Taxane sind anticancerogene Arzneimittel, die strukturell einen Taxankern besitzen, der aus einem Diterpene-Kohlenstoffgerüst besteht (M. T. Huizing et al. : Cancer Investigation 13, S. 381- 404 (1995)).

Seine wichtigsten Vertreter sind Paclitaxel (Taxol) und Docetaxel.

Taxane wie z. B. Paclitaxel und Docetaxel werden bei oraler Verabreichung nur sehr schlecht resorbiert und werden daher mittels intravenöser Infusion verabreicht.

Taxane sind nur wenig wasserlöslich. Dies führt zu ernsthaften Problemen in der Anwendung von Taxanen, da eine einfache wasserlösliche pharmazeutische Zubereitung nicht möglich ist.

Die bisher verwendeten pharmazeutischen Formulierungen zur intravenösen Anwendung von Taxanen enthalten als Lösungsmittel große Mengen an nicht-ionischen Emulgatoren wie z. B.

Polyoxyethylen-Rizinusöl, Polysorbat sowie Alkohol.

So enthält beispielsweise eine handelsübliche Formulierung in einem Milliliter nur 6 mg Paclitaxel, aber 520 mg Polyoxyethylen-Rizinusöl und 450 mg Äthylenalkohol.

Eine andere pharmazeutische Formulierung enthält in einem Milliliter 20 mg Docetaxel, gelöst in dem nicht-ionischen Emulgator Polysorbat 80.

Die vorliegenden pharmazeutischen Formulierungen sind mit zahlreichen schwerwiegenden Nachteilen verbunden, da bei der Verabreichung der pharmazeutisch wirksamen Mengen von Taxanen in Höhe von ca. 200-500 mg pro Anwendung ca. 20-40 g der nicht-ionischen Emulgatoren verabreicht werden.

Die Formulierungen bereiten Probleme mit der Handhabung, da sie vor der Anwendung mit anderen Infusionslösungen wie z. B.

Kochsalz, Glukose verdünnt werden müssen. Dies führt zu Problemen mit der Stabilität (Ausfällung des Wirkstoffs).

Außerdem müssen Filtersysteme verwendet werden.

Kunststoffbehältnisse dürfen nicht verwendet werden.

Noch schwerwiegender sind die Probleme aufgrund von Nebenwirkungen der verwendeten nicht-ionischen Lösungsmittel.

Da diese schwere anaphylaktische Schocks auslösen können, ist vor der Anwendung eine Prämedikation mit Kortikosteroiden, Antibistaminika und H2-Antagonisten notwendig. Die Lösungsmittel sind außerdem nephrotoxisch, zelltoxisch und kardiotoxisch. Sie haben zudem einen ungünstigen Einfluß auf die Pharmakokinetik und die Verteilung von Taxanen im Organismus. Wahrscheinlich verringern die verwendeten Lösungsmittel sogar die klinische Wirksamkeit der Taxane.

Da die für Taxane verwendeten Lösungsmittel einen entscheidenden Anteil an den Nebenwirkungen der Taxane bzw. ihrer Wirksamkeit haben, ist die Entwicklung alternativer, verbesserter Darreichungsformen, die insbesondere keine oder nur geringe Mengen an nicht-ionischen Emulgatoren enthalten sollen, von entscheidender Bedeutung und eine pharmazeutische Herausforderung (vgl. dazu : J. M. Meerum Terwogt et al. : Alternative formulation of paclitaxel. Cancer Treatment Reviews 23, 87-89 (1997) sowie J. D. Adams et al. : Taxol : A History of Pharmaceutical Development and Current Pharmaceutical Concerns.

Monogr. Natl. Cancer Invest. 15, 141-147 (1993) ; J. D. Jonkman- deVries et al. : Pharmaceutical Development of (Investigational) Anticancer Agents for Parenteral Use-A Review. Drug Develop. Indust. Pharmacy 22, 475 (1996)).

Im folgenden werden die wichtigsten alternativen Darreichungsformen von Taxanen kurz beschrieben. Keine dieser Darreichungsformen steht jedoch bisher als zugelassenes Arzneimittel zur Verfügung.

Wasserlösliche Vorstufen (Pro-Drugs) Es wird versucht, durch chemische Veränderungen im Molekül die Taxane wasserlöslich zu machen. Dies ist schwierig und äußerst aufwendig. Zudem können die Eigenschaften der Taxane in ungünstiger Weise verändert werden. Da es sich um neue Stoffe handelt, ist außerdem eine vollständige Neuentwicklung des Arzneimittels notwendig.

Co-Lösungsmittel Paclitaxel löst sich in Lösungsmitteln wie Ethanol, Dimethylsulfoxid oder Polyethylenglykol 400 (PEG 400). Bei der notwendigen Verdünnung zur Infusion fallen die Taxane jedoch sowohl in der Infusionslösung wie im Blut wieder aus und verlieren zudem an Wirksamkeit (J. M. Meerum Terwogt et al. : Canc. Treatment Rev. 23, 87-95 (1997), sowie J. D.

Adam et al. : Monogr. Natl. Cancer Inst. 15, 141-147 (1993)).

Komplexe mit Cyclodextrinen Durch Komplexierung mit Cyclodextrinen kann die Löslichkeit von Taxanen erhöht werden (U. S. Sharma et al. : Am. Chem.

Soc. Am. Pharm. Ass. 84, 1223-1230 (1995)). Die Lösungen werden jedoch viskos und enthalten feste Teilchen. Zudem ist die Löslichkeit nicht hoch genug um eine ausreichende Menge an Wirkstoff zu verabreichen.

Liposome und Mizellen Liposome sind Trägersysteme, die aus einer oder mehreren fettähnlichen Membranen bestehen, welche eine wässrige Phase einschließen. Diese Trägersysteme können fettlösliche Substanzen in die Membranen aufnehmen und ermöglichen so eine intravenöse Anwendung. Mit Taxanen, insbesondere Paclitaxel, wurden zahlreiche liposomale Darreichungsformen entwickelt (vgl. dazu : J. Meerum Terwogt et al. : Cancer Treatment Review 23, 83-87 (1997)).

Liposomen sind jedoch äußerst wärme-und hitzeempfindlich.

Sie können daher nicht hitzesterilisiert werden, wie dies für Infusionslösungen gefordert wird. Sie sind auch bei der Lagerung instabil. In den notwendigen größeren Mengen sind sie nur mit großem Aufwand steril herzustellen. Keine der zahlreichen entwickelten liposomalen Formen wurde daher bisher zur Produktionsreife entwickelt.

Mizellen, z. B. aus Gallensalzen und Phospholipiden wurden mit Paclitaxel beladen und dann daraus Liposome hergestellt.

Solche Mizellen sind instabil, die Sterilisierung ist schwierig und eine Herstellung in größerem Maßstab sehr kompliziert.

Fettemulsionen Im Gegensatz zu Liposomen bestehen Fettemulsionen aus einer Ol-in-Wasser Emulsion, wobei das 01 zur Stabilisierung mit einem oder mehreren Emulgatoren umgeben ist. Die Art der Herstellung sowie das verwendete Öl und die eingesetzten Emulgatoren sind entscheidend für die Qualität von Fettemulsionen, da zahlreiche Emulgatoren, insbesondere die häufig verwendeten nicht-ionischen Emulgatoren, toxisch sind und bei Fettemulsionen die Größe der Fettpartikel im allgemeinen unter 5 Mikron, am besten unter 1, 5 Mikron liegen soll (P. K. Hansrani et al. : J. Parent. Sci. Technol. 4, 145 -150 (1983)).

Die Verwendung von Fettemulsionen zur Erhöhung der Löslichkeit und Stabilität von Taxanen erscheint zunächst prinzipiell möglich. In Fettemulsionen wird meist Sojaöl als Fett verwendet. Nach J. M. Meerum Terwogt et al. (Cancer Treatment Review 23, 87-95 (1997)), sowie J. D. Adams et al. (Monogr. Natl. Cancer Inst. 15, 141-147 (1993)) ist die Verwendung von Sojaöl nicht möglich, da sich Taxane in Sojaöl nicht ausreichend lösen. So wird die Löslichkeit von Paclitaxel in Sojaöl mit nur 0, 3 mg/ml angegeben.

Es wird daher festgestellt, daß bei Taxanen die Verwendung einfacher Öl in Wasser Emulsionen wie z. B. die handelsüblichen Emulsionen mit Sojaöl, Intralipid, nicht möglich ist. Sojaöl ist ein Triglycerid, das Fettsäuren mit 16-18 Kohlenstoffatomen enthält, wie Palmitinsäure, Linolensäure, Linolsäure und Ölsäure.

Daher wurde versucht, Fettemulsionen mit Taxanen durch Verwendung besonderer Trägerstoffe und Emulgatoren herzustellen.

In der WO 96/02247 ist eine Taxane enthaltende Öl-in-Wasser- Emulsion beschrieben, die zumindest ein Taxan enthält, ein 01, Wasser und ein oberflächenaktives Mittel. Bei der Herstellung müssen Co-Lösungsmittel wie Alkohole eingesetzt werden, die anschließend in einem aufwendigen Prozeß wieder entfernt werden müssen. Bereits geringste Restmengen im Endprodukt würden eine intravenöse Applikation verhindern.

Auch Salze freier Fettsäuren werden nicht zugegeben. Die erhaltene Emulsion ist nicht hitzesterilisierbar ; konsequenterweise ist eine derartige Hitzesterilisation auch nicht beschrieben.

B. D. Tarr et al. (Pharmaceutical Res. 4, 162-165 (1987)) beschreiben eine Emulsion, die neben Wasser 1 % Paclitaxel, 50 % Triacetin, 2, 0 % Ölsäureethylester, 1, 5 % Pluronic F 68 und 1, 5 % Sojalecithin enthält. Obwohl die Emulsion nicht hitzesterilisiert wurde, stieg bei der Lagerung die durchschnittliche Partikelgröße von anfangs 1 Mikron schon nach 2 Monaten auf 4 Mikron an und nach 6 Monaten waren 2 Phasen zu beobachten, das heißt es war keine Emulsion mehr vorhanden. Die Emulsion selbst erwies sich als toxisch und die Formulierung zeigte keine Antitumor-Aktivität mehr. Der Bestandteil Pluronic F 68 ist zudem ein synthetischer nicht- ionischer Emulgator mit toxischen Wirkungen.

B. Lundberg (J. Pharm. Pharmacol. 49, 16-21 (1997)) beschreibt die Herstellung einer Fettemulsion als Träger für Arzneimittel unter anderem für Paclitaxel. Dabei wurde Triolein (Glyceroltrioleat), das Triglycerid der Ölsäure, als Träger verwendet, als Emulgatoren wurden Dipalmitoyl- Phosphatidylcholin in Kombination mit dem nicht-ionischen Emulgator Polysorbat 80 eingesetzt. Zusätzlich mußte zur Erhöhung der Löslichkeit und zur Stabilisierung noch Polyethylenglykol verwendet werden.

Die Emulsion kann nicht hitzesterilisiert werden, sondern muß durch aufwendige Dialyseverfahren gereinigt werden. Die Emulsion mußte in lypholysiertem Zustand gelagert werden. Sie ist erst nach dem Verdünnen mit Infusionslösungen wie Kochsalz-oder Glukoselösung einsetzbar. Die Emulsion enthält unphysiologische, toxische Emulgatoren wie Polysorbat 80 und unphysiologische Substanzen wie Polyethylenglykol.

Dipalmityol-Phosphatidylcholin ist extrem teuer. Die Partikelgröße ist zudem mit 20-40 Mikron zu groß. Die Herstellung ist kompliziert und extrem aufwendig. B. Lundberg stellt außerdem fest, daß sowohl die Verwendung von Triacetin und Tributyrin eine instabile Emulsion ergibt, während Tricaproin und Tricaprylin vergleichbar mit Triolein in der schlechten Löslichkeit von Paclitaxel und in der Emulsionsbildung sind. Es wird festgestellt, daß die Löslichkeit von Paclitaxel in Triolein und in Sojaöl mit ca.

0, 3 mg/ml zu gering ist, um Sojaöl oder die handelsübliche Fettemulsion Intralipid als Träger für Paclitaxel zu verwenden.

Die Formulierung und Herstellung von pharmazeutischen Zubereitungen von Taxanen zur intravenösen Infusion ist daher ein schwerwiegendes Problem (B. Lundberg, J. Pharm.

Pharmacol. 49, 16-21 (1997)). Stabile und sterile Darreichungsformen, die zudem auch noch im technischen Maßstab hergestellt werden können und die keine unphysiologischen, nebenwirkungsreichen Lösungsmittel, Lösungsvermittler und Emulgatoren beinhalten, stehen bisher nicht zur Verfügung. Zudem gibt es keine Darreichungsformen, die ohne vorheriges Verdünnen mit Infusionslösungen infundiert werden können.

Obwohl die beschriebenen Probleme seit mehr als zehn Jahren bekannt sind und daher seit langem daran gearbeitet wird, ist es bisher trotz aller Anstrengungen nicht gelungen, eine geeignete Infusionslösung zur intravenösen Anwendung für Taxane zu entwickeln. Insbesondere konnte keine Taxane enthaltende Fettemulsion zur Verfügung gestellt werden.

Zusammenfassung der Erfindung Ziel der vorliegenden Erfindung ist daher eine Taxane enthaltende pharmazeutische Darreichungsform in Form einer Öl in Wasser Emulsion, die auch zur intravenösen Anwendung geeignet ist.

Die erfindungsgemäße pharmazeutische Darreichungsform enthält im wesentlichen keine synthetischen nicht-ionischen Emulatoren, beispielsweise Polyoxyethylen-Rizinusöl, hydriertes Polyoxyethylen-Rizinusöl ; Polysorbate, Pluronic usw. In einer weiteren Ausführungsform der Erfindung sind auch keine halbsynthetischen oder natürlicherweise vorkommende nicht-ionische Emulgatoren, die toxische Nebenwirkungen besitzen, enthalten. Die Zusammensetzung der Erfindung ist im Anspruch 1 näher gekennzeichnet.

Die Nachteile der bisher verwendeten Darreichungsformen werden z. B. vermieden durch die Herstellung einer Taxane enthaltenden Infusionslösung, in welcher die Taxane in einer therapeutisch wirksamen Menge enthalten sind, in einer Emulsion, bestehend aus Triglyceriden von Fettsäuren mit 2-22 Kohlenstoffatomen, bevorzugt 4-20 Kohlenstoffatomen, 3-sn- Phosphatidylcholin, Alkalisalzen freier Fettsäuren und Wasser.

Neben der Abwesenheit von synthetischen nicht-ionischen Emulgatoren hat die erfindungsgemäße Darreichungsform weitere Vorteile, da sie einfach zu handhaben ist, in größeren Mengen industriell in steriler Form herzustellen ist und eine ausgezeichnete Stabilität besitzt.

Der Ausdruck"im wesentlichen keine synthetischen nicht- ionischen Emulgatoren"bedeutet, daß geringe Mengen an synthetischen nicht-ionischen Emulgatoren vorliegen können, sofern diese keine nachteiligen Wirkungen auf den Patienten entfalten. Synthetische nicht-ionische Emulgatoren können in einer Menge von < 5g/l, bevorzugt < lg/1, bevorzugter < 0, 5 g/l und weiterhin bevorzugt < 0, 3 g/l vorliegen. Insbesondere bevorzugt enthält die Formulierung keine synthetischen nicht- ionischen Emulgatoren, weiterhin bevorzugt enthält die Formulierung keine anderen nicht-ionischen Emulgatoren mit schädlichen Nebenwirkungen.

Das Phosphatidylethanolamin kann in der erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zubereitung in einer Menge von 0, 01 bis 3 Gew.-%, bevorzugt 0, 01-2 Gew.-%, bevorzugter 0, 05-2 Gew.- %, vorliegen.

Detaillierte Beschreibung der Erfindung Bei der erfindungsgemäßen Darreichungsform handelt es sich um eine Fettemulsion insbesondere zur intravenösen Anwendung, die Taxane, Triglyceride mit 2-22 Kohlenstoffatomen, 3-sn -Phosphatidylcholin, Alkalisalze freier Fettsäuren und Wasser enthält.

Zusätzlich kann die Darreichungsform noch Phosphatidylethanolamin sowie Substanzen enthalten, welche die Emulsion blutisoton machen wie z. B. Glycerin und/oder Sorbit und/oder Xylit.

Fettemulsionen zur parenteralen Anwendung und Verfahren zu ihrer Herstellung sind bekannt. (Vgl. dazu : DE-PS 1 1249 454, GP-PS 2 406 621, DE-OS 3 721 137, EP 071 995, DE-OS 3 032 300, US 5 589 508) Diese Fettemulsionen sind 01 in Wasser Emulsionen, in denen die Partikelgröße der Tröpfchen weniger als 5 Mikron beträgt, so daß die Emulsionen ohne das Risiko des Auftretens von Embolien infundiert werden können.

Auch Fettemulsionen, die Arzneimittel z. B. Cyclosporine, enthalten, sind bekannt. (Vgl. dazu : US 5 527 537, US 5 622 714) Die verwendeten Öle sind beispielsweise Sojaöl, Distelöl, Olivenöl, Fischöle und mittelkettige Triglyceride.

Vorzugsweise werden MCT-Öle allein oder in Kombination mit Sojaöl oder Olivenöl verwendet. Als Emulgatoren werden Phosphatidylcholine aus Eilecithin bzw. Sojalecithin verwendet. Die Öle werden mit den Emulgatoren emulgiert, bis eine PartikelgröRe der Fettpartikel von kleiner als 5 Mikron erhalten wird.

Erfindungsgemäß sind Alkohole, wie Methanol, Ethanol und Isopropanol, nicht in der pharmazeutischen Zubereitung enthalten bzw. werden nicht bei der Herstellung der pharmazeutischen Zubereitung eingesetzt.

Wie vorher beschrieben, wird seit mehr als zehn Jahren vergeblich versucht, Taxane enthaltende Fettemulsionen herzustellen, bzw. Taxane enthaltende Fettemulsionen ohne die Verwendung nicht-ionischer Emulgatoren herzustellen.

Außerdem wurde bisher festgestellt, daß sich Taxane, z. B.

Paclitaxel in Triglyceriden von Fettsäuren mit einer Kettenlänge von 6-18 Kohlenstoffatomen nicht ausreichend lösen, um therapeutisch wirksame Konzentrationen zu erreichen. In Tributyrin (Fettsäure mit 4 Kohlenstoffatomen) ergab sich zwar eine etwas höhere Löslichkeit, aber trotz Verwendung nicht-ionischer Emulgatoren konnte keine stabile Emulsion hergestellt werden. (B. D. Tarr et al. : Pharmaceutical Research 4, 162-165 (1987) ; B. Lundberg : J.

Pharm. Sci. 83, 72-75 (1994) ; Int. Journ. Pharmaceutics 134, 119-127 (1996) ; J. Pharm. Pharmacol. 49, 16-21 (1997)) Überraschenderweise wurde entsprechend der Erfindung gefunden, daß es sehr wohl möglich ist, eine bevorzugt intravenös anwendbare Darreichungsform mit Taxanen herzustellen, die keine nicht-ionischen Emulgatoren enthält, in Form einer Taxane enthaltenden Emulsion, die aus Triglyceriden von Fettsäuren mit 2-22 Kohlenstoffatomen, bevorzugt mit 4-20 Kohlenstoffatomen, 3-sn- Phosphatidylcholin, Alkalisalzen freier Fettsäuren und Wasser besteht.

Es ist dabei entscheidend, daß die Taxane zuerst in dem verwendeten Triglycerid und/oder Triglyceridgemisch gelöst werden und anschließend unter Verwendung von 3-sn- Phosphatidylcholin emulgiert werden zu einer Emulsion, deren Fettpartikel überwiegend kleiner als 5 Mikron sind.

Als Taxane werden bevorzugt Paclitaxel und Docetaxel verwendet. Weiterhin sind erfindungsgemäß die folgenden Taxane verwendbar : Spicatin ; Taxan-2, 13-dione, 5. beta., 9. beta., 10. beta.- trihydroxy-, cyclo-9, 10-acetal mit Aceton, Acetat ; Taxan- 2, 13-dione, 5. beta., 9. beta., 10. beta.-trihydroxy-, cyclo 9, 10-acetal mit Aceton ; Taxan-2. beta., 5. beta., 9. beta., 10. beta.-tetrol, cyclo-9, 10-acetal mit Aceton ; Cephalomannin- 7-xylosid ; 7-epi-10-Deacetylcephalomannin ; 10- Deacetylcephalomannin ; Cephalomannin ; Taxol B ; 13-(2, 3- Dihydroxy-3-phenylpropionyl) baccatin III ; Yunnanxol ; 7- (4- Azidobenzoyl) baccatin III ; N-Debenzoyltaxol A ; 0- Acetylbaccatin IV ; 7- (Triethylsilyl) baccatin III ; 7, 10-Di-O- [ (2, 2, 2-Trichlorethoxy) carbonyl] baccatin III ; Baccatin III- 13-0-acetat ; Baccatindiacetat ; Baccatin ; Baccatin VII ; Baccatin VI ; Baccatin IV ; 7-epi-Baccatin III ; Baccatin V ; Baccatin I ; Baccatin III ; Baccatin A ; 10-Deacetyl-7-epitaxol ; Epitaxol ; 10-Deacetyltaxol C ; 7-Xylosyl-10-deacetyltaxol ; 10- Deacetylaxol-7-xylosid ; 7-epi-10-Deacetyltaxol ; 10- Deacetyltaxol ; und 10-Deacetyltaxol B.

Die Triglyceride enthalten Fettsäuren mit 2-22 Kohlenstoffatomen.

So können beispielsweise die Triglyceride folgender Fettsäuren eingesetzt werden : Bezeichnung Fettsäure-Anzahl der Kohlenstoffatome Triacetin 2 Tributyrin 4 Tricaproin 6 Tricaprylin 8 Tricaprin 10 Trilaurin 12 Trimyristin 14 Tripalmitin 16 Tristearin 18 Triolein 18 Trilinolein 18 Trieicosapentain 20 Tridocosahexain 22 Es können auch Gemische dieser Triglyceride verwendet werden und/oder natürlich vorkommende und/oder raffinierte und/oder umgeesterte Triglyceride natürlicher Öle wie mittelkettige Triglyceride (MCT-Öle), Sojaöl, Distelöl, Oliven, Fischöl etc. und/oder Gemische dieser Triglyceride.

Auch Triglyceride hydrierter Fettsäuren sind verwendbar.

Bevorzugt sind Triglyceride und/oder Triglyceridgemische von Fettsäuren mit 4-20 Kohlenstoffatomen.

Es sei darauf hingewiesen, daß Tributyrin anscheinend selbst antikanzerogen wirkt, und die Wirkung von Taxanen synergistisch erhöhen kann.

Als Grundstoffe für 3-sn-Phosphatidylcholin kommen bevorzugt Eilecithine und Sojalecithine in Frage.

Lecithine mit einem Gehalt an 3-sn-Phosphatidylcholin von mehr als 60 % sind bevorzugt. Besonders bevorzugt ist Eilecithin mit einem Gehalt an Phosphatidylcholin von 60 bis 90 %.

Das 3-sn-Phosphatidylcholin kann auch teilweise oder vollständig hydriert sein. Die verwendeten Lecithine können neben 3-sn-Phosphatidylcholin auch Phosphatidylethanolamin enthalten.

Während z. B. in der Zubereitung der WO 96/2247 ca. 20 mg Cholesterin/ml Triglycerid enthalten sind, bevorzugt die erfindungsgemäße Zubereitung Mengen weit unter 10 mg, bevorzugter unter 5 mg, z. B. ca. 1 mg Cholesterin/ml Triglycerid.

Weiterhin ist ein Alkalisalz einer Fettsäure mit 4-24 Kohlenstoffatomen enthalten, um den pH-Wert der Emulsion auf 5-9 einzustellen und die Emulgierung und Homogenisierung zu erleichtern. Bevorzugt sind dabei Fettsäuren mit 12-22 Kohlenstoffatomen, insbesondere sind bevorzugt Fettsäuren mit 16-20 Kohlenstoffatomen. Das Alkalisalz einer Fettsäure kann auch in situ durch Zugabe eines Alkalihydroxids in ein Gemisch, das eine Fettsäure enthält, hergestellt werden. Die Natrium-oder Kaliumsalze von Palmitinsäure, Ölsäure, Linolsäure und Linolensäure sind besonders bevorzugt. Die Konzentration der Triglyceride in der erfindungsgemäßen Darreichungsform beträgt 1-60 %. Bevorzugt sind Konzentrationen von 3-40 %.

Die Konzentrationen des verwendeten Emulgators in Form von Eilecithin und/oder Sojalecithin betragen 0, 2-4 %, bevorzugt sind Konzentrationen von 0, 4-2, 5 %, wobei die Konzentration des Emulgators von der Konzentration der Triglyceride abhängt. Falls eingesetzt, betragen die Konzentrationen der Alkalisalze der Fettsäuren im allgemeinen 0, 01-0, 2 %, bevorzugt 0, 02-0, 1 Gew%.

Die verwendeten Taxane sollen in therapeutisch wirksamen Konzentrationen vorhanden sein. Im allgemeinen betragen diese Konzentrationen 0, 01-0, 3 % (0, 1-3 mg/ml).

Um eine blutisotone Emulsion zu erhalten, können bekannte isotonisierende Substanzen wie z. B. Glycerin, Glukose, Fruktose, Sorbit, Xylit in den entsprechenden Konzentrationen enthalten sein, wobei Glycerin bevorzugt ist.

Zusätzlich kann die pharmazeutische Darreichungsform Vitamin E enthalten in der Form von Tocopherol oder pharmazeutisch verträglichen Tocopherolestern, um als stabilisierendes Antioxidans zu wirken. Die verwendeten Konzentrationen betragen cirka 0, 15 bis 1, 5 Gew%, abhängig von Art und Gehalt der verwendeten Triglyceride und Emulgatoren.

Die Partikelgröße der Fettpartikel in der Öl-in-Wasser Emulsion ist möglichst kleiner als 5 Mikron. Mindestens 97 % der Partikel sollen kleiner als 5 Mikron sein. Im allgemeinen beträgt die Partikelgröße im Durchschnitt 0, 1-1 Mikron, bevorzugt zwischen 0, 2-0, 6 Mikron.

Da nicht alle Fettpartikel gleich groß sind, ergeben sich typische Verteilungen der Partikel, z. B. : Partikelgröße Anzahl der Partikel < 0, 2 Mikron 34 % 0, 2-0, 5 Mikron 43 % 0, 5-0, 9 Mikron 14 % 0, 9-1, 2 Mikron 6 % 1, 2-1, 9 Mikron 2 % 1, 9-2, 2 Mikron weniger als 1 % 2, 2-2, 5 Mikron weniger als 1 % 2, 5-3, 2 Mikron weniger als 1 % > 3, 2 Mikron weniger als 1 % Mögliche geeignete erfindungsgemäße pharmazeutische Darreichungsformen als Emulsionen haben beispielsweise folgende Zusammensetzung : Tributyrin 10 g/100 ml Glycerin (zur Isotonisierung) 2, 5 g/ 100 ml Eilecithin 1, 2 g/100 ml Natriumoleat 40 mg/100 ml Paclitaxel 100 mg/100 ml Wasser (für Injektionszwecke) ad 100 ml oder : Mittelkettige Triglyceride 10 g/100 ml bestehend vorwiegend aus Capryl- und Caprinsäure Glycerin 2, 5 g/100 ml Eilecithin, enthaltend ca. 80 % 1, 5 g/ 100 ml 3-sn-Phosphatidylcholin Kaliumoleat 50 mg/100 ml Paclitaxel 100 mg/100 ml Wasser (für Injektionszwecke) ad 100 ml oder : Tributyrin 5 g/100 ml Tricaproin 5 g/100 ml Mittelkettige Triglyceride 5 g/100 ml (vorwiegend Fettsäuren mit 8 und 10 Kohlenstoffatomen) Glycerin 2, 5 g/100 ml Eilecithin 0, 8 g/100 ml Natriumoleat 50 mg/100 ml Docotaxel 40 mg/100 ml Wasser (für Injektionszwecke) ad 100 ml oder : Mittelkettige Triglyceride 10 g/100 ml Sojaöl 10 g/100 ml Glycerin 2, 5 g/100 ml Eilecithin 1, 2 g/100 ml Natriumoleat 50 mg/100 ml Paclitaxel 100 mg/100 ml Wasser (für Injektionszwecke) ad 100 ml oder : Tributyrin 4 g/100 ml Mittelkettige Triglyceride 5 g/100 ml Sojaöl 5 g/100 ml Eilecithin 1, 2 g/100 ml Glycerin 2, 5 g/100 ml Natriumoleat 50 mg/100 ml Paclitaxel 120 mg/100 ml Wasser (fur Injektionszwecke) ad 100 ml oder : Tributyrin 2 g/100 ml Mittelkettige Triglyceride 10 g / 100 ml Fischöl 5 g/100 ml Eilecithin 1, 5 g/100 ml Glycerin 2, 5 g / 100 ml Kaliumoleat 0, 6 g/100 ml Paclitaxel 80 mg / 100 ml Wasser für Injektionszwecke ad 100 ml Verfahren zur Herstellung der erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zubereitung Zur Herstellung der erfindungsgemäßen pharmazeutischen Zubereitungen wird im allgemeinen wie im folgenden beschrieben verfahren.

Lösen des (r) Taxans (e) im Triglycerid Es wurde beschrieben (B. D. Tarr et al. : Pharmaceutical Research 4, 162-162 (1987) ; J. D. Adams et al. : Monogr.

Natl. Cancer Inst. 15, 141-147 (1993) ; B. Lundberg : J.

Pharm. Pharmacol. 49, 16-21 (1997)), daß sich Taxane nicht ausreichend in Triglyceriden lösen, um damit Emulsionen mit therapeutisch wirksamen Konzentrationen herzustellen.

Als Löslichkeit in Triglyceriden mit 6-18 Kohlenstoffatomen werden beispielsweise für Paclitaxel 0, 3 mg/ml angegeben.

Desweiteren wurde beschrieben, daß mit Tributyrin keine stabilen Emulsionen mit kleiner Partikelgröße herzustellen sind.

Überraschenderweise wurde nun erfindungsgemäß gefunden, daß es möglich ist, in Triglyceriden, die Fettsäuren mit 2-22 Kohlenstoffatomen, bevorzugt 4-20 Kohlenstoffatome enthalten, eine ausreichende Menge an Taxanen zu lösen, um therapeutisch wirksame Konzentrationen dieser Taxane zu erhalten und pharmazeutisch verträgliche und wirksame Emulsionen herzustellen.

Um Taxane in den notwendigen Konzentrationen zu lösen, werden die Taxane in die gewünschten Triglyceride, bzw.

Mischungen aus verschiedenen Triglyceriden gegeben und das Gemisch, gegebenenfalls unter Rühren, erhitzt, bis sich das Taxan gelöst hat. Alternativ wird das Taxan, gegebenenfalls unter Rühren, in das bereits erwärmte oder erhitzte Triglycerid bzw. Gemisch aus Triglyceriden gegeben. Dabei sollte das Triglycerid nicht über den Schmelzpunkt des Taxans, der beispielsweise bei Paclitaxel bei ca. 210° C liegt, erhitzt werden.

Je niedriger die Anzahl der Kohlenstoffatome der Fettsäuren im jeweils verwendeten Triglycerid ist, desto leichter löst sich das Taxan beim Erhitzen. So läßt sich Paclitaxel schon bei 60-90° C in Tributyrin lösen, während es zum Lösen in Tricaprylin und/oder Tricaprin vorteilhaft ist, auf ca. 110- 130° C zu erhitzen.

Auch der Siedepunkt des oder der verwendeten Triglyceride, der beispielsweise für Tributyrin bei ca. 130°C liegt, sollte beim Lösen des (r) Taxans (e) nicht überschritten werden. Im allgemeinen werden die Wirkstoffe unter Rühren bei Temperaturen zwischen 60° und 160° C gelöst, wobei die benötigte Temperatur abhängig ist von der Anzahl der Kohlenstoffatome der in den Triglyceriden enthaltenen Fettsäuren.

Je höher die Anzahl der Kohlenstoffatome, desto höher die zu Lösen verwendete Temperatur. In Tributyrin läßt sich beispielsweise Paclitaxel bei ca. 60-100° C gut lösen.

Der Lösungsvorgang erfolgt am besten unter Ausschluß von Sauerstoff, z. B. in einer Stickstoffatmosphäre, um Zersetzungen infolge von Oxidationsvorgängen zu vermeiden.

Es ist vorteilhaft, während des gesamten Herstellungsvorgangs auf Abwesenheit von Sauerstoff zu achten. Es ist auch möglich, das verwendete Taxan zuerst in einem Triglycerid von Fettsäuren mit wenig Kohlenstoffatomen, z. B. Tributyrin bei relativ niedrigen Temperaturen, beispielsweise 70-100° C zu lösen und dann weitere Triglyceride zuzugeben.

Durch das Lösen in der Hitze lassen sich problemlos therapeutisch relevante Konzentrationen der Taxane in den Triglyceriden erreichen.

Konzentration Lösungsmittel Paclitaxel/g mind. 40 mg/g Tributyrin mind. 20 mg/g Tricaproin mind. 15 mg/g Tricaprylin mind. 15 mg/g Mittelkettige Triglyceride (C6-C12, vorwiegend C8-C10) mind. 4 mg/g Sojaöl mind. 8 mg/g MCT-Ö1/Sojaöl (im Verhältnis 1 : 1) Die gelösten Mengen sind ausreichend, um die gewünschten therapeutisch wirksamen Konzentrationen in der erfindungsgemäßen Emulsion zu erreichen.

Nach dem Abkühlen der Triglyceride bzw. Öle mit den darin gelösten Taxanen zeigt sich überraschenderweise, daß die Taxane auch bei Zimmertemperatur problemlos in Lösung bleiben und nicht ausfallen, und zwar über lange Zeiträume, bisher über 19 Monate. Die bisherigen Feststellungen, daß sich Taxane in Triglyceriden und/oder Ölen nicht ausreichend lösen, um therapeutische Konzentrationen zu erreichen, ist daher nicht zutreffend.

Die auf 20-60° C abgekühlten Taxane enthaltenden Triglyceride werden filtriert, um evtl. vorhandene Partikel zu entfernen.

Herstellung der Emulsion Aus einer Mischung, bestehend aus 3-sn-Phosphatidylcholin (z. B. aus Eilecithin), Natriumoleat, Glycerin und Wasser wird durch Rühren mit einem Ultra-Turrax eine Rohemulsionen hergestellt bei einer Temperatur von ca. 40-70° C. In diese Rohemulsion wird nun die Taxane enthaltende Triglyceridlösung und Wasser gegeben, der pH-Wert gegebenenfalls durch Zugabe von Alkalisalzen von Fettsäuren auf 5-9 eingestellt, bevorzugt auf 6-8.

Das Gemisch, welches nun Taxane, Triglyceride, 3-sn- Phosphatidylcholin, Wasser, ein Isotonisierungsmittel wie z.

B. Glycerin und gegebenenfalls Alkalisalze von Fettsäuren enthält, wird durch Rühren mit einem Ultra-Turrax homogenisiert, wodurch eine Rohemulsion erhalten wird. Die Mischung wird durch Zugabe von Wasser so eingestellt, daß der Triglyceridgehalt 1-60 Gew% beträgt.

Die Rohemulsion wird nun in einem Hochdruckhomogenisator mit drei Kolben bei Drücken zwischen 100-700 bar, bevorzugt zwischen 300-600 bar, gegebenenfalls mehrfach, homogenisiert, bis eine Emulsion vorliegt, in der die Partikelgröße von mindestens 97 % aller Fettpartikel unter 5 Mikron, bevorzugt unter 1, 5 Mikron liegt.

Danach wird die Emulsion mit Wasser auf die gewünschte Konzentration verdünnt und in Ampullen oder Flaschen abgefüllt und hitzesterilisiert. Bevorzugt ist dabei die Sterilisation in einem sog. Rotationsautoklaven, in dem die Behältnisse während der Sterilisation über Kopf rotiert werden. Dies führt zu einem besseren Hitzetransfer in den Behältnissen. Dadurch wird die Aufheizphase und Abkühlphase verkürzt und das Risiko einer Schädigung des Inhalts der Behältnisse verringert. Es ist vorteilhaft, den gesamten Herstellungsvorgang unter Ausschluß von Sauerstoff durchzuführen.

Die folgenden Beispiele beschreiben die erfindungsgemäße pharmazeutische Darreichungsform und das Verfahren zu ihrer Herstellung im einzelnen.

Die Erfindung ist jedoch nicht darauf beschränkt.

Beispiel 1 Herstellung einer Emulsion mit Paclitaxel in MCT-Öl und Sojaöl 1000 mg Paclitaxel werden unter Rühren in 200 g eines Triglycerid-Gemisches gegeben, das aus MCT-Ö1 (mittelkettige Triglyceride) mit vorwiegend Fettsäuren mit 8 und 10 Kohlenstoffatomen und Sojaöl im Verhältnis 1 : 1 besteht. Das Gemisch wird unter Rühren und Begasen mit Stickstoff auf ca.

110-135° C erhitzt, bis eine weitgehend klare Lösung erhalten wird.

Alternativ kann das Paclitaxel (1000 mg) zunächst in 100 g MCT-Ö1 bei ca. 110-135° C gelöst werden und erst danach Sojaöl, erhitzt auf ca. 120° C, zugegeben werden.

Man läßt auf ca. 40-80° C abkühlen und filtriert durch ein fettresistentes Entkeimungsfilter mit einer Porengröße von ca. 50 Mikron.

In ein weiteres Gefäß werden nun 25 g Glycerin gegeben sowie 200 ml Wasser und mit Stickstoff begast, bis der Sauerstoffgehalt weniger als 0, 5 mg/l beträgt. Nun werden 12 g Eilecithin (Jodzahl 60-70) mit einem Gehalt an 3-sn- Phosphatidylcholin von ca. 80 % und ca. 12 % Phosphatidylethanolamin zugegeben und 0, 4 g Natriumoleat.

Durch starkes Rühren mit einem Ultra-Turrax wird bei einer Temperatur von ca. 40-60° C eine Rohemulsion hergestellt.

Nun wird die das Paclitaxel enthaltende Triglycerid-Lösung zugegeben und weitere 10 Minuten mit einem Ultra-Turrax stark gerührt. Der pH-Wert wird überprüft und sollte zwischen 5 und 9 liegen, bevorzugt zwischen 6-8, insbesondere bevorzugt zwischen 6, 5 und 7, 5.

Die erhaltene Rohemulsion wird durch ein fettresistentes Edelstahlfilter (Porengröße zwischen 5-50 Mikron) filtriert und anschließend mit einem 2-Stufen-Hochdruck-Homogenisator mit drei Kolben homogenisiert bei Drücken zwischen 100-600 bar. Der Vorgang der Homogenisierung wird so oft wiederholt, bis die gewünschte Partikelgröße erreicht ist. Weniger als 1 % der Partikel sollten größer als 4 Mikron sein. Im Mittel beträgt der Durchmesser der Partikel 0, 2-0, 6 Mikron.

Um eine gut anwendbare Partikelgröße zu erreichen, ist es im allgemeinen nötig, den Vorgang der Homogenisierung ca. 3-6 mal zu wiederholen. Nach jedem Homogenisierungsvorgang sollte die Emulsion auf 30-60° C abgekühlt werden. Die Emulsion wird nun in 560 ml sauerstofffreies Wasser für Injektionszwecke gegeben. Es wird nochmals mit Stickstoff begast, bis der Sauerstoffgehalt unter 0, 5 mg/l liegt.

Vor der Abfüllung in 250 ml Glasflaschen wird durch eine Edelstahlfilter mit einer mittleren Porengröße von 5 Mikron filtriert. Der Filtrationsdruck sollte dabei 0, 2 bar nicht übersteigen, um ein Brechen der Emulsion zu verhindern.

Die Partikelgröße und die Partikelverteilung können beispielsweise mittels Mikroskop oder Coulter Counter bestimmt werden.

Partikelgröße Zahl der Teilchen < 0, 2 Mikron 34 % 0, 2-0, 5 Mikron 43 % 0, 5-0, 9 Mikron 14 % 0, 9-1, 2 Mikron 6 % 1, 2-1, 9 Mikron 2 % 1, 9-2, 2 Mikron unter 1 % 2, 2-2, 5 Mikron unter 1 % 2, 5-3, 2 Mikron unter 1 % > 3, 2 Mikron unter 1 % Die Emulsion wird in 250 ml-Glasflaschen abgefüllt. Die Flaschen werden vor der Abfüllung mit Stickstoff begast.

Dabei ist es vorteilhaft, den verwendeten Stickstoff auf minus 20-30° C abzukühlen, damit der Stickstoff leichter auf den Boden der Flasche sinkt. Auch während des Abfüllvorgangs sollten die Flaschen weiterhin mit Stickstoff begast werden.

Die erhaltene Emulsion wird hitzesterilisiert bei 121'C fUr 20 Minuten. Vorteilhaft wird dabei ein sogenannter Rotationsautoklav verwendet, in dem die Flaschen während der Sterilisation über Kopf rotieren. Dadurch wird die zum Abfüllen und Abkühlen notwendige Zeit vermindert und vermieden, daß sich die Partikelgröße ändert.

Die Partikelverteilung nach der Sterilisation ist wie folgt : Partikelgröße Zahl der Teilchen < 0, 2 Mikron 25 % 0, 2-0, 5 Mikron 46 % 0, 5-0, 9 Mikron 19 % 0, 9-1, 2 Mikron 6 % 1, 2-1, 5 Mikron 2 1, 5-1, 9 Mikron unter 1 % 1, 9-2, 2 Mikron unter 1 % 2, 2-3, 2 Mikron unter 1 % > 3, 2 Mikron 0 % Die Sterilisation führt daher zu keiner wesentlichen Veränderung der Partikelgröße und Partikelverteilung. Die Emulsion ist stabil. Nach einjähriger Lagerung bei Raumtemperatur zeigt sich keine wesentliche Änderung der Partikelgröße und Partikelverteilung.

Man erhält eine stabile Emulsion mit folgender Zusammensetzung pro 100 ml : Paclitaxel : 100 mg Sojaöl plus MCT-Ö1 : 20 g Eilecithin : 1, 2 g Glycerin : 2, 5 g Natriumoleat : 40 mg sowie Wasser ad 100 ml 250 bis 500 ml der Emulsion können nun langsam über 3-10 Studen infundiert werden, wodurch eine therapeutisch wirksame Menge an Paclitaxel zugeführt wird.

Beispiel 2 Das Verfahren des Beispiels 1 wird wiederholt, wobei statt Paclitaxel jetzt 800 mg Docetaxel eingesetzt werden. Man erhält eine pharmazeutische Darreichungsform mit der folgenden Zusammensetzung pro 100 ml : Docetaxel 80 mg Sojaöl 10 g MCT-Ö1 10 g Eilecithin 1, 2 g Glycerin 2, 5 g Natriumoleat 40 mg Wasser ad 100 ml Beispiel 3 60 g Tributyrin werden unter Rühren auf ca. 70-90° C erwärmt unter Stickstoff. Es werden 1000 mg Paclitaxel zugegeben und weiter bei 70-90° C gerührt bis eine klare Lösung erhalten wird. Man läßt auf ca. 30-60° C abkühlen.

Die weitere Herstellung erfolgt analog dem Beispiel l.

Es wird eine erfindungsgemäße Emulsion mit folgender Zusammensetzung pro 100 ml erhalten : Paclitaxel 100 mg Tributyrin 6, 0 g Eilecithin 1, 2 g Glycerin 2, 5 g Natriumoleat 40 mg Wasser für Injektionszwecke ad 100 ml Beispiel 4 30 g Tributyrin und 70 g MCT-Öl (mit vorwiegend Fettsäuren mit 8 und 10 Kohlenstoffatomen, nämlich Capryl-und Caprinsäure) werden auf ca. 110-130° C unter Rühren erwärmt und 800 mg Paclitaxel unter Rühren zugegeben, bis eine klare Lösung entsteht. Man läßt auf 30-60° C abkühlen und verfährt in der weiteren Herstellung analog Beispiel 1, wobei jedoch das Eilecithin durch Sojalecithin mit einem Gehalt an 3-sn-Phosphatidylcholin von ca. 70-80 % ersetzt wird.

Statt Natriumoleat wird Kaliumoleat eingesetzt.

Man erhält eine erfindungsgemäße Emulsion mit der folgenden Zusammensetzung pro 100 ml : Paclitaxel 80 mg Tributyrin 3 g MCT-Öl 7 g Sojalecithin 1, 2 g Glycerin 2, 5 g Kaliumoleat 40 mg Wasser für Injektionszwecke ad 100 ml Beispiel 5 800 mg Paclitaxel werden unter Rühren bei 120-140° C in 150 g MCT-Öl gelöst. Das verwendete MCT-Ö1 enthält 65 % Caprylsaure (C8) und 32 % Caprinsäure als Triglyceride.

Daneben sind als Triglyceride noch geringe Mengen an Capronsäure, Laurinsäure und Myristinsäure enthalten. Es werden noch 0, 6 g freie Ölsäure zugegeben. Es wird analog Beispiel 4 hergestellt, wobei jedoch statt Kaliumoleat Kaliumhydroxid zur pH-Einstellung verwendet wird. Dadurch entsteht in situ Kaliumoleat wie in Beispiel 4. Eine erfindungsgemäße Emulsion mit folgender Zusammensetzung pro 100 ml wird erhalten.

Paclitaxel 100 mg MCT-Ö1 15 g Glycerin 2, 5 g Sojalecithin 1, 2 g Kaliumoleat 69 mg Wasser für Injektionszwecke ad 100 ml Beispiel 6 500 mg Paclitaxel werden unter Rühren und unter Stickstoffatmosphäre in einem Triglyceridgemisch, bestehend aus 100 g MCT-Ö1 und 50 g Fischöl mit einem Gehalt an insgesamt 40 % Omega-3-Fettsäuren, insbesondere Eicosapentaensäure und Docoshexanensäure, bei ca. 130-150° C gelöst. Der Sauerstoffgehalt der Triglyceride wurde vorher durch Begasen mit Stickstoff auf unter 0, 5 mg/l eingestellt.

Zusätzlich wurden 10 mg Vitamin E zugegeben.

Das weitere Herstellungsverfahren erfolgt entsprechend Beispiel l. Es wird eine erfindungsgemäße Emulsion mit der folgenden Zusammensetzung pro 100 ml erhalten.

Paclitaxel 50 mg MCT-Ö1 10 g Fischöl 5 g Glycerin 2, 5 g Eilecithin 1, 2 g Natriumoleat 40 mg Vitamin E 10 mg Wasser für Injektionszwecke ad 100 ml