Изобретение относится к сельскохозяйственной микробиологии и биотехнологии, а именно, к новым инокулянтным композициям, предназначенным для стимулирования развития растений, защиты от заболеваний, повышения продуктивности сельскохозяйственных культур, а также для улучшения качества почвы

Для повышения эффективности растениеводства широко распространено использование минеральных удобрений, содержащих доступные для растений соединения азота, калия, фосфора, микроэлементы. Длительное использование минеральных удобрений связано с негативными экологическими последствиями, такими как загрязнение почвы и грунтовых вод, а также с выбросами в атмосферу вредных веществ, например аммиака и закиси азота.

Альтернативой минеральным удобрениям являются микробиологические инокулянты - биопрепараты, содержащие живые культуры полезных для растений микроорганизмов, обеспечивающих благоприятные условия для развития растений, защиту растений от вредителей и заболеваний, увеличение продуктивности растений

Инокулянты могут проявлять себя как

- бактериальные удобрения, содержащие микроорганизмы, которые способствуют увеличению плодородия почвы за счет повышения концентрации и/или биодоступности питательных веществ, например, азотфиксирующие микроорганизмы, фосфатмобилизирующие бактерии и другие микроорганизмы, способствующие усвоению необходимых для растения макро и микроэлементов;

- стимуляторы развития растений, способствующие быстрому росту и формированию корневой системы и надземных органов растений;

- микоризные препараты, создающие благоприятную ризосферу в почве, которая способствует формированию корневой системы, увеличивает всасывающую поверхность корневой системы растения;

- средства биозащиты, используемые для профилактики инфекционных заболеваний и защиты растений от вредителей,

- средства улучшения (стабилизации) качества почвы за счет увеличения количества и/или доступности необходимых питательных веществ, а также уменьшения или минимизации количества веществ, вредных для развития растений

Известный инокулянт для повышения производительности сои (патент Украины N° 85089, МПК C05F 11/08, C12N 1/20, C12R 1/01 , дата подачи заявки 14 11.2005), содержащий в качестве биоагентов гомологичные штаммы Bradyrhizobium japonicum 694 или Bradyrhizobium japonicum 10к (виды клубеньковых бактерий, сапрофитные азотфиксирующие симбионты сои) Указанные бактериальные культуры являются комплементарными к широкому спектру современных сортов сои и характеризуются:

- нечувствительностью к антибактериальному действию экстрактивных веществ, содержащихся в оболочках семян ряда сортов сои; - высокой пектиназной активностью при контакте с семенами сои;

- способностью переносить условия недостаточного увлажнения;

- устойчивостью к засолению почв NaCL, Na ₂ S0 _4, NaHC0 ₃ ;

- устойчивостью к загрязнению тяжелыми металлами Pb, Cd, Си, Zn и их смесями

Используется в виде жидкого или сыпучего инокулянта для предпосевной инокуляции семян сои.

Общими признаками аналога и заявляемого решения являются: инокулянт для растений, содержащий питательную среду с бактериальной культурой.

Комплементарность указанного инокулянта преимущественно к сортам сои ограничивает возможности его применения для других культур. В качестве прототипа выбрано жидкий инокулянт, содержащий водную питательную среду с бактериальной культурой (патент Украины Ne 94389, МПК А01 С 1/06, C05F 11/08, C12N 1/04, дата подачи заявки 14 12 2006)

Бактериальная культура представляет собой бактерии одного или нескольких родов из: - Rhizobium (род бактерий, способных к фиксации азота);

- Bradyrhizobium (род бактерий, способных к фиксации азота);

- Pseudomonas (род бактерий, предупреждающий рост патогенов растений);

- Serratia (род бактерий патогенов)

- Bacillus (род бактерий, используемых в биозащите растений в качестве альтернативы синтетическим инсектицидам)

- Paenibacillus (род бактерий, продуцирующих антимикробные вещества, которые проявляют бактерицидное и фунгицидное действие)

- Pasteuria (род бактерий, являющихся облигатными паразитами нематод)

- Azotobacter (род почвенных бактерий, способных переводить газообразный азот в растворимую форму, доступную для усвоения растениями)

- Azospirillum (род бактерий, способствующих фиксации азота корнями растений, повышающих способность корней удерживать воду и усиливающих рост корневой системы в целом);

- Methylobacterium (симбионты растений, стимулирующие развитие растений); - Cyanobacteria (род бактерий, стабилизирующих почву, предотвращающих эрозию и удерживание воды). Жидкая питательная среда, в которую вводят бактерии, может быть любой известной питательной средой, совместимой с выбранными бактериями, например, среда следующего состава: дрожжевой экстракт - 0,50 г/л; маннит - 10,0 г/л; К ₂ НР0 ₄ - 0,50 г/л; MgS0 ₄ 7H ₂ 0 - 0,2 г/л; NaCI - 0,1 г/л; вода - 1 л; PH - 6,8. Для получения частично обезвоженного инокулянта к жидкому инокулянту добавляют десикант, как обезвоживающую добавку. Как десикант используют одно или несколько соединений, выбранных из не возобновляемых сахаров и спиртов относящихся к группе сахара, например, десикант, включающий смесь двух или более соединений выбранных из трегалозы, сахарозы, глицерина, триэтиленгликоля и маннита. После добавления бактерий в жидкую питательную среду инокулянт инкубируют

(ферментируют) для предоставления бактериям возможности роста до стационарной фазы. Стационарная фаза представляет собой фазу, на которой рост бактерии прекращается. Стационарная фаза обычно достигается, когда жидкая питательная среда полностью расходуется. Инкубирование инокулянта проводят в течение 2-7 дней. Инокулянт может расфасовываться в полиэтиленовые емкости. Условия хранения предусматривают температуру ниже 35 °С и относительную влажность ниже 80 %.

Инокулянт может наноситься на торф, глину или другие сухие носители для получения сыпучего инокулянта.

Инокулянт может наноситься на семена растений или вноситься в борозду непосредственно перед посадкой семян

Общими признаками прототипа и заявляемого решения, являются: микробиологический инокулянт для растений, содержащий носитель с микробиологическими культурами.

Применение описанного инокулянта направлено на увеличение содержания полезных для растений микроорганизмов (бактерий) в почве. Каждый род бактерий выполняет только свойственные ему функции. Например, бактерии родов Rhizobium, Bradyrhizobium, Azotobacter являются азотфиксаторами, бактерии рода Bacillus проявляют свойства инсектицидов, бактерии рода Paenibacillus проявляют бактерицидное и фунгицидное действие и т. д При этом синергетическое взаимодействие родов бактерий, при котором эффект оказывается большим, чем сумма эффектов от действия отдельных родов бактерий, не проявляется, что ограничивает эффективность инокулянта Для получения комплексного воздействия инокулянта он должен содержать множество родов бактерий что усложняет технологию получения и повышает стоимость инокулянта Кроме того, возможны проблемы комплементарности (биоценоза) различных родов бактерий в композиции В основу изобретения поставлена задача повышения эффективности, упрощения технологии получения и снижения стоимости инокулянта. Поставленная задача решается тем, что в инокулянте для растений, содержащем носитель с микробиологическими культурами, согласно изобретению, в качестве микробиологических культур использованы микроорганизмы домена археи, которые характеризуются одним из следующих специфических маркеров нуклеотидных последовательностей диагностического фрагмента гена 16S рРНК:

- ggttgatcctgccggagatcgctgctattagagttcgactaagccatgcaagtcatctcg caagagaggc gacaggctcagtaacatgtcgttaatctaccctttcgcccagaataccctcgggaaactg aggttaatac tggatatgaaagatattctggaaagaattttttcttaaaggcaacacgaaaggatgagac ggcaccagat taggctgttggcggtgtaatggaccaccaaacctacgatctgtacgggggatgaaagtcc tagcccggag aggaacactgagatactggttccagccctacggggtgcagcaggcgcgaaacctttacaa tgcacgaaag tgtgataagggaactctaagtgcttatgttttacataggcttttgccgaaggtaaatact tcggagaata agtggtgggtaagactggtgccagccgccgcggtanccccagcgccacaagtggggatca cgtttatttg gtctaaagcgttcgtaccagg ;

- attccggttgatcctgccggacctgactgctatcggattgatactaatnnccatgcgagt cattgtagca atacaaggcagacggctcagtagcgcgtagtcaatctaccctatggacgggaataacctc gggaaactga gaataatgcccgatagaacattatgcctggaatggtttatgtttcaaatgatttatcgcc ataggatggg actgcggcctatcagtttgttggtgaggtaatggcccaccaagactattacaggtacggg ctctgagagg agtggcccggagatgggtactgagacacggacccaggccctatggggcgcagcaggcggg aaaactttgc aatgtgcgaaagcacgacnaaggttaatccgagtggtttctgctaaagaaaccttttgtc agtcctagaa accactaaacgaataagggggtgggncaagttctggntgtnngcccgcccgcgggtaaaa acccagcaac cctcaagntgggttcagggnattg; - tccggtgatcctgccggacctgactgctatcggattggtactaagcncatgtgagtcgtt gcagcaatg

Caaggcagacggctcagtaacacgtagtcaacctaacctatggacggggataacctc gggaaactgagaa taatacccgatagatcatgatacctggaacggtttatggtccaaatgatttatcgccata ggatggggct gcggtctatcagcttgttggtgaggtaatggcccaccaaggctataacagatacgggctc tgagaggagg ggcccggagatgggtactgagacacggacccaggtcctatggggcgcagcaggcgagaaa cctttgcaat gtgcgaaagcacgacaaggttaatccgagtgattccctgctaaaggaatcttttgttagt cataaaaacc cactgatgaataaggagtgggcaagttctggtgtcagccgccgcggtaaaacccaagcac cctcaagtgg;

- attccggttgatcctgccggagatcgctgctattagagttcgactaanntcncatgcaag ttatctcgca agagaagcgacaggctcagtaacatgtcgttaatctaccctttcgcctggaataccctcg ggaaactgag gttagcaccggatatgaaagatattctggaaagaattttttcttaaaggcatcacgaaag gatgagacgg caccagattgggctgttggcggtgtaatggaccaccaaacctacgatctgtacgggggat gaaagtccta gcccggagaggaacactgagatactggttccagccctacggggtgcagcaggcgcgaaac ctttacaatg cacgaaagtgtgataagggaactctaagtgcttatgttttacataggcttttgccgaagg taaatacttc ggagaataagtggtgggtaaagactggtgccagccgccgcgggtaaccccancgccacaa gtggggatca cgt;

- ttccggttgatcctgccggaggctgctgctatctggtttgcaattagacatgcaagtctt tttgtttttt cggaaatgaaaggcgaactgctcagtaacacgtagctaacctgccctaacgacggaaata atgtcgggaa actgactctaacatccgatagaagaagacaactggaatgtgttttctttcaagtcaggat ggggctgcgg ctgattagcttgttggcggggtaatagcccaccaaggcgtannatcagtaagggctctta gcggagaagc cctgagaggggatctgagacactatccccagccctacggggtgcagcagtcgggaaactt ctgcaatgta cgcaagtatgacagagcaagccagagtgattctctaataattgagcatctcttataatat gtaaaaagta ttatgaataaggactgggtaagactggtgccagccgccgcggtantaccagcagtccaag tagcagccgc;

- cccgccaattcctttaagtttcagtcttgcgaccgtacttcccaggcggcaaacttaacg gcttccctgc ggcactgcactggccataagccagtgcatcaccgagtttgcatcgtttacagctgggact acccgggtat ctaatccggtttgctcccccagctttcatccctcaccgtcgaacgcgttctggtagaccg ccttcgccac tggtggtcctcaatggatcagaggattttacccctacccaccgaataccgtctacctctc ccgctcccta gctatgtagtatctccggcagcccatctgttaagcagatggatttaaccggagacttgca gagccggcta cggatgctttaggcccaataaacctcctaaccactcgaggtgctggtattaccgcggcgg ctgacaccag acttgcccaccccttattcaccagtagatttagaactgacaaaagatttcttcagcagaa atcactcgga ttaaacctagtcgtgctttcgcacattgctaaggtttcctcgcctgctgcgccnccatag gg;

- gaatgctctagattttccggttgatcctgccggacccgactgctatcagaataggactaa gccatgcgag tcaacgtagcaatacgtggcatacggctcagtaacacgtagtcaacatgcccagaggacg tggataacct cgggaaactgaggataaaccgcgataggtcataatatctggaatgatttatggtttaaat ctatatggcc tctggattggactgcggccgatcaggctgttggtgaggtaatggcccaccaaacctaaaa ccggtacggg ctctgagaggagaagcccggagatgggcactgagacaagggcccaggccctatggggcgc agcaggcgcg aaaactctgcaataagcgaaagcttgacagggttattctgagtgatttccgctaaggaaa tcttttggca cctctaaaaatggtgcagaataaggggtgggcaagcctggtgtcagccgccgcggtaata ccagcacccc gagtggtcgggacgattattgggcctaaagcatccgt;

- gtgaatcagctcggtacctcgcgatgctgntagatncccgccattcctttaagtntcagt cttgcgaccg tactccccangcngcagacttaacggcttccctgcggcactgggccggcatgaagccggc ccatcaccga gtctgcatcgtttacagctgggactacccgggtatctaatccggtttgctcccccagctt tcatccctca ccgtcgagcgcgttctgacaagccgccttcgccactggtggtcttcaatggatcagagga ttttacccct acccactgagtaccgcttgcctctcccgcctcclagtcttgtagtatcttccgcagccca tctgttaage agctggatttaacggaagacttgcaagaccggctacggatgcttnaggcccaataatcgt cccgaccact cggggtgctggtatta ^cc g ^c ggcggctgaca ^cc aga ^c ttg ^cccacccc ttatt ^c tg ^ca t ^c gtttttagag atgccaaaagatncccttagcgggaatcactcagagtaaccctgtcaggctttcgcctat ttnagaggtt tcgcgcctgctgcgccccatagg ;

- agctcggtacctcgcgaatgctctagattcccgccaattcctttaagttcagtcttgcga ccgtactccc caggcggcagacttaacggcttccctgcggcactgggttggctcgaagccaacccatcac cgagtctgca tcgtttacagctgggactacccgggtatctaatccggtttgctcccccagctttcatccc tcaccgtcga gcgcgttctggcaaaccgccttcgccactggtggtcttcagtagatcaatggattttacc cctacccact gagtaccgtttgcctctcccgcctcctagctctgcggtatcctccgcagcccatccgttg agcaggtgga tttaacggaggacttgcagaacaagctacggatgctttaggcccaataatcgtcccgaca actcggggtg ctggtattaccgcggcggctgacaccagacttgcccaccccttattctgcaccattttta gaggtgccaa aagatacccttagcgggcatcactcagagtaaccctgtcaggctttcgcctattgcagag gtttcgcgcc tgctgcgccccatagggcctgggcccttgtctcagtgcccatctccgggctccttctctc aaagcccgta ccggtaaca;

- tgcntctagatttccggttgatcctgccggaccccactgctatcgggataggactaagac atgctagtcg agtggctcagccaatacgagccacggcatacagctcagtaacacgtggctaatctgccct taggacgaga acaaccccgggaaactggggctaactctcgataggcgaagaactctggaatgagtcttca cctaaatagt tcagcgttatgctcgttgaaccgcctaaggatgaggccgcgaccgatcaggttgttggtg aggtaatggc tcaccaagccttttaccggtgcgggccgtgagagcgggagcccggagatgggcactgaga caagggccca ggccctacggggcgcagcagtcgcgaaaactttgcaatacacgaaagtgtgacagggcta tcccgagtgc catccgctgaggaaggcttttacccagtctagaaagctgggagaataaggagagggcaag tctggtgtca gccgccgcnggtaataccagctctcccgagtggtgtggatgtttaattgggccctaaa;

- aatgctgctagatatgccggttgatcctgccggacccgactgctatcagaataggactaa gccatgcgag tcaacgtagcaatacgtggcatacggctcagtaacacgtagtcaacatgcccagaggacg tggataacct cgggaaactgaggataaaccgcgataggtcataatatctggaatgatttatggtttaaat ctatatggcc tctggattggactgcggccgatcaggctgttggtgaggtaatggcccaccaaacctaaaa ccggtacggg ctctgagaggagaagcccggagatgggcactgagacaagggcccaggccctatggggcgc agcaggcgcg aaaactctgcaataagcgaaagcttgacagggtnattctgagtgatttccgctaaggaaa tcttttggca cctctaaaaatggtgcagaataaggggtgggcaagcctggtgtcagccgccgcggtaata ccagcacccc gagtggtcnggacgattattgggcctagagcatccgtagccngttctacaagtcttccgt taaatccacc tgcttaacagatgggctgcggaggatactatggagctaggaggcgggaga;

- cgaatgcatctagatnattccggttgatcctgccggaccccactgctatcgggataggac taagacatgc tagtcgcgtgcctcagctaaaacgaggcacggcatacagctcagtaacacgtggctaatc tgcccttggg ataggaacaaccccgggaaactggggctaattcccaataggcgaagaactctggaatgag tcttcaccag aaacgaacctacgttatgctcgtagaattcgcccaaggatgaggccgcgaccgatcaggt tgttggtgag gtaatggctcaccaagccttttaccggtgcgggccgtgagagcgggagcccggagatggg cactgagaca agggcccaggccctacggggcgcagcagtcgcgaaaactttgcaataagcgaaagcttga cagggctatc ccgagtgccatccgctgaggaangcttttacccagtctagaacgctgggggaataaagga gagggcaagt ctggtgtcngccgccgcggtaaatac,

Указанные признаки являются существенными признаками изобретения, так как в своей совокупности обеспечивают достижение технического результата - повышение эффективности, упрощение технологии получения и снижения стоимости инокулянта.

Археи с указанными специфическими маркерами нуклеотидных последовательностей диагностического фрагмента гена 16S рРНК были обнаружены в глауконитовых рудах, а также в водных источниках месторождений глауконитовых руд

Исследование выявленных архей были выполнены в «Всероссийском научно- исследовательском институте сельскохозяйственной микробиологии» (г Санкт-Петербург). По результатам исследований установлено, что обнаруженные авторами изобретения микроорганизмы, которые являются микробиологической основой заявленного биокулянта, представляют собой микроорганизмы домена археи по трехдоменной системе биологической классификации. Таксономический анализ показал, что данные археи не имеют сходства с известными науке археями и точно идентифицировать их не удалось. Фактически, каждая из обнаруженных архей является новым видом микроорганизмов. Однако, каждая из обнаруженных архей имеет свой специфический маркер - нуклеотидную последовательность диагностического фрагмента гена 16S рРНК, по которой ее всегда можно идентифицировать, например, при выделении из других образцов или, например, в будущем, когда родственный организм будет изучен, наименован и проанализирован по гену 16S рРНК.

Ближайшими родственниками по степени сходства являются микроорганизмы типов: Кренархеоты (Crenarchaeota), Эвриархеоты (Euryarchaeota).

Выявленные археи являются некультивируемыми одноклеточными микроорганизмами, что исключает потерю их свойств при смене поколений. Являются экстремофилами, то есть, способны выживать в экстремальных условиях окружающей среды (экстремально высокие или низкие температуры, давления, кислотность, щелочность, содержание кислорода и т. д ), что определяет выживаемость и стабильность микроорганизмов инокулянта в процессе хранения и использования Не являются патогенами. Устойчивы к антибиотикам, что гарантирует их выживание при использовании в растениеводстве препаратов, содержащих антибиотики.

В отличие от известных почвенных микроорганизмов (микроорганизмов ризосферы) вывяленные археи не являются сапротрофами, азотфиксаторами, фосфатмобилизаторами и т. д. То есть, они не выполняют непосредственно функции, присущие представителям почвенной микрофлоры. В то же время полевые и микро полевые испытания биокулянта с указанными археями на различных сельскохозяйственных культурах показали его высокую эффективность. Результаты испытаний приведены в следующих разделах описания.

Авторы изобретения объясняют эффективность заявляемого инокулянта взаимодействием выявленных архей с представителями естественной почвенной микрофлоры на некотором информационном уровне путем известного горизонтального переноса генов, что обеспечивает усиление их полезных функций, а также взаимодействием с растениями на генном уровне Установлено, что следующие поколения растений, выращенных с применением заявляемого инокулянта, сохраняют приобретенные свойства на генном уровне.

В качестве носителя целесообразно использовать порошкообразный глауконит или водную суспензию порошкообразного глауконита Глауконит - минерал, водный алюмосиликат железа, кремнезема и оксида калия непостоянного состава Содержит окись калия (К ₂ 0) 4, 4-9, 4 %, окись натрия (Na ₂ 0) до 3,5 %, окись алюминия (А1 ₂ 0 ₃ ) 5,5-22,6 %, окись железа (Fe ₂ 0 ₃ ) 6,1-27 %, закись железа (FeO) 0,8-8, 6 %, окись магния (МдО) 2,4-4, 5 %, двуокись кремния (Si0 ₂ ) 47,6-52,9 %, вода (Н ₂ 0) 4,9-13,5%. Разнообразие неорганических веществ в глауконите обеспечивает удовлетворительное среду обитания для выявленных архей.

Приготовление инокулянта включает простое введение заданного количества микроорганизмов в порошкообразный глауконит или в водную суспензию порошкообразного глауконита, дальнейшее инкубирование (ферментация) не требуется, что упрощает технологию получения и снижает стоимость инокулянта

Ниже приводится описание заявляемого инокулянта для растений, особенностей его применения и полученных результатов со ссылками на изображения (фотографии), на которых показано:

Фото 1 - Инокулянт для растений, пример выращивания томатов, инокулированное растение.

Фото 2 - Инокулянт для растений, пример выращивания томатов, контрольный образец.

Фото 3 - Инокулянт для растений, пример выращивания пшеницы Фото 4 - Инокулянт для растений, пример выращивания подсолнечника, результаты всхожести семян по состоянию на начало июня

Фото 5 - Инокулянт для растений, пример выращивания подсолнечника, вегетация по состоянию на середину июля. Фото 6 - Инокулянт для растений, пример выращивания подсолнечника, вегетация по состоянию на начало августа.

Фото 7 - Инокулянт для растений, пример выращивания подсолнечника, период созревания семян по состоянию на начало сентября.

Заявленный инокулянт для растений содержит носитель с микробиологическими культурами, в котором в качестве микробиологических культур использованы микроорганизмы домена археи, которые характеризуются одним из следующих специфических маркеров нуклеотидных последовательностей диагностического фрагмента гена 16S рРНК: - ggttgatcctgccggagatcgctgctattagagttcgactaagccatgcaagtcatctcg caagagaggc gacaggctcagtaacatgtcgttaatctaccctttcgcccagaataccctcgggaaactg aggttaatac tggatatgaaagatattctggaaagaattttttcttaaaggcaacacgaaaggatgagac ggcaccagat taggctgttggcggtgtaatggaccaccaaacctacgatctgtacgggggatgaaagtcc tagcccggag aggaacactgagatactggttccagccctacggggtgcagcaggcgcgaaacctttacaa tgcacgaaag tgtgataagggaactctaagtgcttatgttttacataggcttttgccgaaggtaaatact tcggagaata agtggtgggtaagactggtgccagccgccgcggtanccccagcgccacaagtggggatca cgtttatttg gtctaaagcgttcgtaccagg ;

- attccggttgatcctgccggacctgactgctatcggattgatactaatnnccatgcgagt cattgtagca atacaaggcagacggctcagtagcgcgtagtcaatctaccctatggacgggaataacctc gggaaactga gaataatgcccgatagaacattatgcctggaatggtttatgtttcaaatgatttatcgcc ataggatggg actgcggcctatcagtttgttggtgaggtaatggcccaccaagactattacaggtacggg ctctgagagg agtggcccggagatgggtactgagacacggacccaggccctatggggcgcagcaggcggg aaaactttgc aatgtgcgaaagcacgacnaaggttaatccgagtggtttctgctaaagaaaccttttgtc agtcctagaa accactaaacgaataagggggtgggncaagttctggntgtnngcccgcccgcgggtaaaa acccagcaac cctcaagntgggttcagggnattg;

- tccggttgatcctgccggacctgactgctatcggattggtactaagcncatgtgagtcgt tgcagcaatg Caaggcagacggctcagtaacacgtagtcaacctaacctatggacggggataacctcggg aaactgagaa taatacccgatagatcatgatacctggaacggtttatggtccaaatgatttatcgccata ggatggggct gcggtctatcagcttgttggtgaggtaatggcccaccaaggctataacagatacgggctc tgagaggagg ggcccggagatgggtactgagacacggacccaggtcctatggggcgcagcaggcgagaaa cctttgcaat gtgcgaaagcacgacaaggttaatccgagtgattccctgctaaaggaatcttttgttagt cataaaaacc cactgatgaataaggagtgggcaagttctggtgtcagccgccgcggtaaaacccaagcac cctcaagtgg;

- attccggttgatcctgccggagatcgctgctattagagttcgactaanntcncatgcaag ttatctcgca agagaagcgacaggctcagtaacatgtcgttaatctaccctttcgcctggaataccctcg ggaaactgag gttagcaccggatatgaaagatattctggaaagaattttttcttaaaggcatcacgaaag gatgagacgg caccagattgggctgttggcggtgtaatggaccaccaaacctacgatctgtacgggggat gaaagtccta gcccggagaggaacactgagatactggttccagccctacggggtgcagcaggcgcgaaac ctttacaatg cacgaaagtgtgataagggaactctaagtgcttatgttttacataggcttttgccgaagg taaatacttc ggagaataagtggtgggtaaagactggtgccagccgccgcgggtaaccccancgccacaa gtggggatca cgt;

- ttccggttgatcctgccggaggctgctgctatctggtttgcaattagacatgcaagtctt tttgtttttt cggaaatgaaaggcgaactgctcagtaacacgtagctaacctgccctaacgacggaaata atgtcgggaa actgactctaacatccgatagaagaagacaactggaatgtgttttctttcaagtcaggat ggggctgcgg ctgattagcttgttggcggggtaatagcccaccaaggcgtannatcagtaagggctctta gcggagaagc cctgagaggggatctgagacactatccccagccctacggggtgcagcagtcgggaaactt ctgcaatgta cgcaagtatgacagagcaagccagagtgattctctaataattgagcatctcttataatat gtaaaaagta ttatgaataaggactgggtaagactggtgccagccgccgcggtantaccagcagtccaag tagcagccgc;

- cccgccaattcctttaagtttcagtcttgcgaccgtacttcccaggcggcaaacttaacg gcttccctgc ggcactgcactggccataagccagtgcatcaccgagtttgcatcgtttacagctgggact acccgggtat ctaatccggtttgctcccccagctttcatccctcaccgtcgaacgcgttctggtagaccg ccttcgccac tggtggtcctcaatggatcagaggattttacccctacccaccgaataccgtctacctctc ccgctcccta gctatgtagtatctccggcagcccatctgttaagcagatggatttaaccggagacttgca gagccggcta cggatgctttaggcccaataaacctcctaaccactcgaggtgctggtattaccgcggcgg ctgacaccag acttgcccaccccttattcaccagtagatttagaactgacaaaagatttcttcagcagaa atcactcgga ttaaacctagtcgtgctttcgcacattgctaaggtttcctcgcctgctgcgccnccatag gg;

- gaatgctctagattttccggttgatcctgccggacccgactgctatcagaataggactaa gccatgcgag tcaacgtagcaatacgtggcatacggctcagtaacacgtagtcaacatgcccagaggacg tggataacct cgggaaactgaggataaaccgcgataggtcataatatctggaatgatttatggtttaaat ctatatggcc tctggattggactgcggccgatcaggctgttggtgaggtaatggcccaccaaacctaaaa ccggtacggg ctctgagaggagaagcccggagatgggcactgagacaagggcccaggccctatggggcgc agcaggcgcg aaaactctgcaataagcgaaagcttgacagggttattctgagtgatttccgctaaggaaa tcttttggca cctctaaaaatggtgcagaataaggggtgggcaagcctggtgtcagccgccgcggtaata ccagcacccc gagtggtcgggacgattattgggcctaaagcatccgt;

- gtgaatcagctcggtacctcgcgatgctgntagatncccgccattcctttaagtntcagt cttgcgaccg tactccccangcngcagacttaacggcttccctgcggcactgggccggcatgaagccggc ccatcaccga gtctgcatcgtttacagctgggactacccgggtatctaatccggtttgctcccccagctt tcatccctca ccgtcgagcgcgttctgacaagccgccttcgccactggtggtcttcaatggatcagagga ttttacccct acccactgagtaccgcttgcctctcccgcctcctagtcttgtagtatcttccgcagccca tctgttaage agctggatttaacggaagacttgcaagaccggctacggatgcttnaggcccaataatcgt cccgaccact cggggtg ^c tggtattaccgcggcgg ^c tga ^c ac ^c agacttgcccaccccttattctgcatcgtttttagag atgccaaaagatncccttagcgggaatcactcagagtaaccctgtcaggctttcgcctat ttnagaggtt tcgcgcctgctgcgccccatagg;

- agctcggtacctcgcgaatgctctagattcccgccaattcctttaagttcagtcttgcga ccgtactccc caggcggcagacttaacggcttccctgcggcactgggttggctcgaagccaacccatcac cgagtctgca tcgtttacagctgggactacccgggtatctaatccggtttgctcccccagctttcatccc tcaccgtcga gcgcgttctggcaaaccgccttcgccactggtggtcttcagtagatcaatggattttacc cctacccact gagtaccgtttgcctctcccgcctcctagctctgcggtatcctccgcagcccatccgttg agcaggtgga tttaacggaggacttgcagaacaagctacggatgctttaggcccaataatcgtcccgaca actcggggtg ctggtattaccgcggcggctgacaccagacttgcccaccccttattctgcaccattttta gaggtgccaa aagatacccttagcgggcatcactcagagtaaccctgtcaggctttcgcctattgcagag gtttcgcgcc tgctgcgccccatagggcctgggcccttgtctcagtgcccatctccgggctccttctctc aaagcccgta ccggtaaca;

- tgcntctagatttccggttgatcctgccggaccccactgctatcgggataggactaagac atgctagtcg agtggctcagccaatacgagccacggcatacagctcagtaacacgtggctaatctgccct taggacgaga acaaccccgggaaactggggctaactctcgataggcgaagaactctggaatgagtcttca cctaaatagt tcagcgttatgctcgttgaaccgcctaaggatgaggccgcgaccgatcaggttgttggtg aggtaatggc tcaccaagccttttaccggtgcgggccgtgagagcgggagcccggagatgggcactgaga caagggccca ggccctacggggcgcagcagtcgcgaaaactttgcaatacacgaaagtgtgacagggcta tcccgagtgc catccgctgaggaaggcttttacccagtctagaaagctgggagaataaggagagggcaag tctggtgtca gccgccgcnggtaataccagctctcccgagtggtgtggatgtttaattgggccctaaa;

- aatgctgctagatatgccggttgatcctgccggacccgactgctatcagaataggactaa gccatgcgag tcaacgtagcaatacgtggcatacggctcagtaacacgtagtcaacatgcccagaggacg tggataacct cgggaaactgaggataaaccgcgataggtcataatatctggaatgatttatggtttaaat ctatatggcc tctggattggactgcggccgatcaggctgttggtgaggtaatggcccaccaaacctaaaa ccggtacggg ctctgagaggagaagcccggagatgggcactgagacaagggcccaggccctatggggcgc agcaggcgcg aaaactctgcaataagcgaaagcttgacagggtnattctgagtgatttccgctaaggaaa tcttttggca cctctaaaaatggtgcagaataaggggtgggcaagcctggtgtcagccgccgcggtaata ccagcacccc gagtggtcnggacgattattgggcctaaagcatccgtagccngttctacaagtcttccgt taaatccacc tgcttaacagatgggctgcggaggatactatggagctaggaggcgggaga;

- cgaatgcatctagatnattccggttgatcctgccggaccccactgctatcgggataggac taagacatgc tagtcgcgtgcctcagctaaaacgaggcacggcatacagctcagtaacacgtggctaatc tgcccttggg ataggaacaaccccgggaaactggggctaattcccaataggcgaagaactctggaatgag tcttcaccag aaacgaacctacgttatgctcgtagaattcgcccaaggatgaggccgcgaccgatcaggt tgttggtgag gtaatggctcaccaagccttttaccggtgcgggccgtgagagcgggagcccggagatggg cactgagaca agggcccaggccctacggggcgcagcagtcgcgaaaactttgcaataagcgaaagcttga cagggctatc ccgagtgccatccgctgaggaangcttttacccagtctagaacgctgggggaataaagga gagggcaagt ctggtgtcngccgccgcggtaaatac,

Археи с указанными специфическими маркерами могут быть выделены из глауконитовых руд, а также из водных источников месторождений глауконитовых руд

В качестве носителя использован порошкообразный глауконит или водная суспензия порошкообразного глауконита. Глауконит, содержащий многообразие неорганических веществ, обеспечивает удовлетворительную среду для существования данных архей. Инокулянт готовят следующим образом.

Готовят носитель путем измельчения глауконита до мелкозернистого состояния или готовят водную суспензии глауконитового порошка. Содержание глауконита в водной суспензии составляет 0,5 - 50 весовых процентов.

В приготовленный носитель вводят археи в количестве от 102-106 микроорганизмов на 1 см ³ носителя. В результате получают сыпучий инокулянт (при использовании в качестве носителя порошка глауконита) или жидкий инокулянт (при использовании в качестве носителя водной суспензии порошка глауконита).

Инокулянт расфасовывают в соответствующую, например полиэтиленовую тару и отправляют на хранение. Хранение осуществляют при температуре не выше 70 °С при влажности не ниже 5 %. Срок хранения инокулянта - не ограничен

Применяют инокулянт путем предпосевной обработки семян (замачивание, инкрустация, дражирование по известным технологиям), замачивания черенков или корневой системы саженцев, введения в почву при посадке (посеве) растений, обработки надземной части растений и подкормки в период вегетации, используя эффективное количество биокулянта в зависимости от вида растения, природы и состояния почвы. Для любого конкретного случая «эффективное количество» может определить специалист в данной области, используя обычные эксперименты.

Применение заявленного инокулянта: - обеспечивает высокую приживаемость саженцев и рассады,

- способствует быстрому укоренению черенков;

- стимулирует образование корней, рост и развитие растений;

- повышает иммунитет растений к стрессовым ситуациям и заболеваниям;

- предупреждает поступление канцерогенов, радионуклидов и тяжелых металлов в растение;

- улучшает (стабилизирует) качество почвы;

- обеспечивает повышение продуктивности растений в широком смысле, то есть, повышение биомассы или урожайности листьев, стеблей, зерна, фруктов, овощей, цветов или других частей растения, которые используются для различных целей. Эффективность заявленного инокулянта подтверждена полевыми экспериментами.

Ниже приводятся примеры применения заявленного инокулянта и полученные результаты.

Пример 1 Выращивание томатов. Для эксперимента был выбран сорт «Микадо желтый (низкорослый)», характеризующийся повышенной требовательностью к условиям выращивания. Эксперимент проводился в Броварском районе Киевской области, Украина, на бедных супесчаных почвах с низким плодородием, характерных для восточной части Киевской области. Площадь экспериментального участка 0,1 га

Корневая система высаженной рассады томатов была предварительно замочена в жидком инокулянте (носитель - водная одно процентная суспензия порошка глауконита). Контрольная рассада замачивалась в простой воде Условия замачивания (время, температура) были одинаковыми. Условия полива испытуемых и контрольных растений в период вегетации были равными В период вегетации выполнялось четыре корневые подкормки, подкормка испытуемых образцов выполнялось с добавлением инокулянта.

Результаты эксперимента показаны на фото 1 , 2. Фото 1 - с применением инокулянта (инокулированные растения), фото 2 - без применения инокулянта (контрольные растения). Инокулированные томаты (фото 1) имеют обширные здоровые кусты, количество плодов на кусте от 25 до 50 единиц Контрольные томаты (фото 2), как правило, имеют один стебель и немного плодов (от 10 до 16 плодов). То есть применение заявленного инокулянта повышает урожайность томатов не менее чем в два раза.

Пример 2. Выращивание пшеницы. Для эксперимента был выбран озимый сорт «Акратос» (немецкий сорт). Эксперимент проводился в Барышевском районе Киевской области, Украина. Площадь экспериментального участка 10 га - 5 га с применением заявленного инокулянта и 5 га без инокулянта (контрольная участок)

Известно, что основной задачей посева озимой пшеницы является формирование корневой системы растений, позволяющее перенести неблагоприятные условия зимовки и обеспечить весеннюю вегетацию с минимальными потерями, что имеет решающее значение в реализации потенциальной продуктивности культуры

Семена пшеницы предварительно перед посевом были обработаны заявленным инокулянтом. Применялся жидкий инокулянт (носитель - водная одно процентная суспензия порошка глауконита). Контрольные семена предпосевной обработке не подвергались Для чистоты эксперимента обработанная пшеница была посеяна рядом с необработанной (контроль) в таком же объеме с использованием одинаковой техники и технологии посева

Результаты показаны на фото 3. С левой стороны - образцы растений с предпосевной обработкой инокулянтом (инокулированные растения), с правой стороны - без обработки (контрольные растения).

Инокулированные образцы (фото 3, слева) характеризуются большим количеством побегов, высокой кустистостью, развитой корневой системой с вторичными корнями, чем выгодно отличаются от контрольных образцов (фото 3, справа).

В период осенне-весенней вегетации выполнялось три внекорневые обработки, обработка испытуемых растений выполнялась с добавлением заявленного инокулянта.

Урожайность инокулированной пшеницы превысила урожайность контрольной на

50%.

Пример 3. Выращивание подсолнечника. Для микро-полевого эксперимента был выбран сорт отечественного производителя. Эксперимент проводился в Броварском районе Киевской области, Украина, на супесчаной дерново-слабоподзолистой почве Размер участка 2,5 м х 6 м; площадь участка 15 м ² ; расстояние между рядами 0,7 м; расстояние между растениями в ряду 0,3 м.

Семена подсолнечника предварительно перед посевом были замочены в заявленном инокулянте. Применялся жидкий инокулянт (носитель - водная одно процентная суспензия порошка глауконита). Контрольные семена предварительно перед посевом замачивали в обычной воде. Все работы по проведению микро-полевого эксперимента (разметка и перекопка участка, посев подсолнечника, прополки, сбор урожая) выполнялись вручную. В период микро-полевых работ не проводилось никаких подкормок и обработок, не использовались минеральные удобрения. Микро-полевые работы проводились в период май - сентябрь: замачивание семян, высадка в грунт - начало мая, сбор урожая - середина сентября. Результаты фенологических наблюдений в течение вегетационного периода показаны на фото 4-7. На указанных фото видны существенные различия в росте и развитии растений подсолнечника, семена которого замачивали в заявленном инокулянте, в сравнении с растениями, семена которых замачивали в обычной воде (контроль).

На фото 4 показаны результаты всхожести семян по состоянию на начало июня. С левой стороны фото - контрольные растения. Всхожесть семян, замоченных в заявленном инокулянт, составила 20 из 20, всхожесть семян, замоченных в обычной воде - 18 из 20 Стебли инокулированных растений толще контрольных в 2-3 раза, они, как минимум, в 2 раза выше, их листья, находящиеся в средней части стебля, значительно больше в сравнении с контрольными.

На фото 5 показано развитие растений по состоянию на середину июля С левой стороны фото - контрольные растения. Инокулированные растения имеют насыщенный зеленый цвет, высокие, с толстыми стеблями и широкими листьями. Контрольные растения отстают в росте и развитии, низкие, количество и размер листьев меньше

На фото 6 показано развитие растений по состоянию на начало августа. С левой стороны фото - контрольные растения. В инокулированных растениях корзины значительно больше, не имеют деформаций, семена расположены в корзинах равномерно, растения имеют здоровый вид. В контрольных растениях на листьях присутствуют мелкие пятнышки, местами имеется бурая пятнистость, соцветия уменьшены в размерах, деформированы или отсутствуют.

На фото 7 показаны растения в период созревания семян по состоянию на начало сентября. С левой стороны фото - контрольные растения. Контрольные образцы растений практически не содержат активных листьев, малые размеры корзин В инокулированных растениях сохранена большая масса активных листьев, что непосредственно влияет на МТС (масса тысячи семян) и содержание масла в семенах. Корзины большие, присутствуют на всех растениях, не имеют деформаций и полностью раскрыты. Диаметр корзин достигает 20 см. Урожайность инокулированного подсолнечника в 2,6 раза превышает урожайность контрольного.