UTILISATION D'UN EXTRAIT DE BOERHAVIA DIFFUSA POUR APAISER

LA PEAU

La présente invention concerne l'utilisation cosmétique d'un extrait purifié de Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques, en tant que principe actif pour une activité cosmétique apaisante de la peau.

L'invention se rapporte également à un procédé d'obtention d'un extrait purifié de Boerhavia diffusa, au principe actif obtenu par ce procédé, ainsi qu'à des compositions cosmétiques incluant un extrait de Boerhavia diffusa et à un procédé cosmétique.

La peau sensible est un désordre cosmétique très fréquent, qui touche essentiellement la peau du visage, mais qui peut atteindre également d'autres zones du corps.

Les individus à peau sensible, se plaignent de signes d'inconfort cutané qui se traduisent par des sensations désagréables d'échauffements, de brûlures, de picotements, de fourmillements ou de démangeaisons, associés parfois à des rougeurs fugaces. C'est pourquoi l'objectif de la présente invention est d'apaiser et d'améliorer le confort cutané des peaux sensibles.

Pour y répondre, l'invention vise l'utilisation cosmétique d'un extrait purifié de Boerhavia diffusa, riche en composés hydroxybenzoïques, en tant que principe actif pour la préparation d'une composition cosmétique, ledit extrait de Boerhavia diffusa et/ou la composition l'incluant étant destinée à apaiser la peau et à augmenter le confort cutané.

Le Boerhαviα diffusa, également connu sous le nom « Punarnava » ou « Erva Tostâo », est une plante traditionnellement utilisée en médecine ayurvédique. Présente notamment dans l'Himalaya, elle est très populaire en Inde tant pour ses feuilles, que ses racines et ses graines. Elle est également utilisée dans d'autres pays d'Asie, d'Afrique et d'Amérique du Sud dont le Brésil.

Les utilisations connues de Boerhavia diffusa sont culinaires et médicinales : traitement de la maladie « Piles » dans l'Himalaya, lutte contre la dysenterie au Madhya Pradesh, lutte contre la leucorrhée, les rhumatismes et les maux d'estomac en Uttar Pradesh, nettoyage du système rénal, traitement des faiblesses séminales et pression sanguine au Népal, et enfin lutte contre l'asthme, les problèmes urinaires et les désordres d'inflammation interne. En pharmacopée indienne, le Boerhavia diffusa contient de l'eupalithine glycoside qui a une action anti-inflammatoire. En revanche, aucune application cosmétique n'est connue. Or, de façon surprenante, le Boerhavia diffusa présente des propriétés remarquables au niveau de la peau.

En particulier, il s'avère qu'un extrait purifié de Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques et dépourvu d'eupalithine glycoside est extrêmement efficace en tant que principe actif dans une composition cosmétique pour apaiser la peau agressée, pour lutter contre une inflammation neurogénique cutanée, par exemple en réduisant des sensations de picotement de la peau et/ou diminuant des érythèmes cutanés.

La sensibilité cutanée correspond à un abaissement du seuil de tolérance de la peau à des stimuli physiques ou chimiques habituellement tolérés, tels que des facteurs environnementaux (variation de température, soleil, pollution, etc.), des facteurs internes (émotions, cycles menstruels, alimentation, etc.), ou encore l'application de certains produits topiques.

Lorsque le seuil critique de tolérance est dépassé, la peau exposée quotidiennement à divers stimuli, déclenche via son système immuno-cutané une réponse biologique organisée et non spécifique. Cette réponse ou réaction inflammatoire est un processus complexe et crucial : elle doit être à la fois efficace pour permettre à la peau de résister aux agressions extérieures et maintenir son intégrité, et mesurée pour éviter l'apparition de lésions tissulaires. Cet équilibre délicat est assuré par l'action de médiateurs pro- et antiinflammatoires. Lorsque le seuil aux divers stimuli que subit quotidiennement la peau est dépassé, les kératinocytes, équipés de récepteurs nociceptifs perçoivent le stress. Ainsi activés, les kératinocytes initient localement la réaction inflammatoire via la libération de médiateurs initiaux tels que les cytokines interleukines-la (IL-Ia) et le Tumor Necrosis a (TNF-a). Ces deux médiateurs initiaux vont propager et amplifier la réaction inflammatoire selon deux voies. La première voie induit une réponse cellulaire immédiate, à savoir l'activation des enzymes de formation des médiateurs lipidiques de l'inflammation, des leucotriènes (LT) et des prostaglandines (PG), en particulier les prostaglandines E2 (PGE2). Ces médiateurs lipidiques provoquent une série d'effets automnes et paracrines par l'intermédiaire de récepteurs spécifiques. Ils contribuent notamment à la vasodilatation, l'adhésion et la migration cellulaire.

La seconde voie de transduction implique des facteurs de transcription, comme le Nuclear Factor KB (NF-KB) qui induisent la synthèse de cytokines, molécules proinflammatoires. Le NF-κB est un hétérodimère cytoplasmique lié à un inhibiteur spécifique, la protéine IKB. La phosphorylation de IKB active le NF-κB qui est transféré du cytoplasme vers le noyau de la cellule et active la transcription de gènes codant pour des cytokines, des chimiokines et des molécules d'adhérence impliquées lors des réponses inflammatoires.

En outre, en parallèle de cette réaction inflammatoire, il existe un mécanisme neurogène de la sensibilité cutanée impliquant la mise en jeu des nerfs sensitifs épidermiques dont les terminaisons affleurent le stratum corneum. Activées par divers stimuli, les terminaisons nerveuses cutanées, ou fibres nociceptives, synthétisent et sécrètent des neuromédiateurs substances chimiques médiant l'information nerveuse et responsables de l'initiation du processus d'inflammation neurogénique. La peau produit des signaux neuroendocriniens tels que les prohormones propiomelanocortin POMC, agissant comme un système de défense cutanée coordonnant des réponses à l'inflammation cutanée. L'a-MSH (l'a-Melanocyte Stimulating Hormone) est une neurohormone synthétisée par les kératinocytes, qui provient du clivage protéolytique des précurseurs POMC. Elle joue un rôle important dans de nombreux processus biologiques, et notamment dans la régulation de l'inflammation. Son activité antiinflammatoire résulte de sa double capacité à inhiber la production et l'action des médiateurs pro-inflammatoires TNF-a, IL-I et NF-κB, et à stimuler l'expression des facteurs anti-inflammatoires. La libération d'a-MSH permet ainsi de réduire l'activation des récepteurs nociceptifs des cellules épidermiques et des fibres sensorielles cutanées. Il y a donc différents processus à l'origine des phénomènes de peaux sensibles. Aussi, pour répondre à son objectif, la présente invention propose d'utiliser un principe actif capable à la fois de limiter l'amplification de la réaction inflammatoire en réduisant la libération de médiateurs pro-inflammatoires, et d'agir sur l'inflammation neurogénique en stimulant la production d'une neurohormone anti-inflammatoire. En particulier, l'invention vise l'utilisation cosmétique d'un extrait de Boerhavia diffusa, présentant une teneur en composés hydroxybenzoïques supérieure à 50% des polyphénols totaux, en tant que principe actif, dans une composition cosmétique, capable de :

- limiter l'amplification de la réaction inflammatoire en réduisant la libération de médiateurs pro-inflammatoires PGE2 et en diminuant l'activation des NF-κB, et

- limiter l'inflammation neurogénique en stimulant la libération d'une neurohormone anti-inflammatoire a-MSH.

Préférentiellement l'extrait utile selon l'invention est dépourvu d'eupalithine glycoside.

Avantageusement, l'utilisation d'un extrait de Boerhavia diffusa selon l'invention permet de lutter contre l'inflammation cutanée et les phénomènes d'inconfort cutané des peaux sensibles.

L'utilisation d'un extrait de Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques selon l'invention permet notamment :

- de favoriser le retour de la sensibilité cutanée à un niveau comparable à celui d'une peau normale lors d'une inflammation neurogénique, en particulier de réduire des sensations de picotement et de diminuer un érythème cutané, et

- de présenter un effet apaisant, à la fois immédiat et à long terme, après une agression mécanique unique ou répétée.

Selon un autre aspect, l'invention vise une composition cosmétique destinée à apaiser la peau et augmenter le confort cutané, contenant un extrait de Boerhavia diffusa, présentant une teneur en composés hydroxybenzoïques supérieure à 50% des polyphénols totaux en tant que principe actif.

La composition selon l'invention peut contenir de 0,01 à 20 % d'au moins un extrait de Boerhavia diffusa, présentant une teneur en composés hydroxybenzoïques supérieure à 50%. L'administration d'une telle composition est de préférence effectuée par voie topique.

La composition selon l'invention peut se présenter sous forme de crèmes, émulsions huile-clans-eau, eau-dans-huile ou émulsions multiples, solutions, suspensions ou encore poudres.

L'invention vise aussi un procédé cosmétique destiné à apaiser la peau et à augmenter le confort cutané, à lutter contre une inflammation de la peau, à réduire des sensations de picotement de la peau, à diminuer des érythèmes cutanés, et/ou à apaiser la peau agressée, consistant à appliquer par voie topique sur la peau une composition contenant au moins un extrait de Boerhavia diffusa, présentant une teneur en composés hydroxybenzoïques supérieure à 50%. La présente invention est maintenant décrite en s'appuyant sur un exemple de procédé d'obtention d'extraits de Boerhavia diffusa particulièrement adaptés, et sur des résultats de tests effectués à partir de ces extraits.

1/ PROCEDE D'OBTENTION E>'UN EXTRAIT DE BOERHAVIA DIFFUSA SELON L 'INVENTION : Le procédé d'obtention comprend la succession des étapes suivantes : - solubilisation de poudre de racine de Boerhavia diffusa dans un mélange eau/butylène glycol 50/50,

- hydrolyse(s) enzymatique(s) simultanée(s) ou successive(s),

- séparation des phases soluble et insoluble,

- inactivation enzymatique par traitement thermique, - f iltration, et

- f iltration stérilisante.

La ou les hydrolyse(s) sont réalisées au moyen d'au moins une enzyme de type carbohydrase, choisie parmi les carbohydrases connues, disponibles dans le commerce.

/ CARACTERISATION E>'UN EXTRAIT E)E BOERHAVIA DIFFUSA SELON L'INVENTION :

2-1/ Matières sèches :

On mesure le taux de matières sèches par passage à l'étuve à 105 ⁰ C en présence de sable d'un échantillon de poids initial donné jusqu'à obtention d'un poids constant.

Le taux de matières sèches est compris entre 5 et 250 g/1, plus particulièrement entre 15 et 35 g/1.

2-2/ Mesure du pH :

Le pH mesuré par la méthode potentiométrique à température ambiante conduit à des valeurs comprises entre 2 et 7, plus particulièrement entre 4 et 5.

2-3/ Dosage des composés phénoliques

Le dosage est réalisé par lecture de l'intensité de coloration en présence de ferricyanure de potassium, intensité détectable à 715 nm et comparée à une gamme étalon d'acide gallique.

Le taux de polyphénols totaux est compris entre 0,07 et 4,0 g/l, plus particulièrement entre 0,20 à 0,55 g/l.

2-4/ Caractérisation des composés phénoliques

La caractérisation et la quantification des composés phénoliques du principe actif selon l'invention sont réalisées par HPLC (High Performance Liquid

Chromatography).

Le chromatogramme du principe actif selon l'invention montre la présence de composés hydroxycinnamiques, hydroxybenzoïque et de flavonoïdes, les proportions étant sensiblement de l'ordre des valeurs données dans le tableau suivant :

2-5/ Identification de la fraction active

Pour déterminer la ou les fractions actives, on utilise un composé chimique de façon à éliminer la totalité des polyphénols du principe actif selon l'invention.

On compare ensuite la capacité d'inhibition de la libération du médiateur pro-inflammatoire P&E2, de la fraction privée des polyphénols à celle du principe actif selon l'invention.

Testé à la même concentration, le principe actif selon l'invention présente une activité inhibitrice de la libération du médiateur pro-inflammatoire

PGE2 alors que la fraction privée des polyphénols n'a plus cette activité. Par conséquent, ce sont les composés phénoliques, fraction constituée majoritairement de composés hydroxybenzoïques, qui confèrent à l'extrait selon l'invention son activité d'inhibition de la prolifération bactérienne. 3/EVALUATION E)E L'EFFET E) ¹ UN EXTRAIT E)E BOERHAVIA DIFFUSA SELON L 'INVENTION

3-1/ Evaluation de l'effet sur la libération de PGE2

Cette étude a pour objectif d'évaluer l'effet d'un extrait de Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques selon l'invention, sur la libération de PGE2 lors d'une inflammation des cellules de la peau induite par l'acide arachidonique (AA).

L'étude est réalisée sur des cultures de kératinocytes humains soumis à une inflammation provoquée par un traitement à \'AA. L'effet du principe actif est

évalué sur sa capacité à limiter l'inflammation générée par I ¹ AA en mesurant par dosage Elisa le taux de PGE2 libérées.

Le protocole opératoire est le suivant.

A Jl, les kératinocytes humains normaux sont ensemencés dans des puits dans un milieu complet et incubés à 37°C pendant 2 jours.

A J3, le milieu de culture est éliminé et

- des cellules sont traitées avec 2,5μM d'AA dilué dans un milieu de culture en présence d'un extrait de Boerhavia diffusa selon l'invention à 0,5%, 1%, ou 2% ou en présence d'acide salicylique à 1% utilisé comme témoin positif.

- d'autres cellules sont traitées avec un milieu de culture en présence d'un extrait de Boerhavia diffusa selon l'invention à 0,5%, 1%, ou 2% ou en présence d'acide salicylique à 1% utilisé comme témoin positif.

Après 3 heures d'incubation, les surnageants cellulaires sont récupérés et le dosage de PGE2 est réalisé à l'aide d'un kit de dosage ELISA. Les résultats obtenus, exprimés en pg/ml et en pourcentage de PGE2 relargué par rapport au témoin traité avec XAA ₁ sont présentés dans le tableau suivant :

On constate que, soumis à une inflammation induite par l'acide arachidonique, les kératinocytes humains sécrètent signif icativement plus de PGE2. Les résultats obtenus montrent que l'extrait de Boerhavia diffusa selon l'invention permet de réduire significativement la libération de PGE2, limitant ainsi le phénomène d'inflammation. Cet effet est dose-dépendant.

3-2/ Evaluation de l'effet sur la translocation de NF-κB

Cette étude a pour objectif d'évaluer l'effet d'un extrait de Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques selon l'invention, sur l'activation du facteur de transcription NF-κB lors d'une inflammation des cellules de la peau induite par des esters de phorbol (TPA).

L'étude est réalisée sur des cultures de kératinocytes humains normaux soumis à une inflammation provoquée par un traitement avec des esters de phorbol (TPA : 12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate). L'effet du principe actif est évalué sur sa capacité à limiter l'inflammation en visualisant la translocation de NF-κB du noyau vers le cytoplasme des kératinocytes humains par immunocytof luorescence. Cette translocation correspond à l'activation de NF-κB. Le protocole opératoire est le suivant. A Jl, les kératinocytes humains sont ensemencés sur des lames de verre dans un milieu de culture et incubés à 37°C pendant 2 jours.

A J3, le milieu de culture est éliminé et les cellules sont traitées avec un extrait de Boerhavia diffusa selon l'invention à 0,5% ; 1% ou 2% dilué dans un milieu de culture.

Les cellules sont incubées à 37°C pendant 24 heures. A J4, le milieu de culture est éliminé et remplacé par un milieu contenant du TPA (12-O-tetradecanoylphorbol-13-acetate) pour induire l'inflammation et un extrait de Boerhavia diffusa selon l'invention à 0,5%, 1% ou 2%.

Après quelques heures d'incubation, on réalise un marquage immunocytologique de

NF-κB et on visualise l'immunomarquage sur un microscope couplé à un système d'analyse d'images. La visualisation de la translocation de NF-κB du cytoplasme vers le noyau est proportionnelle à l'intensité de coloration rouge présente dans les noyaux des kératinocytes. Plus la fluorescence est importante, plus la translocation de NF-κB est élevée et plus son activation est importante. Les résultats immunocytologiques étant qualitatifs, 4 niveaux d'expression de NF-κB ont été définis :

- Absence d'immunoréactivité dans le noyau - Faible détection d'immunoréactivité dans le noyau +

- Moyenne détection d'immunoréactivité dans le noyau ++

- Forte détection d'immunoréactivité dans le noyau +++

- Très forte détection d'immunoréactivité dans le noyau ++++

Les résultats obtenus sont présentés dans le tableau suivant

Ces résultats montrent qu'un extrait de Boerhavia diffusa selon l'invention testé à 2% sur kératinocytes humains traités avec le TPA, diminue nettement la translocation de NF-κB dans le noyau, c'est-à-dire son activation, ce qui permet de réduire l'inflammation.

3-3/ Evaluation de l'effet sur la synthèse de l'a-MSH

L'objectif de cette étude est d'évaluer la capacité d'un extrait de Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques selon l'invention, à stimuler la synthèse de l'a-Melanocyte Stimulating Hormone (a-MSH), neuromédiateur antiinflammatoire sécrété par les kératinocytes humains.

L'étude est réalisée par dosage ELISA sur culture de kératinocytes humains dont l'inflammation a été induite ou non avec une irradiation UV selon le protocole opératoire qui suit. A JO, des kératinocytes humains normaux sont ensemencés dans un milieu de culture adapté, puis incubés à 37°C. A J4, deux traitements sont réalisés :

- sans inflammation

Le milieu de culture est éliminé et les kératinocytes sont traités avec un milieu de culture dans lequel est dilué un extrait de Boerhavia diffusa selon l'invention à 0,5% ou 1%. Les cellules sont ensuite incubées à 37°C pendant 24 heures.

- avec inflammation

Le milieu de culture est éliminé et les kératinocytes sont traités avec un milieu de culture dans lequel est dilué un extrait de Boerhavia diffusa selon l'invention à 0,5% ou 1%. Les cellules sont soumises aux irradiations UVB. Après irradiation, le tampon est éliminé et remplacé par du milieu de culture dans lequel est dilué un extrait de Boerhavia diffusa selon l'invention à 0,5% et 1%. Les cellules sont ensuite incubées à 37°C pendant 24 heures. A J5, à la fin de l'incubation, les milieux de culture sont récupérés et concentrés. On effectue ensuite le dosage de I' a-MSH à l'aide d'un kit ELISA.

Les résultats obtenus avec et sans inflammation, exprimés en pg/ml et en pourcentage de taux d' a-MSH synthétisé par rapport à un témoin, sont présentés dans les tableaux ci-dessous :

sans inflammation

On constate que testé à 1%, un extrait de Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques selon l'invention permet d'augmenter significativement de 173% la synthèse de l'a-MSH, neuromédiateur anti-inflammatoire. - avec inflammation

Sur kératinocytes humains normaux dont l'inflammation a été induite par irradiations UVB, un extrait de Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques selon l'invention à 1% renforce la protection antiinflammatoire de la cellule en stimulant la synthèse de I' a-MSH. La stimulation de l'a-MSH est inférieure sur le modèle inflammé par rapport au modèle non-inflammé. Ceci pourrait être dû à la compétition entre les processus pro- et anti-inflammatoire mis en place simultanément lors de l'inflammation UV. 3-4/ Evaluation de l'effet apaisant in vivo

3-4-1/ Etude de la sensibilité à la caζ>saicine

Cette étude α pour but de caractériser in vivo l'effet apaisant d'un extrait de

Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques selon l'invention, formulé à 4% en émulsion, en réalisant un test de picotement, connu sous le nom de « stinging test ». Ce test consiste à déterminer et à percevoir les sensations de picotements engendrées par l'application d'une solution de capsàicine au niveau des ailes du nez. L'application de capsàicine conduit à un relarguage de neurotransmetteurs par les terminaisons nerveuses périphériques et entraîne l'apparition de sensations inconfortables telles que des picotements, des brûlures, des démangeaisons associées éventuellement à l'apparition de rougeurs sur la zone d'application.

L'étude est réalisée sur 16 volontaires sains, selon le protocole expérimental qui suit. On réalise tout d'abord un premier stinging test pour sélectionner les volontaires à peaux sensibles.

A t = 0, on applique sur les ailes du nez de chaque volontaire une solution hydroalcoolique de capsàicine d'un côté et une solution hydroalccolique seule sur l'autre côté. 10 secondes après l'application et ensuite toutes les 5 minutes, les volontaires évaluent les sensations perçues selon l'échelle numérique suivante : - 0 : absence de sensation

- 1 : sensations légères

- 2 : sensations modérées

- 3 : sensations sévères

A t - 2 heures, on applique sur les ailes du nez de chaque volontaire une solution hydroalcoolique de capsàicine sur le coté ayant eu la solution hydroalcoolique seule à t=0 et une solution hydroalccolique seule sur l'autre côté. 10 secondes après l'application et ensuite toutes les 5 minutes, les volontaires évaluent les sensations perçues selon la même échelle numérique.

Un score global de réactivité est calculé et seuls les volontaires réagissant positivement au « stinging test » sont sélectionnés.

Pendant 4 jours, les volontaires sélectionnés appliquent bioquotidiennement soit un placebo, soit un extrait de Boerhavia diffusa selon l'invention formulé à 4% en émulsion.

A J5 on réalise à nouveau un stinging test, comme celui réalisé avant le traitement.

Les résultats récapitulatifs sont présentés dans le tableau suivant :

On constate que, dans les conditions de l'étude, après 4 jours de traitement et en comparaison au placebo, un extrait de Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques selon l'invention formulé à 4% diminue de 44,5% les sensations d'inconf ort engendrées par une inflammation sur les ailes du nez. L'utilisation d'un extrait de Boerhavia diffusa limite ainsi l'inflammation provoquée par une substance neurogène type capsaicine et favorise le retour à une sensibilité cutanée comparable à celle d'une peau normale.

3-4-2/ Suivi de l'érythème après agression à la capsaicine

Le but de cette étude est d'évaluer in vivo la capacité d'un extrait de Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques selon l'invention, formulé à 4% en émulsion, à diminuer la sensibilité de la peau face à une agression avec une solution de capsaicine, substance neurogène.

Cette étude est réalisée sur 5 volontaires sains. L'effet est visualisé sur des photos numériques de la zone d'étude.

Entre JO et J4, les volontaires appliquent deux fois par jour soit un placebo soit un extrait de Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques formulé en émulsion à 4%, sur l'intérieur des avant bras.

A J5, des photographies des zones étudiées sont réalisées, puis on applique un patch contenant 50μl d'une solution hydroalcoolique de capsάidne à 3% pendant 5 minutes.

10, 30 et 60 minutes après le retrait du patch, des photographies des zones étudiées sont réalisées.

On constate que pour les zones traitées avec un extrait de Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques formulé en émulsion à 4%, comparé au placebo, il y a une forte réduction de l'érythème.

3-4-3/ Etude après-rasage : Evaluation de l'effet immédiat au niveau des joues après agression unique Le but de cette étude est d'évaluer in vivo l'effet apaisant d'un extrait de

Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques selon l'invention, formulé à 4% en gel-émulsionné, après une agression mécanique de type rasage.

L'effet immédiat post-rasage est étudié contre placebo, au niveau des joues.

L'étude est réalisée sur 27 volontaires sains de sexe masculin. L'effet apaisant immédiat est évalué par analyse de photographies numériques et par une évaluation des sensations perçues par les volontaires à l'aide d'un questionnaire.

Le protocole opératoire est le suivant.

De J- 14 à JO, les volontaires ne doivent appliquer aucune crème sur le visage. A JO, on réalise des photographies des joues des volontaires avant et après rasage. Le placebo ou l'émulsion contenant l'extrait selon l'invention sont ensuite appliqués en hémi-visage. Une troisième série de photographies est réalisée et les volontaires répondent au questionnaire d'auto-évaluation des sensations.

Sur les photographies, on constate une diminution de 22% de l'érythème après application immédiate de l'extrait selon l'invention, contre 2,5% après application du placebo.

Concernant l'évaluation subjective par le questionnaire, les résultats sont présentés dans le tableau suivant :

Dans les conditions de cette étude, l'utilisation d'un extrait de Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques selon l'invention permet donc de diminuer de 22% l'érythème induit par rasage. En outre, 50% des utilisateurs trouvent que l'utilisation d'un extrait de Boerhavia diffusa selon l'invention apaise le feu du rasoir.

3-4-4/ Etude après-rasage : Evaluation de l'effet long-terme au niveau du cou après agressions répétées Cette étude a pour objectif d'évaluer in vivo l'effet apaisant d'un extrait de Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques selon l'invention, formulé à 4% en gel-émulsionné, après des agressions mécaniques répétées de type rasage quotidien. L'effet à long terme est étudié contre placebo, au niveau du cou. L'étude est réalisée sur 21 volontaires sains de sexe masculin.

L'effet apaisant est évalué après 7 jours d'applications par des mesures de la couleur de la peau réalisées avec un chromamètre avant et après rasage, et par une évaluation des sensations perçues par les volontaires à l'aide d'un questionnaire.

Le chromamètre convertit les couleurs situées dans la plage de perception humaine en code numérique composé de trois paramètres, notamment le paramètre a qui correspond à la gamme des verts aux rouges. De J- 14 à JO, les volontaires ne doivent appliquer aucune crème sur le visage. A JO, on réalise des mesures chromamétriques au niveau de deux zones cutanées symétriques du cou avant et après rasage.

Entre JO et J6, le placebo ou l'émulsion contenant l'extrait selon l'invention sont appliqués une fois par jour après le rasage quotidien.

A J7, on réalise des mesures chromamétriques sur les zones étudiées avant et après rasage. Les volontaires répondent également au questionnaire d'auto- évaluation des sensations.

Les résultats sur les mesures chromamétriques sont présentés dans le tableau ci-dessous :

Concernant l'évaluation subjective par le questionnaire, les résultats sont présentés dans le tableau suivant :

Ces différents résultats montrent que l'extrait selon l'invention après 7 jours d'applications, permet de diminuer de 20% l'érythème induit après une agression mécanique répétée de façon régulière au niveau du cou. En outre 72% des utilisateurs trouvent que l'utilisation de l'extrait selon l'invention apaise le feu du rasoir.

4/ COMPOSITION COSMéTIQUE INCLUANT UN EXTRAIT DE BOERHAVIA DIFFUSA SELON

L'INVENTION :

La présente invention couvre aussi les compositions cosmétiques incluant un extrait de Boerhavia diffusa riche en composés hydroxybenzoïques, dans différentes formes galéniques, notamment gel, solution, émulsion, crème....

Il convient alors d'analyser la stabilité des formes galéniques incluant un extrait selon l'invention, ceci dans des proportions comprises entre 1 et 5 %.

La stabilité est caractérisée par une absence de précipitation de l'extrait, une absence de crémage et une absence de déphasage.

On peut citer des formulations ayant montré une stabilité physique incluant 5% d'un principe actif, extrait de Boerhavia diffusa selon l'invention.

Gel limpide : - Carbopol : 0,5% a^ec Triéthanolamine : qsp pH=6,5 - Glycérol : 10,0%

- Propylène glycol : 10,0%

- Conservateur : 1,0%

- Extrait de Boerhavia diffusa : 5,0%

- Eau : 73,5% Gel opaque : - Sépigel 305 : 3,0%

- Lαnol 99 : 12,0%

- Conservateur : 1,0%

- Extrait de Boerhavia diffusa : 5,0%

- Eau : 79,0% Gel émulsionné : - Montanov 202 : 3,0%

- Isopropyl palmitate : 10,0%

- Sepigel 305 : 2%

- Conservateur : 1,0%

- Extrait de Boerhavia diffusa : 5,0%

- Eau : 79,0%

Emulsion non ionique - Montane 60 : 2,0%

- Montanox 60 : 4,0%

- Isopropyl myristate : 8,0%

- Paraffin wax 130/135 : 3%

- Conservateur : 1,0%

- Extrait de Boerhavia diffusa : 5,0%

- Eau : 77,0%

Emulsion αnionique - Acide stéarique : 7% Triethanolamine qsp pH=8

- Ritaphyl ICS : 20,0%

- Conservateur : 1,0%

- Extrait de Boerhavia diffusa : 5,0%

- Eau : 67,0%

Emulsion cαtionique - Quaternium-82 : 5,0%

- Alcool cétylique : 1,0%

- Gemseal 60 : 8,0%

- Alcool cétéarylique : 1,0%

- PEG 100 stéarate : 1,0%

- Conservateur : 1,0%

- Extrait de Boerhavia diffusa : 5,0%

- Eau : 78,0%

De plus, des tests ont montré la compatibilité du principe actif avec les matières premières utilisées en cosmétique. On peut également citer quelques exemples de compositions cosmétiques incluant un extrait de Boerhavia diffusa, riche en composés hydroxybenzoïques selon l'invention :

- Crème douce :

Glycérol (Univar) 6% Simulsol 58 (Seppic) 2%

Simulsol 78 (Seppic) 1%

DUB PTC (Stearinerie Dubois) 1%

Huile de palme raffinée (Sictia) 2%

Cire de lanol CTO (Seppic) 2% Cettaf ine (Laserson) 2%

Conservateur 1%

Extrait de Boerhavia diffusa 4%

Eau 79%

- Lait apaisant : Glycerox 767H (Croda) 4%

Huile de palme raffinée (Sictia) 5%

Cetearyl alcohol (Rita) 2%

Lanol 99 (Seppic) 3%

DC 345 (Dow Corning) 5% Montanov 82 (Seppic) 2%

Conservateur 1%

Extrait de Boerhavia diffusa 4%

Eau 74%

- Gel crème apaisant :

Carbopol AQUASF (Noveon) 0,5%

Montanov 14 (Seppic) 3,3%

Phytosqualane (Sophim) 2%

Lanol 99 (Seppic) 6%

Sensanov VWR (Seppic) 2%

DUB Heliocristal (Stéarinerie Dubois) 4,66%

DUB Synersol (Stéarinerie Dubois) 4,66%

DUB IPP (Stéarinerie Dubois) 3,33%

Conservateur 1%

Extrait de Boerhavia diffusa 4%

Eau 68.55'