MONASTYRSKAYA GALINA SERGEEVNA (RU)
VINOGRADOVA TATYANA VIKTOROVNA (RU)
ZAVALOVA LYUDMILA LVOVNA (RU)
SPIRIN ALEXANDR SERGEEVICH (RU)
KOPANTSEV EVGENY PAVLOVICH (RU)
SVERDLOV EVGENY DAVIDOVICH (RU)
MONASTYRSKAYA GALINA SERGEEVNA (RU)
VINOGRADOVA TATYANA VIKTOROVNA (RU)
ZAVALOVA LYUDMILA LVOVNA (RU)
SPIRIN ALEXANDR SERGEEVICH (RU)
KOPANTSEV EVGENY PAVLOVICH (RU)
WO2000036420A2 | 2000-06-22 |
US20050136403A1 | 2005-06-23 |
LUDA DIATCHENKO ET AL.: "Suppression subtractive hybridization: A versatile method for identifying differentially expressed genes", METHODS ENZYMOL., vol. 303, 1999, pages 349 - 380
DATABASE MEDLINE [online] MCCAULEY T.G. ET AL.: "Aptamer-based biosensor arrays for detection and quantification of biological macromolecules", accession no. NCBI Database accession no. (12871718)
35
формула изобретения
1. способ дифференциального анализа протеомов в различных типах клеток организма или в одном типе клеток при различных условиях, включающий: а) получение набора дифференциальных транскриптов, представленность которых в одном типе клеток отличается от представленности в другом типе клеток или представленность которых в клетках одного типа при различных условиях отличается; б) определение последовательности дифференциальных транскриптов; в) синтез дифференциальных белков, соответствующих дифференциальным транскриптам, или их фрагментов; г) получение агентов, взаимодействующих с указанными дифференциальными белками или их фрагментами с высокой аффинностью и специфичностью; д) определение и сравнение белковых профилей для различных типов клеток или одного типа клеток при различных условиях с использованием указанных агентов.
2. способ по п. 1, который в случае известности последовательности генома организма дополнительно включает определение полной последовательности дифференциально экспрессирующихся генов и их аналогов, соответствующих полученным дифференциальным транскриптам, путем сопоставления последовательности кднк/фрагмента кднк с известной последовательностью генома организма с использованием методов биоинформатики.
3. способ по п. 1, в котором клетки являются клетками организма млекопитающего .
4. способ по п. 3, где организмом является человек.
5. способ по п. 1, дополнительно предусматривающий оценку диагностической и терапевтической перспективности дифференциальных белков.
6. способ по п. 1, в котором получение набора дифференциальных транскриптов осуществляют с использованием методов вычитающей гибридизации.
7. способ по п. 1, в котором получение набора дифференциальных транскриптов осуществляют с использованием днк-микрочипа.
8. способ по п. 1, в котором синтез дифференциальных белков или их фрагментов осуществляют методами генетической инженерии. 36
9. способ по п. 1, в котором синтез дифференциальных белков или их фрагментов осуществляют химическими методами.
10. способ по п. 1, в котором синтез дифференциальных белков или их фрагментов осуществляют методами бесклеточного синтеза белка.
11. способ по- п. 1, в котором клетки одного из типов являются нормальными, а клетки другого типа являются измененными вследствие наследственных или приобретенных патологий, включая опухолевую трансформацию.
12. способ по п. 11, в котором клетки, измененные вследствие опухолевой трансформации, являются клетками плоскоклеточного рака легких или клетками рака пищевода человека.
13. способ по п. 1, в котором указанные агенты представляют собой поли- или моноклональные антитела, или днк- или рнк-аптамеры.
14. способ по п. 1, в котором для определения белкового профиля указанные агенты используют в виде микрочипа, представляющего собой подложку с иммобилизованными на ней указанными агентами.
15. деж-микрочип для анализа дифференциальных транскриптов, представляющий собой подложку с иммобилизованными на ней изолированными олигонуклеотидами, последовательности которых соответствуют или комплементарны специфичным фрагментам последовательностей дифференциальных транскриптов, полученных на стадии а) способа по п. 1.
16. днк-микрочип по п. 15, предназначенный для характеристики и классификации опухолей на уровне транскрипции.
17. изолированный белок, дифференциально представленный в различных типах клеток или в одном типе клеток при различных условиях, полученный путем осуществления стадий а), б) и в) способа по п. 1, или его фрагмент.
18. агент, способный специфически взаимодействовать с белком, дифференциально представленным в различных типах клеток или в одном типе клеток при различных условиях, или его фрагментом, полученный путем осуществления стадий а) — г) способа по п. 1.
19. агент по п. 18, представляющий собой поли- или моноклональное антитело, или днк- или рнк-аптамер.
20. агент по любому из пп. 18 и 19, используемый в качестве терапевтического/профилактического лекарственного средства. 37
21. агент по любому из пп. 18 и 19, используемый в качестве диагностического средства.
22. микрочип для дифференциального анализа протеомов в различных типах клеток или в одном типе клеток при различных условиях, представляющий собой подложку с иммобилизованными на ней агентами по любому из пп. 18, 19 и 21.
23. набор для диагностики заболевания, прогноза его лечения и выработки терапевтических рекомендаций, содержащий, по меньшей мере, один агент по любому из пп. 18, 19 и 21 и/или, по меньшей мере, один изолированный олигонуклеотид, специфически гибридизующийся с дифференциальным транскриптом, где последовательность олигонуклеотида соответствует или комплементарна специфичному фрагменту последовательности дифференциального транскрипта, определенной на стадии б) способа по п. 1. |