Die vorliegende Erfindung betrifft renininhibi orische Peptide vom Cyclohexylstatin-Typ« Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung in Arzneimitteln _« insbe- sondere in kreislaufbeeinflussenden Arzneimitteln.

Renin ist ein proteolytisches Enzym _« das überwiegend von den Nieren produziert und ins Plasma seze niert wird. Es ist bekannt _« daß Renin in vivo vom Angiotensinogen das Dekapeptid Angiotensin I abspaltet. Angiotensin I wiederum wird in der Lunge« den Nieren oder anderen Ge¬ weben zu dem blutdruckwirksamen Oktapeptid Angiotensin II abgebaut. Die verschiedenen Effekte des Angiotensin II wie Vasokonstriktion, Na ⁺ -Retention in der Niere _« λldosteronfreisetzung in der Nebenniere und Tonuserhσ- hung des sympathischen Nervensystems wirken synergi¬ stisch im Sinne einer Blutdruckerhöhung.

Die Aktivität des Renin-Angiotensin-Systems kann durch die Hemmung der Aktivität von Renin oder dem Angioten-

sin- onversionsenzym (ACE) sowie durch Blockade von Angiotensin II-Rezeptoren pharmakologisch manipuliert werden. Die Entwicklung von oral einsetzbaren ACE- Hemmern hat somit zu neuen Antihypertensiva geführt (vgl, DOS 3 628 650, Am. J. Med. ∑∑, 690, 1984).

Ein neuerer Ansatz ist, in die Renin-Angiotensin-Kaskade zu einem früheren Zeitpunkt einzugreifen, nämlich durch Inhibition der hochεpezif schen Peptidase Renin.

Bisher wurden verschiedene Arten von Renininhibitoren entwickelt: Reninεpezifische Antikörper, Phospholipide, Peptide mit der N-terminalen Sequenz des Prorenins, syn¬ thetische Peptide als Substratanaloga und modifizierte Peptide.

In der EP-A 202 73 696, EP-A 202 78 158 und in der PCT

WO 86/04901 werden renininhibitorische Peptide beschrie¬ ben, bei denen der Bedeutungsumfang von R ² (siehe erfin¬ dungsgemäße Verbindungen) auch heterocyclische Reste erfaßt, ohne jedoch einen Hinweis auf die spezielle 1,3- Dithiolan oder 1,3-Dithiangruppe oder einen konkreten Vertreter dieser Stoffklasεe zu geben.

Es wurden nun überraschenderweise Peptide gefunden, bei denen der übliche Aminosäurerest-His(Histidin) durch einen 1,3-Dithiolan- oder Dithianreεt erεetzt wurde, und die eine renininhibitorische Wirkung besitzen.

Die Erfindung betrifft Peptide der allgemeinen Formel (I)

in welcher

A, B, D und E gleich oder verschieden sind und

für eine Bindung stehen oder

für eine natürliche oder unnatürliche Aminosäure stehen, die gegebenenfalls durch eine Aminoεchutz- gruppe substituiert ist,

R ¹ für Wasserstoff steht oder

für eine typische Aminoschutzgruppe εteht

für geradkettiges oder verzweigtes Alkyl oder Acyl mit jeweils biε zu 8 Kohlenstoffatomen steht, das gegebenenfalls durch Aryl mit 6 bis 10 Kohlenstoff' atomen substituiert ist

für einen Rest der Formel

R ³ -(CH ₂ ) _a -C0, R ^3' -(CH=CH) _a .-C0, R (0) _b -(CH ₂ ) _c -(CH=CH) _d -(CR ⁵ H) _e -(CH ₂ ) _f -C0,

R12 _R H _N _(CH ^l 2->)'2-O-CO,

L L

II II

R ¹⁵ -(CH ₂ ) -NH-C, H ₃ C0-C(CH ₂ ) ₂ 03 ₄ -(CH ₂ ) ₂ -C

oder steht

worin

a, a', b, d, e, h und i gleich oder verschieden sind und eine Zahl 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7 oder 8 bedeuten, g eine Zahl 1, 2, 3, 4 oder 5 bedeutet, c und f gleich oder verschieden sind und eine Zahl 0, 1 oder 2 bedeuten,

R ³ und R ' gleich oder verschieden sind und

Aryl mit 6 bis 10 Kohlenstoffatomen bedeuten, das gegebenenfalls durch Halogen, Nitro, Hy- droxy oder durch geradkettiges oder verzweig¬ tes Alkyl oder Alkoxy mit jeweils biε zu 8 Kohlenεtof tomen substituiert ist

geradkettiges oder verzweigtes Alkyl, Alkoxy oder Alkoxycarbonyl mit jeweils bis zu 10 Koh¬ lenstoffatomen bedeuten, die gegebenenfalls durch Aryl mit 6 biε 10 Kohlenstoffatomen sub¬ stituiert sind

- einen 5- bis 7-gliedrigen, gesättigten oder ungesättigten Heterocyclus mit biε zu 3 Koh¬ lenstoffatomen aus der Reihe N, S oder 0 und deren N-Oxide bedeuten

R ⁴ und R ¹⁰ gleich oder verschieden sind und

Wasserstoff, geradkettiges oder verzweigtes Alkyl mit bis zu 8 Kohlenstoffatomen oder Aryl mit 6 bis 10 Kohlenstoffatomen bedeuten, das gegebenen alls durch Halogen, Nitro oder durch geradkettiges oder verzweigtes Alkyl oder Al¬ koxy mit jeweils bis zu 8 Kohlenstoffatomen substituiert ist

R ⁵ geradkettigeε oder verzweigteε Alkyl mit biε zu 8 Kohlenεtoffatomen bedeutet

R Halogen oder geradkettiges oder verzweigteε Alkyl oder Alkoxy mit jeweils biε zu 8 Koh- lenεtoffatomen bedeutet

m die >NH-Gruppe, ein Sauerstoffato , ein

Schwefelatom oder die S0 ₂ -Gruppe bedeutet

und R ⁸ gleich oder verschieden εind und Wasser¬ stoff oder geradkettigeε oder verzweigteε Al¬ kyl mit biε zu 8 Kohlenεtoffatomen bedeuten

Aryl mit 6 biε 10 Kohlenstoffatomen bedeutet, das gegebenenfalls durch Halogen oder durch

10 geradkettiges oder verzweigtes Alkyl oder Al¬ koxy mit jeweils biε zu 8 Kohlenεtoffatomen substituiert ist

einen 5- bis 7-gliedrigen, gesättigten oder ^*** ungesättigten Heterocyclus mit biε 3 Hetero* atomen auε der Reihe N _« O oder S und deεεen N-Oxide bedeutet

Hydroxy oder geradkettiges oder verzweigtes

20 Alkyl oder Alkoxy mit jeweils biε zu 10 Koh¬ lenεtoffatomen bedeutet, das gegebenenfalls biε zu zweifach durch Hydroxy oder durch Acyl mit biε zu 8 Kohlenεtoffatomen oder durch Pyrrolidinyl, das am Stickεtoff durch eine *** ^β Aminoschutzgruppe gegebenenf llε subεtituiert ist, subεtituiert ist

- einen Rest der Formel R ¹⁶ -S(0) ₁ oder R ¹⁷ -C0 bedeutet 30 worin

1 eine Zahl 0, 1 oder 2 bedeutet

5

R ¹⁶ geradkettigeε oder verzweigteε Alkyl mit biε zu 8 Kohlensto fatomen bedeutet _« das gegebenenfalls durch Aryl mit 6 biε 10 Kohlenεtoffatomen substituiert iεt oder

einen 5- bis 7-gliedrigen, gesättigten

10 oder ungesättigten Heterocycluε mit biε zu 3 Heteroatomen auε der Reihe N, O oder S und dessen Oxide bedeutet, der gegebe¬ nenfalls durch Benzyl subεtituiert iεt

15 R ¹⁷ geradkettiges oder verzweigtes Alkyl mit biε zu 8 Kohlenstoffatomen bedeutet, das gegebenenfalls durch Aryl mit 6 bis 10 Kohlenstoffatomen substituiert ist

20 - einen 5- bis 7-gliedrigen, gesättigten oder ungesättigten Heterocyclus mit biε zu 3 Heteroatomen auε der Reihe N, O oder S bedeutet, der gegebenenfalls durch ge¬ radkettiges oder verzweigtes Alkyl mit

25 bis zu 6 Kohlensto fatomen oder Benzyl substituiert iεt

oder

»

30 eine Gruppe der Formel -NR ¹⁸ R ¹⁹ bedeutet

worin

R ¹⁸ und R ¹⁹ gleich oder verschieden sind und

35 Wasserstoff oder geradkettiges oder ver-

zweigteε Alkyl mit biε zu 8 Kohlenεtoff- 5 atomen bedeuten, das gegebenenfalls durch

Hydroxy, Phenyl, einen 5- bis 7-gliedri- gen, gesättigten oder ungesättigten Hete- rocycluε mit biε zu 3 Heteroatomen aus der Reihe N, S oder 0, Alkoxy mit bis zu 1° 6 Kohlenεtoffatomen, (C ₁ -C _fe )-Dialkylami- no, quarternäre Ammoniumsalze oder durch einen Rest der Formel

CH ₃ 0-(CH ₂ ) ₂ -0-CH ₂ -0-(CH ₂ ) ₂ -N-

15 CH- substituiert ist oder

R ¹⁸ oder R ¹⁹ Cycloalkyl mit 3 bis 8 Koh¬

20 lenstoffatomen bedeuten oder R ¹⁸ oder R ¹⁹ den Rest der Formel

(CH ₃ ) ₂ N-(CH ₂ ) ₂ -N-(CH ₂ ) ₂ -

CH-.

25 oder

R ¹⁸ und R ¹⁹ gemeinsam mit dem Stickstoff¬ atom einen 5- bis 7-gliedrigen, gesättig¬ ten oder ungesättigten Heterocyclus mit

30 bis zu 3 Heteroatomen aus der Reihe N, 0 oder S bilden

R ¹¹ und R ¹² gleich oder verschieden sind und

Waεserstoff, geradkettiges oder verzweig¬

35 tes Alkyl mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen oder eine Aminoεchutzgruppe bedeuten

R ¹³ geradkettigeε oder verzweigteε Alkoxy mit biε zu 8 Kohlenstoffatomen oder Hydroxy bedeuten oder

einen 5- bis 7-gliedrigen, gesättigten oder ungesättigten Heterocyclus mit biε 0 zu 3 Heteroatomen aus der Reihe N, S oder

0 bedeutet oder

geradkettigeε oder verzweigteε Alkyl mit biε zu 8 Kohlenstoff tomen bedeutet, das 15 gegebenenfalls durch Aryl mit 6 bis 10

Kohlenstoffatomen subεtituiert ist, das seinerseits durch Halogen oder Nitro sub¬ stituiert sein kann oder

20 - eine Gruppe der Formel -NR ¹⁸ R ¹⁹ ' bedeu¬ tet

worin

25 R ¹⁸ und R ¹⁹ die oben angegebene Bedeu¬ tung von R* ⁸ und R ¹ haben und mit dieser gleich oder verschieden sind

R ¹⁴ Wasserstoff oder die Gruppe -NR ²⁰ R ²¹ be- 30 deutet

worin

R ² 0 _unc j R21 gleich oder verschieden sind 35 und Wasserstoff, eine Aminoschutzgruppe

oder Acyl mit bis zu 8 Kohlenεtoffatomen 5 bedeuten

R ¹⁵ Aryl mit 6 bis 10 Kohlenstoffatomen be¬ deutet, das gegebenenfalls durch Halogen, Nitro oder durch geradkettiges oder ver- 10 zweigteε Alkyl oder Alkoxy mit jeweils bis zu 6 Kohlenstoff tomen subεtituiert iεt

oder

15 geradkettiges oder verzweigtes Alkyl mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen bedeutet _« das gegebenenfalls durch Hydroxy oder durch quarternäre Ammoniumsalze subεtituiert 20 ist

L und L' gleich oder verschieden εind und ein Sauerεtoff- oder ein Schwefelatom bedeu¬ ten

25

W einen Reεt der Formel R ¹⁶ -S0 ₂ ~ , R ²² R ²³ -N-S0 ₂ - oder R ²⁴ -R ²⁵ -N-CO- bedeutet

30 worin

R!° die oben angegebene Bedeutung von R ¹⁶ hat und mit dieser gleich oder ver¬ schieden ist

35

und

R ²² _« R ²⁵ _« R ²⁴ und R ²⁵ die oben angegeben«

Bedeutung von R 1*fl° und R ^* 1 ¹ haben und mit dieser gleich oder verschieden iεt

10 für Wasserstoff« für geradkettiges oder verzweigtes Alkyl mit bis zu 8 Kohlen¬ stoffatomen oder für Benzyl steht

oder

15 im Fall _« daß A und B gleichzeitig eine Bindung bedeuten

Rl und R ² gemeinsam mit dem Stickstoffatom

20 folgende Ringe auεbilden

oder

30

oder

oder

wobei jeweilε die dort angegebenen Defi¬ nitionen gelten

30

n für die Zahl 1 oder 2 εteht

für Wasserstoff« für geradkettiges oder verzweigteε Alkyl mit bis zu 8 Kohlen¬

35 stoffatomen« für Cycloalkyl mit 3 bis 8 Kohlenstoffatomen εteht oder für eine Aminoεchutzgruppe εteht oder

für einen Reεt der Formel -NHR ²⁶ , NR ²⁷ R ²⁸ , S(0) _k (NH) _r -R ²⁹ oder -OR ³⁰ εteht

R ²⁶ , R ²⁷ und R ²⁸ gleich oder verεchieden εind und Waεserεtoff, Cycloalkyl mit 3 bis 8 Kohlenstoffatomen oder geradketti¬

10 ges oder verzweigteε Alkyl oder Alkoxy mit jeweilε biε zu 10 Kohlenεtoffatomen bedeuten, die gegebenenfallε mehrfach durch Hydroxy, geεchütztes Hydroxy, Al¬ koxy oder Alkoxycarbonyl mit jeweils bis 15 zu 6 Kohlenstoffatomen, Carboxy, Sulfo,

Phenyl , oder durch einen 5- bis 7-glie- drigen, gesättigten oder ungesättigten Heterocyclus mit bis zu 3 Heteroatomen aus der Reihe N, 0 oder S oder durch

20 C _j -Cg-Dialkylamino, C _j -C^-Dihydroxydi- alkylamino oder durch einen Rest der Formel

30 substituiert sind

oder

R ²⁷ und R ²⁸ gemeinsam mit dem Stickεtoff- atom einen geεättigten oder ungeεättigten

5- bis 7-gliedrigen Heterocyclus mit bis zu 3 Heteroatomen aus der Reihe 0, S oder N bilden, der gegebenenfalls durch Benzyl substituiert iεt

k die Zahl 0, 1 oder 2 bedeutet

10 r die Zahl 0 oder 1 bedeutet

R ²⁹ Wasserstoff, geradkettiges oder verzweig¬ tes Alkyl mit bis zu 10 Kohlenstoffato¬

15 men, Benzyl, oder Aryl mit 6 bis 10 Koh¬ lenstoffatomen bedeutet, das gegebenen¬ falls durch Methyl εubεtituiert ist,

oder im Fall, daß r die Zahl 0 bedeutet

20

,30 einen über N gebundenen 5- biε 7-gliedri- gen gesättigten Heterocyclus mit bis zu 3 Heteroatomen aus der Reihe N, 0 oder S bedeutet 25 oder

R ³⁰ Waεεerεtoff oder geradkettigeε oder vei— zweigtes Alkyl mit bis zu 20 Kohlenεtoff- atomen bedeutet, daε gegebenenfalls durch

30 Phenyl subεtituiert iεt _« das seinerseits durch Alkoxycarbonyl mit bis zu 8 Koh¬ lenstoffatomen, Halogen oder durch gerad¬ kettiges oder verzweigteε Alkyl oder Al¬ koxy mit jeweils bis zu 8 Kohlenstoff-

35 atomen substituiert sein kann

oder

einen Rest der Formel

0 C-NR ³¹ R ³²

bedeutet

worin

R ³¹ und R ³² gleich oder verschieden sind und Wasserstoff, Phenyl oder geradketti¬ ges oder verzweigtes Alkyl mit bis zu 8 Kohlenstoffatomen bedeutet, das gegebe¬ nenfalls durch Phenyl substituiert ist

und ihre physiologisch. unbedenklichen Salze.

Die erfindungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen Formel (I), haben mehrere asymmetrische Kohlenstoff- atome. Sie können unabhängig voneinander in der D- oder der L-Form vorliegen. Die Erfindung umfaßt die optischen Antipoden ebenεo wie die Iεomerengemische oder Racemate. Bevorzugt liegen die λminosäurereste unabhängig vonein¬ ander in der optisch reinen, bevorzugt in der L-Form vor.

Die erfindungεgemäßen Verbindungen der allgemeinen For¬ mel (I) können in Form ihrer Salze vorliegen. Dies kön¬ nen Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen mit anoi—

ganischen oder organischen Säuren oder Basen sein. Zu den Säureadditionεprodukten gehören bevorzugt Salze mit Salzsäure, Bromwaεεerεtoffεäure, Iodwaεεerεtoffεäure« Schwefelsäure _« Phoεphorsäure oder mit Carbonsäuren wie Essigsäure« Propionsäure _« Oxalsäure« Glykolsäure _« Bern¬ steinsäure« Maleinsäure _« Hydroxymaleinsäure« Methylma¬ leinsäure, Fu arεäure, Adipinsäure _« pfelεäure _« Weinsäu¬ re _« Zitronensäure _« Benzoesäure _« Zimtsäure, Milchsäure, Ascorbinsäure, Salicylεäure, 2-λcetoxybenzoeεäure, Nico- tinεäure, Iεonicotinεäure, oder Sulfonsäuren wie Methan- εulfonεäure, Ethanεulfonεäure« Benzolεulfonεäure« Tolu- olεulfonεäure, Naphthalin-2-εulfonεäure oder Naphthalin¬ disulfonεäure.

Salze der erfindungsgemäßen Verbindungen mit salzbil¬ denden Gruppen können in an sich bekannter Weise hei— gestellt werden, zum Beiεpiel durch Umεetzung der erfin¬ dungsgemäßen Verbindungen, die saure Gruppen enthalten« mit entsprechenden Basen oder durch Umsetzung der er¬ findungsgemäßen Verbindungen, die basische Gruppen ent¬ halten mit entsprechenden Säuren, jeweilε bevorzugt mit den oben aufgeführten Baεen bzw. Säuren.

Alε Aminoschutzgruppe eignen εich die in der Peptid- chemie gebräuchlichen Aminoschutzgruppen.

Hierzu gehören bevorzugt: Benzyloxycarbonyl, 4-Brom- benzyloxycarbonyl, 2-Chlorbenzyloxycarbonyl, 3-Chloι— benzyloxycarbonyl, Dichlorbenzyloxycarbonyl ,3,4-Di- methoxybenzyloxycarbonyl, 3,5-Dimethoxybenzyloxycarbo- nyl, 2,4-Dimethoxybenzyloxycarbonyl, 4-Methoxybenzyloxy-

carbonyl _« 4-Nitrobenzyloxycarbonyl _« 2-Ni ^' trobenzyloxycä ^' r- bonyl, 2-Nitro-4,5-dimethoxybenzyloxycarbonyl _« 3,4,5- Trimethoxybenzyloxycarbonyl , Methoxycarbonyl , Ethoxy- carbonyl _« Propoxycarbonyl _« Iεopropoxycarbonyl , Butoxy- carbonyl _« Iεobutoxycarbonyl _« tert-Butoxycarbonyl , Pent- oxycarbonyl , Iεopentoxycarbonyl , Hexoxycarbonyl , Cyc- lohexoxycarbonyl , Octoxycarbonyl , 2-Ethylhexoxycarbonyl _« 2-Iodhexoxycarbonyl _« 2-Bromethoxycarbonyl , 2-Chlor- ethoxycarbonyl _« 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl , 2,2,2-Tri- chlor-tert-butoxycarbonyl , Benzhydryloxycarbonyl , Bis- (4-methoxyphenyl )methoxycarbonyl , Phenacyloxycarbonyl , 2-Trimethylεilylethoxycarbonyl « 2- (Di-n-butyl-methyl- εilyl )ethoxycarbonyl _« 2-Triphenylεilylethoxycarbonyl « 2- (Dimethyl-tert-butylεilyl )ethoxycarbonyl « Menthyloxycar- bonyl, Vinyloxycarbonyl, Allyloxycarbonyl, Phenoxycarbo- nyl, Tolyloxycarbonyl _« 2 _« 4-Dinitrophenoxycarbonyl _« 4- Nitrophenoxycarbonyl _« 2,4«5-Trichlorphenoxycarbonyl « Naphthyloxycarbonyl , Fluorenyl-9-methoxycarbonyl , Ethylthiocarbonyl , Methylthiocarbonyl , Butylthio- carbonyl _« Tert.-Butylthiocarbonyl , Fhenylthiocarbonyl _« Benzylthiocarbonyl, Methylaminocarbonyl , Ethylamino- carbonyl _« Methylthiocarbonyl, Butylthiocarbonyl, tert- Butylthiocarbonyl , Phenylthiocarbonyl , Benzylthiocar¬ bonyl, Methylaminocarbonyl, Ethylaminocarbonyl , Propyl- aminocarbonyl, iso-Propylaminocarbonyl , Formyl, Acetyl , Propionyl, Pivaloyl, 2-Chloracetyl , 2-Bromacetyl , 2- Iodacetyl, 2,2,2-Trifluoracetyl , 2«2,2-Trichloracetyl, Benzoyl _« 4-Chlorbenzoyl , 4-Methoxybenzoyl , 4-Nitro- benzyl , 4-Nitrobenzoyl , Naphthylcarbonyl, Phenoxyacetyl, Adamantylcarbonyl , Dicyclohexylphoεphoryl, Diphenyl- phoεphoryl, Dibenzylphoεphoryl » Di-(4-nitrobenzyl )phos-

phoryl, Phenoxyphenylphoεphoryl , Diethylphosphinyl , Di- phenylphosphinyl _« Phthaloyl, Phthalimido, 3,3-Dimethyl- propanoyl, 3,3-Dimethylpropoxycarbonyl , Phenylacetyl , Phenylpropionyl , Cinnamoyl, Toluylsulfonyl , Phenyl- sulfonyl oder tert.-Butyl-εulfonyl .

Besonders bevorzugte Aminoεchutzgruppen sind Benzyloxy¬ carbonyl, 3,4-Dimethoxybenzyloxycarbonyl, 3,5-Dimethoxy- benzyloxycarbonyl , 4-Methoxybenzyloxycarbonyl , 4-Nitro- benzyloxycarbonyl, 2-Nitrobenzyloxycarbonyl, 3,4,5-Tri- methoxybenzyloxycarbonyl , Methoxycarbonyl , Ethoxycarb- onyl, Propoxycarbonyl , Iεopropoxycarbonyl , Butoxycarb- onyl, Iεobutoxycarbonyl , tert-Butoxycarbonyl , Cyclo- hexoxycarbonyl, Hexoxycarbonyl, Octoxycarbonyl , 2- Bro ethoxycarbonyl , 2-Chlorethoxycarbonyl , Phenoxyace¬ tyl, Naphthylcarbonyl, Adamatylcarbonyl, Phthaloyl, 2,2,2-Trichlorethoxycarbonyl , 2,2,2-Trichlor-tert- butoxycarbonyl , Menthyloxycarbonyl , Vinyloxycarbonyl, Allyloxycarbonyl, Phenoxycarbonyl , 4-Nitrophenoxycarb- onyl , Fluorenyl-9-methoxycarbonyl , Formyl, Acetyl , Pro- pionyl, Pivaloyl, 2-Chloracetyl , 2-Bromacetyl, 2,2,2- Trifluoracetyl , 2,2,2-Trichloracetyl , Benzoyl, 4-Chlor- benzoyl, 4-Brombenzoyl, 4-Nitrobenzoyl , Phthalimido oder Iεovaleroyl, 3,3-Dimethylpropanoyl, 3,3-Dimethylpropoxy- carbonyl , Phenylacetyl, Phenylpropionyl, Cinnamoyl, Toluylεulfonyl, Phenylεulfonyl oder tert.-Butyl-εulfonyl [vgl. Th. W. Greene , Protective Groupε in Organic Syntheεi, John Wiley & Sons, New York 1981].

Unter dem Begriff natürliche Aminosäuren werden bei- εpielεweiεe Alanin (Ala) , Aspartinεäure (Asp), Aεparce- gin (Asn), Glutaminsäure (Glu), Glutamin (Gin), Histidin

(His), Leucin (Leu), Methionin (Met), Prolin (Pro), Threonin (Thr), Tyrosin (Tyr), Arginin (Arg), Cystein

(Cys), Glycin (Gly), Isoleucin (Ile), Lysin (Lyε), Phe- nylalanin (Phe), Serin (Ser), Tryptophan (Trp) und Valin (Val) erfaßt.

Unter dem Begriff unnatürliche Aminoεäuren werden p-F-, p-Cl-, p-Nitro und p-J subεtituierteε Phenylalanin, 4-C ₁ -C ₆ -Alkoxyphenylalanin, inεbesondere 4-Methoxyphe- nylalanin, Homophenylalanin, (3-Thionaphtenyl )glycin, O-Benzyl-serin und 1- oder 2-Naphthylalanin erfaßt.

Bevorzugt sind Verbindungen der allgemeinen Formel (I) in welcher

A, B, D und E gleich oder verschieden εind und

- für eine Bindung εtehen

- für Prolein (Pro), Leucin (Leu), Iεoleucin (Ile), Phenylalanin (Phe), Glycin (Gly), Valin (Val), Hiεtidin (His), Alanin (Ala), Lyεin (Lyε), Tryp¬ tophan (Trp), Tyroεin (Tyr), p-F-Phenylalanin, p-Cl-Phenylalanin, p-Nitrophenylalanin, 1- oder 2-Naphthylalanin (1-Nal, 2-Nal ) , 4-Methoxyphenyl- alanin, (3-Thionaphtenyl )glycin, Homophenylalanin oder O-Benzyl-εerin stehen,

R ¹ für Wasεerεtoff steht oder für tert.-Butoxycarbonyl (Boc), Ethoxycarbonyl , (Etoc), Methoxycarbonyl (Metoc), Benzyloxycarbonyl (Z) , Allyloxycarbonyl (Alloc), Iεopropoxycarbonyl , Iεopentoxycarbonyl

(= 3,3-Dimethylpropoxycarbonyl ) , N-Fluorenyloxyi- carbonyl (F-Moc), Phenoxyacetyl, Acetyl , Formyl, Pivalolyl, Iεovaleroyl, Phenylacetyl, Phenylpro¬ pionyl, Cinnamoyl, 3,3-Dimethylpropionyl , Toluyl- εulfonyl, Phenylsulfonyl oder tert.-Butyl-Sulfonyl εteht

für geradkettigeε oder verzweigteε Alkyl oder Acyl mit jeweilε biε zu 6 Kohlenεtoffatomen εteht, daε gegebenenfalls durch Phenyl oder Naphthyl εubεtitu- iert iεt

für einen Rest der Formel

R ³ -(CH ₂ ) _a -C0, R ³ '-(CH=CH) _a .-C0, R (0) _b -(CH ₂ ) _c -(CH=CH) _d -(CR ⁵ H) _e -(CH ₂ ) _f -CO,

- (CR ⁷ R ⁸ ) ₉ -C0-, N-CH ₂ -C0-

,

,

L L ¹

II II

R ¹⁵ - (CH ₂ ) £-NH-C, CH ₃ 0- C (CH ₂ ) ₂ 0] ₄ - (CH ₂ ) ₂ -C-

oder εteht

worin

a« a' _« b _« d _« e _« h und i gleich oder verschieden sind und eine Zahl 0 _« 1 _« 2 _« 3 _« 4 _« 5 _« 6 oder 7 bedeuten« g eine Zahl 1« 2 _« 3« 4 oder 5 bedeutet _« c und f gleich oder verεchieden sind und eine Zahl 0« 1 oder 2 bedeuten _«

3 und R ^* * ^*3* _ ' glei<ch oder verεchi•eden εi•nd und

Phenyl oder Naphthyl bedeuten, die gegebenen- fallε durch Fluor, Chlor, Brom, Nitro, Hydroxy oder durch geradkettiges oder verzweigtes Al¬ kyl oder Alkoxy mit jeweils biε zu 6 Kohlen¬ stoffatomen substituiert sind

geradkettiges oder verzweigtes Alkyl, Alkoxy oder Alkoxycarbonyl mit jeweils biε zu 8 Koh* lenstof atomen bedeuten, die gegebenenfalls durch Phenyl oder Naphthyl subεtituiert sind

Morpholino, Morpholino-N-Oxid, Pyridyl, Pyri- dyl-N-Oxid, Pyrrolidinyl oder Piperidinyl be¬ deuten

R ⁴ und R! gleich oder verschieden εind und Wasser¬ stoff, geradkettiges oder verzweigteε Alkyl mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen, Phenyl oder

Naphthyl bedeuten, wobei letztere gegebenen- falls durch Fluor, Chlor, Brom, Nitro oder durch geradkettigeε oder verzweigteε Alkyl oder Alkoxy mit jeweilε bis zu 6 Kohlenstoff¬ atomen substituiert sind

5 geradkettiges oder verzweigtes Alkyl mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen bedeutet

R* Fluor _« Chlor oder geradkettiges oder ver¬ zweigtes Alkyl oder Alkoxy mit jeweilε bis zu 6 Kohlenεtoffatomen bedeutet

m die >NH-Gruppe _« ein Sauerstoffatom, ein

Schwefelatom oder die S0 ₂ ~Gruppe bedeutet

R ⁷ und R ⁸ gleich oder verεchieden εind und Wasεei— stoff oder geradkettiges oder verzweigteε Alkyl mit bis zu 6 Kohlenεtoffatomen bedeuten

R ⁹ Phenyl oder Naphthyl bedeutet, daε gegebenen- f llε durch Fluor, Chlor, Brom oder durch ge¬ radkettigeε oder verzweigteε Alkyl oder Alkoxy mit jeweilε bis zu 6 Kohlenstoffatomen subεti¬ tuiert iεt

- Morpholino, Morpholino-N-Oxid, Piperidinyl,

Pyrrolidinyl, Pyridyl oder Pyridyl-N-Oxid bedeutet

Hydroxy oder geradkettiges oder verzweigtes Alkyl oder Alkoxy mit jeweils bis zu 8 Koh¬ lenstoffatomen bedeutet, das gegebenenfalls biε zu 2fach durch Hydroxy oder durch Acyl mit biε zu 6 Kohlenεtoffatomen oder durch Pyrroli- dinyl-(N-BOC) substituiert ist

10 einen Rest der Formel R ¹⁶ -S(0) oder R ¹ -CO bedeutet

worin

15

1 eine Zahl 0 _« 1 oder 2 bedeutet

R ¹⁶ geradkettiges oder verzweigtes Alkyl mit biε zu 6 Kohlenεtoffatomen bedeutet, das

20 gegebenenfalls durch Phenyl oder Naphthyl subεtituiert ist oder

Morpholino, Morpholino-N-Oxid, Pyridyl, Pyridyl-N-Oxid, Pyrrolidinyl oder Piperi-

25 dinyl bedeutet, die gegebenenfalls durch Benzyl subεtituiert εind

R ¹⁷ geradkettigeε oder verzweigteε Alkyl mit bis zu 6 Kohlenstoffatomen bedeutet, daε

30 gegebenenfallε durch Phenyl oder Naphthyl substituiert ist

Morpholino, Morpholino-N-Oxid, Pyridyl, Pyridyl-N-Oxid, Pyrrolidinyl oder Fiperi-

35

dinyl bedeutet, die gegebenenfalls durch geradkettiges oder verzweigteε Alkyl mit biε zu 4 Kohlenεtoffatomen oder Benzyl substituiert εind oder

eine Gruppe der Formel NR ¹ R ¹⁹ bedeutet

10 worin

R ¹⁸ und Rl ⁹ gleich oder verεchieden εind und Wasserstoff oder geradkettiges oder verzweigteε Alkyl mit biε zu 6 Kohlen- 15 εtoffatomen bedeuten, das gegebenenf lls durch Hydroxy, Phenyl, Pyridyl, Morpholi¬ no, Piperidinyl, Alkoxy mit bis zu 4 Koh¬ lenstoffatomen, (C^-C ₄ )-Di lkylamino,

20 - oder einem Rest der Formel

(CH ₃ ) ₃ N ^Θ C1 ^Θ oder CH ₃ 0-(CH ₂ ) ₂ ~0-CH ₂ -0-(CH ₂ ) ₂ -N-

CH ₃

25 eubstituiert ist

oder

R ¹⁸ oder R ¹⁹ Cyclopropyl bedeuten

30 oder

R ¹⁸ und R ¹⁹ gemeinεam mit dem Stickεtoff- atom einen Morpholino oder Piperidinyl- 35 ring bilden

R ¹¹ und R ¹² gleich oder verεchieden sind und Wasεerεtoff oder geradket iges oder verzweigtes Alkyl mit bis zu 4 Kohlen¬ stoffatomen oder eine der oben aufge¬ führten Aminoschutzgruppen bedeuten

R ¹³ geradkettigeε oder verzweigteε Alkoxy mit biε zu 6 Kohlenstoffatomen oder Hydroxy bedeutet

Morpholino, Pyridyl, Piperidinyl oder Pyrroli¬ dinyl bedeutet

geradkettiges oder verzweigtes Alkyl mit bis zu 6 Kohlenεtoffatomen bedeutet, das gegebe¬ nenfalls durch Phenyl oder Naphthyl εubεtitu- iert iεt, daε εeinerεeitε durch Fluor, Chlor oder Nitro substituiert sein kann oder

eine Gruppe der Formel .-NR ¹⁸ R* ^*9' bedeutet

worin

R ¹⁸ und R ¹ die oben angegebene Bedeutung von R ¹⁸ und R ¹⁹ haben und mit dieser gleich oder verschieden sind

R ¹⁴ Wasεerεtoff oder die Gruppe -NR ²⁰ R ²¹ bedeutet

worin

,20 und R ²¹ gleich oder verεchieden εind und

Waεεerεtoff, eine der oben aufgeführten

Aminoschutzgruppen oder Acyl mit bis zu 6 Koh¬ lenstoffatomen bedeuten

R ¹⁵ Phenyl oder Naphthyl bedeutet, daε gegebenen- fallε durch Fluor, Chlor, Nitro oder durch geradkettigeε oder verzweigteε Alkyl oder Al¬ koxy mit jeweilε biε zu 4 Kohlenεtoffatomen εubεtituiert iεt oder

geradkettigeε oder verzweigtes Alkyl mit bis zu 4 Kohlenεtoffatomen bedeutet, daε gegebe¬ nenfalls durch Hydroxy oder durch einen Rest

© θ der Formel (CH ₃ ) ₃ N Cl subεtituiert iεt

L und L' gleich oder verεchieden εind und ein Sauerstoff oder ein Schwefelatom bedeuten

W einen Reεt der Formel R ^16' -S0 ₂ , R ²² R ²³ N-S0 ₂ oder R ² R ² N-C0 bedeutet

worin

E die oben angegebene Bedeutung von ¹ hat und mit dieser gleich oder verεchieden iεt und

R ²² , R ²³ , R ²⁴ und R ²⁵ die oben angegebene Be¬ deutung von R ⁱ⁸ und R ¹⁹ haben und mit dieεer gleich oder verεchieden ist

*-, " für Wasserstoff, für geradkettiges oder verzweigtes Alkyl mit bis zu 6 Kohlen- εtoffatomen oder Benzyl εteht

oder

im Fall, daß A und B gleichzeitig eine Bindung bedeuten

Rl und R gemeinsam mit dem Stickεtoffatom einen der oben aufgeführten literaturbe- kannten Ringe bilden,

n für die Zahl 1 oder 2 εteht

Y für Wasserstoff, für geradkettiges oder verzweigtes Alkyl mit bis zu 6 Kohlen- εtoffatomen oder Cyclopropyl εteht

für eine der oben aufgeführten λmino- εchutzgruppen steht oder

für einen Rest der Formel -NHR ²⁶ , -NR ²⁷ R ²⁸ oder -0R 30 steht

worin

R ²⁶ , R ²⁷ und R ²⁸ gleich oder verschieden sind und Wasserstoff, Cyclopropyl oder geradketti¬ ges oder verzweigtes Alkyl oder Alkoxy mit je¬ weils bis zu 8 Kohlenstoffatomen bedeuten, die

gegebenenfallε durch Hydroxy, Pyridyl oder Morpholino εubstituiert εind

R ³⁰ Waεεerεtoff oder geradkettiges oder ver¬ zweigteε Alkyl mit biε zu 8 Kohlenstoff¬ atomen bedeutet

und deren physiologisch unbedenklichen Salze.

Beεonders bevorzugt sind Verbindungen der allgemeinen Formel (I)

in welcher

A, B, D und E gleich oder verschieden sind und

für eine Bindung stehen oder

- für Prolein (Pro), Leucin (Leu), Isoleucin (Ile), Phenylalanin (Phe), Valin (Val), Hiεtidin (His), Alanin (Ala), Lyεin (Lyε), Tyroεin (Tyr), p-Fluor- phenylalanin, p-Cl-Phenylalanin, p-Nitrophenyl- alanin, 2-Naphthylalanin (2-Nal), 4-Methoxyphenyl- alanin, (3-Thionaphtenyl )glycin, Homophenylalanin oder O-Benzyl-εerin etehen,

R ¹ für Waεεerεtoff εteht oder

für tert.-Butoxycarbonyl (Boc), Ethoxycarbonyl , (Etoc), Methoxycarbonyl (Metoc), Benzyloxycarbonyl (Z) , Iεopropoxycarbonyl, Allyloxycarbonyl (Alloc),

Phenoxyacetyl, Acetyl , Pivaloyl, Isovaleroyl, Phe¬ nylpropionyl, Toεyl, tert . -Butylεulfonyl oder 3,3- Dimethylpropionyl

für geradkettigeε oder verzweigteε Alkyl oder Acyl mit jeweilε biε zu 4 Kohlenεtoffatomen εteht, daε gegebenenfalls durch Phenyl oder Naphthyl subεtitu¬ iert iεt

für einen Reεt der Formel

R ³ -(CH ₂ ) _a -C0, R ³ '-(CH=CH) _a .-C0, R ⁴ (0) _b -(CH ₂ ) _c -(CH=CH) _d -(CR ⁵ H) _e -(CH ₂ ) _f -C0,

^ζ - H,N- (CR ⁷ R ⁸ ) ₉ -C0- N-CH,-C0-

R ¹² R ^1:l N-(CH ₂ ) ₂ -0-C0-, ,

L L'

R ¹⁵ -(CH ₂ ) _j -NH-C, CH3O- i (CH ₂ ) ₂ 0] ₄ - (CH ₂ ) ₂ ~C-

oder εteht

worin

a, a", b, d, e, h und i gleich oder verschieden εind und eine Zahl 0, 1, 2, 3, 4, 5 oder 6 be¬ deuten, g eine Zahl 1, 2, 3 oder 4 bedeutet, c und f gleich oder verεchieden εind und eine Zahl o , i oder 2 bedeuten,

R ³ und R ³ gleich oder verεchieden εind und

Phenyl oder Naphthyl bedeuten, die gegebenen- durch Fluor, Chlor, Methyl, Nitro oder Methoxy substituiert sind

geradkettiges oder verzweigtes Alkyl, Alkoxy oder Alkoxycarbonyl mit jeweils bis zu 6 Koh- lenstoffatomen bedeuten, die gegebenenfallε durch Phenyl oder Naphthyl εubstituiert sind

Morpholino, Pyridyl oder Piperidinyl bedeuten

R ⁴ und gleich oder verεchieden εind und Wasser¬ stoff, geradkettiges oder verzweigtes Alkyl mit biε zu 4 Kohlenεtoffatomen, Phenyl oder Naphthyl bedeuten, wobei letztere gegebenen¬ falls durch Fluor, Chlor, Nitro, Methyl oder Methoxy subεtituiert εind

R ⁵ geradkettiges oder verzweigtes Alkyl mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen bedeutet

R ⁶ Fluor, Chlor oder geradkettiges oder verzweig¬ tes Alkyl oder Alkoxy mit jeweilε biε zu 4 Kohlenεtoffatomen bedeutet

m die >NH-Gruppe oder ein Sauerstoffatom be¬ deutet

R ⁷ und R ⁸ gleich oder verεchieden εind und Wasεer¬ εtoff oder geradkettigeε oder verzweigteε Al¬ kyl mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen bedeuten

R ⁹ Phenyl oder Naphthyl bedeutet, das gegebenen¬ falls durch Fluor, Chlor, Methyl oder Methoxy substituiert ist

Morpholino, Pyridyl oder Piperidinyl bedeutet

Hydroxy oder geradkettigeε oder verzweigteε Alkyl oder Alkoxy mit jeweils biε zu 6 Kohlen¬ stoffatomen bedeutet, das gegebenenfalls bis zu 2fach durch Hydroxy oder durch einen Rest der Formel

- einen Rest der Formel R ¹⁶ -S0 ₂ - oder R ⁷ -C0 bedeutet

worin

¹ * geradkettigeε oder verzweigteε Alkyl mit biε zu 4 Kohlenεtoffatomen bedeutet, daε gegebenenfallε durch Phenyl oder Naphthyl subεtituiert iεt

10

Morpholino, Piperidinyl oder Pyridyl be¬ deutet _« daε gegebenenfalls durch Benzyl substituiert ist

I C * »γ , ,

* ^{■ t} geradkettigeε oder verzweigtes Alkyl mit bis zu 4 Kohlenstoff tomen bedeutet, das gegebenenfalls durch Phenyl oder Naphthyl substituiert iεt

0 Morpholino, Pyridyl oder Piperidinyl be¬ deutet, daε gegebenenfalls durch Methyl oder Benzyl substituiert iεt

eine Gruppe der Formel -NR ¹⁸ R ^** bedeutet 5 worin

! ^*3 und Rl ⁹ gleich oder verεchieden εind und Waεεerεtoff oder geradkettigeε oder 0 verzweigteε Alkyl mit biε zu 4 Kohlen- εtoffato en bedeuten, daε gegebenenfallε durch Phenyl, Hydroxy, Pyridyl, Morpholi¬ no, Piperidinyl, Methoxy, Ethoxy, Dime- thylamino oder einen Reεt der Formel 5

(CH ₃ ) ₃ N ^Θ C1 ^Θ oder CH ₃ 0-(CH ₂ ) ₂ -0-CH ₂ -0-(CH ₂ ) ₂ -N-

CH ₃

substituiert ist

oder

R ¹⁸ und R ¹⁹ gemeinsam mit dem Stickstoff¬ atom einen Morpholino oder Piperidinyl- 10 ring bilden

R ¹³ geradkettigeε oder verzweigtes Alkoxy mit bis zu 4 Kohlenstoffatomen oder Hydroxy bedeutet 15

Morpholino, Pyridyl oder Piperidinyl be¬ deutet

geradkettiges oder verzweigtes Alkyl mit 20 bis zu 4 Kohlenstoff tomen bedeutet, das gegebenenfalls durch Phenyl oder Naphthyl subεtituiert iεt, das seinerseits durch Fluor, Chlor oder Nitro subεtituiert sein kann

25 eine Gruppe der Formel -NR ^* * ⁸ R ¹⁹ bedeu¬ tet

worin

30

R ⁱ⁸ und R* ^*9 die oben angegebene Bedeu- tung von R 1* ^* R° und R1 ^x haben und mi•t dieser gleich oder verschieden sind

35

R ¹⁴ Waεserstoff oder die Gruppe -NR ²⁰ R ²¹ be- 5 deutet

worin

R ² 0 und R ²¹ gleich oder verschieden εind 10 und Waεεerεtoff, eine der oben aufgeführ¬ ten Aminoεchutzgruppen oder Acyl mit biε zu 4 Kohlenεtoffatomen bedeuten

R1 ⁵ Phenyl oder Naphthyl bedeutet, daε gege- 15 benenfalls durch Fluor, Chlor, Nitro, Me¬ thyl oder Methoxy εubεtituiert iεt

geradkettiges oder verzweigtes Alkyl mit bis zu 4 Kohlenεtoffatomen bedeutet, daε 20 gegebenenfallε durch Hydroxy oder durch einen Reεt der Formel (CH ₃ ) ₃ N Cl εub¬ εtituiert iεt

L und L"gleich oder verεchieden εind und ein 25 Sauerstoff- oder ein Schwefelatom bedeuten

W einen Reεt der Formel R ^16' -S0 ₂ -, R ²² R ²³ N-S0 ₂ - oder R ²⁴ R ²⁵ N-C0 bedeutet,

30 worin

R ° die oben angegebene Bedeutung von R * hat und mit dieser gleich oder verεchieden iεt und 35

R ²² , R ²³ und R ²⁵ die oben angegebene Bedeutung von R ^*1 und R ^*1 ' haben und mit dieser gleich oder verschieden ist

R ² für Waεεerεtoff, für geradkettigeε oder verzweigtes Alkyl mit bis zu 4 Kohlen¬

10 stoffatomen oder Benzyl steht

n für die Zahl 1 oder 2 εteht

Y für Wasserstoff, für geradkettiges oder

15 verzweigteε Alkyl mit biε zu 4 Kohlen¬ εtoffatomen

für eine der oben aufgeführten Amino- schutzgruppen εteht oder

20

- für einen Reεt der Formel -NHR ²⁶ , -NR ²⁷ R ²⁸ oder -0R ³⁰ εteht

worin

25

R ²⁶ , R ²⁷ und R ²⁸ gleich oder verεchieden εind und Wasserstoff, Cyclopropyl oder geradkettiges oder verzweigteε Alkyl oder Alkoxy mit jeweilε bis zu 6 Kohlenεtoff-

30 atomen bedeuten, die gegebenen lls durch Hydroxy, Pyridyl oder Morpholino substi¬ tuiert sind

35

0 Wasserstoff oder geradkettiges oder ver¬ zweigtes Alkyl mit bis zu 6 Kohlenstoff¬ atomen bedeutet

und deren phyεiologisch unbedenklichen Salze.

Die Gruppe der Formel

besitzt drei asymmetrische Kohlenstoffatome, die unab- hängig voneinander in der R- oder S-Konfiguration vor¬ liegen können. Bevorzugt liegt diese Gruppierung in der 5R, 3S, 4S-Konfiguration, 5R, 3R, 4S-Konfiguration, 5S, 3S, 4S-Konfiguration oder 5S, 3R, 4S-Konfiguration vor, besonderε bevorzugt in der 5R, 3S, 4S- oder 5S, 3S, 4S- Konfiguration vor. Ebenso wird die Gruppierung als Iso¬ merengemiεch eingeεetzt.

Stereoiεomerengemiεche, insbesondere Diaεtereomerenge- mieche, können in an eich bekannter Weise, z.B. durch fraktionierte Kristallisa ion oder Chromatographie in die einzelnen Ieomere getrennt werden.

Racemate können in an sich bekannter Weise, z.B. durch Überführung der optischen Antipoden in Diastereomere, gespalten werden.

Die erf ndungsgemäßen Verbindungen der allgemeinen

Formel (I)

in welcher

R ¹ , A, B, R ² , n _« D _« E und Y die oben angegebene Bedeu¬ tung haben

erhält man« indem man

CA] Verbindungen der allgemeinen Formel (II)

in welcher

D, E« R* ^** und Y die oben angegebene Bedeutung haben

und

Z - für eine Aminoschutzgruppe εteht

zunächεt durch Abεpaltung die Gruppe Z nach üblichen Methoden in λmine überführt und dieεe anεchließend mit Verbindungen der allgemeinen Formel (III)

in welcher

und R die oben angegebene Bedeutung haben _;

und

Z" die oben angegebene Bedeutung von Z hat und mit dieεer gleich oder verεchieden iεt«

unter Aktivierung der Carbonεäure nach üblichen Methoden in inerten Lδεemitteln zu Verbindungen der allgemeinen Formel (Ia)

in welcher

Z' _« R , n, D, E und X die oben angegebene Bedeutung haben,

umsetzt, die Schutzgruppe Z' nach üblicher Methode ab¬ spaltet und in einem weiteren Schritt mit Verbindungen der allgemeinen Formel (IV)

A - B OH (IV)

in welcher

R , A und B die oben angegebene Bedeutung haben,

gegebenenfall unter der oben erwähnten Carbonsäure¬ aktivierung kondensiert,

und gegebenenfallε die entsprechenden Ester nach üblicher Methode verseift, oder zunächst die Verbindun¬ gen der allgemeinen Formel (III) und (IV) nach der oben angegebenen Methode umsetzt und anschließend mit den Verbindungen der allgemeinen Formel (II) eine weitere Peptidknüpfung anschließt

oder indem man

CB] Verbindungen der allgemeinen Formel (Ib)

in welcher

A _« B _« R _« R ² _« n _« D und E die oben angegebene Bedeutung haben und

Y ^r für Alkoxy mit bis zu 8 Kohlenstoffatomen oder Ben- zyloxy εteht,

nach üblicher Methode zunächst zu den entsprechenden Säuren verseift und in einem weiteren Schritt in An¬ wesenheit von Hilfεstoffen mit Aminen der allgemeinen Formel (V) oder (VI)

H ₂ NR' (V) oder HNR'R" (VI)

in welcher

R, R' und R" gleich oder verεchieden sind und dem unter Y aufgeführten Bedeutungsumfang der jeweiligen Aminogruppierungen entsprechen

kondensiert, oder indem man

[C] entweder Verbindungen der allgemeinen Formel (Ic)

in we l cher

A, B, R , R** ^* und n die oben angegebene Bedeutung haben,

und

R ³³ für Alkyl mit biε zu 6 Kohlenεtoffatomen oder Benzyl εteht,

oder Verbindungen der allgemeinen Formel (Id)

in welcher

Z', n _« R ² und R ³³ die oben angegebene Bedeutung haben _«

zunächst zu den entsprechenden Säuren nach üblicher Methode verseift und anschließend mit dem Bruchstück der allgemeinen Formel (VII)

D-E-Y (VII),

in welcher

D, E und Y die oben angegebene Bedeutung haben,

in inerten Lösemitteln, gegebenenfalls in Anwesenheit von Hilfsstoffen, umsetzt,

und im Fall der Verbindungen der allgemeinen Formel (Id) in einem nächeten Schritt nach der unter Verfahren CA] beschriebenen Methode unter schrittweiεer λbepaltung der jeweiligen Schutzgruppe Z' mit Verbindungen der all- gemeinen Formel (IV) oder (IVa)

R* ^* -A-0H (IVa) oder R!-A-B-OH (IV)

in welcher

Rl _« A und B die oben angegebene Bedeutung haben«

umsetzt,

und den Substituenten Y gegebenenfalls nach üblichen Methoden, beispielsweise durch Substitution, deriva- tisiert.

Daε Syntheεeεchema kann durch folgendes Reaktionεschema beispielhaft belegt werden:

1. + HC1 - Boc

+ HC1

3. - Boc

CA]

H ₂ 0/0H

OH

NH ₂ -CH ₂ -CH ₂ -N O

OH

Die Herstellung der erfindungsgemäßen Verbindungen iεt auch nach weiteren üblichen Varianten des beschriebenen Verfahrens durchgeführt worden (vgl. z.B. Houben-Weyls "Methoden der organischen Chemie" XV/1 und 2; M. Bodans- zky, A. Bodanszky in "The Practia Cl of Peptide Synthe- εiε", Springer Verlag, Berlin, 1984; George R. Pettit 0 in "Synthetic Peptidee" _« Volume 4, Elsevier Scientific Publishing Company, Amεterdam-Oxford-New York, 1976; E. Groεε und J. Meienhofer (Editors) in "The Peptideε", Vol. 1-3« Academic Press, New York-London-Toronto- Sydney-San Francisco« 1981; M. Bodanszky in "Frinciples 5 of Peptide Syntheεeiε", Springer Verlag, Berlin-Heidel- berg-New York-Tokyo, 1984; R. Uh ann und K, Radscheit, Offenlegungsschrift, DE 3 411 244 AI) oder auch nach der "Sol d-Phase-Methode" , wie sie beispieleweiεe von M. Bodanszky _« A. Bodanszky in "The Practice of Peptide 0 Syntheeiε" _« Springer-Verlag« Berlin _« 1984, oder G. Barany, R.B. Merrifield in "Solid-Phase Peptide Synthesis" auε "The Peptideε"« Vol. 2« S. 3-254 _« edited by E. Groεε _« J. Meienhofer _« Academic Press, New York- London-Toronto-Sydney-San Francisco (1980) beschrieben ⁵ wird.

Als Lösemittel eignen sich bei den Verfahrensvarianten CA], [B] und CC] die üblichen inerten Lösemittel, die sich unter den jeweils gewählten Reaktionεbedingungen 0 nicht verändern. Hierzu gehören Wasser oder organische Lösemittel wie Diethylether, Glykolmono- oder -dimethyl- ether, Dioxan oder Tetrahydrofuran, oder Kohlenwasser¬ stoffe wie Benzol, Toluol« Xylol« Cyclohexan oder Erdöl¬ fraktionen oder Halogenkohlenwaεεerεtoffe wie Methylen- *-' Chlorid, Chloroform, Tetrachlorkohlenwaεεerεtoffe oder

Aceton, Dimethylsulfoxid _« Dimethylformamid, Hexamethyl- phosphorεäuretriamid, Essigester, Pyridin, Triethylamin oder Picolin.

Ebenεo iεt es möglich, Gemieche der genannten Löεemittel zu verwenden«

Bevorzugt εind Tetrahydrofuran, Methylenchlorid, Dime¬ thylformamid und Eεεigeεter.

Üblicherweise werden die Verfahrenεvarianten CA], CB] und [C] in Gegenwart geeigneter Löse- bzw. Verdünnungε- ittel, gegebenenfallε in Anwesenheit eines Hilfsεtoffeε oder Katalysators in einem Temperaturbereich von -80°C biε 300°C, bevorzugt von -30° C biε +30° C bei normalem Druck durchgeführt. Ebenso ist es möglich« bei erhöhtem oder erniedrigtem Druck zu arbeiten.

Alε aktivierte Carboxylgruppe eignen sich bei den Ver- fahrenεvarianten [A], CB] und [C] beispielsweise Car- bonsäureazide (erhältlich z.B. durch Umsetzung von ge¬ schützten oder ungeschützten Carbonsäurehydraziden mit salpetriger Säure _« deren Salzen oder Alkylnitriten (z.B. Iεoamylnitrit), oder ungeεättigte Ester, insbesondere Vinyleεter, (ei— hältlich z.B. durch Umεetzung eineε entsprechenden Esterε mit Vinylacetat) , Carbamoylvinylester (erhältlich z.B. durch Umsetzung einer entsprechenden Säure mit einem Iεoxazoliu reagenz) , Alkoxyvinyleεter (erhältlich z.B. durch Umeetzung der entsprechenden Säuren mit Alk- oxyacetylenen, bevorzugt Ethoxyacetylen) , oder Amidinoeεter z.B. N,N'- bzw. N _» N-disubεtituierte

Amidinoeεter (erhältlich z.B. durch Umεetzung der ent-

sprechenden Säure mit einem N,N' -diεubεituierten Carbo- diimid (bevorzugt Dicyclohexylcarbodiimid, Diieopropyl- carbodiimid oder N-(3-Dimethylaminopropyl )- ' -ethyl- carbodiimidhydrochlorid) oder mit einem N,N-diεubεtitu- ierten Cyanamid, oder Aryleεter, insbesondere durch elektronenziehende

10 Substituenten substituierte Phenylester, z.B. 4-Nitro- phenyl-, 4-Methylεulfonylphenyl-, 2,4,5-Trichlorphenyl-, 2,3,4,5,6-Pentachlorphenyl-, 4-Phenyldiazophenyleεter (erhältlich z.B. durch Umsetzung der entsprechenden Säure mit einem entsprechend substituierten Phenol,

¹⁵ gegebenenfalls in Anwesenheit eines Kondensationsmittels wie z.B. N,N' -Dicyclohexylcarbodiimid, Diiεopropylcarbo- diimid, N-(3-Dimethylaminopropyl )-N' -ethylcarbodiimid- Hydrochlorid, Iεobutylchloro or at« Propanphoεphon- säureanhydrid) _« Benzotriazolyloxytris(dimethylamino)-

* ^&u phoεphoniumhexafluorphoεphat« oder Cyanmethyleεter (erhältlich z.B. durch Umεetzung der entsprechenden Säure mit Chloracetonitri1 in Ge¬ genwart einer Baεe), oder Thioester, insbesondere Nitrophenylthioeεter (er¬

25 hältlich z.B. durch Umεetzung der entεprechenden Säure mit Nitrothiophenolen _« gegebenenfallε in Gegenwart von Kondenεationsmitteln wie N,N' -Dicyclohexylcarbodiimid, Diisopropylcarbodiimid, N-(3-Dimethylaminopropyl )-N'- ethylcarbodiimid-Hydrochlorid, Isobutylchloroformat,

30 Propanphoεphonsäureanhydrid, Benzotriazolyloxytris (dimethylamino)phoεphoniumhexafluorphoεpha ) , oder Amino- bzw. Amidoeεter (erhältlich z.B. durch Umεetzung der entεprechenden Säure mit einer N-Hydroxy- amino- bzw. N-Hydroxyamido-Verbindung, inεbeεondere N-

35

Hydroxy-succinimid« N-Hydroxypiperidin« N-Hydroxy-phtha- limid« N-Hydroxy-5-norbornen-2,3-dicarbonsäureimid oder 1-Hydroxybenzotriazol, gegebenenfallε in Anwesenheit von Kondensationsmitteln wie N,N'-Dicyclohexylcarbodiimid« Diiεopropylcarbodiimid oder N-(3-Dimethylaminopropyl)- N'-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid« Iεobutylchloroformat oder n-Propanphoεphonsäureanhydrid) « oder Anhydride von Säuren« bevorzugt symmetrische oder unsymmetrische Anhydride der entsprechenden Säuren _« inε- beεondere Anhydride mit anorganiεchen Säuren (erhältlich z.B. durch Umεetzung der entεprechenden Säure mit Thio- nylchlorid, Phoεphorpentoxid oder Oxalylchlorid) « oder Anhydride mit Kohlensäurehalbderivaten z.B. Kohlen- säureniederalkylhalbester (erhältlich z.B. durch Umset¬ zung der entεprechenden Säure mit Halogenameisenεäure- niedrigalkyleεtern, z.B.Chlorameiεenεäuremethyleεter,

-ethylester, -propylester, -iεopropyleεter, -butyleεter oder -iεobutyleεter oder mit l-Niedrigalkoxycarbonyl-2- niedrigalkoxy-1,2-dihydro-chinolin, z.B. 1-Methoxycarbo- nyl-2-ethoxy-l,2-dihydrochinolin) , oder Anhydride mit Dihalogenphoεphorεäuren (erhältlich z.B. durch Umsetzung der entεprechenden Säure mit Phoεphoroxychlorid) , oder Anhydride mit Phoεphorsäurederivaten oder Phoεphor- igsäurederivaten, (z.B. Propanphoεphonεäureanhydrid, H. Wisεmann und H.J, Kleiner, Angew. Chem. Int. Ed. 19. 133 (1980)) oder Anhydride mit organischen Carbonεäuren (erhältlich z.B. durch Umeetzung der entεprechenden Säuren mit einem gegebenenf llε εubεtituierten Niederalkan- oder Phenylalkancarbonsäurehalogenid, insbesondere Phenyl-

essigεäure, Pivalinεäure- oder Trifluoreεεigεäure- Chlorid), oder Anhydride mit organiεchen Sulfonεäuren (erhältlich z.B. durch Umεetzung eineε Alkaliεalzes einer ent¬ sprechenden Säure mit einem Sulfonsäurehalogenid, insbesondere Methan-, Ethan-, Benzol- oder Toluol- sulfonsäurechlorid) , oder symmetrische Anhydride (erhältlich z.B. durch Kondensation entsprechender Säuren« gegebenenfalls in Gegenwart von Kondensa ionsmitteln wie N,N' -Dicyclo¬ hexylcarbodiimid, Diiεopropylcarbodiimid, N-(3-Di- methyl minopropyl )-N' -ethylcarbodiimid-Hydrochlorid

Iεobutylchloroformat, Propanphσεphonεäureanhydrid oder Benzotriazolyloxy-tris(dimethylamino)phoεphonium- hexafluorphoεphat.

Reaktionsfähige cyclische Amide εind insbeεondere Amide mit fünfgliedrigen Heterocyclen mit 2 S ickstof atomen und gegebenenfalls aromatischem Charakter _« bevorzugt Amide mit Imidazolen oder Pyrazolen (erhältlich z.B. durch Umεetzung der entsprechenden Säuren mit N _« N'- Carbonyldiimidazol oder - gegebenenfallε in Gegenwart von Kondensationsm tteln wie z.B. N,N'-Dicyclohexyl¬ carbodiimid, N,N' -Diisopropylcarbodiimid, N-(3-Dimethyl- aminopropyl )-N'-ethylcarbodiimid-Hydrochlorid, Iεobutyl¬ chloroformat, Propanphoεphonεäureanhydrid, Benzotria- zolyloxy-triε(dimethylamino)phoεphonium-hexafluorphoε¬ phat- mit z.B. 3,5-Dimethyl-pyrazol , 1 ,2,4-Triazol oder Tetrazol .

λlε Hilfsstoffe werden bevorzugt Kondensationεmittel eingeεetzt, die auch Basen sein können, insbesondere wenn die Carboxylgruppe als Anhydrid aktiviert vorliegt.

Bevorzugt werden hier die üblichen Kondensationsmittel wie Carbodiimide z.B. N,N"-Diethyl-, N,N- 'Dipropyl-, N,N ^* -Diiεopropyl-, N _« N" -Dicyclohexylcarbodiimid _« N-(3- Dimethylaminoiεopropyl )-N'-ethylcarbodiimid-Hydro- chlorid, oder Carbonylverbindungen wie Carbonyldiimi- dazol, oder 1 ,2-0xazoliumverbindungen wie 2-Ethyl-5- phenyl-1«2-oxazolium-3-εulfat oder 2-tert-Butyl-5- methyl-isoxazoliu -perchlorat, oder Acylaminoverbin- dungen wie 2-Ethoxy-l-ethoxycarbonyl-l,2-dihydro- chinolin _« oder Propanphosphonsäureanhydrid« oder Iεo- butylchloroformat _« oder Benzotriazolyloxy-triε(dimethyl- amino)phoεphonium-hexafluorophoεphat, und alε Basen Alkalicarbonate z.B. Natrium- oder Kaliumcarbonat oder -hydrogencarbonat _« oder organische Basen wie Trialkyl- amine z.B. Triethylamin« N-Ethylmorpholin« N-Methyl- piperidin oder Diiεopropylethylamin eingesetzt.

Die Abεpaltung der Aminoschutzgruppe erfolgt in an sich bekannter Weise unter sauren oder baεischen Bedingungen, oder reduktiv durch katalytiεche Hydrierung beiεpiels- weiεe mit Pd/C in organiεchen Lösemitteln wie Ethern _« z.B. Tetrahydrofuran oder Dioxan, oder Alkoholen z.B. Methanol, Ethanol oder Iεopropanol.

Die Verεeifung der Carbonεäureeεter erfolgt nach üb¬ lichen Methoden in einem der oben aufgeführten Löse¬ mittel, indem man die Ester mit üblichen Basen behan¬ delt, wobei die zunächst entstehenden Salze durch Be¬ handeln mit Säure in die freien Carbonsäuren überführt werden können.

Als Basen eignen sich für die Verseifung die üblichen anorganischen Basen. Hierzu gehören bevorzugt Alkali¬ hydroxide oder Erdalkal hydroxide wie beispielsweise Natriumhydroxid, Kaliumhydroxid oder Bariumhydroxid, oder Alkalicarbonate wie Natrium- oder Kaliumcarbonat oder Natriumhydrogencarbonat, oder Alkalialkoholate wie Natriumethanolat, Natriummethanolat, Kaiiumethanolat, Kaliummethanolat oder Kalium-tert«butanolat. Besonders bevorzugt werden Natriumhydroxid oder Kaliumhydroxid eingesetzt.

Die Verεeifung wird im allgemeinen in einem Temperatur¬ bereich von 0° C biε +100° C, bevorzugt von +20° C iε +80° C durchgeführt.

Im allgemeinen wird die Verεeifung bei Normaldruck durchge ührt. Es iεt aber auch möglich, bei Unterdruck oder bei Überdruck zu arbeiten (z.B. von 0,5 bis 5 bar) .

Bei der Durchführung der Verseifung wird die Base im allgemeinen in einer Menge von 1 bis 3 mol, bevorzugt von 1 bis 1,5 mol bezogen auf 1 mol des Esterε einge¬ setzt. Besonders bevorzugt verwendet man molare Mengen der Reaktanden.

Die Abspaltung der Ester kann ebenfalls nach üblicher Methode mit Säuren, wie beiεpielεweiεe Chlorwaeserstoff- säure oder Trifluoresεigεäure im Fall der tert.-Butyl- ester oder durch Hydrogenolyse im Fall von Benzylestern erfolgen.

Die Verbindungen der allgemeinen Formeln (II), (IV), (IVa) und (VII) εind an sich bekannt oder können nach üblichen Methoden der Peptidchemie aufgebaut werden, indem man durch Umεetzung eines entεprechenden Bruch¬ stücks bestehend auε einer oder mehreren Aminoεäure- gruppierungen, mit einer freien, gegebenenfallε in aktivierter Form vorliegenden Carboxylgruppe mit einem komplementierenden Bruchstück, beεtehend auε einer oder mehreren Aminoεäuregruppierungen, mit einer Aminogruppe, gegebenenfallε in aktivierter Form, herstellt, und dieεen Vorgang gegebenenf lls so oft mit entsprechenden Bruchstücken wiederholt, biε man die gewunεchten Peptide der allgemeinen Formeln (II), (IV), (IVa) und (VII) her¬ gestellt hat, anεchließend gegebenenfallε Schutzgruppen abspaltet oder gegen andere Schutzgruppen auεtauεcht.

Hierbei können zuεätzliche reaktive Gruppen, wie z.B. Amino- oder Hydroxygruppen, in den Seitenketten der Bruchεtücke gegebenenfallε durch übliche Schutzgruppen geεchützt werden [vgl, Houben-Weyl, Eugen Müller, Methoden der organiεchen Chemie, Band XV/1 und Band XV/2, Georg Thieme Verlag« Stuttgart, 1974],

Die Umεetzung mit Aminen der Formeln (V) und (VI) er¬ folgt im allgemeinen in einem der oben aufgeführten inerten Lösemitteln, in Anwesenheit einer der oben aufgeführten Basen, bevorzugt in Triethylamin und Methylenchlorid bei einer Temperatur von -40° C bis 0° C bei, bevorzugt bei -20° C und Normaldruck,

Im allgemeinen setzt man 1 biε 5, bevorzugt 1,5 biε 1 mol Amin, bezogen auf 1 mol des Reaktionspartners, ein.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel (III)

^(CH 2>n—|

in welcher

n und Z' die oben angegebene Bedeutung haben _«

sind größtenteils neu und können dann hergestellt werden, indem man

Verbindungen der allgemeinen Formel (VIII)

in welcher

n die oben angegebene Bedeutung hat,

mit einem einführenden Reagenz, wie beiεpielεweiεe (Z'-0-CO) ₂ 0, Z'-O-CO-Cl oder (Z ^* -0-CO)-0-N-εuccinimid, die Aminoεchutzgruppe Z' nach der oben beschriebenen Methode CA] in inerten Lösemitteln in Anwesenheit einer Base, bevorzugt im Gemisch Dioxan/Waεser mit Natrium¬ hydroxid oder in Dioxan mit Triethylamin in einem Tem¬ peraturbereich von 0° C biε +50° C, bevorzugt bei Raum¬ temperatur und Normaldruck, umsetzt und im Fall, daß R ² = H, nach üblicher Methode alkyliert.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel (Ia) und (Ib) sind neu und werden nach der unter Verfahren [A] und [B] beschriebenen Methode dargestellt.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel (Id) eind eben¬ falls neu und können hergeεtellt werden,

indem man

Verbindungen der allgemeinen Formel (III)

in welcher

Z' _« R ² und n die oben angegebene Bedeutung haben,

mit Verbindungen der allgemeinen Formel (IX)

in welcher

Z, R ² und R ³³ die oben angegebene Bedeutung haben«

unter Abεpaltung der Schutzgruppe Z, umsetzt.

Die Verbindungen der allgemeinen Formel (IX) sind be¬ kannt Cvgl, Boger et al., J. Med. Chem. 2J5, 1779 -1790 (1985)].

Die Verbindungen der allgemeinen Formel (VIII) εind be¬ kannt oder können nach bekannten Methoden hergestellt werden CM.P. Mertes, A.A. Ramsey, J. Med. Chem. J_2, 342 (1969)].

Die Verbindungen der allgemeinen Formel (Ic) sind eben¬ falls neu und werden durch Umsetzung der Verbindungen der Formel (III), (IV) und (IX) nach der unter Verfahren CA] beεchriebenen üblichen Peptidkupplungεmethode her- gestellt.

Die Amine der allgemeinen Formel (V) und (VI) εind be¬ kannt Cvgl, G.C. Barrett, Chemiεtry and Hell Chemiεtry of the Amino Acidε, Chapman and Hell, New York, London, 1988 und EP-A2 0278 158].

Die erfindungεgemäßen Verbindungen besitzen eine kreiε- laufbeeinfluεεende Wirkung und können deshalb in Arz¬ neimittel zur Behandlung des Blutdrucks und der Herz¬ insuffizienz eingesetzt werden.

In vitro Teεt

Die inhibitorische Stärke der erfindungsgemäßen Peptide gegen endogenes Renin vom Humanplasma wird in vitro be-

stimmt. Gepooltes Humanplasma wird unter Zusatz von Ethylendia intetraeεεigεäure (EDTA) als Antikoagulanz erhalten und bei -20° C gelagert. Die Plasmareninaktivi- tät (PRA) werden alε Bildungsrate von Angiotenεin I auε endogenem Angiotenεinogen und Renin nach Inkubation bei 37° C bestimmt. Die Reaktionεlöεung enthält 150 μl Plas- ma, 3 μl 6,6%ige 8-Hydroxychinolinεulfatlöεung, 3 μl lu ige Dimercaprollösung und 144 μl Natriumphoεphatpuf- fer (0,2 M; 0,1% EDTA; pH 5,6) mit oder ohne den erfin¬ dungsgemäßen Stoffen in verschiedenen Konzentrationen. Das pro Zeiteinheit gebildete Angiotensin I wird mit einem Radioimmunoaεεay (Sorin Biomedica, Italien) be¬ stimmt. Die prozentuale Inhibition der Plasmareninakti- vität wird berechnet durch Vergleich der hier bean¬ spruchten Substanzen. Der Konzentrationsbereich, in dem die hier beanspruchten Substanzen eine 50 ^* . Inhibition der Plaεmareninaktivität zeigen, liegen zwiεchen 10~ ⁶ biε 10~H M. Beispielhaft seien folgende Wirkdaten angegeben:

Bεp. Nr. IC ₅₀ CM]

76 5«6 x 10 -11

89 5.4 x 10 ^'

Die neuen Wirkstoffe können in bekannter Weise in die üblichen Formulierungen überführt werden, wie Tabletten _« Dragees« Pillen, Granulate« Aerosole _« Sirupe _« Emulsionen Suεpenεionen und Lösungen, unter Verwendung inerter _« nicht _« toxiεcher, pharmazeutisch geeigneter Trägerstoffe oder Löεungεmittel. Hierbei εoll die therapeutisch wirksame Verbindung jeweilε in einer Konzentration von etwa 0,5 biε 90-Gew,-% der Gesamtmischung vorhanden sein, d.h. in Mengen die ausreichend sind« um den angegebenen _« Dosierungεεpiel zu erreichen.

Die Formulierungen werden beiεpielεweiεe hergestellt durch Verstrecken der Wirkεtoffe mit Lδεungεmitteln und/oder Trägerstof en _« gegebenenfalls unter Verwendung von Emulgiermitteln und/oder Dispergiermitteln _« wobei z.B. im Fall der Benutzung von Waεer alε Verdünnungε- ittel gegebenenfallε organiεche Lδεungεmittel alε Hilfslösungsmittel verwendet werden können.

Alε Hilfεεtoffe seien beispielsweise aufgeführt:

Wasser, nicht-toxische organische Löεungεmittel _« wie Paraffine (z.B. Erdδlfraktionen) , pflanzliche Öle (z.B. Erdnuß/Seεa δl ) , Alkohole (z.B: Ethylalkohol , Glycerin), Trägeretoffe, wie z.B. natürliche Geεteinεmehle (z.B. Kaoline, Tonerden, Talkum, Kreide), eynthetische Ge¬ steinsmehle (z.B. hochdisperse Kieselsäure _« Silikate) _« Zucker (z.B. Rohr- _« Milch- und Traubenzucker), Emulgier¬ mittel (z.B. Polyoxyethylen-Fettsäure-Eεter) , Polyoxy- ethylen-Fettalkohol-Ether (z.B. Lignin _« Sulfitablaugen _« Methylcellulose _« Stärke und Polyvinylpyrrolidon) und Gleitmittel (z.B. Magnesiumstearat, Talkum, Stearinsäure und Natriumsul at).

Die Applikation erfolgt in üblicher Weise, vorzugsweise oral oder parenteral, insbesondere perlingual oder in¬ travenös. Im Falle der oralen Anwendung können Tabletten selbstverständlich außer den genannten Trägerstoffen auch Zusätze, wie Natriumeitrat, Calciumcarbonat und Dicalciumphoεphat zusammen mit verschiedenen Zuschlag¬ stoffen _« wie Stärke« vorzugsweise Karto felstärke« Ge¬ latine und dergleichen enthalten. Weiterhin können

Gleitmittel, wie Magneεiumεtearat« Natriumlaurylεulfat und Talkum zum Tablettieren mitverwendet werden. Im

Falle wäßriger Suεpensionen können die Wirkstoffe außer den obengenannten Hilfεεtoffen mit verschiedenen Ge- εchmackεaufbeεεerern oder Farbεtoffen versetzt werden.

Für den Fall der parenteralen Anwendung können Lösungen der Wirkεtoffe unter Verwendung geeigneter flüεεiger Trägermaterialien eingeεetzt werden.

Im allgemeinen hat es eich alε vorteilhaft erwieeen« bei intravenöser Applikation Mengen von etwa 0,001 bis

1 mg/kg, vorzugsweise etwa 0,01 bis 0,5 mg/kg Körperge¬ wicht zur Erzielung wirksamer Ergebnisse zu verabrei¬ chen, und bei oraler Applikation beträgt die Dosierung etwa 0,01 biε 30 mg/kg, vorzugsweise 0,1 bis 10 mg/kg Körpergewicht,

Trotzdem kann es gegebenenfalls erforderlich sein, von den genannten Mengen abzuweichen, und zwar in Abhängig¬ keit vom Körpergewicht des Versuchstieres bzw. der Art der Applikation, aber auch aufgrund der Tierart und deren individuellem Verhalten gegenüber dem Medikament bzw. deren Art von dessen Formulierung und dem Zeitpunkt bzw. Intervall, zu welchem die Verabreichung erfolgt. So kann eε in einigen Fällen auεreichend sein, mit weniger als der vorgenannten Mindestmenge auszukommen, während in anderen Fällen die genannte obere Grenze überschritten werden muß. Im Falle der Applikation größerer Mengen kann es empfehlenswert εein, dieεe in

mehrere Einzelgaben über den Tag zu verteilen. Für die Applikation in der Humanmedizin iεt der gleiche Do- εierungεεpielraum vorgeεehen. Sinngemäß gelten hierbei auch die obigen Ausführungen,

Erklärungen zum experimentellen Teil:

DC-Svsteme:

Stationäre Phaεe

Merk DC-Fertigplatten Kieεelgel 60 F-254, 5 x 10 cm, Schichtdicke 0,25 mm, Art.-Nr. 5719.

Mobile Phaεen (im Teεt alε "DC-S εtem")

HPLC-Syεtem I : Säule Merck Lichroεorb' ⁸ ' RP-8, 250-4,

10 μm, Kat.-No. 50318

HPLC-Syεtem II Säule Merck Lichroeorb® RP-18, 250-4, 10 μm, Kat.-Np. 50334

Verzeichnis der benutzten Abkürzungen

1. allgemeine analytische Methoden

DC Dünnschichtchromatographie

GC Gaschromatographie HPLC Hochdruckflüεεigkeitεchromtographie

SC Säulenchromatographie

NMR Kernεpinreεonanzεpektroεkopie

(Protonen) MS Masεenεpektrometrie (Elektronenstoß- ionisation)

(+ )FAB-MS Fast-atomic-bombardement-Maεεenεpektro- metrie, positive Ionen, Matrixsubεtanz : m-Nitrobenzylalkohol MS-DCI Massenspektrometrie, chemische Ionisation

2. Aminosäuren

Im allgemeinen erfolgt die Bezeichnung der Konfiguration durch das Vorausstellen eines L bzw. D vor der Amino¬ säureabkürzung, im Fall des Racematε durch ein D,L- wobei zur Vereinfachung bei L-Aminoεäuren die Konfigura¬ ionsbezeichnung unterbleiben kann und dann nur im Fall der D-Form bzw. des D,L-Gemischeε explizierte Bezeich- nung erfolgt.

a) natürliche Aminoεäuren

Ala L-Alanin

Arg L-Arginin

Aεn L-Aεparagin

Aεp L-Aεparaginsäure Cyε L-Cyεtein

Gin L-Gluthamin

Glu L-Gluthaminεäure

Gly L-Glycin

His L-Hiεtidin He L-Iεoleucin

Leu L-Leucin

Lyε L-Lyεin

Met L-Methionin

Orn L-Ornithin Phe L-Phenylalanin

Ser L-Serin

Sar L-Sarcoεin (N-Methylglycin)

Thr L-Threonin

Trp L-Tryptophan Tyr L-Tyroεin

Val L-Valin

b) unnatürliche Aminoεäuren

D- oder L-Nal(l) D- oder L-( 1-Naphthyl)alanin

D- oder L-Nal(2) D- oder L-(2-Naphthyl )alanin

D- oder L-Phe(2N0 ₂ ) D- oder L-(2-Nitrophenyl)alanin

D- oder L-Phe(3N0 ₂ ) D- oder L-(3-Nitrophenyl)alanin

D- oder L-Phe(4N0 ₂ ) D- oder L-(4-Nitrophenyl )alanin

D- oder L-Phe(2NH ₂ ) D- oder L-(2-Aminophenyl )alanin D- oder L-Phe(3NH ₂ ) D- oder L- (3-Aminophenyl )alanin D- oder L-Phe(4NH ₂ ) D- oder L- (4-Aminophenyl )alanin D- oder L-Phe(3,4-Cl ) D- oder L-(3,4-Dichlorphenyl )ala* nin D- oder L-Phe(4i) 4i0D0 D- oder L-Phg D- oder L-Phenylglycin

D- oder L-Pyr(2) D- oder L-(2-Pyridyl )alanin D- oder L-Pyr(3) D- oder L-(3-Pyridyl )alanin D- oder L-Pyr(4) D- oder L-(4-Pyridyl )alanin D- oder L-Trz(l) D- oder L-( 1-Triazolyl )alanin D- oder L-Phe(0CH ₃ ) D- oder L- (4-Methoxyphenyl )ala- nin Phe(OMe)

3. Ak vierunqεαruDPen HOBT 1-Hydroxybenzotriazol

HOSU N-Hydroxyεuccinimid

4. Kupplunqsreaqenzien

DCC Dicyclohexylcarbodiimid DPPA Diphenylphoεphorylazid

PPA n-Propanphoεphonsäureanhydrid

BOP Benzotriazolyloxy-triε(dimethylamino)phos- phoniumhexafluorphosphat

5. Reaoentien

NEM N-Ethylmorpholin

NMM N-Methylmorpholin

TEA Triethylamin

TFA Trifluoreεεigεäure

6. Lösun smittel

DCU N,N" -Dicyclohexylharnεtof f

AusgangsVerbindungen

Beispiel I

N-tert,-Butoxycarbonyl-L-isoleucin-(2-picolyl )amid

Zu einer Lösung von 100 g (0,432 mol) N-tert . -Butoxy- carbonyl-L-Isoleucin und 46,72 g (0,432 mol) 2-Picolyl- amin in 1 1 Methylenchlorid gibt man bei 0° C 419,13 ml (3,024 mol) Triethylamin. Man läßt 10 Minuten rühren, kühlt auf -20° C (Trockeneiε/Aceton) und tropft bei dieεer Temperatur 365 ml (0,561 mol) einer 50*.igen Löεung von Propanphoεphonsäureanhydrid in Methylen¬ chlorid (Hoechst AG) hinzu. Der Ansatz wird 1 Stunde bei -20° C weitergerührt und über Nacht auf Raumtemperatur gebracht. Die Reaktionsmischung wird nacheinander 3 mal mit je 300 ml 5*.ige Natriumhydrogencarbonatlosung, 3 mal mit je 300 ml Pufferlösung pH 4 (Merck, Art. -Nr. 9435) und schließlich 2 mal mit je 300 ml gesättigter Koch¬ salzlösung ausgeschüttelt. Die organische Phase wird über Natriumsulfat getrocknet und im Vakuum eingeengt. Das Rohprodukt wird durch Verrühren mit Diethylether kristallisiert, abgesaugt und dann aus Diisopropylether/ n-Hexan umkristallisiert. Ausbeute: 85,9 g (61,8% der Theorie) DC-Syβtem II: R _f = 0,35 DC-Syεtem III : R _f = 0,49 DC-Syεtem IV: R _f = 0,57

Beispiel II

L-Isoleucin-(2-picolyl )amid-Dihydrochlorid

40 g (0,124 mol) der Verbindung auε Beispiel I werden mit 250 ml 4 N Salzsäure (Gaε) in Dioxan versetzt und unter Eiskühlung gerührt. Die Suspenεion wird durch Zugabe von 10 ml Methanol in Lösung gebracht. Nach Abreaktion (DC-Kontrolle) engt man am Rotationεver- dampfer ein. Nach mehrmaliger Koevaporation mit Di- ethylether wird daε Rohprodukt mit Diethylether ver¬ rührt, abgeεaugt und im Exεikkator über Kal umhydroxid getrocknet.

Ausbeute: 37,2 g (100% der Theorie) DC-Syste III: R _f = 0,30

Beiεpiel III

N-tert.-Butoxycarbonyl-4S-amino-3S-hydroxy-5-cyclohexyl' pentanoyl-L-iεoleucin-(2-picolyl )amid

13,2 g (41,8 mmol ) N-tert.-Butoxycarbonyl-4S-amino-3S- hydroxy-5-cyclohexyl-pentasäure CJ. Boger et al,, J. Med. Chem, 28, 1779 (1985)] und 13,5 g (46 m ol) der Verbindung auε Beiεpiel II werden mit 420 ml Methylen¬ chlorid verεetzt. Die Suspension wird durch Zugabe von 31 ml (230 mmol) Triethylamin in Lösung gebracht und auf -20° C gekühlt (Aceton/Trockeneiε) . Unter Rühren tropft man bei dieser Temperatur 39 ml einer 50%igen Lösung von Propanphosphonsaureanhydrid in Methylenchlorid hinzu und läßt den Ansatz über Nacht auf Raumtemperatur kommen. Das Methylenchlorid wird am Rotationsverdampfer abgezo¬ gen und der Rückstand in 400 ml Eεsigeεter aufgenommen. Die organische Phase wird nacheinander 1 mal mit 200 ml gesättigter Natriumhdyrogencarbonatlδεung, 2 mal mit je 200 ml Pufferlösung pH 7 (Merck, Art.-Nr. 9439) und 4 mal mit je 200 ml vollentsalztem Wasser gewaschen. Die Pufferlösungen werden mit je 100 ml Essigeεter zurück¬ extrahiert. Die vereinigten organiεchen Phaεen werden 2 mal mit je 500 ml gesättigter Kochsalzlösung gewa¬ schen, über Natriumsulfat getrocknet und am Rotations¬ verdampfer auf ein Volumen von etwa 125 ml eingeengt. Die Lösung wird mit 125 ml n Hexan versetzt und über Nacht in den Kühlschrank (5°C) gestellt. Das auskri- εtalliεierte Produkt wird abgeεaugt, mit wenig kaltem Essigester/n-Hexan 1:1 nachgewaschen und im Vakuum getrocknet.

Ausbeute: 17,2 g (79% der Theorie) MS-DCI; m/z 519 (M+H) DC-System III: R _f = 0,48 DC-System IV: R _f = 0,63 DC-System V : R _f = 0,48 HPLC-Syεtem II: R _t = 6,02 Min

Beispiel IV

4S-Amino-3S-hydroxy-5-cyclohexyl-pentanoyl-L-isoleucin- (2-picolyl)amid Dihydrochlorid

16 g (30,8 mmol) der Verbindung auε Beiεpiel III werden unter Eiεkühlung mit 160 ml 4N Salzsäure (Gaε) in Dioxan versetzt. Die Suεpenεion wird durch Zugabe von 5 ml Me¬ thanol in Löεung gebracht. Nach Abreaktion (DC-Kontrol- le) engt man am Rotationεverdampfer ein. Nach mehrma¬ liger Koevaporation mit Diethylether wird das Rohprodukt mit Diethylether verrührt, abgesaugt und im Exsikkator über Kaliumhydroxid getrocknet. Auεbeute : 16,56 g (95% der Theorie) MS-DCI: m/z 419 (M+H) DC-Syεtem III: R _f = 0,35

Beispiel V

N-tert.-Butoxycarbonyl-2-R,S-amino-2- 2-(l,3-dithio- lano) ]eεεigεäure

19,9 g (0,11 mol) 2-Amino-2-R,S-2- 2-(1 ,3-dithiolano) ]- essigs ure CM.P. Mertes, A.A. Ramεey, J. Med Chem. 12. 342 (1969)] werden in 100 ml Dioxan gelδεt und mit 6,6 g (0,16 mol) Natriumhydroxid und 29 g (0,13 mol) Di-tert.- Butylcarbonat versetzt, Man läßt über Nacht bei Raumtem¬ peratur rühren und zieht das Dioxan am Rotationsver- dampfer ab. Die Miεchung wird mit 200 ml Wasser aufge¬ füllt und mit Ether mehrmals extrahiert. Die basiεche wäßrige Phaεe wird mit Salzsäure auf pH 3 gestellt und mehrmale mit Methylenchlorid extrahiert. Die vereinigten organiεchen Phaεen werden mit gesättigter Kochsalzlösung gewaschen, über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Ausbeute: 18,1 g (60,6% der Theorie) MS-DCI: m/z 280 (M+H); m/z 297 (M+NH ) DC-Syεtem IV: R _f = 0,55

Herstellunαsbeispiele Allgemeine Formel (I)

Beiεpiel 1

N-tert.-Butoxycarbonyl-2-R,S-amino-2-C2-(1,3-dithio- lano) ]-acetyl-4S-amino-3S-hydroxy-5-cyclohexyl-pen- tanoyl-L-iεoleucin-(2-picolyl )amid

4,4 g (15,7 mmol) der Verbindung auε Beispiel V und 7,3 g (15 mmol) der Verbindung aue Beispiel IV werden mit 20 ml Methylenchlorid und 18,3 ml (105 mmol) Diiso- propylethylamin vesetzt. Die Lösung wird gerührt und auf -20° C gekühlt (Trockeneiβ/Aceton) . Man tropft bei dieser Temperatur 11,7 ml einer 50%igen Lösung von Propanphos- phors ureanhydrid in Methylenchlorid (Hoechst AG) hinzu und läßt den Ansatz über Nacht auf Raumtemperatur kommen. Das Methylenchlorid wird am Rotationβverdaunpfer abgezogen und der Rückstand in Esεigester aufgenommen. Die organische Phase wird je 3 mal mit gesättigter NβtriumhydrogencarbonatlÖBung, ^* Pufferlösung pH 4 (Merck, Artikel-Nr. 9435) und gesättigter Kochsalzlösung ausge¬ schüttelt, über Natriumsulfat getrocknet, eingeengt und am Hochvakuum getrocknet.

Ausbeute: 9 g (79 _« 8% der Theorie) (+) FAB-MS: m/z 680 (M+H); m/z 686 (M+Li) DC-System XII: R _f ^•*■ 0,59 DC-System IV : R _f ■ 0,67 HPLC-Systβm II: R _t = 6,16 min

Beispiel 2

2-R,S-Amino-2-[2-(l,3-dithiolano) ]-acetyl-4S-amino-3S- hydroxy-5-cyclohexyl-pentanoyl-L- soleucin-(2-picolyl)- amid Dihydrochlorid

9 g (13,24 mmol) der Verbindung aus Beispiel 1 werden unter Eiskühlung mit 150 ml 4N Salzsäure in Dioxan ver¬ setzt und 4 Stunden gerührt. Das Dioxan/Salzβäure-Ge- miβch wird am Rotationsverdampfer abdestilliert. Das nach mehrmaliger Koevaporation mit Diethylether erhal¬ tene Produkt wird abgesaug , mit Diethylether nachge¬ waschen und im Exsikkator über Kaliumhydroxid getrock¬ net.

Ausbeute: 8,6 g (100% der Theorie) (+) FAB-MS: m/z 580 (M+H); m/z 602 (M+Na). DC-System III: R _f * 0,38 (Isomer A)

Rf • ^** 0,33 (Isomer B) DC-System IV : R _f ■ 0,21

Beispiel 3

N-ter .-Butoxycarbonyl-2-R,S-amino-2-C2-(1,3-dithio- lano) ]-acetyl-4S-amino-3S-hydroxy-5-cyclohexylpentan- säuremethylester

Die Titelverbindung wird analog Beiεpiel 1 durch Propan- phosphonεäureanhydridkopplung aus 2,2 g (7,8 mmol) der Verbindung aus Beiεpiel V und 2,4 g (6,5 mmol) 4-S- Amino-3S-hydroxy-5-cyclohexylpentansäuremethyleεter Hydrochlorid [erhältlich durch Veresterung der 4S-λmino- 3S-hydroxy-5-cyclohexylpentanεäure (J. Boger et al . _« J. Med. Chem. 2 J, 1779 (1985) bzw. R.F. Schuda et al., J. Org. Chem 1988« .53.« 873-875) mit Diazomethan und Fällung als Hydrochlorid] und nachfolgender Kieεelgel- chromatographie erhalten.

Ausbeute: 3,6 g (88 % der Theorie) DC-Syεtem IV : R _f = 0,88 ) Isomere nicht HPLC-System II : _f = 7,06 min ) unterεcheidbar (+) FAB-MS : m/z 497 (M+Li); m/z 441 m/z 397

Be i sp ie l 4

2-R _« S-Amino-2-C2-( 1 _« 3-dithiolano) ]-acetyl-4S-amino-3S- hydroxy-5-cyclohexylpentansäurβmethyleεter Hydrochlorid

Die Titelverbindung wird analog Beispiel 2 durch Abspal¬ tung der Boc-Schutzgruppe aus 3,5 g (7,1 mmol) der Vei— bindung aus Beispiel 3 erhalten

Ausbeute: 3 _« 0 g (100% der Theorie) DC-System III: R _f -** 0,40 (Isomer A)

R _f = 0,34 (Isomer B) DC-System IV : R _f = 0,21 (+) FAB-MS: m/z 391 (M+H); m/z 397 (M+Li).

Beispiel 5

2-R-Amino-2-C2-(1 ,3-dithiol no) ]-acetyl-4S-amino-3S- hydroxy-5-cyc1ohexylpen ansäure-methylester

Die Titelverbindung wird durch chromatographiεche Tren- nung der Iεomerenmiεchung auε dem Beiεpiel 4 an Kiesel¬ gel 60 (Merck, Art.-Nr. 9385) 0,040 - 0,063 mm (230 - 400 mesh) mit einem Stufengradienten aus Methylen¬ chlorid/Methanol 25 %iger wäßriger Ammoniaklösung (100/0/0,2; 99/1/0,2; 98/2/0,2; 97/3/0,2; 95/5/0,2; 9/1/0,2) getrennt.

Die Detektion erfolgt bei 214 nm« die Fraktionskontrolle dünnschicht- und hochdruck lüεεigkeitεchromato- graphiεch.

Zuerst eluiert daε R-Iεomere (Beispiel 5), dann das S- Iεomere.

Analytische Daten:

DC-Systen III: R _f = 0,40

(+) FAB-MS: m/z = 391 (M+H); m/z 397 (M+Li) .

Beispiel 6

Methyl N-tert.-Butoxycarbonyl-2-R-Amino-2-C2-(1,3- dithiolano) ]-acetyl-4S-amino-3S-hydroxy-5- cyclohexylpentanoate

Die Titelverbindung wird analog Beispiel V durch Um- setzung der Verbindung aus dem Beispiel 5 mit Di-tert.- butylcarbonat mit Triethylamin als Hilfsbaεe und Dioxan alε Lösungsmittel erhalten. Die Reaktionεmiεchung wird mit Wasser und 1 N Salzsäure verdünnt und mit Methyl¬ chlorid extrahiert. Die organische Phase wird abge- trennt _« über Natriumsulfat getrocknet und eingeengt. Das Rohprodukt wird durch Flash-Chromatographie (Kiesel¬ gel/Dichlormethan) gereinigt.

Analytische Daten:

DC-System IV : R _f *= 0,88 HPLC-System II: R _f = 7,06 min (+) FAB-MSJ m/z 497 (M+Li).

Beispiel 7

N-tert.-Butoxycarbonyl-2-R-Amino-2- 2-(1 ,3-dithiolano) ]• acetyl-4S-amino-3S-hydroxy-5-cyclohexyl-pentansäure

Die Titelvβrbidnungen wird durch basische Verseifung analog Beispiel 16 aus 2,1 g (4,28 mmol) der Verbindung aus dem Beispiel 6 und Standardaufarbeitung erhalten.

Ausbeute: 195 g (95,6 % der Theorie)

DC-System IV: R _f = 0,57

(+) FAB-MS: m/z 477 (M+H), m/z 421, m/z 377.

Beispiel 8

2-R-Amino-2-C2-(l,3-dithiolano) ]-acetyl-4S-amino-3S- hydroxy-5-cyclohexyl-pentanoyl-L-isoleucin-(2- picolyl)amide

Die Titelverbindung wird analog Beiεpiel 5 auegehend vom R,S-Gemisch der Verbindung auε dem Beispiel 2 durch Chromatographie erhalten. Zuerst eluiert das R-(Bei¬ εpiel 8) dann das S-Iεomere.

Analvtiεche Daten:

DC-Syεtem III : R _f = 0,38

(+) FAB-MS: m/z 580 (M+h) , m/z 602 (M+Na)

Beispiel 9

N-tert.-Butoxycarbonyl-L-(4-Methoxy)-phenylalanyl-{2- R,S-amino-2-C2-(l,3-dithiolano)]-acetyl-4S-amino-3S- hydroxy-5-cyclohexyl-pentanoyl-L-isoleucin-(2- picolyl )amid

0

0,6 g (0,95 mmol) der Verbindung auε Beiεpiel 2 und 364 mg (1,2 mmol) N-tert.-Butoxycarbonyl-L-(4-Methoxy)- phenylalanin (Bieεendorf Biochemicalε) werden mit 20 ml 5 Methylenchlorid und 1,2 ml (6,6 mmol) Diiεopropylethyl- amin veεetzt. Die Lδεung wird gerührt und auf -20° C gekühlt (Trockeneis/Aceton) , Man tropft bei dieser Temperatur 860 ml (1,3 mmol) einer 50%igen Lösung von Phosphonsäureanhydrid in Methylenchlorid (Hoechst AG) _Q hinzu und läßt den Anεatz über Nacht auf Raumtemperatur kommen. Man gitb 20 ml Methylenchlroid hinzu und εchüttelt 3 mal mit geεättigter Natriumhydrogencarbonat¬ losung, 3 mal mit Pufferlδεung pH 7 (Merck, Artikel-Nr. 9439) und einmal mit halbgeeättigter Kochsalzlösung aus. ₅ Die organische Phase wird über Natriumsulfat getrocknet, eingeengt und am Hochvakuum getrocknet.

Rohausbeute: 60 mg

DC-Syεtem I R _f = 0,59 (Isomer A) 0

Rf = 0,56 (Isomer B)

HPLC-Syεtem II: R _t = 11,77 min (Isomer A)

R _t = 10,49 min (Isomer B)

(+) FAB-MS: m/z 857 (M+H); m/z = 879 (M+Na). 5

Beispiel 10 und Beispiel 11

N-tert«-Butoxycarbonyl-L-(4-Methoxy)phenylalanyl-{2- S-amino-2-[2-(1,3-dithiolano)]-acetyl-4S-amino-3S- hydroxy-5-cyclohexylpentanoyl-L-ieoleucin-(2-picolyl) ^■ a id (Beispiel 10)

N-ter .-Butoxycarbonyl-L-(4-Methoxy)phenylalanyl-{2- R-amino-2- 2-(1,3-di hiolano)]-acetyl-4S-amino-3S- hydroxy-5-cyclohexylpentanoyl-L-isoleucin-(2-picolyl)* amid (Beispiel 11)

*S = Beispiel 10 (Isomer λ) *R = Beispiel 11 (isomer B)

Die Titelverbindung wird durch chromatographiβche Tren¬ nung des Gemisches aus dem Beispiel 9 (600 mg) an Kieselgel 60 (Merck, Art.-Nr. 9385) 0,040 - 0,063 mm (230 -400 mesh) mit einem Stufengradienten auε Methylen¬ chlorid/Methanol (100/0; 99/1; 98/2; 97/3; 95/5; 9/1) getrennt. Die Detektion erfolgt bei 214 nm, die Frak¬ tionskontrolle dunnschicht- und hochdruckflüssigkeitε- chromatographiεch. Zuerst eluiert das Beispiel 10 (Isomer A, S-Iβomer), dann das Beispiel 11 (Isomer B, R-Isomer).

Nach Vereinigung und Abrotieren der Lδεemittel erhält man:

150 mg der Verbindung aus Beispiel 10 (Isomer = S)

10 mg der Verbindung aus Beispiel 10 und Beiεpiel 11 (Miεchfraktion auε A und B)

160 mg der Verbindung aus Beispiel 11 (Isomer B = R)

Analytische Daten zu Beiεpiel 10 Isomer A

DC-Syεtem I : R = 0,59

HPLC-Syεtem II: R _f = 11,77 min

(+) FAB-MS: m/z 857 (M+H); m/z + 879 (M+Na)

Analvtiεche Daten zu Beispiel 11 Isomer B

DC-System I : R _f = 0,56

HPLC-Syste II: R _f = 10,49 min

(+) FAB-MS: m/z 857 (M+H); m/z 879 (M+Na)

Beispiel 12

L-(4-Methoxy)phenylalanyl-{2-R,S-amino-2-C2-( 1,3- dithiolano) ] }acetyl-4S-amino-3S-hydroxy-5-cyclohexyl• pentanoyl-L-isoleuc n-(2-picolyl )amide

HC

Die Titelverbindung wird analog Beispiel 2 durch Ab- εpaltung der Boc-Schutzgruppe aus einer Mischung der Verbindungen der Beiεpiele 10 und 11 erhalten.

Analytische Daten:

DC-Syεtem III: R _f = 0,42;

R = 0,38

Beispiel 13

L-(4-Methoxy)phenylalanyl-{2-R-amino-2-C2-(l ,3- dithiolano) ] acetyl-4S-amino-3S-hydroxy-5-cyclohexyl- pentanoyl-L-iεoleucin-(2-picolyl )amide

Die Titelverbindung wird analog Beiεpiel 2 durch Ab¬ εpaltung der Boc-Schutzgruppe auε der Verbindung deε Beispieles 11 erhalten.

Analytische Daten:

(+) FAB-MS: m/z 757 (M+H)

Beispiel 14 und Beispiel 15

N-tert , -Butoxycarbonyl-L- (4-Methoxy)phenylalanyl- {2- S-amino-2-C2-(l ,3-dithiolano) ]}-acetyl-4S-amino-3S- hydroxy-5-cyclohexylpentanεäuremethyleεter (Beispiel 14)

N-tert.-Butoxycarbonyl-L-(4-Methoxy)phenylalanyl-{2- R-amino-2- 2-(l ,3-di hiolano) ]-acetyl-4S-amino-3S- hydroxy-5-cyclohexylpent nεäuremethylester (Beispiel 15)

*S = Beispiel 14 (Isomer A) *R = Beispiel 15 (isomer B)

Die Titelverbindungen werden analog Beiεpiel 10 und Bei spiel 11 auεgehend von 1,9 g (6,3 mmol) N-tert.-Butoxy¬ carbonyl-L-(4-methoxy)phenylalanin (Bissendorf, Bio- chemicalε) und 2,4 g (5,7 mmol) der Verbindung auε Bei¬ εpiel 4 erhalten.

Analvtiεche Daten Isomer A (Beispiel 14)

DC-Syεtem II : R _f = 0,58 HPLC-Syεtem II: R _f = 12,33 min (+) FAB-MS: m/z 668 (M+H)

Analvtiεche Daten Isomer B (Beispiel 15)

DC-Syεtem II : f = 0,56 HPLC-Syεtem II: Rf ^** • 11,25 min (+) FAB-MS: m/z 668 (M+H)

Beispiel 16

N-tert.-Butoxycarbonyl-L-(4-Methoxy)phenylalanyl-{2- R,S-amino-2- 2-(1,3-dithiolano) ] }-acetyl-4S-amino-3S- hydroxy-5-cyclohexylpentanεäure (Beiεpiel 16)

790 mg (1,18 mmol) eineε Gemiεcheε der Verbindungen auε Beiεpiel 14 und Beispiel 15 werden in 5 ml Dioxan/Wasεer 1/1 suspendiert, mit 283 μl (1,5 eq) 6N NaOH versetzt und über Nacht bei Raumtemperatur gerührt. Der Anεatz wird

mit IN HCl auf pH 3 geεtellt und vom Dioxan abrotiert Der Niederεchlag wird abgeεaugt, mit Wasser nachge¬ waschen und über KOH in Exεiccator getrocknet.

Ausbeute: 560 mg (84 % der Theorie)

DC-Syεtem I R _f = 0,18 DC-Syεtem II R _f = 0,05 DC-Syεtem III R _f = 0,82

(+) FAB-MS: m/z = 660 (M+Li)

Beiεpiel 17 und Beiεpiel 18

N-tert .-Butoxycarbonyl-L-(4-Methoxy)phenylalanyl- { 2- S-amino-2-[2-( 1 ,3-dithiolano) ] }-acetyl-4S-amino-3S- hydroxy-5-cyclohexylpentanoyl-N-(2-morphol noethyl )amid (Beiεpiel 17)

N-tert.-Butoxycarbonyl-L- (4-Methoxy)phenylalanyl-{2- R-amino-2-C2-(l ,3-dithiolano) ]}-acety1-4S-amino-3S- hydroxy-5-cyclohexylpentanoyl-N-(2-morpholinoethyl )amid (Beiεpiel 18)

Boc

*S = Beiεpiel 17 (Isomer λ) *R = Beispiel 18 (isomer B)

Die Titelverbindungen werden analog Beispiel I durch PPA-Kopplung der Verbindung aus dem Beispiel 16 und λminoethylmorpholin alε Aminkomponente hergestellt. Daε Rohprodukt wird säulenchromatographiεch getrennt, wobei eine Miεchfraktion auε den Beispielen 17 und 18 auftritt (analog Beiεpiel 10 und Beispiel 11), zuerst eluiert Isomer A (Beispiel 17), dann Isomer B (Beispiel 18).

Analytische Daten Isomer A (Beispiel 17)

DC-System I : R = 0,47 HPLC-System II: R _f = 10,36 min

(+) FAB-MS: m/z 766 (M+H)

Analytische Daten Isomer B (Beispiel 18)

DC-System I : R _f ^*** 0,44 HPLC-System II: * ^** 9,96 min (+) FAB-MS: m/z 766 (M+H)

Beispiel 19

N-tert.-Butoxycarbonyl-2-R-amino-2-C2-(1,3-di hiolano) ]• acetyl-4S-amino-3S-hydroxy-5-cyclohexylpentanoyl-2S- methyl)butylamid

Zu einer Löεung von 650 mg (1 _» 36 mmol) der Verbindung aus dem Beiεpiel 7 in 30 ml Dichlormethan gibt man unter Rühren 483 μl (3 eq; 4,1 mmol) 2-S-Methyl-butylamin, 1,2 ml (5 eq; 6,8 mmol) Di-iεopropylethyl-amin und - nach Abkühlen auf -10°C - 1,2 ml (1,3 eq) einer 50 %igen Lösung von Propanphosphonsäure-anhydrid in Methylenchlorid (Hoechεt AG, Aldrich). Der Anεatz wird über Nacht auf Raumtemperatur kommen lassen, mit 20 ml Dichlormethan aufgefüllt und je 3 x mit ges. Natriumbi- carbonatlöεung, 5 % Kaiiumhydrogenεulfat und geε. Koch¬ salzlösung ausgeschüttelt. Die organische Phase wird über Natriumsulfat getrocknet, eingeengt und durch

Säulenchromatographie an Kieselgel (analog Beispiel 10 und Beiεpiel 11) gereinigt.

Ausbeute: 460 mg (62 % der Theorie)

DC-Syεtem I : R _f = 0,52 HPLC-Syεtem II: R _f = 13,38 min

(+) FAB-MS: m/z 546 (M+H)

Beispiel 20

2-R-Amino-2-C2-( 1 ,3-dithiolano) ]-acetyl-4S-amino-3S* hydroxy-5-cyclohexylpentanoyl-(2S-methyl )-butylamid Hydrochlorid

Die Titelverbindung wird analog Beispiel 2 durch Ab- Spaltung der Boc-Schutzgruppe aus 4,20 mg (0,77 mmol) der Verbindung auε Beiεpiel 19 erhalten.

Ausbeute: 350 mg (94 % der Theorie)

DC-Syεtem III : R _f = 0,41

(♦) FAB-MS: m/z 446 (M+H).

Beispiel 21

N-(3-Phenyl )propionyl-{2-R-Amino-2- 2- (1,3-dithiolano)] ^■ acetyl-4S-amino-3S-hydroxy-5-cyclohexylpentanoyl-(2S- methy1 )-buty1amid

100 mg (207 μmol) der Verbindung aus dem Beiεpiel 20 werden in 10 ml Dichlormethan gelδεt und nacheinander unter Rühren mit 303 μl (1,74 mmol) Diiεopropylethyl- amin und εchließlich 27,4 μl (249 μmol) 3-Phenylpropion- εäurechlorid versetzt. Der Anεatz wird über Nacht bei Raumtemperatur gerührt, mit Ether aufgefüllt und abge¬ εaugt. Der Rücketand wird analog Beiεpiel 10 und 11 chromatographiert.

Ausbeute: 63 mg (53 % der Theorie)

DC-System III : R _f *- 0,69 HPLC-System II: R _f = 11,19 min

(+) FAB-MS: m/z 578 (M+H).

Tabelle 1

Beispiele 22 - 43

Die in Tabelle 1 aufgeführten Verbindungen werden durch Propanphosphonsäureanhydridkopplung der entsprechenden Säuren mit der Verbindung aus dem Beispiel 8 erhalten (analog Beispiel 1). Alle Verbindungen werden nach Standardaufarbeitung chromatographisch gereinigt (analog Beispiel 10 und 11). Die angesetzten Säuren bzw. -deri- vate sind entweder kommerziell erhältlich oder werden nach bekannten Methoden dargestellt.

Tabelle 1

Tabelle 1

Tabelle 1 Fortsetzung

Tabelle 1 - Fortsetzung

Tabe l l e 2

Beispiele 44 - 46

Die in Tabelle 2 aufgeführten Beispiele werden nach be¬ kannten Methoden durch Umsetzung der Verbindung aus dem Beiεpiel 8 mit den käuflichen Iso- bzw. Isothiocyanaten (Aldrich) in Dichlormethan mit Diisopropylethylamin als Hilfsbaεe, Standardaufarbeitung und Chromatographie er¬ halten (Analog Beiεpiel 10 und 11).

Tabelle 3

Beispiele 47 - 69

Die in Tabelle 3 aufgeführten Verbindungen werden durch Propanphosphonsäureanhyridkopplung der entsprechenden Säuren X-OH mit der Verbindung aus dem Beiεpiel 8 erhal¬ ten (analog Beiεpiel 9). Alle Verbindungen werden nach Standardaufarbeitung chromatographiεch gereinigt (analog Beiεpiel 10 und 11). Die angesetzten Säuren X-OH sind bekannt oder werden nach bekannten Methoden auε den ent¬ εprechenden Estern X-OR (R = Me, Et, Bzl) durch basische Verεeifung hergestellt (siehe Herεtellungsbeispiele) ♦

Im speziellen werden die Säuren X-OH der Beispiele 47 und 48 analog EP 0 399 556 A dargestellt. Die Ester für die Säuren X-OH der Beiεpiele 49 biε 59 werden durch Umsetzen deε Iεocyanateε mit den entεprechenden Aminen und/oder Alkoholen nach bekannten Methoden dargestellt. Die Säure deε Beiεpieleε 60 wird analog Harada et al., J. Org. Chem. 1990, 55 _« 1679-82 hergeεtellt. Die Säuren X-OH der Beiεpiele 61 biε 63 sind auε den entsprechenden tx-Bromestern bzw. analog M. Kanamato et al . , Chemiεtry Expreεε, Vo. 2, No. 1« pp 17-20 (1987) erhältlich. Die Säuren der Beispiele 64 bis 67 sind auε den entεprechen¬ den Acetamidomalonesteraddukten durch partielle Ver¬ seifung« Umsetzung des Produktes mit den jeweiligen Aminen und erneute Verseifung der Amide nach bekannten Methoden erhältlich. Die Säure des Beispiels 69 wird analog EP 412 350 A hergestellt.

Tabelle 3

Tabelle 3

Tabelle 3

Tabelle 3

Beispiele 70 - 73

Die in Tabelle 4 aufgeführten Verbindungen werden durch Propanphosphonεäureanhydridkopplung der entεprechenden Säuren mit der Verbindung aus dem Beispiel 12 erhalten (analog Beispiel 9). Alle Verbindungen werden nach Stan¬ dardaufarbeitung chromatographisch gereinigt (analog Beispiel 10 und 11). Die angeeetzten Säuren bzw. -deri- vate εind entweder kommerziell erhältlich oder werden nach bekannten Methoden dargestellt.

Beispiele 74 - 76

Die in Tabelle 5 aufgeführten Verbindungen werden durch Propanphosphonsäureanhydridkopplung der entεprechenden Säuren mit der Verbindung auε dem Beiεpiel 13 erhalten (analog Beiεpiel 9). Alle Verbindungen werden nach Stan¬ dardaufarbeitung chromatographiεch gereinigt.

Die angeεetzten Säuren bzw. -derivate eind entweder kom¬ merziell erhältlich oder werden nach bekannten Methoden dargestellt.

Die Verbindung aus dem Beispiel 75 wird aus der Verbin¬ dung des Beispieles 74 durch basiεche Verεeifung er¬ halten (analog Beiεpiel 16).

Tabelle 5

m/z 857 (M+H)

76 II IV: 0,56 3,27 min m/z 799 (M+H)

5 Beispiele 77 - 88

Die in Tabelle 6 aufgeführten Verbindungen werden durch Propanphoεphonεäureanhydridkopplung der entεprechenden Säuren mit der Verbindung auε dem Beispiel 8 erhalten 10 (analog Beispiel 9). Alle Verbindungen werden nach Stan¬ dardaufarbeitung chromatographisch gereinigt.

Die angesetzten Säuren bzw. -derivate sind entweder kom¬ merziell erhältlich oder werden nach bekannten Methoden lg dargestellt.

Die Verbindung aus dem Beiεpiel 80 wird auε dem Bei¬ εpiel 78 durch Abεpaltung der Boc-Schutzgruppe erhalten (analog Beiepiel 2).

20

Die Verbindung auε dem Beiεpiel 81 wird auε dem Bei¬ εpiel 80 durch Umsetzen mit Phenylesεigsäure/Propanphos- phonsäureanhydrid erhalten (analog Beispiel 9)

__. Die Verbindung aus dem Beispiel 86 wird aus dem Bei¬ spiel 82 analog Beispiel 80 erhalten.

Die Verbindung aus dem Beispiel 88 wird durch Umsetzung dee Beiεpielε 8 mit p-Tolyl-εulfonylchlorid/Triethylamin in Dichlormethan und Standardaufarbeitung erhalten. 30 ^s

35

Tabelle 6

Tabelle 6

Beiεpiele 89 bis 93

Die in Tabelle 7 aufgeführten Verbindungen werden aus der Verbindung des Beiεpielε 16 durch Propanphoεphon- εäureanhydridkopplung mit den entεprechenden Aminen, nach Standardaufarbeitung und nachfolgender Chromato¬ graphie erhalten (analog Beiεpiel 17 und 18).

Tabelle 7

Beispiel 94

Das in Tabelle 8 aufgeführte Beiεpiel wird analog Bei¬ εpiel 9 durch Propanphosphonεäureanhydridkopplung der Verbindung auε dem Beiεpiel 5 mit Phenylpropionεäure- Chlorid (analog Beiεpiel 21) Standardaufarbeitung und Chromatographie erhalten.

Tabelle 8