TITRE : Support pour l’analyse par microscope d’une substance biologique à base liquide et système comportant un tel support et un microscope

Domaine technique de l’invention

L’invention a trait à l’analyse par microscope d’une substance biologique à base liquide, telle que de la semence animale. L’invention vise plus particulièrement un support pour une telle substance, destiné à être monté dans un microscope configuré pour réaliser une telle analyse, ainsi qu’un système comportant un tel support et un tel microscope.

Etat de la technique

On connaît déjà, notamment par le brevet européen EP 0 809 815, auquel correspond le brevet américain US 6,551 ,554 ainsi que par le design patent américain US D566,849 S un support pour l’analyse par microscope d’une substance biologique à base liquide, telle que de la semence animale, comportant une lame porte-objet, une lamelle couvre-objet et des lignes de colle disposées entre la lame porte-objet et la lamelle couvre-objet pour les assujettir l’une à l’autre tout en délimitant périphériquement des compartiments individuels de réception d’un échantillon de ladite substance biologique ; la lame porte-objet étant parallélépipédique et présentant deux faces principales, à savoir une face supérieure et une face inférieure, et des faces latérales qui s’étendent de l’une à l’autre des faces principales, à savoir une face gauche, une face droite, une face avant et une face arrière, avec la distance entre la face gauche et la face droite qui est supérieure à la distance entre la face avant et la face arrière qui est elle-même supérieure à la distance entre la face inférieure et la face supérieure ; ledit support présentant une direction gauche- droite transversale à la face gauche et à la face droite tandis qu’elle est parallèle à la face avant, à la face arrière et aux faces principales, une direction avant-arrière transversale à la face avant et à la face arrière tandis qu’elle est parallèle à la face gauche, à la face droite et aux faces principales, et une direction bas-haut transversale aux faces principales tandis qu’elle est parallèle aux faces latérales ; la lamelle couvre-objet étant parallélépipédique et présentant deux faces principales, à savoir une face supérieure et une face inférieure, et des faces latérales qui s’étendent de l’une à l’autre des faces principales, à savoir une face gauche, une face droite, une face avant et une face arrière ; la face inférieure de la lamelle couvre-objet étant en regard de la face supérieure de la lame porte-objet tandis que la face avant, la face arrière, la face gauche et la face droite de la lamelle couvre-objet sont tournées vers et à distance de respectivement la face avant, la face arrière, la face gauche et la face droite de la lame porte-objet ; chaque dit compartiment individuel étant délimité suivant la direction bas-haut respectivement par la face supérieure de la lame porte-objet et par la face inférieure de la lamelle couvre-objet et délimité périphériquement par lesdites lignes de colle, chaque dit compartiment individuel s’ouvrant exclusivement d’un côté sur un puits et d’un autre côté sur un évent, chaque puits et chaque évent étant délimité par lesdites lignes de colle, chaque puits étant tourné vers l’une des face avant et face arrière de la lame porte-objet et chaque évent étant tourné vers l’autre des face avant et face arrière de la lame porte-objet.

Pour analyser la substance biologique, on en dépose une goutte au niveau de chacun des puits du support. Les gouttes sont alors chacune entraînée par capillarité dans le compartiment individuel avec lequel communique le puits. Le support est monté dans un microscope et les compartiments individuels sont disposés l’un après l’autre sous son objectif pour observer la substance.

On connaît également un système comportant un tel support et un tel microscope comportant un objectif, une platine sur laquelle repose le support avec la face inférieure de la lame porte-objet contre la platine et un des compartiments individuels aligné avec l’objectif. Le microscope comporte en outre un bâti sur lequel l’objectif est monté et sur lequel la platine est montée mobile en translation suivant la direction gauche-droite du support afin de pouvoir aligner successivement les autres compartiments individuels avec l’objectif. Le microscope comporte en outre une plaque d’appui et un organe de serrage configuré pour solliciter la plaque d’appui et la platine l’une vers l’autre. La plaque d’appui est articulée à la platine pour pouvoir être écartée du support ou rabattue sur le support. Le système est en outre configuré pour effectuer la mise au point de l’objectif par autofocus.

Exposé de l’invention

L’invention propose, sous un premier aspect, un support similaire à celui décrit ci-dessus mais aux performances améliorées, notamment vis-à-vis du positionnement des compartiments individuels par rapport à l’objectif du microscope.

L’invention propose à cet effet un support pour l’analyse par microscope d’une substance biologique à base liquide, telle que de la semence animale, comportant une lame porte-objet, une lamelle couvre-objet et des lignes de colle disposées entre la lame porte-objet et la lamelle couvre-objet pour les assujettir l’une à l’autre tout en délimitant périphériquement des compartiments individuels de réception d’un échantillon de ladite substance biologique ; la lame porte-objet étant parallélépipédique et présentant deux faces principales, à savoir une face supérieure et une face inférieure, et des faces latérales qui s’étendent de l’une à l’autre des faces principales, à savoir une face gauche, une face droite, une face avant et une face arrière, avec la distance entre la face gauche et la face droite qui est supérieure à la distance entre la face avant et la face arrière qui est elle-même supérieure à la distance entre la face inférieure et la face supérieure ; ledit support présentant une direction gauche-droite transversale à la face gauche et à la face droite tandis qu’elle est parallèle à la face avant, à la face arrière et aux faces principales, une direction avant-arrière transversale à la face avant et à la face arrière tandis qu’elle est parallèle à la face gauche, à la face droite et aux faces principales, et une direction bas-haut transversale aux faces principales tandis qu’elle est parallèle aux faces latérales ; la lamelle couvre-objet étant parallélépipédique et présentant deux faces principales, à savoir une face supérieure et une face inférieure, et des faces latérales qui s’étendent de l’une à l’autre des faces principales, à savoir une face gauche, une face droite, une face avant et une face arrière ; la face inférieure de la lamelle couvre-objet étant en regard de la face supérieure de la lame porte-objet tandis que la face avant, la face arrière, la face gauche et la face droite de la lamelle couvre-objet sont tournées vers et à distance de respectivement la face avant, la face arrière, la face gauche et la face droite de la lame porte-objet ; chaque dit compartiment individuel étant délimité suivant la direction bas-haut respectivement par la face supérieure de la lame porte-objet et par la face inférieure de la lamelle couvre- objet et délimité périphériquement par lesdites lignes de colle, chaque dit compartiment individuel s’ouvrant exclusivement d’un côté sur un puits et d’un autre côté sur un évent, chaque puits et chaque évent étant délimité par lesdites lignes de colle, chaque puits étant tourné vers l’une des face avant et face arrière de la lame porte-objet et chaque évent étant tourné vers l’autre des face avant et face arrière de la lame porte-objet ; caractérisé en ce que la face supérieure de la lame porte-objet est à nu et à découvert sur au-moins une région marginale avant et sur au-moins une région marginale arrière, la région marginale avant longeant la face avant de la lame porte-objet, la région marginale arrière longeant la face arrière de la lame porte-objet, chacune desdites région marginale avant et région marginale arrière ayant une extension suivant la direction avant-arrière au-moins égale à 2,5 mm et une extension suivant la direction gauche-droite au moins égale à l’écart entre les axes respectifs des deux compartiments individuels les plus éloignés l’un de l’autre et au plus égale à la distance entre la face gauche et la face droite de la lame porte-objet.

Grâce aux régions marginales, il est possible d’effectuer un positionnement du support selon l’invention vis-à-vis d’un microscope par appui sur la face supérieure de la lame porte-objet, et non sur sa face inférieure comme cela se fait classiquement.

Cela permet un positionnement particulièrement précis suivant la direction bas-haut de l’échantillon à analyser, puisque l’on évite ainsi l’incertitude sur l’épaisseur de la lame porte-objet due aux tolérances de fabrication.

On notera que l’expression « à nu » visant la face supérieure de la lame porte-objet signifie que cette face supérieure ne porte directement sur elle aucun revêtement ajouté localement, tel que les lignes de colle ou de l’encre.

On notera également que l’expression « à découvert » visant la face supérieure de la lame porte-objet signifie que cette face supérieure n’est en regard d’aucun élément (comme par exemple la lame couvre-objet) qui pourrait constituer un obstacle pour un autre élément qui serait rapproché du support suivant la direction bas-haut pour arriver au contact de sa face supérieure.

Grâce aux régions marginales, il est possible d’accéder directement à la face supérieure de la lame porte-objet afin d’en déterminer mécaniquement la position et ainsi déterminer la position d’autres éléments dont la position est fixe et/ou connue par rapport à cette face supérieure. On notera en particulier que déterminer mécaniquement la position de la face supérieure revient à déterminer mécaniquement la position des compartiments individuels que la face supérieure délimite.

L’invention est en outre basée sur l’observation que la qualité optique de la surface de la lame porte-objet (nécessaire afin de perturber le moins possible la lumière qui traverse la lame pour illuminer l’échantillon présent dans le compartiment individuel) implique une régularité mécanique de cette surface qui est favorable au glissement ; et qu’il est notamment possible d’exercer un appui sur cette surface tout en conservant une capacité de glissement sur cette surface.

Les régions marginales avant et arrière peuvent ainsi servir de pistes de glissement pour au moins un élément d’appui - tel que par exemple un doigt comme expliqué plus loin - contre lequel la face supérieure serait mise en appui par ses régions marginales afin d’avoir sa position déterminée mécaniquement.

On notera en outre que la position des régions marginales - à savoir le long de la face avant et de la face arrière - fait que ces régions sont le plus à l’écart possible l’une de l’autre, ce qui est favorable à la précision de la détermination mécanique du positionnement par les éléments d’appui et à la stabilité lors du glissement.

S’agissant de la borne inférieure de l’extension des régions marginales suivant la direction avant-arrière - à savoir 2,5 mm -, la demanderesse a déterminé que, compte tenu des tolérances de fabrication des différents éléments du système, une valeur au-moins égale à 2,5 mm permettait de garantir que les doigts d’appui restent exclusivement au contact des régions marginales avant et arrière, quelle que soit la position de la platine suivant la direction gauche-droite.

Des caractéristiques avantageuses particulièrement simples, commodes et économiques du support selon l’invention sont présentées ci- dessous :

- pour l’une au moins de la région marginale avant et de la région marginale arrière, l’extension suivant la direction gauche-droite est égale à la distance entre la face gauche et la face droite de la lame porte-objet ;

- chaque puits a une extension suivant la direction avant-arrière qui est inférieure à l’extension suivant la direction avant-arrière de chacune desdites région marginale avant et région marginale arrière ;

- la distance entre la face gauche et la face droite de la lame porte-objet est comprise entre 74,8 mm et 75,2 mm, la distance entre la face avant et la face arrière de la lame porte-objet est comprise entre 24,8 mm et 25,2 mm, la distance entre la face gauche et la face droite de la lamelle couvre-objet est comprise entre 31 ,8 mm et 32,2 mm, et la distance entre la face avant et la face arrière de la lamelle couvre-objet est comprise entre 16,8 mm et 16,2 mm; et/ou

- tous les puits sont tournés vers l’une des face avant et face arrière de la lame porte-objet et tous les évents sont tournés vers l’autre des face avant et face arrière de la lame porte-objet.

L’invention propose, sous un deuxième aspect, un système pour l’analyse d’une substance biologique à base liquide, comportant un support tel que décrit ci- dessus et un microscope comportant un objectif, une platine configurée pour recevoir le support dans une première position d’observation dans laquelle la face inférieure de la lame porte-objet est contre la platine et un des compartiments individuels est aligné avec l’objectif, un bâti sur lequel l’objectif est monté dans au moins une position prédéterminée fixe et sur lequel la platine est montée mobile en translation suivant la direction gauche-droite du support afin de pouvoir aligner successivement les autres compartiments individuels avec l’objectif, une plaque d’appui s’étendant au moins partiellement en regard du support, et un organe de serrage configuré pour solliciter la plaque d’appui et la platine l’une vers l’autre de sorte que le support est enserré entre la plaque d’appui et la platine ; la plaque d’appui étant montée fixe sur le bâti et comportant une embase et des doigts d’appui saillant de l’embase vers la platine et dont les extrémités distales sont au contact des régions marginales exclusivement, avec au moins deux doigts d’appui sur l’une des région marginale avant et région marginale arrière et au moins un doigt d’appui sur l’autre des région marginale avant et région marginale arrière ; la platine présentant des butées de positionnement pour immobiliser le support par rapport à la platine suivant la direction gauche-droite.

Puisque la plaque d’appui est montée fixe sur le bâti et que la face supérieure de la lame porte-objet est maintenue contre les doigts d’appui par la platine, sous l’effet de l’organe de serrage, les doigts d’appui déterminent la position de la face supérieure par rapport au bâti suivant la direction bas-haut.

On notera qu’ainsi la position de la face supérieure par rapport au bâti ne dépend pas de l’épaisseur (c’est-à-dire la distance entre la face inférieure et la face supérieure) de la lame porte-objet.

Lors de la translation de la platine suivant la direction gauche-droite, les doigts d’appui glissent sur les régions marginales. Puisque l’extension suivant la direction gauche-droite des régions marginales est au moins égale à l’écart entre les axes respectifs des deux compartiments individuels les plus éloignés l’un de l’autre, les doigts restent au contact des régions marginales quel que soit le compartiment individuel aligné avec l’objectif.

Ainsi, la position de la face supérieure de la lame porte-objet suivant la direction bas-haut reste déterminée de la même manière par les doigts d’appui quel que soit le compartiment individuel aligné avec l’objectif.

Ceci permet notamment, une fois que la mise au point de l’objectif a été faite pour un compartiment individuel donné, de conserver cette mise au point pour chacun des autres compartiments individuels.

Ceci permet en outre de conserver cette mise au point pour un autre support mis en remplacement d’un premier support pour lequel la mise au point a été effectuée, puisque la position suivant la direction bas-haut de la face supérieure de cet autre support sera déterminée par les doigts d’appui de la même manière que pour le premier support. On notera qu’un telle mise au point peut alors correspondre à un réglage d’usine effectué lors de la fabrication du microscope.

On notera encore que dans les systèmes de l’art antérieur, la surface de référence mécanique est la surface de la platine sur laquelle repose la face inférieure de la lame porte-objet, de sorte que la position de la face supérieure de la lame porte-objet dépend de l’épaisseur de la lame porte-objet, et que par conséquent ces systèmes n’offrent pas les avantages exposés ci-dessus.

Des caractéristiques avantageuses particulièrement simples, commodes et économiques du système selon l’invention sont présentées ci- dessous :

- la plaque d’appui comporte quatre doigts d’appui, dont deux doigts d’appui au contact de la région marginale avant et les deux autres doigts d’appui au contact de la région marginale arrière ;

- l’un de la platine et de la plaque d’appui a des propriétés magnétiques et l’organe de serrage comporte des aimants solidaires de l’autre de la platine et de la plaque d’appui ;

- l’embase présente une ouverture au travers de laquelle l’objectif pointe sur ledit compartiment individuel aligné avec l’objectif dans ladite première position d’observation, au-moins deux des doigts d’appui qui sont au contact d’une même région marginale étant disposés de part et d’autre de l’ouverture ;

- le bâti comporte une paroi de montage et l’embase comporte deux branches saillant chacune transversalement de la paroi de montage, s’étendant en regard l’une de l’autre et délimitant l’ouverture, chaque branche étant pourvue de deux doigts d’appui, dont un doigt au contact de la région marginale avant et un doigt au contact de la région marginale arrière ;

- l’organe de serrage comporte des aimants logés dans lesdites branches ;

- l’une de la platine et de la plaque d’appui présente une rampe et l’autre de la platine et de la plaque d’appui présente un bossage configuré pour coopérer avec la rampe au cours du mouvement de translation de la platine suivant la direction gauche-droite de manière à écarter la platine de la plaque d’appui, à l’encontre de la force exercée par l’organe de serrage, jusqu’à une position dans laquelle le support est accessible pour pouvoir être retiré de la platine ; - la platine est mécaniquement reliée au bâti par une liaison pivot glissant comportant un guide cylindrique longitudinalement orienté suivant la direction gauche-droite et un fût monté à coulissement sur le guide, avec un jeu entre le fût et le guide ; et/ou

- l’objectif a une distance focale fixe.

L’invention vise également l’utilisation d’un système tel qu’exposé ci- dessus dans laquelle la substance biologique à base liquide est de la semence animale et ladite analyse comprend une étape de comptage des spermatozoïdes.

Brève description des figures

On va maintenant poursuivre l'exposé de l'invention par la description détaillée d'exemples de réalisation, donnée ci-après à titre illustratif et non limitatif, en référence aux dessins annexés. Sur ceux-ci :

- La figure 1 est une vue d’un support pour l’analyse par microscopie d’une substance biologique à base liquide, conforme à l’art antérieur.

- La figure 2 est une vue similaire à la figure 1 , et à la même échelle, d’un support conforme à l’invention.

- La figure 3 est une vue en coupe très schématique d’un système conforme à l’invention (illustré plus en détails sur les figures 9 à 12), comportant le support illustré sur la figure 2 et un microscope, le système étant dans une configuration d’observation dans laquelle le support est enserré entre une platine et les doigts d’une plaque d’appui du microscope avec un des compartiment individuels du support aligné avec l’objectif ; la coupe étant suivant la direction avant-arrière du support et passant par le milieu de ce compartiment individuel.

- La figure 4 est une vue en coupe du système illustré à la figure 3, cette fois suivant la direction gauche-droite du support et passant par le milieu des compartiments individuels.

- La figure 5 est une vue similaire à la figure 4 après que la platine a été déplacée suivant la direction gauche-droite pour aligner un autre des compartiments individuels avec l’objectif.

- La figure 6 est une vue similaire à la figure 2 sur laquelle sont repérés les axes des compartiments individuels, ainsi que les positions des doigts de la plaque d’appui sur la face supérieure de la lame porte-objet lorsque la platine est dans la position qu’elle occupe à la figure 4 et lorsque la platine est dans la position qu’elle occupe à la figure 5.

- La figure 7 est une vue similaire à la figure 6, sur laquelle sont repérées le trajet de chacun des doigts de la plaque d’appui lors du passage de la platine de la position qu’elle occupe sur la figure 4 à la position qu’elle occupe sur la figure 5.

- La figure 8 est une vue similaire à la figure 3, après que la platine a été écartée de la plaque d’appui pour passer le système dans une configuration de chargement/déchargement dans laquelle le support est accessible à un utilisateur du système.

- La figure 9 est une vue en perspective éclatée et détaillée du système illustré schématiquement sur les figures 2 à 8, mais sans l’objectif.

- La figure 10 est une vue semblable à la figure 9 mais pour le système à l’état assemblé, et dans une configuration de nettoyage dans laquelle la platine est très à l’écart de la plaque d’appui.

- La figure 11 est une vue en coupe du système tel qu’illustré sur les figures 9 et 10, prise suivant la direction avant-arrière du support et passant par un des compartiments individuels, le système étant dans la configuration de chargement/déchargement schématiquement représentée à la figure 8.

- La figure 12 est une vue de côté d’une partie du système illustré sur les figures 9 à 11 , le système étant dans la configuration d’observation schématiquement représentée sur les figures 3 à 5.

- La figure 13 est une vue similaire à la figure 7 pour une variante du support conforme à l’invention.

Description détaillée

Le support 10 et le support 40 illustrés respectivement sur les figures 1 et 2 comportent chacun une lame porte-objet 11 , une lamelle couvre-objet 12 et des lignes de colle 13 disposées entre la lame porte-objet 11 et la lamelle couvre-objet 12 pour les assujettir l’une à l’autre tout en délimitant périphériquement des compartiments individuels 14. On notera au préalable que dans le présent rapport, on a employé pour simplifier les mêmes références numériques pour les éléments correspondants du support 10 et du support 40.

Par conséquent, dans la description du support 10 qui suit, s’il est fait référence à un élément du support 10 qui n’est pas visible sur la figure 1 , il est possible - à des fins de compréhension - de se référer à l’une des figures illustrant le support 40 sur laquelle l’élément correspondant est visible.

Les compartiments individuels 14 du support 10 sont chacun configurés pour recevoir un échantillon de la substance biologique à base liquide, ici de la semence animale, diluée ou non.

Le support 10 comporte ici compartiments individuels 14.

Chaque compartiment individuel 14 s’ouvre exclusivement d’un côté sur un puits 15 et d’un autre côté sur un évent 16, chaque puits 15 et chaque évent 16 étant délimité par les lignes de colle 13.

Pour remplir un compartiment individuel 14 avec un échantillon de la substance biologique, une goutte (non illustrée) de cette substance est déposée dans le puits 15 respectif. Cette goutte est alors entraînée par capillarité dans le compartiment individuel 14 tandis que l’air initialement présent dans le compartiment individuel 14 s’échappe par l’évent 16.

La lame porte-objet 11 et la lamelle couvre-objet 12 sont ici chacune en verre flotté revêtu d’un film tensioactif (en anglais surfactant) favorisant l’entrainement de la goutte dans le compartiment individuel 14 par capillarité.

La lame porte-objet 11 et la lamelle couvre-objet 12 sont chacune transparente.

La lame porte-objet 11 est parallélépipédique et présente deux faces principales, à savoir une face supérieure 17 et une face inférieure 18 (figures 3 et 4), et des faces latérales qui s’étendent de l’une à l’autre des faces principales, à savoir une face gauche 19, une face droite 20, une face avant 21 et une face arrière 22.

La distance entre la face gauche 19 et la face droite 20 est supérieure à la distance entre la face avant 21 et la face arrière 22 qui est elle- même supérieure à la distance entre la face inférieure 18 et la face supérieure 19.

La distance entre la face gauche 19 et la face droite 20 est ici comprise entre 74,8 mm et 75,2 mm.

La distance entre la face avant 21 et la face arrière 22 est ici comprise entre 24,8 mm et 25,2 mm.

La distance entre la face inférieure 18 et la face supérieure 19 - c’est-à-dire l’épaisseur de la lame porte-objet 11 - est ici d’environ 1 mm.

Le support 10 présente une direction gauche-droite transversale à la face gauche 19 et à la face droite 20 tandis qu’elle est parallèle à la face avant 21 , à la face arrière 22 et aux faces principales 17 et 18, une direction avant- arrière transversale à la face avant 21 et à la face arrière 22 tandis qu’elle est parallèle à la face gauche 19, à la face droite 20 et aux faces principales 17 et 18, et une direction bas-haut transversale aux faces principales 17 et 18 tandis qu’elle est parallèle aux faces latérales 19, 20, 21 et 22.

La lamelle couvre-objet 12 est parallélépipédique et présente deux faces principales, à savoir une face supérieure 23 et une face inférieure 24, et des faces latérales qui s’étendent de l’une à l’autre des faces principales, à savoir une face gauche 25, une face droite 26, une face avant 27 et une face arrière 28.

La distance entre la face gauche 25 et la face droite 26 est supérieure à la distance entre la face avant 27 et la face arrière 28 qui est elle- même supérieure à la distance entre la face inférieure 24 et la face supérieure 23.

La distance entre la face gauche 25 et la face droite 26 est ici comprise entre 31 ,8 mm et 32,2 mm.

La distance entre la face avant 27 et la face arrière 28 est ici comprise entre 20,8 mm et 21 ,2 mm.

La distance entre la face inférieure 24 et la face supérieure 23 - c’est-à-dire l’épaisseur de la lamelle couvre-objet 12 - est ici de 0,7 mm +/- 0,05 mm. La face inférieure 24 de la lamelle couvre-objet 12 est en regard de la face supérieure 17 de la lame porte-objet 11 tandis que la face avant 27, la face arrière 28, la face gauche 25 et la face droite 26 de la lamelle couvre-objet 12 sont tournées vers et à distance de respectivement la face avant 21 , la face arrière 22, la face gauche 19 et la face droite 20 de la lame porte-objet 11 .

La lamelle couvre-objet 12 est ici disposée centrée par rapport à la lame porte-objet 11 suivant la direction gauche-droite.

Chaque compartiment individuel 14 est délimité suivant la direction bas-haut respectivement par la face supérieure 17 de la lame porte-objet 11 et par la face inférieure 24 de la lamelle couvre-objet 12 et délimité périphériquement par les lignes de colle 13.

L’épaisseur des lignes de colle 13 est ici de 20 pm.

On notera que sur les figures 3 à 5 et 8, l’épaisseur des lignes de colle 13 a été exagérée par souci de lisibilité.

Chaque compartiment individuel 14 a ici une contenance de 3 pl.

Les compartiments individuels 14 se succèdent suivant la direction gauche-droite, ici en étant juxtaposés l’un à l’autre.

Comme expliqué plus haut, chaque compartiment individuel 14 s’ouvre d’un côté sur un puits 15 et d’un autre côté sur un évent 16, le puits 15 étant ici tourné vers la face arrière 22 de la lame porte-objet 11 et l’évent 16 étant ici tourné vers la face avant 21 de la lame porte-objet 11 .

Ici tous les puits 15 sont tournés vers la face arrière 22 et tous les évents 16 sont tournés vers la face avant 21 .

Chaque puits 15 est ici délimité par une portion 29 des lignes de colle 13 conformée en U et s’étendant en débord de l’espace strictement compris entre la lame porte-objet 11 et la lamelle couvre-objet 12 jusqu’à une extrémité 30 située ici au raz de la face arrière 22 de la lame porte-objet 11 .

Chaque évent 16 est ici délimité par des portions droites 31 des lignes de colle 13 s’étendant en regard l’une de l’autre, chacune en débord de l’espace strictement compris entre la lame porte-objet 11 et la lamelle couvre- objet 12 et jusqu’à une extrémité 32 respective située ici au raz de la face avant 21 de la lame porte-objet 11 . Le support 40 illustré sur la figure 2 est similaire au support 10, sauf que les dimensions respectives de la lamelle couvre-objet 12 et des lignes de colle 13 du support 40 sont plus petites suivant la direction avant-arrière et que la face supérieure 17 de la lame porte-objet 11 du support 40 est à nu et à découvert sur une région marginale avant 41 et sur une région marginale arrière 42.

Plus précisément, la distance entre la face avant 27 et la face arrière 28 de la lamelle couvre-objet 12 est ici comprise entre 16,8 mm et 16,2 mm.

On notera que la longueur des compartiments individuels 14 du support 40, c’est-à-dire la distance séparant le puits 15 de l’évent 16, qui correspond ici à la distance entre la face avant 27 et la face arrière 28 de la lamelle couvre-objet 12, est par conséquent elle aussi plus petite que celle des compartiments individuels 14 du support 10.

La région marginale avant 41 longe la face avant 21 de la lame porte-objet 11 , tandis que la région marginale arrière 42 longe la face arrière 22 de la lame porte-objet 11 .

Ici, la région marginale avant 41 et la région marginale arrière 42 sont chacune directement bordée par la face avant 21 et la face arrière 22 de la lame porte-objet 11 respectivement.

La région marginale avant 41 a ici une extension suivant la direction avant-arrière égale à 2,5 mm et a une extension suivant la direction gauche- droite égale à la distance entre la face gauche 19 et la face droite 20 de la lame porte-objet 11 .

La limite de l’extension suivant la direction avant-arrière de la région marginale avant 41 est repérée sur la figure 2 par le trait interrompu 43, où elle passe au raz de chacune des extrémités 32 des évents 16.

En effet, au-delà de cette limite 43 en allant vers l’arrière, la face supérieure 17 est revêtue par les lignes de colle 13 et/ou se trouve en regard de la face inférieure 24 de la lamelle couvre-objet 12 est n’est donc pas à nu et à découvert.

La région marginale arrière 42 a ici une extension suivant la direction avant-arrière égale à 2,6 mm et a une extension suivant la direction gauche- droite égale à la distance entre la face gauche 19 et la face droite 20 de la lame porte-objet 11 .

La limite de l’extension suivant la direction avant-arrière de la région marginale arrière 42 est repérée sur la figure 2 par le trait interrompu 44, où elle passe au raz des extrémités 30 des puits 15.

En effet, au-delà de cette limite 44 en allant vers l’avant, la face supérieure 17 est revêtue par les lignes de colle 13 et/ou se trouve en regard de la face inférieure 24 de la lamelle couvre-objet 12 est n’est donc pas à nu et à découvert.

D’une manière générale, chacune des région marginale avant 41 et région marginale arrière 42 a une extension suivant la direction avant-arrière au plus égale à 3 mm, ou en variante égale à plus que 3 mm, par exemple 3,5 mm, 4 mm, 4,5 mm, 5 mm, voire plus que 5 mm.

En outre, on notera que l’extension suivant la direction avant-arrière de chacun des puits 15 - c’est-à-dire la distance, mesurée au niveau de la face supérieure 17, entre la face arrière 28 de la lame couvre-objet 12 et la limite 44 (qui passe au raz des extrémités 30 des puits 15) - est ici égale à 2,4 mm, ce qui est notamment inférieur à la fois à l’extension suivant la direction avant- arrière de la région marginale avant 41 (2,5 mm) et à l’extension suivant la direction avant-arrière de la région marginale arrière 42 (2,6 mm).

Les figures 3 à 5 et 8 illustrent un système 100 pour l’analyse de la substance biologique à base liquide, comportant le support 40 et un microscope

50.

Sur les figures 3 à 5, le système est dans une configuration d’observation dans laquelle le microscope 50 est en cours de coopération avec le support 40 afin d’observer les échantillons de substance biologique contenus dans les compartiments individuels 14.

Le microscope 50 comporte un objectif 51 et une platine 52 configurée pour recevoir le support 40 dans au-moins une position d’observation dans laquelle la face inférieure 18 de la lame porte-objet 11 contre la platine 52 et un des compartiments individuels 14 aligné avec l’objectif

51. Sur les figures 3 et 4, le support 40 est dans une première position d’observation dans laquelle le compartiment 14 aligné avec l’objectif 51 est celui que l’on voit le plus à gauche sur la figure 2.

Comme expliqué plus en détails ci-après, le microscope 50 est configuré pour disposer le support 40 dans une pluralité de positions d’observation dans chacune desquelles la platine 52 reçoit le support 40 avec un compartiment individuel 14 respectif aligné avec l’objectif 51.

Sur la figure 5 par exemple, le support 40 est dans une deuxième position d’observation dans laquelle le compartiment 14 aligné avec l’objectif 51 est celui que l’on voit le plus à droite sur la figure 2.

Le microscope 50 comporte en outre un bâti (non illustré sur les figures 3 à 5 et 8 mais dont une paroi de montage 60 est visible sur les figures 9 à 11 ) sur lequel l’objectif 51 est monté fixe et sur lequel la platine 52 est montée mobile en translation suivant la direction gauche-droite du support 40 afin de pouvoir aligner successivement les autres compartiments individuels 14 avec l’objectif 51 .

La liaison mécanique entre la platine 52 et le bâti sera décrite en détail ultérieurement, à l’appui des figures 9 à 12.

La platine 52 est en outre configurée pour recevoir le support 40 dans une position prédéterminée.

Pour positionner et immobiliser le support 40 dans cette position prédéterminée, la platine 52 comporte ici des butées de positionnement chacune configurée pour coopérer avec une face latérale respective de la lame porte-objet 11 dont elle est en regard afin d’immobiliser le support 40 suivant la direction (gauche-droite ou avant-arrière suivant le cas) transversale cette face latérale respective.

Les butées de positionnement comportent ici deux butées de positionnement avant 33 en regard de la face latérale avant 21 , une butée de positionnement gauche 34 en regard de la face latérale gauche 19, une butée de positionnement droite 35 en regard de la face latérale droite 20 et deux butées de positionnement arrière 36 en regard de la face latérale arrière 22, de sorte que le support 40 est ici immobilisé par rapport à la platine 52 à la fois suivant la direction avant-arrière dans les deux sens et suivant la direction gauche-droite dans les deux sens.

Les butées de positionnement sont ici formées par des pions saillant d’une face supérieure 37 de la platine 52 sur laquelle repose la face inférieure 18 de la lame porte-objet 11 .

La platine 52 comporte en outre une échancrure 45 qui s’étend en regard de chacun des compartiments individuels 14 et configurée pour permettre à la lumière d’un organe d’éclairage (non illustré) disposé sous la platine 52 d’atteindre chacun des compartiments individuels 14.

Le microscope 50 comporte en outre une plaque d’appui 53 qui s’étend au moins partiellement en regard du support 40, ainsi qu’un organe de serrage configuré pour solliciter la plaque d’appui 53 et la platine 52 l’une vers l’autre, de sorte que le support 40 est enserré entre la plaque d’appui 53 et la platine 52.

L’organe de serrage comporte ici des aimants 54 solidaires de la plaque d’appui 53, tandis que la platine 52 a des propriétés magnétiques, les aimants 54 étant configurés pour solliciter la platine 52 vers la plaque d’appui 53.

La plaque d’appui 53 est montée fixe sur le bâti et comporte une embase 55 et des doigts d’appui 56 saillant chacun de l’embase 55 vers la platine 52 jusqu’à une extrémité distale 57.

Les extrémités distales 57 des doigts d’appui 56 sont chacune exclusivement au contact des régions marginales 41 et 42 de la face supérieure 17 de la lame porte-objet 11 .

La lame porte-objet 11 est ainsi enserrée entre les doigts d’appui 56 et la platine 52, la lame porte-objet 11 étant au contact de la plaque d’appui 53 ici exclusivement par l’intermédiaire des doigts d’appui 56.

La plaque d’appui 53 comporte ici quatre doigts 56, dont deux doigts 56 qui sont au contact de la région marginale avant 41 et deux autres doigts 56 qui sont au contact de la région marginale arrière 42.

Les quatre doigts d’appui 56 sont ici disposés de sorte à se trouver chacun au sommet respectif d’un rectangle imaginaire. L’embase 55 présente en outre une ouverture 58 au travers de laquelle l’objectif 51 pointe sur le compartiment individuel 14 aligné avec l’objectif 51 , ce dernier étant ici partiellement reçu dans l’ouverture 58.

Les doigts d’appui 56 qui sont au contact de la région marginale avant 41 sont disposés de part et d’autre de l’ouverture 58. Les doigts d’appui 56 qui sont au contact de la région marginale arrière 42 sont disposés de part et d’autre de l’ouverture 58.

L’objectif 51 a ici une distance focale fixe.

Le système 100 est configuré de sorte que le point focal 59 de l’objectif 51 se trouve ici approximativement au milieu du compartiment individuel 14 qui est aligné avec l’objectif 51 .

Lors de la translation de la platine 52 suivant la direction gauche- droite du support 40, les doigts d’appui 56 glissent sur les régions marginales 41 et 42 respectives, en restant chacun exclusivement à leur contact.

Sur la figure 6, on a repéré les axes 38 de chacun des compartiments individuels 14.

Lorsqu’on aligne un compartiment individuel 14 avec l’objectif 51 pour observer l’échantillon reçu dans ce compartiment 14, on aligne plus précisément l’axe 38 de ce compartiment 14 avec l’axe optique de l’objectif 51 .

Par conséquent, entre la position qu’elle occupe sur la figure 4 et la position qu’elle occupe sur la figure 5, la platine 52 a été déplacée sur une distance égale à l’écart entre les axes 38 respectifs du compartiment individuel 14 le plus à gauche et le compartiment individuel 14 le plus à droite, c’est-à-dire les deux compartiments individuels 14 les plus éloignés l’un de l’autre sur le support 40.

L’écart entre les axes 38 de deux compartiments voisins est ici égal à 7,8 mm et l’écart entre les axes 38 des deux compartiments individuels 14 les plus éloignés l’un de l’autre est donc de 23,4 mm.

Sur la figure 6, on a en outre repéré par quatre rectangles noirs 46 les positions respectives des doigts d’appui 56 lorsque la platine 52 est dans la position qu’elle occupe sur la figure 4, et par quatre rectangles hachurés 47 les positions respectives de ces doigts 56 lorsque la platine 52 est dans la position qu’elle occupe sur la figure 5.

Chaque rectangle noir 46 ou hachuré 47 correspond à la portion de la face supérieure 17 qui est en contact avec l’extrémité distale 57 d’un doigt d’appui 56, cette portion ayant ici une extension suivant la direction avant- arrière égale à environ 1 mm et une extension suivant la direction gauche-droite égale à environ 3 mm.

Sur la figure 7, on a en outre repéré par des rectangles hachurés 48 le trajet de chacun des doigts d’appui 56 lorsque la platine 52 passe de la position qu’elle occupe sur la figure 4 à la position qu’elle occupe sur la figure 5.

Chaque rectangle hachuré 48 correspond donc à l’intégrale du rectangle 46 ou 47 respectif sur l’ensemble du trajet du doigt 56 correspondant. Chaque rectangle 48 a donc ici une extension suivant la direction avant-arrière égale à environ 1 mm et une extension suivant la direction gauche-droite égale à environ 3 mm additionnée de la longueur du trajet du doigt 56, cette dernière longueur étant - comme expliqué plus haut - égale à l’écart entre les axes 38 respectifs du compartiment individuel 14 le plus à gauche et le compartiment individuel 14 le plus à droite, c’est-à-dire les deux compartiments individuels 14 les plus éloignés l’un de l’autre sur le support 40.

On notera que pour que chaque doigt d’appui 56 puisse rester entièrement au contact de la région marginale 41 ou 42 respective qu’il parcourt, quel que soit le compartiment individuel 14 qui est aligné avec l’objectif 51 , l’extension suivant la direction gauche-droite de cette région marginale doit être au-moins égale à l’extension suivant la direction gauche- droite des rectangles hachurés 48.

On notera encore que l’extension suivant la direction gauche-droite des rectangles hachurés 48 est en pratique supérieure à l’écart entre les axes 38 respectifs des deux compartiments individuels 14 les plus éloignés l’un de l’autre sur le support 40 (puisqu’il faut tenir compte de l’extension des doigts d’appui suivant la direction gauche-droite).

On notera encore que sur la figure 7, les rectangles hachurés 48 d’une même région marginale 41 ou 42 ne se recoupent pas, de sorte qu’un revêtement pourrait être présent entre ces deux rectangles 48 sans être rencontré par un doigt d’appui 56 au cours de son trajet. Ainsi, dans une variante non illustrée, le support présente deux régions marginales avant et/ou deux régions marginales arrière telle que décrites ci-dessus mais chacune avec une extension moindre suivant la direction gauche-droite, et avec un revêtement interposé entre ces deux régions marginales avant et/ou entre ces deux régions marginales arrière.

Le support 70 illustré à la figure 13 est similaire au support 40 sauf qu’il ne comporte que deux compartiments individuels 14, l’écart entre les axes 38 de ces compartiments étant dans ce cas égal à 15,84 mm.

La figure 8 illustre une configuration de chargement/déchargement du système 100, ici obtenue après que la platine 52 a été écartée de la plaque d’appui 53, le support 40 étant alors accessible à un utilisateur pour être retiré de la platine 52 et éventuellement remplacé par un autre support similaire afin d’analyser les échantillons contenus dans les compartiments de cet autre support.

Inversement, pour passer le système 100 de la configuration de chargement/déchargement à la configuration d’observation, la platine 52 chargée du support 40 est rapprochée de la plaque d’appui 53 jusqu’à ce que chaque doigt d’appui 56 soient au contact des régions marginales 41 et 42 de la manière décrite précédemment.

On va maintenant décrire plus en détail le système 100 à l’appui des figures 9 à 12.

Le bâti comporte ici une paroi de montage 60 et l’embase 55 comporte deux branches 61 saillant chacune transversalement de la paroi de montage 60. Les branches 61 s’étendent en regard l’une de l’autre en délimitant l’ouverture 58.

Chaque branche 61 est ici pourvue de deux doigts d’appui 56, dont un doigt 56 est au contact de la région marginale avant 41 et un doigt est au contact de la région marginale arrière 42 lorsque le système 100 est dans la configuration d’observation (figure 12). Comme on le voit bien sur la figure 10, les aimants 54 de l’organe de serrage sont ici logés dans les branches 61 , chaque branche 61 étant ici pourvue de trois aimants 54 cylindriques. Pour chaque branche 61 , les aimants 54 sont ici répartis entre les doigts d’appui 56 de cette branche 61 .

La plaque d’appui 53 présente ici des rainures de guidage 62 ménagées dans l’embase 55, du même côté que les doigts d’appui 56, chaque rainure de guidage 62 étant configurée pour recevoir une portion d’extrémité d’un pion respectif formant l’une des butées de positionnement avant 33, gauche 34 et/ou droite 35 de la platine 52 lorsque le système 100 est en configuration d’observation, les extrémités des pions se déplaçant dans la rainure de guidage respective lorsque la platine 52 se déplace suivant la direction gauche-droite.

Les rainures de guidage 62 participent ainsi au bon positionnement de la platine 52 suivant la direction avant-arrière du support 40, c’est-à-dire afin que les doigts d’appui 56 restent exclusivement au contact des régions marginales 41 et 42 lors du déplacement de la platine 52.

La platine 52 présente en outre une rampe 63 et la plaque d’appui 53 présente un bossage 64 configuré pour coopérer avec la rampe 63 au cours du mouvement de translation de la platine 52 suivant la direction gauche-droite du support 40 de manière à écarter la platine 52 de la plaque d’appui 53, à l’encontre de la force exercée par l’organe de serrage, ici jusqu’à ce que la platine arrive dans la position illustrée sur la figure 11 , où le système 100 est dans sa configuration de chargement/déchargement.

La platine 52 est ici mécaniquement reliée au bâti par une liaison pivot glissant comportant un guide cylindrique 65 et un fût 66 monté à coulissement sur le guide 65, ce dernier étant longitudinalement orienté suivant une direction parallèle à la direction gauche-droite du support 40 lorsque ce dernier est reçu dans sa position prédéterminée sur la platine 52.

Un telle liaison mécanique permet à la fois d’éloigner et rapprocher la platine 52 de la plaque d’appui 53 et de déplacer la platine 52 suivant la direction gauche-droite. Le guide 65 est ici fixé à la paroi de montage 60 tandis que le fût 66 est solidaire de la platine 52.

Le diamètre interne du fût 66 est ici légèrement supérieur au diamètre externe du guide 65 de sorte qu’il existe entre eux un jeu permettant à la platine 52 de pivoter dans une certaine mesure à la fois suivant la direction gauche-droite dans les deux sens et suivant la direction avant-arrière dans les deux sens.

Cette capacité de la platine 52 à pivoter permet d’ajuster l’inclinaison de la face supérieure 17 de la lame porte-objet 11 par rapport aux doigts d’appui 56 afin de s’assurer que ces derniers soient tous au contact de la face supérieure 17, avec un appui équitablement réparti entre tous les doigts 56.

Pour déplacer la platine 52 suivant la direction gauche-droite, le microscope 50 comporte en outre ici un mécanisme motorisé (non illustré) commandé depuis une interface utilisateur. En variante, le mécanisme n’est pas motorisé et est actionné manuellement à l’aide d’une molette.

Le système 100 tel que décrit ci-dessus est notamment adapté pour une analyse comportant une étape de comptage des spermatozoïdes présents dans les échantillons de semence animale, en vue d’en déterminer la concentration.

Dans une variante non illustrée, le système 100 est couplé à un ordinateur configuré pour analyser automatiquement les images captées par l’objectif afin de réaliser l’étape de comptage et déterminer la concentration.

Dans une variante non illustrée, le point focal de l’objectif n’est pas au milieu des compartiments individuels mais se trouve - suivant la direction bas-haut - à une distance prédéterminée du milieu des compartiments individuels.

Dans une variante non illustrée, l’objectif est monté mobile par rapport au bâti du microscope entre une pluralité de positions prédéterminées fixes dans chacune desquelles l’objectif se trouve à une distance respective du support différente.

Il est entendu que dans la présente demande, le terme objectif doit être compris dans un sens large et peut notamment être un simple capteur d’images électronique, comme par exemple un capteur CMOS, utilisé par exemple dans les procédés de microscopie dit « sans lentille », utilisant par exemple le principe de l'holographie en ligne. Ainsi, en variante, le système d’analyse tel que décrit ci-dessus est pourvu d’une caméra équipée d’un tel capteur électronique, et est configuré pour enregistrer et traiter une succession d’image afin d’analyser la substance biologique, par exemple pour déterminer la motilité des spermatozoïdes contenus dans des échantillons de semence animale.

Dans une autre variante non illustrée, la bande marginale avant et la bande marginale arrière se trouvent à une faible distance de la face avant 21 ou de la face arrière 22 respectivement, c’est-à-dire par exemple qu’un revêtement ou une portion de revêtement se trouve sur la face supérieure 17 entre la face avant 21 et la région marginale avant et/ou entre la face arrière 22 et la région marginale arrière.

Dans encore une autre variante non illustrée, la plaque d’appui comporte trois doigts d’appui, avec - lorsque le système est en configuration de maintien - deux des doigts qui sont exclusivement au contact de l’une des régions marginales avant et arrière et le dernier des doigts qui est exclusivement au contact de l’autre des régions marginales avant et arrière.

Dans encore une autre variante non illustrée, l’organe de serrage comporte des aimants qui sont solidaires de la platine tandis que la plaque d’appui a des propriétés magnétiques.

Dans encore une autre variante non illustrée, les butées de positionnement sont différentes de pions saillant de la face supérieure 37 de la platine 52 et sont par exemple formées par les bords d’un renfoncement ménagé dans cette face supérieure 37 et configuré pour accueillir la lame porte- objet 11 .

Dans encore d’autres variantes non illustrées, les puits et les évents sont disposés différemment que décrit ci-dessus, par exemple tous les puits sont tournés vers la face avant et tous les évents sont tournés vers la face arrière, ou bien d’un compartiment à l’autre les puits et les évents sont en alternance tournés vers la face avant puis vers la face arrière. Dans d’autres variantes non illustrées :

- l’objectif a une distance focale variable plutôt que fixe ;

- le nombre de compartiments individuels est différent de quatre et de deux, par exemple trois, cinq ou plus que cinq ; - l’organe de serrage comporte un nombre d’aimants différent de trois par branche, par exemple un, deux, quatre ou plus de quatre aimants par branche et/ou les aimants ont une forme différente de cylindrique, par exemple parallélépipédique ;

- l’organe de serrage est différent d’aimants logés dans les branches de la plaque d’appui, et comporte par exemple des ressorts disposés du côté de la platine qui regarde à l’opposé de la plaque d’appui et configurés pour pousser la platine vers la plaque d’appui ; et/ou

- la rampe 63 est portée par la plaque d’appui et le bossage 64 est porté par la platine. De nombreuses autres variantes sont possibles en fonction des circonstances et l’on rappelle à cet égard que l’invention ne se limite pas aux exemples décrits et représentés.