[0001] 本申请是以申请号为 201810159656.6、 申请日为 2018年 2月 26日的中国专利申请 为基础， 并主张其优先权， 该申请的全部内容在此作为整体引入本申请中 。

[0002] 技术领域

[0003] 本申请涉及医学检验的技术领域， 尤其涉及一种病理组织切片的染色方法。

[0004] 背景技术

[0005] 病理切片染色是医学检验中的重要手段， 当前的染色方法包括常规染色、 IHC 染色、 特殊染色等， 需要用到各种试剂。 5见有染色方法中， 加入反应试剂后孵 育的过程中， 一般会保持静置载玻片， 这样造成离组织较远的反应试剂不能充 分参与反应， 造成试剂的浪费。 因而如果能使离组织较远的反应试剂也参与免 疫反应， 将提高试剂的使用效率。 5见有自动化染色方案， 染色时为了防止试剂 挥发， 有时会在载玻片上增加盖子或者添加液态油膜 。 载破片和盖子放置在染 色仪特定的托盘上， 盖子除了能够防止挥发还能够保持组织上试剂 的温度稳定 ， 增强染色效果。 同理地， 液态油膜也起到了防止挥发的作用。 但是如前所述 ， 为了使组织充分被试剂覆盖， 染色时通常需要将整个载玻片都覆盖上试剂， 大量的试剂不会参与反应， 造成不必要的浪费。 如果能使所有试剂都参与反应 ， 将能大大节省试剂用量。

[0006] 申请内容

[0007] 本申请的目的在于提供一种病理组织切片的染 色方法， 减少了染色时试剂的使 用量， 提高试剂的使用效率。 为了实现上述目的， 本申请提供如下技术方案： 一种病理切片的染色方法， 应用于自动化染色系统， 包括步骤：

[0008] b、 向病理切片加入反应试剂；

[0009] c、 静置孵育 1-10分钟；

[0010] d、 完成步骤 c后， 对反应试剂进行混匀；

[0011] 优选地， 在步骤 d之后还包括步骤： e、 完成步骤 d之后，至少重复一次步骤 c、 步骤 d操作。 [0012] 优选地， 染色过程中使用载玻片盖体； 所述载玻片盖体包括反应腔、 加样槽和 突起部； 载玻片盖体放置于自动化染色仪托盘内， 盖体的反应腔位置对应载玻 片上的组织切片位置。

[0013] 优选地， 所述步骤 b具体包括： 在盖体加样槽加入反应试剂。

[0014] 优选地， 所述步骤 d具体包括： 将盖体突出部抬起再放回原来位置， 静置载玻 片后， 重复操作， 使得反应试剂充分混匀。

[0015] 优选地， 所述步骤 d具体包括： 将盖体突出部抬起并向突出部方向拖动后再将 放置回原来位置， 静置载玻片后， 重复操作， 使得反应试剂充分混匀。

[0016] 优选地， 染色过程中使用液态油膜； 所述油膜包裹于病理切片外； 油膜成分为 含碳数为 C10-C16的碳氢化合物。

[0017] 优选地， 所述步骤 b具体包括： 向病理切片加入试剂， 试剂穿过油膜与病理切 片接触， 油膜包裹于反应试剂外。

[0018] 优选地， 所述步骤 d具体包括： 向由油膜包裹的反应试剂提供气流， 气流的作 用下反应试剂在油膜范围内流动； 静置后， 重复操作， 使得反应试剂充分混匀

[0019] 优选地， 所述油膜成分为 C ₁₅ H ₃₂ 。

[0020] 本申请的技术方案改进了病理切片染色方法， 在孵育过程中混匀反应试剂， 提 高试剂的使用效率， 节约试剂的总用量。

[0021] 具体实施方式

[0022] 为使技术人员更好地理解本申请， 下面对本申请的实施例进行清楚、 详细的说 明， 但不作为对本申请的限定。 显然， 所描述的实施例仅仅是本申请的一部分 实施例， 而不是全部的实施例。 基于本申请中的实施例， 本领域普通技术人员 在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其 他实施例， 都属于本申请保护的 范围。

[0023] 在一具体实施例中， 本申请公开的病理组织切片染色方法， 包括如下步骤：

[0024] ( 1) 将贴有病理切片的载玻片放置在自动化染色仪 托盘内；

[0025] (2) 将载玻片盖体放置于载玻片上， 盖体的反应腔位置对应载玻片上的组 织切片位置; [0026] (3) 在盖体加样槽加入反应试剂；

[0027] (4) 混匀反应试剂： 试剂孵育 1-10分钟后， 将盖体突出部抬起再放回原来 位置， 或者将盖体突出部抬起向突出部方向拖动后再 将放置回原来位置；

[0028] (5) 静置载玻片后， 重复步骤 (4) 操作， 使得反应试剂充分混匀。 上述重 复混匀的步骤， 使得原本远离组织、 未参与反应的试剂移动到组

[0029] 织上方， 与组织进行反应， 提高试剂的使用效率， 在达到同样效果的前提下， 节省试剂的用量。 以 Ki67染色为例， 5见有的染色方法需要的抗体试剂用量约 [0030] lOOul； 应用本申请的载玻片盖体和上述染色方法进行 Ki67染色时， 达到同样 染色效果所需抗体试剂用量仅为 70ul。 同理的， 在其它多种染色中， 应用上述 方法后试剂使用量可减少 20以上， 大大节约了染色成本。

[0031] 在一具体实施例中， 本申请公开的病理切片染色方法， 包括如下步骤：

[0032] (a) 将贴有病理切片的载玻片放置在自动化染色仪 托盘内；

[0033] ⑹ 向病理组织切片位置滴加成分为 C ₁₅ H ₃₂ 的液态油膜；

[0034] (c) 向病理切片加入试剂， 试剂穿过油膜与病理切片接触， 油膜包裹于试 剂外；

[0035] (d) 混匀反应试剂： 试剂孵育 1-10分钟后， 向由油膜包裹的反应试剂提供 气流， 气流的作用使得反应试剂在油膜范围内流动； 或者通过摇晃载玻片， 使 得反应试剂可流动， 已达到未反应的试剂流动到病理切片上方参与 反应的效果

[0036] (e) 静置后， 重复上述步骤 (d) 操作 1-3次， 使得反应试剂充分混匀。 上 述使用液态油膜的染色方法， 在孵育过程中对反应试剂进行混匀， 使

[0037] 得原反应的试剂最大限度得参与反应， 提高试剂的使用效率， 在达到同样效果 的前提下， 节省试剂的用量。 上述染色方法所应用的液态油膜还可以是其他 含 碳数为 C10-C16的碳氢化合物。

[0038] 本申请的染色方法中， 具体孵育时间根据具体反应试剂而定。 本申请的染色方 法应用于免疫组化染色、 常规染色和特殊染色。 在免疫组化染色中， 一抗孵育 、 二抗孵育、 DAB染色等均可应用本技术方案所公开的混匀反 应试剂的操作方 法； 同样地， 本申请的技术方案可应用于在伊红染色、 苏木素染色等常规染色 中。

[0039] 以上所述仅为本申请的优选实施例， 并非因此限制本申请的专利范围， 凡是在 本申请的申请构思下， 利用本申请说明内容所作的技术延伸或再创造 均包括在 本申请的专利保护范围内。

发明概述

技术问题

问题的解决方案

发明的有益效果