PROCEDE DE MONOACYLATION D'HYDROXY TAXANES

La présente invention concerne un procédé de monoacylation d'hydroxy taxanes. Elle concerne plus particulièrement un procédé de monoacylation sélective de la désacétyl- 10 baccatine III ou de ses dérivés.

La désacétyl- 10 baccatine III (10-DAB), représentée par la formule générale

(I) dans laquelle R _\ représente un atome d'hydrogène et la baccatine III représentée par la formule générale (I) dans laquelle R| représente un radical acétyle, peuvent être extraites des feuilles d'ifs et constituent des matières premières intéressantes dans l'hémisynthèse du paclitaxel (Taxol ® ), du docetaxel (Taxotèrc ® ) et de leur dérivés.

Cependant, la 10-DAB est plus facilement accessible, et est extraite des feuilles en plus grande quantité que la baccatine III.

Il est connu, d'après les travaux de F. Guéritte-Voegelein et al., Tetrahedron, 42, 4451-4460 ( 1986), que l'acétylation de la 10-DAB avec l'anhydride acétique est peu sélective. Lorsque la réaction a lieu dans des conditions opératoires douces (24 heures à 20°C) il se forme un mélange équimolaire de dérivés 7-monoacétylé et de 7,10-diacétylé. Des conditions plus vigoureuses (48 heures à 60°C) conduisent à la formation de 7,10-diacétylé et de 7,10,13-triacétylé en quantités égales. A une température plus élevée (24 heures à 80°C), il se forme exclusivement le dérivé 7,10,13-triacétylé.

Il est encore connu selon J-N. Denis et A. E. Greene, J. Am. Chem. Soc. 1 10, 5917- 5919 (1988) que la 10-DAB peut être acétylée en position 10 par le chlorure d'acétyle à condition de protéger au préalable et de façon sélective, l'hydroxyle en 7 avec un groupe triéthylsilyle.

Dans la demande internationale PCT WO 95/26961 est décrite la préparation de la baccatine III à partir de la 10-DAB en trois étapes : protection de l'hydroxyle en

7 par action d'un halogénure de trialkylsilyle. acetylation de l'hydroxyle en 10 par l'anhydride acétique, et enfin déprotection du groupe trialkylsilyle en 7 au moyen d'acide trifluoroacétique.

En tenant compte de ces résultats, il s'ensuit que toute réaction permettant la différenciation entre les hydroxyles libres en positions 7 et 10 de la 10-DAB ou de ses dérivés, notamment l'acylation sélective, est de grande importance dans la synthèse de taxoïdes.

La présente invention décrit, pour la première fois, une réaction de monoacylation sélective de l'hydroxyle en position C-10 de la désacétyl- 10 baccatine III ou de ses dérivés en C-2 et/ou en C-4.

Il est connu d'après W. Kantlehner, Adv. Org. Chem., vol. 9, part 2, 65-141 et 181-277 (1976), que les halogénométhylène iminiu s peuvent réagir avec les alcools pour donner les halogénures d'alkoxyméthylène iminium intermédiaires, qui conduisent après hydrolyse aux esters correspondants avec élimination d'une alkylamine.

Il a maintenant été trouvé, que la désacétyl- 10 baccatine III ou ses dérivés en C-2 et/ou en C-4, peuvent être monoacylés sélectivement en position 10 en utilisant un sel de méthylène iminium répondant à la formule générale (II) :

dans laquelle R ₂ représente :

- un atome d'hydrogène,

- un radical alkyle droit, ramifié ou cyclique contenant 1 à 12 atomes de carbone,

- un radical alkényle droit, ramifié ou cyclique contenant 2 à 12 atomes de carbone, - un radical alkynyle droit ou ramifié contenant 3 à 12 atomes de carbone,

- un radical aryle,

- un groupe alkoxy, alkylamino, alkylthio, alkyloxy carbonyle, alkylaminocarbonyle ou alkylthiocarbonyle dont la partie alkyle contient 1 à 12 atomes de carbone, ou

- un radical hétérocyclique, saturé ou insaturé, contenant 5 à 6 chaînons et un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi le soufre, l'oxygène ou l'azote, ces radicaux étant éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi :

- les atomes d'halogène,

- les radicaux alkyles ou halogénoalkyles,

- les radicaux aryles, - les groupes alkylamino, pipéridyle, pipérazinyle, nitro ou cyano,

- les groupes alkoxy ou alkoxycarbonyles, les parties alkyles des différents radicaux contenant 1 à 12 atomes de carbone, et

- les radicaux hétérocycliques, saturés ou insaturés, contenant 5 à 6 chaînons et un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi le soufre, l'oxygène ou l'azote, ou bien

R ₂ et R ₃ ou R ₂ et R ₄ peuvent former avec l'atome d'azote et le carbone méthylénique, un cycle comportant 4 à 7 chaînons, tels que la 2-pipéridone, 2-azétidinone, la 2-pyrrolidinone, le caprolactame.

R ₃ et R ₄ , identiques ou différents, représentent chacun :

- un atome d'hydrogène, - un radical alkyle droit, ramifié ou cyclique contenant 1 à 12 atomes de carbone,

- un radical alkényle droit, ramifié ou cyclique contenant 2 à 12 atomes de carbone,

- un radical alkynyle droit ou ramifié contenant 3 à 12 atomes de carbone, ou

- un radical aryle, ou bien

R ₃ et R ₄ peuvent former avec l'atome d'azote un hétérocycle contenant 4 à 6 chaînons, saturé ou insaturé, éventuellement substitué,

X représente un atome d'halogène ou un groupe phosphinyloxy, phosphoranyloxy, halogénosulfinyloxy, halogénosulfonyloxy, alkylsulfonyloxy, arylsulfonyloxy. alkylaminosulfonyloxy, alkylcarbonyloxy, arylcarbonyloxy, halophosphinyloxy, halophosphoranyloxy, haloalkylsulfonyloxy, haloalkylcarbonate,

Y ^" représente un ion sélectionné parmi les halogénures, les alkylsulfonates, les arylsulfonates, les alkylaminosulfonates, les alkylcarboxylates, les arylcarboxylates et les phosphorodihalogénidates, ou [M(Z) _n ] ^~ dans lequel 4 < n < 6, Z est un atome d'halogène et M est un élément du tableau périodique pouvant avoir un degré d'oxydation égal ou supérieur à 3 et de préférence compris entre 3 et 5.

Plus particulièrement, X représente :

- un atome d'halogène tel qu'un atome de fluor, de chlore, de brome ou d'iode,

- un groupe (Hal) ₄ P-O-, (Hal) ₂ PO-O-, (Hal)SO-O-, (Hal)SO O-, R _a SO ₂ -O- ou R _a CO ₂ dans lesquels R _a représente un radical alkyle, linéaire, ramifié ou cyclique, un radical halogénoalkyle, un radical aryle éventuellement substitué par un atome d'halogène ou par un radical alkyle ou nitro, et Hal représente un atome d'halogène choisi parmi les atomes de fluor, de chlore, de brome ou d'iode,

Y représente : - un ion halogénure tel qu'un ion fluorure, chlorure, bromure ou iodure,

- un contre-ion tel que R _a CO ₂ , R _a SO ₃ ou (Hal) ₂ PO , dans lequel Hal et R _; , sont définis comme ci-dessus, ou

- une entité telle que [M(Z) _n ] ^~ dans laquelle 4 < n < 6, Z est un atome d'halogène tel qu'un atome de fluor ou de chlore, et M est un élément du tableau périodique pouvant avoir un degré d'oxydation égal ou supérieur à 3, sélectionné parmi l'aluminium, le bore, l'antimoine, l'étain et le titane.

Plus particulièrement, dans la formule générale (II), R ₂ peut représenter un atome d'hydrogène ou un radical méthyle, éthyle ou un radical phényle.

A titre d'exemple les sels suivants peuvent être utilisés : le trifluorométhanesulfonate de N,N-diméthyl trifluorométhanesulfonyloxy- 1 méthylidène-ammonium : )

. CH,

\

-N ^' CF,SO,

CF ₃ SO ₃ H,

le trifluorométhanesulfonate de N-méthyl trifluorométhanesulfonyloxy- 1 éthylidène- ammonium: )

CH,

/ CF _r SO,

CF ₃ SO, ^" CH,

le chlorure de N-méthyl p-toluènesulfonyloxy- 1 éthylidène-ammonium : (R ₂ =R ₃ =CH ₃ ,

R ₄ =H, X=p-CH ₃ -C ₆ H ₄ -SO ₃ , Y ^' =Cl ^" ) ou le p-toluènesulfonate de N-méthyl chloro- 1 éthylidène-ammonium : (R ₂ =R ₃ =CHι,

R,=H, X=C1, Y ^" = p-CH -C ₆ H ₄ -SO ₃ ^~ )

CH, CH

Cl p-CH,-C _f H SO, p-CH -C,H ₄ » Y CH, Cl CH,

le chlorure de N-méthyl chloro-1 éthylidène-ammonium : (R ₂ =R ₃ =CH ₃ , i≈H, X=C1, Y ^' ≈Cl ^" )

le chlorure de N-éthyl méthanesulfonyloxy- 1 éthylidène-ammonium : (R ₂ =CH ₃ ,

R ₃ =C ₂ H ₅ , R ₄ =H, X=CH ₃ SO ₃ , γ-=Cl ^" ) ou le methanesulfonate de N-éthyl chloro- 1 éthylidène-ammonium : (R ₂ =CH ₃ , R ₃ =C ₂ H ₅ , H, X=C1, Y ^" = CH ₃ SO ₃ - )

CH, CH.

Cl ^{^>} CH _J SO _J

CH,SO, ,H, Cl C _J H _J

le chlorure de N-éthyl dichlorophosphinyloxy- 1 éthylidène-ammonium : (R ₂ =CH ₃ , ou le dichlorophosphoridate de N-éthyl chloro- 1 éthylidène-ammonium : (R ₂ =CH ₃ , R ₃ =C ₂ H ₅ , P =H, X=C1, Y ^' =Cl ₂ PO ₂ - )

le p-toluènesulfonate de N,N-diéthyl p-toluènesulfonyloxy- 1 éthylidène-ammonium : (R ₂ =CH ₃ , R ₃ =R ₄ =C ₂ H ₅ , X= p-CH ₃ -C ₆ H ₄ -SO ₃ , Y ^" = p-CH _r C ₆ H ₄ -SO-f )

Ces sels peuvent être préparés selon des méthodes décrites dans la littérature ou en s'inspirant de celles-ci [voir par exemple W. Kantlehner, Adv. Org. Chem.. vol. 9, part 2, 5-64 et 65-141 (1976), R. L. N. Harris, Synthesis, 841 -842 (1980), H. S. Mosher et al., Synthetic Commun., JJ., 733-736 (1981 ), A. G. Martinez et al., J. Chem. Soc, Chem. Commun., 1571 -1572 ( 1990), H. Heaney et al., Tetrahedron, 49, 4015-4034 (1993), et P. L. Fuchs et al. J. Org. Chem., 59, 348-354 ( 1994)].

Les sels de méthylène iminiums (II) sont préparés par mise en contact d'une amide de formule

O

R.

. N R

R,

avec un réactif électrophile de formule XY. Ils peuvent être isolés ou formés « in situ ». L'amide peut être utilisée à la fois comme réactif et comme solvant réactionnel.

Selon l'invention, les sels de méthylène iminiums peuvent réagir avec la 10- DAB et/ou ses dérivés en C-2 et C-4 de formule générale (III) :

dans laquelle m peut être égal à 0 ou 1 ,

R et R ₅ , identiques ou différents représentent :

-un radical alkyle droit, ramifié ou cyclique contenant 1 à 8 atomes de carbone, -un radical alkényle droit, ramifié ou cyclique contenant 2 à 8 atomes de carbone, -un radical alkynyle droit, ramifié ou cyclique contenant 3 à 8 atomes de carbone,

- un radical aryle, ou

- un radical hétérocyclique, saturé ou insaturé, contenant 4 à 6 chaînons avec un ou plusieurs hétéroatomes choisis parmi les atomes d'oxygène, d'azote ou du soufre, ces radicaux étant éventuellement substitués par un ou plusieurs substituants choisis parmi :

- les atomes d'halogène tel que les atomes de fluor, de chlore, de brome ou d'iode,

- les radicaux alkyles, hydroxy, alkoxy, alkylthio, alkylamino, halogénoalkyles, halogenoalkoxy, halogenoalkylthio dont la chaîne alkyle contient 1 à 4 atomes de carbone, ou

- les radicaux hétérocycliques ayant de 4 à 6 chaînons comportant un ou plusieurs hétéroatomes choisi parmi les atomes d'oxygène, d'azote ou du soufre, éventuellement substitués,

- les radicaux aryles éventuellement substitués,

- les groupes cyano, nitro ou azido, ou

- les groupes carboxy ou alkoxycarbonyles dont la partie alkyle contient 1 à 4 atomes de carbone,

pour fournir un produit de formule générale (V) :

dans laquelle R, R ₂ et R5 sont définis comme précédemment, en passant intermέdiairement par un produit de formule générale (IV) :

dans laquelle m, R, R ₂ , R ₃ , Rt, Rs, X ^" et Y ^' sont définis comme précédemment qui est hydrolyse en produit de formule générale (V).

Les composés de formule générale (III) sont définis selon renseignement des demandes internationales PCT WO 94/20484 et WO 95/33736.

Selon une meilleure manière de mise en oeuvre de l'invention on utilise un excès de réactif électrophile et/ou d'amide par rapport au substrat de formule (III).

Selon un mode préférentiel, l'excès de réactif électrophile est inférieur ou égal à

10 équivalents et encore plus préférentiellement voisin de 5 équivalents par rapport au réactif de formule générale (III).

Généralement, la réaction est mise en oeuvre dans un solvant organique choisi parmi les hydrocarbures aliphatiques halogènes, de préférence les hydrocarbures aliphatiques chlorés tels que le dichlorométhane ou le dichloro- l ,2-éthane, les hydrocarbures aromatiques tels que le benzène, le toluène ou le xylène, les éthers aliphatiques tels que l'éther éthylique ou l'éther isopropyliquc, les nitriles aliphatiques tels que l'acétonitrile ou les amides aliphatiques tels que le N,N-diméthylformamide, le N,N-diméthylacétamide, le N-éthylacétamide et le N,N-diéthylacétamide. Il est particulièrement avantageux d'effectuer la réaction dans l'amidc aliphatique qui est utilisé pour la préparation des sels de méthylène iminiums (II).

Généralement, le procédé selon l'invention est mis en oeuvre à une température comprise entre -78°C et la température de reflux du mélange réactionnel et de préférence entre -20°C et 25°C.

Il peut être avantageux de mettre en oeuvre le procédé en présence d'une base minérale ou organique choisie parmi la pyridine, les trialkylamines, les N- alkylmorpholines, les carbonates ou les hydrogénocarbonates de métaux alcalins.

L'hydrolyse des sels d'iminium de formule générale (IV) en produit de formule générale (V) peut être effectuée à l'eau ou au moyen d'une solution aqueuse d'une base minérale ou organique telle que la soude, la pyridine, la triéthylamine, l'acétate de sodium, le carbonate de sodium ou l'hydrogénocarbonate de sodium.

Les composés de formule générale (V) sont particulièrement utiles pour la préparation des composés de formule générale (VI) :

dans laquelle, m, R, R ₂ et R ₅ sont définis comme précédemment,

R ₆ représente un atome d'hydrogène, ou forme une liaison avec R ₇ conduisant ainsi a une double liaison entre C-6 et C-7, R ₇ représente :

- un atome d'hydrogène,

- un atome d'halogène, ou

- un groupe hydroxy, OR _x , ou O-COR- dans lesquels R _x représente un atome d'hydrogène ou un radical alkyle droit, ramifié ou cyclique contenant 1 à 8 atomes de carbone, un radical alkényle droit, ramifié ou cyclique contenant 2 à 8 atomes de carbone, un radical alkynyle droit ou ramifié contenant 3 à 8 atomes de carbone, ou un radical aryle, étant entendu que ces radicaux peuvent être éventuellement substitués, ou

- un groupe augmentant l'hydrosolubilité de formule générale -O-CO-A-COR _y ,

dans laquelle A est un radical alkényle, cycloalkényle ou aryle comportant au moins une double liaison,

R _y représente :

- un groupe hydroxyle,

- un groupe alkylamino, alkylaminoalkyloxy, alkylaminoalkylthio, N,N- dialkylaminocarbonylalkoxy contenant 1 à 4 atomes de carbone éventuellement substitué, et

R ₈ représente un radical méthyle ou forme un cyclopropyle avec R ₇ .

La baccatine III de formule générale (V) obtenue selon la présente invention est utilisée, en particulier, pour la préparation de produits de formule générale (VI) dans laquelle R ₂ représente un radical méthyle, R ₆ représente un atome hydrogène, R ₈ et R ₇ forme un cyclopropyle, m est égal à 1 , R représente un radical phényle et R représente un radical méthyle, soit par action de l'anhydride trifluorométhanesulfonique, puis d'un halogénure de métal alcalin (chlorure de sodium, iodure de sodium, fluorure de potassium), ou avec l'azoture de métal alcalin (azoture de sodium), ou avec le sel d'ammonium quaternaire ou avec un phosphate de métal alcalin, soit par action du DAST ("diethylaminosulfur trifluoride")

Il est particulièrement avantageux d'utiliser la baccatine III ou ses dérivés de formule générale (VI) obtenus selon le procédé de la présente invention, pour la préparation des taxoïdes thérapeutiquement actifs, dont la fonction hydroxyle en 7 est éventuellement modifiée, de formule générale (VII) :

dans laquelle m est égal à 1 , R représente un radical phényle, R ₂ , R représentent un radical méthyle, R _ή représente un atome d'hydrogène,

R ₇ représente des substituants tels que définis précédemment,

R ₈ peut représenter un radical méthyle ou former avec R? un cyclopropyle, et de préférence Ar représente un radical phényle et R ₉ représente un radical t-butoxy ou phényle.

Plus particulièrement, la baccatine III ou ses dérivés en C-7, préparés selon le procédé de la présente invention, peuvent être utilisés pour la synthèse du paclitaxel (Taxol ® ) ou du dérivé de formule générale (VII) dans laquelle m est égal à 1 , R représente un radical phényle, R ₂ et R ₅ représentent chacun un radical méthyle, R« représente un atome d'hydrogène, R» et R ₇ forment un cyclopropyle, Ar représente un radical phényle et R ₉ représente un radical t-butoxy comme décrit dans la demande internationale WO 94/13654.

Les exemples suivants illustrent la présente invention.

EXEMPLE

Préparation du 4-acétoxy-2α-benzoyloxy-5β,20-époxy-10β-formyloxy-l,7β ,l 3 - trihydroxy-9 oxo-tax-1 1-ène

Dans un monocol de 50 ml, muni d'un thermomètre et d'une agitation magnétique, on charge sous atmosphère d'azote 12 ml de N,N-diméthylformamide (155 mmol), 0,495 ml de pyridine (6,1 mmol) et 3 g de 4-acétoxy-2α-benzoyloxy-5β ,20-éρoxy-l ,7β,10β,13α-tétrahydroxy-9-oxo-tax-l l -ène ( 10-DAB) à 97,7% (5,4 mmol). Apres refroidissement à -20°C, on ajoute en 10 minutes par l'intermédiaire d'une seringue 1,08 ml d'anhydride triflique (6,4 mmol). Le mélange réactionnel est maintenu pendant 10 minutes à -20°C puis on hydrolyse avec 60 ml d'eau. Après 3 heures à 0°C, la suspension est filtrée et le produit obtenu est séché

sous pression réduite à température ambiante pendant une nuit. On obtient ainsi, avec un rendement d'environ 90%, 2,87 g (4,9 mmoles) de 4-acétoxy-2α-benzoyloxy-5β ,20-époxy-10β-formyloxy-l,7β,13α-trihydroxy-9-oxo-tax-l 1-ène dont la pureté déterminée par CLHP est de 97%, et dont les caractéristiques sont les suivantes :

- spectre de RMN Η (400 MHz, CDC1 ₃ , δ en ppm) : 1 ,1 1 (s, 3H, CH ₃ ) ; 1, 13 (s, 3H, CH ₃ ) ; 1,69 (s, IH, OH-1) ; 1,71 (s, 3H, CH ₃ ) ; 1,87 et 2,58 (2 m, IH chacun, CH ₂ -6) ; 2,08 (s, 3H, CH ₃ ) ; 2,18 (d, J = 5,0 Hz, IH, OH-13) ; 2,25 (d, J = 5,0 Hz, IH, OH-7) ; 2,29 (s, 3H, COOCH ₃ ); 2,32 (d, J = 9,0 Hz, 2H, CIL- 14) ; 3,91 (d, J = 7,0 Hz, I H, H-3) ; 4, 16 et 4,33 (2d, J = 8,5 Hz, IH chacun, CTL-20) ; 4,47 (m, IH, H-7) ; 4,91 (m, IH, H- 13) ; 5.00 (d large, J = 10,0 Hz, IH, H-5) ; 5,64 (d, J = 7,0 Hz, IH, H-2) ; 6,46 (s, IH, H- 10) ; 7,50 (t, J = 7,5 Hz, 2H, H-méta dans C H ₅ COO) ; 7,64 (t, J = 7,5 Hz, IH, H-para dans C H ₅ CO) ; 8.13 (d, J = 7,5 Hz, 2H, H-ortho dans H<CO) ; 8;23 (s, I H, HCO).

- spectre IR (KBr, v en cm ^"1 ) : 3622 et 3517 (OH de H ₂ O) ; 3400 (OH alcools + H ₂ O) ; 3061 et 3019 (CH aromatiques) ; 2990 à 2850 (CH ₂ , CH,) ; 1739 (C=O acétate) ; 1715 (C=O formiate + cétone) ; 1704 (C=0 benzoate) ; 1271 (O-C=O benzoate) ; 1250 (O-C=O acétate) ; 1 156 (O-C=0 formiate) ; 1 100 à 1000 (C-O alcools) ; 977 (C-0 oxétane) ; 719 (CH aromatiques).

- spectre de masse (NH ₃ ) M/Z: 590 (M+NH ₄ ⁺ ); 573 (M+H ⁺ ); 544 (M-CHO+NH ₄ ⁺ ); 527 (544-OH).

EXEMPLE 2

Préparation du 4, 10β-diacétoxy-2α-benzoyloxy-5 β,20-époxy- 1 ,7β, 13α-trihydroxy-9- oxo-tax- 1 1 -ène (baccatine III)

Dans un réacteur double-enveloppe de 250 ml, muni d'un thermomètre et d'une agitation magnétique, on charge sous azote 60 ml de N-éthylacétamide (627 mmol). Après refroidissement à -20°C, on ajoute en 15 minutes par l'intermédiaire d'une seringue 7,2 ml de chlorure de mésyle (92 mmol). La solution est maintenue pendant 30 minutes à -20°C puis pendant environ 17 heures à 0°C. On ajoute à la solution, à 0°C, 10 g (10,7 mmoles) de 4-acétoxy-2α-benzoyloxy-5β,20- époxy-l ,7β,10β,13α-tétrahydroxy-9-oxo-tax-l l-ène (10-DAB) à 97,5 % puis la suspension est maintenue sous agitation pendant 30 heures à 0°C. Après transfert dans un réacteur de 1 litre, on ajoute dans le mélange réactionnel, une solution de 15 g d'acétate de sodium dans 300 ml d'eau puis la suspension obtenue est maintenue pendant 25 heures à température ambiante. L'analyse par CLHP d'un aliquot du mélange réactionnel permet de détecter moins de 1 % des dérivés monoacétylé en 7 et diacétylé en 7,10. Après filtration, le produit est lavé successivement trois fois avec 50 ml d'eau et séché une nuit à 50°C sous pression réduite. On obtient ainsi, avec un rendement de 79 %, 9 g (14,1 mmoles) de 4, 10β-diacétoxy-2 -benzoyloxy-5β,20- époxy-l,7β,13 -trihydroxy-9-oxo-tax-l 1-ène dont la pureté est de 92%, et dont les caractéristiques sont les suivantes :

- spectre de RMN Η (400 MHz, CDC1 ₃ , δ en ppm) : 1 , 12 (s, 6H, CH ₃ ) ; 1 ,68 (s, 4H, CH et OH-1 ) ; 1 ,88 et 2,58 (2 m, I H chacun, CH ₂ -6) ; 2,08 (s, 3H, CH ₃ ) ; 2,27 et 2,3 1 (2 s, 3H chacun, CH ₃ CO et CH ₃ COO) ; 2,32 ( d, J = 9,0 Hz, 2H, CH ₂ - 14) ; 3,90 ( d, J = 7,0 Hz, I H, H-3) ; 4,17 et 4,33 (2 d, J = 8,5 Hz, I H chacun, CH ₂ -20) ; 4,48 (dd, J = 1 1 ,0 Hz et 7,0 Hz, IH, H-7) ; 4,91 (t large, J = 9,0 Hz , I H, H- 13) ; 5,00 (d large, J= 10,0 Hz, IH, H-5) ; 5,64 (d, J = 7,0 Hz, IH, H-2) ; 6,34 (s, I H, H- 10) ; 7,50 (t, J = 7,5 Hz, 2H, H-méta dans C ₆ H ₅ COO) ; 7,64 (t, J = 7,5 Hz, IH, H-para dans C ₆ H _s COO) ; 8, 13 (d, J = 7,5 Hz, 2H, H-ortho dans C ₆ H ₅ COO).

- spectre IR (KBr, v en cm ^"1 ): 3400 (OH alcools + H ₂ O) ; 3071 (CH aromatiques) ; 2990 à 2850 (CH ₂ et CH ₃ ) ; 1730 (C=O acétate) ; 1712 (C=O formiate + cétone + benzoate) ; 1271 (O-C=O benzoate) ; 1243 (O-C=0 acétate) ; 1 100 à 1000 (C-0 alcools); 982 (C-O oxétane) ; 710 (CH aromatiques). - spectre de masse (NH ₃ ) M/Z: 604 (M+NH ₄ ⁺ ); 587 (M+H ⁺ ); 544 (M- CH ₃ COOH+NH ₄ ⁺ ); 527 (M+CH ₃ COOH+H ⁺ ); 509 (M-CH ₃ COOH-H ₂ O+H ⁺ ).

EXEMPLE 3

Dans un erlenmeyer de 25 ml, muni d'une agitation magnétique, on charge sous azote 3,9 g de N-méthylacétamide (53 mmol) et 5 ml de 1 ,2-dichloroéthane. Après refroidissement à -10°C, on ajoute 0,42 ml d'anhydride triflique (2,5 mmol) puis la solution est maintenue pendant 30 minutes à -10°C puis pendant 1 heure à 0°C. On ajoute à la solution, à 0°C, 0,5 g (environ 0,9 mmol) de 4-acétoxy-2α-benzoyloxy-5β, 20-époxy-l,7β,10β,13α-tétrahydroxy-9-oxo-tax-l l-ène (10-DAB). Le mélange réactionnel résultant est maintenu sous agitation pendant une nuit à 0°C. On ajoute alors 15 ml d'une solution aqueuse d'acétate de sodium à 5% et puis maintient une nuit à température ambiante. Le mélange réactionnel est dilué par addition de 1,2- dichloroéthane jusqu'à dissolution complète. La phase organique est séparée par décantation puis le solvant est évaporé sous pression réduite. Dans l'extrait obtenu, on dose par CLHP environ 33mg de 4,10β-diacétoxy-2α-benzoyloxy-5β,20-époxy-l ,7β ,13α-trihydroxy-9-oxo-tax-l 1-ènc (baccatine III). Le rendement est voisin de 6 %.

EXEMPLE 4 Dans un erlenmeyer de 25 ml, muni d'une agitation magnétique, on charge sous azote à température ambiante 5 ml d'acétonitrile, 3,9 g de N-méthylacétamide (53 mmol) et 0,9g de chlorure de tosyle (4,7 mmol) puis la solution est maintenue pendant 20 minutes à température ambiante. On ajoute à la solution obtenue 0,5 g (environ 0,9 mmol) de 4-acétoxy-2α-benzoyloxy-5β,20-époxy-l ,7β,10β, 13α- tétrahydroxy-9-oxo-tax-l 1-ène ( 10-DAB), puis le mélange réactionnel est maintenu sous agitation pendant environ 17 heures à température ambiante. On ajoute alors 15 ml d'une solution aqueuse d'acétate de sodium à 5% puis on maintient sous agitation pendant une nuit à température ambiante. L'analyse CLHP d'un aliquot ne permet pas de détecter de dérivés monoacétylé en 7 ou de diacétylé en 7,10 par. Le mélange réactionnel est extrait avec du 1 ,2-dichloroéthane, la phase organique est séparée après décantation et le solvant est évaporé sous pression réduite. Dans l'extrait obtenu, on dose par CLHP environ 86 mg de 4,10β-diacétoxy-2α- benzoyloxy-5β,20-époxy-l,7β,13α-trihydroxy-9-oxo-tax-l 1 -ène (baccatine III), soit un rendement d'environ 16%.

EXEMPLE 5

Dans un erlenmeyer de 25 ml, muni d'une agitation magnétique, on charge sous azote à température ambiante 5 ml de 1 ,2-dichloroéthane, 3,9g de N- méthylacétamide (53 mmol). Après refroidissement à 0°C, on coule 0,4 ml de chlorure

d'oxalyle (4,6 mmol) puis la solution est maintenue pendant 25 minutes à 0°C (formation de gaz). On ajoute à la solution obtenue 0,5 g (environ 0,9 mmol) de 4- acétoxy-2α-benzoyloxy-5β,20-époxy- 1 ,7β, 1 Oβ, 13α-tétrahydroxy-9-oxo-tax- 1 1 -ène (10-DAB), puis le mélange réactionnel est maintenu sous agitation pendant environ 19 heures à 0°C. On ajoute alors 15 ml d'une solution aqueuse d'acétate de sodium à 5% et on maintient pendant une nuit à température ambiante. Le mélange réactionnel est extrait avec du 1 ,2-dichloroéthane. La phase organique est séparée par décantation et le solvant est évaporé sous pression réduite. Dans l'extrait obtenu, on dose par CLHP environ 212 mg de 4,10β-diacétoxy-2 -benzoyloxy-5β,20-époxy- l ,7β,13α- trihydroxy-9-oxo-tax-l 1-ène (baccatine III), soit un rendement d'environ 40%. On détecte 1 ,2% du dérivé monoacétylé en 7. Le dérivé diacétyié en 7, 10 n'est pas détecté.

EXEMPLE 6

Dans un erlenmeyer de 50 ml, muni d'une agitation magnétique, on charge sous azote à température ambiante 5 ml de 1 ,2-dichloroéthane et 1 ,5 g d'anhydride p- toluènesulfonique (4,5 mmol). Après refroidissement à 0°C, on ajoute 4 ml de N,N- diéthylacétamide (32 mmol) puis la solution est maintenue pendant 35 minutes à 0°C.

On ajoute à la suspension obtenue, 0,5 g (environ 0,9 mmol) de 4-acétoxy-2α- benzoyloxy-5β,20-époxy-l ,7β,10β,13α-tétrahydroxy-9-oxo-tax-l 1 -ène ( 10-DAB). Le mélange réactionnel est maintenu sous agitation pendant environ 1 heure et 30 minutes à 0°C puis 4 heures et 30 minutes à température ambiante. Un aliquot de la solution est prélevé et hydrolyse dans un mélange acétonitrile/eau (diluant CLHP). On dose ainsi par CLHP, dans la totalité de la solution, environ 347 mg de 4,10β-diacétoxy-2α- benzoyloxy-5β,20-époxy-l ,7β,13α-trihydroxy-9-oxo-tax-l l-ène (baccatine III), soit un rendement d'environ 66%. Aucun dérivé monoacétylé en 7 ni diacétyié en 7, 10, n'est détecté.

EXEMPLE 7

Dans un erlenmeyer de 25 ml, muni d'une agitation magnétique, on charge sous azote à température ambiante 4 ml de N-éthylacétamide (42 mmol) et 5 ml de 1,2-dichloroéthane. On ajoute 0,42 ml d'oxychlorure de phosphore (4,6 mmol). La solution est maintenue pendant 15 minutes à température ambiante. On ajoute à la solution 0,5 g (environ 0,9 mmol) de 4-acétoxy-2α-benzoyloxy-5β,20-époxy-l ,7β,10β ,13α-tétrahydroxy-9-oxo-tax-l 1-ène (10-DAB). Le mélange réactionnel résultant est

maintenu sous agitation pendant environ 3 heures. Un aliquot de la solution est prélevé et hydrolyse dans un mélange acétonitrile/eau (diluant CLHP). Dans la totalité de la solution, on dose par CLHP, environ 116 mg de 4,10β-diacétoxy-2α-benzoyloxy-5β ,20-époxy-l,7β,13α-trihydroxy-9-oxo-tax-l l-ène (baccatine III) soit un rendement d'environ 22%. On ne détecte pas de dérivés monoacétylé en 7 et de diacétyié en 7,10.