DERIVES DE 2-ALCOXY-3,4,5-TRIHYDROXY-ALKYLAMIDE. LEUR PREPARATION. COMPOSITIONS LES CONTENANT ET UTILISATION

La présente invention concerne notamment des dérivés de 2-alcoxy-3,4,5- trihydroxy-alkylamides, leur préparation, des compositions les contenant, et leur utilisation comme médicament.

Plus particulièrement, et selon un premier aspect, l'invention concerne des dérivés de 2-alcoxy-3,4,5-trihydroxy-alkylamides utiles comme agents anticancéreux.

Des 2-méthoxy-3,4,5-trihydroxy-alkylamides ont été décrits dans US 6239127, US 20010044433 A1 , WO 01/85697, WO 00/29382, US 4831135, EP 687673, et US 2002128474 A1. Ces documents divulguent essentiellement des analogues et dérivés de bengamide, un produit naturel isolé d'une éponge marine, Jaspis coriacea.

Ces mêmes produits ont été décrits dans la littérature : J. Org. Chem. (1986), 51 (23), 4494-7 ; J. Org. Chem. (2001), 66(5), 1733-41 ; J. Med. Chem. 2001 , 44, 3692-9.

Le problème que se propose de résoudre la présente invention est d'obtenir de nouveaux produits présentant une activité anticancéreuse. En plus du maintien d'une activité anticancéreuse, certains de ces nouveaux produits peuvent également présenter des propriétés avantageuses en relation avec leur activité pharmacologique, telle que leur pharmacocinétique, biodisponibilité, solubilité, stabilité, toxicité, absorption ou métabolisme.

La présente invention a pour objet les produits répondant à la formule générale (I) suivante :

(I)

dans laquelle :

a) Ri est indépendamment sélectionné dans le groupe constitué par (C1- C12)alkyle, (C2-C12)alcényle, (C2-C12)alcynyle, cycloalkyle, hétérocyclyle, aryle, hétéroaryle, cycloalkyl(C1 -C12)alkyle, cycloalkyl(C2- C12)alcényle, cycloalkyl(C2-C12)alcynyle, hétérocyclyl(C1-C12)alkyle, hétérocyclyl(C2-C12)alcényle, hétérocyclyl(C2-C12)alcynyle, aryl(C1 - C12)alkyle, aryl(C2-C12)alcényle, aryl(C2-C12)alcynyle, hétéroaryl(C1- C12)alkyle, hétéroaryl(C2-C12)alcényle, hétéroaryl(C2-C12)alcynyle, le groupe aryle de chaque Ri étant éventuellement substitué par un ou plusieurs halogènes ;

b) R ₂ est sélectionné dans le groupe constitué par (C1-C6)alkyle, aryl(C1 - C6)alkyle, hétéroaryl(C1-C6)alkyle, aryle, hétéroaryle, (C1- C6)alkylthio(C1 -C6)alkyle, di(C1 -C6)alkylamino(C1 -C6)alkyle, aryloxy(C1 - C6)alkyle, (C1 -C6)alkoxy(C1-C6)alkyle ;

c) R ₃ est sélectionné dans le groupe constitué par H, COO(R ₅ ), CONH(R ₅ ), CO(R ₅ ), 0(R ₅ ), R ₅ ;

d) R ₄ est indépendamment sélectionné dans le groupe constitué par H, F, Cl, Br, N(Rs) ₂ , NO ₂ , CN, COO(R ₅ ), CON(R ₅ ) ₂ , NHCO(R ₅ ), NHCOO(R ₅ ), OCONH(Rs), 0(R ₅ ), R ₅ ou bien, deux substituants R ₄ , liés à 2 carbones adjacents du phényl, forment ensemble un cycle choisi parmi cycloalkyle, hétérocyclyle, aryle ou hétéroaryle, éventuellement substitué par un ou plusieurs R ₄ ;

e) Xi est -CH ₂ - , et X ₂ est indépendamment sélectionné dans le groupe constitué par O, N(R ₅ ), ou bien, Xi et X ₂ forment ensemble un groupe divalent indépendamment choisi parmi -N=C(R ₅ )-, -N(R ₅ )-C(R ₅ )( R ₅ )-, les deux substituants R ₅ pouvant être identiques ou différents ;

f) m a pour valeur O, 1 , 2, 3, ou 4 ;

g) R ₅ est indépendamment choisi parmi doublet d'électrons non liant, H, (C1- C12)alkyle, (C2-C12)alcényle, (C2-C12)alcynyle, halogéno(C1-C12)alkyle, aryl(C1-C12)alkyle, hétéroaryl(C1-C12)alkyle, hétéroarylaryl(C1 - C12)alkyle, aryle, hétéroaryle, cycloalkyle, dans lequel chaque R ₅ est éventuellement substitué par au moins un substituant choisi parmi OH, halogène, (C1 -C4)alkyle, (C1 -C4)alkoxy, aryl(C1-C4)alkyle, aryle, hétéroaryl(C1 -C4)alkyl, hétéroaryle, -N(CH ₃ ) ₂ , -NH ₂ , CONH ₂ ,

chacun des Rz est indépendamment sélectionné dans le groupe constitué par H, COO(R ₅ ), CONH(R ₅ ), CON(R ₅ ) ₂ , CO(R ₅ ), R ₅ , dans lequel chaque

R ₅ est indépendamment choisi parmi (C1-C4)alkyle, halogéno(C1-

C4)alkyle, aryl(C1-C4)alkyle, hétéroaryl(C1-C4)alkyle, dans lequel chaque

R ₅ est éventuellement substitué par un substituant choisi parmi OH, halogène, (C1-C4)alkyle, (C1-C4)alkoxy, aryl(C1 -C4)alkyle, aryle, hétéroaryl(C1-C4)alkyle, hétéroaryle.

La présente invention a pour objet les produits de formule générale (I) ci- dessus dans laquelle Ri est indépendamment sélectionné dans le groupe constitué par (C1-C12)alkyle, (C2-C12)alcényle, (C2-C12)alcynyle, cycloalkyle, hétérocyclyle, aryle, hétéroaryle, aryl(C1-C12)alkyle, aryl(C2- C12)alcényle, aryl(C2-C12)alcynyle, hétéroaryl(C1-C12)alkyle, hétéroaryl(C2- C12)alcényle, hétéroaryl(C2-C12)alcynyle.

La présente invention a pour objet les produits de formule générale (I) ci- dessus dans laquelle R ₂ est sélectionné dans le groupe constitué par (C1- C6)alkyle, aryl(C1 -C6)alkyle, hétéroaryl(C1-C6)alkyle, aryle, hétéroaryle, (C2- C12)alcénylaryle, (C2-C12)alcénylhétéroaryle, (C1-C6)alkylthio(C1-C6)alkyle, di(C1 -C6)alkylamino(C1 -C6)alkyle, aryloxy(C1 -C6)alkyle.

Selon l'invention, R ₁ est préférentiellement choisi parmi -C(Re)=C(R ₇ )(R ₈ ) dans lequel R ₆ , R ₇ , et R ₈ sont indépendamment sélectionnés parmi H, (C1- C6)alkyle, cycloalkyle, hétérocyclyle, aryle, hétéroaryle. Plus préférentiellement, Ri est choisi parmi (E) -CH=CH-CH(CH ₃ )(C ₂ H ₅ ), (E) - CH=CH-CH(CHs) ₂ , (E) -CH=CH-C(CH ₃ ) ₃ , ou encore parmi (E) -C(CH ₃ )=CH- CH(CH ₃ )(C ₂ H ₅ ), (E) -C(CH ₃ )=CH-CH(CH ₃ ) ₂ , et (E) -C(CH ₃ )=CH-C(CH ₃ ) ₃ . Plus préférentiellement, Ri est choisi parmi (E) -CH=CH-C ₅ H ₉ , (E) -CH=CH- thiophène _, (E) -CH=CH-C ₆ H ₅ où le phényle est éventuellement substitué par un atome de brome.

Selon l'invention, R ₂ est préférentiellement méthyle.

Parmi les objets de la présente invention, un premier groupe est caractérisé en ce que R ₃ est H. Un second groupe est caractérisé en ce que R ₃ est méthyle. Un troisième groupe est caractérisé en ce que R ₃ est (C1-C6)alkyle, (C1-C6)alcényle, benzyle ou (3,5-difluoro)benzyle.

Parmi ces objets, un autre sous-groupe est caractérisé en ce que Xi -CH ₂ - et X ₂ est O ou N(R ₅ ) dans lequel R ₅ est H, benzyle ou méthyle, ou Xi et X ₂ forment ensemble un groupe divalent-N=C(R ₅ )- où R ₅ est phényle.

Parmi ces objets, un autre sous-groupe est caractérisé en ce que m a pour valeur 0 ou bien R ₄ est phényle.

De manière préférée, l'invention concerne les produits exemplifiés dans le tableau 1.

Selon un autre aspect, l'invention concerne les procédés de préparation des produits de formule générale (I) ou (I ¹ ). Les produits de formule générale (I') sont des précurseurs, éventuellement actifs, des produits de formule générale (I). Les produits de formule générale (I) sont obtenus à partir des produits de formule générale (I ¹ ) par des procédés décrits ou par une ou plusieurs réactions classiques pour l'homme du métier telle que par exemple une cyclopropanation, une oxydation ou une séparation chirale.

Les produits de formule générale (I) ou (I ¹ ) peuvent être obtenus par hydrolyse d'un produit de formule générale (II) :

, dans lequel R ₁ , R ₂ , R ₃ , R ₄ , Xi, X ₂ et m sont tels que définis précédemment,.

Les produits de formule générale (II) peuvent être obtenus par réaction d'un produit de formule générale (III) :

, dans lequel R ₃ , R _{4 1} Xi, X ₂ et m sont tels que définis précédemment, avec un produit de formule générale (IV) :

, dans lequel R ₁ , R ₂ sont tels que définis précédemment.

Les produits de formule générale (I) ou (I ¹ ) peuvent également être obtenus par réaction d'un produit de formule générale (IM) tel que défini précédemment, avec un produit de formule générale (V) :

, dans lequel R ₁ , R ₂ sont tels que définis précédemment.

Les produits de formule générale (V) peuvent être obtenus par hydrolyse d'un produit de formule générale (IV) :

, dans lequel Ri, R ₂ sont tels que définis précédemment. Des produits de formule générale (V) pour lesquels Ri représente -CH=CH-R ¹ _I peuvent encore être obtenus par hydrolyse d'un produit de formule générale (VII) :

, dans lequel R ₂ est tel que défini précédemment, afin d'obtenir un produit de formule générale (Vl) :

, dans lequel R ₂ est tel que défini précédemment, qui subit une métathèse afin d'obtenir un produit de formule générale (V) :

représente un groupe (C1 -C6)alkyle, cycloalkyle, hétérocyclyle, aryle ou hétéroaryle.

Les produits de formule générale (VII) peuvent être obtenus par double déshydratation d'un produit de formule générale (VIII) :

, dans lequel R ₂ est tel que défini précédemment.

Les produits de formule générale (I ¹ ), (II) et (III) tels que définis précédemment sont un objet de la présente invention. Les produits de formule générale (IV) et (V) tels que définis précédemment pour lesquels R ₂ est méthyle ou méthyle et R1 est -(E) -CH=CH-C ₅ H ₉ , -(E) - CH=CH-thiophène ou -(E) -CH=CH-C ₆ H ₅ où le phényle est substitué par un atome de brome sont un objet de la présente invention. Les produits de formule générale (Vl) pour lesquels R ₂ est méthyle ou éthyle sont un objet de la présente invention. Les produits de formule générale (VII) pour lesquels R ₂ est méthyle ou éthyle sont un objet de la présente invention.

Les produits selon la présente invention peuvent exister à l'état de bases, de sels d'additions avec des acides, de solvats, d'hydrates ou de prodrogues.

Les produits selon l'invention peuvent être sous forme non chirale, ou racémique, ou enrichie en un stéréo-isomère, ou enrichie en un énantiomère ; et peuvent éventuellement être salifiés. Les produits pour lesquels le carbone lié à l'aminé exocyclique est de configuration (S) sont préférés.

Un produit conforme à l'invention pourra être utilisé pour la fabrication d'un médicament utile pour prévenir ou traiter un état pathologique, en particulier un cancer.

Les produits de la présente invention peuvent également être utilisés pour la fabrication d'un médicament utile pour prévenir ou traiter un état pathologique dans lequel une néovascularisation ou angiogenèse se fait de façon inappropriée c'est-à-dire dans les cancers en général et dans des cancers particuliers tels que le sarcome de Kaposi ou l'hémoangiome infantile, mais aussi dans l'arthrite rhumatoïde, l'osthéoarthrite et/ou ses douleurs associées, les maladies inflammatoires de l'intestin telle que la recto-colite hémorragique ou la maladie de Crohn's, les pathologies de l'œil telle que la dégénérescence maculaire liée à l'âge, les rétinopathies diabétiques, l'inflammation chronique, le psoriasis.

L'angiogenèse est un processus de génération de nouveaux vaisseaux capillaires à partir des vaisseaux pré-existants. L'angiogenèse tumorale

(formation de néovaisseaux sanguins), indispensable à la croissance

tumorale, est également un des facteurs essentiels de la dissémination métastatique (Oncogene. 2003 May 19;22(20):3172-9 ; Nat Med. 1995 Jan;1 (1):27-31.).

La présente invention concerne aussi les compositions thérapeutiques contenant un composé selon l'invention, en association avec un excipient pharmaceutiquement acceptable selon le mode d'administration choisi. La composition pharmaceutique peut se présenter sous forme solide, liquide ou de liposomes.

Parmi les compositions solides on peut citer les poudres, les gélules, les comprimés. Parmi les formes orales on peut aussi inclure les formes solides protégées vis-à-vis du milieu acide de l'estomac. Les supports utilisés pour les formes solides sont constitués notamment de supports minéraux comme les phosphates, les carbonates ou de supports organiques comme le lactose, les celluloses, l'amidon ou les polymères. Les formes liquides sont constituées de solutions de suspensions ou de dispersions. Elles contiennent comme support dispersif soit l'eau, soit un solvant organique (éthanol, NMP ou autres) ou de mélanges d'agents tensioactifs et de solvants ou d'agents complexants et de solvants.

Les formes liquides seront de préférence injectable et, de ce fait, auront une formulation acceptable pour une telle utilisation.

Des voies d'administration par injection acceptables incluent les voies intraveineuse, intra-péritonéale, intramusculaire, et sous cutanée, la voie intraveineuse étant préférée.

La dose administrée des composés de l'invention sera adaptée par le praticien en fonction de la voie d'administration du patient et de l'état de ce dernier.

Les composés de la présente invention peuvent être administrés seuls ou en mélange avec d'autres anticancéreux. Parmi les associations possibles on peut citer :

• les agents alkylants et notamment le cyclophosphamide, le melphalan, l'ifosfamide, le chlorambucil, le busulfan, le thiotepa, la prednimustine, la carmustine, la lomustine, la semustine, la steptozotocine, la decarbazine, la témozolomide, la procarbazine et l'hexaméthylmélamine

• les dérivés du platine comme notamment le cisplatine, le carboplatine ou l'oxaliplatine

• les agents antibiotiques comme notamment la bléomycine, la mitomycine, la dactinomycine

• les agents antimicrotubules comme notamment la vinblastine, la vincristine, la vindésine, la vinorelbine, les taxoides (paclitaxel et docétaxel)

• les anthracyclines comme notamment la doxorubicine, la daunorubicine, l'idarubicine, l'épirubicine, la mitoxantrone, la losoxantrone

• les topoisomérases des groupes I et II telles que l'étoposide, le teniposide, l'amsacrine, l'irinotecan, le topotecan et le tomudex

• les fluoropyrimidines telles que le 5-fluorouracile, l'UFT, la floxuridine

• les analogues de cytidine telles que la 5-azacytidine, la cytarabine, la gemcitabine, la 6-mercaptomurine, la 6-thioguanine

• les analogues d'adénosine telles que la pentostatine, la cytarabine ou le phosphate de fludarabine

• le méthotrexate et l'acide folinique

• les enzymes et composés divers tels que la L-asparaginase, l'hydroxyurée, l'acide trans-rétinoique, la suramine, la dexrazoxane, l'amifostine, l'herceptin ainsi que les hormones oestrogéniques, androgéniques

• les agents antivasculaires tels que les dérivés de la combretastatine, par exemple la CA4P, des chalcones ou de la colchicine, par exemple le ZD6126, et leurs prodrogues.

• Les inhibiteurs de kinases tels que l'ertonilib ou l'imatinib.

• Les agents biothérapeutiques comme les anticorps tels que le rituximab, le bevacizumab, le cetuximab, le trastuzumab ou l'alemtuzumab. • Les inhibiteurs du protéasome tel que le bortesomib.

Il est également possible d'associer aux composés de la présente invention un traitement par des radiations. Ces traitements peuvent être administrés simultanément, séparément, séquentiellement. Le traitement sera adapté par le praticien en fonction du malade à traiter.

Définitions

Le terme « halogène » fait référence à un élément choisi parmi F, Cl, Br, et I.

Le terme « alkyle » fait référence à un substituant hydrocarboné saturé, linéaire ou ramifié, ayant de 1 à 12 atomes de carbone. Les substituants méthyle, éthyle, propyle, 1-méthyléthyl, butyle, 1-méthylpropyl, 2-méthylpropyle, 1 ,1 -diméthyléthyle, pentyle, 1-méthylbutyle, 2-méthylbutyle, 3-méthylbutyle, 1 ,1-diméthylpropyle, 1 ,2-diméthylpropyle, 2,2-diméthyl- propyle, 1-éthylpropyle, hexyle, 1-méthylpentyle, 2-méthylpentyle, 1-éthyl- butyle, 2-éthylbutyle, 3,3-diméthylbutyle, heptyle, 1-éthylpentyle, octyle, nonyle, décyle, undécyle, et dodécyle sont des exemples de substituant alkyle.

Le terme « alcényle » fait référence à un substituant hydrocarboné linéaire ou ramifié ayant une ou plusieurs insaturations, ayant de 2 à 12 atomes de carbone. Les substituants éthylènyle, 1-méthyléthylènyle, prop-1-ènyle, prop- 2-ènyle, Z-1-méthylprop-1-ènyle, E-1-méthylprop-1-ènyle, Z-1 ,2-diméthyl- prop-1-ènyle, E-1 ,2-diméthylprop-1-ènyle, but-1 ,3-diényle, 1-méthylidènyl-

prop-2-ènyle, Z-2-méthylbut-1 ,3-diényle, E-2-méthylbut-1 ,3-diényle, 2-méthyl- i-méthylidènylprop-2-ènyle, undéc-1-ènyle et undéc-10-ènyle sont des exemples de substituant alkylène.

Le terme « alcynyle » fait référence à un substituant hydrocarboné linéaire ou ramifié ayant au moins deux insaturations portées par une paire d'atomes de carbone vicinaux, ayant de 2 à 12 atomes de carbone. Les substituants éthynyle; prop-1-ynyle; prop-2-ynyle; et but-1-ynyle sont des exemples de substituant alkynyle.

Le terme « aryle » fait référence à un substituant aromatique mono- ou polycyclique ayant de 6 à 14 atomes de carbone. Les substituants phényle, napht-1-yle ; napht-2-yle ; anthracen-9-yl ; 1 ,2,3,4-tétrahydronapht-5-yle ; et 1 ,2,3,4-tétrahydronapht-6-yle sont des exemples de substituant aryle.

Le terme « hétéroaryle » fait référence à un substituant hétéroaromatique mono- ou polycyclique ayant de 1 à 13 atomes de carbone et de 1 à 4 hétéroatomes. Les substituants pyrrol-1-yle ; pyrrol2-yle ; pyrrol3-yle ; furyle ; thienyle ; imidazolyle ; oxazolyle ; thiazolyle ; isoxazolyle ; isothiazolyle ;

1 ,2,4-triazolyle ; oxadiazolyle ; thiadiazolyle ; tétrazolyle ; pyridyle ; pyrimidyle ; pyrazinyle ; 1 ,3,5-triazinyle ; indolyle ; benzo[b]furyle ; benzo[b]thiényle ; indazolyle ; benzimidazolyle ; azaindolyle ; quinoléyle ; isoquinoléyle ; carbazolyle ; et acridyle sont des exemples de substituant hétéroaryle.

Le terme « hétéroatome » fait référence ici à un atome au moins divalent, différent du carbone. N; O; S; et Se sont des exemples d'hétéroatome.

Le terme « cycloalkyle » fait référence à un substituant hydrocarboné cyclique saturé ou partiellement insaturé ayant de 3 à 12 atomes de carbone. Les substituants cyclopropyle; cyclobutyle; cyclopentyle; cyclopentènyle; cyclopentadiényle; cyclohexyle; cyclohexènyle; cycloheptyle; bicyclo[2.2.1]heptyle ; cyclooctyle; bicyclo[2.2.2]octyle ; adamantyle ; et perhydronapthyle sont des exemples de substituant cycloalkyle.

Le terme « hétérocyclyle » fait référence à un substituant hydrocarboné cyclique saturé ou partiellement insaturé ayant de 1 à 13 atomes de carbone et de 1 à 4 hétéroatomes. De préférence, le substituant hydrocarboné

cyclique saturé ou partiellement insaturé sera monocyclique et comportera 4 ou 5 atomes de carbone et 1 à 3 hétéroatomes.

Concernant le phényle fusionné, lorsque m a pour valeur zéro on entend qu'il s'agit d'un phényle non substitué (ou substitué par 4 atomes d'hydrogène), et lorsque m a pour valeur 1 , 2, 3 ou 4, on entend qu'1 , 2, 3 ou 4 atomes d'hydrogènes sont substitués par un substituant R ₄ .

Les avantages de l'invention seront plus particulièrement illustrés par les exemples suivants :

Abréviations :

Ac acétate ; Bn benzyle ; °C degré Celsius ; cat. catalyseur ; CCM chromatographie sur couche mince ; CCP chromatographie sur colonne préparative ; cm centimètre ; δ déplacement chimique ; d doublet ; dd doublet de doublets ; DMF diméthylformamide ; DMSO-d ⁶ diméthylsulfoxyde deutéré ; dt doublet de triplets ; éq. équivalent ; ES+/- electrospray (modes positif / négatif) ; Et éthyle ; g gramme ; h heure ; Hz hertz ; IC _5O constante d'inhibition à 50% d'activité ; iPr isopropyle ; j. jour ; J constante de couplage ; LCMS chromatographie liquide couplée à une spectrométrie de masse; m multiplet ; Me méthyle ; mg milligramme ; MHz mégahertz ; ml_ millilitre ; μl_ microlitre ; mm millimètre ; μm micromètre ; mmol millimole ; mn minute ; N mol. L ^"1 ; PF point de fusion ; Ph phényle ; ppm parties par million ; q quadruplet ; Rdt rendement ; Rf rapport frontal ; RMN ¹ H résonance magnétique nucléaire du proton ; s singulet ; si singulet large ; t triplet ; TA température ambiante ; tBu tertiobutyle ; TFA acide trifluoroacétique ; THF tétrahydrofuranne ; t _R temps de rétention ; U.V. ultraviolet ; V volt.

Ex1 : N-((S)-8-oxo-6,7,8,9-tetrahydro-5-oxa-9-aza-benzocyclohepten -7-yl)- (E)-(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8-diméthyl- non-6-énamide

Etape 1 : Préparation du (3R,4R,5S)-4-hydroxy-5-((E)-(R)-1-hydroxy-4,4- diméthyl-pent-2-ényl)-3-méthoxy-dihydro-furan-2-one (2)

1 2 Dans un ballon de 250 ml_ conteant 40 ml_ d'eau et 3,6 g de 1 (qui peut être préparé selon les modes opératoires décrits dans Org. Process Res. Dev.

2003, 7(6), 856-865) en suspension, on ajoute 17 mL de TFA en solution dans 10 mL d'eau. On agite le milieu pendant 1 ,5 h à TA puis dilue le milieu avec 290 mL d'eau, congèle et lyophilise. On obtient 4 g d'une huile qui cristallise dans 20 mL d'éther isopropylique à TA. Après essorage, lavage à l'éther isopropylique, et séchage sous vide à 40 ⁰ C, on obtient 2,46 g de produit attendu 2(cristaux blanc).

PF : 123°C.

IC : m/z = 262 MNH ₄ ⁺ . RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,00 (s, 9H) ; 3,41 (s, 3H) ; 3,93 (dd, J

= 2,5 et 9,0 Hz, 1 H) ; de 4,22 à 4,31 (m, 3H) ; 5,19 (d, J = 5,0 Hz, 1 H) ; 5,42

(dd, J = 5,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,43 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 5,87 (d, J = 16,0 Hz,

1 H) .

IR (KBr): 3239; 2964; 2914; 1701 ; 1499; 1312; 1253; 1047 & 751 cnrï ¹ .

Etape 2: Préparation du chlorhydrate de (S)-7-amino-6,7-dihydro-9H-5-oxa-9- aza-benzocycloheptén-8-one (4)

Dans un ballon de 25 mL contenant 400 mg de 3 (1 ,44 mmol) (qui peut être préparé selon les modes opératoires décrites dans Chem. Pharm. Bull. 1986, 34(3), 1128-1147), on ajoute 11 mL d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite pendant 6 h à TA sous argon. Un précipité blanc se forme, qui est essoré, lavé avec du dioxane puis de l'éther isopropylique. On obtient ainsi 288 mg d'aminé 4 sous forme de chlorhydrate. IE : m/z = 178 M ⁺ .

[<X]D : -239,1 +/- 2,5 (c=5,160 mg/0.5 mL MeOH)

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-Cl ₆ ), δ(ppm):: 4,32 (dd, J = 5,5 et 10,0 Hz, 1 H) ; 4,40 (t, J = 10,0 Hz, 1 H) ; 4,59 (dd, J = 5,5 et 10,0 Hz, 1 H) ; 7,14 (m, 4H) ; 8,55 (s large, 3H) ; 10,5 (s, 1 H). IR (KBr): 3239; 2964; 2914; 1701 ; 1499; 1312; 1253; 1047 & 751 cm ^'1 .

Etape 3: Préparation du N-((S)-8-oxo-6,7,8,9-tetrahydro-5-oxa-9-aza- benzocyclohepten-7-yl)-(E)-(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2- méthoxy-8,8- diméthyl-non-6-énamide (Ex1)

On introduit successivement dans un ballon de 10 mL, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 57 mg de 2 (187 μmol), 80 mg de 4 (373 μmol), 140 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (0,84 mmol) dans 1 ,8 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 24 h. On ajoute 30 mL d'acétate d'éthyle au milieu réactionnel. On lave successivement avec 20 mL d'une solution de HCI (0,1 N), puis 20 mL d'une solution aqueuse saturée de NaCI. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium anhydre, filtrée puis évaporée à sec. On obtient 340 mg d'un solide marron, qui est chromatographié sur une cartouche de silice (25g, éluant CH ₂ Cl ₂ /MeOH- en gradient MeOH 5 à 20%). On recueille 24 mg de produit attendu Ex1. ES : m/z= 421 (M-H) ^' .

[α] _D : -64 +/- 2,7 (c=0,556 mg/0.5 mL MeOH)

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 0,96 (s, 9H) ; 3,24 (s, 3H) ; de 3,25 à 3,32 (m partiellement masqué, 1 H) ; 3,52 (m, 1 H) ; 3,71 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,94 (m, 1 H) ; de 4,28 à 4,39 (m, 4H) ; 4,55 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 4,68 (m, 1 H) ; 5,30 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,63 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; de 7,07 à 7,16 (m, 4H) ; 8,14 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 10,05 (s, 1 H) . IR (KBr): 3420; 2958; 1667; 1499; 1419; 1364; 1111 ; 978 & 757 cm ^'1

Ex2: N-((S)-9-méthyl-8-oxo-6,7,8,9-tetrahydro-5-oxa-9-aza- benzocycloheptèn-7-yl)-(E)-(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2 -méthoxy-8,8- diméthyl-non-6-énamide

Etape 1 : Préparation du ((S)-9-méthyl-8-oxo-6,7,8,9-tetrahydro-5-oxa-9-aza- benzocycloheptèn-7-yl)-carbamate de tert-butyle (5)

15

Dans un ballon de 10 mL, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 1 ml_ de DMF et 72 mg d'hydrure de sodium en suspension à 60% dans l'huile (1 ,8 mmol), on introduit goutte à goutte une solution de 500 mg de 3 (1 ,8 mmol) dans 3 mL de DMF. On agite le milieu pendant 1 h, et puis ajoute 258 mg (1 ,82 mmol) d'iodure de méthyle. On laisse le milieu sous agitation pendant une nuit, puis on ajoute 10 mL d'eau. Un précipité se forme, qui est essoré, lavé à l'eau, et séché sous vide. On obtient ainsi 452 mg de produit attendu 5 (solide blanc, PF : 152,4°C) ES : m/z = 293 MH ⁺ .

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm):: 1,34 (s, 9H) ; 3,28 (s, 3H) ; de 4,25 à 4,40 (m, 3H) ; 7,13 (d, J = 8,0 Hz, 1H) ; 7,18 (dd, J = 2,0 et 7,5 Hz, 1H) ; de 7,22 à 7,33 (m, 2H) ; 7,46 (dd, J = 2,0 et 7,5 Hz, 1H) IR (KBr): 3354; 2976; 1709; 1673; 1533; 1500; 1368; 1254; 1173; 998 & 771 cm ^'1

Etape 2: Préparation du chlorhydrate de 7-(S)-amino-9-méthyl-6,7-dihydro- 9H-5-oxa-9-aza-benzocycloheptèn-8-one (6)

On reprend 0,45 g de 5 (1 ,54 mmol) dans un ballon de 50 mL et on ajoute 11 mL d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite le milieu pendant 1 nuit à TA sous argon. Après évaporation du solvant, on reprend le résidu avec 30 mL d'éther isopropylique. Le solide formé est essoré et séché sous vide. On récupère ainsi 260 mg de produit attendu 6 (solide écru).

IE : m /z = 192 M ⁺ .

[α] _D : -257,5 +/- 2,72 (c=5,842 mg/0.5 mL MeOH)

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm):: 3,35 (s, 3H) ; 4,25 (dd, J = 7,5 et

10,5 Hz, 1 H ) ; 4,43 (t, J = 10,5 Hz, 1 H) ; 4,57 (dd, J = 7,5 et 10,5 Hz, 1 H) ; de 7,24 à 7,38 (m, 3H) ; 7,52 (d large, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 8,43 (s large, 3H) .

IR (KBr): 2985; 1684; 1500; 1478; 1374; 1272; 1246; 1052; 805; 776 & 754 cm ^"1

Etape 3: Préparation du N-((S)-9-méthyl-8-oxo-6,7,8,9-tetrahydro-5-oxa-9- aza-benzocycloheptèn-7-yl)-(E)-(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydro xy-2-méthoxy- 8,8-diméthyl-non-6-énamide (Ex2)

On introduit successivement dans un ballon de 10 ml_, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 55 mg de 2 (225 μmol), 103 mg de 6 (450 μmol), 168 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (1 ,01 mmol) dans 2,5 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 48 h. On ajoute 30 mL d'acétate d'éthyle au milieu réactionnel. On lave avec 20 mL d'une solution aqueuse saturée de NaCI. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium anhydre, filtrée puis évaporée à sec. On obtient 174 mg brut, qui est chromatographié sur une cartouche de silice (12g, éluant CH ₂ CbZMeOH 90/10). On recueille 37 mg de produit attendu Ex2. ES : m/z = 435 (M-H) ^* . [α] _D : -94 +/- 1 ,7 (c=1 ,611 mg/0.5 mL MeOH)

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm):: 0,96 (s, 9H) ; 3,21 (s, 3H) ; de 3,24 à 3,32 (m masqué, 1 H) ; 3,30 (s, 3H) ; 3,49 (m, 1 H) ; 3,69 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,92 (m, 1 H) ; de 4,28 à 4,37 (m, 4H) ; 4,54 (d large, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 4,71 (m, 1 H) ; 5,29 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,62 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 7,21 (dd, J = 2,0 et 7,5 Hz, 1 H) ; de 7,24 à 7,34 (m, 2H) ; 7,48 (dd, J = 2,0 et 7,5 Hz, 1 H) ; 8,15 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) .

Ex3: N-((S)-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1 ,5-benzodiazépin-3-yl)-(E)- (2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8-diméthyl-non- 6-énamide

Etape 1 : Préparation du chlorhydrate de 3-(S)-amino-1 ,3,4,5-tetrahydro-1 ,5- benzodiazépin

Dans un ballon de 25 mL contenant 300 mg de 7 (1 ,08 mmol) (qui peut être préparé selon les modes opératoires décrites dans Bioorg. Med. Chem. Lett. 2002, 12, 1225-1227), on ajoute 5 mL d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite le milieu pendant 6 h à TA sous argon. Un

précipité blanc se forme, qui est essoré, lavé avec de CH ₂ CI ₂ , séché sous vide. On obtient ainsi 221 mg d'aminé 8 sous forme de chlorhydrate. ES : m /z = 178 MH ⁺ . [α] _D : -101 ,1 +/- 1 ,5 (c=2,422 mg/0.5 ml_ MeOH)

Etape 2: Préparation du N-((S)-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1 ,5- benzodiazépin-3-yl)-(E)-(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2-mà ©thoxy-8,8- diméthyl-non-6-énamide (Ex3)

On introduit successivement dans un ballon de 10 mL, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 82 mg de 2 (336 μmol), 101 mg de 8 (403 μmol), 251 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (1 ,51 mmol) dans 1 ,2 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 24 h. On ajoute 30 mL d'acétate d'éthyle au milieu réactionnel. On lave avec 20 mL d'une solution d'eau saturée de NaCI. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium anhydre, filtrée puis évaporée à sec. On obtient 248 mg d'un solide marron, qui est chromatographié sur une cartouche de silice (25g, éluant CH ₂ CI ₂ /MeOH- en gradient MeOH 5 à 20%). On recueille 36 mg de produit attendu Ex3. ES : m /z = 422 MH ⁺ ; m /z = 404 MH ⁺ - H ₂ O. [α] _D : +6,0 +/- 0,7 (c=1 ,512 mg/0.5 mL MeOH)

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm) :0,97 (s, 9H) ; 3,25 (s, 3H) ; de 3,25 à 3,36 (m masqué, 2H) ; de 3,51 à 3,61 (m, 2H) ; 3,72 (d, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 3,95 (m, 1 H) ; 4,33 (d, J = 6,5 Hz, 1 H) ; 4,39 (d, J = 7,0 Hz, 1 H) ; 4,46 (m, 1 H) ; 4,54 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 5,32 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,64 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 5,78 (d, J = 6,5 Hz, 1 H) ; 6,69 (dt, J = 2,0 et 7,5 Hz, 1 H) ; 6,72 (d large, J = 7,5 Hz, 1 H) ; de 6,87 à 6,94 (m, 2H) ; 7,92 (d, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 9,82 (s, 1 H).

Ex4: N-((S)-1 -méthyl-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1 ,5-benzodiazépin-3-yl)- (E)-(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8-diméthyl- non-6-énamide

Etape 1 : Préparation du ((S)-1-méthyl-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1 ,5- benzodiazépin-3-yl)-carbamate de tert-butyle (9)

Dans un ballon de 10 ml_, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 2 ml_ de THF et 36 mg d'hydrure de sodium en suspension à 60% dans l'huile (0,90 mmol), on introduit goutte à goutte une solution de 250 mg de 7 (0,90 mmol) dans 2 ml_ de THF. On agite le milieu pendant 1 h, puis ajoute 130 mg (0,91 mmol) d'iodure de méthyle. On laisse le milieu sous agitation pendant 48 h, on ajoute 5 ml_ d'eau, et extrait avec 3 fois 25 ml_ d'AcOEt. Les phases organiques sont réunies, séchées sur MgSO ₄ , filtrées et évaporées à sec. On obtient 295 mg brut, qui est chromatographié sur une cartouche de silice (25g, éluant Heptane/AcOEt- en gradient AcOEt : 25 à 100%). On recueille 169 mg de produit attendu 9 ES : m /z = 292 MH ⁺ .

Etape 2: Préparation du chlorhydrate de 3-(S)-amino-1 -méthyl-1 ,3,4,5- tetrahydro-1 ,5-benzodiazépin-2-one (10)

On reprend 0,168g de 9 (0,58 mmol) dans un ballon de 25 ml_ et on ajoute 6 ml_ d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite le milieu pendant 4 h à TA sous argon. Un précipité se forme qui est essoré et séché sous vide, on obtient 174 mg de produit attendu 10 sous forme de chlorhydrate.

ES : m /z = 192 MH ⁺ .

[α] _D : -113 +/- 1 ,8 (c=1 ,987 mg/0.5 ml_ MeOH)

Etape 3: Préparation du N-((S)-1-méthyl-2-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1 ,5- benzodiazépin-3-yl)-(E)-(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2-mà ©thoxy-8,8- diméthyl-non-6-énamide (Ex4)

On introduit successivement dans un ballon de 10 ml_, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 80 mg de 2 (328 μmol), 104 mg de 10 (393 μmol), 245 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (1 ,47 mmol) dans 2,0 ml_ de THF. On

maintient l'agitation à TA pendant 48 h. On ajoute 30 ml_ d'acétate d'éthyle au milieu réactionnel. On lave avec 20 ml_ d'une solution aqueuse saturée de NaCI. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium anhydre, filtrée puis évaporée à sec. On obtient 250 mg brut, qui est chromatographié sur une cartouche de silice (12g, éluant CH ₂ CVMeOH 90/10). On recueille 117 mg de produit attendu Ex4. ES : m /z = 458 MNa ⁺ ; m /z = 436 MH ⁺ . [α] _D : -3,3 +/- 0,4 (c=3,007 mg/0.5 ml_ MeOH) RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 0,96 (s, 9H) ; 3,22 (s, 3H) ; 3,25 (s, 3H) ; de 3,25 à 3,37 (m masqué, 2H) ; de 3,47 à 3,62 (m, 2H) ; 3,69 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,93 (m, 1 H) ; 4,31 (m, 2H) ; de 4,49 à 4,59 (m, 2H) ; 5,28 (d, J = 6,0 Hz, 1 H) ; 5,30 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,62 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; de 6,94 à 7,01 (m, 2H) ; 7,08 (t large, J = 8,0 Hz,, 1 H) ; 7,27 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 7,95 (d, J = 8,0 Hz, 1 H).

Ex5: N-((S)-1 -méthyl-4-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1 ,5-bezodiazépin-3-yl)- (E)-(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8-diméthyl- non-6-énamide

Etape 1 : Préparation du ((S)-1-méthyl-4-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1 ,5- benzodiazépin-3-yl)-carbamate de tert-butyle (H)

Dans un vial de 30 ml_, contenant 300 mg de 7 (1 ,08 mmol), 200 mg de K ₂ CO ₃ (1 ,45 mmol) et 3,07 g d'iodure de méthyle (21 ,6 mmol) et 20 ml_ d'acétone. On chauffe le milieu réactionnel à 120 ⁰ C pendant 30 min au micro-onde (300Watt, Biotage). On filtre et évapore à sec. On obtient 395 mg brut, qui est chromatographié sur une cartouche de silice (25g, éluant Heptane/AcOEt- en gradient AcOEt 25 à 100%). On recueille 211 mg de produit attendu H (solide blanc). ES : m /z = 292 MH ⁺ .

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,34 (s, 9H) ; 2,71 (s, 3H) ; 3,15 (m, 1 H) ; 3,41 (m, 1 H) ; 4,03 (m, 1 H) ; de 6,92 à 7,04 (m, 3H) ; 7,10 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 7,17 (dt, J = 1 ,5 et 8,0 Hz, 1 H) ; 9,67 (s, 1 H).

Etape 2: Préparation du chlorhydrate de 3-(S)-amino-5-méthyl-1 ,3,4,5- tetrahydro-1 ,5-benzodiazépin-2-one (12)

On reprend 0,21 g de H (0,72 mmol) dans un ballon de 25 ml_ et on ajoute 5 mL d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite le mileu pendant 1 nuit à TA sous argon. Un précipité se forme qui est essoré et séché sous vide, on obtient 175 mg de produit attendu 12 sous forme de chlorhydrate.

ES : m /z = 192 MH ⁺ .

[α] _D : -52,4 +/- 1 ,1 (c=2,019 mg/0.5 mL MeOH)

Etape 3: Préparation du N-((S)-1-méthyl-4-oxo-2,3,4,5-tetrahydro-1 H-1 ,5- bezodiazépin-3-yl)-(E)-(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2-mé thoxy-8,8- diméthyl-non-6-énamide (Ex5)

On introduit successivement dans un ballon de 10 mL, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 80 mg de 2 (328 μmol), 104 mg de 12 (393 μmol), 245 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (1 ,47 mmol) dans 2,0 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 48 h. On ajoute 30 mL d'acétate d'éthyle au milieu réactionnel. On lave avec 20 mL d'une solution aqueuse saturée de NaCI. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium anhydre, filtrée puis évaporée à sec. On obtient 175 mg brut, qui est chromatographié sur une cartouche de silice (12g, éluant CH ₂ CVMeOH 90/10). On recueille 74 mg de produit attendu Ex5. ES : m /z = 458 MNa ⁺ ; m /z = 436 MH ⁺ . [α] _D : +51 ,4 +/- 1 ,1 (c=1 ,757 mg/0.5 mL MeOH)

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 0,96 (s, 9H) ; 2,73 (s, 3H) ; 3,23 (s, 3H) ; de 3,24 à 3,35 (m masqué, 2H) ; 3,43 (m, 1 H) ; 3,51 (m, 1 H) ; 3,69 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,94 (m, 1 H) ; 4,30 (m, 2H) ; 4,39 (m, 1 H) ; 4,52 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 5,30 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,62 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; de 6,95 à 7,04 (m, 2H) ; 7,10 (d large, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 7,17 (m, 1 H) ; 7,98 (d, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 9,82 (s, 1 H).

Ex6: N-(2-oxo-5-phényl-2,3-dihydro-1 H-1 ,4-benzodiazépin-3-yl)-(E)- (2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8-diméthyl-non- 6-énamide

Etape 1 : Préparation du 3-amino-5-phenyl-1 ,3-dihydro-1 ,4-benzodiazepin-2- one

Dans un ballon de 20 ml_, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 7 ml_ de MeOH et 0,7 g 13 (1 ,82 mmol) (commercial chez Neosystem) et 0,35 ml_ d'acide formique (9,3 mmol), on introduit 38 mg de Pd/C à 10%. On chauffe le milieu réactionnel à 50 ⁰ C pendant 6 h. On filtre sur célite, rince au MeOH, reprend avec 5OmL de CH ₂ CI ₂ , et amène à pH 8 avec une solution d'ammoniaque à 32%. On extrait au CH ₂ CI ₂ , puis lave à l'eau. La phase organique est séchée sur MgSO4, filtrée et évaporée à sec. On obtient 0,437 g produit attendu 14. IC : m /z = 252 MH ⁺ .

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 4,22 (s, 1 H) ; 7,19 (t, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 7,25 (d, J = 7,5 Hz, 2H) ; de 7,40 à 7,51 (m, 5H) ; 7,58 (dt, J = 2,0 et 7,5 Hz, 1 H) ; 10,65 (s large, 1 H) .

Etape 2: Préparation du N-(2-oxo-5-phényl-2,3-dihydro-1 H-1 ,4- benzodiazépin-3-yl)-(E)-(2R,3R,4S,5R)-3,4,5-trihydroxy-2-mà ©thoxy-8,8- diméthyl-non-6-énamide (Ex6)

On introduit successivement dans un ballon de 30 mL, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 235 mg de 2 (818 μmol), 400 mg de 14 (1 ,59 mmol), 340 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (2,04 mmol) dans 3,5 mL de THF. On chauffe à 60 ⁰ C pendant 5 h, et maintient l'agitation à TA pendant 24 h. On ajoute 15 mL de CH ₂ CI ₂ au milieu réactionnel. On lave avec 2 fois 10 mL de HCI (1 N) puis 10 mL d'une solution aqueuse saturée de NaCI. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium anhydre, filtrée puis évaporée à sec. On obtient 510 mg brut, qui est chromatographié sur une

cartouche de silice (30g, éluant CH2CI2/MeOH 97/3). On recueille 73 mg de produit attendu Ex6. ES : m /z = 496 MH+

RMN 1 H (400 MHz, DMSO-d6), δ(ppm): (un mélange 50% - 50% d'isomères): 0,96 (s, 4,5H) , 0,98 (s, 4,5H) ; 3,35 (s, 1 ,5H) ; 3,36 (s, 1 ,5H) ; 3,40 (m, 1 H) ;

3,65 (m large, 1 H) ; 3,89 (d, J = 7,5 Hz, 0,5H) ; 3,91 (d, J = 7,5 Hz, 0,5H) ;

3,99 (m, 1 H) ; de 4,23 à 4,65 (m étalé, 3H) ; 5,22 (d, J = 7,5 Hz, 0,5H) ; 5,26

(d, J = 8,0 Hz, 0,5H) ; 5,34 (m, 1 H) ; 5,63 (d, J = 16,0 Hz, 0,5H) ; 5,65 (d, J =

16,0 Hz, 0,5H) ; 7,26 (m, 1 H) ; 7,32 (m, 2H) ; de 7,42 à 7,55 (m, 5H) ; 7,65 (m, 1 H) ; 8,71 (d, J = 8,0 Hz, 0,5H) ; 8,86 (d, J = 7,5 Hz, 0,5H) ; 10,9 (m large,

1 H)

Ex7: (2R,3R,4S,5R,6E)-N-[(3S)-1 -benzyl-4-oxo-2,3,4,5-tétrahydro-1 H-1 ,5- benzodiazépin-3-yl]-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8-diméth ylnon-6-énamide

Etape 1 : Préparation du [(3S)-1-benzyl-4-oxo-2,3,4,5-tétrahydro-1 H-1 ,5- benzodiazépin-3-yl]carbamate de ferf-butyle (15)

Dans un vial de 5 ml_, contenant 110 mg de 7 (0,397 mmol), 129,2 mg de Cs ₂ CO ₃ (0,397 mmol) et 136 mg d'iodure de benzyle (0,793 mmol) et 3,72 ml_ de méthylisobutylcétone. On chauffe le milieu réactionnel à 130 ⁰ C pendant 20 min au micro-onde (300Watt, Biotage). On filtre et évapore à sec.

Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (20g, éluant

Heptane/AcOEt- en gradient AcOEt 25 à 100%). On recueille 116 mg de produit attendu 15.

ES : m /z = 368 MH ⁺

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,31 (s, 9H) ; 3,18 (m, 1 H) ; 3,32 (m,

1 H) ; de 4,04 à 4,15 (m, 2H) ; 4,40 (d, J = 14,0 Hz, 1 H) ; de 6,93 à 7,32 (m,

10H) ; 9,71 (s, 1 H).

Etape 2: Préparation du (3S)-3-amino-5-benzyl-1 ,3,4,5-tétrahydro-2/-/-1 ,5- benzodiazépin-2-one chlorhydrate (16)

On reprend 357,5 mg de 15 (0,97 mmol) préparé selon le mode opératoire décrit dans l'étape 1 , dans un ballon de 25 ml_ et on ajoute 6,3 ml de dioxane et 7,5 ml_ d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite le milieu pendant 1 nuit à TA sous argon. Un précipité se forme qui est essoré et lavé à l'éther isopropylique (15 ml_) et séché sous vide. On obtient 280 mg de produit attendu 16 (solide blanc) sous forme de chlorhydrate. ES : m /z = 267 MH ⁺

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): De 3,32 à 3,52 (m partiellement masqué, 2H) ; 3,95 (m, 1 H) ; 4,17 (d, J = 14,0 Hz, 1 H) ; 4,43 (d, J = 14,0 Hz, 1 H) ; de 7,01 à 7,38 (m, 9H) ; 8,29 (s large, 3H) ; 10,3 (s, 1 H).

Etape 3: Préparation du (2fî _I 3fî,4S,5fî,6E)-λ/-[(3S)-1-benzyl-4-oxo-2,3,4,5- tétrahydro-1 H-1 ,5-benzodiazépin-3-yl]-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8- diméthylnon-6-énamide (Ex7)

On introduit successivement dans un ballon de 10 ml_, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 67 mg de 2 (274 μmol), 141 mg de 16 (462 μmol), 296 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (1 ,78 mmol) dans 1 ,5 ml_ de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 3 jours. On filtre les insolubles, lave avec du THF, puis évapore à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (20g, éluant AcOEt/MeOH 95/5). On recueille 85 mg de produit attendu Ex7.

ES : m /z = 512 MH ⁺

[<X]D : +153.4+/-2.4. C=1.572 mg/0.5 ml_ CH3OH

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 0,94 (s, 9H) ; 3,19 (s, 3H) ; de 3,20 à

3,42 (m partiellement masqué, 3H) ; 3,49 (m, 1 H) ; 3,64 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ;

3,91 (m, 1 H) ; 4,12 (d, J = 14,0 Hz, 1 H) ; 4,23 (m, 2H) ; 4,41 (d, J = 14,0 Hz,

1 H) ; 4,45 (m, 1 H) ; 4,50 (d, J = 4,0 Hz, 1 H) ; 5,29 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz,

1 H) ; 5,61 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 7,02 (m, 2H) ; de 7,10 à 7,35 (m, 7H) ; 8,02

(d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 9,83 (s, 1 H).

Ex8: (2f?,3fî,4S,5fî,6E)-λ/-[(3S)-1.δ-diméthyl^-oxo^.S^.δ-t étrahydro-i H-1 ,5- benzodiazépin-3-yl]-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8-diméth ylnon-6-énamide

Etape 1 : Préparation du [(3S)-1 ,5-diméthyl-2-oxo-2,3,4,5-tétrahydro-1 H-1 ,5- benzodiazépin-3-yl]carbamate de te/t-butyle (17)

Dans un ballon de 50 ml_, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 10 ml_ de THF et 265 mg de H (0,91 mmol), on introduit à -10 ⁰ C, 36 mg d'hydrure de sodium en suspension à 60% dans l'huile (0,90 mmol). On agite le milieu pendant 1 h, puis ajoute 148 mg (1 ,04 mmol) d'iodure de méthyle. On laisse le milieu sous agitation à TA pendant 24 h. On concentre, et obtient 320 mg de brut, qui est chromatographié sur une cartouche de silice (50g, éluant Heptane/AcOEt- en gradient AcOEt : 10 à 50%). On recueille 235 mg de produit attendu 17 ES : m /z = 328 MNa ⁺ ; m /z = 306 MH ⁺ . RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,33 (s, 9H) ; 2,69 (s, 3H) ; 3,03 (m, 1 H) ; 3,21 (s, 3H) ; 3,35 (m, 1 H) ; 4,04 (m, 1 H) ; 7,03 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; de 7,11 à 7,18 (m, 2H) ; 7,26 (t, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 7,35 (d, J = 8,0 Hz, 1 H).

Etape 2: Préparation du (3S)-3-amino-1 ,5-diméthyl-1 ,3,4,5-tétrahydro-2H-1 ,5- benzodiazépin-2-one chlorhydrate (18)

On reprend 206,8 mg de 17 (0,677 mmol) dans un ballon de 25 mL et on ajoute 5 mL d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite le milieu pendant 1 nuit à TA sous argon. Un précipité se forme. Après avoir évaporé le solvant sous vide, on obtient 213 mg de produit attendu 18

(solide blanc) sous forme de chlorhydrate.

ES : m /z = 206 MH ⁺ . RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm):2,74 (s, 3H) ; 3,30 (s, 3H) ; 3,32 (m,

1 H) ; 3,46 (m, 1 H) ; 3,90 (m partiellement masqué, 1 H) ; de 7,15 à 7,24 (m,

2H) ; 7,31 (dt, J = 1 ,5 et 7,5 Hz, 1 H) ; 7,41 (dd, J = 1 ,5 et 7,5 Hz, 1 H) ; 8,34 (s large, 3H).

Etape 3: Préparation du (2fî,3fî,4S,5fî,6E)-λ/-[(3S)-1 ,5-diméthyl-2-oxo- 2,3,4,5-tétrahydro-1 H-1 ,5-benzodiazépin-3-yl]-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy- 8,8-diméthylnon-6-énamide (Ex8)

On introduit successivement dans ballon de 25 mL, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 208 mg de 2 (852 μmol), 198 mg de 18 (712 μmol), 473 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (2,848 mmol) dans 5,0 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 48 h. On concentre et évapore à sec. On obtient 923 mg de brut, qui est chromatographié sur une cartouche de silice [50 g, éluant AcOEt/AcOEt-isopropanol (50/50), en gradient AcOEt- isopropanol (50/50) : 0 à 50%] . On recueille 172 mg de produit attendu Ex8.

[α] _D : +40,1 +/-0,8. C=2,550 mg/0,5 mL CH3OH. ES : m /z = 472 MNa ⁺ ; m /z = 450 MH ⁺ .

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 0,95 (s, 9H) ; 2,71 (s, 3H) ; 3,11 (dd, J = 7,5 et 10,0 Hz, 1 H) ; 3,21 (s, 3H) ; 3,24 (s, 3H) ; de 3,25 à 3,33 (m masqué, 1 H) ; 3,37 (dd, J = 10,0 et 12,0 Hz, 1 H) ; 3,49 (m, 1 H) ; 3,69 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,92 (m, 1 H) ; 4,32 (m, 2H) ; 4,40 (m, 1 H) ; 4,54 (m large, 1 H) ; 5,29 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,61 (d large, J = 16,0 Hz, 1 H) ; de 7,12 à 7,19 (m, 2H) ; 7,28 (dt, J = 1 ,5 et 7,5 Hz, 1 H) ; 7,37 (dd, J = 1 ,5 et 7,5 Hz, 1 H) ; 8,03 (d, J = 8,0 Hz, 1 H).

Ex9: (2fî,3fî,4S,5fî,6E)-λ/-[(3S)-5-éthyl-4-oxo-2,3,4,5-tét rahydro-1 ,5- benzoxazépin-3-yl]-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8-diméthy lnon-6-énamide

Etape 1 : Préparation du [(3S)-5-éthyl-4-oxo-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5- benzoxazépin-3-yl]carbamate de terf-butyle (19)

Dans un ballon de 25 mL, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 6 mL de DMF et 400 mg de 3 (1 ,44 mmol), on introduit à 0 ⁰ C, 57 mg d'hydrure de sodium en suspension à 60% dans l'huile (1 ,44 mmol). On agite le milieu pendant 1 h, puis ajoute 234 mg (1 ,50 mmol) d'iodure d'éthyle. On agite le milieu à TA pendant 48 h, puis on ajoute 50 mL d'eau glacée, et extrait avec

50 ml_ d'AcOEt. La phase organique est séchée sur MgSO4, filtrée et évaporée à sec. On obtient 477 mg brut, qui est chromatographié sur une cartouche de silice (50g, éluant Heptane/AcOEt-eÏ€ gradient AcOEt 25 à 100%). On recueille 309 mg de produit attendu 19 (solide blanc). ES : m /z = 307 MH ⁺ , 329 MNa ⁺

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 0,99 (t, J = 7,0 Hz, 3H) ; 1 ,33 (s, 9H) ; 3,58 (m, 1 H) ; 4,09 (m, 1 H) ; de 4,21 à 4,36 (m, 3H) ; 7,10 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 7,19 (dd, J = 2,0 et 8,0 Hz, 1 H) ; de 7,23 à 7,34 (m, 2H) ; 7,48 (dd, J = 2,0 et 8,0 Hz, 1 H).

Etape 2: Préparation du (3S)-3-amino-5-éthyl-2,3-dihydro-1 ,5-benzoxazépin- 4(5H)-one chlorhyd

On reprend 0,286 g de 19 (0,934 mmol) dans un ballon de 50 ml_ et on ajoute 7 ml_ de dioxane et 7 ml_ d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite le milieu pendant 1 nuit à TA sous argon. Après évaporation du solvant, on reprend le résidu avec 1 mL de CH ₂ CI ₂ et 10 mL d'éther isopropylique. Le solide formé est essoré et séché sous vide. On récupère ainsi 185 mg de produit attendu 20 (solide blanc). PF : 237,9 +/- 1 °C

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,05 (t, J = 7,0 Hz, 3H) ; 3,70 (m, 1 H) ; 4,10 (m, 1 H) ; 4,19 (dd, J = 8,0 et 10,0 Hz, 1 H) ; 4,40 (t, J = 10,0 Hz, 1 H) ; 4,50 (dd, J = 8,0 et 10,0 Hz, 1 H) ; de 7,23 à 7,39 (m, 3H) ; 7,53 (m, 1 H) ; 8, 18 (m étalé, 3H).

Etape 3: Préparation du (2fî,3f?,4S,5fî,6£)-λ/-[(3S)-5-éthyl-4-oxo-2,3,4 _I 5- tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3-yl]-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8- diméthylnon-6-énamide (Ex9)

On introduit successivement dans ballon de 25 mL, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 181 mg de 2 (742 μmol), 180 mg de 20 (742 μmol), 296 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (1 ,78 mmol) dans 3 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 24 h. On concentre et obtient 727 mg brut, qui est chromatographié sur une cartouche de silice [50 g, éluant

Heptane/AcOEt-Heptanel (50/50), en gradient AcOEt-Heptane (50/50) : 0 à

100%]. On recueille 177 mg de produit attendu Ex9.

ES : m /z = 473 MNa ⁺ _.

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 0,95 (s, 9H) ; 1 ,01 (t, J = 7,0 Hz, 3H) ; 3,21 (s, 3H) ; de 3,23 à 3,35 (m masqué, 1 H) ; 3,50 (m, 1 H) ; 3,61 (m, 1 H) ;

3,69 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,92 (m, 1 H) ; 4,09 (m, 1 H) ; de 4,25 à 4,35 (m, 3H) ;

4,52 (d, J = 4,0 Hz, 1 H) ; 4,68 (m, 1 H) ; 5,29 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,62

(d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 7,21 (m, 1 H) ; de 7,25 à 7,35 (m, 2H) ; 7,50 (m, 1 H) ;

8,10 (d, J = 8,0 Hz, 1 H).

Ex10: (2fî,3fî,4S,5fî,6£)-λ/-[(3S)-5-allyl-4-oxo-2 ₎ 3,4,5-tétrahydro-1 ,5- benzoxazépin-3-yl]-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8-diméthy lnon-6-énamide

Etape 1 : Préparation du [(3S)-5-allyl-4-oxo-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5- benzoxazépin-3-yl]carbamate de ferf-butyle (21)

Dans un ballon de 25 ml_, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 5 ml_ de DMF et 600 mg de 3 (2,16 mmol), on introduit à 0 ⁰ C, 86 mg d'hydrure de sodium en suspension à 60% dans l'huile (2,16 mmol). On agite le milieu pendant 1 h, puis ajoute 264 mg (2,18 mmol) d'iodure d'allyle. On agite le milieu à 0 ⁰ C pendant 2 h, puis on ajoute 10 mL d'eau glacée, et extrait 3 fois avec 25 mL d'AcOEt. Les phases organiques réunies sont séchées sur MgSO4, filtrées et évaporées à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (50g, éluant Heptane/AcOEt- en gradient AcOEt 5 à 30%). On recueille 430 mg de produit attendu 21 (solide blanc).

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,34 (s, 9H) ; de 4,24 à 4,46 (m, 4H) ; 4,61 (m, 1 H) ; 5,04 (d large, J = 10,0 Hz, 1 H) ; 5,12 (d large, J = 17,0 Hz, 1 H) ; 5,22 (m, 1 H) ; 7,14 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; de 7,17 à 7,32 (m, 3H) ; 7,46 (m, 1 H).

Etape 2: Préparation du (3S)-5-allyl-3-amino-2,3-dihydro-1 ,5-benzoxazépin- 4(5H)-one chlorhydrate (22)

On reprend 0,430 g de 21 (1 ,35 mmol) dans un ballon de 50 ml_ et on ajoute 10 mL de dioxane et 10 ml_ d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite le milieu pendant 1 nuit à TA sous argon. Après évaporation du solvant, on reprend le résidu avec 10 mL de CH ₂ CI ₂ puis 10 mL d'éther isopropylique. Le solide formé est essoré et séché sous vide. On récupère ainsi 350 mg de produit attendu 22 (solide blanc). PF : 202,7 +/- 1 ⁰ C

[α] _D : -257,9 +/- 2,8 (c=2,634 mg/0.5 mL MeOH)

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): De 4,20 à 4,65 (m, 5H) ; 5,09 (d large, J = 10,0 Hz, 1 H) ; 5,19 (d large, J = 18,0 Hz, 1 H) ; 5,28 (m, 1 H) ; de 7,21 à 7,38 (m, 3H) ; 7,50 (m, 1 H) ; 8,25 (m étalé, 3H).

Etape 3: Préparation du (2fî,3fî,4S,5fî,6E)-λ/-[(3S)-5-allyl-4-oxo-2,3,4,5- tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3-yl]-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8- diméthylnon-6-énamide (Ex10)

On introduit successivement dans ballon de 25 mL, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 224 mg de 2 (916 μmol), 350 mg de 22 (1 ,374 mmol), 457 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (2 ,748 mmol) dans 5 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 48 h. On concentre et obtient 920 mg brut, qui est chromatographié sur une cartouche de silice [50 g, éluant Heptane/AcOEt, en gradient AcOEt : 30 à 100%]. On recueille 280 mg de produit attendu Ex10. ES : m /z = 461 (M-H ⁺ ) [α] _D : -114.9+/-1.8. (c=1.999 mg/0.5 mL CH ₃ OH)

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 0,95 (s, 9H) ; 3,21 (s, 3H) ; 3,29 (m masqué, 1 H) ; 3,50 (m, 1 H) ; 3,69 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,92 (m, 1 H) ; de 4,22 à 4,42 (m, 5H) ; 4,53 (d, J = 5,5 Hz, 1 H) ; 4,60 (dd, J = 5,5 et 16,0 Hz, 1 H) ; 4,74 (m, 1 H) ; 5,04 (d large, J = 11 ,0 Hz, 1 H) ; 5,15 (d large, J = 18,0 Hz, 1 H) ; 5,29 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,62 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 5,74 (m, 1 H) ; de 7,18 à 7,32 (m, 3H) ; 7,47 (m, 1 H) ; 8,17 (d, J = 8,0 Hz, 1 H).

Ex11 : (2fî,3R,4S,5fî,6£)-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8-dimét hyl-λ/-[(3S)-4- oxo-5-propyl-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3-yl]non-6-énamide

Etape 1 : Préparation du [(3S)-4-oxo-5-propyl-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5- benzoxazépin-3-yl]carbamate de tert-butyle (23)

Dans un autoclave contenant 270 mg de 21 (0,848 mmol), 20 mg de Pd/C (10%) et 5 ml_ de MeOH, on hydrogène sous 4 bars pendant 16 h à 20 ⁰ C. Après filtration sur célite du catalyseur, et évaporation du solvant, on obtint 257 mg de produit 23 attendu qui est utilisé directement pour le stade suivant. ES : m /z = 321 MH ⁺ _: 343 MNa ⁺ .

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 0,75 (t, J = 7,5 Hz, 3H) ; de 1 ,20 à 1 ,50 (m, 2H) ; 1 ,32 (s, 9H) ; 3,51 (m, 1 H) ; 4,12 (m, 1 H) ; de 4,22 à 4,38 (m, 3H) ; 7,08 (d, J = 8,0 Hz ₁ 1 H) ; 7,19 (m, 1 H) ; de 7,21 à 7,33 (m, 2H) ; 7,48 (m, 1 H).

Etape 2: Préparation du (3S)-3-amino-5-propyl-2,3-dihydro-1 ,5- benzoxazépin-4(5H)-one chlorhydrate (24)

On reprend 250 mg de 23 (0,78 mmol) dans un ballon de 50 ml_ et on ajoute

5 ml_ de dioxane et 5,8 ml_ d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite le milieu pendant 1 nuit à TA sous argon. Après évaporation du solvant, on reprend le résidu avec 2 mL de CH ₂ Ck puis 50 ml_ d'éther isopropylique. Le solide formé est essoré et séché sous vide. On récupère ainsi 185 mg de produit attendu 24 (solide blanc).

PF : 220,1 +/- 1 °C

[α]D : -259,l+/-2,8. (c=2,191 mg/0.5 mL CH30H) RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 0,79 (t, J = 7,5 Hz, 3H) ; de 1 ,31 à

1 ,54 (m, 2H) ; 3,61 (m, 1 H) ; 4,16 (m, 1 H) ; 4,21 (dd, J = 7,5 et 10,0 Hz, 1 H) ;

4,41 (t, J = 10,0 Hz, 1 H) ; 4,52 (dd, J = 7,5 et 10,0 Hz, 1 H) ; de 7,23 à 7,38 (m,

3H) ; 7,53 (m, 1 H) ; 8,22 (m large, 3H).

Etape 3: Préparation du (2fî,3fî,4S,5/ ^: ?,6£)-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8- diméthyl-λ/-[(3S)-4-oxo-5-propyl-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3- yl]non-6-énamide (Ex11)

On introduit successivement dans ballon de 25 ml_, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 134 mg de 2 (549 μmol), 169 mg de 24 (0,659 mmol), 350 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (2,11 mmol) dans 2 ml_ de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 1 semaine. On concentre sous vide. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice [20 g, éluant CH ₂ CI ₂ / CH ₂ CI ₂ -MeOH (90/10), en gradient CH ₂ CI ₂ -MeOH (90/10) : 10 à 30%]. On recueille 178 mg de produit attendu Ex11. ES : m /z = 463 (M-H ⁺ )

[α]D : -114.7+/-1 ,9. (c=1 ,737mg/0.5 ml_ CH ₃ OH)

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 0,78 (t, J = 7,5 Hz, 3H) ; 0,95 (s, 9H) ; de 1 ,30 à 1 ,52 (m, 2H) ; 3,21 (s, 3H) ; 3,30 (m masqué, 1 H) ; de 3,47 à 3,60 (m, 2H) ; 3,69 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,92 (m, 1 H) ; 4,13 (m, 1 H) ; de 4,25 à 4,39 (m, 4H) ; 4,52 (m, 1 H) ; 4,69 (m, 1 H) ; 5,30 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,62 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 7,22 (m, 1 H) ; de 7,24 à 7,35 (m, 2H) ; 7,50 (m, 1 H) ; 8,11 (d, J = 8,0 Hz, 1 H).

Ex12: (2fî,3fî,4S,5fî,6£)-3 ₎ 4,5-trihydroxy-λ/-[(3S)-5-isopropyl-4-oxo-2,3,4,5- tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3-yl]-2-méthoxy-8,8-diméthylnon-6-énamid e

Etape 1 : Préparation du [(3S)-5-isopropyl-4-oxo-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5- benzoxazépin-3-yl]carbamate de tert-butyle (25)

Dans un ballon de 10 ml_, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 4 ml_ de DMF et 200 mg de 3 (0,719 mmol), on introduit à -10 ⁰ C, 28 mg d'hydrure de sodium en suspension à 60% dans l'huile (0,719 mmol). On agite le milieu pendant 1 h, puis ajoute 136 mg (2,23 mmol) d'iodure d'isopropyle. On laisse le milieu revenir lentement à TA, et agite pendant 1 nuit, puis on ajoute 50 ml_ d'eau glacée, et extrait avec 50 ml_ d'AcOEt. La phase organique est séchée sur MgSO4, filtrée et évaporée à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (20g, éluant Heptane/AcOEt- en gradient AcOEt 10 à 50%). On recueille 97 mg de produit attendu 25.

ES : m /z = 321 MH ⁺ _: 343 MNa ⁺ .

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-Cl ₆ ), δ(ppm): 1 ,03 (d, J = 7,5 Hz, 3H) ; 1 ,32 (s, 9H) ; 1 ,35 (d, J = 7,5 Hz ₁ 3H) ; de 4,10 à 4,30 (m, 3H) ; 4,60 (m, 1 H) ; 6,99 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 7,20 (dd, J = 2,0 et 8,0 Hz, 1 H) ; de 7,25 à 7,35 (m, 2H) ; 7,40 (dd, J = 2,0 et 8,0 Hz, 1 H).

Etape 2: Préparation du (3S)-3-amino-5-isopropyl-2,3-dihydro-1 ,5- benzoxazépin-4(5/-/)-one chlorhydrate (26)

On reprend 216 mg de 25 (0,67 mmol) dans un ballon de 50 ml_ et on ajoute

2 mL de dioxane et 5,5 mL d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite le milieu pendant 1 nuit à TA sous argon. Après évaporation du solvant, on reprend le résidu avec 10 mL d'éther isopropylique. Le solide formé est essoré et séché sous vide. On récupère ainsi 169 mg de produit attendu 26 (solide blanc).

PF : 248,8 +/- 1 °C

ES : m /z = 221 MH ⁺ _; 243 MNa ⁺ _.

[α] _D : -197.7+/-2.9. (c=1 ,585 mg/0.5 mL CH ₃ OH)

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,12 (d, J = 7,0 Hz, 3H) ; 1 ,41 (d; J =

7,0 Hz, 3H) ; 4,09 (dd, J = 7,5 et 10,0 Hz, 1 H) ; 4,33 (t, J = 10,0 Hz, 1 H) ; 4,42

(dd, J = 7,5 et 10,0 Hz, 1 H) ; 4,59 (m, 1 H) ; 7,28 (dd, J = 2,0 et 8,0 Hz, 1 H) ; de

7,30 à 7,40 (m, 2H) ; 7,45 (dd, J = 2,0 et 8,0 Hz, 1 H) ; 8,15 (m étalé, 3H).

Etape 3: Préparation du (2fî,3fî,4S,5fî,6-≡)-3A5-trihydroxy-λ/-[(3S)-5- isopropyl-4-oxo-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3-yl]-2-méthoxy-8,8- diméthylnon-6-énamide) (Ex12)

On introduit successivement dans ballon de 25 mL, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 172 mg de 2 (704 μmol), 151 mg de 26 (0,588 mmol), 254 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (2,11 mmol) dans 3 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 3 jours. On concentre sous vide. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice [40 g, éluant Heptane/AcOEt- en gradient AcOEt 10 à 100%).. On recueille 181 mg de produit attendu Ex12. ES : m /z = 463 (M-H ⁺ ) [α] _D : -84,2+7-1 ,4 (c=2,028 mg/0.5 mL CH ₃ OH)

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-Cl ₆ ), δ(ppm): 0,95 (s, 9H) ; 1 ,08 (d, J = 7,0 Hz, 3H) ; 1 ,37 (d, J = 7,0 Hz, 3H) ; 3,21 (s, 3H) ; 3,30 (m masqué, 1 H) ; 3,49 (m, 1 H ) ; 3,68 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,92 (m, 1 H) ; de 4,20 à 4,35 (m, 4H) ; de 4,51 à 4,65 (m, 3H) ; 5,29 (dd, J = 7,5 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,62 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 7,23 (dd, J = 2,0 et 8,0 Hz, 1 H) ; de 7,26 à 7,38 (m, 2H) ; 7,42 (dd, J = 2,0 et 8,0 Hz, 1 H) ; 8,02 (d, J = 8,0 Hz, 1 H).

Ex13: (2f?,3fî,4S,5/?,6E)-λ/-[(3S)-5-(3,5-difluorobenzyl)-4-oxo- 2,3,4,5- tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3-yl]-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-8,8- diméthylnon-6-énamide

Etape 1 : Préparation du [(3S)-5-(3,5-difluorobenzyl)-4-oxo-2,3,4,5-tétrahydro- 1 ,5-benzoxazépin-3-yl]carbamate de terf-butyle (27)

Dans un ballon de 10 ml_, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 1 mL de THF et 43 mg d'hydrure de sodium en suspension à 60% dans l'huile (1 ,08 mmol), on introduit à 20 ⁰ C une solution de 3 (300 mg, 1 ,08 mmol) dans 1 ,5 mL THF. On agite le milieu pendant 1 h, puis ajoute 0,446 mg (2,16 mmol) de bromure de 3,5-difluorobenzyle. On agite pendant 1 nuit, puis on ajoute 5 mL d'eau, et extrait 3 fois avec 15 mL d'AcOEt. Les phases organiques réunies sont séchées sur MgSO4, filtrées et évaporées à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (20g, éluant Heptane/AcOEt- en gradient AcOEt 5 à 50%). On recueille 313 mg de produit attendu 27. ES : m /z = 405 MH ⁺

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,35 (s, 9H) ; de 4,32 à 4,53 (m, 3H) ; 4,98 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 5,27 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 6,91 (m, 2H) ; 7,04 (tt, J = 2,0 et 9,0 Hz, 1 H) ; de 7,18 à 7,30 (m, 4H) ; 7,43 (m, 1 H).

Etape 2: Préparation du (3S)-3-amino-5-(3,5-difluorobenzyl)-2,3-dihydro-1 ,5- benzoxazépin-4(5/-/)-one chlorhydrate (28)

On reprend 300 mg de 27 (0,74 mmol) dans un ballon de 50 ml_ et on ajoute 4,8 ml_ de dioxane et 5,6 ml_ d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite le milieu pendant 1 nuit à TA sous argon. Après évaporation du solvant, on reprend le résidu avec 5ml_ de CH ₂ CI ₂ puis 100 mL d'éther isopropylique. Le solide formé est essoré et séché sous vide. On récupère ainsi 234 mg de produit attendu 28 (solide blanc). PF : 208 +/- 1 ⁰ C

[α]D : - 196,5+/- 2,6 C= 2,294 mg/0,5 mL MeOH ES : m /z = 305 MH ⁺ _: 327 MNa ⁺ _. RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): De 4,28 à 4,62 (m, 3H) ; 5,09 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 5,25 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 6,95 (m, 2H) ; 7,10 (tt, J = 2,0 et 9,0 Hz, 1 H) ; de 7,24 à 7,35 (m, 3H) ; 7,46 (m, 1 H) ; 8,33 (s large, 3H).

Etape 3: Préparation du (2fî,3fî,4S,5/ ^: ?,6£)-λ/-[(3S)-5-(3,5-difluorobenzyl)-4- oxo-2, 3,4,5-tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3-yl]-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy- 8,8-diméthylnon-6-énamide (Ex13)

On introduit successivement dans ballon de 10 mL, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 132 mg de 2 (540 μmol), 230 mg de 28 (0,675 mmol), 404 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (2,43 mmol) dans 3,5 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 2 jours. On concentre sous vide. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice [40 g, éluant Heptane/AcOEt- en gradient AcOEt 30 à 100%). On recueille 96 mg de produit attendu Ex12. [α]D : - 123,4+/- 1 ,8 C= 2,065 mg/0,5 mL MeOH PF : 71 ,6 +/- 1°C

ES : ES : m /z = 549 MH ⁺ .

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 0,95 (s, 9H) ; 3,22 (s, 3H) ; 3,30 (m masqué, 1 H) ; 3,51 (m, 1 H) ; 3,70 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,93 (m, 1 H) ; de 4,21 à 4,55 (m, 5H) ; 4,80 (m, 1 H) ; 4,98 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; de 5,23 à 5,35 (m, 2H) ; 5,62 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 6,92 (m, 2H) ; 7,07 (tt, J = 2,0 et 9,0 Hz, 1 H) ; de 7,20 à 7,30 (m, 3H) ; 7,48 (m, 1 H) ; 8,28 (d, J = 8,0 Hz, 1 H).

Ex14: (2fî,3fî,4S,5fî,6E)-7-cyclopentyl-3,4,5-trihydroxy-2-mét hoxy-λ/-[(3S)-5- méthyl-4-oxo-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3-yl]hept-6-énamide

Etape 1 : Préparation du (4fî,4aS,7fî,7aft)-7-méthoxy-2,2-diméthyl-4- vinyltétrahydro-6H-furo[3,2-û(][1 ,3]dioxin-6-one (30)

Dans un ballon de 4000 ml_, équipé d'une agitation mécanique, on charge sous azote 178,2 g de PPh ₃ (0,679 mol), 84,1 g d'imidazole (1 ,235 mol), et 2430 ml_ de THF anhydre, On additionne avec précaution 156,8 g d'Iode bisublimé (0,618 mol) en maintenant la température du mélange réactionnel à 30 ⁰ C. On porte ce milieu au reflux (66°C) durant 1 h, puis on ajoute progressivement 81 g de 29 (0,309 mol) (qui peut être préparé selon les modes opératoires décrits dans Org. Process Res. Dev. 2003, 7(6), 856-865) à 66°C +/- 2°C. Le milieu homogène ainsi obtenu est chauffé au reflux pendant 3 h. On laisse revenir à 20 ⁰ C +/- 5°C, puis on coule 1000 ml_ d'une solution de NaHCO ₃ à 10% (effervescence, athermique) (pH 8,0-8,5). Ensuite on additionne 185,5 g de Na ₂ SaO ₃ jusqu'à la décoloration quasi totale (apparition d'un précipité minéral). Après agitation à 20 ⁰ C +/- 5°C pendant 30 minutes, on filtre et rince avec du THF le solide. Le filtrat THF/H ₂ O est concentré partiellement à l'évaporateur rotatif à une température inférieure à 35 ⁰ C. Le concentrât aqueux est saturé avec NaCI et extrait avec 1500ml de CH ₂ CI ₂ . La phase organique est séchée sur MgSO ₄ , filtrée et évaporée à sec. Le résidu est repris dans 2000 mL d'un mélange H ₂ O/Acétone (75/25), les insolubles sont filtrés, et rincés avec le mélange H ₂ O/Acétone (75/25). Les filtrats sont concentrés à l'évaporateur rotatif à 50 ⁰ C et 20 mbars, et filtrés de nouveau sur un verre fritte (porosité N°4). La phase aqueuse est saturée avec NaCI, est extraite 3 fois avec CH ₂ CI ₂ (1000 mL, 500 mL, et 250 mL). Les phases organiques sont réunies, séchées sur MgSO ₄ , filtrées et évaporées à sec pour donner 60 g de produit brut, qui est dissout dans 250 mL de CH ₂ CI ₂ . On ajoute ensuite dans la solution 30 g de silice. Après agitation pendant 15 min, on filtre la silice, rince 2 fois avec de CH ₂ CI ₂ (250 mL et 100 mL). Le filtrat est concentré à sec et séché sous 1 mbar à 20 ⁰ C pour donner 54,8 g de produit attendu 30 (solide blanc)

RMN ¹ H (300 MHz, DMSO-Cl ₆ ), δ(ppm): 5.85 (m, 1 H) ; 5.35 (d, 1 H) ; 5.25 (d, 1 H) ; 4.80 (m, 1 H) ; 4.69 (m, 1 H) ; 4.43 (d, 1 H) ; 4.22 (m, 1 H) ; 3.40 (s, 3 H) ; 1.49 (s, 3 H) ; 1.30 (s, 3 H).

Etape 2: Préparation du (3fî,4fî,5S)-4-hydroxy-5-[(1 fi)-1-hydroxyprop-2-én-1- yl]-3-méthoxydihyd

Dans un ballon de 100 ml_ contenant 1 ,0 g de 30 (4,38 mmol), 10 ml_ d'eau et 14 mL de THF, on ajoute à 0 ⁰ C goutte à goutte 10 mL de TFA. On laisse le milieu revenir à TA et agite pendant 1 nuit. On concentre ensuite le milieu à pression réduite à TA et ajoute 50 mL d'eau, congèle et lyophilise. Le lyophilisât est empâté dans de l'heptane en présence d'un minimum de méthanol, après évaporation des solvants, on obtient 778 mg de 3_1 attendu (solide blanc). MS : m/z = 211 [M+Na] ⁺ , 189 [M+H] ⁺

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 3,42 (s, 3H) ; 3,98 (dd, J = 2,5 et 9,0 Hz, 1 H) ; de 4,25 à 4,34 (m, 3H) ; 5,22 (dm, J = 10,5 Hz, 1 H) ; 5,29 (d, J = 5,0 Hz, 1 H) ; 5,44 (d partiellement masqué, J = 16,5 Hz, 1 H); 5,46 (m, 1 H) ; 5,97 (m, 1 H).

Etape 3: Préparation du (3fî,4fî,5S)-5-[(1 / ^: ?,2£)-3-cyclopentyl-1-hydroxyprop- 2-én-1 -yl]-4-hydroxy-3-méthoxydihydrofuran-2(3/-/)-one (32)

M 32

Dans un ballo de 250 mL, on ajoute 2 g de 31 (10,63 mmol), 4,22g de vinylcyclopentane (43,92 mmol), 80 mL de CH ₂ CI ₂ et 226 mg de catalyseur de Grubbs 2° génération (C46H65CI2N2PRu, PM 848,98, 0,266 mmol). On agite le milieu pendant 2 h à TA puis chauffe 4h à 45°C. On filtre l'insoluble puis évapore le solvant, le brut (3,39 g) est chromatographié sur une cartouche de silice (150 g) en éluant avec un mélange Heptane/AcOEt (50/50). On obtient 1 ,39 g de produit attendu 32 (solide blanc). MS : m/z = 279 [M+Na] ⁺ , 257 [M+H] ⁺

RMN ¹ H (300 MHz, DMSO-Cl ₆ ), δ(ppm): 0,81 (t, J = 7,5 Hz, 6 H) ; 1 ,23 (m, 4H) ; de 1 ,32 à 1 ,49 (m, 2H) ; 1 ,78 (m, 1 H) ; 3,42 (s, 3H) ; 3,97 (d, J = 9,0 Hz, 1 H) ; 4,20 à 4,31 (m, 3H) ; 5,11 à 5,75 (m, 4 H).

Etape 4: Préparation du (2fî,3R,4S,5f?,6E)-7-cyclopentyl-3,4,5-trihydroxy-2- méthoxy-λ/-[(3S)-5-méthyl-4-oxo-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3- yl]hept-6-énamide (Ex14)

On introduit successivement dans un ballon de 100 mL, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 1 ,9 g de 32 (7,41 mmol), 1 ,7 g de 6 (7,41 mmol),

2,59 g de 2-éthylhexanoate de sodium (15,57 mmol) dans 15,0 mL de THF.

On maintient l'agitation à TA pendant 88 h. On ajoute 45 mL d'AcOEt au milieu réactionnel. On lave successivement avec 15 mL d'eau, 15 mL d'une solution de HCI (0,5N), 10 mL d'eau. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium anhydre, filtrée puis évaporée à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (330 g, éluant, AcOEt/Heptane :

90/10). On recueille 2,54 g de produit attendu Ex14 (Solide Blanc).

[α]D : - 101 ,8+/- 1 ,7 C= 1 ,775 mg/0,5 mL MeOH

PF : 85 +/- 1 °C

Micronanalyse: C=61.32% H=6.81% N=6.22%. C=61.48% H=7.25%

N=6.27%

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,21 (m, 2H) ; de 1 ,42 à 1 ,76 (m,

6H) ; 2,38 (m, 1 H) ; 3,20 (s, 3H) ; de 3,22 à 3,53 (m partiellement masqué,

5H) ; 3,68 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,91 (m, 1 H) ; de 4,22 à 4,40 (m, 4H) ; 4,54 (s large, 1 H) ; 4,71 (m, 1 H) ; 5,35 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,58 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 7,22 (dd, J = 2,0 et 7,5 Hz, 1 H) ; de 7,25 à 7,35 (m, 2H) ;

7,49 (dd, J = 2,0 et 7,5 Hz, 1 H) ; 8,15 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) .

Ex15: (2fî,3fî,4S,5fî,6E)-7-cyclopentyl-λ/-[(3S)-1 ,5-diméthyl-2-oxo-2,3,4,5- tétrahydro-1 H- 1 ,5-benzodiazépin-3-yl]-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxyhept-6- énamide

On introduit successivement dans ballon de 25 ml_, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 208 mg de 32 (852 μmol), 198 mg de 18 (0,712 mmol), 473 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (2,848 mmol) dans 5 ml_ de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 2 jours. On concentre sous vide. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice [50 g, éluant AcOEt/AcOEt- isopropanol (50/50), en gradient AcOEt-isopropanol (50/50) : 0 à 30%]).. On recueille 172 mg de produit attendu Ex15. ES: 462 [M+H] ⁺ RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,21 (m, 2H) ; de 1 ,45 à 1 ,77 (m, 6H) ; 2,39 (m, 1 H) ; 2,71 (s, 3H) ; 3,11 (dd, J = 7,5 et 10,0 Hz, 1 H) ; 3,21 (s, 3H) ; 3,24 (s, 3H) ; 3,30 (m partiellement masqué, 1 H) ; 3,38 (dd, J = 10,0 et 12,0 Hz, 1 H) ; 3,49 (m, 1 H) ; 3,69 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,92 (m, 1 H) ; 4,29 (d, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 4,32 (d, J = 6,0 Hz, 1 H) ; 4,41 (m, 1 H) ; 4,54 (d, J = 4,0 Hz, 1 H) ; 5,36 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,58 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; de 7,11 à 7,19 (m, 2H) ; 7,28 (dt, J = 1 ,5 et 7,5 Hz, 1 H) ; 7,38 (dd, J = 1 ,5 et 7,5 Hz, 1 H) ; 8,04 (d, J = 8,0 Hz, 1 H).

Ex16: (2fî,3fî,4S,5fî,6£)-7-cyclopentyl-3,4,5-trihydroxy-2-mé thoxy-λ/-[(3S)-4- oxo-9-phényl-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3-yl]hept-6-énamide

Etape 1 : Préparation de O-(2-bromo-6-nitrophényl)-λ/-(te/ï-butoxycarbonyl)- L-sérine (34)

Dans un tricol de 1 L contenant 250 ml de DMF et 5,0 g de L-Boc-Serine (24,37 mmol), à 0 ⁰ C, on ajoute par portion 2,00 g de d'hydrure de sodium en suspension à 60% dans l'huile (50 mmol). On agite à TA pendant 4h. Ensuite On transvase lentement, à 0 ⁰ C, cette solution dans un tricol contenant 250 ml DMF et 5,90 g de 2-fluoro-3-bromo-nitrobenzène 33 (26,81 mmol). On laisse le milieu réactionnel revenir à TA et agite pendant 1 nuit. On ajoute 1 L d'AcOEt, et lave 2 fois avec 500 ml_ d'eau saturée d'acide citrique. La phase organique est séchée sur MgSO ₄ , filtrée et enfin évaporée à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (600 g, éluant CH ₂ CbZMeOH, en

gradient MeOH : 0,5 à 10%). On obtient 4,5 g de produit attendu 34 (huile jaune).

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,40 (s, 9H) ; 4,35 (s large, 3H) ; 6,93

(d large, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 7,32 (t, J= 8,0 Hz, 1 H) ; 7,95 (m, 1 H) ; 8,01 (dd, J =

1 ,5 et 8,0 Hz, 1 H ) ; 13,0 (m étalé, 1 H)

Etape 2: Préparation de /V-(terf-butoxycarbonyl)-O-(3-nitrobiphényl-2-yl)-L- sérine (35)

Dans un ballon de 100 ml_, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 16 mL d'eau, 5 ml_ de dioxane et 1 g de 34 (2,47 mmol), on introduit 331 mg d'acide phenylboronique (2,72 mmol), 50,3 mg de chlorure de 1 ,1 '- bis(diphenylphosphino)ferrocene palladium (C35H30CI4FeP2Pd, PM 816,65, 0,025 mmol) et 3,22 g de carbonate de césium (9,87 mmol). On chauffe à 100 ⁰ C le milieu sous agitation pendant 1 h. On concentre le dioxane, et acidifie la phase aqueuse à pH 2-3, extrait 2 fois avec 50 ml d'AcOEt. Les phases organiques réunies sont séchées sur MgSO4, filtrées et évaporés à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (150 g, éluant CH ₂ CVMeOH, en gradient MeOH : 1 à 5%). On recueille 500 mg de produit attendu 35 (Huile Jaune).

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,37 (s, 9H) ; 3,72 (dd, J = 4,5 et 9,0 Hz, 1 H) ; 3,84 (dd, J = 6,0 et 9,0 Hz, 1 H) ; 4,00 (m, 1 H) ; 6,41 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; de 7,38 à 7,52 (m, 4H) ; 7,56 (d large, J = 8,0 Hz, 2H) ; 7,68 (dd, J = 1 ,5 et 8,0 Hz, 1 H) ; 7,88 (dd, J = 1 ,5 et 8,0 Hz, 1 H) ; 12,75 (m étalé, 1 H).

Etape 3: Préparation de 0(3-aminobiphényl-2-yl)-λ/-(tert-butoxycarbonyl)-L- sérine (36)

Dans un autoclave contenant 500 mg de 35 (1 ,243 mmol), 54 mg de Pd/C (10%) et 33 mL d'EtOH, on hydrogène sous 2 bars pendant 10 h à 20 ⁰ C. Après filtration du catalyseur sur célite, on évapore le solvant et obtient 284 mg de produit attendu 36 qui est utilisé directement pour l'étape suivante.

Etape 4: Préparation du [(3S)-4-oxo-9-phényl-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5- benzoxazépin-3-yl]carbamate de terf-butyle (37)

Dans un tricol de 25 mL contenant 284 mg de 36 (0,763 mmol), 6,2 ml_ de DMF, on introduit, à 0 ⁰ C, 0,136 ml de Cyanophosphonate de diéthyle (147,8 mg, 0,906 mmol), et 10 minute après, 0,102 ml de TEA (0,731 mmol). On agite le milieu réactionnel à 0 ⁰ C pendant 2 h. On ajoute 20 ml d'AcOEt, puis lave avec 2 fois 20 mL d'eau distillée. La phase organique est séchée sur MgSO ₄ , filtrée puis évaporée à sec. On obtient 160 mg de produit attendu 37. ES : m /z = 353 (M-H ⁺ )

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,37 (s, 9H) ; de 4,12 à 4,28 (m, 2H) ; 4,43 (m, 1 H) ; 7,04 (d, J = 8,5 Hz, 1 H) ; 7,10 (dd, J = 2,0 et 8,0 Hz, 1 H) ; 7,16 (dd, J = 2,0 et 8,0 Hz, 1 H) ; 7,22 (t, J = 8,0 Hz, 1 H) ; de 7,33 à 7,51 (m, 5H) ; 9,97 (s, 1 H).

Etape 4: Préparation du (3S)-3-amino-9-phényl-2,3-dihydro-1 ,5- benzoxazépin-4(5H)-one chlorhydrate (38)

Dans un ballon de 25 mL contenant 160 mg de 37 (0,452 mmol), on ajoute 3,4 mL d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane (4M). On agite durant 4 h à TA sous argon. On concentre le dioxane, reprend avec 15 mL d'éther isopropylique. On délite le solide formé. On obtient après filtration 113 mg d'aminé 38 (solide crème) sous forme de chlorhydrate. RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): De 4,31 à 4,51 (m, 3H) ; 7,15 (dd, J = 2,0 et 8,0 Hz, 1 H) ; 7,19 (dd, J = 2,0 et 8,0 Hz, 1 H) ; 7,26 (t, J = 8,0 Hz, 1 H) ; de 7,35 à 7,52 (m, 5H) ; 8,52 (s large, 3H) ; 10,55 (s, 1 H).

Etape 5: Préparation du (2fî,3f?,4S,5/ ^: ?,6£)-7-cyclopentyl-3,4,5-trihydroxy-2- méthoxy-λ/-[(3S)-4-oxo-9-phényl-2,3 ₎ 4,5-tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3- yl]hept-6-énamide (Ex16)

On introduit successivement dans un tube Wheatton, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 100 mg de 32 (390 μmol), 113 mg de 38 (390 μmol), 162 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (0,98 mmol) dans 2 ml_ de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 24 h. On concentre le milieu réactionnel à sec. Les résidus sont chromatographiés sur une cartouche de silice (8 g, éluant AcOEt). On recueille 79 mg de produit attendu Ex16. MS : m/z = 533 [M+Na] ⁺ , 511 [M+H] ⁺

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,21 (m, 2H) ; de 1 ,42 à 1 ,77 (m, 6H) ; 2,38 (m, 1 H) ; 3,21 (s, 3H) ; de 3,25 à 3,35 (m masqué, 1 H) ; 3,50 (m, 1 H) ; 3,69 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,91 (m, 1 H) ; de 4,15 à 4,33 (m, 4H) ; 4,52 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 4,79 (m, 1 H) ; 5,35 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,59 (dd, J = 8,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 7,11 (dd, J = 2,0 et 7,5 Hz, 1 H) ; 7,19 (dd, J = 2^ et 7,5 Hz, 1 H) ; 7,23 (t, J = 7,5 Hz, 1 H) ; 7,39 (m, 1 H) ; de 7,41 à 7,51 (m, 4H) ; 8,11 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 10,1 (s, 1H).

Ex17: (2fî,3f?,4S,5fî,6£)-7-cyclopentyl-3,4,5-trihydroxy-2-mét hoxy-λ/-[(3S)-4- oxo-6-phényl-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3-yl]hept-6-énamide

Etape 1 : Préparation du 3-fluoro-2-nitrobiphényl (40)

39 40

Dans un ballon de 250 mL, sous agitation et atmosphère d'argon, contenant 54 mL d'eau, 18 mL de dioxane et 1 ,8 g de 39 (8,18 mmol), on introduit 1 ,1 g d'acide phenylboronique (9,0 mmol), 167 mg de chlorure de 1 ,1 '- bis(diphenylphosphino)ferrocene palladium (C35H30CI4FeP2Pd, PM 816,65, 0,025 mmol) et 10,7 g de carbonate de césium (32,7 mmol). On chauffe à 100 ⁰ C le milieu sous agitation pendant 1 h. ON concentre le dioxane, et extrait 2 fois avec 50 ml d'AcOEt. Les phases organiques réunies sont

séchées sur MgSO4, filtrées et évaporés à sec. On obtient 1 ,34 g de produit attendu 40 (Huile Jaune).

RMN ¹ H (300 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 7,40 (m, 2H) ; de 7,42 à 7,56 (m, 4H) ; 7,66 (dt, J = 2,0 et 9,0 Hz ₁ 1 H) ; 7,78 (dt, J = 6,0 et 9,0 Hz, 1 H).

Etape 2: Préparation de λ/-(tert-butoxycarbonyl)-O-(2-nitrobiphényl-3-yl)-L- sérine (41)

Dans un tricol de 250 ml_ contenant 64 ml de DMF et 1 ,26 g de L-Boc-Serine (6,12 mmol), à 0 ⁰ C, on ajoute par portion 0,735 g de d'hydrure de sodium en suspension à 60% dans l'huile (18,4 mmol). On agite 1 h à froid puis 2h à TA. Ensuite on refroidit à 0 ⁰ C, on additionne goutte à goutte une solution de 40 (1 ,33 g 6,12 mmol) dans 50 ml DMF. On laisse le milieu réactionnel revenir à TA et agite pendant 1 nuit. On ajoute 250 ml_ d'AcOEt, et lave 2 fois avec 250 mL d'une solution aqueuse saturée d'acide citrique. La phase organique est séchée sur MgSO _-I , filtrée et enfin évaporée à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (150 g, éluant CH ₂ CI ₂ /MeOH, en gradient MeOH : 0,5 à 5%). On obtient 280 mg de produit attendu 41 (huile jaune). RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,38 (s, 9H) ; de 4,28 à 4,49 (m, 3H) ; 7,03 (d large, J = 80, Hz, 1 H) ; 7,11 (d large, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 7,32 (m, 2H) ; 7,38 (d large, J = 8,0 Hz, 1 H) ; de 7,40 à 7,52 (m, 3H) ; 7,60 (t, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 13,05 (m étalé, 1 H).

Etape 3: Préparation de 0(2-aminobiphényl-3-yl)-λ/-(fert-butoxycarbonyl)-L- sérine (42)

Dans un autoclave contenant 280 mg de 41 (0,696 mmol), 30 mg de Pd/C (10%) et 18 mL de MeOH, on hydrogène sous 2 bars pendant 10 h à 20 ⁰ C. Après filtration du catalyseur sur célite, on évapore le solvant et obtient 260 mg de produit attendu 42 qui est utilisé directement pour l'étape suivante.

Etape 4: Préparation du [(3S)-4-oxo-6-phényl-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5- benzoxazépin-3-yl]carbamate de tert-butyle (43)

Dans un tricol de 25 ml_ contenant 260 mg de 42 (0,70 mmol), 6,5 ml_ de DMF, on introduit, à 0°C, 0,143 ml de Cyanophosphonate de diéthyle (156 mg, 0,96 mmol), et 10 minute après, 0,109 ml de TEA (0,77 mmol). On agite le milieu réactionnel à 0 ⁰ C pendant 2 h. On ajoute 25 ml d'AcOEt, puis lave avec 2 fois 25 mL d'eau distillée. La phase organique est séchée sur MgSO ₄ , filtrée puis évaporée à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (24 g, éluant Heptane/AcOEt, en gradient AcOEt : 25 à 75%). On obtient 85 mg de produit attendu 43. ES : m /z = 353 (M-H ⁺ )

Etape 4: Préparation du (3S)-3-amino-6-phényl-2,3-dihydro-1 ,5- benzoxazépin-4(5H)-one chlorhydrate (44)

Dans un ballon de 25 mL contenant 85 mg de 43 (0,24 mmol), on ajoute 2 mL de dioxane et 1 ,8 mL d'une solution d'acide chlorhydrique dans le dioxane

(4M). On agite durant 4 h à TA sous argon. On concentre le dioxane, reprend avec 10 mL d'éther isopropylique. On délite avec l'éther isopropylique le solide formé. On obtient après filtration 60 mg d'aminé 44 (solide crème) sous forme de chlorhydrate.

RMN ¹ H (300 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): De 4,32 à 4,65 (m, 3H) ; de 7,15 à

7,50 (m, 8H) ; 8,20 (m étalé, 3H) ; 9,75 (s, 1 H).

Etape 5: Préparation du (2fî,3fî,4S,5fî,6£)-7-cyclopentyl-3,4,5-trihydroxy-2- méthoxy-λ/-[(3S)-4-oxo-6-phényl-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3- yl]hept-6-énamide (Ex17)

On introduit successivement dans un tube Wheatton, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 53 mg de 32 (207 μmol), 60 mg de 44 (207 μmol), 86 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (0,52 mmol) dans 1 ml_ de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 24 h. On concentre le milieu réactionel à sec. Les résidus sont chromatographiés sur une cartouche de silice (4 g, éluant AcOEt). On recueille 45 mg de produit attendu Ex17 (solide crème). MS : m/z = 533 [M+Na] ⁺ , 511 [M+H] ⁺

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,23 (m, 2H) ; de 1 ,43 à 1 ,75 (m, 6H) ; 2,39 (m, 1 H) ; 3,23 (s, 3H) ; 3,52 (m, 1 H) ; 3,71 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,93 (m, 1 H) ; de 4,30 à 4,45 (m, 5H) ; 4,56 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 4,83 (m, 1 H) ; 5,38 (dd, J = 7,5 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,59 (dd, J = 8,5 et 16,0 Hz, 1 H) ; de 7,18 à 7,25 (m, 2H) ; 7,31 (t, J = 7,5 Hz, 1 H) ; de 7,36 à 7,50 (m, 5H) ; 8,19 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 9,35 (s, 1 H).

Ex18: (2fî,3fî,4S,5fî,6£)-7-(2-bromophényl)-3,4,5-trihydroxy- 2-méthoxy-λ/-

[(3S)-5-méthyl-4-oxo-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3-yl]hept-6- énamide

Etape : Préparation du (3f?,4f?,5S)-5-[(1 fî,2E)-3-(2-bromophényl)-1- hydroxyprop-2-én-1-yl]-4-hydroxy-3-méthoxydihydrofuran-2(3 /-/)-one (45)

Dans un ballon de 100 ml_, on ajoute 400 mg de 3_1 (2,13 mmol), 1 ,56 g de 2- bromostyrène (8,5 mmol), 1 ml_ de THF, 16 mL de CH ₂ CI ₂ et 54 mg de catalyseur de Grubbs 2° génération (C46H65CI2N2PRu, PM 848,98, 0,06 mmol). On agite le milieu pendant 24 h à TA. On évapore le solvant, le brut (1 ,9 g) est chromatographié sur une cartouche de silice (90 g) en éluant avec un mélange CH ₂ CI ₂ /MeOH (95/5). On obtient 190 mg de produit attendu 45. RMN ¹ H (300 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 3,42 (s, 3H) ; 4,10 (dd, J = 3,0 et 8,5 Hz, 1 H) ; 4,29 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 4,47 (m, 1 H) ; 4,51 (m, 1 H) ; 5,56 (d,

J = 4,5 Hz, 1 H) ; 5,63 (d, J = 5,0 Hz, 1 H) ; 6,43 (dd, J = 4,5 et 16,0 Hz, 1 H) ; 7,08 (dd, J = 1 ,5 et 16,0 Hz, 1 H) ; 7,22 (dt, J = 2,0 et 7,5 Hz, 1 H) ; 7,39 (dt, J = 2,0 et 7,5 Hz, 1 H) ; 7,63 (dd, J = 2,0 et 7,5 Hz, 1 H) ; 7,69 (dd, J = 2,0 et 7,5 Hz, 1 H).

Etape 2: Préparation du (2fî,3fî,4S,5fî,6E)-7-(2-bromophényl)-3,4,5- trihydroxy-2-méthoxy-λ/-[(3S)-5-méthyl-4-oxo-2,3,4,5-tét rahydro-1 ,5- benzoxazépin-3-yl]hept-6-énamide (Ex18)

On introduit successivement dans un ballon de 10 mL, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 90 mg de 45 (0,22 mmol), 51 mg de 6 (0,22mmol), 93 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (0,56 mmol) dans 2,0 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 24 h. On ajoute 20 mL de CH ₂ Ck au milieu réactionnel. On lave successivement avedOmL d'une solution de HCI (1 N), 10 mL d'eau saturé en NaCI. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium anhydre, filtrée puis évaporée à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (9 g, éluant, AcOEt/Heptane : 85/15). On recueille 49 mg de produit attendu Ex18 (Solide Blanc). ES : m /z = 533 (M-H ⁺ )

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 3,22 (s, 3H) ; de 3,23 à 3,32 (m partiellement masqué, 3H) ; 3,48 (m, 1 H) ; 3,59 (m, 1 H) ; 3,72 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 4,22 (m, 1 H) ; 4,32 (m, 2H) ; 4,45 (d, J = 5,0 Hz, 1 H) ; 4,57 (d, J = 5,0 Hz, 1 H) ; 4,71 (m, 1 H) ; 4,99 (d, J = 4,0 Hz, 1 H) ; 6,33 (dd, J = 6,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 6,82 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; de 7,22 à 7,39 (m, 5H) ; 7,48 (dd, J = 2,0 et 7,5 Hz, 1 H) ; de 7,55 à 7,64 (m, 2H) ; 8,16 (d, J = 8,0 Hz, 1 H).

Ex19: (2fî,3fî,4S,5fî,6£)-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-λ/-[(3S )-5-méthyl-4-oxo- 2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3-yl]-7-(3-thiényl)hept-6-énamide

Etape 1 : Préparation du (3fî,4fî,5S)-4-hydroxy-5-[(1 f?,2£)-1 -hydroxy-3-(3- thiényl)prop-2-én-1 -yl]-3-méthoxydihydrofuran-2(3/-/)-one (45)

Dans un ballon de 50 ml_, on ajoute 200 mg de 31 (1 ,06mmol), 0,486 g de 3- vinylthiophène (4,4 mmol), 8 ml_ de CH ₂ CI ₂ et 27 mg de catalyseur de Grubbs 2° génération (C46H65CI2N2PRu, PM 848,98, 0,03 mmol). On agite le milieu pendant 24 h à TA, puis chauffe 1 h à 40 ⁰ C. On évapore le solvant. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (20 g, éluant, AcOEt/Heptane : 65/35). On obtient 100 mg de produit attendu 46. ES : m /z = 269 (M-H ⁺ )

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 3,41 (s, 3H) ; 4,07 (dd, J = 3,0 et 8,5 Hz, 1 H) ; 4,28 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 4,39 (m, 1 H) ; 4,42 (m, 1 H) ; 5,40 (d, J = 5,5 Hz, 1 H) ; 5,48 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 6,20 (dd, J = 5,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 6,76 (d large, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 7,30 (d large, J = 5,0 Hz, 1 H) ; 7,46 (d large, J = 3,0 Hz, 1 H) ; 7,52 (dd, J = 3,0 et 5,0 Hz, 1 H).

Etape 2: Préparation du (2fî,3fî _> 4S,5f?,6£)-3,4,5-trihydroxy-2-méthoxy-λ/- [(3S)-5-méthyl-4-oxo-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3-yl]-7-(3- thiényl)hep

On introduit successivement dans un ballon de 10 ml_, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 98 mg de 46 (0,36 mmol), 83 mg de 6 (0,36mmol), 151 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (0,91 mmol) dans 1 ,5 ml_ de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 20 h. On ajoute 20 ml_ de CH ₂ CI ₂ au milieu réactionnel. On lave successivement avedOmL d'une solution de HCI (1 N), 10 ml_ d'eau saturé en NaCI. La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium anhydre, filtrée puis évaporée à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (20 g, éluant, CH ₂ CI ₂ /isopropanol : 95/5). On recueille 67 mg de produit attendu Ex19 (poudre). MS : m/z = 485 [M+Na] ⁺ , 463 [M+H] ⁺

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 3,22 (s, 3H) ; de 3,22 à 3,33 (m partiellement masqué, 3H) ; 3,43 (m, 1 H) ; 3,53 (m, 1 H) ; 3,71 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 4,11 (m, 1 H) ; 4,32 (m, 2H) ; 4,39 (d, J = 7,0 Hz, 1 H) ; 4,44 (d, J = 6,0 Hz, 1 H) ; 4,71 (m, 1 H) ; 4,79 (d, J = 4,0 Hz, 1 H) ; 6,09 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ;

6,53 (d, J = 16,0 Hz, 1 H) ; 7,21 (dd, J = 2,0 et 7,5 Hz, 1 H) ; de 7,22 à 7,34 (m, 3H) ; 7,39 (m, 1 H) ; 7,49 (m, 2H) ; 8,14 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) .

Ex20: (2fî _I 3fî,4S,5fî,6£)-7-cyclopentyl-2-éthoxy-3,4,5-trihydroxy-Î »/-[(3S)-4- oxo-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3-yl]hept-6-énamide

Etape 1 : Préparation (4fî,4aS,7fî,7afî)-4-[(4fî)-2,2-diméthyl-1 ,3-dioxolan-4- yl]-7-éthoxy-2,2-diméthyltétrahydro-6H-furo[3,2-c/][1 ,3]dioxin-6-one

Dans un ballon de 100 ml_ contenant 24 ml_ de CH ₂ CI ₂ et 4,0 g de 47 (13,87 mmol) (qui peut être préparé selon les modes opératoires décrits dans Org. Process Res. Dev. 2003, 7(6), 856-865), à 0 ⁰ C, on ajoute 8 ml_ d'iodoéthane (15,44 g, 99 mmol), 9,7 g d'oxyde d'argent et 180 μl d'eau. Le ballon est recouvert immédiatement d'aluminium. On laisse le milieu réactionnel revenir à TA et gite pendant 24h. On dilue le milieu avec 15 mL de CH ₂ CI ₂ , puis filtre les précipités noirs. Le filtrat est évaporé à sec, puis empâté dans 20 mL d'éther éthylique. Après essorage, lavage avec de l'éther et séchage sous vide à 35°C, on obtient 2,64 g de produit attendu 48. MS : m/z =317 [M+H] ⁺

Etape 2 : Préparation du (4fî,4aS,7fî,7afî)-4-[(1 fî)-1 ,2-dihydroxyéthyl]-7- éthoxy-2,2-diméthyltétrahydro-6/-/-furo[3,2-α(][1 ,3]dioxin-6-one (49)

^ Dans un tricol de 100 mL contenant 16 mL d'eau et 16 mL d'acide acétique, on introduit 2,62 g de 48 (8,28 mmol). On agite le milieu pendant 24 h à TA puis concentre sous vide le milieu réctionnel. On délite les résidus avec 25 mL d'éther isopropylqiue, filtre et sèche sous vide. On obtient 2,15 g de produit attendu 49 (solide blanc). MS : m/z = 299 [M+Na] ⁺ , 277 [M+H] ⁺

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-Cl ₆ ), δ(ppm): 1 ,15 (t, J = 7,0 Hz, 3H) ; 1 ,25 (s, 3H) ; 1 ,41 (s, 3H) ; 3,35 (m, 1 H) ; de 3,48 à 3,73 (m, 4H) ; 3,92 (dd, J = 2,0 et 9,0 Hz, 1 H) ; 4,37 (t, J = 2,0 Hz, 1 H) ; 4,40 (t, J = 6,0 Hz, 1 H) ; 4,58 (d, J = 4,0 Hz, 1 H) ; 4,74 (dd, J = 2,0 et 4,0 Hz, 1 H) ; 4,91 d, J = 6,0 Hz, 1 H).

Etape 3: Préparation de (4fî,4aS,7fî,7afl)-7-éthoxy-2,2-diméthyl-4- vinyltétrahydro-6H-f

49 50

Dans un tricol de 250 ml_ contenant 2,15 g de 49 (7,78 mmol) et 100 ml_ de toluène, sous agitation et sous atmosphère d'argon, on ajoute 2,12 g d'imidazole (31 ,13 mmol) et 10,37 g de triphenylphosphine supporté par un copolymère de styrène (Fluka, cas: 39319-11-4, 31 ,13 mmol). On porte le milieu au reflux, et ajoute par petites portions 5 ,93 g d'iode (23,35 mmol). On continue le chauffage pendant 2h, puis refroidit, filtre la résine, lave avec 20 mL de toluène, et 5OmL d'AcOEt. Le filtrat est lavé 2 fois avec 150 mL d'une solution d'eau saturée de NaHCO ₃ . La phase organique est séchée sur sulfate de magnésium anhydre, filtrée puis évaporée à sec. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (250g, éluant CH ₂ CVMeOH- en gradient MeOH 0 à 10%). On recueille 800 mg de produit attendu 50. MS : m/z = 265 [M+Na] ⁺

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,14 (t, J = 7,0 Hz, 3H) ; 1 ,30 (s, 3H) ; 1 ,48 (s, 3H) ; 3,59 (m, 1 H) ; 3,69 (m, 1 H) ; 4,21 (t, J = 2,0 Hz ₁ 1 H) ; 4,52 (d, J = 4,0 Hz, 1 H) ; 4,68 (m, 1 H) ; 4,77 (dd, J = 2,0 et 4,0 Hz, 1 H) ; 5,23 (td, J = 2,0 et 10,5 Hz, 1 H) ; 5,34 (td, J = 2,0 et 17,0 Hz, 1 H) ; 5,33 (m, 1 H).

Etape 4 : Préparation du (3fî,4fî,5S)-3-éthoxy-4-hydroxy-5-[(1 fî)-1- hydroxyprop-2-én-1

Dans un ballon de 25 mL conteant 13 mL d'eau et 800 mg de 50 (3,30 mmol), on ajoute 2,8 mL de TFA. On agite le milieu pendant 2 h à TA puis dilue le milieu avec 200 mL d'eau, congèle et lyophilise. On obtient 550 mg de produit attendu 51 (solide blanc floconneux).

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,18 (t, J = 7,0 Hz, 3H) ; 3,64 (q large, J = 7,0 Hz, 2H) ; 3,98 dd, J = 3,0 et 9,0 Hz, 1 H) ; 4,29 (m, 2H) ; 4,36

(d, J = 4,0 Hz, 1H) ; 5,21 (td, J = 1 ,5 et 10,5 Hz, 1 H) ; 5,29 (d, J = 5,5 Hz, 1 H) ; 5,42 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 5,43 (td, J = 1 ,5 et 17,5 Hz, 1 H) ; 5,96 (ddd, J = 4,5 - 10,5 et 17,5 Hz, 1 H).

Etape 5: Préparation du (3fl,4/?,5S)-5-[(1 fî,2E)-3-cyclopentyl-1-hydroxyprop-2- én-1 -yl]-3-éthoxy-4-hydroxydihydrofuran-2(3H)-one (52)

51 52

Dans un ballon de 50 ml_, on ajoute 550 mg de 51 (2,47 mmol), 0,987 g de vinylcyclopentane (10,26 mmol), 18 mL de CH ₂ CI ₂ et 63 mg de catalyseur de Grubbs 2° génération (C46H65CI2N2PRu, PM 848,98, 0,030 mmol). On agite le milieu pendant 24 h à TA puis, on filtre l'insoluble, évapore le solvant. Le brut est chromatographié sur une cartouche de silice (40 g, éluant AcOEt/Heptane - en gradient AcOEt : 50 à 100%). On obtient 85 mg de produit attendu 52.

RMN ¹ H (500 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,17 (t, J = 7,0 Hz, 3H) ; 1 ,27 (m, 2H) ; de 1 ,47 à 1 ,79 (m, 6H) ; 2,44 (m, 1 H) ; 3,62 (q, J = 7,0 Hz, 2H) ; 3,95 (dd, J = 2,5 et 9,0 Hz, 1 H) ; de 4,20 à 4,28 (m, 2H) ; 4,33 (d, J = 4,0 Hz, 1 H) ; 5,17 (d, J = 5,0 Hz, 1 H) ; 5,35 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 5,49 (dd, J = 5,5 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,81 (dd, J = 8,0 et 16,0 Hz, 1 H).

Etape 6: Préparation du (2fî,3fî,4S,5fî,6E)-7-cyclopentyl-2-éthoxy-3,4,5- trihydroxy-λ/-[(3S)-4-oxo-2,3,4,5-tétrahydro-1 ,5-benzoxazépin-3-yl]hept-6- énamide (Ex20)

On introduit successivement dans un tube Wheatton, sous agitation et sous atmosphère d'argon, 110 mg de 52 (407 μmol), 87 mg de 4 (407μmol), 169 mg de 2-éthylhexanoate de sodium (1 ,02 mmol) dans 2 mL de THF. On maintient l'agitation à TA pendant 24 h. On concentre le milieu réactionnel à sec. Les résidus sont chromatographiés sur une cartouche de silice (8 g, éluant AcOEt). On recueille 75 mg de produit attendu Ex20. MS : m/z = 471 [M+Na] ⁺ , 449 [M+H] ⁺

RMN ¹ H (400 MHz, DMSO-d ₆ ), δ(ppm): 1 ,10 (t, J = 7,0 Hz, 3H) ; 1 ,23 (m, 2H) ; de 1 ,43 à 1 ,77 (m, 6H) ; 2,39 (m, 1 H) ; de 3,23 à 3,55 (m partiellement

masqué, 4H) ; 3,79 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 3,93 (m, 1 H) ; de 4,23 à 4,40 (m, 4H) ; 4,55 (d, J = 4,5 Hz, 1 H) ; 4,69 (m, 1 H) ; 5,39 (dd, J = 7,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; 5,59 (dd, J = 8,0 et 16,0 Hz, 1 H) ; de 7,13 à 7,18 (m, 4H) ; 8,09 (d, J = 8,0 Hz, 1 H) ; 10,05 (s, 1 H).

Activité biologique des produits préparés:

Au jour du dépôt de la demande, il a été mesuré que le Caco2-TC7 du produit de l'exemple 2 (Papp single point = 52.10 ⁷ cm. sec ^"1 ) est meilleur que celui du produit de l'exemple 22a (Papp single point = 6.10 ⁷ cm. sec ^"1 ) décrit dans la demande de brevet WO2006/056696.

L'activité antiproliférative des produits des exemples du tableau 1 a été déterminée par mesure de l'inhibition de la prolifération cellulaire de cellules HCT116.

Les cellules sont ensemencées dans un milieu de culture cellulaire à une concentration de 10 000 cellules par puits, dans 0.17 mL de milieu, et 20 μL de produit à tester, à différentes concentrations, et 10 μL de Thymidine [methyl-14C] (100 μCi/ml - activité spécifique 47.90 mCi/mmol; NEN Technologies référence NEC568 batch 3550-001) sont ajoutés, puis les cellules sont incubées à 37°C et 5% de CO ₂ . Milieu utilisé pour la culture de cellules HCT116 : milieu DMEM 2 mM L- glutamine, 200 Ul/ml pénicilline, 200 μg/ml streptomycine and 10% (WV) Sérum de veau fÅ“tal (Life Technologies).

Après 96 heures, l'incorporation de ¹⁴ C-thymidine est comptée dans un compteur à scintillation liquide 1450 Microbeta Wallac Trilux. Les résultats R sont exprimés en cpm (coups par minute) et convertis en pourcentage d'inhibition de croissance Gl% en faisant premièrement la soustraction de la moyenne du nombre de cpm des puits sans cellules B et en divisant ensuite par le nombre de cpm des puits des cellules non traitées C comprenant 20μL de milieu de dilution du produit contentant 1% d'éthanol. (Gl % = (R - B) x 1007 C %).

Les valeurs d'IC50 sont calculées à l'aide de l'équation 205 du logiciel XLFit (IDBS company, UK) par analyse de régression non linéaire utilisant l'algorithme Marquardt (Donald W. MARQUARDT, J.Soc.industry.appI, vol 11 , No. 2, June, 1963).

Les produits du tableau 1 présentent une IC50 sur les cellules HCT116 généralement inférieure à 30μM et de préférence inférieure à 10OnM. Par exemple, le composé de l'exemple 1 a une IC50 de 60 nM, le composé de l'exemple 2 a une IC50 de 32 nM, le composé de l'exemple 3 a une IC50 de 88nM, le composé de l'exemple 4 a une IC50 de 45 nM, le composé de l'exemple 5 a une IC50 de 28 nM.

- Tableau 1 -