本发明涉及一种包含坎地沙坦或其酯以及氯噻 酮的药物组合物， 该药物 组合物在制备抗高血压药物中的应用和坎地沙 坦或其酯与氯噻酮在制备抗 高血压药物中的应用， 以及一种治疗高血压的方法。 背景技术

高血压是常见的心血管疾病， 近年来， 其患病率呈不断上升趋势。 据世 界卫生组织 （WHO )最新诊断标准， 我国 18岁以上居民高血压发病率约为 18.8%, 全国高血压患者人群至少在 2亿人以上， 而全球患病人数 9.6亿以 上。 高血压可使脑卒中、 冠心病、 心衰、 肾脏疾病、 大动脉及周围病变等并 发症发病率与危害率明显增加， 我国每年由于高血压升高过早死亡的人数达 150万人， 高血压占慢性门诊就诊人数的 41%, 居首位， 每年高血压医药费 达 400亿元。 因此， 防治高血压以及控制其引发的并发症具有重要 意义。

WHO要求高血压患者须终生连续用药， 目前的高血压药物虽然种类较 多， 但对高血压的防治、 疗效预期、 并发症与危害性的控制依然未达到理想 的要求， 因此我国高血压防治的任务仍然较为艰巨。 联合治疗是治疗高血压 的一个方向。 联合治疗有助于干预多种血压维持机制， 消除药物的个体遗传 差异反应， 添加或补充药理作用， 中和不同药物引起的不良反应， 从而降低 单一药物剂量， 降低不良反应， 更好地保护靶器官， 提高依从性。 现代研究 表明， 不同作用机制的药物联用可使高血压治疗有效 率提高到 80~90%, 高 于单方用药治疗有效率 （40~60% )。

血管紧张素 II受体拮抗剂 ARB类 （沙坦类） 与利尿剂组合， 是临床治 疗、 药物复方的常规组方。 目前常用的 ARB类药物中， 坎地沙坦在降压疗 效方面具有明显优势。研究资料表明，坎地沙 坦对 ATI受体的抑制作用最强， 坎地沙坦对血管紧张素所引起的血管收缩的抑 制作用最强。 与其他抗高血压 药物相比， 坎地沙坦酯较钙拮抗剂、 噻嗪类利尿剂、 ACEI更加安全， 疗效 更加肯定。但坎地沙坦酯也有缺点， 当增加到一定剂量时，其药效不再增强， 多数患者的治疗需与其它降压药联合应用才能 达到有效降压目的。

利尿药氢氯噻嗪通过加强肾脏从体内排钠而使 血压降低。 氢氯噻嗪与坎 地沙坦酯可产生协同作用， 其机理为利尿剂可激活肾素-血管紧张素系统 ( RAS ), 使血压变化更依赖于 RAS, 从而加强坎地沙坦酯的降压作用， 同 时弥补了单用氢氯噻嗪激活 RAS 的缺点。 另外， 单用氢氯噻嗪还可能引发 低血钾症， 当它与坎地沙坦酯联用时， 氢氯噻嗪的剂量可以降低， 从而可以 减少低血钾的发生。 目前， 坎地沙坦西酯 /氢氯噻嗪复方已经上巿。

近年来利尿剂氯噻酮的临床地位得到重新认识 。 与氢氯噻嗪比较， 氯噻 酮半衰期较长， 因此其降压作用更为持久， 尤其氯噻酮夜间有更持久的降压 作用。 临床研究表明， 氯噻酮 12.5~25 mg/d、 氢氯噻嗪 25~50 mg/d使 24 h 血压分别降低 12.4和 7.4 mmHg, 夜间血压降低分别为 13.5和 6.4 mmHg。 可见， 氯噻酮降压效应具有更大优势。 Khoska认为， 与氢氯噻嗪相比， 氯 噻酮降低收缩压的效果更好，氯噻酮的降压疗 效大约是氢氯噻嗪的 1.5~2倍， 而且作用时间更长， 在血压控制不理想时， 应当首先考虑使用氯噻酮， 而不 是氢氯噻嗪。 临床研究表明， 氯噻酮、 氨氯地平、 赖诺普利对血压有效控制 率分别为 68.2%、 66.3%和 61.2%。 氯噻酮预防心衰优于氨氯地平、 预防脑卒 中优于赖诺普利。 阿齐沙坦 +氯噻酮组成的复方已进行临床研究。 釆用 1714 例病人对该复方进行研究的结果表明， "阿齐沙坦 +氯噻酮" 复方降低 SBP 效果优于 "奥美沙坦 +氢氯噻嗪" 复方， "阿齐沙坦 +氯噻酮" 复方可使 SBP 较基础值下降 22.9~29.8 mmHg, 而单方阿齐沙坦下降 12.1~15.9 mmHg, 氯 噻酮下降 12.7~15.9 mmHg, 可见， "阿齐沙坦 +氯噻酮" 复方更具优势。 发明概述

因此，本发明的发明人对于以氯噻酮为组方的 复方抗高血压药物进行了 研究。 具体地， 本发明人基于目前的高血压治疗与新药研发背 景， 对坎地沙 坦或其酯与氯噻酮组成的不同配比进行了深入 细致的研究， 发现该组方具有 降血压作用， 并且坎地沙坦或其酯与氯噻酮在特定比例范围 内具有协同效 应， 为抗高血压药物研发提供了指导。

一方面， 本发明提供了一种药物组合物， 该药物组合物包含作为活性成 分的坎地沙坦或其酯以及氯噻酮， 其中， 坎地沙坦或其酯与氯噻酮的重量比 为 5.3:1~1:6.25。

另一方面，本发明还提供了坎地沙坦或其酯与 氯噻酮在制备抗高血压药 物中的应用。

又一方面，本发明还提供了所述药物组合物在 制备抗高血压药物中的应 用。 再一方面， 本发明还提供了一种治疗高血压的方法， 该方法包括对需要 治疗的患者给药所述药物组合物。

包含坎地沙坦或其酯和氯噻酮的药物组合物， 当二者比例在 5.3:1至 1:6.25的范围内时， 有协同降压效应， 能增加疗效， 增强降压作用与降压维 持时间。 应用该比例范围内的药物组合能降低药物剂量 ， 减轻副作用， 有利 于高血压疾病的治疗。 附图的简要说明

结合以下附图对本发明进行详细描述， 其中：

图 1显示实施例 13中本发明 Can-Chl组方与作为对照的 Can-HCTZ组方在 连续给药 1-14天后停药 3天对 SBP影响的比较结果。 发明详述

现结合本发明的目的对本发明内容进行具体描 述。

本发明的发明人经研究发现， 坎地沙坦或其酯和氯噻酮在 5.3:1~1:6.25 的比例范围内具有显著的协同作用。

根据本发明提供的药物组合物， 其中， 坎地沙坦或其酯与氯噻酮的重量 比优选为 1.28:1~1:6.25 , 更优选为 1.28:1~1:3.125。

坎地沙坦或其酯与氯噻酮的重量比还可以优选 为 1:1 ~1:6.25。

在本发明优选的实施方案中， 坎地沙坦或其酯与氯噻酮的重量比可以为

1.28:1或 1:1.5-1:6.25, 最优选为 1.28:1或 1:1.5 1:3.125。

根据本发明提供的药物组合物， 其中， 所述坎地沙坦酯可以为坎地沙坦 的各种酯， 例如， 从天津药物研究院现代化学制药部购得的坎地 沙坦环己氧 羰氧乙酯。 本领域通常认为 "坎地沙坦" 或 "坎地沙坦酯" 是指坎地沙坦环 己氧羰氧乙酯， 因此， 在本发明中， 所述坎地沙坦或其酯的重量均以坎地沙 坦环己氧羰氧乙酯的重量计。 具体地， 所述坎地沙坦环己氧羰氧乙酯的结构 式如式 I所示。

另一方面，本发明还提供了坎地沙坦或其酯 与氯噻酮在制备抗高血压药 物中的应用。 基于药物效应与可能产生的副作用等临床用药 特点， 其中， 坎 地沙坦或其酯与氯噻酮的重量比可以为 5.3:1~1:6.25 , 优选为 1.28:1~1:6.25 , 更优选为 1.28:1~1:3.125； 或者优选为 1:1~1:6.25 , 或者优选为 1.28:1或 1:1.5-1:6.25 , 最优选为 1.28:1或 1 :1.5~1 :3.125。 在坎地沙坦或其酯与氯噻酮 应用于抗高血压药物中时， 每单位剂量的药物中， 坎地沙坦或其酯的量可以 为 2~16mg,优选为 2~8mg,氯噻酮的量可以为 4~25 mg,优选为 6~12.5 mg。

又一方面，本发明还提供了所述药物组合物在 制备抗高血压药物中的应 用。 在应用于抗高血压药物中时， 每单位剂量的药物中， 坎地沙坦或其酯的 量可以为 2~16mg, 优选为 2~8mg, 氯噻酮的量可以为 4~25mg, 优选为 6~12.5mg。

再一方面， 本发明还提供了一种治疗高血压的方法， 该方法包括对需要 治疗的患者给药所述药物组合物。

根据本发明提供的治疗高血压的方法， 优选地， 坎地沙坦或其酯的给药 剂量为每天 0.057~0.228 mg/kg, 氯噻酮的给药剂量为每天 0.089~0.357 mg/kg。 一般地， 对于普通成人而言， 上述给药剂量相当于坎地沙坦或其酯 的给药剂量为每天 4~16 mg, 氯噻酮的给药剂量为每天 6.25~25 mg。

本发明的药物组合物还可以包含药学上可接受 的载体或赋型剂。 只要是 不对本发明药物组合物的活性成分的活性造成 不利的影响，本领域中的任何 常规载体或赋型剂均可以用于本发明的药物组 合物中。 另外， 本发明药物组 合物可以用本领域的常规方法制成各种剂型， 例如片剂、 颗粒剂、 溶液剂、 胶囊剂、 粉剂等。 实施发明的最佳方式

下面结合实施例对本发明作进一步的说明。 需要说明的是， 下述实施例 仅是用于说明， 而并非用于限制本发明。 本领域技术人员根据本发明的教导 所做出的各种变化均应在本申请权利要求所要 求的保护范围之内。 对实施例中使用的材料、 设备和方法进行说明如下。 在本发明实施例中， 所述坎地沙坦酯是指坎地沙坦环己氧羰氧乙酯 。 一、 药品

坎地沙坦酯 （简称 Can ), 天津药物研究院现代化学制药部提供， 白色 粉末， 批号 20110604。 用 0.5%羧甲基纤维素钠 （CMC ) 配制， 供大鼠灌胃 给药用。

氯噻酮 （简称 Chi ), 日本和光纯药 （Wako Pure )工业株式会社提供， 白色粉末， 25g/瓶， 纯度大于 97% ( HPLC ), 批号 LDJ7832。 用 0.5%CMC 配制， 供大鼠灌胃给药用。

氢氯噻嗪（HCTZ ), 购自美国 Sigma公司。 二、 动物

自发性高血压大鼠 （SHR ), 雄性， 北京维通利华实验动物技术有限公 司提供。 动物生产许可证号 SCXK (京) 2007-0001。 动物饲养在由中央空调系 统调控的观察室内， 室温 25 ± 2°C , 人工照明 12 h/天。 分笼饲养， 鼠笼 43 X 27 X 18cm, 每笼 4只， 自由饮水， 每天喂以大鼠块料， 换新鲜自来水 1 次。 测压室温度为 26 ± 2°C。 三、 仪器

BP-98A型智能无创血压计， 日本软隆科技有限责任公司产品。 四、 大鼠血压测量

釆用尾套袖 （Tail-Cuff ) 法测量血压， 依据脉波频率测量心率。 动物经 预先测压训练 2周以上， 使动物适应测量环境。 正式测量时将动物放入 37 °C保温袋中预温 5 ~ 10 min后， 在安静状态下测量鼠尾动脉血压 2 ~ 3次， 取其平均值作为每次血压测量值， 数据均由计算机釆样并保存。 五、 分组与给药

(一 )对于实施例 1-7

选取血压 （ SBP ) >190 mmHg的 SHR用于实验。

大鼠按血压随机分成 14组， 每组 7只。 动物禁食过夜， 实验当天测量 给药前血压， 然后按照如下方式给药：

空白对照组灌胃给予 0.5%CMC;

单方组灌胃给予坎地沙坦酯 （Can )或氯噻酮 （Chi ), Can剂量为 0.36 mg/kg, Chi剂量分别为 0.0675、 0.36、 0.54、 0.72、 1.125和 2.25 mg/kg;

药物组合物给予 6种剂量（分别记作 Fl、 F2、 F3、 F4、 F5和 F6 ), 具 体地， 各种药物组合物中 Can+Chl配比剂量分别为：

F1: 0.36+0.0675 mg/kg;

F2: 0.36+0.36 mg/kg;

F3: 0.36+0.54 mg/kg;

F4: 0.36+0.72 mg/kg;

F5: 0.36+1.125 mg/kg;

F6: 0.36+2.25 mg/kg,

给药体积均为 5 mL/kg。

连续给药 8天， 末次给药后 2、 4、 8、 12、 24 h, 测定 SBP。 计算 0 ~ 24 h降压-时间曲线下面积 （AUC0-24 ) 以及最大降压值。

(二）对于实施例 8-12

选取血压 （ SBP ) >190 mmHg的 SHR用于实验。

大鼠按血压随机分成 20组， 每组 8 ~ 10只。 动物禁食过夜， 实验当天 测量给药前血压， 然后按照如下方式给药：

空白对照组灌胃给予 0.5%CMC;

单方组灌胃给予坎地沙坦酯 （Can )或氯噻酮 （Chi ), Can剂量分别为 0.1、 0.2、 0.4 mg/kg, Chi剂量分别为 0.3125、 0.625、 1.25 mg/kg;

根据临床单方规格设置如下 Can+Chl配比：

Can:Chl=l: 6.25的比例设置 0.1+0.625 mg/kg一个剂量；

Can:Chl=l: 3.125的比例设置 0.2+0.625, 0.4+1.25 mg/kg两个剂量； Can:Chl=l: 1.5625的比例设置 0.2+0.3125, 0.4+0.625 mg/kg两个剂量； Can:Chl=1.28: 1的比例设置 0.4+0.3125 mg/kg一个剂量； Can:Chl=2.56: 1的比例设置 0.4+0.15625 mg/kg一个剂量； 给药体积均为 5mL/kg, 连续给药 14天。 首次给药后 2、 4、 8、 12、 24 h测定 SBP。 给药第 3d、 7d、 14 d给药前与给药 5 h测定血压。 计算 0~24 h 以及 0~14d的降压-时间曲线下面积 （AUC0-24h、 AUC0-14d)。

(三）对于实施例 13

选取血压 （ SBP ) >200 mmHg的 SHR用于实验。

大鼠按血压随机分成 3组， 每组 6只。 动物禁食过夜， 实验当天测量给 药前血压， 然后按照如下方式给药 （总剂量均为 1 mg/kg):

空白对照组灌胃给予 0.5%CMC;

根据临床单方规格设置如下配比：

Can:Chl=l:1.5625 (临床 8/12.5 mg的比例；)： 0.39+0.609375 mg/kg; Can/HCTZ=1:1.5625 (临床 8/12.5 mg的比例；)： 0.39+0.609375 mg/kg; 给药体积均为 5mL/kg, 连续给药 14天。 首次给药后 1、 3、 5、 7、 12、 24h测定 SBP。给药第 3d、 7 d、 14 d给药前与给药 5 h测定血压。计算 0~24 h以及 0~14d的降压-时间曲线下面积 （AUC0-24h、 AUC0-14d)。 六、 测定结果分析方法

计量结果以均数±标准误差 （ ±SE)表示； 釆用组间非配对 t检验进 行统计学处理， 比较均数差异的显著性； 釆用析因方差分析判断药物之间的 交互作用， P<0.05为差异有统计学意义。 实施例 1: 氯噻酮 0.0675 mg/kg和坎地沙坦酯 0.36mg/kg及其药物组 合物对 SBP的影响

空白对照组给药后 24h内基本保持稳定。

坎地沙坦酯 0.36mg/kg口服给药后 2h起效， 2 ~ 8 h可明显降低 SBP。 氯噻酮 0.0675 mg/kg给药后无明显降压作用；

药物组合物 1 (F1) 给药后 2h起效， 作用可持续至 12 h, 降压持续 时间明显延长， 给药后 24作用优于坎地沙坦酯， 2~24h的降压作用优于 氯噻酮。 24h的降压作用二者具有协同效应 （Ρ=0.036) , 结果见表 1。 表 1 ( ±SE, n=7)

1. 括号内的数值为与基础值的差值;

2. 与空白对照组比较, *P<0.05, "P<0.

3. 与 Can比较， ⁺⁺ P<0.01;

4. 与 Chi比较， ^# P<0.05, ^## P<0.01。

实施例 2: 氯噻酮 0.36 mg/kg和坎地沙坦酯 0.36mg/kg及其药物组合 物对 SBP的影响

药物组合物 2 (F2) 给药前仍有作用， 给药后作用可持续至 24h, 降 压持续时间明显延长， 经统计分析表明降压持续时间二者具有协同作 用； F2给药后 8-24h降压作用优于坎地沙坦酯， 2~24h优于氯噻酮， 经统计 分析表明 24 h的降压幅度二者具有协同作用 （Ρ=0.0031 ) , 结果见表 2。 表 2 ( ±SE, n=7)

1. 括号内的数值为与基础值的差值；

2. 与空白对照组比较， "P<0.05, "P<0.

3. 与 Can比较， +P<0.05, ⁺⁺⁺ P<0.001;

4. 与 Chi比较， ^# P<0.05, 腦 Ρ<0·001。

实施例 3: 氯噻酮 0.54 mg/kg和坎地沙坦酯 0.36mg/kg及其药物组合 物对 SBP的影响

药物组合物 3 (F3) 给药前仍有作用， 给药后作用可持续至 24h, 降 压持续时间明显延长， 经统计分析表明降压持续时间二者具有协同作 用； F3给药后 8-24h降压作用优于坎地沙坦酯， 给药前、 给药后 2 ~ 24 h优于 氯噻酮， 经统计分析表明 24 h的降压幅度二者具有协同作用 （Ρ=0.008) , 结果见表 3。 表 3 ( ±SE, n=7)

1. 括号内的数值为与基础值的差值；

2. 与空白对照组比较， *Ρ<0.05, , "Ρ<0.

3. 与 Can比较， +P<0.05, ⁺⁺⁺ P<0.001;

4. 与 Chi比较， ^## P<0.01, ^### P<0.001。

实施例 4: 氯噻酮 0.72 mg/kg和坎地沙坦酯 0.36mg/kg及其药物组合 物对 SBP的影响

药物组合物 4 (F4) 给药前仍有作用， 给药后作用可持续至 24h, 降 压持续时间明显延长， 经统计分析表明降压持续时间二者具有协同作 用； F4给药后 8-24h降压作用优于坎地沙坦酯， 给药前、 给药后 2 ~ 24 h优于 氯噻酮，经统计分析表明 24h的降压幅度二者具有协同作用（P=0.0021 ), 结果见表 4。 表 4 ( ±SE, n=7)

1. 括号内的数值为与基础值的差值；

2. 与空白对照组比较， *Ρ<0.05, , "P<0.

3. 与 Can比较， ⁺⁺⁺ P<0.001;

4. 与 Chi比较， ^## Ρ<0.01, ^### Ρ<0·001。 实施例 5:氯噻酮 1.125 mg/kg和坎地沙坦酯 0.36mg/kg及其药物组合 物对 SBP的影响

氯噻酮 1.125 mg/kg给药后 4 h有降压作用。

药物组合物 5 (F5) 给药前仍有作用， 给药后作用可持续至 24h, 降 压持续时间明显延长， 经统计分析表明降压持续时间二者具有协同作 用； F5给药后 2、 8 ~24h降压作用优于坎地沙坦酯， 2 ~ 24 h优于氯噻酮， 经 统计分析表明 24 h的降压幅度二者具有协同作用 （Ρ=0.0003 ) , 结果见表 表 5 ( ±SE, n=7)

1. 括号内为与基础值的差值；

2. 与空白对照组比较， *Ρ<0.05, "Ρ<0.01,

3. 与 Can比较， ⁺⁺ P<0.01, ⁺⁺⁺ P<0.001;

4. 与 Chi比较， ^## Ρ<0.01, ^### Ρ<0·001。

实施例 6: 氯噻酮 2.25 mg/kg和坎地沙坦酯 0.36mg/kg及其药物组合 物对 SBP的影响

氯噻酮 2.25 mg/kg给药后 2 ~ 12 h明显降低血压。

药物组合物 6 (F6) 给药前已具有作用， 作用可持续至 24h, 经统计 分析表明， 降压持续时间二者具有协同作用； F6给药后， 2~24h的降压 效果优于坎地沙坦酯，给药前以及给药后 2 ~ 24 h的降压效果优于氯噻酮。 24 h的降压效果来看， 二者具有协同作用 （P=0.0008) 。 结果见表 6。 表 6 ( ±SE, n=7 )

注： 1. 括号内为与基础值的差值;

2. 与空白对照组比较， *P<0.05 , "P<0.01 , "*P<0.001 ;

3. 与 Can比较， +P<0.05 , ⁺⁺ P<0.01 , ⁺⁺⁺ P<0.001 ;

4. 与 Chi比较， ^## Ρ<0·01 , ^### Ρ<0·001。 实施例 7: 氯噻酮和坎地沙坦酯及其药物组合物对 SBP最大降压值与 AUC的影响

与空白对照组比较， 坎地沙坦酯 0.36mg/kg可使收缩压最大降压值达 19.0 mmHg, AUC为 -127 mmHg*h。

与空白对照组比较， 氯噻酮 0.0675、 0.36、 0.54、 0.72 mg/kg对最大降 压值与 AUC无明显影响， 1.125和 2.25 mg/kg可导致二者显著降低；

Fl、 F2、 F3、 F4、 F5、 F6对最大降压值及 AUC的影响均优于相应组 方的氯噻酮； F4、 F5、 F6对最大降压值影响优于坎地沙坦酯， Fl、 F2、 F3、 F4、 F5、 F6对 AUC的影响优于坎地沙坦酯。 从 Fl F2 F3 F4 F5 F6对 AUC的影响来看， 三种药物组合物 中的坎地沙坦酯与氯噻酮均具有协同作用。 结果见表 7

(^土 SE, n=7)

1. 与空白对照组比较, *Ρ<0.05, "Ρ<0.01, "*Ρ<0.

2. 与 Can比较， +P<0.05, ⁺⁺ P<0.01, ⁺⁺⁺ P<0.001;

3. 与相应的 Chi比较， ^## P<0.01, ^### P<0.001 实施例 1-7的结杲分析：

药物组合物 F1, 即 Can:Chl=5.3:l ( 0.36:0.0675 mg/kg )时， 给药后 24 h的降压作用优于坎地沙坦酯， 2 ~ 24 h的降压作用优于氯噻酮。 24h的降 压作用二者具有协同效应（Ρ=0.036) , 对 24h的 AUC影响， 二者具有协 同效应 （P=0.0439)

药物组合物 F2, 即 Can:Chl=l:l ( 0.36:0.36 mg/kg) 时, 给药后 8-24h 降压作用优于坎地沙坦酯， 2 ~ 24 h优于氯噻酮， 24 h的降压幅度二者具 有协同效应 （Ρ=0.0031 ) , 对 24 h的 AUC影响， 二者具有协同效应 (P=0.0168)

药物组合物 F3, 即 Can:Chl=l:1.5 ( 0.36:0.54 mg/kg)时, 给药后 8-24h 降压作用优于坎地沙坦酯， 给药前、 给药后 2 ~ 24 h优于氯噻酮， 24 h的 降压幅度二者具有协同作用 （Ρ=0.008) , 对 24h的 AUC影响， 二者具有 协同效应 （P=0.001 ) 。

药物组合物 F4, 即 Can:Chl=l :2 (0.36:0.72 mg/kg) 时, 给药后 8-24h 降压作用优于坎地沙坦酯， 给药前、 给药后 2 ~ 24 h优于氯噻酮， 24 h的 降压幅度二者具有协同作用 （Ρ=0.0021 ) , 对 24 h的 AUC影响， 二者具 有协同效应 （P=0.0002) 。

药物组合物 F5, 即 Can:Chl=l:3.125 ( 0.36:1.125 mg/kg)时, 给药后 2、 8~24h降压作用优于坎地沙坦酯， 2~24h优于氯噻酮， 24h的降压幅度 二者具有协同作用 （P=0.0003 ) 。 对 24h的 AUC影响， 二者具有协同效 应 （P=0.0009) 。

药物组合物 F6, 即 Can:Chl=l :6.25 ( 0.36:2.25 mg/kg)时, 给药后 2~ 24 h的降压效果优于坎地沙坦酯， 也优于氯噻酮。 24 h的降压效果来看， 二者具有协同作用 （P=0.0008) 。 对 24h的 AUC影响， 二者具有协同效 应 （P=0.0009) 。

药物组合物 F1, 即 Can:Chl=5.3:l ( 0.36:0.0675 mg/kg ) 的 AUC ( -240.0±28.5 ) 与药物组合物 F3, 即 Can:Chl=l:1.5 ( 0.36:0.54 mg/kg ) 的 AUC ( -374.0±32.4 )相比较小， 二者有显著性差异 （ P=0.0092 ) , 5.3:1的 药物组合物的协同效应较 1:1.5的药物组合物弱， 即， 1:1.5的药物组合比 例要优于 5.3:1的药物组合比例。

药物组合物 F5, 即 Can:Chl=l:3.125 ( 0.36:1.125 mg/kg ) 的 AUC ( -457.0±36.8 ) 与药物组合物 F6, 即 Can:Chl=l:6.25 ( 0.36:2.25 mg/kg ) 的 AUC (-518.0±24.6)相比二者无显著性差异 （P=0.1942) 。 但根据临床 用药知识， 一定条件内， 氯噻酮占份额高者引起的电解质紊乱等副作用 比 份额低者要高， 因此在疗效相似的情况下， 宜选用比例低者， 即， 1:3.125 的药物组合比例优于 1:6.25的药物组合比例。 实施例 8:坎地沙坦酯 0.1 mg/kg和氯噻酮 0.625 mg/kg及其组合物（坎 地沙坦酯与氯噻酮的比例为 1:6.25)

Can, Chi单药及 Can-Chl组方均可使 AUC。 _-24h 、 AUQ^d降低， 该比 例、 该剂量下两药的 AUC。_ _24h 协同作用明显， AUC。_ _14d 也有协同作用。 结 果见表 8。 表 8 ( ±SE, n=8~10 )

注： 与空白对照组比较： *"Ρ<0.001 ; 析因方差分析： $Ρ<0. 实施例 9: 坎地沙坦酯与氯噻酮的比例为 1: 3.125的协同效应

(一 )坎地沙坦酯 0.2 mg/kg和氯噻酮 0.625 mg/kg及其组合物

Can, Chi单药及 Can-Chl组方均可使 AUC。 _-24h 、 AUC _Q — _14d 降低, 该比 该剂量下两药的 AUC。_ _24h 、 AUC。_ _14d 协同作用明显。 结果见表 9。 表 9 ( ±SE, n=8~10 )

注： 与空白对照组比较： "*P<0.001 ; 析因方差分析： $Ρ<0·05。

(二）坎地沙坦酯 0.4 mg/kg和氯噻酮 1.25 mg/kg及其组合物

Can, Chi单药及 Can-Chl组方均可使 AUC _Q-24h 、 AUC _Q — _14d 降低, 该 例、 该剂量下两药的 AUC。_ _24h 、 AUC。_ _14d 协同作用明显。 结果见表 10。 表 10 ( ±SE, n=8~10 )

注： 与空白对照组比较： *"P<0.001 ; 析因方差分析： $P<0. 实施例 10: 坎地沙坦酯与氯噻酮的比例为 1: 1.5625的协同效应

(一 )坎地沙坦酯 0.2 mg/kg和氯噻酮 0.3125 mg/kg及其组合物

Can, Chi单药及 Can-Chl组方均可使 AUC。 _-24h 、 AUC _Q — _14d 降低, 该比 该剂量下两药的 AUC。_ _24h 、 AUC。_ _14d 协同作用明显。 结果见表 11。 表 11 ( ±SE, n=8~10 )

注： 与空白对照组比较： *"Ρ<0.001 ; 析因方差分析： $Ρ<0.

(二）坎地沙坦酯 0.4 mg/kg和氯噻酮 0.625 mg/kg及其组合物

Can、 Chi单药及 Can-Chl组方均可使 AUC ₀ — _24h 、 AUC ₀ — _14d 降低， 该剂量下两药的 AUC。_ _24h 、 AUC。_ _14d 协同作用明显。 结果见表 12 表 12 ( ±SE, n=8~10 )

注： 与空白对照组比较： "*P<0.001 ; 析因方差分析： $Ρ<0·05, ^$$ Ρ<0·01。

实施例 11: 坎地沙坦酯 0.4 1112/1^和氯噻酮 0.3125 mg/kg及其组合物 (坎地沙坦酯与氯噻酮的比例为 1.28: 1 )

Can, Chi单药及 Can-Chl组方均可使 AUC。 _-24h 、 AUC _Q — _14d 降低, 该比 例、 该剂量下两药的 AUC _24h 、 AUCo^d协同作用明显。 结果见表 13。 表 13 ( ±SE, n=8~10 )

注： 与空白对照组比较： *"Ρ<0.001 ; 析因方差分析： $Ρ<0. 实施例 12: 坎地沙坦酯 0.4 mg/kg和氯噻酮 0.15625 mg/kg及其组合 物 （坎地沙坦酯与氯噻酮的比例为 2.56: 1 )

Can, Chi单药及 Can-Chl组方均可使 AUC。 _-24h 、 AUC _Q — _14d 降低, 该比 例、 该剂量下两药的 AUC。_ _24h 、 AUC。_ _14d 协同作用明显。 结果见表 14。 表 14 ( ±SE, n=8~10 )

注： 与空白对照组比较： "Ρ<0.01 , "*Ρ<0.001; 析因方差分析： $Ρ<0·05。 实施例 8-12的结果分析：

实施例 8-12围绕临床单药规格进行组方的比例进行协� �效应研究，结 合药物作用的药理特性， 对同一组方比例设置了不同实验用组方剂量， 以 客观准确反映药物的交互作用。 研究表明：

1 ) Can-Chl组方比例为 1:3.125 , 单次用药、连续 14d用药均具有良 好协同作用， 该组方比例可代表临床 4/12.5、 8/25、 16/50 mg组方剂量。

2 ) Can-Chl组方比例为 1:1.5625 , 单次用药、 连续 14d用药均具有 良好协同作用， 该组方比例可代表临床 8/12.5、 16/25 mg组方剂量。

3 ) Can-Chl组方比例为 1.28:1单次用药、连续 14d用药均具有良好 协同作用， 该组方比例可代表临床 16/12.5、 32/25 mg组方剂量。

4 ) Can-Chl组方比例为 2.56:1单次用药、连续 14d用药均具有一定 协同作用， 该组方比例可代表临床 16/6.25、 32/12.5 mg组方剂量。 5 ) Can在 0.4 mg/kg的剂量水平， Chi剂量由 0.62 mg/kg增加到 1.25 mg/kg, 即二者比例由 1:1.5625增加到 1:3.125时， 降压作用并不增加， 提 示在该剂量水平下， 1:1.5625比例优于 1:3.125。 Can在 0.4 mg/kg剂量水 平， Chi剂量增加， 即二者比例由 2.56:1增加到 1:3.125的过程中， 降压作 用增加， 提示在该剂量水平下， 1:1.5625与 1:3.125比例均优于 1.28:1 , 并 且 1.28:1比例优于 2.56: 1。

总之， Can-Chl组方比例在 1:3.125、 1:1.5625、 1.28:1、 2.56:1下， 两 药联用具有降压的协同作用， 提示在临床组方剂量 4/12.5、 8/25、 16/50、 8/12.5、 16/25、 16/12.5、 32/25、 16/6.25、 32/12.5 mg组合下, 两药联用有 协同作用。 实施例 13: 坎地沙坦酯 -氯噻酮组方 （Can-Chl ) 与坎地沙坦酯 -氢氯 噻嗪复方 （Can-HCTZ ) 的效应对比

Can-Chl组方： 坎地沙坦酯 0.39 mg/kg+氯噻酮 0.609375 mg/kg;

Can-HCTZ组方： 坎地沙坦酯 0.39 mg/kg+氢氯噻嗪 0.609375mg/kg。

(一）对 AUC、 最大降压值效应的影响

各种组方均可使 AUC。_ _24h 降低。 Can-Chl组方使 AUC。_ _14d 降低的程度 均要大于相应比例的 Can-HCTZ组方。 Can-Chl组方对 0-14 d最大降压值 影响优于相应比例的 Can-HCTZ。 结果见表 15。 表 15 ( ±SE, n=6 )

1、 与空白对照组比较： "*P<0.001 ;

2、 与 Can-HCTZ组比较： ⁺ P<0.05。

(二）停药后对 SBP的影响

Can-HCTZ组方停药后， SBP回升； Can-Chl组方停药后的 SBP均低 于 Can-HCTZ组方。 结果见表 16和图 1。 表 16 ( ±SE, n=6 )

1、 与空白对照组比较： *Ρ<0.05 , "Ρ<0.01 , "*Ρ<0.001 ;

2、 与 Can-HCTZ组比较： +P<0.05 , ⁺⁺ P<0.05。 实施例 13的结果分析：

Can-Chl组方比例 1:1.5625 , 即 0.39/0.609375 mg/kg连续用药， 对 AUQM^作用优于 Can-HCTZ组方， 对最大降压值影响优于 Can-HCTZ 组方； 停药后 3d对 SBP的降低作用优于等比例 Can-HCTZ组方； 该组方 比例可代表临床 8/12.5 mg组方剂量。

总之， 在等比例 （ 1:1.5625 ) 、 等剂量下， Can-Chl组方与 Can-HCTZ 组方比较， Can-Chl组方降压幅度大、 停药反跳轻， 作用时间长。 综上， 坎地沙坦或其酯与氯噻酮组成的复方， 二者比例在 5.3:1到 1:6.25范围内时， 有协同降压作用， 能增加疗效， 增强降压作用与降压维 持时间， 该比例范围内的药物组合研究， 为降低药物剂量， 减轻副作用提 供了可能， 有利于高血压疾病的治疗。