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Title:
METHOD AND PROCESS FOR PREPARATION AND PRODUCTION OF DEUTERATED Ω-DIPHENYLUREA
Document Type and Number:
WIPO Patent Application WO/2011/113367
Kind Code:
A1
Abstract:
Methods and processes for preparation and production of deuterated ω-diphenylure are disclosed. Especially, a kind of deuterated ω-diphenylurea compounds which can inhibit phosphokinase and the preparation method of N-(4-chloro-3-(trifluoromethyl)phenyl)-N'-(4-(2-(N-1',1',1'-d3-methylcarbamoyl)-4-pyridinyloxy)phenyl)urea are disclosed. The said deuterated diphenylurea compounds can be used for treating or preventing tumors and relative diseases.

Inventors:
FENG WEIDONG (CN)
GAO XIAOYONG (CN)
DAI XIAOJUN (CN)
Application Number:
CN2011/071926
Publication Date:
September 22, 2011
Filing Date:
March 17, 2011
Export Citation:
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Assignee:
SUZHOU ZELGEN BIOPHARMACEUTICAL CO LTD (CN)
FENG WEIDONG (CN)
GAO XIAOYONG (CN)
DAI XIAOJUN (CN)
International Classes:
C07D213/81; A61K31/44; A61P35/00; C07C275/30
Domestic Patent References:
WO2009054004A22009-04-30
WO2009034308A22009-03-19
WO2000042012A12000-07-20
Foreign References:
US20090069388A12009-03-12
CN101676266A2010-03-24
Other References:
See also references of EP 2548868A4
CURR PHARM DES, vol. 8, 2002, pages 2255 - 2257
Attorney, Agent or Firm:
XU & PARTNERS, LLC. (CN)
上海明成云知识产权代理有限公司 (CN)
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Claims:
权 利 要 求

1. 一种氘代的 ω-二苯基脲化合物或其药学上可接受的盐, 其特征在于, 所 述的化合物是 Ν-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -Ν,-(4-(2-(Ν- Γ,Γ,Γ-三氘甲基氨基甲 酰基) -4-吡啶基氧)苯基)脲;

2.一种制备化合物 Ν-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -Ν,-(4-(2-(Ν- Γ,Γ,Γ-三氘甲基 氨基甲酰基) -4-吡啶基氧)苯基)脲的方法,

其特征在于, 所述方法包括:

(a) 在惰性溶剂中以及碱存在下, 式 III化合物与式 V化合物反应, 形成所述化 合物;

V 碱

式中, X为 Cl、 Br、 或 I;

或者, 所述方法包括:

(b) 在惰性溶剂中, 式 IX化合物与 CD3NH2或 CD3NH2 * HC1反应, 形成所述 的化合物; 式中, R为 C1-C8直链或支链垸基, 或芳基;

或者, 所述方法包括:

(c) 在惰性溶剂中, 4-氯 -3-三氟甲基苯异氰酸酯 (W【)与式 5化合物反应, 形成 所述的化合物; 或者, 所述方法包括:

(d) 在惰性溶剂中, 在 CDI和 CH2C12存在下, 式 5化合物与式 6化合物反应, 形成所述的化合物。

3. 如权利要求 2所述的方法, 其特征在于, 所述的式 III化合物是通过以下 该方法制备:

(i) 对羟基苯胺 (I)和 4-氯 -3-三氟甲基苯胺 (II)缩合得到 II

I II

4. 如权利要求 2所述的方法, 其特征在于, 所述的式 III化合物是通过以 下该方法制备:

(ii)对甲氧基苯胺 (X)和 4-氯 -3-三氟甲基苯胺 (II)或 4-氯 -3-三氟甲基苯异氰酸 酯 (W【)反应生成 XI化合物:

CI Vffl XI

然后, XI化合物在酸或碱条件下, 脱甲基得到 III化合物。

5. 如权利要求 2所述的方法, 其特征在于, 所述的式 VII化合物通过以下方 法制备:

VI化合物与对羟基苯胺在碱作用下, 生成 VII化合物: 式中, X是氯、 溴或碘; R为 C 1 -C8直链或支链垸基, 或芳基。

6. 如权利要求 2所述的方法, 其特征在于, 所述的碱选自叔丁醇钾、 氢化 钠、 氢化钾, 碳酸钾、 碳酸铯、 磷酸钾、 氢氧化钾、 氢氧化钠或组合。

7. 一种式 B所示

式中, Y为卤素或

8. 一种制备 4-氯吡啶 -2-(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基)酰胺的方法, 其特征在于, 包 括步骤:

(al)在碱性条件下, 于惰性溶剂中,将 4-氯 -2-吡啶甲酸甲酯与 1,1,1 -三氘代甲 胺或其盐进行反应, 从而形成 4-氯吡啶 -2-(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基)酰胺; 或者

(a2) 在惰性溶剂中, 将 3-氯 -吡啶 -2-甲酰氯与氘代甲胺进行反应, 形成 4- 氯吡啶 -2-(N- l,,r,r-三氘代甲基)甲酰胺。

9. 一种 4-(4-氨苯氧基) - 2-吡啶 -(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基)酰胺的制备方法, 其特 征在于, 包括步骤:

在碱性条件下, 于惰性溶剂中, 将 4-氯吡啶 -2-(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基)酰胺与 4-氨基苯酚 从而形成 4-(4-氨苯氧基) - 2-吡啶 -(Ν- Γ,Γ,Γ-三氘代甲基)酰胺

10. 如权利要求 7所述的中间体的用途,其特征在于,用于制备氘代二苯基脲。

Description:
一种氘代的 ω -二苯基脲的合成及生产的方法和工艺 技术领域

本发明涉及化学合成领域, 更具体涉及一种氘代的 ω -二苯基脲的合成及生产的 方法和工艺。 背景技术

已知的 ω-二苯基脲衍生物是 c-RAF激酶活性的化合物。例如在 WO 2000/042012 中公开了一类 ω-羧基芳基取代的二苯基脲,及其在治疗癌症 以及相关疾病中的用途。

to-二苯基脲化合物如索拉非尼 (Somfenib)最先被发现是 c-RAF激酶的抑制剂,之 后不断的研究发现它还能抑制 MEK 和 ERK 信号传导通路、 血管内皮生长因子 -2(VEGFR-2)、 血管内皮生长因子 -3(VEGFR-3)、 以及血小板源生长因子 - β (PDGFR- β )的酪氨酸激酶的活性 (Curr Pharm Des 2002;8:2255 - 2257),因此它被称之为多激酶 抑制剂, 具有双重抗肿瘤作用。

索拉非尼 (Sorafenib;), 商品名 Nexavar, 是由拜耳公司和 ONXY公司共同研制的 一种新型的口服多激酶抑制剂, 由于它在一项针对晚期肾癌的 III期临床研究中的卓 越表现, 2005年 12月被 FDA快速批准用于治疗晚期肾细胞癌, 2006年 11月在中国 上市。 然而,索拉非尼 (Somfenib) 具有多种副作用, 例如高血压、 体重减轻、 皮疹等。

然而, 本领域仍需要开发对 mf激酶有抑制活性、 或更好药效学性能的化合物及 其制备工艺。 发明内容

本发明的目的就是提供一类新型的具有 m微酶抑制活性和更好药效学性能的化 合物及其用途。

本发明的另一目的是提供氘代的 ω -二苯基脲及其中间体的一系列合成方法, 从 而满足药物工业生产方面中的标准, 并提高操作性和安全性。 在本发明的第一方面, 提供了一种氘代的 ω-二苯基脲化合物或其药学上可接受 的盐, 所述的化合物是 Ν-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -Ν'-(4-(2-(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘甲基氨基 甲酰基 )-4-吡啶基氧)苯基)脲;

在另一优选例中, 所述化合物中的 N是 14 N。

在本发明的第二方面, 提供了一种制备化合物 N-(4-氯 -3- (三氟甲基;)苯 基) - Ν '-(4-(2-(Ν-Γ, Γ, -三氘甲基氨基甲酰基 )-4-吡啶基氧)苯基)脲的方法,

所述方法包括:

(a) 在惰性溶剂中以及碱存在下, 式 III化合物与式 V化合物反应, 形成所述化合

III V 碱

式中, X为 Cl、 Br、 或 I;

或者, 所述方法包括:

(b) 在惰性溶剂中, 式 IX化合物与 CD 3 NH 2 或 CD 3 NH 2 · HC1反应, 形成所述的 化合物;

K

式中, R为 C1-C8直链或支链垸基, 或芳基;

或者, 所述方法包括:

(c) 在惰性溶剂中, 4-氯 -3-三氟甲基苯异氰酸酯 (環)与式 5化合物反应,形成所述 的化合物; 或者, 所述方法包括:

(d) 在惰性溶剂中, 在 CDI和。11^1 2 存在下, 式 5化合物与式 6化合物反应, 形成所述的化合物。

在另一优选例中, 所述的式 III化合物是通过以下该方法制备:

(i) 对羟基苯胺 和 4-氯 -3-三氟甲基苯胺 (II

I Π III 。 在另一优选例中, 所述的式 III化合物是通过以下该方法制备:

(ii)对甲氧基苯胺 (X)和 4-氯 -3-三氟甲基苯胺 (II)或 4-氯 -3-三氟甲基苯异氰酸酯 (環)反应生成 XI化合物:

然后, XI化合物在酸或碱条件下, 脱甲基得到 III化合物。

在另一优选例中, 所述的式 VII化合物通过以下方法制备:

VI化

式中, X是氯、 溴或碘; R为 C1-C8直链或支链垸基, 或芳基。

在另一优选例中, 所述的碱选自叔丁醇钾、 氢化钠、 氢化钾, 碳酸钾、 碳酸铯、 磷酸钾、 氢氧化钾、 氢氧化钠或组合。

在另一优选例中, 在方法 , 还包括在催化剂存在下进行反应, 其中所述的催 化剂选自: 碘化亚铜和脯氨酸; 或碘化亚铜和吡啶甲酸。

在另一优选例中, 各反应在温度 0〜200°C下进行。

在本发明的第三方面, 提供 的中间体, (B) 式中, Y为卤素或

在另一优选例中, Υ 为 Cl, 结构式为 。

在本发明的第四方面, 提供了一种制备 4-氯吡啶 -2-(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基;)酰胺 的方法, 包括步骤:

(al)在碱性条件下, 于惰性溶剂中, 将 4-氯 -2-吡啶甲酸甲酯与 1,1,1-三氘代甲胺 或其盐进行反应, 从而形成 4-氯吡啶 -2-(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基)酰胺; 或者

(a2) 在惰性溶剂中,将 3-氯 -吡啶 -2-甲酰氯与氘代甲胺进行反应,形成 4-氯吡啶 -2-(N-l,,r,r-三氘代甲基)甲酰胺。

在另一优选例中, 所述的惰性溶剂包括: 四氢呋喃、 乙醇、 甲醇、 水、 或其混 合溶剂。

在另一优选例中, 步骤 (al)和 (a2)中, 反应温度为 -10°C至回流温度, 较佳地为 -4 °〇至60°〇, 更佳地为 5-50°C。

在另一优选例中, 步骤 (al)和 (a2)中,反应时间为 0.5-72小时, 较佳地为 1-64小 时, 更佳地为 2-48小时。

在另一优选例中, 步骤 (al)中, 所述的碱性条件为反应体系中存在碳酸钾、 碳酸 钠、 碳酸铯、 KOH、 NaOH或其组合。

在本发明的第五方面, 提供了一种 4-(4-氨苯氧基;) - 2-吡啶 -(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲 基;)酰胺的制备方法, 包括步骤:

在碱性条件下, 于惰性溶剂中, 将 4-氯吡啶 -2-(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基;)酰胺与 4- 氨基苯酚反应 从而形成 4-(4-氨苯氧基;) - 2-吡啶 -(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基;)酰胺

在另一优选例中, 所述的碱性条件是反应体系中存在 KOH、 NaOH, 碳酸钾、 碳酸钠、 碳酸铯、 叔丁醇钾、 叔丁醇钠、 或其组合。

在另一优选例中, 所述的惰性溶剂选自 DMF、 DMSO、 Ν,Ν,-二甲基乙酰胺、 四 氢呋喃、 Ν-甲基吡洛垸酮, 1, 4-二氧六环、 或其混合溶剂。

在另一优选例中, 上述反应温度为 0°C至 160°C, 较佳地为 20°C至 120°C, 更佳 地为 30-100 °C。

反应时间为 0.5-48小时, 较佳地为 1-36小时, 更佳地为 3-24小时。

在本发明的第五, 提供本发明第三方面中所述的中间体的用途, 它用于制备氘 代二苯基脲或用作制备氘代二苯基脲的原料。 在另一优选例中, 所述的氘代二苯基脲包括 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基;)苯基]酰 脲)—苯氧基 )-2-( N-l,,r,r-三氘代甲基) B比啶酰胺 (CM4307); 和

4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基]酰脲) -苯氧基) -2-( N-Γ, Γ,Γ-三氘代甲基)吡啶酰 胺对甲苯磺酸盐 (CM4307 · TsOH

应理解, 在本发明范围内中, 本发明的上述各技术特征和在下文 (如实施例;)中具 体描述的各技术特征可以互相组合, 从而构成新的或优选的技术方案。 限于篇幅, 在 此不再 累述。 附图说明

图 1是雄性 SD大鼠口服 3mg/kg对照化合物 CM4306后的血清药物浓度 (ng/ml)曲 线图。

图 2是雄性 SD大鼠口服 3mg/kg本发明化合物 CM4307后的血清药物浓度 (ng/ml) 曲线图。

图 3是 CM4306和 CM4307对人肝细胞癌 SMMC-7721裸鼠移植模型的抑制作 用曲线图。 图中, " treatment"表示治疗的时间为 14天。 随后为停药后的观察期。 治疗前 5天是模型制备期。 具体实施方式

本发明人经过研究, 意外地发现, 本发明的氘代的 ω-二苯基脲及其药学上可接 受的盐与未经氘代的化合物相比, 具有明显更优异的药物动力学和 /或药效学性能, 因此更适合作为抑制 mf激酶的化合物, 进而更适用制备治疗癌症以及相关疾病的药 物。

此外, 本发明人还

式中, γ 为卤素或

化合物。 在此基础上完成了本发明。

如本文所用, "卤素"指?、 Cl、 Br、 和 I。 更佳地, 卤原子选自 F、 C1和 Br。 如本文所用, "垸基 "包括直链或支链的垸基。 优选的垸基是 C1-C4垸基, 例 如甲基、 乙基、 丙基、 异丙基、 丁基、 异丁基、 叔丁基等。

如本文所用, "氘代"指化合物或基团中的一个或多个氢被氘 取代。 氘代可 以是一取代、 二取代、 多取代或全取代。 术语 "一个或多个氘代的"与 "一次或多次 氘代"可互换使用。

在另一优选例中, 氘在氘取代位置的氘同位素含量是大于天然氘 同位素含量

(0.015%), 更佳地大于 50%, 更佳地大于 75%, 更佳地大于 95%, 更佳地大于 97%, 更佳地大于 99%, 更佳地大于 99.5%。

在另一优选例中,式 化合物至少含有 1个氘原子, 更佳地 3个氘原子, 更佳地 5个氘原子。

如本文所用, 术语 "化合物 CM4306"指化合物 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基;)苯基] 酰脲;) -苯氧基;) -Ν-甲基吡啶酰胺。

如本文所用, 术语 "化合物 CM4307"指化合物 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基;)苯基] 酰脲) -苯氧基) -2-(N-l,,r,r-三氘代甲基)吡啶酰胺。

如本文所用, 术语 " TsOH"表示对甲苯磺酸。 因此, CM4307 · TsOH表示化合 物 CM4307的对甲苯磺酸盐。 氘代二苯基脲

在本发明的优选的氘

式中:

X 是 N或者 N + -0-;

R 1 是卤素 (如 F,C1或 Br), 一个或多个氘代的或全氘代的 C1-C4垸基;

R 2 是未氘代的、 一个或多个氘代的或全氘代的 C1-C4垸基, 或者部分或全部卤 素取代的 C1-C4垸基;

R 3 、 R 4 、 R 5 、 R 8 、 R 9 、 R 1Q 、 R"、 R 12 、 R 13 、 R 14 分别是氢、 氘、 或卤素 (如 F,C1, 或 Br);

R 6 是氢、 氘、 或一个或多个氘代的或全氘代的 C1-C4垸基;

R 7 是氢、 氘、 或一个或多个氘代的或全氘代的 C1-C4垸基;

附加条件是 R 2 、 R 3 、 R 4 、 R 5 、 R 6 、 R 7 、 R 8 、 R 9 、 R 10 、 R"、 R 12 、 R 13 或 R 14 中至 少一个是氘代的或氘。

在另一优选例中, 氘在氘取代位置的氘同位素含量至少是大于天 然氘同位素含 量 (0.015%),较佳地大于 30%,更佳地大于 50%,更佳地大于 75%,更佳地大于 95%, 更佳地大于 99%。 在另一优选例中, 式 化合物中的除 H之外的其他元素 (如 N、 C、 0、 F等;)全 部或基本上 (>99wt%;)为丰度最高的天然存在的元素, 例如 14 N、 12 C、 16 0和 19 F。

在另一优选例中,式 化合物至少含有 1个氘原子, 更佳地 3个氘原子, 更佳地 5个氘原子。

在另一优选例中, R 1 选自卤素; 更佳的是氯;

在另一优选例中, R 2 是三氟甲基;

在另一优选例中, R 6 或 R 7 分别独立地选自: 氢、 氘、 氘代的甲基、 或氘代的乙 基; 更佳地, 选自一氘甲基、 二氘甲基、三氘甲基、 一氘乙基、 二氘乙基、三氘乙基、 四氘乙基、 或五氘乙基。

在另一优选例中, R 6 或 R 7 分别独立地选自: 氢、 甲基或三氘甲基。

在另一优选例中, R 3 、 R 4 或 R 5 分别独立地选自: 氢或氘。

在另一优选例中, R 8 、 R 9 、 R 1Q 或 R 11 分别独立地选自: 氢或氘。

在另一优选例中, R 12 、 R 13 或 R 14 分别独立地选自: 氢或氘。

在另一优选例中, 所述化合物是选自下组的优选化合物:

N-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -Ν,-(4-(2-(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘甲基氨基甲酰基 )-4-吡啶基 氧;)苯基;)脲;

4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基) 苯基)脲基)苯氧基 )-2-(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘甲基氨基甲酰 基;)吡啶 -1-氧化物; 中间体

如本文所用, 术语 "本发明的中间体"指式 Β化合物:

式中, Υ为卤素或

上式化合物中的除 Η之外的其他元素 (如 N、 C、 0等;)全部或基本上 (>99wt%;) 为丰度最高的天然存在的元素, 例如 14 N、 12 C和 16 0。 活性成分

如本文所用, 术语 "本发明化合物 "指式 ω所示的化合物。 该术语还包括及式 ω 化合物的各种晶型形式、 药学上可接受的盐、 水合物或溶剂合物。

如本文所用, 术语 "药学上可接受的盐"指本发明化合物与酸或碱 形成的适合 用作药物的盐。药学上可接受的盐包括无机盐 和有机盐。一类优选的盐是本发明化合 物与酸形成的盐。 适合形成盐的酸包括但并不限于: 盐酸、 氢溴酸、 氢氟酸、 硫酸、 硝酸、 磷酸等无机酸, 甲酸、 乙酸、 丙酸、 草酸、 丙二酸、 琥珀酸、 富马酸、 马来酸、 乳酸、 苹果酸、 酒石酸、 柠檬酸、 苦味酸、 甲磺酸、 苯甲磺酸, 苯磺酸等有机酸; 以 及天冬氨酸、 谷氨酸等酸性氨基酸。 制备方法

下面更具体地描述本发明式 ω结构化合物和式 Β中间体的制备方法, 但这些具体 方法不对本发明构成任何限制。 本发明化合物还可以任选将在本说明书中描述 的或本 领域已知的各种合成方法组合起来而方便的制 得, 这样的组合可由本发明所属领域的 技术人员容易的进行。

本发明使用的未氘代的 ω-二苯基脲及其生理上相容的盐的制备方法是 已知的。 对应氘代的 ω-二苯基脲的制备可以用相应的氘代起始化合 物为原料, 用同样的路线 合成。 例如, 本发明式①化合物可按 WO 2000/042012中所述的制备方法制备, 不同 点在于在反应中用于氘代的原料代替非氘代的 原料。

通常, 在制备流程中, 各反应通常在惰性溶剂中, 在室温至回流温度 (如 0°C〜 80 °C , 优选 0°C〜50°C)下进行。 反应时间通常为 0.1小时 -60小时, 较佳地为 0.5-48 小时。

以化合物 CM4307为例, 一种优选的制备流程如下:

合成路线 如合成路线一所示, 对羟基苯胺 (化合物 I)和 3-三氟甲基 -4-氯 -苯胺 (化合物 II)在

NN'-羰基二咪唑、 光气或三光气作用下, 反应得到 1-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基; )-3-(4-羟 基苯基;)脲 (化合物 111)。吡啶甲酸甲酯 (化合物 IV)和氘代甲胺或氘代甲胺盐酸盐在碱 (例 如碳酸钠、 碳酸钾、 氢氧化钠、 三乙胺、 吡啶等;)的作用下、 或直接混合反应, 得到吡 啶 -2-(N-l,, r,r-三氘代甲基;)甲酰胺 (化合物 、。 化合物 III和化合物 V在碱 (如叔丁醇 钾、 氢化钠、 氢化钾, 碳酸钾、 碳酸铯、 磷酸钾、 氢氧化钾、 氢氧化钠;)和任选的催化 剂 (如碘化亚铜和脯氨酸、 或碘化亚铜和吡啶甲酸)的作用下, 得到化合物 CM-4307。 上述反应在惰性溶剂, 如二氯甲垸、 二氯乙垸、 乙腈、 正己垸、 甲苯、 四氢呋喃、 Ν,Ν- 二甲基甲酰胺、 二甲基亚砜等中, 温度 0〜200°C下进行。

以化合物 CM4307为例, 另一种优选的制备流程如下:

II Vffl

CM-4307

合成路线二

如合成路线二所示, 吡啶甲酸酯 (化合物 VI)和对羟基苯胺 (化合物 I)在碱 (如叔丁 醇钾、 氢化钠、 氢化钾, 碳酸钾、 碳酸铯、 磷酸钾、 氢氧化钾、 氢氧化钠;)和任选的催 化剂 (如碘化亚铜和脯氨酸、 或碘化亚铜和吡啶甲酸)的作用下, 得到胺 (化合物 νπ)。 再和化合物 II在 NN'-羰基二咪唑、 光气或三光气作用下、 或和 4-氯 -3-三氟甲基 -苯基 异氰酸酯 (化合物環)反应得到脲 (化合物 ΙΧ)。化合物 IX和氘代甲胺或氘代甲胺盐酸盐在 碱 (例如碳酸钠、 碳酸钾、 氢氧化钠、 三乙胺、 吡啶等;)的作用下、 或直接混合反应得 到化合物 CM4307。 上述反应在惰性溶剂, 如二氯甲垸、 二氯乙垸、 乙腈、 正己垸、 甲苯、 四氢呋喃、 Ν,Ν-二甲基甲酰胺、 二甲基亚砜等中, 温度 0〜200°C下进行。

以化合物 CM4307为例, 另一种优选的制备流程如下:

ΠΙ CM-4307

合成路线三

如合成路线三所示, 对甲氧基苯胺 (化合物 X)和化合物 II在 NN'-羰基二咪唑、 光 气或三光气作用下、 或和 4-氯 -3-三氟甲基-苯基异氰酸酯 (化合物環)反应得到脲 (化合 物 XI)。利用本领域已知的各种去甲基方法得到 1-(4-氯 -3- (三氟甲基;)苯基; )-3-(4-羟基苯 基;)脲 (化合物 111)。 然后使用和合成路线一中描述的同样方法, 或本领域已知的各种合 成方法, 化合物 III和化合物 V反应得到化合物 CM4307。上述反应在惰性溶剂, 如二 氯甲垸、 二氯乙垸、 乙腈、 正己垸、 甲苯、 四氢呋喃、 Ν,Ν-二甲基甲酰胺、 二甲基亚 砜等中, 温度 0〜200°C下进行。

以化合物 CM4307为例, 一种特别优选的制备流程如下:

氘代可以通过氘代甲胺引入的。

可通过以下反应得到氘代甲胺或其盐酸盐。 硝基甲垸在碱 (氢化钠、 氢化钾、 氘 代氢氧化钠、 氘代氢氧化钾、 碳酸钾等;), 或在相转移催化剂下, 和氘水反应得到氘 代硝基甲垸, 如有必要, 重复上述实验, 以得到高纯度的氘代硝基甲垸。氘代硝基甲 垸还原, 如锌粉、 镁粉、 铁或镍等作用下, 得到氘代甲胺或其盐酸盐。

D O 还原

CH-,ΝΟ J ·2 CD 3 N0 2 CD 3 NH 2 -HCI 或 CD 3 NH 2 再者可以通过以下反应得到氘代甲胺或其盐酸 盐。

CD3OD CD 3 NH 2 -HCI 或 CD 3 NH 2

关键中间体 3也可以通过如下方法从氘代甲醇合成。

3

其具体合成方法在实施例 1中有详细的说明。 本发明的主要优点包括:

(1) 本发明化合物对磷酸激酶 (KinaseM列如 mf激酶具有优异的抑制性。

(2) 通过本发明的式 B 中间体, 可以方便、 高效、 高纯度地制备多种氘代二苯 基脲。

(3) 反应条件更加温和, 操作过程更为安全。 下面结合具体实施例, 进一步阐述本发明。 应理解, 这些实施例仅用于说明本 发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例 中未注明具体条件的实验方法,通常按 照常规条件, 或按照制造厂商所建议的条件。 除非另外说明, 否则份数和百分比为重 量份和重量百分比。 实施例 1 : ^(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-^-(4-(2-( 1,,1,,1,-三氘甲基氨基甲酰 基) -4-吡啶基氧)苯基)脲 (化合物 CM4307)

合成路线:

CM4307

流程一

1、 4-氯吡啶-2-(7¥-1,,1,,1,-三氘代甲基)甲酰胺( 3)的制备

在配有尾气处理装置的 250 mL单颈圆底烧瓶中,加入氯化亚砜 (60 mL), 维持温 度在 40〜50°C之间, 向其中缓慢的滴加无水 DMF(2 mL), 滴加完毕后, 继续搅拌 10 分钟, 在 20分钟内向其中分批加入烟酸 (20 g, 162.6 mmol), 溶液的颜色逐渐由绿色 转变为浅紫色。 将温度升到 72°C, 搅拌回流 16小时, 产生大量的固体沉淀物。 冷却 到室温, 用甲苯 (100 mL)稀释, 浓缩至近干, 然后再用甲苯稀释, 浓缩至干。 过滤, 用甲苯洗涤, 得到淡黄色的 3-氯 -吡啶 -2-甲酰氯固体。 冰浴下将此固体慢慢的加入到 氘代甲胺的四氢呋喃饱和溶液中, 维持温度低于 5 °C, 继续搅拌 5小时。 浓缩, 加乙 酸乙酯, 析出白色固体, 滤除, 滤液用饱和食盐水洗涤, 无水硫酸钠干燥, 浓缩至干, 得到淡黄色的 4-氯吡啶 -2-(N-l,,r,r-三氘代甲基)甲酰胺 (3) (20.68 g) , 收率 73%。

1H NMR (CDC1 3 , 300 MHz): 8.37 (d, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.96(br, 1H), 7.37(d, 1H).

2、 4-(4-氨苯氧基)-2-吡啶-(^-1,,1,,1,-三氘代甲 )甲酰胺(5)的制备

向 100 mL干燥的无水 DMF中依次加入对氨基苯酚 (9.54 g, 0.087 mol) , 叔丁醇 钾(10.3 g, 0.092 mol), 溶液变成深褐色, 室温下搅拌 2小时后, 向其中加入 4-氯吡啶 -2-(N-r, l,,r-三氘代甲基)甲酰胺 (3)(13·68 g, 0.079 mol) , 无水碳酸钾 (6.5 g, 0.0467 mol) , 将反应液温度升到 80°C后继续搅拌过夜。 TLC检测反应完毕, 冷却到室温, 将反应液倒入乙酸乙酯 (150 mL)和饱和食盐水 (150 mL)的混和溶液中, 搅拌分层, 静 置后分液,水层用乙酸乙酯萃取 (100 mLx3),合并萃取液,用饱和水洗涤 (100 mLx3), 无水硫酸钠干燥,浓缩,得到淡黄色的 4-(4-氨苯氧基) -2-吡啶 -(N-Γ, Γ, Γ-三氘代甲基) 甲酰胺 (18.00 g), 收率 92%。

1H NMR (CDC1 3 , 300 MHz): 8.32 (d, 1H), 7.99 (br, 1H), 7.66 (s, 1H), 6.91〜6.85 (m, 3H), 6.69 (m, 2H), 3.70 (br, s, 2H). 3、 ^(4-氯-3-(三氟甲基)苯基)-^-(4-(2-(^1,,1,,1,-三 氘甲基氨基甲酰基)-4-吡啶 基氧)苯基)脲 (CM4307)的制备

向 120 mL二氯甲垸中加入 5-氨基 -2-氯 -三氟甲基苯(15.39 g, 78.69 mol), Ν,Ν'- 羰基二咪唑 (CDIX13.55 g, 83.6 mmol) , 室温搅拌 16小时后, 向其中缓慢的滴加 4-(4- 氨苯氧基) -2-吡啶 -(N-Γ, Γ, Γ-三氘代甲基)甲酰胺 (18 g, 73 mmol)的二氯甲垸 (180 mL) 溶液,室温下继续搅拌 18小时。 TLC检测反应完毕,旋去部分二氯甲垸溶剂至 100 mL 左右, 室温放置数小时, 有大量白色固体析出, 抽滤, 固体用大量二氯甲垸洗涤。 滤 液浓缩去除部分溶剂后,又析出部分固体,合 并两次固体,用大量二氯甲垸再次洗涤, 得到白色粉状的 N-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -Ν,-(4-(2-(Ν-Γ,Γ, Γ-三氘甲基氨基甲酰 基) -4-吡啶基氧)苯基)脲 CM4307纯品 (20.04 g) , 收率 58%。

1H NMR (CD 3 OD, 300 MHz): 8.48 (d, 1H), 8.00 (d, 1H), 7.55 (m, 5H), 7.12 (d, 1H), 7.08 (s, 2H), ESI-HRMS m/z: C21H13D3C1F3N403, Calcd. 467.11 , Found 490.07 (M+Na) + .

另外, 可将化合物 CM4307溶于二氯甲垸中, 与过氧苯甲酸进行反应, 制得相 应的氧化产物: 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基) 苯基)脲基)苯氧基 )-2-(Ν-Γ, Γ, Γ-三氘甲基 氨基甲酰基;)吡啶 -1-氧化 实施例 2: 4-氯吡啶-2-(^-1,,1,,1,-三氘代甲基)甲酰胺(3) 的制备

CI

Na 2 CQ 3 ,

N CONHCD3

3

a) 将邻苯二甲酰亚胺(14.7g, O. lmol), 氘代甲醇 (3.78g, 0.105mol, 1.05eq), 三苯基 膦 (28.8g, O. l lmol, l. leq)溶于无水四氢呋喃中, 冰浴下滴加 DEAD(l . leq)的四氢呋喃 溶液, 滴加完毕后室温搅拌一小时。 过柱提纯, 或者溶剂旋干后, 加适量 DCM于冰 箱冷冻析出固体后过滤, 滤液旋干, 再快速过柱, 得纯品氘代甲基邻苯二甲酰亚胺 14.8g o 收率 90%。

b) 氘代甲基邻苯二甲酰亚胺 (12.5g, 0.077mol)溶于适量盐酸 (6N, 50ml)中, 于封 管中回流 24-30小时, 反应液冷却至室温后, 置于冰箱中冷却到零度以下, 过滤析出 的固体, 用冷的去离子水洗涤, 收集滤液, 旋蒸除水并干燥得到氘代甲胺盐酸盐。 加 入无水 DCM(lOOml)于氘代甲胺盐酸盐中, 并加入 4-氯烟酸甲酯盐酸盐 (6.52g, 0.038mol, 0.5 eq), 碳酸钠(12.2g, 0.12mol, 1.5eq), 反应瓶密封, 置于冰箱中反应一天。 TLC检测反应,完毕后水洗,干燥,浓缩,过柱 提纯。得化合物 4-氯吡啶 -2-(N-l',r,r- 三氘代甲基;)甲酰胺 (3),5.67g, 收率 86% 。 其结构特征与实施例 1一致。 实施例 3

1: 4-氯 -3-三氟甲基苯基异氰酸酯 A4的制备

将三光气(167g, 0.56 mol, 0.5eq)溶于氯仿 (500 mL),接好尾气吸收装置, 在 5°C 下滴加 N-甲基吗啉 (11.4g, 0.11 mol, O.leq)的氯仿 (100 mL)溶液, 滴加完毕后, 于 10°C继续滴加 4-氯 -3-三氟甲基苯胺 (220g, 1.13 mol, l.Oeq)的氯仿 (700 mL)溶液。 升 温至 40 °C搅拌 15小时, 升温至 50°C搅拌 5小时, 升温至 60〜65°C回流 5小时。 常 压除去溶剂, 减压蒸馏 (油温 110〜120°C, 真空度 200Pa)收集 95〜100°C馏分得到标 题化合物, 为无色液体 200g, 纯度 98.7%, 收率 84%。

2: 4-氯吡啶-2-(^-1,,1,,1,-三氘代甲基)酰胺(中 体 A2)的制备

方法 1:

将 4-氯 -2-吡啶甲酸甲酯 (50g, 0.29mol, leq)置入盛有 250mL四氢呋喃的三口瓶 中, 搅拌并加入 1,1,1-三氘代甲胺盐酸盐 (31g, 0.44mmol, 1.5eq), 400目的无水碳酸 钾 (80g, 0.58mol, 2eq), 室温搅拌反应 20 小时后加入水 (250mL)和甲基叔丁基醚 (150mL), 搅拌后分层, 获得有机相。 水相用甲基叔丁基醚萃取 (lOOmL), 合并有机 相并加入无水硫酸钠干燥并过滤,减压除去溶 剂得到标题化合物,为浅黄色液体 48g, 纯度 99%, 收率 96%。

1HNMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 7.64(dd, J= 2Hz, 5.2Hz, 1H), 7.97(d,J= 1.6Hz, 1H), 8.54(d,J=5.2Hz, 1H), 8.74(br, 1H). MS (ESI, m/z) calcd. for C 7 H 4 D 3 C1N 2 0: 173, found: 174 [M +H]+

方法 2:

将 4-氯 -2-吡啶甲酸甲酯 (130g, 0.76 mol, leq)溶于无水乙醇 (1.3 L)的中, 搅拌并 加入 1, 1 ,1-三氘代甲胺盐酸盐 (80g, 1.13 mol, 1.5eq), 无水碳酸钾 (313 g, 2.67 mol, 3eq) , 室温搅拌反应 50小时。 过滤, 并用乙醇 (260mL X 2)洗涤, 滤液减压除去溶剂, 加入乙酸乙酯 (400 mL), 并用饱和食盐水 (250 mL X 2)洗涤, 用乙酸乙酯 (100 mL X 2) 反萃水相, 合并有机相, 用无水硫酸钠干燥, 过滤, 减压除去溶剂得到标题化合物, 为浅黄色液体 109g, 纯度 98%, 收率 83%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.64(dd, J= 2Hz, 5.2Hz, 1H), 7.97(d, J = 1.6Hz, 1H), 8.54(d, J = 5.2Hz, 1H), 8.74(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C 7 H 4 D 3 C1N 2 0: 173, found: 174 [M +H]+

3: l-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -3-(4-羟基-苯基) -脲 A5的制备

方法 1 :

在室温下, 将 4-氨基 -苯酚 (5g, 45.82mmol, leq)溶于二氯甲垸 (40mL)中, 并将 4-氯 -3-三氟甲基苯基异氰酸酯 (10.7g, 48.1 1mmol, 1.05eq)的二氯甲垸 (40mL)溶液滴 加到上述溶液中, 室温搅拌反应 16小时, 过滤并用二氯甲垸 (10 X 2)洗涤, 得到标题 化合物, 为浅褐色固体 14.2g, 纯度 97%, 收率 94%。

1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 6.70(dd, J = 2Hz, 6.8Hz, 1H), 7.22(dd, J = 2Hz, 6.4Hz, 1H), 7.58-7.24(m, 1H), 8.10(d, J = 2Hz, 1H), 8.50(br, 1H), 9.04(br, 1H), 9.14(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C 14 H 10 ClF 3 N 2 O 2 : 330, found: 331 [M +H]+

A6 A5

将 4-氯 -3-三氟甲基苯基异氰酸酯 (5.15g, 26mmol, 1.05eq)溶于二氯甲垸 (30 mL), 室温搅拌 20小时, 滴加对甲氧基苯胺 (3.07g, 25mmol, leq)的二氯甲垸 (20 mL), 室温 搅拌反应 20小时。 过滤, 并用二氯甲垸 (5 mL X 2)洗涤, 固体溶于乙酸乙酯 (50 mL), 并用稀盐酸洗涤 (IN, 10 mL), 饱和食盐水洗涤 (20 mL), 有机相用无水硫酸钠干燥, 减压除去溶剂得到白色固体 1-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基; )-3-(4-甲氧基-苯基;) -脲 A6(4.5g) , 收率 52%。

1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 3.73(s, 3H), 6.86-6.90(m, 2H), 7.35-7.39(m, 2H),

7.59-7.65(m, 2H), 8.11(d, J = 2Hz, 1H), 8.65(br, 1H), 9.09(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C 15 H 12 C1F 3 N 2 0 2 : 344, found: 345 [M +H]+ 将 l-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -3-(4-甲氧基-苯基) -脲 A6(344 mg, lmmol, leq)溶 于乙酸 (4 mL), 加入氢溴酸 (40%, I mL) , 回流 5小时, 冷却至室温, 并加入冰水 (10 mL) , 用乙酸乙酯 (20 mL)萃取, 并用饱和碳酸氢钠溶液 (10 mL)洗涤, 有机层用无水 硫酸钠干燥, 减压除去溶剂得到标题化合物, 为浅黄色固体 140mg, 纯度 90%, 收 率 42%。

1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 6.70(dd, J = 2Hz, 6.8Hz, 1H), 7.22(dd, J = 2Hz, 6.4Hz, 1H), 7.58-7.24(m, 1H), 8.10(d, J = 2Hz, 1H), 8.50(br, 1H), 9.04(br, 1H), 9.14(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C 14 H 10 ClF 3 N 2 O 2 : 330, found: 331 [M +H]+

4: 4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基】酰脲)-苯氧基)-2 -( ^-1,,1,,1,-三氘代甲基)吡啶 酰胺 CM4307的制备

在室温下, 将 1-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -3-(4-羟基-苯基) -脲 A5(4g, 12.10mmol, leq)溶于 N, N-二甲基甲酰胺 (20mL), 分批加入叔丁醇钾 (4.6g, 41.13mmol, 3.4eq) , 搅拌反应 3小时,加入 4-氯吡啶 -2-(N-l,,r,r-三氘代甲基)酰胺 (2.3g, 13.31mmol, l . leq) 与碳酸钾 (0.8g, 6.05mmol, 0.5eq) , 加热至 80度搅拌反应 1.5小时。 冷却至室温, 力口 入乙酸乙酯 (200mL), 过滤除去无机盐, 用饱和食盐水洗涤 (50mL X 3), 分层, 有机 层用无水硫酸钠干燥, 过滤减压除去溶剂, 向固体中加入乙腈 (15mL)回流搅拌 2 小 时, 冷却至室温过滤得到 CM4307, 为浅黄色固体 3.4g, 纯度 96%, 收率 60%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.15(dd, J = 2.8Hz, 5.6Hz, 1H), 7.17-7.19(m,2H), 7.40(d, J = 2.4Hz, 1H), 7.59-7.69(m, 4H), 8.13(d, J = 2.4Hz, 1H), 8.51(d, J = 6Hz, 1H), 8.75(br, 1H), 8.90(br, 1H), 9.22(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C 21 H 13 D 3 C1F 3 N 4 0 3 : 467, found: 468[M +H]+ 实施例 4

化合物 CM4307的合成

CM4307.TsOH

1: 4-氯吡啶-2-(^-1,,1,,1,-三氘代甲基)酰胺(中 体 A2)的制备

在氮气保护下, 将四氢呋喃 (10.86 kg)加入到 30L反应釜中, 开启搅拌, 依次投 入 1,1,1-三氘代甲胺盐酸盐 (1.50 kg, 21.26mol, 1.5eq)、 4-氯 -B比啶 -2-甲酸甲酯 (2.43 kg, 14.16mol, leq)、 无水碳酸钾 (3.92 kg, 28.36mol, 2eq)。 于 33 °C反应 15h, 加入纯水 (12.20 kg),并用甲基叔丁基醚萃取两次 (3.70 kgx2),合并有机层,加入无水硫酸钠 (0.50 kg)搅拌干燥 1小时; 过滤, 在水温 40±2°C、 真空度≤-0.09Mpa下, 滤液减压脱溶, 得到标题化合物, 为淡黄色油状液体 2.41 kg, 纯度 99.0%, 收率 98%。

1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 7.64(dd, J= 2Hz, 5.2Hz, 1H), 7.97(d, J = 1.6Hz, 1H), 8.54(d, J = 5.2Hz, 1H), 8.74(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C 7 H 4 D 3 C1N 2 0: 173, found : 174 [M +H]+

2: 4-(4-氨苯氧基) - 2-吡啶-(^-1,,1,,1,-三氘代甲基)酰胺(中间体 A3)的制备 方法 1:

在氮气保护下, 将二甲亚砜 (2.75 kg)加入到 20 L的反应釜中, 开启搅拌, 投入 4-氯吡啶 -2-(Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基)酰胺 (2.41kg, 13.88mol, leq)、 4-氨基苯酚 (1.62 kg, 14.84mol, 1.08eq), 再投入叔丁醇钾(1.66 kg, 14.79mol, l.leq)。 釜温稳定后, 升温 并保持釜内温 80°C反应 4小时。将釜温降至 40°C后, 加入异丙醇 (7.90kg)搅拌稀释反 应液,再用异丙醇洗涤反应釜,并转移至 30 L的反应釜;在氮气保护下滴加盐酸 (5.81 kg), 滴加完毕后, 搅拌并离心过滤, 并加入纯化水洗涤; 离心的固体转入 50 L的反 应釜, 加入纯化水 (21.00kg)搅拌使之全部溶解; 在氮气保护下, 缓慢滴加碳酸钾溶液 于上述 50L反应釜 (2.5 kg碳酸钾溶于 7升纯化水), 约 1.5小时滴加完毕; 放料离心 过滤,用纯化水洗涤产品, 并真空干燥 24小时,得到标题化合物,为淡棕色晶体 2.72 kg, 纯度 99.9%, 收率 78%。

1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 5.19(br, 2H), 6.66-6.68(m, 2H), 6.86-6.88(m, 2H), 7.07(dd, J = 2.8Hz, 5.6Hz, 1H), 7.36(d, J = 2.8Hz, 1H), 8.45(d, J = 5.6Hz, 1H), 8.72(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C 13 H 10 D 3 N 3 O 2 Cl: 246, found: 247[M +H]

在室温下, 将 4-氯吡啶 -2-(N-l,,r,r-三氘代甲基)酰胺 (4.3g, 24.77mmol, leq) 溶于四氢呋喃 (20mL)中, 室温搅拌并加入 4-氨基苯酚 (2.7g, 24.77mmol, leq) , 四丁 基硫酸氢铵(1.68g, 4.95mmol, 0.2eq), 氢氧化钠固体(1.35g, 33.69mmol, 1.36eq)。 缓慢滴加 45%的氢氧化钠水溶液 (氢氧化钠 (1.32 g)溶于水 (1.6 mL)), 加热至 67°C并搅 拌反应 20小时。 冷却至 20°C下, 使反应混合物的温度不超过 25 °C的速度加入 37 % 的浓盐酸 (10mL)。 搅拌 1 小时, 过滤并用四氢呋喃洗涤 (20mL), 将得到的固体溶解 于水中 (60mL),将反应液温度降至 10-20°C,缓慢滴加 22.5%的氢氧化钠溶液 (2.6mL)), 调节 pH = 3-3.5, 继续滴加 22.5%的氢氧化钠溶液 (3.4mL), 调节 pH =7-8, 有浅黄色 固体析出, 在滴加过程中, 保持体系温度不超过 20度。 过滤并用水 (12 mL X 2)洗涤, 真空干燥得到浅黄色的 4-(4-氨基 -苯氧基;) -N-氘代甲基吡啶 -2-甲酰胺 5.01g, 纯度 99%, 收率为 82%。

1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 5.19(br, 2H), 6.66-6.68(m, 2H), 6.86-6.88(m, 2H), 7.07(dd, J = 2.8Hz, 5.6Hz, 1H), 7.36(d, J = 2.8Hz, 1H), 8.45(d, J = 5.6Hz, 1H), 8.72(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C 13 H 10 D 3 N 3 O 2 Cl: 246, found: 247[M +H]+

3: 4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基】酰脲)-苯氧基)-2 -( ^-1,,1,,1,-三氘代甲基)吡啶 酰胺 (CM4307)的制备

在氮气保护下, 向 50L 干燥的反应釜加入二氯甲垸 (17.30 kg)与二甲亚砜 (2.92 kg) , 室温搅拌并加入 4-(4-氨苯氧基) - 2-吡啶 -(Ν-Γ, Γ, Γ-三氘代甲基)酰胺 (2.65kg, 10.76mol) o 将 4-氯 -3-三氟甲基苯基异氰酸酯 (2.50kg, 1 1.26mol, 1.05eq)溶于二氯甲 垸 (7.00kg)中, 并滴加至反应釜中, 室温反应 10min, 用冰盐水降至 3±2°C。 向反应釜 中滴加 10.60kg的纯化水, 并控制温度为 3±2°C, 滴完后继续搅拌 30min, 放料离心 过滤, 用二氯甲垸 (7.00kg)洗涤产品, 将得到的产品用真空干燥 24h, 得到类白色粉 末状固体 4.8kg, 纯度 99.8%, 收率 95.4%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.15(dd, J = 2.8Hz, 5.6Hz, 1H), 7.17-7.19(m,2H) 7.40(d, J = 2.4Hz, 1H), 7.59-7.69(m, 4H), 8.13(d, J = 2.4Hz, 1H), 8.51(d, J = 6Hz, 1H), 8.75(br, 1H), 8.90(br, 1H), 9.22(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C 21 H 13 D 3 C1F 3 N 4 0 3 : 467, found: 468[M +H]+ 实施例 5

4: 4-(4-(3-(4-氯-3-(三氟甲基)苯基】酰脲)-苯氧基)-2 -(^-1,,1,,1,-三氘代甲基)吡啶 酰胺对甲苯磺酸盐 (CM4307 · TsOH)的制备

将无水乙醇 (45.00kg)加入到 100L的反应釜, 开启搅拌, 分别加入 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基]酰脲) -苯氧基) -2-( Ν-Γ,Γ,Γ-三氘代甲基)吡啶酰胺 (4.50kg, 9.62mol, leq)和对甲苯磺酸一水合物 (0.66kg, 3.47mol, 0.36eq), 升温至 78°C并回流 40分钟, 待固体全部溶解。

将对甲苯磺酸一水合物 (1.61kg, 8.46mol)溶解于无水乙醇 (4.50kg)中, 升温至 70 °C溶解。 然后将溶液添加到上述 100L的反应釜中, 降温至 0-2°C, 保温 30分钟。 放 料离心过滤, 用无水乙醇 (13.50kg)洗涤产品, 用真空干燥 24h, 得到标题化合物, 为 白色至类白色固体 5.75kg, 纯度 99.3%, 收率 93.4%。

1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 2.30(s, 3H), 7.15(d,J= 8.8Hz, 2H), 7.20(d,J = 8.8Hz, 2H), 7.23(dd, J= 2.8Hz, 6Hz, 1H), 7.52(d, J= 8Hz, 2H), 7.55(d, J = 2.8Hz, 1H), 7.63(d, J= 8.8Hz, 3H), 7.68(dd, J = 2.4Hz, 9.2Hz, 1H), 8.03(br, 1H), 8.14(d, J = 2.4Hz, 1H), 8.56(d,J= 6Hz, 1H), 8.91(br, 1H), 9.17(br, 1H), 9.36(br, 1H).

13 C NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 21.1, 26.1, 111.7, 115.2, 117.0, 120.7(2C), 121.6 (2C), 121.9, 122.8, 123.2, 124.6,125.6 (2C), 127.2, 129.0(2C), 132.3, 138.8, 139.5, 139.9, 144.1, 146.6, 147.2, 152.8, 159.9, 170.7 ppm.

液相条件: Agilent 1100 Series; 色谱柱: Synergi 4μ POLAR-RP 80A, 250X4.6 mm, 4μπΐ; 柱温: 25°C 检测波长: UV210nm ; 流动相: A:磷酸二氢铵 10mmol/L, B: 甲醇; 进样量: ΙΟμί; 流速: 0.8 mL/min; 分析时间: 70min; 梯度程序: 0至 15分钟 50%流动相 B, 15至 32分钟流动相 B增加到 75%, 然后 32至 55分钟 75% 流动相 B洗脱 23分钟。 保留时间: 4.95min (对甲苯磺酸); 47.1 lmin(CM4307)o

1: 4-氯吡啶 -2-甲酸叔丁酯 A7的制备

将 4-氯吡啶 -2-甲酸 (10.5 g, 66.64 mmol)悬浮于氯化亚砜 (40 mL)中, 升温至 80

°C回流, 滴加 N, N-二甲基甲酰胺 (0.2mL), 回流 2小时。 减压除去二甲亚砜得到浅 黄色的酰氯, 并加入二氯甲垸 (60mL)。 在 -40°C下, 将上述配制的二氯甲垸溶液滴加 至叔丁醇 (25mL)、 吡啶 (20mL)与二氯甲垸 (80mL)的混合溶液中。 将该反应液升温至 50°C并搅拌 16小时。 减压除去溶剂, 加入乙酸乙酯 (150 mL), 并用饱和食盐水洗涤 (50mLX2), 再用氢氧化钠溶液 (IN)洗涤 (50mLX2), 分层, 有机相用无水硫酸钠干 燥, 减压除去溶剂, 真空干燥得到标题化合物, 为浅黄色固体 ll.lg, 纯度 95%, 收 率 78%。

1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.56(s, 9H), 7.80(dd, J = 2.4Hz, 5.2Hz, 1H), 8.02(d,J=2Hz, 1H), 8.69(d,J= 5.2Hz, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C 10 H 12 ClNO 2 : 213, found: 158[M-Bu l +H] +

2: 4-(4-氨基-苯氧基) -吡啶 -2-甲酸叔丁酯 A8的制备

在室温下, 将对氨基苯酚 (0.51g, 4.70 mmol, leq)溶于 N, N-二甲基甲酰胺 (10 mL), 分批加入叔丁醇钾 (0.53 g, 4.70 mmol, leq)搅拌 0.5小时, 加入 4-氯吡啶 -2-甲 酸叔丁酯(lg, 4.70 mmol, leq)与碳酸钾 (45 mg, 0.33mmol, 0.07eq), 并加热至 80°C 搅拌 2小时。 冷却至室温, 加入乙酸乙酯 (50 mL), 过滤除去不溶物, 加入饱和食盐 水洗涤 (20 mLX2), 有机相用无水硫酸钠干燥, 减压除去溶剂, 柱层析分离 (二氯甲 垸: 乙酸乙酯 =30:1)得到标题化合物 805mg, 纯度 96%, 收率 60%。

1HNMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.52(s, 9H), 5.21(br, 2H), 6.64(d,J= 8.8Hz, 2H) 6.87(d,J= 8Hz, 2H), 7.35(dd, J= 2.4Hz, 5.6Hz, 1H), 8.50(d,J= 6Hz, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C 10 H 12 ClNO 2 : 286, found: 231[M-Bu l +H] +

3: 4-{4-[3-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -脲基卜苯氧基}-吡啶 -2-甲酸叔丁酯 A9的制备 在室温下, 将 4-氯 -3-三氟甲基苯基异氰酸酯 (656 mg, 2.96 mmol, 1.05eq)溶于 二氯甲垸 (5mL), 并将 4-(4-氨基-苯氧基) -吡啶 -2-甲酸叔丁酯 (805mg, 2.81 mmol, leq) 的二氯甲垸 (5mL)溶液缓慢滴加至上述溶液中, 室温搅拌 16 小时。 减压除去溶剂, 得到的固体柱层析分离 (二氯甲垸: 甲醇 =30:1)得到化合物, 为白色固体 1.4g, 纯度 95%, 收率 85%。

1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 1.53(s, 9H), 7.13(dd, J = 2.4Hz, 5.2Hz, 1H), 7.18(d, J= 8.8Hz, 2H), 7.41(d, J =2.4Hz, 1H), 7.59-7.66(m, 4H), 8.13(d, J= 1.6Hz, 1H), 8.55(d,J= 5.6Hz, 1H), 9.06(br, 1H), 9.27(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C 24 H 21 ClF 3 N 3 O 4 :507, found: 508 [M+H] +

4: 4-{4-[3-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -脲基】 -苯氧基} -吡啶 -2-甲酸 A10的制备 在室温下, 将 4-{4-[3-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -脲] -苯氧基 吡啶 -2-甲酸叔丁酯 (1.4g, 2.76mmol)溶于二氯甲垸 (20mL), 加入三氟乙酸 (20mL)与三乙基硅垸 (0.5mL), 升温至 50°C搅拌 16小时。 减压除去溶剂, 加入水 (50mL)与乙酸乙酯 (70mL), 分层, 除去有机相, 水层过滤并用水 (30mL X 2)洗涤, 得到标题化合物, 为浅绿色固体, 真 空干燥的 l . lg, 纯度 97%, 收率 90%。

1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 7.21-7.25(m, 2H), 7.33(dd, J = 2.8Hz, 6Hz, 1H),

7.57(d, J = 2.8Hz, 1H), 7.60-7.67(m, 4H), 8.12(d, J = 2.4Hz, 2H), 8.64(d, J = 6Hz, 1H),

9.84(br, 1H), 10.17(br, 1H),.

MS (ESI, m/z) calcd. for C 20 H 12 ClF 4 N 3 O 4 :451 , found: 450 [M-H]"

5: 4-(4-(3-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基】酰脲) -苯氧基) -2-( N-l,,l,,l,-三氘代甲基)吡 啶酰 CM4307的制备 在室温下, 将 4- {4-[3-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -脲] -苯氧基 吡啶 -2-甲酸 (0.5g, l . l lmmol, leq)溶于 Ν,Ν-二甲基甲酰胺 (5mL), 加入 1 , 1, 1-三氘代甲胺盐酸盐 (0.15g, 2.22mmol , 2eq) , 2-(7-偶氮苯并三氮唑) -Ν,Ν,Ν',Ν'-四甲基脲六氟磷酸酯 (HATU , 0.84g, 2.22mmol, 2eq)与 Ν,Ν-二异丙基乙胺 (DIEA, 0.86g, 6.66mmol, 3eq) , 并室 温搅拌 16小时。 向上述反应液中滴加水 (20mL), 搅拌 0.5小时, 过滤得到灰白色固 体, 加入乙酸乙酯 (50mL), 用饱和食盐水 (10mL X 3)洗涤, 分层, 有机相用无水硫酸 钠干燥, 过滤, 减压除去溶剂得 0.42g类白色固体 CM4307, 纯度 97%, 收率 81%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.15(dd, J = 2.8Hz, 5.6Hz, 1H), 7.17-7.19(m,2H) 7.40(d, J = 2.4Hz, 1H), 7.59-7.69(m, 4H), 8.13(d, J = 2.4Hz, 1H), 8.51(d, J = 6Hz, 1H), 8.75(br, 1H), 8.90(br, 1H), 9.22(br, 1H).

+

将 4- {4-[3-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -脲] -苯氧基} -吡啶 -2-甲酸 (0.5g, l . l lmmol)悬 浮于甲醇 (10mL)中, 室温下加入浓硫酸 (2mL)并回流 3小时, 减压除去溶剂, 柱层析 (二氯甲垸: 甲醇 =10: 1)分离得到白色固体 4-{4-[3-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基;) -脲基] -苯氧 基 吡啶 -2-甲酸甲酯 All(0.46g), 纯度 95%, 收率 90%。

1H NMR(DMSO-d6, 400 MHz): δ 3.85(s, 3H), 7.18-7.21(m, 3H), 7.43(d, (dd, J = 2.4Hz, 1H), 7.59-7.66(m, 4H), 8.13(d, J = 2.4Hz, 1H), 8.59(d, J = 6Hz, 1H), 9.06 (br, 1H), 9.27(br, 1H),.

MS (ESI, m/z) calcd. for C 21 H 15 C1F 3 N 3 0 4 :465, found: 466 [M+H] + 将 4- {4-[3-(4-氯 -3-三氟甲基-苯基) -脲] -苯氧基} -吡啶 -2-甲酸甲酯 (300mg, 0.65mmol, leq)置入盛有 10mL四氢呋喃的三口瓶中, 搅拌并加入 1, 1 ,1-三氘代甲胺 盐酸盐 (91mg, 1.3mmol, 2eq) , 400 目的无水碳酸钾(179mg, 1.3mmol, 2eq), 室温 搅拌 20 小时后加入水 (5mL)和甲基叔丁基醚 (15mL), 搅拌并分层, 获得有机相。 水 相用甲基叔丁基醚萃取 (10mL), 合并有机相并加入无水硫酸钠干燥并过滤, 减压除 去溶剂得到 CM4307类白色固体 261mg, 纯度 96%, 收率 86%。

1H NMR(DMSO-d6 , 400 MHz): δ 7.15(dd, J = 2.8Hz, 5.6Hz, 1H), 7.17-7.19(m,2H) 7.40(d, J = 2.4Hz, 1H), 7.59-7.69(m, 4H), 8.13(d, J = 2.4Hz, 1H), 8.51(d, J = 6Hz, 1H), 8.75(br, 1H), 8.90(br, 1H), 9.22(br, 1H).

MS (ESI, m/z) calcd. for C 21 H 13 D 3 C1F 3 N 4 0 3 : 467, found: 468[M +H]+ 实施例 7:

氘代二苯基脲化合物在大鼠中的药代动力学评 价

8只雄性 Sprague-Dawley大鼠, 7-8周龄, 体重约 210g, 分成 2组, 每组 4只 (大 鼠编号:对照组为 13-16; 实验组为 9-12), 单次口服给予 3mg/kg剂量的 (a)对组合物: 未氘代的 N-(4-氯 -3- (三氟甲基)苯基) -N'-(4-(2-(N-甲基氨基甲酰基;) -4-吡啶基氧;)苯基) 脲(对照化合物 CM4306)或(b)实施例 1 制备的 N-(4-氯 -3-(三氟甲基)苯 基) - Ν ,-(4-(2-(Ν-Γ,Γ, Γ-三氘甲基氨基甲酰基 )-4-吡啶基氧)苯基)脲 (本发明化合物 CM4307), 比较其药代动力学差异。

大鼠采用标准饲料饲养, 给予水和利眠宁。 实验的前一天晚上停止给予利眠宁, 给药后 2小时重新给予利眠宁。试验前 16小时开始禁食。药物用 30% PEG400溶解。 眼眶采血, 采血的时间点为给药后 0.083 小时, 0.25 小时, 0.5 小时, 1 小时, 2 小时, 4 小时, 6小时, 8小时和 24小时。

令大鼠吸入乙醚后短暂麻醉, 眼眶采集 300 uL血样于试管。 试管内有 30 ul l% 肝素盐溶液。 使用前, 试管于 60°C烘干过夜。 在随后一个时间点血样采集完成之后, 大鼠乙醚麻醉后处死。

血样采集后, 立即温和地颠倒试管至少 5次, 保证混合充分后放置于冰上。 血 样在 4°C 5000 rpm离心 5分钟, 将血清与红细胞分离。 用移液器吸出 100 uL血清到 干净的塑料离心管中, 表明化合物的名称和时间点。 血清在进行 LC-MS分析前保存 在 -80°C。

其结果如图 1-2所示。 结果显示, CM4307比 CM4306的半衰期 T 1/2 延长 [分别 为 1 1.3 ± 2.1小时和 8.6 ± 1.4小时], 曲线下面积 AUC。_ CM4307比 CM4306显著增 加 [分别为 1 1255 ±2472 ng-h/mL和 7328 ± 336 ng-h/mL] , CM4307比 CM4306表观清 除率减少 [分别为 275 ± 52mL/h/kg和 410 ± 18.7 mL/h/kg]。 从上面结果看出, 本发明化合物在动物体内具有更好的药物动力 学, 因而具有 更好的药效学和治理效果。

另外, 通过氘化, 本发明化合物在生物体中的代谢过程有所改变 。 特别地使苯 基上的羟化变得困难, 这导致初次通过效应 (First-pass effect)的降低。 在这种情况下, 可改变剂量并形成长效制剂, 其也可以长效制剂的形式改善适用性。

另外, 通过氘化还改变了药物动力学作用, 因为氘代化合物完全形成另一水合 物膜, 以致在生物体中的分布明显不同于未氘代的化 合物。 实施例 8: CM4307对人肝细胞癌 SMMC-7721裸小鼠移植瘤生长抑制的药效学 评价

Balb/c nu/nu裸小鼠, 6周龄, 雌性, 70只, 购自上海试验动物资源中心 (上海西普 尔-必凯实验动物有限公司;)。

SMMC-7721细胞购自中科院上海生命科学院 (上海, 中国)。

肿瘤裸鼠移植模型的建立: 收获对数生长期的 SMMC-7721细胞, 计数后将细胞 悬于 IxPBS, 调整细胞悬液浓度至 1.5xl0 7 /ml。用 lml注射器在裸鼠右侧腋下皮下接种 肿瘤细胞, 3xl0 6 /0.2ml/鼠。 共接种 70只裸鼠。

在肿瘤体积达到 30-130mm 3 时, 将动物进行随机分组, 共获得 58只动物, 使各组 肿瘤差异小于均值的 10%, 并开始给药。

试验期间每周测定两次动物体重和肿瘤大小。 每日观察记录临床症状。给药结束 时, 拍照记录肿瘤大小。 每组处死一只小鼠取肿瘤组织, 固定于 4%多聚甲醛。 给药 结束后, 继续观察, 当肿瘤均值大于 2000mm 3 , 或动物出现濒死状态时, 处死动物, 做大体解剖, 取肿瘤组织固定于 4%多聚甲醛。

肿瘤体积 (Tumor volume, TV)的计算公式为: TV=axb 2 /2。 其中 a、 b分别代表肿 瘤测量长和宽。相对肿瘤体积 (relative tumor volume, RTV)计算公式为: RTV=Vt/V。。 其中 V。为分组给药时的肿瘤体积, Vt为测量时的肿瘤体重。抗肿瘤活性的评价指 为 相对肿瘤增值率 T/C(%;),计算公式为: T/C(%)=(T RTV /C RTV )xl00%。 T RTV 为治疗组 RTV, C RTV 为阴性对照组 RTV。

疗效评价标准: 相对肿瘤增值率 T/C(%)≤ 40%并经统计学分析 p<0.05为有效。 结果如图 3所示。 CM4306和 CM4307单剂量 10、 30、 100mg/kg 每日灌胃给药连 续 2周, 两个化合物均表现剂量依赖性的抑制肿瘤生长 作用。 给药结束时, CM4306 的 T/C%分别为 56.9%、40.6%和32.2%。0^4307的170;%)分别为53.6%、40 .8%和19.6%。 其中 100mg/kg剂量组的 17。%均<40%, 肿瘤体积与对照组比较有显著差异 (ρθ.01),表 现显著的抑制肿瘤生长的作用。

CM4307的高剂量 100mg/kg组比 CM4306高剂量组肿瘤抑制作用强 (;最佳 17。%分 别为 19.6%和 32.2%,dl 5), 瘤体积组间比较有显著差异 (p<0.01)。 与 CM4306相比, CM4307的抑瘤率的绝对值提高 10%以上,相对幅度提高约 60%(32.2%/19.6%-1=64%), 表现出更为显著的抑制肿瘤生长的作用。

此外, 试验过程中未见其他药物相关毒性反应。 实施例 9 药物组合物

化合物 CM4307(实施例 1) 20g

淀粉 140g

微晶纤维素 60g

按常规方法, 将上述物质混合均匀后, 装入普通明胶胶囊, 得到 1000颗胶囊。 在本发明提及的所有文献都在本申请中引用作 为参考, 就如同每一篇文献被单 独引用作为参考那样。此外应理解, 在阅读了本发明的上述讲授内容之后, 本领域技 术人员可以对本发明作各种改动或修改,这些 等价形式同样落于本申请所附权利要求 书所限定的范围。