以下、本発明についてさらに詳細に説明す� ��。
 本発明で用いる生体高分子(生体由来の高分 子)は、本発明を実現可能である限りは特に� �定はないが、好ましくはタンパク質、多糖� �又はそれらの誘導体又は塩類である。タン� �ク質の場合は、球状、繊維状等のタンパク� �のいずれでもよい。本発明でいう生体高分� �には合成ポリペプチドも含まれる。生体高� �子は、より好ましくは、コラーゲン、ゼラ� �ン、アルブミン、ラミニン、カゼイン、フ� �ブロイン、フィブリン、キトサン、フィブ� �ネクチン、ビトロネクチン、ウロキナーゼ� �トロンボモジュリン、アンチトロンビンIII� �よびヒアルロン酸エステルである。さらに� �ましくは、コラーゲン、ゼラチン、アルブ� �ン、カゼイン、フィブロインである。最も� �ましくはコラーゲンまたはゼラチンである� �タンパク質の由来は特に限定せず、ヒト、� �、豚、魚、および遺伝子組み換え体のいず� �を用いても良い。遺伝子組み換え体として� �、例えばEP0926543B,WO2004-085473号明細書、EP139832 4A、EP1014176A、US6645712に記載のものを用いるこ とができるがこれらに限定されるものではな い。また、該生体高分子は部分的に加水分解 されていてもよい。

 本発明で用いるポリペプチドの製法に特� ��規定はないが、例えば、大腸菌又は酵母で� ��成した任意のポリペプチド、又は化学合成� ��た任意のポリペプチドを用いることができ� ��。

 本発明で用いる有機フッ素化合物につい� ��は生体高分子又はポリペプチドを溶解する� ��りは特に限定はないが、好ましくは炭素数1 から8の有機フッ素化合物である。より好ま� �くは炭素数1から6の有機フッ素化合物である 。より好ましくは炭素数1から3の有機フッ素� ��合物である。さらに好ましくは、有機フッ� ��化合物はアルコール、ケトン、またはカル� ��ン酸である。特に好ましくは、1,1,1,3,3,3-ヘ� ��サフルオロ-2-プロパノール(HFIP)、2,2,2-トリ� ��ルオロエタノール(TFE)、ヘキサフルオロア� �トン。最も好ましくは2,2,2-トリフルオロエ� �ノールである。該有機フッ素化合物は単独� �たは該有機フッ素化合物と相溶性の溶媒と� �混合で用いても構わない。

 本発明で用いる有機フッ素化合物は特に� ��定するものではないが、常温で液体のもの� ��好ましい。このうち、好ましくは炭素数2~8� ��ある非芳香族有機フッ素化合物又は炭素数6 ~12の芳香族含フッ素エステル類、カルボン酸 類、ニトリル類である。炭素数2~8である非芳 香族有機フッ素化合物としては、炭素数2~8の フッ素含有アルコール類、フッ素含有アミド 類、フッ素含有エステル類、フッ素含有カル ボン酸、フッ素含有エーテル類が好ましい。 該有機フッ素化合物はフッ素以外の元素が含 まれていても構わない。例えば、ハロゲン原 子で一部が置換されていても構わない。この うちより好ましくは炭素数が2から3であるフ� ��素含有アルコールである。最も好ましくは1 ,1,1,3,3,3-ヘキサフルオロ-2-プロパノール、2,2, 2-トリフルオロエタノール、トリフルオロ酢� ��、およびペンタフルオロプロピオン酸であ� ��。また、該溶媒は種々の溶媒と相溶性があ� ��ため、相溶性のある溶媒との混合溶媒とし� ��利用しても構わない。

 1,1,1,3,3,3-ヘキサフルオロ-2-プロパノール( HFIP)や2,2,2-トリフルオロエタノール(TFE)に代� �される有機フッ素化合物はコラーゲンやゼ� �チンといったタンパク質を溶解する。さら� �、例えば、ゼラチンを含むHFIP溶液を4℃とし てもゲル形成しない。従って、反応性の高い 反応にもハンドリングが容易である。

 本発明でいう化学修飾の例としては、生� ��高分子又はポリペプチドの架橋、及び生体� ��分子又はポリペプチドへの官能基の導入を� ��げることができる。

 生体高分子又はポリペプチドの架橋は、� ��橋剤を用いて行うことができる。本発明で� ��いる架橋剤は本発明を実施可能である限り� ��特に限定はなく、化学架橋剤でも酵素でも� ��いが、特に化学縮合剤が好ましい。架橋剤� ��しては、例えば、ホルムアルデヒド、グル� ��ルアルデヒド、カルボジイミド、シアナミ� ��、ビニルスルホン、ジエポキシドなどが挙� ��られる。好ましくは、ホルムアルデヒド、� ��ルタルアルデヒドである。タンパク質の縮� ��に水よりも求核性の低い溶媒を用いること� ��望ましい。HFIPやTFEはアルコールであるが、 水酸基の酸性度が高く、求核性が低い。従っ て、該溶媒による求核攻撃を伴う反応の阻害 が少ないことが考えられる。

 本発明を生体高分子への官能基の導入に適� ��する場合、縮合剤とともに、所望の官能基� ��有する化合物を反応させる、または所望の� ��能基を有する酸無水物、酸塩化物、あるい� ��エポキシドと反応させる。縮合剤としては� ��述の架橋剤と同様のものが好ましい。用い� ��化合物としては、特に限定はないが、疎水� ��の高い官能基、アルカリにて分解、反応を� ��こす官能基を含む化合物が本発明の目的を� ��成するために好ましい。好ましくは、エス� ��ル基、アミド基、ジチオカルバミル基、炭� ��エステル基、エポキシド基、α-オルソエス� ��ル基を有する化合物、α、β不飽和結合を有 する化合物である。例えば、2-N,N-ジエチルジ チオカルバミルメチルー安息香酸、3-N,N-ジエ チルジチオカルバミルメチルー安息香酸、4-N ,N-ジエチルジチオカルバミルメチルー安息香 酸、2-ビニル安息香酸、3-ビニル安息香酸、4- ビニル安息香酸、カルボキシル化カンファキ ノンが挙げられる。
 また、化学修飾に用いる化合物として、酸� ��水物(例えば:2-N,N-ジエチルジチオカルバミ� �メチルー安息香酸無水物、3-N,N-ジエチルジ� �オカルバミルメチルー安息香酸無水物、4-N,N -ジエチルジチオカルバミルメチルー安息香� �無水物、2-ビニル安息香酸無水物、3-ビニル� ��息香酸無水物、4-ビニル安息香酸無水物)、� ��塩化物(例えば:2-N,N-ジエチルジチオカルバ� �ルメチルー安息香酸塩化物、3-N,N-ジエチル� �チオカルバミルメチルー安息香酸塩化物、4- N,N-ジエチルジチオカルバミルメチルー安息� �酸塩化物、2-ビニル塩化ベンゾイル、3-ビニ� ��塩化ベンゾイル、4-ビニル塩化ベンゾイル)� ��エポキシドを用いることができる。

 本発明では、生体高分子あるいはポリペ� ��チドを化学修飾する際、反応混合物中の縮� ��剤の濃度は一般的には1.0~10重量%であり、好 ましくは1.0~5.0重量%である。

 生体高分子の化学修飾には、生体高分子の� ��液と反応基質を混合する過程とそれらの均� ��溶液の反応する過程の2つの過程を有する。
 本発明において生体高分子と反応基質との� ��合温度は、溶液を均一に攪拌できる限り特� ��限定されないが、好ましくは0℃~40℃であり 、より好ましくは0℃~30℃であり、より好ま� �くは3℃~25℃であり、より好ましくは3℃~15℃ であり、さらに好ましくは3℃~10℃であり、� �に好ましくは3℃~7℃である。

 生体高分子と反応基質とを攪拌した後は� ��度を上昇させることができる。反応温度と� ��ては反応が進行する限りは特に限定はない� ��、生体高分子の変性や分解を考慮すると実� ��的には0℃~60℃であり、より好ましくは0℃~4 0℃であり、より好ましくは3℃~25℃であり、� ��り好ましくは3℃から15℃であり、さらに好� ��しくは3℃~10℃であり、特に好ましくは3℃~7 ℃である。

 本発明により得られる化学修飾(架橋又は 官能基導入)された生体高分子又はポリペプ� �ドからなる構造物の形態は特に規定はない� �、例えばスポンジ、フィルム、不織布、フ� �イバー(チューブ)、粒子などが挙げられる。 形状はいずれの形状でも適用可能であるが、 例えば角錐、円錐、角柱、円柱、球、紡錘状 の構造物および任意の型により作成した構造 物が挙げられる。好ましくは、角柱、円柱、 紡錘状の構造物および任意の型により作成し た構造物である。より好ましくは、角錐、円 錐、角柱、円柱である。最も好ましくは角柱 、円柱である。

 該構造物の大きさは特に限定されないが� ��スポンジ、不織布であれば好ましくは500 cm 四方以下である。好ましくは100 cm以下であ� �。特に好ましくは50 cm以下である。最も好� �しくは10 cm以下である。ファイバー(チュー� ��)であれば、ファイバーまたはチューブの直 径(または一辺)は1 nm以上10 cm以下である。� �ましくは1 nm以上1 cm以下である。より好ま� ��くは1 nm以上100 μmである。特に好ましくは 1 nm以上1μm以下である。最も好ましくは1 nm� ��上10 nm以下である。また、長さは特に限定� ��れるものではないが、好ましくは10 μm以上 100 m以下である。より好ましくは100 μm以上1 0 m以下である。さらに好ましくは1 mm以上1  m以下である。最も好ましくは1 cm以上30 cm以 下である。粒子であれば、好ましくは1 nmか� ��1 mm、より好ましくは10 nmから200 μm、さら に好ましくは50 nmから100 μm、特に好ましく� ��100 nmから10μmである。

 構造物の厚さについては特に限定されな� ��が、好ましくは1 nm以上である。より好ま� �くは、10 nm以上である。より好ましくは100  nm以上である。より好ましくは1 μm以上であ� ��。さらに好ましくは10 μm以上である。最も 好ましくは100 μm以上である。

 本発明の方法により製造される化学修飾� ��れた生体高分子又はポリペプチドには、必� ��に応じて添加剤を加えても良い。添加剤の� ��としては、薬剤、色素剤、柔軟剤、経皮吸� ��促進剤、保湿剤、増粘剤、界面活性剤、防� ��剤、香料、pH調整剤が挙げられる。

 本発明により製造した化学修飾された生� ��高分子又はポリペプチドは、その中に薬剤� ��封入して用いることができる。該薬剤の具� ��例としては、例えば抗癌剤(例えば、パクリ タキセル、トポテシン、タキソテール、5-フ� ��オロウラシル、シスプラチン)、免疫抑制剤 (例えば、ラパマイシン、タクロリムス、シ� �ロスポリン)、抗炎症剤、抗血栓剤、抗精神� ��(例えば、塩酸アミトリプチリン)、抗うつ� �、抗酸化剤、抗アレルギー剤、増殖因子(例� ��ば、繊維芽細胞増殖因子、上皮細胞増殖因� ��、インシュリン様増殖因子、トランスフォ� ��ミング増殖因子、血管内皮細胞増殖因子、� ��細胞増殖因子、血小板由来増殖因子、神経� ��殖因子)、ホルモン、サプリメント成分、化 粧品成分が挙げられる。

 本発明の方法により製造される化学修飾� ��れた生体高分子又はポリペプチドの用途は� ��に限定することはないが、経皮吸収剤、局� ��治療剤、経口治療剤、注射治療剤、化粧品� ��サプリメント、食品、および色素材である� ��好ましくは経皮吸収剤、局所治療剤、経口� ��療剤、化粧品である。さらに好ましくは経� ��吸収剤、局所治療剤、経口治療剤である。� ��も好ましくは経皮吸収剤、局所治療剤であ� ��。

 本発明により製造される化学修飾された� ��体高分子又はポリペプチドの用途として、� ��えば、抗癌剤を含有する皮膚外用剤が挙げ� ��れる。皮膚外用剤の適用疾患としては、例� ��ば、皮膚癌、角化症、悪性黒色腫、菌状息� ��症、乳癌、前立腺癌、子宮癌、膣癌、陰茎� ��、大腸癌である。好ましくは、皮膚癌、角� ��症である。

 本発明により製造される化学修飾された� ��体高分子又はポリペプチドは、生体組織中� ��の埋め込み材として利用できる。例えば、� ��胞を包埋した架橋した生体高分子を損傷部� ��に埋め込み、組織を修復することができる� ��また、別の形態によると、増殖因子や各種� ��剤を封入した架橋した生体高分子を生体組� ��中に埋め込み、組織を修復することができ� ��。

 化学修飾された生体高分子又はポリペプチ� ��に封入する細胞の種類は特に限定されない� ��、例えば、骨髄細胞、胚性幹細胞、成体幹� ��胞、軟骨細胞、骨芽細胞、繊維芽細胞、血� ��内皮細胞、血管平滑筋細胞、心筋細胞、上� ��細胞が挙げられる。
 生体組織中への埋め込み部位として特に強� ��が求められる部位としては、例えば、骨、� ��骨、心臓、血管などが挙げられる。

 生体組織中への埋め込み材としての利用� ��別の形態として、生体内での治療器具への� ��ーティングが挙げられる。例えば、人工血� ��、人工心臓等の人工臓器、血管内治療用の� ��テントが挙げられる。ステントに用いる場� ��、抗癌剤や免疫抑制剤を架橋した生体高分� ��に封入し、ステント表面にコーティングす� ��ことが挙げられる。

 本発明で用いる手法は、未修飾では該有� ��フッ素化合物に溶解しない化合物であって� ��使用可能である。すなわち、水系での化学� ��飾では効率が悪く、化合物の高導入率化は� ��成できないが、疎水性化合物の導入により� ��有機フッ素化合物に溶解する場合は、1段階 目に水系での化合物の導入反応を、2段階目� �有機フッ素化合物での化学反応を行うこと� �生体高分子あるいはポリペプチドへの疎水� �の化合物の高導入率化が可能となる。

 以下の実施例により本発明をさらに具体� ��に説明するが、本発明は実施例によって限� ��されるものではない。