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Title:
USE OF AN EXTRACT OF YEAST OF THE SACCHAROMYCES GENUS TO IMPROVE THE BRIGHTNESS OF THE SKIN TONE, AND COMPOSITION CONTAINING AT LEAST SAID EXTRACT AND A DEPIGMENTING AGENT
Document Type and Number:
WIPO Patent Application WO/2012/072951
Kind Code:
A1
Abstract:
The invention relates to the cosmetic use of at least one extract of yeast of the Saccharomyces genus as an agent for improving the brightness and/or the transparency and/or the sheen of the skin tone of a person, as well as to a composition containing at least said yeast extract and a depigmenting agent. The invention further relates to a cosmetic treatment method for improving the brightness of the skin tone of a person, including applying at least said extract, or a composition containing said extract, onto the skin.

Inventors:
AMIOT-PEYROT PEGGY (FR)
Application Number:
PCT/FR2011/052821
Publication Date:
June 07, 2012
Filing Date:
November 30, 2011
Export Citation:
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Assignee:
OREAL (FR)
AMIOT-PEYROT PEGGY (FR)
International Classes:
A61K8/99; A61Q19/00; A61Q19/02
Domestic Patent References:
WO2002003943A12002-01-17
Foreign References:
FR2906719A12008-04-11
FR2851576A12004-08-27
FR1548652A1968-12-06
US20110129453A12011-06-02
Other References:
GASPAR L R ET AL: "Evaluation of dermatological effects of cosmetic formulations containing Saccharomyces cerevisiae extract and vitamins", FOOD AND CHEMICAL TOXICOLOGY, PERGAMON, GB, vol. 46, no. 11, 1 November 2008 (2008-11-01), pages 3493 - 3500, XP025587818, ISSN: 0278-6915, [retrieved on 20080902], DOI: 10.1016/J.FCT.2008.08.028
IHLBROCK D ET AL: "ZUR KOSMETISCHEN WIRKUNG EINES EXTRAKTES AUS DER HEFE SACCHAROMYCESCEREVISIAE", SOFW-JOURNAL SEIFEN, OELE, FETTE, WACHSE, VERLAG FUR CHEMISCHE INDUSTRIE, AUGSBURG, DE, vol. 123, no. 5, 1 January 1997 (1997-01-01), pages COMPLETE, XP000979043, ISSN: 0942-7694
C. MUSNIER ET AL: "Visual evaluation in vivo of 'complexion radiance' using the C.L.B.T.tm sensory methodology", SKIN RESEARCH AND TECHNOLOGY, vol. 10, no. 1, 1 February 2004 (2004-02-01), pages 50 - 56, XP055004440, ISSN: 0909-752X, DOI: 10.1111/j.1600-0846.2004.00053.x
PETIT L ET AL: "Skin-lightening products revisited", vol. 25, 1 January 2003 (2003-01-01), pages 169 - 181, XP002262230, ISSN: 0142-5463, Retrieved from the Internet [retrieved on 20110810], DOI: 10.1046/J.1467-2494.2003.00182.X
SHOUKAT PARVEZ ET AL: "Survey and mechanism of skin depigmenting and lightening agents", PHYTOTHERAPY RESEARCH, vol. 20, no. 11, 1 November 2006 (2006-11-01), pages 921 - 934, XP055004431, ISSN: 0951-418X, DOI: 10.1002/ptr.1954
NICO SMIT ET AL.: "The Hunt for Natural Skin Whitening Agents", INTERNATIONAL JOURNAL OF MOLECULAR SCIENCES, 2009, pages 5326 - 5349, XP002656718, ISSN: 1422-0067, Retrieved from the Internet [retrieved on 20110810]
Attorney, Agent or Firm:
BROHMI, Karim (FR)
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Claims:
REVENDICATIONS

1 . Utilisation cosmétique d'au moins un extrait de levure du genre Saccharomyces, comme agent pour améliorer l'éclat du teint et/ou la transparence et/ou la luminosité du teint de la peau d'un individu.

2. Utilisation selon la revendication 1 , caractérisée en ce que l'on utilise un extrait de levure à une concentration de 0,01 à 5% par rapport au poids total de la composition en contenant.

3. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, pour lutter contre les signes de fatigue et/ou du vieillissement chronologique.

4. Utilisation selon la revendication précédente, caractérisée en ce que lesdits signes de fatigue sont choisis parmi le teint terne, le teint exsangue, le teint livide, le teint blafard et le teint hétérogène.

5. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, pour augmenter la réflexion de la lumière par la peau et/ou améliorer l'homogénéité du teint.

6. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, pour détoxifier les cellules de la peau. 7. Utilisation selon la revendication précédente, pour stimuler les mécanismes cellulaires de dégradation lysosomale dans les kératinocytes.

8. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'on utilise un extrait de levure de l'espèce Saccharomyces cerevisiae.

9. Utilisation selon l'une quelconque des revendications précédentes, caractérisée en ce que l'on utilise un extrait aqueux de levure. 10. Utilisation selon la revendication 1 , caractérisée en ce que l'on utilise en outre au moins un agent dépigmentant.

1 1 . Utilisation selon la revendication précédente, caractérisée en ce que l'agent dépigmentant est choisi parmi : l'hydroquinone et ses dérivés, le résorcinol et ses dérivés, l'arbutine et ses dérivés, le lucinol et ses dérivés, la vitamine C et ses dérivés, l'acide L-2-oxothiazolidine-4-carboxylique ou procystéine ainsi que ses sels ou esters, l'acide férulique et ses dérivés, l'acide tranexamique et ses dérivés, l'acide gentisique, le méthyl gentisate ou l'homogentisate, l'acide dioique, l'acide lipoique, l'acide linoléique et ses dérivés, l'acide ellagique et ses dérivés, l'acide kojique et ses dérivés, le D calcium panthéteine sulfonate, le magnolol, l'honokiol, le magnolignan, les céramides naturels ou de synthèse et leurs homologues, les extraits de fruits d'arbuste du genre Morus, de pétales de fleur d'arbuste du genre Rosa, de feuilles de plante du genre Mentha, de plante du genre Aloe, de fleur de plante du genre Chamaemelum, d'arbuste de l'espèce Arctostaphylos uva-ursi L, une eau de fruit d'espèces du genre Actinidia, un extrait de racine de Paeonia suffructicosa, un extrait de Ginkgo biloba, un extrait de Glycyrrhiza glabra et un extrait de scutellaire.

12. Composition cosmétique comprenant au moins un extrait de levure du genre Saccharomyces utile selon l'une quelconque des revendications 1 à 1 1 , et au moins un agent dépigmentant choisi parmi l'hydroquinone et ses dérivés, le résorcinol et ses dérivés, l'arbutine et ses dérivés, le lucinol et ses dérivés, la vitamine C et ses dérivés, l'acide L-2-oxothiazolidine-4-carboxylique ou procystéine ainsi que ses sels ou esters, l'acide férulique et ses dérivés, l'acide tranexamique et ses dérivés, l'acide gentisique, le méthyl gentisate ou l'homogentisate, l'acide dioique, l'acide lipoique, l'acide linoléique et ses dérivés, l'acide ellagique et ses dérivés, l'acide kojique et ses dérivés, le D calcium panthéteine sulfonate, le magnolol, l'honokiol, le magnolignan, les céramides naturels ou de synthèse et leurs homologues, les extraits de fruits d'arbuste du genre Morus, de pétales de fleur d'arbuste du genre Rosa, de feuilles de plante du genre Mentha, de plante du genre Aloe, de fleur de plante du genre Chamaemelum, d'arbuste de l'espèce Arctostaphylos uva-ursi L., une eau de fruit d'espèces du genre Actinidia, un extrait de racine de Paeonia suffructicosa, un extrait de Ginkgo biloba, un extrait de Glycyrrhiza glabra et un extrait de scutellaire.

13. Composition selon la revendication précédente, comprenant en outre au moins un agent choisi parmi les agents desquamants et les agents apaisants.

14. Composition selon l'une quelconque des revendications 12 ou 13, caractérisée en ce qu'elle comprend au moins un extrait de pétales de rose, un extrait de feuille de menthe, un extrait de Gingko biloba, un extrait de Glycyrrhiza glabra, de l'acide ellagique ou de ses dérivés et de l'acide salicylique ou de ses dérivés.

15. Procédé de traitement cosmétique pour améliorer l'éclat, la transparence et/ou la luminosité du teint de la peau d'un individu, caractérisé en ce qu'on applique sur la peau dudit individu au moins un extrait de levure du genre Saccharomyces ou une composition comprenant au moins un extrait de levure du genre Saccharomyces, dans un milieu physiologiquement acceptable.

Description:
Utilisation d'extrait de levure du genre Saccharomyces pour améliorer l'éclat du teint et composition comprenant au moins cet extrait et un agent dépigmentant La présente invention est dans le domaine du soin de la peau et plus précisément dans celui de l'amélioration du teint de la peau.

L'éclat du teint traduit l'état de bonne santé de la peau, notamment des peaux jeunes.

De nombreux facteurs extérieurs ou internes peuvent affecter l'éclat du teint de la peau. Parmi les facteurs extrinsèques, on peut citer l'exposition aux variations de températures et d'humidité ou l'exposition aux polluants. Parmi les facteurs intrinsèques affectant l'éclat du teint de la peau, on peut citer le stress, la fatigue, des changements hormonaux, une déshydratation de l'épiderme ou une altération de la fonction barrière de la peau, voire le vieillissement chronologique. Ces facteurs extrinsèques et intrinsèques tendent à brouiller le teint, à le rendre inhomogène, terne, cireux, voire maladif, et à favoriser voire aggraver la présence d'imperfections cutanées.

Ces altérations du teint, souvent d'origine multifactorielle, sont une cause de plus en plus fréquente de consultations auprès de centres de soins esthétiques ou de cabinets dermatologiques. Elles concernent presque chaque individu, et leur fréquence est maximale à l'âge de la puberté. Toutefois, elles peuvent se manifester dès l'âge de 7 à 9 ans et perdurer jusqu'à des âges dépassant 40 ans, et notamment aller au-delà de 60 ans. Ainsi, il est fréquent d'avoir des imperfections au niveau de la peau, notamment du visage, le teint brouillé, terne et/ou inhomogène encore après 25 ans.

Il existe donc un réel besoin d'être en mesure de prévenir, de réduire ou de traiter ces altérations du teint de la peau.

II est important de bien différencier les problématiques de couleur de peau et celles d'éclat du teint, dans la mesure où une peau peut être plus ou moins éclatante quelque soit sa carnation.

La couleur de la peau ou carnation est fonction de différents facteurs et notamment de l'hérédité et de l'ensoleillement. Elle est déterminée par les pigments contenus dans la peau :

la nature, la concentration et la répartition de la mélanine produite par les mélanocytes.

l'irrigation sanguine et la vascularisation des tissus (hémoglobine).

les apports en caroténoïdes voire en polyphénols colorés via l'alimentation.

L'éclat de la peau, en revanche, est une composante multifactorielle. Un teint terne, sans éclat, manque de luminosité (la peau réfléchit moins bien la lumière) ; ceci se révèle par une opacité, un manque de transparence. Ce manque de transparence crée un teint exsangue, livide, voire légèrement olivâtre. La perte de luminosité et d'éclat est directement liée à l'apparition d'un teint blafard et hétérogène et est considérée comme un signe de fatigue cutané. L'évaluation de l'éclat du teint pourra se faire par toute méthode connue dans l'art antérieur. On pourra par exemple utiliser un appareil tel que celui décrit dans le brevet EP 0 655 221 , des dispositifs tels que ceux décrits dans les brevets EP 1 277 436 et EP 1 277 437 ou la méthode décrite dans le brevet FR 2 897 768. La combinaison d'une première donnée relative au niveau de saturation de la teinte de la peau et d'une deuxième donnée relative à au moins une caractéristique non tinctoriale de la peau, avantageusement choisie parmi la transparence, la luminosité, l'homogénéité et la texture de la peau, peut renseigner sur l'éclat du teint.

La Demanderesse s'est intéressée aux mécanismes de détoxification cellulaire (protéasome, dégradation lysosomale...) de la peau puisqu'en cas de défaillance de ces systèmes, la peau est comme « étouffée » par ses propres constituants superflus ou altérés qui s'accumulent dans les cellules. Ceci se traduit en surface par une altération de l'aspect de la peau qui perd de sa luminosité ou de sa transparence ce qui laisse apparaître des signes de fatigue comme le teint terne.

De manière surprenante, il a été mis en évidence l'effet d'un extrait de levure de l'espèce Saccharomyces cerevisiae sur la formation des lysosomes dans les kératinocytes et sur la capacité de phagocytose de ces cellules. Par l'intermédiaire de ces mécanismes, l'extrait de levure permet l'amélioration de l'éclat du teint de la peau par l'élimination des constituants superflus ou altérés qui se sont accumulés dans les cellules. C'est pourquoi, la présente invention a pour objet l'utilisation cosmétique d'au moins un extrait de levure du genre Saccharomyces, comme agent pour améliorer l'éclat du teint et/ou la transparence et/ou la luminosité du teint de la peau d'un individu. La phagocytose est un processus cellulaire qui permet une internalisation de particules. Ce processus est généralement associé à des cellules du type phagocytes ou macrophages ayant pour fonction d'éliminer des agents infectieux ou des débris cellulaires. Mais les kératinocytes ont aussi la capacité de phagocyter et de dégrader des protéines de faible poids moléculaire (ex : fibrine dans des processus de cicatrisation) (Takashima et Grinnell, J. Invest. Dermatol., 1985, 85: 304-308). Ces éléments phagocytés peuvent ensuite être dégradés par les lysosomes au sein de ces cellules. En améliorant l'éclat du teint, on n'agit pas sur la mélanogénèse donc ni sur des mécanismes d'inhibition de la tyrosinase, ni sur le traitement de taches pigmentaires, ni sur le blanchiment de la peau. De façon courante, des agents dépigmentants sont utilisés pour blanchir la peau. Ces agents agissent en modifiant l'activité biologique des mélanocytes et en limitant la pigmentation due à la formation de mélanine. Il en résulte que leurs effets n'apparaissent que lentement après les avoir utilisés de façon itérative et prolongée. Il est également fréquent de voir les personnes, désirant éclaircir la couleur de leur peau ou atténuer des dyschromies, utiliser des compositions cosmétiques uniformisant le teint de la peau en lui conférant un aspect blanc immédiat. Ces compositions contiennent des pigments blancs diffusants, leur assurant l'opacité et la couvrance nécessaires pour obtenir l'effet recherché. Toutefois, ce pouvoir couvrant crée une opacité qui fait perdre à la peau ainsi maquillée son aspect naturel, sa transparence et sa clarté. Il génère notamment un effet grisâtre et terne. Par ailleurs, les solutions techniques mettant en œuvre des composés émissifs tels que des molécules ou matériaux organiques, semi- organiques ou inorganiques fluorescents dans des compositions cosmétiques sont limitées par plusieurs effets rendant l'éclaircissement de la couleur de peau peu perceptible.

Les propriétés dépigmentantes d'extraits de levure, notamment Saccharomyces cerevisiae, sont connues dans l'état de l'art (KR 20090090608, JP 9124438). Toutefois, l'effet d'un extrait de levure du genre Saccharomyces et notamment de l'espèce Saccaromyces cerevisiae n'a jamais été décrit que ce soit sur les mécanismes intracellulaires de dégradation lysosomale des kératinocytes, sur la capacité de phagocytose de ces cellules ou sur l'éclat du teint. Par « améliorer», on entend à la fois, améliorer, augmenter, prévenir la perte de... et lutter contre la perte de....

Au sens de l'invention, on entend désigner par « éclat de teint », une coloration de la peau différente de la pigmentation et en particulier la combinaison entre le niveau de saturation de la teinte de la peau et au moins l'une des caractéristiques non tinctoriales de la peau choisies parmi la luminosité, la transparence, l'homogénéité et la texture.

La teinte de la peau est notamment caractérisée par la valeur L * du système colorimétrique L * , a * et b * . Il s'agit d'une méthode classique et bien connue de l'homme du métier. L * (généralement appelée clarté ou luminance) désigne un résultat de mesure qui permet une quantification du blanc au noir. La luminance est une unité visuelle qui correspond au quotient de l'intensité lumineuse dans une direction donnée d'une surface par l'aire apparente de cette surface. Toute augmentation du paramètre L * signe un éclaircissement de la peau.

La saturation est définie comme l'intensité d'une teinte spécifique fondée sur la pureté de la couleur. Une teinte hautement saturée a une couleur vive et intense alors qu'une teinte moins saturée parait plus fade et grise. La saturation d'une couleur est déterminée par une combinaison de son intensité lumineuse et de la distribution de ses différentes longueurs d'ondes dans le spectre des couleurs. La couleur la plus pure est obtenue en utilisant une seule longueur d'onde à très haute intensité, comme avec un laser. Si l'intensité lumineuse diminue, la saturation aussi. Sans aucune saturation, une teinte devient un niveau de gris. Ainsi une augmentation de saturation traduit une couleur plus saturée donc un effet anti-voile gris.

La luminosité est définie comme l'intensité des accroches de lumières sur les zones saillantes du visage telles que les pommettes, le front, le nez et le menton. Elle peut être évaluée par au moins un expert entraîné ou par auto-évaluation ou par analyse d'image ou toute autre méthode instrumentale par exemple en quantifiant la réflexion spéculaire de la lumière sur certaines zones sur l'image.

La transparence est définie comme le fait de pouvoir apercevoir la lumière traverser la peau dans ses couches supérieures. Elle peut être mesurée sur des zones spécifiques du visage telles que le front, les tempes, la paupière inférieure et/ou l'ovale du visage. Cette transparence peut être évaluée par analyse d'image, par au moins un expert entraîné ou par auto-évaluation. L'homogénéité de la peau correspond à l'uniformité de couleur et de texture de la peau. Un teint de couleur homogène correspond à un teint ne présentant pas de zones plus rouges et/ou plus ternes que d'autres. Cela ne concerne pas l'absence de taches pigmentaires. Cette absence de zones plus rouges et/ou plus ternes que d'autres peut être évaluée par au moins un expert, par auto-évaluation ou par analyse d'image, par exemple en analysant la distribution de l'intensité et de la couleur de la lumière réfléchie.

L'uniformité de texture correspond à un grain de peau régulier, à l'absence d'imperfection ou de défaut de surface.

L'utilisation selon l'invention sera particulièrement efficace pour lutter contre les signes de fatigue et/ou du vieillissement chronologique, les signes de fatigue étant préférentiel lement choisis parmi le teint terne, le teint exsangue, le teint livide, le teint blafard et le teint hétérogène.

Préférentiellement, l'extrait de levure selon l'invention sera utilisé à une concentration de 0,01 à 5%, préférentiellement de 0,05 à 1 % et encore plus préférentiellement de 0,1 à 1 % par rapport au poids total de la composition en contenant.

L'utilisation selon l'invention se fera, préférentiellement, par voie topique sur la peau.

Les levures peuvent être préparées par culture dans un milieu classique de culture de levure (extrait de levure : 10g/I, peptone pepsique: 7 g/l, glucose : 20 g/l, eau : QSP).

On choisira préférentiellement un extrait aqueux de levure c'est-à-dire un extrait de levure qui, sous réserve des pertes inévitables selon les bonnes pratiques de fabrication, contient tous les constituants solubles dans l'eau de levures après la lyse des levures et l'élimination par filtration de leurs débris de membranes. Cet extrait aqueux de levure sera préférentiellement remis en solution.

De préférence, l'extrait aqueux de levure du genre Saccharomyces selon l'invention sera préparé en solubilisant dans de l'eau (préférentiellement de l'eau distillée) des levures entières du genre Saccharomyces, en soumettant la suspension ainsi obtenue à d'une hydrolyse protéique, en séparant les phases soluble et insoluble de la solution obtenue suite à cette hydrolyse et en soumettant la phase soluble, récupérée à l'issue de l'étape précédente, à une stérilisation.

Dans un mode de réalisation préférentiel de l'invention, l'extrait aqueux de levure ainsi obtenu peut être ensuite optionnellement séché et proposé sous forme de poudre. L'extrait, de préférence sous forme de poudre, peut être aussi mis en solution (on parlera alors d'extrait de levure en solution), en particulier une solution hydroalcoolique et préférentiellement une solution hydroglycolique (par exemple une solution constituée d'un mélange d'eau et de pentylène glycol). Dans cette solution, l'extrait aqueux de levure sera préférentiellement ajouté à une concentration entre 0,5 et 8%, préférentiellement entre 2 et 7%, encore plus préférentiellement entre 3 et 5%.

L'extrait de levure, utilisé dans la présente invention, comprendra au final au moins 50%, préférentiellement au moins 60%, encore plus préférentiellement au moins 70% ou au moins 80% d'eau par rapport à son poids total. Avantageusement, l'extrait de levure en solution, utilisable selon la présente invention, aura les caractéristiques suivantes :

- Il aura un pH compris entre 5 et 8, préférentiellement compris entre 6 et 7.

- Il comprendra entre 20 et 60 g de sucres par litre de solution (g/1), préférentiellement entre 20 et 50 g/1 et encore plus préférentiellement entre

25 et 35 g/1 et/ou,

- Il aura une concentration en matières sèches comprise entre 10 et 60 g/l, préférentiellement comprise entre 20 et 50 g/l et encore plus préférentiellement comprise entre 37 et 47 g/l .

La population de levures entières utilisées pour préparer cet extrait aqueux de levures, c'est-à-dire avant hydrolyse et/ou stérilisation, sera préférentiellement de 10 E 5 à 10 E 10 colonies formant unité par millilitre (ou cfu/ml) de solution aqueuse de levures, préférentiellement 10 E 6 à 10 E 9 cfu/ml, encore plus préférentiellement 10 E 6 à 10 E 8 /ml .

L'extrait aqueux de levure présentera préférentiellement les caractéristiques suivantes :

- il aura un taux d'azote total (selon la méthode de Kjeldahl) de 5 à 15%, préférentiellement de 6 à 12%, encore plus préférentiellement de 7 à 10 % et/ou,

- il aura un taux d'acides aminés libres totaux (selon la méthode de Sôrensen) de 2 à 10 %, préférentiellement de 3 à 7%, encore plus préférentiellement de 4 à 6%, et/ou,

- il aura un rapport Azote aminé assimilable / Azote total de 0,4 à 0,7%, préférentiellement 0,4 à 0,6%, encore plus préférentiellement 0,5 à 0,6%.

L'hydrolyse protéique se fera préférentiellement par hydrolyse chimique ou acide ou par utilisation d'enzymes naturels de levures et elle sera préférentiellement réalisée pour au moins 60%, préférentiellement au moins 80%, encore plus préférentiellement au moins 90% de la totalité des protéines présentes dans la solution de levures après la lyse des levures.

La séparation des phases soluble et insoluble obtenue suite à l'hydrolyse des protéines se fera par tout moyen connu de l'homme du métier en fonction de la nature de l'extrait recherchée. Cette séparation de phases peut par exemple être réalisée par filtration, décantation ou centrifugation, la filtration étant le moyen préférentiel. Suite à cette séparation des phases soluble et insoluble, la phase soluble est récupérée.

La stérilisation pourra se faire par tout moyen connu de l'homme du métier et en particulier par filtration stérilisante. Cette dernière se fera préférentiellement par l'utilisation de filtre à membrane dont la taille des pores est choisie en fonction de la taille des éléments membranaires que l'on souhaite éliminer. Cette technique est bien connue de l'homme du métier.

Suite à cette étape de stérilisation, l'extrait aqueux de levure obtenu peut être séché pour le proposer sous forme de poudre. Ce séchage pourra être réalisé également par tout moyen connu de l'homme du métier, par exemple par évaporation, lyophilisation ou par atomisation.

Dans le genre Saccharomyces, peuvent être citées les espèces suivantes : Saccharomyces bailii, Saccharomyces carlsbergensis, Saccharomyces uvarum, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces delbrueckii, Saccharomyces exiguus, Saccharomyces fermentati, Saccharomyces florentinus, Saccharomyces fragilis Saccharomyces fructuum, Saccharomyces heterogenicus, Saccharomyces oleaginosus, Saccharomyces rosei, Saccharomyces steineri, Saccharomyces boulardii, Saccharomyces kefir, Saccharomyces kluyveri.

Préférentiellement, on choisira une levure de l'espèce Saccharomyces cerevisiae.

De manière préférentielle, cet extrait ne comprend pas de levure vivante.

Un exemple d'extrait selon l'invention est commercialisé par la société SILAB (BP. 213, 19108 Brive Cedex France) sous le nom FIRMALIFT® GR. Il se présente sous forme d'une solution légèrement opalescente, de couleur jaune et qui renferme 32.0 g/l de sucres. Le numéro CAS de cet extrait est 8013-01 -2. Son numéro EINECS/ELINCS est le numéro 232-387-9. Cet extrait est à une concentration de 4,2% dans une solution hydroglycolique comprenant 7,5% de pentylene glycol et 88,3% d'eau.

Cette utilisation permet avantageusement d'augmenter la réflexion de la lumière par la peau et/ou d'améliorer l'homogénéité du teint.

L'utilisation selon l'invention est notamment efficace pour détoxifier les cellules de la peau et/ou pour stimuler les mécanismes cellulaires de dégradation lysosomale dans les kératinocytes et/ou pour orienter les constituants cellulaires superflus ou altérés vers la voie de dégradation lysosomale et/ou pour stimuler, dans les kératinocytes, la formation des lysosomes impliqués dans la dégradation des éléments cellulaires superflus ou altérés et/ou pour augmenter la capacité de phagocytose des kératinocytes. En stimulant les mécanismes employés par les kératinocytes pour éliminer leurs propres constituants superflus ou altérés ou pour internaliser puis dégrader ces éléments dans leur environnement, la peau se trouve nettoyée de ses déchets, de ses impuretés. Cette détoxification des cellules de la peau permet ainsi d'améliorer l'éclat, la transparence ou la luminosité du teint de la peau.

Il sera particulièrement avantageux d'associer l'extrait de levure à au moins un agent dépigmentant (appelés aussi agent blanchissant ou agent de blanchiment) pour pouvoir, d'une part moduler la teinte de l'éclaircissement obtenu par l'agent dépigmentant et pour améliorer et/ou accélérer la visibilité de l'effet d'un agent dépigmentant et d'autre part pour rendre encore plus visible l'effet d'un extrait de levure sur l'éclat du teint.

Il sera donc avantageux d'utiliser un extrait de levure selon l'invention en association avec au moins un agent dépigmentant.

Par « agent dépigmentant », on entend préférentiellement un composé agissant sur la coloration mélanique de la peau, directement sur la biosynthèse ou sur le transfert de la mélanine dans l'épiderme.

Une substance est reconnue comme dépigmentante si elle agit directement sur la mélanine ou sur la mélanogénèse dans le sens d'une atténuation de la couleur résultante.

L'agent dépigmentant sera avantageusement choisi parmi : l'hydroquinone et ses dérivés, le résorcinol et ses dérivés, l'arbutine et ses dérivés, le lucinol et ses dérivés, la vitamine C et ses dérivés, l'acide L-2-oxothiazolidine-4-carboxylique ou procystéine ainsi que ses sels ou esters, l'acide férulique et ses dérivés, l'acide tranexamique et ses dérivés, l'acide gentisique, le méthyl gentisate ou l'homogentisate, l'acide dioique, l'acide lipoique, l'acide linoléique et ses dérivés, l'acide ellagique et ses dérivés, l'acide kojique et ses dérivés, le D calcium panthéteine sulfonate, le magnolol, l'honokiol, le magnolignan, les céramides naturels ou de synthèse et leurs homologues, les extraits de fruits d'arbuste du genre Morus (par exemple le mûrier), de pétales de fleur d'arbuste du genre Rosa (par exemple la rose ou Rosa centifolia), de feuilles de plante du genre Mentha (la menthe par exemple), de plante du genre Aloe (notamment de l'espèce vera, ferox ou bardensis), de fleur de plante du genre Chamaemelum (la camomille notamment), d'arbuste de l'espèce Arctostaphylos uva-ursi L. (par exemple la busserole), une eau de fruit d'espèces du genre Actinidia (par exemple une eau de fruit ô'Actinidia chinensis ou kiwi commercialisée par Gattefosse), un extrait de racine de Paeonia suffructicosa tel que celui commercialisé par exemple par la société Ichimaru Pharcos sous la dénomination Botanpi Liquid B®, un extrait de Ginkgo biloba, un extrait de Glycyrrhiza glabra (réglisse, liquorice ou licorice) et un extrait de scutellaire. Par « dérivé de résorcinol », on entend par exemple un dérivé diphényl-méthane hydroxylé tel que ceux décrits dans la demande WO 2004/105736 comme le 4-(1 - phenylethyl)-1 ,3-benzenediol ou 4-(1 -phenylethyl)-1 ,3-dihydroxybenzène ou autrement nommé phenyethyl résorcinol ou phenylethylbenzenediol ou styryl résorcinol. Ce composé a un numéro CAS 85-27-8.

Par «dérivés de l'arbutine », on entend notamment ceux décrits dans les demandes EP 895779 et EP 524109 comme l'alpha et la béta arbutine. Par «dérivés de la vitamine C», on entend notamment la vitamine CG, CP et la 3- O ethyl vitamine C.

Par « dérivés de l'acide ellagique », on entend ses sels, ses complexes métalliques, ses dérivés mono- ou polyéthers, ses dérivés mono- ou polyacylés, ainsi que ses dérivés carbonates ou carbamates, dérivant des groupements hydroxyles.

Par « dérivés de l'acide férulique », on entend notamment ses esters et/ou sels et/ou extraits végétaux en contenant. De préférence, on utilisera les esters. Comme 'esters' d'acide férulique, on peut notamment citer les esters d'acide férulique et d'alcools en C1 -C30, en particulier le methyl férulate, l'éthyl férulate, l'isopropyl férulate, l'octyl férulate et l'oryzanyl férulate. Comme 'sels' d'acide férulique, on peut notamment citer les sels organiques d'acide férulique, en particulier les sels de sodium (ex : sodium férulate et sodium isoférulate). Comme 'extraits végétaux' contenant de l'acide férulique, on peut notamment citer le riz, le blé, l'orge, l'avoine, l'écorce des arbres, les bourgeons de peuplier, l'asperge, les olives, les baies. De préférence, on utilisera la fraction du son de riz, blé, orge, ou avoine. Selon la présente invention, on entend, par « composé de type céramide », les céramides et/ou les glycocéramides et/ou les pseudocéramides et/ou les néocéramides, naturelles ou synthétiques.

Des composés de type céramides sont par exemple décrits dans les demandes de brevet DE 4424530, DE 4424533, DE 4402929, DE 4420736, WO 95/23807, WO 94/07844, EP 0 646 572, WO 95/16665, FR 2 673 179, EP 0 227 994 et WO 94/07844, WO 94/24097, WO 94/10131 dont les enseignements sont ici inclus à titre de référence.

Un exemple de céramide peut être un composé de formule (I) suivante

R -CHOH-CH(NH-COR 2 )(CH 2 OH) (I) dans laquelle Ri désigne un radical alkyle en C-n à C21 , 2 désigne un radical hydrocarboné en C1 1 -C19, linéaire, éventuellement hydroxylé et le groupe hydroxyle étant en position alpha du carbonyle, et pouvant comporter une ou plusieurs insaturations éthyléniques, notamment une ou deux insaturations éthyléniques.

Pour les composés de formule (I), de préférence Ri désigne un radical hydrocarboné en C13-C19 ; R2 désigne un radical hydrocarboné en C13-C19 linéaire, éventuellement hydroxylé, et pouvant comporter une ou plusieurs insaturations éthyléniques.

Préférentiellement, Ri désigne un radical hydrocarboné en C13-C17 ; R2 désigne un radical hydrocarboné en C13-C19 linéaire, éventuellement hydroxylé, et pouvant comporter une ou plusieurs insaturations éthyléniques.

Avantageusement, Ri désigne un radical hydrocarboné en C13-C17 ; R2 désigne soit un radical hydrocarboné en C13-C19 linéaire et pouvant comporter une ou plusieurs insaturations éthyléniques, soit un radical hydrocarboné saturé en C13- C19 linéaire hydroxylé, le groupe hydroxyle étant en position alpha du carbonyle.

Comme composés de formule (I) particulièrement préférés, on peut utiliser la N- oléoyldihydrosphingosine et la N-2-hydroxypalmitoyldihydrosphingosine.

Les composés de formule (I) sont connus de l'état de la technique, notamment dans les demandes EP-A-500437 et EP-A-647617.

Par exemple, la société COSMOFERM commercialise le N-linoleoyl- phytosphingosine sous le nom de Ceramide NIA® et qui est connu pour avoir une action dépigmentante sur la peau.

Le terme alkyle, dans le cadre de la présente invention, signifie une chaîne hydrocarbonée saturée ou insaturée.

Comme agents dépigmentants préférentiels, on utilisera l'acide ellagique, les extraits de menthe et/ou de rose et/ou de Ginkgo biloba et/ou de Glycyrrhiza glabra (réglisse, liquorice ou licorice) décrits ci-dessus.

L'invention porte également sur un procédé de traitement cosmétique pour améliorer l'éclat, la transparence et/ou la luminosité du teint de la peau d'un individu, caractérisé en ce qu'on applique sur la peau dudit individu au moins un extrait de levure du genre Saccharomyces ou une composition comprenant au moins un extrait de levure du genre Saccharomyces, dans un milieu physiologiquement acceptable. Le procédé sera avantageusement mis en œuvre le matin et/ou le soir, tous les jours pendant une durée minimale d'un mois. L'individu préférentiellement ciblé par l'utilisation ou le procédé selon l'invention sera une femme asiatique, âgée de 25 à 45 ans.

Une composition cosmétique, pour la mise en œuvre de l'invention, comprend au moins un extrait de levure du genre Saccharomyces, tel que défini précédemment, et au moins un agent dépigmentant choisi parmi l'hydroquinone et ses dérivés, le résorcinol et ses dérivés, l'arbutine et ses dérivés, le lucinol et ses dérivés, la vitamine C et ses dérivés, l'acide L-2-oxothiazolidine-4-carboxylique ou procystéine ainsi que ses sels ou esters, l'acide férulique et ses dérivés, l'acide tranexamique et ses dérivés, l'acide gentisique, le méthyl gentisate ou l'homogentisate, l'acide dioique, l'acide lipoique, l'acide linoléique et ses dérivés, l'acide ellagique et ses dérivés, l'acide kojique et ses dérivés, le D calcium panthéteine sulfonate, le magnolol, l'honokiol, le magnolignan, les céramides naturels ou de synthèse et leurs homologues, les extraits de fruits d'arbuste du genre Morus, de pétales de fleur d'arbuste du genre Rosa, de feuilles de plante du genre Mentha, de plante du genre Aloe, de fleur de plante du genre Chamaemelum, d'arbuste de l'espèce Arctostaphylos uva-ursi L, une eau de fruit d'espèces du genre Actinidia, un extrait de racine de Paeonia suffructicosa, un extrait de Ginkgo biloba, un extrait de Glycyrrhiza glabra et un extrait de scutellaire.

Selon un mode de réalisation avantageux, la composition selon l'invention comprend une concentration de 0,01 à 5%, préférentiellement de 0,05 à 1 % et encore plus préférentiellement de 0,1 à 1 % par rapport au poids total de la composition, d'au moins un extrait de levure du genre Saccharomyces.

Dans un mode de réalisation préféré, cette composition selon l'invention, comprend en outre au moins un agent choisi parmi les agents desquamants et les agents apaisants. Par "agent desquamant", on entend tout composé capable d'agir:

- soit directement sur la desquamation en favorisant l 'exfoliation, tels que les beta- hydroxyacides (BHA), en particulier l'acide salicylique et ses dérivés (dont l'acide n-octanoyl 5-salicylique autrement nommé acide capryloyl salicylique en nom INCI) ; les alpha-hydroxyacides (AHA), tels que les acides glycolique, citrique, lactique, tartrique, malique ou mandélique ; l'acide 8-hexadécène-1 ,16- dicarboxylique ou acide 9-octadécène dioïque ; l'urée et ses dérivés; l'acide gentisique et ses dérivés ; les oligofucoses ; l'acide cinnamique ; l'extrait de Saphora japonica ; le resvératrol et certains dérivés d'acide jasmonique.

- soit sur les enzymes impliquées dans la desquamation ou la dégradation des cornéodesmosomes, les glycosidases, la stratum corneum chymotryptic enzyme (SCCE) voire d'autres protéases (trypsine, chymotrypsine-like). On peut citer les composés aminosulfoniques et en particulier l'acide 4-(2-hydroxyethyl)piperazine- 1 -propanesulfonique (HEPES) ; l'acide 2-oxothiazolidine-4-carboxylique (procystéine) et ses dérivés ; les dérivés d'acides alpha aminés de type glycine (tels que décrits dans EP-0 852 949, ainsi que le méthyl glycine diacétate de sodium commercialisé par BASF sous la dénomination commerciale TRILON M) ; le miel ; les dérivés de sucre tels que l'O-octanoyl-6-D-maltose et la N-acétyl glucosamine. Comme autres agents desquamants utilisables dans la composition selon l'invention, on peut citer :

les oligofructoses, l'EDTA et ses dérivés, les laminaria extract, le o-linoleyl- 6D-glucose, l'acide (3-hydroxy-2pentylcyclopentyl) acétique, le trilactate de glycérol, l'O-octanyl-6'-D-maltose, la S carboxyméthyl cystéine, les dérivés siliciés de salicylate comme ceux décrits dans le brevet EP 0 796 861 , les oligofucase comme ceux décrits dans le brevet EP 0 218 200, les sels d'acide 5-acyl salicylique, des actifs ayant des effets sur la transglutaminase comme dans le brevet EP 0 899 330,

l'extrait de fleur de Ficus opuntia indica comme l'Exfolactive® de Silab, - l'acide 8-hexadécène 1 ,16-dicarboxylique,

les esters de glucose et de vitamine F, et

leurs mélanges.

Comme agents desquamants préférés, on utilisera l'acide salicylique et ses dérivés (dont l'acide n-octanoyl 5-salicylique autrement nommé acide capryloyl salicylique en nom INCI).

On entend par « agent apaisant », un composé permettant de réduire la sensation de picotements, de démangeaisons ou de tiraillements de la peau.

Comme agents apaisants utilisables dans la composition selon l'invention, on peut citer: les oligomères procyannidoliques, les vitamines E, C B5, B3, la caféine et ses dérivés, les triterpènes pentacycliques et les extraits de plantes les contenant, l'acide beta-glycyrrhétinique et ses sels ou dérivés (le stearyl glycyrrhetate, l'acide 3-stéaroyloxy glycyrrhétique, l'acide glycyrrhétinique monoglucuronide) ainsi que les extraits de plantes en contenant (ex : Glycyrrhiza glabra), l'acide oléanolique et ses sels, l'acide ursolique et ses sels, l'acide boswellique et ses sels, l'acide bétulinique et ses sels, un extrait de Paeonia suffruticosa et/ou lactiflora tel que celui commercialisé par la société Ichimaru Pharcos sous la dénomination Botanpi Liquid B®; un extrait de Laminaria saccharina, les extraits de Centella asiatica, l'huile de Canola, le bisabolol, le diesterphosphorique de vitamine E et C comme le Sepivital EPC® de Seppic, les extraits de camomille, l'allantoïne, les huiles insaturées en oméga 3 telles que les huiles de rosier muscat, de cassis, à'Ecchium, de poisson, l'huile de calophilum, des extraits de plancton, la capryloyl glycine, un mélange d'extrait de fleur de nénuphar et de palmitoylproline tel que celui vendu sous la dénomination "Seppicalm VG®" par la société Seppic, un extrait de Boswellia serrata, un extrait de Centipeda cunnighami tel que celui vendu sous la dénomination "Cehami PF®" par la société TRI-K Industries, un extrait de graines de tournesol en particulier l'Hélioxine® de Silab, un extrait de graines de Linum usitatissimum comme la Sensiline® de Silab, les tocotriénols, le piperonal, un extrait d'Epilobium angustifolium tel que celui vendu sous la dénomination "Canadian Willowherb Extract" par la société FYTOKEM PRODUCTS, IWoe vera, les phytostérols, l'eau de bleuet, l'eau de rose, un extrait de menthe, en particulier de feuilles de menthe comme le Calmiskin® de Silab, les dérivés d'anis, les bactéries filamenteuse comme Vitreoscilla filiformis tel que décrit dans le brevet EP 761 204 et commercialisé par Chimex sous la dénomination Mexoryl SBG®, un extrait de pétales de rose comme le Rose Flower Herbasol® extract de la société Cosmetochem, le beurre de karité, un mélange de fraction de cire de graine d'orge obtenue par CO2 supercritique, de beurre de karité et d'huile d'argan comme le "Stimu-tex AS®" de Pentapharm, les sels alcalino-terreux notamment le strontium, un extrait fermenté ô'Alteromonas commercialisé sous la dénomination ABYSSINE® par la société Atrium Biotechnologies ; les eaux thermales du bassin de Vichy, telles que les eaux provenant des sources Célestins, Chomel, Grande-Grille, Hôpital, Lucas et Parc, et de préférence l'eau de la source Lucas ; un extrait d'écorce 6'Eperua falcata tel que celui commercialisé par la société COGNIS sous la dénomination Eperuline® ; et leurs mélanges.

Comme agents apaisants préférés, on pourra citer les extraits de pétales de rose et de feuilles de menthe.

Certains composés cités précédemment peuvent apparaître dans plusieurs catégories d'agents.

Dans un mode de réalisation particulier de l'invention, l'agent dépigmentant sera aussi un agent apaisant. Un extrait de menthe est un exemple d'un agent dépigmentant et apaisant.

Dans un mode de réalisation préférentiel de l'invention, la composition, comprend, en association avec au moins un extrait de levure, un extrait de pétale de rose, un extrait de feuille de menthe, un extrait de Gingko biloba, un extrait de Glycyrrhiza glabra, de l'acide ellagique ou de ses dérivés et de l'acide salicylique ou de ses dérivés.

Les extraits de rose et de menthe seront utilisés dans la composition pour leurs propriétés anti-inflammatoires (ils agissent respectivement sur PGE 2 et IL-1 qui sont des neuromédiateurs connus pour jouer un rôle dans l'hyperpigmentation cutanée). L'acide ellagique aura comme rôle principal de réduire la synthèse de mélanine CGRP-induite. L'extrait de Ginkgo biloba inhibera la production de NO, messager stimulant la mélanogénèse et l'acide salicylique sera utilisé ici pour ses propriétés exfoliantes. L'extrait de de Glycyrrhiza glabra sera, quant à lui, utilisé pour son effet inhibiteur sur la tyrosinase.

Selon un mode de réalisation avantageux, la composition selon l'invention comprendra en plus d'au moins un extrait de levure (par rapport au poids total de la composition) :

- entre 0,01 et 1 %, préférentiellement entre 0,05 et 0,5% d'un extrait de pétales de rose et/ou

- entre 0,01 et 1 %, préférentiellement entre 0,02 et 0,2% d'un extrait de feuille de menthe et/ou

- entre 0,01 et 1 %, préférentiellement entre 0,1 et 0,8% d'acide ellagique et/ou

- entre 0,01 et 1 %, préférentiellement entre 0,01 et 0,1 % d'extrait de Ginkgo biloba et/ou

- entre 0,01 et 1 %, préférentiellement entre 0,05 et 0,5% d'acide salicylique et/ou

- Entre 0,01 et 1 %, préférentiellement entre 0,05 et 0,5% d'extrait de Glycyrrhiza glabra.

Cette composition pourra être avantageusement utilisée pour améliorer l'éclat du teint et/ou la transparence et/ou la luminosité et/ou l'homogénéité du teint de la peau d'un individu et/ou pour lutter contre les signes de fatigue (par exemple le teint terne, le teint exsangue, le teint livide, le teint blafard ou le teint hétérogène) et/ou pour lutter contre les signes du vieillissement chronologique et/ou pour détoxifier les cellules de la peau.

La composition selon l'invention peut se présenter sous toutes les formes galéniques normalement utilisées dans les domaines cosmétique et dermatologique, et elle peut être notamment sous forme d'une solution aqueuse éventuellement gélifiée, d'une dispersion du type lotion éventuellement biphasée, d'une émulsion obtenue par dispersion d'une phase grasse dans une phase aqueuse (H/E) ou inversement (E/H), ou d'une émulsion triple (E/H/E ou H/E/H) ou d'une dispersion vésiculaire de type ionique et/ou non ionique. Ces compositions sont préparées selon les méthodes usuelles. Cette composition peut être plus ou moins fluide et avoir l'aspect d'une crème blanche ou colorée, d'une pommade, d'un lait, d'une lotion, d'un sérum, d'une pâte, d'une mousse. Elle peut éventuellement être appliquée sur la peau sous forme d'aérosol. Elle peut également se présenter sous forme solide, en particulier sous forme de stick. Elle peut être utilisée comme produit de soin et/ou comme produit de maquillage pour la peau.

Le ou les autres actifs cosmétiques présents dans les compositions selon l'invention pourront être choisis parmi les agents hydratants, les agents améliorant la fonction barrière, les agents stimulant la synthèse de macromolécules dermiques et/ou épidermiques et/ou empêchant leur dégradation, les agents stimulant la prolifération des fibroblastes ou des kératinocytes et/ou la différenciation des kératinocytes, les agents favorisant la maturation de l'enveloppe cornée, les agents stimulant le métabolisme énergétique des cellules, les agents tenseurs, les agents favorisant la microcirculation cutanée, les agents anti-irritants ou anti-séborrhéiques et les agents anti-acné.

L'homme du métier choisira le ou lesdits actifs en fonction de l'effet recherché sur les matières kératiniques.

Pour le soin et/ou le maquillage des peaux âgées, il choisira de préférence au moins un actif choisi parmi les agents hydratants, les agents améliorant la fonction barrière, les agents dermodécontractants, les agents stimulant la synthèse de macromolécules dermiques et/ou épidermiques et/ou empêchant leur dégradation, les agents stimulant la prolifération des fibroblastes ou des kératinocytes et/ou la différenciation des kératinocytes, les agents favorisant la maturation de l'enveloppe cornée, les inhibiteurs de NO-synthases, les agents stimulant le métabolisme énergétique des cellules, et les agents favorisant la microcirculation cutanée pour le contour des yeux.

Un "milieu physiologiquement acceptable" est, selon l'invention, un milieu cosmétiquement acceptable compatible avec la peau, les muqueuses, les ongles et/ou les cheveux.

Par « milieu cosmétiquement acceptable », on entend un milieu sans aspect désagréable, et qui ne génère pas de picotement, de tiraillement ou de rougeur inacceptable pour l'utilisateur. Le milieu physiologiquement acceptable sera adapté à la nature du support sur lequel doit être appliquée la composition ainsi qu'à la forme sous laquelle la composition est destinée à être conditionnée, notamment solide ou fluide à température ambiante et pression atmosphérique. Légende de la figure

Figure 1 : Résultats de spectrométrie: la flurorescence est exprimée en RFU (Relative Fluorescence Unit). YE représente la condition dans laquelle les cellules sont traitées avec un extrait de levure. C représente la condition contrôle témoin dans laquelle les cellules ne reçoivent pas de traitement.

Les exemples figurant ci-après sont présentés à titre illustratif et non limitatif de l'invention.

EXEMPLES

Exemple 1 : Mise en évidence de l'activité de l'extrait de Saccharomyces cerevisiae

1. Effet de l'extrait de Saccharomyces cerevisiae sur la phagocytose

La capacité de kératinocytes à incorporer des billes de latex fluorescentes a été étudiée par spectrophotométrie et microscopie par fluorescence après 24 heures de traitement avec l'extrait de levure, de façon à évaluer la capacité de phagocytose de kératinocytes suite à ce traitement.

1.1. Protocole Le test de phagocytose a été réalisé sur des kératinocytes NCTC-2544 (Interlab Cell Line Collection (ICLC), Genova, Italy) et à l'aide d'un kit de phagocytose (Cayman Chemical Company). Les cellules NCTC-2544 sont des cellules type bien connues de l'homme du métier (Neufhart et al. Arch Dermatol Res. 1976 Oct 27;256(3):255-60).

Chaque condition a été testée sur 3 échantillons.

Les cellules NCTC-2544 sont ensemencées sur des plaques 96 puits à T0 dans un milieu de culture EMEM (Eagle's Minimum Essential Médium - Lonza France), avec une densité de 0.5x10 4 cellules par puits.

Le jour suivant, les cellules sont traitées avec 100 μΙ d'une solution contenant l'extrait de levure à 0.42% dans du milieu de culture EMEM. La condition témoin est obtenue en ajoutant 100 μΙ de milieu de culture EMEM aux cellules.

Une solution contenant des billes de latex (dilution 1 /10) est alors ajoutée dans chaque puits et les plaques sont incubées pendant 24 heures. Les billes de latex sont marquées avec des IgG fluorescents permettant leur identification. Après 24 heures de traitement, le milieu de culture est éliminé et 50μΙ_ d'une solution de Bleu de Trypan sont ajoutés dans chaque puits. Les plaques sont alors incubées pendant 2 minutes. La solution est ensuite éliminée et les cellules rincées avec un tampon.

La quantification de l'intensité de fluorescence a été faite par 2 méthodes :

- Spectrophotometrie

- Microscopie par fluorescence (LEICA DM IL LED FLUO avec un filtre FITC ; excitation à 484nm et émission à 535nm.)

1.2. Résultats

- Spectroscopie

La fluorescence, traduisant le phénomène de phagocytose, est exprimée en RFU (Relative Fluorescence Unit) et comparée à un contrôle témoin n'ayant pas reçu de traitement). Une augmentation significative de la fluorescence a été observée sur les cellules NCTC-2544 traitées pendant 24 heures avec l'extrait de levure sélectionné. L'extrait de levure induit 2,5 fois plus de fluorescence que le contrôle témoin (Voir Figure 1 ). - Microscopie par Fluorescence

Les images obtenues avec l'extrait de levure sélectionné montrent que comparativement au témoin, l'extrait augmente significativement la capacité des cellules à ingérer des billes de latex, donc le mécanisme de phagocytose.

1.3. Conclusion

Le kit de phagocytose utilisé pour cette étude a permis de mettre en évidence l'effet de l'extrait de levure sélectionné (Firmalift®) sur la capacité des cellules à ingérer des billes de latex. L'extrait de levure a permis de multiplier par 2.5 les capacités de phagocytose des kératinocytes.

2. Effet de l'extrait de Saccharomyces cerevisiae sur la formation des lysosomes

Une étude (n=2) pour évaluer l'effet de l'extrait de levure sur la formation des lysosomes impliqués dans la dégradation des éléments cellulaires altérés a été réalisée par marquage fluorescent à l'aide d'un fluorophore Lysotrackeur® (Invitrogene, BP 96 - 95613 Cergy Pontoise Cedex France) sur des kératinocytes HaCat (CLS - Cell Lines Service - Hildastr. 21 , 69214 Eppelheim Germany) en condition de stress (H2O2). Les cellules HaCat sont des cellules type bien connues de l'homme du métier (Boukamp P. et al., The Journal of Cell Biology, Volume 106, March 1988, 761 -771 ).

2.1. Protocole:

A J 1 a lieu l'ensemencement cellulaire : les kératinocytes HaCat sont ensemencés dans du milieu KSFM (Keratinocyte serum-free médium) complet (Invitrogen). Les cellules sont ensuite incubées à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2.

A J3, T0 a lieu le prétraitement des cellules : le milieu de culture est éliminé et remplacé par du milieu contenant ou non l'extrait de levure à 1 % (VA/). Les cellules sont ensuite incubées pendant 3 heures à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO 2 .

A J3, T3h a lieu l'induction de l'autophagie et un traitement des cellules : le milieu de culture est éliminé et remplacé par :

- une solution de H2O2 a 250μΜ

- un extrait de levure à 1 % (V/V)

Les cellules sont ensuite incubées pendant 3 heures à 37°C dans une atmosphère contenant 5% de CO2.

A J3, T6h a lieu un traitement des cellules : le milieu de culture est éliminé et remplacé par du milieu contenant ou non l'extrait de levure à 1 % (VA/). Les cellules sont de nouveau incubées à 37°C pendant 15 heures.

A J4 a lieu le marquage des lysosomes : un marquage spécifique par fluorescence est réalisé par :

- Rinçage des lames dans un tampon PBS.

- Incubation dans une solution de Lysotrackeur Yellow (50nM) pendant une heure à 37°C.

- Rinçage dans un tampon PBS. La lecture du marquage est réalisée sur microscope IX 70 (OLYMPUS - Japon) couplé à un système d'analyse d'images (logiciel NIS-Elements AR-NIKON). L'intensité du marquage des lysosomes est proportionnelle à l'intensité de fluorescence jaune présente au niveau cytoplasmique des cellules. Plus la couleur jaune est importante, plus la formation de lysosomes est élevée.

2.2. Résultats :

Les résultats sont résumés dans le tableau ci-dessous: Formation des

lysosomes

Cellules en condition

normale (non stressées et +

n'ayant pas reçu de

traitement) = C

Cellules en condition de

stress mais ne recevant ++

pas de traitement = CS

Cellules en condition de

stress et traitées avec 1 % +++

d'extrait de levure = CS +

YE

Sur les images que l'on obtient, on voit que l'ajout de H2O2 augmente la formation des lysosomes dans les kératinocytes. On voit aussi très nettement que lorsque l'on ajoute de l'extrait de levure, une fluorescence plus importante est visible dans les cellules en condition de stress.

L'extrait de levure a ainsi démontré sa capacité à stimuler la formation, dans les kératinocytes, des lysosomes impliqués dans la dégradation des éléments cellulaires altérés et à augmenter ainsi le système de dégradation lysosomale de la cellule initialement déclenché par un stress H2O2.

3. Conclusion En favorisant les mécanismes de phagocytose et la formation des lysosomes, l'extrait de levure oriente les constituants cellulaires altérés vers la voie de dégradation lysosomale renforçant ainsi la détoxification cellulaire. Exemple 2 : Composition cosmétique selon l'invention

Ingrédients Proportions

(en pourcentage par rapport au poids total de la composition)

Extrait de levure de Saccharomyces 0,1 %

cerevisiae

Extrait de Glycyrrhiza glabra 0,1 %

Acide ellagique 0,5%

Acide salicylique 0,1 %

Gélifiants 0,2 à 0,8%

L'extrait de levure est fourni sous forme d'extrait hydroglycolique dans un mélange eau et pentylène glycol. Exemple 3 : Mise en évidence in vivo de l'efficacité d'une composition contenant l'extrait de levure précédemment décrit en association avec des agents dépigmentants

Une étude clinique a été mise en place à Singapour sur 50 femmes âgées de 25 à 45 ans, présentant un teint terne au niveau du visage. Cette étude monocentrique randomisée a été réalisée en ouvert. Le produit testé a été appliqué 2 fois par jour pendant 8 semaines.

Des photos haute résolution du visage entier et de ¾ (profil droit ou gauche) ont été prises, en lumière polarisée croisée, sur 40 des sujets à T0, T4 et T8 semaines afin d'évaluer la luminosité du teint et la saturation de couleur entre 5 zones du visage (front, pommette, cerne, joue, menton). Ces photos ont été prises à l'aide d'un système permettant des conditions parfaitement reproductibles : un appareil photo Nikon D100 avec une haute résolution (10 millions de pixels), un système d'éclairage (Broncolor, France) composé d'un générateur et de 2 flashs disposés de chaque côté du sujet garantissant une lumière stable et un système de repositionnement spécifique des volontaires.

Les résultats mettent en évidence :

Une augmentation statistiquement significative du paramètre L* de la peau traduisant une augmentation de la luminosité cutanée à T4 et T8 semaines.

Une augmentation statistiquement significative des paramètres L* et « saturation de couleur » de la peau montrant une amélioration de la qualité du teint et un effet « anti-gris », donc un teint moins terne, après 4 semaines de traitement.

Les femmes ont également évalué elles-mêmes l'efficacité de la formule en répondant à un questionnaire d'autoévaluations immédiatement après application du soin et après 1 , 4 et 8 semaines de traitement selon une échelle en 5 points :

D'autre part, dans une seconde étude réalisée sur 41 femmes asiatiques, des mesures du paramètre L * caractérisant la luminance cutanée ont été réalisées à l'aide d'un chromamètre 4 et 8 semaines après utilisation du produit. Les résultats obtenus, montrant une augmentation significative du paramètre L * à chacun des temps d'évaluations, confirment que l'utilisation de la composition selon l'invention a un effet positif sur l'éclat et la luminosité de la peau.