Die Erfindung betrifft ein neues Verfahren zur Herstellung von 4-Amιnopteπdιndeπvaten der allgemeinen Formel

worin Rl ein Wasserstoffatom, eine C _j -C4- Alkylgruppe, eine Arylgruppe, substituiert oder unsubstituiert, -NH2, -SR ³ , -OR ³ , -NHR ³ oder -N(R ³ )2, worin R ³ eine Cι -C4-Alkylgruppe ist, und R^ eine C 1 -C4-Alkylgruppe, eme Arylgruppe, substituiert oder unsubstituiert. eine Heteroarylgruppe, substituiert oder unsubstituiert, oder -CH2X. worin X ein Halogenatom ist, bedeutet, ausgehend von emem 4,5.6-Tπamιnopyπmιdιn der allgemeinen Formel

worin R die genannte Bedeutung hat

4-Amιnopteπdιndeπvate sind wichtige Zwischenprodukte zur Synthese von Pteπndeπvaten wie beispielsweise zur Herstellung von Folsaure, ihres Antagonisten Aminopteπn und des Cytostatikums Methotrexat (DE-OS 27 41 383)

Zur Herstellung von 4-Amιnopteπdιndeπvaten sind mehrere Verfahren bekannt

Die CH-PS 630 380 beschreibt ein Verfahren zur Herstellung von 2,4-Dιamιno-6-brom- methylpteπdin durch direkte Bromierung von 2.4-Dιamιno-6-methylpteπdιn Dabei wird zum einen das Produkt nur in massiger Ausbeute erhalten Zum anderen weist das Produkt Verunreinigungen auf.

Piper J.R. & Montgomery J.A. (J. Heterocyclic Chem., 1974, 1 1, S. 279 - 280) beschreiben ein Verfahren zur Herstellung von 2,4-Diamιno-6-brommethylpteπdin ausgehend von 2,4-

Dιamιno-6-hydroxymethylpteπdιn Dabei wird das 2,4-Dιamιno-6-hydroxymethylptendιn mit

Tπphenylphosphindibromid bromiert Auch dieses Verfahren hat den Nachteil, dass das Produkt nur in massigei Ausbeute erhalten wird Ein weiterer Nachteil ist, dass das Bromierungsreagens in 4-fachem stochiometrischen Uberschuss eingesetzt werden muss

Die GB-1 414 752 beschreibt ein Verfahren zur Herstellung von 2,4-Dιamιno-6- chlormethylpteπdin bei dem das Edukt 2,4-Diamιno-6-hydroxymethylpteridιn mittels Thionylchlond chloriert wird. Nachteilig bei diesem Verfahren ist, dass die Herstellung des Edukts kompliziert ist oder mit der Bildung störender, schwer abzutrennender Nebenprodukte verbunden ist (P.H Boyle, W. Pfleiderer, Chem Ber., 1980, 1 13, S. 1514 ff.).

Shey CF. et al., (Shi Ta Hsueh Pao (Taipei), 1984, 29, S 631 ff, Chem. Abstract 101 - 230476)) beschreiben eine 3-stufige Synthese zur Herstellung von 2,4-Dιamιno-6-chlor- methylpteπdm. Dabei wird in der ersten Stufe Aminomalodinitπltosylat mit Chlorpyruval- doxim zum entsprechenden Pyrazin-N-oxid kondensiert, dieses dann in der zweiten Stufe zum entsprechenden Pyrazin reduziert, welches dann in der dritten Stufe ins Produkt überfuhrt wird. Ein grösser Nachteil dieses Verfahrens besteht dann, dass das Produkt nur in geringer Ausbeute erhalten wird

Yamamoto H et al., (Chem. Ber. 1973, 106, S. 3175 - 3 193) beschreiben die Herstellung von 2,4-Dιamtno-6-phenylpteπdιn ausgehend von dem Edukt 2,4,6-Tπacetamιdo-5- nitrosopyπmidin. Dabei wird das Edukt mit Phenylacetaldehyd umgesetzt. Nachteilig bei diesem Verfahren ist, dass das Edukt nicht in reiner Form zugänglich ist

Aufgabe der vorliegenden Erfindung war es sowohl ein wirtschaftlicheres Verfahren zur Herstellung von 4-Amιnopteπdιndeπvaten zur Verfugung zu stellen als auch mit diesem Verfahren einen wirtschaftlichen Zugang zur Herstellung von Pteπnen wie beispielsweise Folsäure bereitzustellen

Diese Aufgabe wird mit den erfindungsgemässen Verfahren nach Anspruch 1 und 6 gelost

Erfindungsgemäss wird das Verfahren zur Herstellung von 4-Amιnopteπdιndeπvaten derart durchgeführt, dass man ein 4,5,6-Tπarnιnopyπmιdιn der allgemeinen Formel

worin Rl die genannte Bedeutung hat oder dessen Salz mit einer Verbindung der allgemeinen Formel

worin R^ die genannte Bedeutung hat in das Endprodukt der Formel

worin R 1 und R^ die genannte Bedeutung haben, überführt.

Die als Edukte eingesetzten 4,5,6-Triaminopyπmidιne können auf bekannte Weise hergestellt werden. Beispielsweise wird 2,4,5,6-Tetraamιnopyπmιdin der Formel II (Rι = NH2) aus 2,4,6-Tπamιno-5-nιtroso-pyrmιdιn durch Hydrierung mit Wasserstoff/Raney-Nickel in Wasser hergestellt und nach der Katalysatorabtrennung z. B. als Salz eingesetzt (Boyle P.H. & Pfleiderer W , Chem. Ber., 1980, 1 13, S. 1514ff).

Als Salze der 4,5,6-Tπamιnopyπmιdιne der allgemeinen Formel II werden zweckmassig deren Hydrochlorid- bzw. Hydrobromid-Salze verwendet

Der Substituent R^ bedeutet ein Wasserstoffatom, eine Cι -C4-Alkylgruppe, eine Arylgruppe, substituiert oder unsubstituiert, -NH2, -SR ³ , -OR ³ , -NHR ³ oder -N(R ³ )2- worin R ³ eine C ] - C4-Alkylgruppe ist. Der Substituent R^ bedeutet eine Cj -C4-Alkylgruppe, eine Arylgruppe, substituiert oder unsubstituiert, eine Heteroarylgruppe, substituiert oder unsubstituiert. oder - CH2X, worin X ein Halogenatom ist

Ein Halogenatom kann Fluor, Chlor, Brom oder Jod, vorzugsweise Chlor oder Brom bedeuten. Eine unsubstituierte Arylgruppe kann Phenyl oder Naphtyl, vorzugsweise Phenyl- bedeuten. Eine substituierte Phenylgruppe kann Tolyl-, Halogenphenyl wie Fluor-, Chlor-, Brom-, 3,5-Difluorphenyl oder C _| -C ₄ -Alkoxyphenyl wie Methoxy-, Ethoxy-, Propoxy- oder Butoxyphenyl bedeuten. Vorzugsweise wird als substituierte Phenylgruppe Chloφhenyi, Methoxyphenyl oder Tolyl verwendet.

Eine unsubstituierte Heteroarylgruppe kann Pyridinyl, Pyπdazinyl, eine substituierte Heteroarylgruppe kann Methylpyπdinyl bedeuten Eine C,-C ₄ -Alkylgruppe kann Methyl-, Ethyl-, Propyl-, i-Propyl-, Butyl-, i-Butyl oder t-Butyl-, vorzugsweise Methyl oder Ethyl, bedeuten Die Bedeutung von -SR ³ kann sein -SCH ₃ , -SC ₂ H ₅ , -SC ₃ H ₉ , -SC ₄ H, ₃ , vorzugsweise

-SCH ₃ ; von -OR ³ , -OCH ₃ , -OC ₂ H ₅ , -OC ₃ H ₉ , -OC ₄ H ₁₃ , vorzugsweise -OCH ₃ , von -NHR ³ , -NHCH ₃ , -NHC ₂ H ₅ ; von -N(R ³ ) ₂ , -N(CH ₃ ) ₂ , -N(C ₂ H ₅ ) ₂ , -N(C ₃ H ₇ ) ₂ , -N(C ₄ H,) ₂ , vorzugsweise -N(CH ₃ ) ₂ .

Zweckmassig wird die Umsetzung in einem inerten Lösungsmittel durchgeführt Als inerte Lösungsmittel können polar protische oder polar aprotische Losungsmittel verwendet werden. Als polar protische Losungsmittel können Wasser oder C,-C ₄ -Alkohole verwendet werden Als C,-C ₄ - Alkohole werden zweckmassig Methanol, Ethanol, Propanol oder Butanol, insbesondere Methanol, verwendet Als polar aprotisches Losungsmittel kann Dimethylforma- mid oder Dimethylacetamid verwendet werden Die geeigneten Losungsmittel können einzeln oder als Mischung verwendet werden

Die Umsetzung wird zweckmassig bei einer Temperatur von 0°C bis zur Ruckflusstempera¬ tur des entsprechenden Losungsmittels, vorzugsweise bei 20 bis 70°C, durchgeführt

Die 4-Aminopteπdιndeπvate können durch fachmannisch übliche Aufarbeitungsmethoden isoliert werden und dann auf an sich bekannte Weise entweder

- in ein 6-Halogenmethyl-4H(lH)-pteπdιnon der allgemeinen Formel

worin R, die genannte Bedeutung hat und R ² -CH ₂ X bedeutet, worin X ein Halogenatom ist, hydrolysiert (z. B. gemäß J. Heterocyclic Chem., 1987, S. 279ff) und/oder

durch Umsetzung mit einer Verbindung der allgemeinen Formel

worin R ⁴ einen Glutaminsaurerest und R ⁵ C,-C ₄ - Alkyl oder em Wasserstoffatom bedeuten m ein Pteπndeπvat der allgemeinen Formel

worin R' die genannte Bedeutung hat und Y Sauerstoff oder NH ist, wie z B Folsaure (R ¹ = NH ₂ , Y = Sauerstoff, R" = Glutaminsaurerest, R ⁵ = Wasserstoff)

überfuhrt werden

Das 2-Amιno-6-(brommethyI)-4H(lH)-pteπdιnon, (Formel V, R, - NH-, R ₂ = -CH ₂ Br) kann beispielsweise gemäss Piper et al , (J Heterocyclic Chem , 1987, 24, S 279ff) hergestellt werden und zur Alkyherung von p-Aminobenzoyl-L-glutaminsaure zu Folsaure weiterverwendet werden

Folsaure kann durch Umsetzen von 2,4-Dιamιno-6-brommethylpteπdιn (Formel I, R, = NH ₂ , R ₂ = -CH ₂ Br) mit p-Aminobenzoyl-L-glutaminsaure analog der Methode von Piper J R & Montgomery J A. (J Heterocyclic Chem , 1974, 11 , S 279 - 280) ins Aminopterin überfuhrt werden, welches dann beispielsweise gemäss Seeger D R et al , (J Am Chem Soc , 1949, 71, S 1753 - 1759) zur Folsaure hydrolysiert werden kann

Beispiel 1

Herstellung von Tetraaminopyrimidindihydrobromid

51,35 g 2,4,6-Triamino-5-nitrosopyrimidin (0,33 mol) und 2 g Palladiumkatalysator (z. B. 5% Pd/C, 50% Wasser) wurden in einem 1 I-Stahlautoklaven mit Flügelrührer in 350 ml Wasser suspendiert und bei 60 °C in 6 - 7 bar Wasserstoff gerührt bis nach 2,5 bis 3 Stunden Sättigung erreicht war. Nach dem Abkühlen und Entspannen wurde unter Schutzgas mit 111 g Bromwasserstoffsäure (48 % HBr) versetzt und der Katalysator durch Filtration abgetrennt. Das gelb-orange gefärbte, klare Filtrat wurde an einem Rotation Verdampfer in Wasserstrahl- Vakuum zur Trocken eingedampft. Man erhielt 98 bis 99 g Tetraaminopyrimidin-dihydro- bromid als leicht gelb gefärbten Eindampfrückstand (Gehalt 99,0 - 99,5 %, Ausbeute 98 - 99%).

Beispiel 2

Herstellung von 2,4-Diamino-6-brommethylpteridin

1 ,00 g (3,31 mM) 2,4,5,6-Tetraaminopyrimidindihydrobrornid wurde in 20 ml Methanol suspendiert und zum Sieden erhitzt. Zu dieser Suspension tropfte man in der Siedehitze innerhalb von 5 Minuten eine Lösung von 0,83 g (4,97 mM) Brompyruvaldoxim in 10 ml

Methanol. Dabei wurde eine Farbänderung nach gelb-orange beobachtet. Die Mischung wurde weitere 30 Minuten am Rückfluss erhitzt. Die nun klare Lösung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt und mit konz. Ammoniaklösung auf pH = 8 gestellt, wobei ein gelber Niederschlag sofort ausfiel. Die Mischung wurde weitere 30 Minuten bei diesem pH und bei Raumtemperatur gerührt. Der ausgefallene Niederschlag wurde auf einer Fritte gesammelt, nacheinander mit wenig Methanol und Ether gewaschen und bei 70 °C getrocknet.

Man erhielt 0.74 g geibes 2,4-Diamino-6-brommethylpteridin (Ausbeute 88%). Diese Produkt enthielt nach chromatographischen Analysen (DC, HPLC) keine weiteren Verunreinigungen.

¹ H-NMR: (DMSO-d ⁶ , 300 MHz), in ppm 4,82, s, 2H:

7,07, s, 2H;

7,98, s, IH;

8,07, s, IH; 8,88, s, IH.

Beispiel 3

Herstellung von 2,4-Dιamιno-6-chlormethylpteπdιn

a) in Methanol 1 ,07 g (5 mM) 2,4,5,6-Tetraamιnopyπmιdιndihydrochloπd wurden in 50 ml Methanol suspendiert und zum Sieden erhitzt. Zu dieser Lösung tropfte man in der Siedehitze innerhalb von 5 Minuten eine Losung von 0,91 g (7,5 mM) Chlorpyruvaldoxim in 10 ml Methanol. Es wurde eine Farbänderung nach gelb-orange beobachtet. Danach wurde die Mischung weitere 2 Stunden unter Rückfluss erwärmt. Die nun klare Lösung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt und mit konz. Ammoniaklösung auf pH = 8 gestellt, wobei ein gelber Niederschlag sofort ausfiel Die Mischung wurde weitere 30 Minuten bei diesem pH und bei Raumtemperatur gerührt. Der ausgefallene Niederschlag wurde auf einer Fπtte gesammelt, nacheinander mit wenig Methanol und Ether gewaschen und bei 70 °C getrocknet Man erhielt 0,84 g gelbes 2,4-Dιamιno-6-chlormethylpteπdin (Ausbeute 79%). Diese

Produkt enthielt nach chromatographischen Analysen (DC, HPLC) keine weiteren Verunreinigungen

¹ H-NMR. (DMSO-d ⁶ , 300 MHz), in ppm 4,89, s, 2H, 6.91 , s, 2H,

7,78, s, IH; 7,86, s, I H, 8,94, s, IH

b) in Dimethylacetamid

1 ,0 g (4,69 mmol) 2,4,5,6-1 etraamino-pyπmidinhydrochloπd wurde in 15 ml N.N- Dimethylacctamid (DMAC) suspendiert und für 10 Minuten auf 120 °C erhitzt Danach liess man die Suspension auf 70 °C abkühlen und bei dieser Temperatur tropfte zu dieser Suspension eine Losung aus 0,85 g (7,04 mmol) Chloφyruvaldoxim in 5 ml DMAC innerhalb von 5 Minuten Es wurde eine Farbanderung nach gelb-orange beobachtet Die

Mischung wurde nun für weitere 2 Stunden bei 70 °C erwärmt. Die nun fast klare Losung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt, wobei ein beiger Niederschlag langsam ausfiel Man iiess die Mischung für weitere 3 Tage bei Raumtemperatur stehen Anschliessend wurde der ausgefällte Niederschlag auf einer Fritte gesammelt, nacheinander mit wenig Ethanol und Ether gewaschen und bei 70 °C getrocknet. Man erhielt somit 0,60 g

(Ausbeute 52%) des Hydrochloridsalzes von 2,4-Dιamιno-6-chlormethyl-pteπdιn, das nach dunnschichtchromatographischen Untersuchungen keine weiteren Verunreinigungen

enthielt Um das 2,4-Dιamιno-6-chlormethyl-pteπdιn von seinem Hvdrochloπdsalz freizusetzen, wurde das Hydrochloπdsalz des Produktes in 10 ml HτO suspendiert und mit konz Ammoniaklösung auf pH = 8 gestellt Dabei fiel sofort ein gelber Niederschlag aus Man liess noch 30 Minuten bei Raumtemperatur und pH = 8 rühren, saugte den Niederschlag ab, wusch ihn mit wenig Methanol und Ether und trocknete bei 70 °C Auf diese Weise erhielt man 0,38 g gelbes 2,4-Dιamιno-6-chlormethyl-pteπdιn (Ausbeute 39%), dessen charaktenstische physikalische Daten (Schmelzpunkt, UV, * H-NMR, DC) mit denen des authentischen Materials übereinstimmten

Beispiel 4

Herstellung von 2,4-Dιammo-6-methylpteπdιn

1 ,07 g (5 mM) 2,4,5.6-Tetraamιnopyπmιdιndιhydrochloπd wurden in 50 ml Methanol suspendiert und zum Sieden erhitzt Zu dieser Suspension tropfte man in der Siedehitze innerhalb von 5 Minuten eine Losung von 0,65 g (7,46 mM) Pyruvaldoxim in 10 ml Methanol Es entstand sofort eine stark gelbe Mischung, die nach 2 Stunden bei Rückflusstemperatur in eine orange. braune Losung überging Die Losung wurde nach Abkühlenlassen auf Raumtemperatur mit konz. Ammoniaklösung auf pH = 8 gestellt Dabei fiel sofort ein gelber Niederschlag aus Man lies noch eine Stunde bei Raumtemperatur und pH = 8 rühren, saugte den Niederschlag ab, wusch ihn mit wenig Methanol und Ether nach und trocknete bei 100 °C

Man erhielt 0.72 g gelbes 2,4-Dιamιno-6-methylpteπdιn (Ausbeute 81%) Diese Produkt enthielt nach chromatogiaphischcn Analysen (DC, HPLC) keine weiteren Verunreinigungen

Η-NMR (DMSO-d ⁶ , 300 MHz), in ppm 2,50, s, 3H,

6.47, s, 2H,

7.48, s, 2H, 8,6, s, IH

Beispiel 5

Wie in Beispiel 3a wurden 4,28 g (20 mM) 2,4,5, 6-Tctraaminopyrimidindihydrochlorid in 140 ml Ethanol bei 75 °C während 7 Minuten mit 3,68 g (30 mM) Chloφyruvaldoximin 40 ml Ethanol versetzt. Nach 2,5 Stunden bei Rückflusstemperatur wurde nichtumgesetztes Tetraaminopyrimidinhydrochlorid heiss abfiltriert. Aus der klaren orangefarbenen Lösung wurde 2,4-Diamino-6-chlormethylpteridin entweder durch Kristallisation als Hydrochlorid oder durch Neutalisation, z. B. Natronlauge pH = 8, als Fällung isoliert. Ausbeute: 2,04 g, d.h. 48,4% bezogen auf eingesetztes 2,4,5,6-Tetraaminopyrimidinhydro- chlorid bzw. 83,9%), bezogen auf umgesetztes 2,4,5,6-Tetraaminopyrimidinhydrochlorid.

Beispiel 6

Herstellung von 2,4-Diamino-6-ethylpteridin

1 ,0 g (4,69 mmol) Tetraaminopyrimidindihydrochlorid wurde in 50 ml Methanol suspendiert und zum Sieden erhitzt. In der Siedehitze wurde zu dieser Suspension eine Lösung aus 0,71 g (7,03 mmol) Oximiminomethyl-ethyl-keton in 10 ml Methanol innerhalb 10 Minuten zugetropft. Nach 30 Minuten entstand eine klare Lösung, welche dann weitere 30 Minuten unter Rückfluss erhitzt wurde. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur wurde der pH-Wert der Lösung mit konz. Ammoniak auf pH = 8 eingestellt, wobei ein beiger Niederschlag ausfiel. Der Niederschlag wurde abgesaugt, mit wenig Methanol / Ether gewaschen und bei 100 °C getrocknet. Man erhielt somit 0,41 g (Ausbeute 46%) des chromatographisch reinen Produktes, das nach dem Hl-NMR-Spektrum nur aus reinem 6-Isomer bestand.

¹ H-NMR: (DMSO-d ⁶ , 300 MHz), in ppm 1 ,25, (t, 3H);

2,81 , (q, 2H); 6,52, (sb, 2H); 7.52, (db, 2H); 8,63, (s, I H.).

Beispiel 7

Herstellung von 2,4-Diamino-6-phenylpteridin

1 ,0 g (4,69 mmol) Tetraaminopyrimidindihydrochlorid wurde in 50 ml Methanol suspendiert und zum Sieden erhitzt. In der Siedehitze wurde zu dieser Suspension eine Lösung aus 1 ,05 g (7,04 mmol) Isonitrosoacetophenon in 10 ml Methanol innerhalb von 10 Minuten zugetropft, wobei sofort eine leichte gelbe Färbung eintrat. Anschliessend wurde diese Mischung 2 h unter Rückfluss erhitzt. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur wurde der pH- Wert der Mischung (ohne Abtrennen des ausgefallenen Niederschlages (Hydrochloridsalz des Produktes)) mit konz. Ammoniak auf pH = 8 eingestellt und 15 Minuten bei diesem pH- Wert gerührt. Das Produkt wurde nun abgesaugt, mit Methanol / Ether gewaschen und bei 100 °C getrocknet. Man erhielt somit 1 ,04 g (Ausbeute 93%) des chromatographisch reinen Produktes, das eine UV-Reinheit von 96% besass.

1 H-NMR: (DMSO-d ^ό , 300 MHz), in ppm 6,68, (sb, 2H);

■ ^' ,48, (m, 3H);

7,82, (d, 2H);

8,30, (m, 2H);

9,33, (s, I H).

Beispiel 8

Herstellung von 2,4-Diamino-6-tolylpteridin (R^ = Tolyl)

1 ,06 g (4,69 mmol) Tetraaminopyrimidindihydrochlorid wurde in 50 ml Methanol suspendiert und zum Sieden erhitzt. In der Siedehitze wurde zu dieser Suspension eine Lösung aus 1 ,27 g (7,04 mmol) Isonitroso-(p-methyl)-acetophenon in 10 ml Methanol innerhalb von 10 Minuten zugetropft, wobei sofort eine leichte gelbe Färbung eintrat. Anschliessend wurde diese Mischung 2 h unter Rückfluss erhitzt. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur wurde der pH- Wert der Mischung (ohne Abtrennen des ausgefallenen Niederschlages (das Hydrochloridsalz des Produktes) mit konz. Ammoniak auf pH = 8 eii ^stellt und 15 Minuten bei diesem pH- Wert gerührt. Das Produkt wurde nun abgesaugt, m,t Methanol / Ether gewaschen und bei 100 °C getrocknet. Man erhielt somit 1 ,04 g (Ausbeute 88%) des chromatographisch reinen Produktes, das nach dem lH-NMR-Spektrum nur aus reinem 6-Isomer bestand.

1H-NMR (DMSO-d ⁶ . 300 MHz), m ppm 2,63, (s, 3H),

6,67, (sb, 2H),

7.30, (d, 2H), 7,70, (db. 2H), 8,20, (d, 2H),

9.31, (s, IH)

Beispiel 9

Wie in Beispiel 3a wurden 1 ,09 g (5,00 mmol) 2,4,5, 6-TetraamιnopyπmιdιndιhydrochIoπd in emer Mischung von 47,5 ml Methanol und und 2,5 ml Dimethylacetamid bei 63 °C wahrend 3 Minuten mit 0,91 g Chloφyruvaldoxim (7,49 mmol) in 10 ml Methanol versetzt Anschlies¬ send wurde bei Ruckflusstemperatur weiter erwärmt bis nach 2,5 Stunden eine klare Losung entstanden war Man liess auf 20 °C abkühlen, neutralisierte die Reaktionslosung durch Zugabe von konz Ammoniaklosung und isolierte das ausgefallene 2,4-Dιamιno-6- chlormethylpteπdin durch Filtration und Vakkumtrocknung Ausbeute 0,79 g (70%)

Beispiel 10

Wie in Beispiel 9 wurden 1 ,08 g (4,96 mmol) 2,4,5,6-Tetraamιnopyπmιdιndιhydrochloπd in einer Mischung von 45 ml Methanol und und 5 ml Dimethvlformamid bei 20 °C mit 0,91 g Chloφyruvaldoxim (7,49 mmol) in 10 ml Methanol versetzt und bei dieser l cmperatur gerührt bis nach 18 Stunden eine klare Losung entstanden war Ausbeute 0,74 g 2,4-Dιamιno- 6-chlormethylpteπdιn (64%)

Beispiel 11

Wie in Beispiel 9 wurden 1 ,07 g (4,91 mmol) 2,4,5,6-Tetraamιnopynmιdιndιhvdrochloπd in einer Mischung von 45 ml Methanol und und 5 ml Dimethylformamid bei 60 °C mit 0,91 g Chloφyruvaldoxim (7,49 mmol) in 10 ml Methanol versetzt und auf Rückfusstemperatur erwärmt bis nach 30 Minuten eine klare Lösung entstanden war Ausbeute 0,78 g 2,4- Dιamino-6-chlormethylpteridιn (69%)

Beispiel 12

Wie in Beispiel 9 wurden 1 ,09 g (4,91 mmol) 2,4,5,6-Tetraamιnopyπmιdιndιhydrochloπd in einer Mischung von 47,5 ml Methanol und und 2,5 ml Dimethylformamid bei 60 °C mit 0,79 g Chloφyruvaldoxim (6,50 mmol) in 7 ml Methanol versetzt und auf Ruckfusstempera- tur erwärmt bis nach 3 Stunden eine klare Losung entstanden war Ausbeute 0,71 g 2,4- Diamιno-6-chlormethylpteπdιn (63%)

Beispiel 13

Herstellung von 2,4-Dιamιno-6-methoxyphenylpteridιn

Analog zu Beispiel 8 wurde 1,06g (4,69 mmol) Tetraaminopyπmidindihydrochloπd mit 1 ,26g (7,04 mmol) Isonιtroso-(p-methoxy)-acetophenon umgesetzt Man erhielt 1.15g Produkt, entsprechend einer Ausbeute von 91 %

Beispiel 14

Herstellung von 2,4-Dιamιno-6-chloφhenyIpteπdιn

Analog zu Beispiel 8 wurde 1 ,06g (4,69 mmol) Tetraaminopyπmidindihydrochloπd mit 1,29g (7,04 mmol) Isonιtroso-(p-chlor)-acetophenon umgesetzt Man erhielt 1 ,15g Produkt, entsprechend einer Ausbeute von 90%

Beispiel 15

Herstellung von 4-Arnιno-6-chlormethyl-pteπdιn

3,00 g (15, 15 mmol) 4,5,6-Tπamιnopyπmιdιndιhydrochloπd wurden in 90 ml Methanol suspendiert und zum Sieden erhitzt. Zu dieser Suspension tropfte man in der Siedehitze innerhalb von 10 Minuten eine Losung aus 2,76 g (22,72 mmol) Chloφyruvaldoxim in 30 ml Methanol zu Es wurde eine Farbanderung nach gelb-orange beobachtet. Danach wurde die Mischung weitere 2 Stunden unter Rückfluss erwärmt Die nun klare rote Losung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt und mit konz. Ammoniaklösung auf pH = 7,5 (pH-Meter) eingestellt, wobei nach einer Weile ein grau-blauer Niederschlag ausfiel. Die Mischung wurde weitere 30 Minuten bei diesem pH-Wert und bei Raumtemperatur gerührt

Der ausgefallene Niederschlag wurde auf einer Fritte gesammelt, nacheinander mit wenig Methanol und Ether gewaschen und bei 70 °C getrocknet.

Somit erhielt man 1 ,37 g grau-blaues 4-Amino-6-chlormethyl-pteridιn (Ausbeute 46%). Durch Aufarbeitung der Mutterlauge der Reaktion konnten weitere 0,60 g 4-Amino-6- chiormethyl-pteridin (Ausbeute 20%) isoliert werden. Diese Produkte enthielten nach chromatographischer Analyse (DC, HPLC) keine weiteren Verunreinigungen.

1 H-NMR: (DMSO-d6, 250 MHz), in ppm 5,00, (s, 2H)

8,27, (s, IH) 8,36, (s, IH) 8,55, (s, IH) 9,21, (s, IH).

Beispiel 16

Herstellung von 4-Amino-6-phenyl-pteridin

1 ,0 g ( 15,04 mmol) 4,5,6-Triaminopyrimidindihydrochlorid wurden in 30 ml Methanol suspendiert und zum Sieden erhitzt. In der Siedehitze wurde zu dieser Suspension eine Lösung aus 1 , 13 g (7,57 mmol) Isonitrosoacetophenon in 10 ml Methanol innerhalb von 10 Minuten zugetropft, wobei sofort eine leichte gelbe Färbung eintrat. Anschliessend wurde die Mischung 2 Stunden unter Rückfluss erhitzt. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur wurde der pH-Wert der Mischung (ohne Abtrennen des ausgefallenen Niederschlages (das Hydrochloridsalz des Produktes)) mit konz. Ammoniaklösung auf pH = 7.5 eingestellt und 30 Minuten bei diesem pH-Wert gerührt. Das Produkt wurde nun abgesaugt mit Methanol und Ether gewaschen und bei 100 °C getrocknet. Man erhielt somit 0,99 g (Ausbeute 88%) des chromatographisch reinen Produktes, das nach dem 1 H-NMR Spektrum nur aus reinem 6- Isomer bestand.

1 H-NMR: (DMSO-d ⁶ , 250 MHz), in ppm 7.54, (m, 3H);

8.21 , (s, I H):

8.45, (m, 2H

8.46, (s, IH) 8,52, (s, IH) 9,69, (s, IH)

Beispiel 17

Herstellung von 4-Amino-6-chlormethyl-2-methylthio-pteridin

1 ,0 g (4,10 mmol) 4,5,6-Triamino-2-methylthiopyrimidindihydrochlorid wurden in 25 ml Methanol suspendiert und zum Sieden erhitzt. Zu dieser Suspension tropfte man in der

Siedehitze innerhalb von 5 Minuten eine Lösung aus 0,75 g (6,17 mmol) Chloφyruvaldoxim in 10 ml Methanol zu. Es wurde eine Farbänderung nach gelb-orange beobachtet. Nach kurzer Zeit entstand eine klare gelbe Lösung, welche dann weitere 2 Stunden unter Rückfluss erwärmt wurde. Die nun klare dunkelgrüne Lösung wurde auf Raumtemperatur abgekühlt und mit konz. Ammoniaklösung auf pH = 7,5 (pH-Meter) eingestellt, wobei nach einer Weile ein grau-blauer Niederschlag ausfiel. Die Mischung wurde weitere 30 Minuten bei diesem pH- Wert und bei Raumtemperatur gerührt. Der ausgefallene Niederschlag wurde auf einer Fritte gesammelt, nacheinander mit wenig Methanol und Ether gewaschen und bei 70 °C getrocknet. Somit erhielt man 0,73 g grau-blaues 4-Amino-6-chlormethyl-2-methyIthio-pteridin (Ausbeute 74%). Dieses Produkt enthielt nach chromatographischen Analysen (DC, HPLC) keine weiteren Verunreinigungen.

¹ H-NMR: (DMSO-d ⁶ , 250 MHz), in ppm 2,52, (s, 3H)

4,95, (s, 2H) 8,28, (s, 2H)

8,36, (s, I H) 9,09, (s, IH).

Beispiel 18

Herstellung von 4-Amino-2-methylthio-6-phenyl-pteridin

1 ,0 g (4,10 mmol) 4,5,6-Triamino-2-methyIthopyrimidindihydrochlorid wurden in 30 ml Methanol suspendiert und zum Sieden erhitzt. In der Siedehitze wurde zu dieser Suspension eine Lösung aus 0,95 g (6,15 mmol) Isonitrosoacetophenon in 10 ml Methanol innerhalb von 10 Minuten zugetropft, wobei sofort eine leichte gelbe Färbung eintrat. Nach kurzer Zeit entstand eine klare gelbe Lösung, welche dann weitere 2 Stunden unter Rückfluss erhitzt wurde. Nach Abkühlen auf Raumtemperatur wurde der pH- Wert der Lösung mit konz. Ammoniaklösung auf pH = 7,5 eingestellt und 30 Minuten bei diesem pH- Wert gerührt. Das Produkt wurde nun abgesaugt, mit Methanol und Ether gewaschen und bei 100 °C getrocknet. Man erhielt somit 1,07 g (Ausbeute 97%) des chromatographisch reinen Produktes, das nach dem ' H-NMR Spektrum aus reinem 6-Isomer bestand.

¹ H-NMR: (DMSO-d ⁶ . 250 Mhz), in ppm 2.53, (s. 3H);

7,53, (m, 3H); 8,33, (s, I H); 8,43, (m. 2H); 8,46, (s, IH); 9,61, (s, IH).

Beispiele 19 bis 31

Analog zu Beispiel 16 wurden ausgehend von den entsprechenden Edukten die folgenden 4- Aminopteridinderivate der allgemeinen Formel

hergestellt.