твердая оральная форма лекарственного препарата

и способ получения твердой оральной формы

лекарственного препарата

область техники

изобретение относится к области медицины и может быть использовано для технологически простого получения твердой оральной формы лекарственного препарата на основе антител для эффективного лечения патологического синдрома без выраженных побочных эффектов.

предшествующий уровень техники

из уровня техники известны лекарственные препараты (сыворотки, иммуноглобулины) на основе антител, используемых в терапевтических дозах (например, см. регистр лекарственных средств россии, энциклопедия лекарств, 7-е изд., 2000, стр.358-359). однако данные лекарственные препараты приготовляют в жидкой лекарственной форме для инъекций и вводят в организм парентерально, поскольку только при таком способе введения обеспечивается биодоступность указанных лекарственных препаратов.

кроме того, область применения данных препаратов ограничена этиологическим лечением преимущественно инфекционных заболеваний; их использование может быть сопряжено с нежелательными побочными эффектами.

известен также способ получения твердой оральной формы лекарственного препарата, включающий прессование сухих измельченных компонентов, содержащих действующее вещество и фармацевтически приемлемые добавки (RU 2203054 C2, A61K9/20, 2003).

раскрытие изобретения

изобретение направлено на создание твердой формы лекарственного препарата на основе антител, пригодной для орального вве-

дения, и технологически простого способа получения лекарственного препарата на основе антител в активированной форме, приготовленной по гомеопатической технологии, в виде таблеток.

решение поставленной задачи обеспечивается тем, что твердая оральная форма лекарственного препарата на основе антител включает эффективное количество носителя, орошенного водно- спиртовым разведением антител в активированной форме, приготовленной путем сочетания многократного последовательного разведения антител и внешнего воздействия, и фармацевтически приемлемые добавки.

при этом водно-спиртовое разведение содержит в активированной форме антитела к эндогенному веществу, участвующему в регуляции или воздействующему на механизмы формирования патологического синдрома, причем активированная форма приготовлена путем многократного последовательного разведения и внешнего воздействия по гомеопатической технологии.

возможно в качестве внешнего воздействия использовать механическое встряхивание или обработку разведений ультразвуком или электромагнитным полем.

кроме того, в качестве носителя препарат содержит нейтральное вещество - лактозу, а в качестве фармацевтически приемлемых добавок содержит связующее вещество и скользящее вещество.

причем в качестве фармацевтически приемлемых добавок дополнительно твердая оральная форма содержит нейтральный наполнитель - лактозу в количестве 30 í 80 масс. % от массы твердой оральной формы - таблетки, при этом в качестве связующего вещества содержит микрокристаллическую целлюлозу в количестве 10,0 í 15,0 масс. % от массы твердой оральной формы - таблетки, а в качестве скользящего вещества - стеарат магния в количестве 0,8 í 1,2 масс. % от массы твердой оральной формы - таблетки.

при этом активированная форма антител является смесью различных десятичных и/или сотенных водно- спиртовых гомеопатических разведений.

решение поставленной задачи обеспечивается также тем, что способ получения твердой оральной формы лекарственного препарата на основе антител включает приготовление водно- спиртового разведения антител в активированной форме, получаемой путем сочетания многократного последовательного разведения и внешнего воздействия по гомеопатической технологии, орошение полученным водно- спиртовым разведением нейтрального носителя в псевдоожиженном - кипящем слое с одновременной сушкой при температуре не выше 35 ⁰ C, смешивание в фармацевтически приемлемой последовательности с фармацевтически приемлемыми добавками, и последующее таблети- рование - формирование таблеток прямым сухим прессованием.

при этом в качестве носителя используют нейтральное вещество - лактозу с размером частиц от 150 до 250 мкм.

введение в твердую лекарственную форму антител в активированной форме, полученной по заявленной технологии, обеспечивает возможность перорального применения препарата на основе антител с сохранением биологической активности.

при этом использование в качестве активированной формы антител смеси различных сотенных спиртовых гомеопатических разведений повышает терапевтическую эффективность заявленного лекарственного препарата при наличии индивидуальной толерантности (не- чувствиетльности) организма к определенному разведению.

кроме того, качественный, количественный, гранулометрический и структурный состав заявленных ингредиентов (компонентов) обеспечивает возможность надежного формирования таблеток пря-

мым сухим прессованием с использованием ограниченного количества добавок.

варианты осуществления изобретения

для приготовления фармацевтической субстанции используют поликлональные антитела, моноклональные антитела и естественные антитела к веществу, участвующему в регуляции или воздействующему на механизмы формирования патологического синдрома.

методики получения антител описаны, например, в книге: иммунологические методы, под ред. г.фримеля, M., «Meдицинa», 1987, c.9-33.

поликлональные антитела, специфически связывающиеся с соединениями различных классов - белками, полинуклеотидами, олиго- сахаридами, гликолипидами и т.д., а также взаимодействующие с низкомолекулярными веществами (гаптенами) получают активной иммунизацией животных. для этого по специально разработанной схеме животным делают серию инъекций антигеном, который представляет собой либо индивидуально выделенную высокомолекулярную субстанцию, либо является синтетическим конъюгатом - в случае использования гаптенов. в результате проведения такой процедуры получают моноспецифическую антисыворотку с высоким содержанием антител, которую и используют в дальнейшей работе. при необходимости проводят очистку антител, присутствующих в антисыворотке. для этого применяют фракционирование солевым осаждением или ионообменную хроматографию.

моноклональные антитела различной специфичности, взаимодействующие как с низкомолекулярными гаптенами, так и с эпитопа- ми высокомолекулярных веществ, получают с помощью гибридомной технологии. причем начальная стадия процесса включает иммунизацию, основанную на принципах, уже разработанных при приготовле-

нии поликлональных антисывороток. дальнейшие этапы работы предусматривают получение гибридных клеток, продуцирующих клоны одинаковых по специфичности антител. их выделение в индивидуальном виде проводится теми же методами, что и в случае поликлональных антисывороток.

естественные антитела к экзогенным антигенам и биорегуляторам различной природы выделяют из сыворотки крови человека методом аффинной хроматографии. для этой цели в качестве иммуносор- бента используют носитель с ковалентно связанным антигеном, являющимся либо гаптеном, либо макромолекулярным соединением. в результате проведения хроматографии получают популяцию антител с узким распределением по специфичности и аффинности.

выделенные антитела к веществу или лекарственному препарату последовательно многократно разводят в сочетании с внешним воздействием, преимущественно вертикальным встряхиванием, до получения активированной формы, например, по гомеопатической технологии потенцирования (см., например, в. швабе, гомеопатические лекарственные средства. руководство по описанию и изготовлению, M., 1967, с. 12 - 38; или г.келлер, гомеопатия, M. «Meдицинa» 2000, ч. 1, с. 37 - 40). при этом равномерное уменьшение концентрации производят путем последовательного разведения 1 объемной части исходной субстанции (антител) в 9 объемных частях (для десятичного разведения D) или в 99 объемных частях (для сотенного разведения с) или в 999 объемных частях (для тысячного разведения) нейтрального растворителя - дистиллированной воды и/или 70% этилового спирта с многократным вертикальным встряхиванием каждого полученного разведения и использованием, преимущественно, отдельных емкостей для каждого последующего разведения до получения требуемого разведения.

внешнюю обработку в процессе уменьшения концентрации также можно осуществлять ультразвуком или электромагнитным воздействием, а также иным механическим воздействием.

на следующем этапе, для получения фармацевтической субстанции - действующего вещества в виде «нacыщeннoй» лактозы, в установке кипящего слоя, например, типа «Huttlin Pilotlab» производства компании нuttliп Gmbн, производят орошение вводимых в псевдо- ожиженный слой гранул нейтрального вещества - лактозы (молочного сахара) с размером частиц 150 í 250 мкм приготовленным водно- спиртовым разведением (предпочтительно, сотенным) активированной формы антител с одновременной сушкой при температуре не выше 35°C.

расчетное количество приготовленной фармацевтической субстанцию - действующего вещества в виде «нacыщeннoй» лактозы загружают в смеситель и смешивают с микрокристаллической целлюлозой, вводимой в количестве 10,0 í 15,0 масс. % от общей массы загрузки. затем в смесь добавляют «нeнacыщeннyю» лактозу (при необходимости для снижения стоимости и некоторого упрощения и ускорения технологического процесса без снижения эффективности лечебного воздействия за счет уменьшения содержания в таблетке фармацевтической субстанции: водно- спиртового разведения активированной формы антител) в количестве 30 í 80 мacc.% от общей массы загрузки и стеарат магния в количестве 0,8 í 1,2 масс. % от общей массы загрузки, и равномерно перемешивают.

полученную сухую гомогенную смесь направляют в таблети- рующую машину, например, таблет - пресс коrsсh — XL 400, для формирования круглых таблеток прямым сухим прессованием массой 150 í 500 мг.

ниже приведен пример получения лекарственного препарата в виде активированной формы поликлональных антител (антисыворотки) к морфину, процесс которого протекает в несколько этапов.

этап получение конъюгата морфин-овальбулин.

раствор 50 мг (0,001 ммоль) овальбулина в 5,0 мл дистиллированной воды смешивают с 2,0 мл диметилформамида, содержащего 15,0 мг (0,039 ммоль) 6-гeмиcyкцинaтa морфина, и при охлаждении по каплям прибавляют раствор 15 мг (0,055 ммоль) водорастворимого карбодиамида в 3 мл дистиллированной воды. реакционную смесь ин- кубировают в течение 5 часов при 4 ⁰ C. полученный конъюгат выделяют гель-хроматографией на колонке с сефадексом G25 и лиофиль- но сушили.

количество присоединенного морфина рассчитывают по данным уф - спектров исходного белка и полученного конъюгата по изменению поглощения при 280 нм. по данным уф - спектров, в синтезированном конъюгате содержится 12 í 15 молей гаптена на моль белка. этап получение моноспецифической сыворотки к конъюгату мор- фин-овальбумин.

иммунизацию кроликов породы «Beнcкий гoлyбoй» весом не более 2 кг осуществляют циклически с 10 - дневным интервалом. максимальное количество инъекций равно четырем. конъюгат вводят в передние и задние конечности в область суставных лимфоузлов в количестве 1 мг на одну иммунизацию. для этого антиген предварительно растворяют в 1 мл полного адъюванта фрейнда. объем смеси для иммунизации составляет 2 мл.

последующие иммунизации проводят с использованием неполного адъюванта фрейнда, соблюдая указанные выше пропорции анти-

гена и адъюванта. пробное взятие крови осуществляют из краевой ушной вены животного через 10 дней после иммунизации.

сыворотку крови кроликов получают центрифугированием при 100Og в течение 10 минут при комнатной температуре, после чего добавляют в качестве консерванта хлороформ до конечной концентрации 13%.

полученную антисыворотку проверяют методом иммунофер- ментного анализа на наличие специфических антител к морфину, выявление которых проводят с помощью конъюгата антивидовых антител, меченых ферментом.

полученная таким образом антисыворотка содержит специфические антитела в разведении 1 :1000 í 1 :25000.

далее из полученной антисыворотки выделяют γ-глобулиновую фракцию. для этой цели используют осаждение белка 50% сульфатом аммония с последующей промывкой осадка 30% солевым раствором, центрифугированием и диализом против фосфатного буфера. приготовленную таким образом фракцию, содержащую специфические антитела к данному антигену, на следующем этапе используют для приготовления лекарственного препарата.

этап получение активированной формы антител к морфину.

0,5 мл фракции γ-глобулинов антисыворотки помещают в емкость E-6 _lз прибавляют 4,5 мл дистиллированной воды, встряхивают 10 раз, получают 5 мл 1-го сотенного разведения. затем 0,05 мл 1-го сотенного разведения помещают в емкость E-6 ₂ , прибавляют 4,95 мл дистиллированной воды, встряхивают 10 раз, получают 5,0 мл 2-го сотенного разведения. аналогично 2-му сотенному разведению готовят с 3-го по 29-е сотенное разведения.

конечное 30-е сотенное разведение получают разведением 29-го в 70% этиловом спирте.

полученный водно- спиртовой раствор используют для орошение в псевдоожиженном слое частиц нейтрального носителя - лактозы (молочного сахара) при получении фармацевтической субстанции - действующего вещества в виде «нacыщeннoй» лактозы, которая является основой для формирования прямым сухим прессованием твердой оральной формы (круглых таблеток, преимущественно, массой 240 и 300 мг) заявленного лекарственного препарата.

ниже приведены примеры лечения различных патологических синдромов твердой оральной формой лекарственного препарата на основе активированной формой антител, которые условно (по аналогии с терминологией, используемой в гомеопатической литературе) названы потенцированными антителами.

пример 1.

больной в., 19 лет. в течение 2 месяцев не менее трех раз в неделю вводит ингаляционным путем героин. по согласованию с родителями на 24 дня госпитализирован в закрытое отделение. через 2 дня после поступления стал раздражителен, нарушился сон. при беседе отмечает, что появилось влечение к наркотику. назначено: по 1 таблетке, «нacыщeннoй» потенцированными антителами - гомеопатиче¬

ским разведением сзо γ-глобулиновой фракции антисыворотки к морфина гидрохлориду - 6 раз в день. через 3 недели отмечается ровное настроение, удовлетворительные аппетит и сон. при индивидуальных занятиях с психологом уверяет, что влечения не испытывает. рекомендовано продолжать принимать антитела к героину ежедневно

по 1 таблетке. через 2 месяца после выписки из отделения, со слов матери, наркотики не принимает. пример 2.

больной к., 57 лет, в течение 5 лет страдающий ревматоидным артритом (PA), класс III по функциональной классификации американской коллегии ревматологов, был госпитализирован по поводу обострения заболевания. при поступлении: жалобы на лихорадку, значительное усиление утренней скованности и болей в пораженных суставах, их опухание. объективно: температура 37.5°C, выраженная гиперемия и дефигурация лучезапястных, голеностопных, проксимальных межфаланговых суставов суставов, боль при пальпации. в анализе крови: соэ 35 мм/ч, ревматоидный фактор ++. в связи с плохой переносимостью нестероидных противовоспалительных средств назначено: по 1 таблетке, «нacыщeннoй» потенцированными антителами - смесью гомеопатических разведений C50, C200 (1 :1) монокло- нальных антител к рекомбинантному человеческому фактору некроза опухоли альфа - 3 раза в день. через 3 суток после начала лечения больной отметил значительное уменьшение болевого синдрома, температура тела снизилась до нормотермии. к 7 суткам лечения: сохраняется утренняя скованность, отмечавшаяся до госпитализации. больной выписан на 14 сутки с клинико-лабораторной ремиссией. рекомендован профилактический прием препарата по 1 таблетке через день. через 2 месяца после выписки больному изменен класс III на класс II по функциональной классификации PA.

пример 3.

пациент с, 51 года, обратился к урологу с жалобами на снижение либидо, нарушение эрекции, снижение удовлетворения от полового акта. указанные симптомы нарастали в течение последних 2 лет. в

последние 3 года также отмечает периодическую подавленность, плаксивость, нарушения памяти и сна, снижение работоспособности, приступы сердцебиения, колебания артериального давления. объективно: выявлено умеренное увеличение предстательной железы. диагноз: эректильная дисфункция на фоне инволюционных гормональных изменений. назначено: по 1 таблетке, «нacыщeннoй» потенцированными антителами - смесью гомеопатических разведений монокло- нальных антител к фрагменту человеческой эндотелиальной NO син- тазы D6, сзо и C200 (1 :1 :1) - 1 раз в 3 дня. через 2 недели после начала лечения пациент отметил улучшение эрекции и повышение либидо на фоне улучшения общего состояния: повысился общий тонус, улучшился сон. рекомендован прием препарата 1-2 раза в неделю. при повторной явке через 2 месяца после начала лечения прежних жалоб не предъявляет, отмечает восстановление либидо, эрекции и удовлетворения от полового акта.