Login| Sign Up| Help| Contact|

Patent Searching and Data


Title:
PROTEOM DIFFERENTIAL ANALYSIS METHOD
Document Type and Number:
WIPO Patent Application WO/2008/044957
Kind Code:
A1
Abstract:
The invention relates to molecular biology, in particular to genomics and proteomics, and provides with multi-purpose technique, which makes it possible to detect expressive genes and transcripts and proteins which are encoded thereby and are present in different types of cells of an organism, including normal cells and cells transformed by different genetic or acquired pathologies, including neoplastic aberration, or in homogeneous cells, but in different conditions. Protein and nucleotide agents produced by means of the claimed technique can be used in the form of therapeutic and prophylactic drugs. Diagnosticums, which can be used in medicine for the rapid semiquantitative evaluation of the content of transcripts of differential expression genes and corresponding differential proteins in different cells, thereby making it possible to determine the status of a patient, to prognosticate the course of a disease and to give recommendations relating to treatment methods, are also disclosed.

Inventors:
SVERDLOV EVGENY DAVIDOVICH (RU)
MONASTYRSKAYA GALINA SERGEEVNA (RU)
VINOGRADOVA TATYANA VIKTOROVNA (RU)
ZAVALOVA LYUDMILA LVOVNA (RU)
SPIRIN ALEXANDR SERGEEVICH (RU)
KOPANTSEV EVGENY PAVLOVICH (RU)
Application Number:
PCT/RU2006/000522
Publication Date:
April 17, 2008
Filing Date:
October 09, 2006
Export Citation:
Click for automatic bibliography generation   Help
Assignee:
INST MOLEKULYARNOI GENETIKI RO (RU)
SVERDLOV EVGENY DAVIDOVICH (RU)
MONASTYRSKAYA GALINA SERGEEVNA (RU)
VINOGRADOVA TATYANA VIKTOROVNA (RU)
ZAVALOVA LYUDMILA LVOVNA (RU)
SPIRIN ALEXANDR SERGEEVICH (RU)
KOPANTSEV EVGENY PAVLOVICH (RU)
International Classes:
G01N33/53; C07H21/00; C07K16/18; C07K17/00; C12N15/11; C12Q1/68; G16B25/00
Domestic Patent References:
WO2000036420A22000-06-22
Foreign References:
US20050136403A12005-06-23
Other References:
TROY D.R. ET AL.: "J chain syntheses and secretion of hexameric JgM is differentially regulated by lipopolysaccharide and interleukin 5", PROC. NATL. ACAD. SCI. USA, vol. 89, no. 3, 1992, pages 962 - 966
LUDA DIATCHENKO ET AL.: "Suppression subtractive hybridization: A versatile method for identifying differentially expressed genes", METHODS ENZYMOL., vol. 303, 1999, pages 349 - 380
DATABASE MEDLINE [online] MCCAULEY T.G. ET AL.: "Aptamer-based biosensor arrays for detection and quantification of biological macromolecules", accession no. NCBI Database accession no. (12871718)
Attorney, Agent or Firm:
OBSCHESTVO S OGRANICHENNOI OTVETSTVENNOSTJU "SOJUZPATENT" (Moscow, 5, RU)
Download PDF:
Claims:
35

формула изобретения

1. способ дифференциального анализа протеомов в различных типах клеток организма или в одном типе клеток при различных условиях, включающий: а) получение набора дифференциальных транскриптов, представленность которых в одном типе клеток отличается от представленности в другом типе клеток или представленность которых в клетках одного типа при различных условиях отличается; б) определение последовательности дифференциальных транскриптов; в) синтез дифференциальных белков, соответствующих дифференциальным транскриптам, или их фрагментов; г) получение агентов, взаимодействующих с указанными дифференциальными белками или их фрагментами с высокой аффинностью и специфичностью; д) определение и сравнение белковых профилей для различных типов клеток или одного типа клеток при различных условиях с использованием указанных агентов.

2. способ по п. 1, который в случае известности последовательности генома организма дополнительно включает определение полной последовательности дифференциально экспрессирующихся генов и их аналогов, соответствующих полученным дифференциальным транскриптам, путем сопоставления последовательности кднк/фрагмента кднк с известной последовательностью генома организма с использованием методов биоинформатики.

3. способ по п. 1, в котором клетки являются клетками организма млекопитающего .

4. способ по п. 3, где организмом является человек.

5. способ по п. 1, дополнительно предусматривающий оценку диагностической и терапевтической перспективности дифференциальных белков.

6. способ по п. 1, в котором получение набора дифференциальных транскриптов осуществляют с использованием методов вычитающей гибридизации.

7. способ по п. 1, в котором получение набора дифференциальных транскриптов осуществляют с использованием днк-микрочипа.

8. способ по п. 1, в котором синтез дифференциальных белков или их фрагментов осуществляют методами генетической инженерии.

36

9. способ по п. 1, в котором синтез дифференциальных белков или их фрагментов осуществляют химическими методами.

10. способ по п. 1, в котором синтез дифференциальных белков или их фрагментов осуществляют методами бесклеточного синтеза белка.

11. способ по- п. 1, в котором клетки одного из типов являются нормальными, а клетки другого типа являются измененными вследствие наследственных или приобретенных патологий, включая опухолевую трансформацию.

12. способ по п. 11, в котором клетки, измененные вследствие опухолевой трансформации, являются клетками плоскоклеточного рака легких или клетками рака пищевода человека.

13. способ по п. 1, в котором указанные агенты представляют собой поли- или моноклональные антитела, или днк- или рнк-аптамеры.

14. способ по п. 1, в котором для определения белкового профиля указанные агенты используют в виде микрочипа, представляющего собой подложку с иммобилизованными на ней указанными агентами.

15. деж-микрочип для анализа дифференциальных транскриптов, представляющий собой подложку с иммобилизованными на ней изолированными олигонуклеотидами, последовательности которых соответствуют или комплементарны специфичным фрагментам последовательностей дифференциальных транскриптов, полученных на стадии а) способа по п. 1.

16. днк-микрочип по п. 15, предназначенный для характеристики и классификации опухолей на уровне транскрипции.

17. изолированный белок, дифференциально представленный в различных типах клеток или в одном типе клеток при различных условиях, полученный путем осуществления стадий а), б) и в) способа по п. 1, или его фрагмент.

18. агент, способный специфически взаимодействовать с белком, дифференциально представленным в различных типах клеток или в одном типе клеток при различных условиях, или его фрагментом, полученный путем осуществления стадий а) — г) способа по п. 1.

19. агент по п. 18, представляющий собой поли- или моноклональное антитело, или днк- или рнк-аптамер.

20. агент по любому из пп. 18 и 19, используемый в качестве терапевтического/профилактического лекарственного средства.

37

21. агент по любому из пп. 18 и 19, используемый в качестве диагностического средства.

22. микрочип для дифференциального анализа протеомов в различных типах клеток или в одном типе клеток при различных условиях, представляющий собой подложку с иммобилизованными на ней агентами по любому из пп. 18, 19 и 21.

23. набор для диагностики заболевания, прогноза его лечения и выработки терапевтических рекомендаций, содержащий, по меньшей мере, один агент по любому из пп. 18, 19 и 21 и/или, по меньшей мере, один изолированный олигонуклеотид, специфически гибридизующийся с дифференциальным транскриптом, где последовательность олигонуклеотида соответствует или комплементарна специфичному фрагменту последовательности дифференциального транскрипта, определенной на стадии б) способа по п. 1.