【명세서】

【발명의 명칭】

팔로노세트론을 함유하는 약학 조성물

【기술분야】

본 발명은 팔로노세트론을 포함하는 개선된 안정성을 갖는 약학 조성물， 이의 제조방법， 및 상기 약학 조성물을 포함하는 약제학적 패키지에 관한 것이다.

【배경기술】

시스플라틴을 비롯한 암치료용 화학요법제의 투여 시， 대부분 오심과 구토가 동반된다. 시스플라틴을 투약하면， 1 내지 2 시간부터 구토가 시작되는 즉발성 구토가 시작되고， 18 내지 24시간에서 가라앉은 후, 다시 구토가 진행되면서 48 내지 기시간 정도에 구토 상태가 최고조에 달하는 후속성 구토가 나타난다.

또한， 오심 및 구토는 마취 및 수술 과정 후에 가장 흔하게 나타난다. 수술 후 구토는 탈수， 전해질 블균형， 위 헤르니아 형성 (gastr i c herni at i on) , 상처 파열， 식도루 (esophageal tears) , 근육 피로 등과 같은 심각한 부작용올 야기할 수 있으며, 환자들에게 추가 수술에 대한 불안감을 증가시킨다. 일반적으로， 수술 후 구토는 수술 24시간 내에 발생하며 25 내지 40%의 수술환자에게서 나타난다.

한편， 5— HT3 (5-하이드록시트리프타민) 수용체 길항제에 의해 5-HT3 수용체와 관련된 대뇌의 기능을 길항 작용함으로써 구토를 치료할 수 있다.

1세대 5-HT3 길항제로 분류되는 온단세트론이나 그라니세트론은 즉발성 구토에는 효과가 좋으나 후속성 구토 예방에는 효과가 적다. 따라서 화학치료 또는 방사선 치료를 시작하기 직전에 정맥 주사제를 한번 또는 그 이상 투여하여야 하며， 그 이후에도 후속성 구토를 억제하기 위하여 정제나 엘릭실제와 같은 경구제를 지속적으로 투여하여야 하는 문제가 있다. 또한 일부 항암 화학요법제는 단 한번의 투여에 의해서도 일정기간 이상 구토를 유발하기 때문에， 구토의 위험이 실제적으로 가라앉을 때까지 매일 5-HT3 길항제를 투여하여야 한다.

미국 특허 제 5 ,202 ,333호에서 팔로노세트론과 같은 Bridged bicyclic amine substituent를 포함하는 삼환계 5-HT3 수용체 길항제를 포함한 정맥주사용 조성물올 개시하고 있다. 이 문헌에서는 상기 삼환계 5-HT3 수용체 길항제와 일반적 투여량을 체중 1kg당 lng 내지 lmg, 바람직하게는 10 내지 100,000ng의 범위로 개시하고 있다. 이 특허에서 팔로노세트론 염산염， 덱스트로즈일수화물， 구연산일수화물, 수산화나트륨과 주사용수로 구성된 조성물을 개시하고 있으나， 약학적으로 유용한 보관 안정성을 확보하지 못하였다는 문제점이 있다.

팔로노세트론염산은 현재 AL0XI ^® 라는 상품명으로 판매되고 있다. 이 제품은 일회 투여용 정맥 주사용 액제로서， 1 바이알당 5ml 또는 1.5ml이 담겨있다. 각 5ml 바이알은 팔로노세트론 0.25mg, 만니를 207.5mg, 구연산 완충제， 및 다이소듐이디티에이를 포함하고 있으며， 1.5ml 바이알은 팔로노세트론 0.075mg, 만니를 83mg, 구연산완충제， 및 다이소듐이디티에이를 포함하고 있다.

한국특허 제 10-1113084호 및 제 10-1113087호에서 팔로노세트론， 만니를， 시트레이트 버퍼 및 킬레이팅제로서 0.005 내지 l.Omg/ml 의 EDTA(ethylenediaminetetraacetic acid)를 포함하고 pH 4 내지 6인 약학적으로 안정한 조성물을 개시하고 있다. 상기 문헌에는 팔로노세트론를 포함하는 약학 조성물은 안정성 확보를 위해 킬레이팅제로서 다이소듐이디티에이 또는 EDTA를 포함하고 있다. EDTA는 혈류로부터 납， 카드뮴， 수은과 같은 중금속을 포함한 독소를 배출시킴으로써 급만성 납중독을 치료하는데 사용되고 있다 (킬레이션 요법; chelation therapy) . EDTA 킬레이션 요법은 미국 FDA에 의해 납 및 중금속 중독에 대한 치료법으로 승인되어 있으며, 고칼슘혈증의 웅급 치료 및 디기탈리스 (Digitalis) 독성과 연관된 심실 부정맥의 조절을 위해 사용되고 있다. 그러나 EDTA는 가장 일반적인 부작용으로 주사부위에 작열감 (burning sensat i on)을 유발할 뿐만 아니라， 일부 사람들은 EDTA에 대해 알러지 반응을 나타낼 수 있다ᅳ 그 밖에도 심각한 부작용으로는 저혈당， 칼슴농도 감소， 두통, 구역， 저혈압， 신부전， 기관손상， 불규칙한 심장박동, 발작 또는 심지어 사망까지 보고된 바 있다.

팔로노세트론을 포함한 조성물이 약학적으로 유효하게 적용되기 위해서는 팔로노세트론의 안정성을 향상시켜 약학적으로 사용 가능한 기간을 확보할 수 있어야 한다. 그러므로 약학적으로 유효한 보관 안정성을 확보한 팔로노세트론 제제의 개발은 여전히 요구된다.

【발명의 상세한 설명】 【기술적 과제】

따라서， 본 발명은 팔로노세트론의 안정성이 증진된 약학 조성물을 제공하는 것을 목적으로 한다.

본 발명의 추가 목적은， 약제학적으로 유의한 안정성을 확보하여 장기간 보관이 가능하며， 사후 멸균이 허용되는 팔로노세트론의 약학 조성물을 제공하는 것이다.

또한， 본 발명은 팔로노세트론 및 /또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염과 수성 매질을 포함하며， 다이소듐이디티에이 등과 같은 킬레이팅제를 포함하지 않으면서 팔로노세트론의 안정성을 증가시킨 액상 약학 조성물 및 이의 제조 방법을 제공하고자 한다.

【기술적 해결방법】

본 발명의 일구현예는 활성성분으로 팔로노세트론 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을， 팔로노세트론으로서 0.01 내지 0.5mg/ml의 농도로 포함하며， 킬레이팅제를 포함하지 않으며， 보관 기간 동안 총 중금속의 함량이 50ppm 이하로 유지되는 약학 조성물올 제공한다. 상기 약학 조성물은 허용가능한 수성 담체를 추가로 포함할 수 있으며， 완층제， 등장화제 또는 이들의 흔합물을 추가로 포함할 수 있으며, 상기 조성물의 pH는 바람직하게는 4 내지 6일 수 있다.

상기 약학 조성물은 액상 제제 또는 동결건조 제제일 수 있으며， 경구 또는 비경구 투여용일 수 있으며， 바람직하게는 비경구 투여용일 수 있다.

본 발명의 또다른 일구현예는 완층제, 등장화제 또는 이들의 흔합물과， 약학적으로 허용 가능한 수성 담체를 포함하는 수용액을 제조하고,

상기 수용액을 킬레이트 수지로 처리하여 중금속 함량을 50ppm 이하로 조절하고 ,

활성성분으로 팔로노세트론 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 상기 수용액 또는 상기 중금속 함량이 조절된 수용액에 첨가하는 단계를 포함하는，

보관 기간 동안 총 중금속의 함량이 50ppm 이하로 유지되는 약학 조성물의 제조방법에 관한 것이다.

상기 약학 조성물의 제조방법에서， 킬레이트 수지는 직접 약학 조성물과 접촉하거나 킬레이트 수지가 충진된 칼럼에 약학 조성물을 통과시켜 수행할 수 있다. 본 발명의 일구현예에 따른 약학 조성물의 제조방법은， 멸균단계 및 동결건조단계로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 단계를 추가로 포함할 수 있다.

본 발명의 추가 일구현예는 약제학적으로 적합한 용기와, 상기 활성성분으로 팔로노세트론 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 함유하는 약학 조성물을 포함하는 약제학적 패키지에 관한 것이다. 【발명의 실시를 위한 최선의 형태】 이하에서， 본 발명을 더욱 자세히 설명하고자 한다.

본 발명의 일 예에서， 유효성분으로서 팔로노세트론 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염들로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 약학 조성물이 제공된다.

팔로노세트론은 삼환계 5-HT3 수용체 길항제로서 항구토제로서 사용되며， 오심 및 /또는 구토에 대하여 예방 및 /또는 치료 효과를 갖는다. 특히， 팔로노세트론은 수술 후, 항암치료 후， 방사선 치료 후 발생하는 구토에 대한 항구토제로서 유용하다. 팔로노세트론의 화학명은 s5)-2- [(3S)-l-azabicyclo[2.2.2]oct -3-y 1] -2, 3, 3a, 4, 5， 6-hexahydro- IH—

benz [ de] i soqu i no 1 i n-l-one (C ₁₉ H ₂₄ N ₂ 0)이고， 분자량은 296.407 g/mol이며， 다음의 구조를 갖는다.

[화학식 1]

이 중에서 팔로노세트론 염산염은 화학명이 (3aS)-2-[(S)_l- azabicyclo[2.2.2]oct-3-yl]-2,3,3a,4,5, 6-hexahydr o- 1-oxo- H—

benz [ i/e]i soqu i no line hydrochloride (Ci ₉ H ₂₄ N ₂ ().HCl)이고， 분자량이 332.87 g/mol이다.

상기 팔로노세트론 또는 이의 약학적으로 허용 가능한 염은 2세대 5- HT3 길항제로 분류되며, 반감기가 40시간 이상이고， 5-HT3 수용체에 장시간 결합하여 보다 장시간 효과를 발휘할 수 있기 때문에， 후속성 구토 억제 효과가 다른 1세대 5-HT3 수용체 길항제 보다 10배 가량 우수하다. 세포 독성 항암제 등과 같은 화학 요법제 투여， 방사선 치료， 및 /또는 외과 수술 후 동반되는 오심 및 /또는 구토의 예방 및 /또는 치료에 효과적으로 적용 가능하다.

그러나, 팔로노세트론은 액상 매질에서 빛이나 산소 등에 의해 쉽게 산화되어 분해되므로 안정성이 매우 취약하여 약물의 안정성을 확보할 필요가 있다. 특히， 산화반웅은 액상 매질에 존재하는 바륨, 망간， 아연， 구리， 철， 납, 니켈 또는 크름 등의 중금속에 의해 더욱 촉진되는 것으로 알려져 있다. 상기 중금속의 흔입은 팔로노세트론 자체에 포함되어 있을 수도 있고， 액상 제제의 제조과정에서 첨가되는 완충제 및 등장화제 등의 부형제로부터 흔입될 수 있으며ᅳ 용해， 층진 및 포장 등의 제조 공정에서도 중금속이 흔입될 수 있다.

따라서， 유효성분인 팔로노세트론의 산화 반웅 및 /또는 미량의 중금속에 의한 산화 반웅 촉진을 효과적으로 방지하기 위해 미량의 중금속을 제거하거나 흔입을 방지할 필요성이 있다.

상기 중금속의 예는 바륨， 망간， 아연， 구리， 철, 납, 니켈 및 크롬으로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상을 포함한다.

본 발명의 일예에서， 팔로노세트론을 포함하는 약학 조성물을 팔로노세트론 수용액 또는 팔로노세트론을 제외한 부형제 수용액을 킬레이트 수지로 처리하여 중금속 함량을 감소시킬 수 있다. 이에， 중금속 함량을 적절한 범위로 조절함으로써 팔로노세트론 함유 제제가 보관 안정성이 우수함은 물론이고 즉발성 구토뿐 아니라 후속성 구토에도 안정적인 효과를 보이는 항구토제의 제조를 가능하도록 한다.

본 발명의 일예에서， 팔로노세트론을 포함하는 약학 조성물은 약제학적으로 의미있는 보관 기간 동안에 중금속의 함량은 50ppm 이하， 더욱 바람직하게는 lOppm 이하일 수 있다. ,

본 발명에 따라 중금속 함량이 조절된 팔로노세트론 함유 약학 조성물은 킬레이팅제를 포함하지 않으면서도 장기간 안정하게 보관이 가능하며， 예를 들면, 실온에서 2년 이상 안정한 상태로 유지될 수 있다. 구체적으로， 본 발명에 따른 약학 조성물은 25 ^° C에서 24개월 보관시 팔로노세 론 또는 이의 약학적으로 허용가능한 염, 예를 들면 팔로노세트론 염산염의 함량이 제조시 초기 함량의 95 중량 % 내지 100 중량 %로 유지되는 보관 안정성을 가질 수 있다 _. .

본 발명에 따른 약학 조성물은 상기 활성성분으로 팔로노세트론 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상과， 약학적으로 허용 가능한 수성 담체 및 /또는 완층제, 등장화제 또는 이들의 흔합물을 포함할 수 있다.

본 발명에 일예에서， 소망하는 효과를 유효하게 발휘하기 위하여， 유효성분인 팔로노세트론의 농도는 O . Olmg/ml 내지 0.5mg/ml , 0.03mg/ml 내지 0.2mg/ml , 0.04mg/ml 내지 0.07mg/ml , 또는 약 0.05mg/ml 정도일 수 있다.

팔로노세트론의 약학적으로 허용 가능한 염은 약제학적으로 수용될 수 있는 염 및 바람직한 약리활성을 가지는 염으로서 염산， 브름산, 황산 질산， 인산 등과 같은 무기산으로 형성된 부가염; 또는 아세트산 프로피온산， 핵사노산， 헵타노산， 사이클로펜탄프로피온산， 글리콜산 피루브산, 락트산， 말론산， 숙신산， 말산， 말레산, 푸말산, 타르타르산 시트르산， . 벤조산, 으 (4-하이드록시벤조일)벤조산， 신남산， 만델산 메탄설폰산， 에탄설폰산， 1， 2-에탄디설폰산, 2-하이드록시에탄설폰산 벤젠설폰산， P-클로로벤젠설폰산， 2-나프탈렌설폰산， P-를루엔설폰산 캄포르설폰산， 4-메틸바이사이클로 [2.2.2] 옥트 -2-엔 -1-카르복실산 글루코헵톤산， 4， 4 ' -메틸렌비스 (3-하이드록시— 2—엔 -1-카르복실산) ᅳ 3- 페닐프로피온산， 트리메틸아세트산, 3차 부틸아세트산， 라우릴 황산， 글루콘산， 글루탐산, 하이드록시나프토산， 살리실산, 스테아르산， 무콘산 등과 같은 유기산으로 형성된 부가염을 포함한다.

본 발명에 따른 약학 조성물의 pH는 4 내지 6， 바람직하게는 4.5 내지 5.5， 예를 들면 5일 수 있다. 상기 조성물의 pH 범위를 보다 안정하게 유지하기 위하여， 시트르산 및 시트르산의 염 등과 같은 유기산 완층제를 이용할 수 있다. 상기 완층제는 완충능이 우수한 유기산 완층제일 수 있으며 ᅳ 상기 완층제의 함량은 구연산 완충제를 사용하는 경우， 전체 약학 조성물 기준으로 10mM 내지 lOOmM 정도일 수 있다. 구연산 완층액은 전체 약학 조성물 기준으로 바람직하게는 10 내지 40mM , 보다 바람직하게는 15 내지 30mM로 사용될 수 있다. 상기 등장화제는 만니를， 탁토오스， 덱스트로오스 및 트리할로오스로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상일 수 있으며， 바람직하게는 만니를이다. 만니틀은 전체 약학 조성물 기준으로 10 내지 80 mg/ml , 바람직하게는 20 내지 60 mg/ml , 보다 바람직하게는 40 내지 45 mg/ml로 포함될 수 있다. 본 발명의 일예에서， 상기 조성물은 액상 주사제제일 수 있다. 본 발명에 따른 팔로노세트론 제제를 액상주사제의 경우， 중금속 함량이 조절된 제제를 멸균단계 및 동결건조단계로 이루어지는 1종 이상의 단계를 수행하여 얻어진 멸균제제 또는 동결건조제제일 수 있다. 두 가지 제제 모두 정맥주사하기 위해 액상으로 조제되어야 하므로 액상조제 후에도 충분한 시간 동안 안정성을 유지하는 장점이 있다.

본 발명의 추가 구현예에서， 팔로노세트론 제제의 안정성 향상을 위해 중금속의 함량을 감소시키고자， 활성성분으로 팔로노세트론 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을， 팔로노세트론의 농도가 0.01 내지 0.5mg/ml로 포함하며, 중금속의 함량이 50ppm 이하인 약학 조성물의 제조방법이 제공된다. 상기 제조방법은 팔로노세트론 수용액 또는 팔로노세트론을 제외한 완충제 및 등장화제를 포함한 부형제 수용액에 킬레이트 수지를 처리하여 수행할 수 있다.

구체적으로， 본 발명의 일예는 완층제， 등장화제 또는 이들의 흔합물과, 약학적으로 허용 가능한 수성 담체를 포함하는 부형제 수용액을 제조하고; 상기 부형제 수용액을 킬레이트 수지로 처리하여 중금속 함량을 50ppm 이하로 조절하고; 상기 중금속 함량이 조절된 부형제 수용액에 활성성분으로 팔로노세트론 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 첨가하는 단계를 포함하는， 중금속의 함량이 50ρ ι 이하인 약학 조성물의 제조방법을 제공한다.

또한， 본 발명의 일예는 완층제, 등장화제 또는 이들의 흔합물과， 약학적으로 허용 가능한 수성 담체， 및 팔로노세트론 및 그의 약학적으로 허용 가능한 염으로 이루어진 군에서 선택된 1종 이상을 포함하는 조성물올 제조하고; 상기 조성물을 킬레이트 수지로 처리하여 중금속 함량을 50ppm 이하로 조절하는 단계를 포함하는， 중금속의 함량이 50ppm 이하인 약학 조성물의 제조방법을 제공한다.

상기 제조방법에서 킬레이트 수지의 처리는 킬레이트 수지에 직접 접촉시키거나, 킬레이트 수지가 층진된 칼럼을 통과시켜 수행할 수 있다. 상기 킬레이트 수지는 이미도디아세테이트， 및 폴리아민 등을 치환기로 포함하여 중금속과 킬레이트 결합올 형성할 수 있어 중금속을 효과적으로 제거할 수 있다. 상기 킬레이트 수지의 예는， 현재 시판된 제품으로는 DIAION CR11 (미쓰비시 사) , DIAION CR20(미쓰비시 사)， 및 Eporous MX- 8C (삼양사) 등이 포함된다. DIAION CR11은 스티렌계의 다공성 킬레이트 수지로서 금속이온을 교환기와 킬레이션하여 제거할 수 있고， 강，약산성 양이온교환수지에 비하여 아연， 구리， 철 등과 같은 2가 금속이온의 선택성이 뛰어나다. DIAION CR20은 스티렌계의 다공성 킬레이트 수지로서 중금속에 대한 선택성이 우수하나 알칼리 금속이온 및 알칼리 토금속 이온은 흡착되지 않는 특징이 있다. Eporus MX8C 는 납， 아연， 구리， 니켈， 크롬 등의 일반 중금속을 흡착하는 킬레이트 수지로서 화학적 안정성이 뛰어나며 내구성이 우수하여 폐수처리 및 다양한 용도에 사용된다. 필요에 따라 위에서 언급한 킬레이트 수지를 2종 이상 조합하여 사용할 수 있다. 상기 킬레이트 수지 처리단계는 팔로노세트론 수용액 또는 팔로노세트론을 제외한 완층제 및 등장화제를 포함한 부형제 수용액에 직접 킬레이트 수지를 접촉시키거나 킬레이트 수지가 충진된 통상의 칼럼에 통과시켜 처리할 수 있다.

킬레이트 수지가 층진된 칼럼을 사용하는 경우에는， 상기 수용액으로부터 중금속을 제거하기 위하여 컬럼크기， 주입량 등을 통상적인 방법으로 조절할 수 있다. 이와 같이 팔로노세트론을 포함한 원료물질로부터 유래할 수 있는 중금속을 효과적으로 제거할 수 있으며 팔로노세트론을 포함한 원료물질로부터 유래할 수 있는 중금속의 총량이 본 발명에서 제한하는 양보다 적은 경우 킬레이트 수지 처리를 생략할 수도 있다. 상기 중금속 함량올 조절한 약학 조성물을 제조한 후에， 멸균단계 및 동결건조단계로 이루어지는 군에서 선택된 1종 이상의 단계를 추가로 수행할 수 있다. 특히， 본 발명의 조성물을 주사제제로 제조하는 경우 멸균단계를 추가로 수행한 액상 주사제제를 제조하거나， 멸균 및 동결건조단계를 수행하여 동결건조제품 형태로 유통될 수 있다.

본 발명에 따른 중금속 함량이 조절된 약학 조성물은 중금속이 추가로 흔입되는 것을 방지하는 것이 바람직하다. 구체적 *으로， 약제학적으로 적합한 1차 포장용기를 사용하여야 하며， 예를 들면 보관 기간 동안 용기로부터 중금속이 용출량이 제한되는 플라스틱 용기， 실리콘 등으로 표면처리된 유리 용기 및 중금속 용출량이 제한된 유리용기를 사용하는 것이 바람직하며， 밀봉을 위해 고무마개가 필요한 경우도 이 조건에 적합한 것이 바람직하다. 포장용기 전체로부터 용출되는 중금속량은 50ppm 이하인 것이 바람직하다.

본 발명의 일례에 따르면, 약제학적으로 적합한 1차 포장용기로서 유리 튜빙 바이알 (tubing vial)올 사용할 수 있다. 유리는 투명한 보로실리케이트 유리， 특히 저팽창성 보로실리케이트 유리 ( 1 ow— expansion borosi licate glass)로서， ASTM(½erican Society for Testing and Materials) 타입 1, 클래스 A, USP(US Pharmacopoeia) 타입 1 파우더드 글래스 (USP Type 1 Powdered Glass), USP 아세닉 (USP Arsenic), EP(European Pharmacopoeia) 타입 1 글래스 그레인즈 (테스트 B)(EP Type 1 Glass Grains(Test B))와 EP 아세닉 (EP Arsenic)의 조건을 만족시키는 것일 수 있다.

유리는 Si0 ₂ > 80%, 예를 들어 80~85¾； A1 ₂ 0 ₃ < 5%, 예를 들어 1~5%； Na ₂ 0 + K ₂ 0 < 5%, 예를 들어 1~5%； CaO + MgO < 0.2%, 예를 들어 0¾) 초과 0.2% 미만; B ₂ 0 ₃ > 10%, 예를 들어 10~15%； Fe ₂ 0 ₃ < 0.1%, 예를 들어 0 ⁾ 초과 0.1% 미만을 포함하고, BaO, ZnO, Mn0 _2> Ti0 ₂₎ S0 ₃ 는 포함하지 않는 것일 수 있다. 예를 들어， Si0 ₂ 81%, A1 ₂ 0 ₃ 2%, Na ₂ 0 + K ₂ 0 4%, CaO + MgO < 0.2%， ¾0 ₃ 13%, Fe ₂ 0 ₃ < 0.1%를 포함하고， BaO, ZnO, Mn0 ₂ , Ti¾, S0 ₃ 는 포함하지 않는 것일 수 있다.

유리는 변형점 (strain point) 510 ^° C 미만， 바람직하게는 500 ^° C 이상 510 ^° C 미만， 가장 바람직하게는 505 ^° C； 어닐링점 (annealing point) 550-570 ^° C, 바람직하게는 555~565 ^° C , 가장 바람직하게는 560 ^° C； 연화점 (softening point) 800-900 ^° C , 바람직하게는 800~850 ^° C , 가장 바람직하게는 820 ^° C; 팽창 선형지수 (0-300 ^° C)( linear coefficient of expansion(0-300 ^° C)) 30-40X10 ^"7 , 바람직하게는 30~35X1(T ⁷ , 가장 바람직하게는 33ΧΚΓ ⁷ ; 및 밀도 2.2-2.3 g/cm ³ , 바람직하게는 2.2~2.25 g/cm ³ , 가장 바람직하게는 2.22 g/ _cm ³ 일 수 있다.

유리용기는 아래 표 1과 같은 원소 용출 데이터 (element extraction data)를 가질 수 있다.

【표 1】

(단위: ppm, 121 ^° C 60분간， 20mL 용기 중 고순도 물에서 오토클레이브 후 결과)

유리는 상기 성질 중 하나 이상, 바람직하게는 상기 성질올 모두 만족시키는 것일 수 있다.

본 발명에 따른 약학 조성물은 바이알 또는 ¾플에 충전 및 밀봉한 상태로 사용시까지 보관 및 /또는 유통될 수 있다. 상기 보관은 무균 (멸균) 환경 (예컨대 무균실)에서 수행되는 것일 수 있다. 상기 바이알 또는 앰풀은 직사광선에 의한 광화학반웅 및 이에 의한 유효성분의 분해 및 /또는 변성을 방지하기 위하여 갈색 용기를 사용하거나 암소에 보관할 수 있다. 예컨대， 상기 액상 약학 조성물이 무균 주사용 제형으로 제제화된 것인 경우， 유리 또는 플라스틱 재질의 바이알 또는 ¾플에 층전 및 밀봉한 상태로 무균 (멸균) 환경 (예컨대 무균실)에서 보관 및 /또는 유통될 수 있다. 또한， 직사광선에 의한 광화학반웅을 방지하기 위하여 갈색 용기를 사용하거나 암소에 보관할 수 있다.

본 발명에 따른 팔로노세트론 함유 제제는 경구 또는 비경구 투여를 위한 다양한 형태로 제제화될 수 있다. 구체예에서， 상기 액상 약학 조성물은 경구， 정맥내 근육내, 경피， 비강내, 피하, 또는 국소적 투여를 위한 다양한 제형으로 제제화 가능하며， 액체 형태뿐 아니라， 동결건조된 형태로도 제제화될 수 있다. 일반적으로 주사제 제조에 사용되는 주사용수를 사용하여 최종 용적을 맞추고 최종 멸균 과정올 거친 무균 (멸균) 주사용 제형, 예컨대 무균 정맥 주사용 제형으로 제제화될 수 있다. 다른 예에서， 상기 주사용 제형은 용액 주사제뿐 아니라 동결건조된 제형일 수 있으나, 이에 제한되지 않는다. 상기 액상 약학 조성물의 동결건조된 제형은 액상 약학 조성물에서 수성 매질이 제거된 형태로， 상기한 팔로노세트론 함유 약학 조성물과 동일 또는 동등한 범위의 조성을 갖는 것일 수 있다.

【유리한 효과】

본 발명의 팔로노세트론 및 /또는 그의 약학적으로 허용 가능한 염을 포함하는 약학 조성물은， 약제학적으로 유의한 안정성을 확보하여. 장기간 보관이 가능하며， 사후 멸균이 허용되는 팔로노세트론의 제제를 제공할 수 있으며， 다이소듐이디티에이 등과 같은 킬레이팅제를 포함하지 않으면서 팔로노세트론의 안정성을 증가시킨 액상 약학 조성물 및 이의 제조 방법을 제공할 수 있다.

【발명의 실시를 위한 형태】

다음의 실시예에 의하여 본 발명을 더욱 상세히 설명하겠으나， 이는 본 발명을 예시하기 위한 것일 뿐이며, 본 발명이 다음의 실시예로 한정되는 것은 아니다. 실시예 1 : 약학 조성물의 제조

1. 1.킬레이트 수지의 저처리

킬레이트 수지 (DIAION CR11)을 50ml 취하여 컬럼에 층진하고 100배의 정제수로 수세한 후 1N-염산 5( l을 가하여 1시간 동안 처리하였다. 이후 정제수 150ml로 수세하여 준비하였다.

1.2.부형제 수용액의 조제

중금속 용출이 염려되지 않도록 가공된 흔합용기에 시트르산 156mg , 시트르산나트륨 370mg , 및 만니를 4. 15g을 칭량하여 넣고 주사용 정제수를 가하여 용해하여 최종 용적이 100ml이 되도특 하여 혼합액을 제조하였다. ᅳ상기 흔합액을 상기 전처리된 킬레이트 수지 칼럼을 통과시켜 부형제 수용액을 조제하였다. 1.3.팔로노세트론 수용액의 조제 및 층진

상기 실시예 1.2에서 얻어진 부형제 수용액 100ml에 팔로노세트론 염산염 5.6mg을 첨가하여 용해하였다. 상기 용해물을 실리콘으로 내벽이 코팅된 유리 바이알에 층진하여 밀전하고， 121 ^° C에서 30분간 증기 멸균하여 터미날 멸균이 완성되도록 하였다. 실시예 2 : 약학 조성물의 성분 분석

실시예 1에서 팔로노세트론 수용액 주사제를, 40 ^° C에서 6개월 보관 후에 팔로노세트론의 함량 변화 및 유연물질 생성 등 안정성 시험을 실시하였으며 육안으로 불용성 물질의 생성 여부 및 색의 · 변화 등올 관찰하고， 팔로노세트론의 함량 변화 및 유연물질 생성여부는 HPLC로 분석하였으며， 중금속량의 증가여부를 ICP로 분석하였다.

( 1)중금속 함량 분석

분석대상 중금속은 Fe , Cu , Mn, Pb 및 Zn 이었다. 분석방법은 ICP/AES (Inductuvely coupled plasma I Atomic Emission Spectrometer, 모델명: OPTIMA 5300DV, Perkin Elmer사 )를 이용하여 다음과 같은 조건으로 시험하였다.

<기기 조건 >

RF Power ： 1300 watts

Nebulizer Ar Flow ： 0.65 L/min

Plasma Ar Flow ： 15 L/min

Pump Flow rate ： 1.5 mL/min

View Dist . ： 15 mm

Read Delay time: 30 sec 시료 전처리

Microwave digest ion system (모델 ： Mult i wave 3000, 제작사 ： Anton Paar)을 사용하여, 시료 약 100 mg을 정확히 평량하고, 질산 (5 mL)과 과산화수소 (1 mL)의 흔합산으로 약 2시간 동안 완전 acid digestion 시키고 filtration 과정을 거친 후에 최종 50 mL로 mass up 한다. 이때의 모든 전처리 과정은 오염을 피하기 위해 glass 용기가 아닌 Teflon 재질 (metal free)의 용기를 사용해야 한다. 표준 용액 제조 및 측정

무기분석원소 K 전용 Standard (Merck, USA) 1,000 ppm 농도의 표준용액을 이용하여， 시료와 동일하게 전처리 한 흔합산 (sample blank)을 이용하여 알맞게 희석하고 해당 농도들의 검량선을 작성한 후에 ICP 시험을 실시한다. 그 실험결과를 표 1에 나타냈다.

(2) 미지의 유연물질의 HPLC 분석

구체적으로， HPLC 분석은 다음과 같은 조건에서 수행하였다.

1) 조작 a. 검출기 : 자외부흡광광도계 (측정 파장 210 nm)

b. 컬럼: Zorbax SB 5 ym, C8, 250 4.6 mm 또는 동등 이상의 컬럼

c. 컬럼 온도: 실온

d. 이동상: 물과 아세토니트릴의 흔합액 (72:18) 1000 mL에 트리플루오로아세트산 0.67 mL을 넣어 흔합한 후 여과 (0.46 μιη)한다.

e. 유량: 1.0 mL/분

f. 주입량: 80 pL 2) 계산

[수학식 1]

개개의 유연물질의 함량 (%)=

검액 중 미지의 유연물질의 피크면적 / 검액 중 팔로노세트론 염산염의 피크면적 X 100

(3) 기지의 유연물질의 HPLC 분석

기지의 유연물질로서 분석대상은 (2-[(S)-l-azabicyclo[2.2.2]oct-3- yl]-2,4,5,6,-tetr ahydro- ΙΗ-benz [ de] i soqu ί no 1 i ne - l_one hydroch lor ide 과 (3aR)-2- [ (S)-l-azabicyc lo[2.2.2]oct-3yl]-2,3,3a,4,5 _> 6-hexahydro-l- oxo-lH-benz[i/e] isoquinol ine hydrochloride 을 포함한다.

1) 조작

a. 검출기 : 자외부흡광광도계 (측정 파장 238 nm)

b. 컬럼: Chirobiotic V, 5 μηι, 4.6 x 250 mm, Hewelett -Packard c. 이동상: 20 mM/L 초산암모늄 완층액 (pH 6.0)/테트라히드로퓨란 흔합액 (9:1)

d. 컬럼온도: 35 ^° C

e. 유속: 1.2 mL/min

f . 주입량: 200 ill 2) 계산

각 유연물질의 함량은 다음식에 의해 계산한다.

2- [ (S)-l-azabicyc 1 o [ 2.2.2] oct -3— y 1 ] -2， 4 , 5， 6 , -t et rahydro-lH- benz[i/e]isoquinoline -1—one hydrochloride 의 상대반웅인자 (RRF)를 구하고, 기타 유연물질의 RRF는 1로 간주한다.

RRF = 2-[(S)-l-azabicyclo[2.2.2]oct-3-yl]-2,4,5,6,-tetrahydro- ΙΗ-benz [ de] i soqu i no 1 i ne —l—one hydrochloride 의 RF/ (3aR)-2-[(S)-l- azabi eye lo[2.2.2]oct-3yl ]-2,3,33,4,5, 6-hexahydr o— l—oxo— 1H- benzti/e] i soqu i no 1 ine hydrochloride의 RF

[수학식 2]

검량선 : As = M x Cs

M 1

^{■ ~} M ^' ERP

X =

At 1 100

x——— x

M RRP C

각 유연물질의 함량 (%)=

As ： 표준액의 피크면적

Cp ： 표준액의 농도 (mg/mL)

Cs ： 표준액의 함량을 고려한 실제 농도 (mg/mL)

P ： 부분입체이성질체 표준품의 함량 (¾)

X ： 검액 중 유연물질 농도 (mg/mL)

At ： 검액의 유연물질 피크면적

RRF ： 상대 반웅 인자

M ： 검량선의 기울기

C ： 검액의 팔로노세트론 염산염 농도 (mg/mL)

총 유연물질의 양(%)= 가)항의 유연물질 (%) + 나)항의 (4) 함량시험

유연물질시험은 (2)미지의 유연물질의 HPLC 시험법에 따라 분석하고， 팔로노세트론 염산염의 함량은 다음 식에 의해 계산한다.

[수학식 3]

약 1 mL 중 팔로노세트론 (C ₁₉ H ₂₄ N ₂ 0 ： 296.40)의 함량 (mg)=

-« = 30}： s j증習 노세트론 산 화파 ¾g적 a

圍 ϋ:군 ^' sᅳ! o img) X 표준 iᅵ증팥로노세트론 _¾ 산 _¾ 피 _3¾ 적 _ᅵ ^χ °· ^δ904 C ： 팔로노세트론 염산염 표준품의 순도 (%/100)

팔로노세트론 수용액제의 유연물질로 알려진 것으로서， 2-[(S)-l- azabicyclo[2.2.2]oct-3-yl ]-2,4,5,6,-tetrahydro-lH-benz[o'e] isoquinol ine -1-one hydrochloride 과 (3aR)_2-[(S)— l-azabicyclo[2.2.2]oct-3yl ]— 2 , 3 , 3 , 4 , 5 , 6-hexahydro-l-oxo-lH-benz [ de\ isoquinol ine hydrochloride 과 미지의 유연물질들의 증가여부를 확인하였다ᅳ

(5) 불용성 미립자의 생성 여부 및 색의 변화 등올 관찰

광차폐형 자동 미립자 특정장치 (모델명 ： PAMAS -SVSS) 를 이용하여 불용성 미립자의 생성여부를 확인하였으며 육안으로 색상의 변화여부를 확인하였다. 비교예 1

실시예 1.2에서 제조된 부형제 수용액 100ml에, 팔로노세트론 염산염 5.6mg 및 황산구리 24mg을 가하여 용해하였다. 상기 용해물을 유리 바이알에 충진하여 밀전하고, 121 ^° C에서 30분간 증기 멸균하여 터미날 멸균이 완성되도록 하였다.

상기 제조된 제제에 대해서, 실시예 2의 방법과 실질적으로 동일한 방법으로 팔로노세트론의 함량 변화 및 유연물질 생성여부를 HLPC 분석을 수행하고, 중금속량의 증가여부를 ICP로 분석하였다. 그 실험결과를 표 1에 정리하였다. 비교예 2

시트르산 156mg , 시트르산나트륨 370mg , 만니를 4.15g을 칭량하여 넣고 주사용 정제수를 가하여 용해하여 최종 용적이 lOOml이 되도록 하여 부형제 수용액을 제조하고， 실시예 1과는 달리 킬레이트 수지 층진 칼럼을 통과시키지 않았다.

상기 제조된 부형제 수용액 100ml에, 팔로노세트론 염산염 5.6mg을 용해하였다. 상기 용해물을 유리 바이알에 충진하여 밀전하고， 121 ^° C에서 30분간 증기 멸균하여 터미날 멸균이 완성되도록 하였다.

상기 제조된 제제에 대해서, 실시예 2의 방법과 실질적으로 동일한 방법으로 팔로노세트론의 함량 변화 및 유연물질 생성여부를 HLPC 분석을 수행하고， 중금속량의 증가여부를 ICP로 분석하였다. 그 실험결과를 표 2 및 표 3에 정리하였다.

【표 2】

6개월 후 6개월 후 유연물질 (wt%) 미검출 1.30% 미검출 . 1.30% 미지유연물질 (wt%) 0.50% 3.50% 0.50% 3.50% 유연물질 총량 (wt%) ^' 미검출 4.80% 미검출 4.80% 중금속 총량 (ppm) 98ppm 120ppm lOppm 60ppm 불용성 미립자 ( 1.5ml lOmcm 이상: lOmcm 이상: lOmcm lOmcm 이상:

중) 15개 17개 이상: 18개 18개

25 이상: 25' 이상: 25[ m이상： 이상： 3개 5개 1개 3개 색상 무색 투명 무색 투명 무색 투명 무색 투명 상기 표에서 유연물질은 2-[ (S)-l-azabi cyc lo[2.2.2]oct-3ᅳ yl ]- 2 , 4 , 5 , 6- tet r ahydr o ^~ IH-benz [ de] i soqu i no 1 i ne "1ᅳ one hydrochlor ide 및 (3aR)-2- [ (S)-l-azabi cyc 1 o [2.2.2] oct_3y 1 ] -2， 3 , 3a， 4 , 5， 6ᅳ hexahydro-1— ox으 lH-benz [ i/e] i soqu inol ine hydrochlor ide이다.

제제의 6개월 보관기간 동안 실시예의 함량변화는 초기량의 95 wt 내지 110wt% 범위에 있었으며 유연물질 각각은 모두 1% 미만이었으며， 총 유연물질은 2% 미만이었다. 제조 당시 어떤 중금속도 검출되지 않았으며, 보관 기간 동안 총 중금속량은 lOppm 미만이었다.

비교예 1 및 비교예 2에서 유연불질은 시간이 경과함에 따라 꾸준히 증가하였다. 특히， 비교예 1에서 유연물질 각각 1% 이상까지 증가되었으며 총 유연 물질량은 2% 이상이었다. 비교예 1에서 제조 당시 중금속함량은 구리이은 lOOppm 이상이었다. 실시예 3

( 1)시료 제조

아래 표 4와 같은 조성의 시료를 제조하였다. 【표 4]

(2)보관조건 및 기간

고무전과 알루미늄 씰로 밀봉 후 차광， 60 ^° C 하에서 2~3주간 정치하였다.

(3)분석 방법

HPLC로 분석하였다. 가)완충용액 조제

인산이수소나트륨 (Sodium di hydrogen orthophosphate) 3. 1 g 과 트리에틸아민 (Tr i ethylamine) 2.5 mL 을 정확하게 측량하여 1000 mL 용량플라스크에 옮기고 정제 수로 녹인 후 표선올 맞추었다. 이 용액을 인산으로 pH 7.0 土 으 05로 조정하였다. pH 측정 전에 pH 미터기는 1) 6.00 과 2) 8.00 의 표준완충용액으로 보정하였다. 0.45 μ 여과지를 이용하여 여과하고 탈기하였다.

나) 이동상 A 조제

조제된 완층용액을 이동상 A로 이용하였다.

다) 이동상 B 조제 아세토니트릴을 이동상 B로 이용하였다.

* 주의 : 이동상을 조제하고 16시간 이내에 사용하였다.

라) 희석액

완충용액과 아세토니트릴을 50:50(부피비율)으로 균일하게 흔합한

마) 크로마토그래피 조건

컬럼: 150 mmX4.6 mm, 5 卿， Intersil C8 또는 이와 동등한 컬럼유속: 1.0 mL/min

검출기 : UV 파장: 210 nm

주입량: 20 ≠

컬럼온도: 40 ^° C

분석시간: 45분 기울기 용리 프로그램 ： 하기 표 5에 따름

]

바) 총 미확인 유연물질의 양 (%) = 검체의 미확인 유연물질 각각의 피크 면적의 합

÷검체의팔로노세트론피크의면적 x lOO

(4)결과

다음 표 6에서 보이는 바와 같이 EDTANa를 제외한 용액을 W사 와 Y사에서 공급하는 투명한 유리 바이알 및 Daikyo사에서 제공하는 플라스틱 바이알을 1차 포장재로 선택하여 충진하여 밀봉하였다:

60 ^° C에서 2주 보관한 후 총 미확인 유연물질의 양을 확인한 결과 W사 포장재 사용시 0.1~0.3% 이었으며， 타사의 포장재에서 보다 더욱 안정함을 확인하였다. 【표 6】

본 발명에 따른 조성물의 포장재에 따른 총 미확인 유연물질의 양 (%)

OW사 포장재: Wheaton Borosi l i cate Tubing Vial Clear

**Y사: 연합유리 제약용 바이알 백색 (탈알카리 처리)

***Daikyo사: Daikyo Crystal Zeni th vi al )