienschreibern registriert. Kontraktionen werden durch Zugabe von Phenylephrin induziert.

Nach mehreren (allgemein 4) Kontrollzyklen wird die zu untersuchende Substanz in jedem weiteren Durchgang in steigender Dosierung zugesetzt und die Höhe der unter dem Einfluss der Testsubstanz erzielten Kontraktion mit der Höhe der im letzten Vordurchgang erreichten Kontraktion verglichen. Daraus wird die Konzentration errechnet, die erforderlich ist, um die in der Vorkontrolle erreichte Kontraktion auf 50% zu reduzieren (IC ₅₀ -Wert). Das Standard-Applikationsvolu- men beträgt 5 μl. Der DMSO-Anteil in der Badlösung entspricht 0.1%.

Repräsentative Ergebnisse zu den erfindungsgemäßen Verbindungen sind in Tabelle 1 aufgeführt:

Tabelle 1 : Gefaßrelaxierende Wirkung in vitro

B-2. Stimulation der rekombinanten löslichen Guanylatcyclase (sGQ in vitro:

Die Untersuchungen zur Stimulation der rekombinanten löslichen Guanylatcyclase (sGC) durch die erfindungsgemäßen Verbindungen mit und ohne Natriumnitroprussid sowie mit und ohne den Häm-abhängigen sGC-Inhibitor lH-l,2,4-Oxadiazolo[4,3-a]chinoxalin-l-on (ODQ) werden nach der in folgender Literaturstelle im Detail beschriebenen Methode durchgeführt: M. Ηoenicka, E.M. Becker, Η. Apeler, T. Sirichoke, Η. Schroeder, R. Gerzer und J.-P. Stasch, "Purified soluble guanylyl cyclase expressed in a baculovirus/Sf9 System: Stimulation by YC-I, nitric oxide, and carbon oxide", J. Mol. Med. 11_ (1999), 14-23. Die Ηäm-freie Guanylatcyclase wird durch Zugabe von Tween 20 zum Probenpuffer (0.5% in der Endkonzentration) erhalten.

Die Aktivierung der sGC durch eine Prüfsubstanz wird als n-fache Stimulation der Basalaktivität angegeben. Das Ergebnis für Beispiel 1 ist in Tabelle 2 gezeigt:

Tabelle 2: Stimulation (n-fach) der rekombinanten löslichen Guanylatcyclase (sGC) in vitro durch Beispiel 1

[DEA/NO = 2-(NN-Diethylamino)diazenolat-2-oxid; ODQ = lH-l,2,4-Oxadiazolo[4,3-a]chinoxa- lin-l-on].

Aus Tabelle 2 ist ersichtlich, dass eine Stimulation sowohl des Ηäm-haltigen als auch des Ηäm- freien Enzyms erreicht wird. Weiterhin zeigt die Kombination aus Beispiel 1 und 2-(NN-Diethyl- amino)diazenolat-2-oxid (DEA/ΝO), einem ΝO-Donor, keinen synergistischen Effekt, d.h. die Wirkung von DEA/ΝO wird nicht potenziert, wie dies bei einem über einen Ηäm-abhängigen Mechanismus wirkenden sGC-Aktivator zu erwarten wäre. Darüber hinaus wird die Wirkung des erfindungsgemäßen sGC-Aktivators durch den Häm-abhängigen Inhibitor der löslichen Guanylat- cyclase ODQ nicht blockiert, sondern sogar gesteigert. Die Ergebnisse aus Tabelle 2 belegen somit den Wirkmechanismus der erfϊndungsgemäßen Verbindungen als Aktivatoren der löslichen Gua- nylatcyclase.

B-3. Wirkung an rekombinanter Guanylatcyclase-Reporterzelllinie

Die zelluläre Wirkung der erfϊndungsgemäßen Verbindungen wird an einer rekombinanten Guanylat- cyclase-Reporterzelllinie, wie in F. Wunder et al., Anal. Biochem. 339, 104-112 (2005) beschrieben, bestimmt.

Repräsentative Ergebnisse zu den erfindungsgemäßen Verbindungen sind in Tabelle 3 aufgeführt:

Tabelle 3: sGC-aktivierende Wirkung in der CHO-Reporterzelle in vitro

(MEC = minimale effektive Konzentration).

B-4. Stimulation der sGC-Enzymaktivität

Lösliche Guanylatcyclase (sGC) setzt unter Stimulation GTP zu cGMP und Pyrophosphat (PPi) um. PPi wird mit Hilfe des nachfolgend beschriebenen Tests nachgewiesen. Das im Test entstehende Signal nimmt mit fortschreitender Umsetzung zu und dient als Maß für die sGC-Enzym- aktivität unter der gegebenen Stimulation. Zur Durchführung des Tests werden 29 μl Enzymlösung [0-10 nM lösliche Guanylatcyclase (hergestellt nach Hönicka et al., J. Mol. Med. TL, 14-23 (1999)) in 50 mM TEA, 2 mM MgCl ₂ , 0.1% BSA (Fraktion V), 0.005% Brij ^® , pH 7.5] in eine Mikroplatte vorgelegt und 1 μl der zu testenden Substanz (als seriell verdünnte Lösung in DMSO) hinzugegeben. Der Ansatz wird 10 min bei Raumtemperatur inkubiert. Anschließend werden 20 μl Detektionsmix [1.2 nM Firefly-Luciferase {Photinus ^yra/w-Luciferase, Fa. Promega), 29 μM Dehydro-Luziferin (hergestellt nach Bitler & McElroy, Arch. Biochem. Biophys. 72, 358 (1957)), 122 μM Luziferin (Fa. Promega), 153 μM ATP (Fa. Sigma) und 0.4 mM DTT (Fa. Sigma) in 50 mM TEA, 2 mM MgCl ₂ , 0.1% BSA (Fraktion V), 0.005% Brij ^® , pH 7.5] zugegeben. Die Enzymreaktion wird durch Zugabe von 20 μl Sub- stratlösung [1.25 mM Guanosin-5'-triphosphat (Fa. Sigma) in 50 mM TEA, 2 mM MgCl ₂ , 0.1% BSA (Fraktion V), 0.005% Brij ^® , pH 7.5] gestartet und kontinuierlich luminometrisch vermessen. Das Maß der Stimulation durch die zu testende Substanz kann relativ zum Signal der nicht stimulierten Reaktion bestimmt werden.

Durch Zugabe von 25 μM lH-l,2,4-Oxadiazolo[4,3-a]chinoxalin-l-on (ODQ) zur Enzymlösung und anschließende 30-minütige Inkubation wird die Aktivierung der Ηäm-freien Guanylatcyclase untersucht und mit der Stimulation des nativen Enzyms verglichen.

Repräsentative Ergebnisse zu den erfϊndungsgemäßen Verbindungen sind in Tabelle 4 aufgeführt:

Tabelle 4: Aktivierende Wirkung am sGC-Enzym in vitro

(MEC = minimale effektive Konzentration; EC ₅₀ = Konzentration bei 50% der maximalen Wirksamkeit; n.d. = nicht bestimmt).

B-5. Radiotelemetrische Messung von Blutdruck und Herzfrequenz an wachen SH-Ratten

Für die im Folgenden beschriebenen Messungen an wachen SH-Ratten wird ein im Handel erhältliches Telemetriesystem der Firma Data Sciences International DSI, USA, eingesetzt. Das System besteht aus 3 Hauptkomponenten: (7) Implantierbare Sender, (2) Empfanger, die über einen Multiplexer mit einem (3) Datenakquisitionscomputer verbunden sind. Die Telemetrieanlage ermöglicht eine kontinuierliche Erfassung von Blutdruck und Herzfrequenz an wachen Tieren in ihrem gewohnten Lebensraum.

Die Untersuchungen werden an ausgewachsenen weiblichen, spontan-hypertensiven Ratten (SH- Ratten) mit einem Körpergewicht von- >200 g durchgeführt. Die Versuchstiere werden nach Senderimplantation einzeln in Makrolon-Käfigen Typ 3 gehalten. Sie haben freien Zugang zu Standardfutter und Wasser. Der Tag/Nacht-Rhythmus im Versuchslabor wird per Raumbeleuchtung um 6:00 Uhr morgens und um 19:00 Uhr abends gewechselt.

Die eingesetzten Telemetriesender (TAM PA-C40, DSI) werden den Versuchstieren mindestens 14 Tage vor dem ersten Versuchseinsatz unter aseptischen Bedingungen chirurgisch implantiert. Die so instrumentierten Tiere sind nach Abheilen der Wunde und Einwachsen des Implantats wiederholt einsetzbar.

Zur Implantation werden die nüchternen Tiere mit Pentobarbital (Nembutal, Sanofi, 50 mg/kg i.p.) narkotisiert und an der Bauchseite weiträumig rasiert und desinfiziert. Nach Eröffnung des Bauchraumes entlang der Linea alba wird der flüssigkeitsgefüllte Messkatheter des Systems oberhalb der Bifurcation nach cranial in die Aorta descendens eingesetzt und mit Gewebekleber (VetBonD™, 3M) befestigt. Das Sendergehäuse wird intraperitoneal an der Bauchwandmuskulatur fixiert und die Wunde schichtweise verschlossen. Postoperativ wird zur Infektionsprophylaxe ein Antibio- tikum verabreicht (Tardomyocel COMP, Bayer AG, 1 ml/kg s.c).

Versuchsablauf:

Die zu untersuchenden Substanzen werden jeweils einer Gruppe von Tieren (n = 6) per Schlundsonde oral verabreicht. Entsprechend einem Applikationsvolumen von 5 ml/kg Körpergewicht werden die Testsubstanzen in geeigneten Lösungsmittelgemischen gelöst oder in 0.5%-iger Tylose suspendiert. Eine Lösungsmittel-behandelte Gruppe von Tieren wird als Kontrolle eingesetzt.

Die Telemetrie-Messeinrichtung ist für 24 Tiere konfiguriert. Jeder Versuch wird unter einer Versuchsnummer registriert.

Den in der Anlage lebenden instrumentierten Ratten ist jeweils eine eigene Empfangsantenne zugeordnet (1010 Receiver, DSI). Die implantierten Sender sind über einen eingebauten Magnet- Schalter von außen aktivierbar und werden bei Versuchsvorlauf auf Sendung geschaltet. Die ausgestrahlten Signale können durch ein Datenakquisitionssystem (Dataquest™ A.R.T. for Windows, DSI) online erfasst und entsprechend aufgearbeitet werden. Die Ablage der Daten erfolgt jeweils in einem hierfür eröffneten Ordner, der die Versuchsnummer trägt.

Im Standardablauf werden über je 10 Sekunden Dauer gemessen: (/) systolischer Blutdruck (SBP), (2) diastolischer Blutdruck (DBP), (3) arterieller Mitteldruck (MAP) und (4) Herzfrequenz (HR).

Die Messwerterfassung wird rechnergesteuert in 5 Minuten-Abständen wiederholt. Die als Absolutwert erhobenen Quelldaten werden im Diagramm mit dem aktuell gemessenen Barometerdruck korrigiert und in Einzeldaten abgelegt. Weitere technische Details sind in der Dokumentation der Herstellerfirma (DSI) aufgeführt.

Die Verabreichung der Prüfsubstanzen erfolgt am Versuchstag um 9:00 Uhr. Im Anschluss an die Applikation werden die oben beschriebenen Parameter über 24 Stunden gemessen. Nach Versuchsende werden die erhobenen Einzeldaten mit der Analysis-Software (Dataquest™ A.R.T. Analysis) sortiert. Als Leerwert wird der Zeitpunkt 2 Stunden vor Substanz-Applikation angenommen, so dass der selektierte Datensatz den Zeitraum von 7:00 Uhr am Versuchstag bis 9:00 Uhr am Folgetag umfasst.

Die Daten werden über eine voreinstellbare Zeit durch Mittelwertbestimmung geglättet (15 Minuten-Mittelwert, 30 Minuten-Mittelwert) und als Textdatei auf einen Datenträger übertragen. Die so vorsortierten und komprimierten Messwerte werden in Excel-Vorlagen übertragen und tabellarisch dargestellt.

C. Ausführungsbeispiele für pharmazeutische Zusammensetzungen

Die erfindungsgemäßen Verbindungen können folgendermaßen in pharmazeutische Zubereitungen überfuhrt werden:

Tablette:

Zusammensetzung:

100 mg der erfindungsgemäßen Verbindung, 50 mg Lactose (Monohydrat), 50 mg Maisstärke (nativ), 10 mg Polyvinylpyrrolidon (PVP 25) (Fa. BASF, Ludwigshafen, Deutschland) und 2 mg Magnesiumstearat.

Tablettengewicht 212 mg. Durchmesser 8 mm, Wölbungsradius 12 mm.

Herstellung:

Die Mischung aus erfindungsgemäßer Verbindung, Lactose und Stärke wird mit einer 5%-igen Lösung (m/m) des PVPs in Wasser granuliert. Das Granulat wird nach dem Trocknen mit dem Magnesiumstearat 5 Minuten gemischt. Diese Mischung wird mit einer üblichen Tablettenpresse verpresst (Format der Tablette siehe oben). Als Richtwert für die Verpressung wird eine Presskraft von 15 kN verwendet.

Oral applizierbare Suspension:

Zusammensetzung:

1000 mg der erfindungsgemäßen Verbindung, 1000 mg Ethanol (96%), 400 mg Rhodigel ^® (Xanthan gum der Firma FMC, Pennsylvania, USA) und 99 g Wasser.

Einer Einzeldosis von 100 mg der erfindungsgemäßen Verbindung entsprechen 10 ml orale Suspension.

Herstellung:

Das Rhodigel wird in Ethanol suspendiert, die erfindungsgemäße Verbindung wird der Suspension zugefügt. Unter Rühren erfolgt die Zugabe des Wassers. Bis zum Abschluß der Quellung des Rhodigels wird ca. 6 h gerührt. Oral applizierbare Lösung;

Zusammensetzung:

500 mg der erfindungsgemäßen Verbindung, 2.5 g Polysorbat und 97 g Polyethylenglycol 400. Einer Einzeldosis von 100 mg der erfindungsgemäßen Verbindung entsprechen 20 g orale Lösung.

Herstellung:

Die erfindungsgemäße Verbindung wird in der Mischung aus Polyethylenglycol und Polysorbat unter Rühren suspendiert. Der Rührvorgang wird bis zur vollständigen Auflösung der erfindungsgemäßen Verbindung fortgesetzt.

i.v.-Lösung:

Die erfindungsgemäße Verbindung wird in einer Konzentration unterhalb der Sättigungslöslichkeit in einem physiologisch verträglichen Lösungsmittel (z.B. isotonische Kochsalzlösung, Glucose- lösung 5% und/oder PEG 400-Lösung 30%) gelöst. Die Lösung wird steril filtriert und in sterile und pyrogenfreie Injektionsbehältnisse abgefüllt.