以下、本発明を詳細に説明する。
 本発明を適用することによって、新規な毛� ��成長促進剤、発毛促進剤及び脱毛症治療剤� ��提供することができる。これら毛髪成長促� ��剤、発毛促進剤、脱毛症治療剤は、FGF18の� �性または発現を抑制する点、及び持続的高� �度のFGF18が毛包(毛根と呼ばれる場合もある)� ��成長を抑制する作用を利用する点で共通す� ��。

 毛包とは、毛を作る器官である。毛包の� ��長周期は、成長期(anagen)、退行期(catagen)、� �行期に続く休止期(telogen)からなり、休止期� �後に成長期に入るというサイクルである。� �般に、マウスの実験系では、成長期は脱毛� �1~19日目の期間であり、退行期は20~21日目の� �間である。また、脱毛後、21~22日目に休止期 に入ることが知られている。成長期において は、新しい毛の成長(伸長)が活発化するとと� ��に、皮膚内では毛包の成長が活発化して、� ��の底部が皮膚の下部近傍に到達する。一方� ��休止期においては、毛包は皮膚の浅いとこ� ��に小さい状態で存在する。また、成長期と� ��止期とでは皮膚の厚さも全く異なる。さら� ��有色体毛を持つマウスでは、成長期の初期� ��はメラニン色素が合成され、皮膚が青くな� ��ているのを視認することができる。したが� ��て、皮膚の外側から青い色を見て毛包の成� ��周期の進行を評価することもできる。また� ��成長期に皮膚を切開して裏側から見ると、� ��ラニン色素を多量に含んだ毛包が高い密度� ��並ぶこととなるため、皮膚の裏側が黒なっ� ��いるのを視認することができる。これに対� ��て休止期においては、皮膚の裏側は白いま� ��であることを視認することができる。例え� ��、マウスの実験系では、生後7~8週齢のマウ� ��の背中の毛は全て休止期にあり、また、生� ��ている毛を抜くことにより、同調して成長� ��が開始する。

1.FGF18活性阻害物質
 本発明に係る新規な毛髪成長促進剤、発毛� ��進剤又は脱毛症治療剤に含まれるFGF18活性� �害物質は、例えばFGF18の部分断片であっても 良い。
 FGF18は、ヒトとマウスでは産生細胞の細胞� �で207アミノ酸のポリペプチドとして合成さ� �、それが細胞外に分泌される際にN末端のシ� ��ナルペプチドが切断され、181アミノ酸より� ��る分泌体として生理作用を発揮する。そし� ��、7種類あるFGF受容体サブクラス(FGFR1c、FGFR1 b、FGFR2c、FGFR2b、FGFR3c、FGFR3b、FGFR4)のうち少� �くとも4つ、すなわちFGFR1c、FGFR2c、FGFR3c、FGFR 4と反応する。
 本発明において「FGF18」というとき、ヒト� �来に限定されず、例えば、他の哺乳動物由� �のFGF18を使用することができる。他の哺乳動 物としては、マウス、ラット、ニワトリ、七 面鳥、ウシ、ブタ、ヒツジ及びウサギ等を挙 げることができるが、これらに限定されない 。例えば、配列番号1に示すヒト由来FGF18の塩 基配列に基づいて作製したプローブを定法に 従って用いれば、ヒトを除く他の哺乳動物か らFGF18をコードする遺伝子を単離することが� ��きる。
 シグナル配列除去後のヒト由来FGF18の塩基� �列及びアミノ酸配列をそれぞれ配列番号1及� ��2に示す。シグナル配列除去後のマウス由来 FGF18の塩基配列及びアミノ酸配列をそれぞれ� ��列番号3及び14に示す。これら配列番号2及び 14に示すアミノ酸配列を比較すると判るよう� ��、哺乳動物においてFGF18は非常に高い相同� �を有しており、哺乳動物におけるFGF18の機能 はほぼ同様であると理解することができる。

 ところで、一般にアンタゴニストとは、受� ��体には結合はするが、その受容体を刺激す� ��生体物質(リガンド)とは異なり生体反応を� �こさないかまたは比較的弱い生体反応しか� �こさず、また本来結合すべき生体内物質と� �容体の結合を阻害し、生体応答反応を引き� �こさないかまたは減弱させる物質をいう。FG F18は、上述のように、7種類あるFGF受容体サ� �クラスのうちの少なくともFGFR1c、FGFR2c、FGFR3 c、FGFR4と反応するので、本発明において「FGF 18アンタゴニスト作用」というときは、FGFR1c� ��FGFR2c、FGFR3c、FGFR4のいずれかの受容体を発� �している細胞に対して、FGF18による応答を引 き起こさないかまたは減弱させる物質をいう 。FGF18アンタゴニストがFGF18の受容体への結� �を妨げることになってFGF18に起因する毛髪成 長抑制作用を阻害し、結果的に毛髪成長促進 効果を有することになる。
 FGF18アンタゴニスト作用を有するFGF18部分ペ プチドの場合としてヒトFGF18の場合を例にと� ��ば、配列番号2に示すアミノ酸配列における 32~151番目の領域は、FGFファミリーで共通性の 高いコア配列と呼ばれる領域であって、この 領域だけで構築される3次元構造は受容体と� �基本的な結合能を有しているが完全な活性� �持たないと考えられることから、当該領域� �対応する領域のアミノ酸配列からなる部分� �プチドは、FGF18アンタゴニスト作用を有する と考えられる部分ペプチドである。当該領域 に対応するコア配列を含むFGF18部分ペプチド� ��あって、FGFR4などの受容体への結合能は十� �有しており、かつFGF18応答を引き起こすほど に十分な長さを有していない場合は、FGF18ア� ��タゴニスト作用を有する。
 実際に実験的に確かめた結果からは、図3に 示されるように、配列番号14において、N末端 から翻訳開始のために導入されたメチオニン を除く16個欠失した場合でもアンタゴニスト� ��用を及ぼし、好ましくは22個、より好まし� �は77個、最も好ましくは95個のアミノ酸を欠� ��した部分ペプチドはさらに強いFGF18アンタ� �ニスト作用を有するということができる。� �なわち、少なくともN末側のアミノ酸配列に� ��いては、95個まで欠失しても受容体結合能� �失わず、むしろアンタゴニスト作用が強ま� �ているといえるから、N末側のアミノ酸配列� ��32番目から始まる上記コア配列の全てがFGF� �容体の結合に必須の配列ではないことは明� �かであり、N末側アミノ酸をさらに除去した� ��合であってもFGF18アンタゴニストであると� �える。また、このことからみて、C末側につ� ��ても、コア配列のC末側に相当する、C末端� �ら31番目までのアミノ酸を欠失した場合の部 分ペプチドにFGF18アンタゴニスト作用がある� ��とは明らかである上に、さらにC末側アミノ 酸配列を大きく欠失させた場合も、受容体結 合能を完全には失わないことが十分期待でき るから、C末端から31個以上の、例えば43個、5 7個、67個、82個、94個、108個、113個、125個な� �のアミノ酸を欠失した部分ペプチドも強いFG F18のアンタゴニスト作用のある部分ペプチド であると考えられる。そして、これはN末側� �C末側を同時に除去しても当該アンタゴニス� ��作用が保たれることはもちろんであるから� ��少なくとも32~151番目のアミノ酸配列を含有� ��るペプチドのみならず、むしろ好ましくは7 7~151、より好ましくは95~151番目のアミノ酸配� ��を含むペプチドもFGF18アンタゴニスト作用� �有するということができる。

 また、FGF18又はFGF18反応性受容体に結合する 抗体、すなわち、抗FGF18抗体や抗FGFR3c抗体、� ��FGFR4抗体も同様にFGF18とその受容体との結合 を阻害するので、FGF18による毛包成長抑制作� ��を阻害する。
 そこで、本発明では、上記FGF18アンタゴニ� �トも含めて、FGF18とその受容体との結合を阻 害する物質など、FGF18の受容体を介しての作� ��を阻害する物質を「FGF18の活性阻害物質」� �いう。
 このような、FGF18活性阻害作用を有する物� �は、FGF18とは無関係な物質群から選択された 物質であっても良く、下記2.のスクリーニン� ��方法を適用することにより、簡単にFGF18活� �阻害作用を有する物質を取得することがで� �る。本願の実施例においても、当該スクリ� �ニング方法により、FGF18の活性阻害作用があ るゴーヤー抽出物を選択し、当該ゴーヤー抽 出物に、FGF18の毛包成長抑制作用を阻害し、� ��つ毛包成長作用があることを確認した。こ� ��ように、本発明におけるFGF18の活性阻害物� �は、FGF18の受容体との結合を阻害することで FGF18による毛包の成長抑制作用を阻害し、結� ��的に毛髪の成長促進作用を有する。
 これらのFGF18の活性阻害物質が、ペプチド� �タンパク質もしくは糖タンパク質の場合、� �れらペプチドなど自身を含む製剤として投� �してもよいことはもちろんであるが、当該� �プチドなどをコードするDNAを組み込んだ発� �ベクターの状態で投与することもできる。� �とえば、FGF18部分ペプチドをコードするDNAを 組み込んだ発現ベクターを有効成分とする製 剤も、毛髪成長促進剤、発毛促進剤及び脱毛 症治療剤として用いることができる。
 そして、これらのFGF18の活性阻害物質は、� �独で、もしくは併用して、毛髪成長促進剤� �発毛促進剤及び脱毛症治療剤として用いる� �とができる。

2.FGF18活性阻害物質のスクリーニング方法
 FGF18の活性阻害物質をスクリーニングし、� �検物質を毛髪成長促進剤又は発毛促進剤及� �脱毛症治療剤の候補とする方法は、具体的� �は、以下の(a)~(c)の工程を含むものである。
(a)FGFR1c、FGFR2c、FGFR3c及びFGFR4から選ばれた少� ��くとも1つのFGF受容体遺伝子を用いて遺伝子 操作により細胞表面に強制的に発現させ、当 該細胞を培養する工程、
(b)(a)工程で得られた、細胞表面にFGF受容体を 有する細胞系にFGF18とともに披検物質を接触� ��せる工程、
(c)(b)工程において、FGF18の細胞増殖促進活性� ��阻害する活性を観察した披検物質を選択す� ��工程
 ここで、FGF受容体遺伝子としては、FGF18が� �合し、かつ細胞表面に受容体を有する細胞� �対するFGF18の細胞増殖作用が確認されている FGFR1c、FGFR2c、FGFR3c及びFGFR4の受容体遺伝子の� ��なくとも1つを用いる。好ましくは、FGFR3cま たはFGFR4遺伝子を用いる。(b)工程で、被検物� ��を細胞に接触させる場合に、典型的には、� ��胞培養液に被検物質を直接投与するが、特� ��被検物質がタンパク質の場合などは、当該� ��検物質をコードする遺伝子をFGF受容体発現� ��胞中に導入することも可能である。
 また、FGF受容体を細胞表面に強制的に発現� ��せるための細胞は、培養可能な細胞であれ� ��どのような細胞でもよいが、好ましくはマ� ��スIL-3依存性Ba/F3細胞株である。
 スクリーニングに際しては、48時間以上、� �えば72時間程度培養し、FGF18を単独で添加し� ��場合に比べ、FGF受容体発現細胞の細胞増殖� ��が、5%以上、好ましくは10%以上低下してい� �ことを目安にスクリーニングすることが好� �しい。
 そして、FGF受容体遺伝子を導入していない� ��細胞は対照試験に用いることができ、披検� ��質を用いて(b)工程で添加したFGF18をIL-3に置� ��換えて同様の操作を行い、披検物質がこれ� ��親細胞に対してはIL-3の細胞増殖促進活性を 阻害しないことを確認する工程を設けること が好ましい。
 

3.FGF18の発現抑制物質及びそのスクリーニン� �方法
 FGF18は毛包内に存在する内在因子であるの� �、毛包細胞内でのFGF18遺伝子の転写及び翻訳 を阻害する物質、すなわちFGF18遺伝子の発現� ��低下させる物質も毛包細胞中のFGF18濃度を� �下させて、FGF18による毛髪成長の促進作用を 引き起こすことができるから、毛髪成長促進 作用及び発毛作用を有する。
 このようなFGF18遺伝子の発現を阻害する物� �は、FGF18遺伝子に対するsiRNAまたはその発現� ��クターとして公知の方法で設計することが� ��き、その活性は、動物培養細胞又は実験動� ��を用いてFGF18遺伝子の発現を阻害するか否� �をモニターすることで確認することができ� �。
 また別に、このようなFGF18遺伝子の発現を� �害する物質は、動物培養細胞又は実験動物� �用いてFGF18遺伝子の発現を阻害するか否かを モニターすることでスクリーニングすること ができる。

 具体的には、先ず、FGF18遺伝子を観察可能� �程度に発現する動物培養細胞又は実験動物� �用意し、被検物質を当該動物培養細胞もし� �は実験動物に接触させるか又は実験動物に� �与する。なお、実験動物とは、ヒトを除く� �例えば、マウス、ラット、ニワトリ、七面� �、ウシ、ブタ、ヒツジ及びウサギ等を意味� �る。被検物質としては、何ら限定されない� �、例えば、植物抽出液、ペプチド、タンパ� �質、非ペプチド性化合物、低分子化合物、� �成化合物、発酵生産物、細胞抽出液、動物� �織抽出液等が挙げられる。これらの物質は� �規な物質であってもよいし、公知の物質で� �ってもよい。被検物質を細胞もしくは動物� �接触させる場合に、典型的には、被検物質� �細胞培養液に添加するか又は実験動物に投� �するが、特に被検物質がタンパク質の場合� �どは、当該被検物質をコードする遺伝子をFG F受容体発現細胞中に導入することも可能で� �る。
 次に、当該動物培養細胞又は実験動物にお� ��るFGF18遺伝子の発現をモニターする。動物� �養細胞又は実験動物におけるFGF18遺伝子の発 現は、例えば、FGF18抗体を用いたELISA等の常� �を用いて解析するか、あるいは該細胞内又� �実験動物内におけるFGF18遺伝子のmRNA量を定� �的逆転写PCR法やノーザンブロット法等によ� �解析するといった方法によりモニターする� �とができる。
 これらいずれかの解析により、被検物質の� ��存在下で培養された動物培養細胞内におけ� ��FGF18遺伝子の発現量と比べて、被検物質の� �在下で培養された動物培養細胞内又は実験� �物内におけるFGF18遺伝子の発現量が低下すれ ば、当該被検物質は毛髪成長促進或いは発毛 といった機能を有する可能性があると判断で きる。具体的には、被検物質を作用させない 場合と比較して、mRNA量が0.8倍以下、好まし� �は0.7倍以下、より好ましくは0.5倍以下に減� �すれば、確実にFGF18の発現抑制物質であると いえる。培養角化細胞や培養真皮細胞、培養 毛乳頭細胞でのFGF18のmRNA発現量は、培養条件 や細胞の種類により様々であるので、上記の 方法などにより個別に測定し、その数値が0.8 倍以下に減少することを目安にスクリーニン グすればよい。
 このような工程を経てスクリーニングされ� ��FGF18の発現抑制物質は、単独で、もしくは� �用して、毛髪成長促進剤、発毛促進剤又は� �毛症治療剤として用いることができる。

4.毛髪成長促進剤、発毛促進剤又は脱毛症治� ��剤
 上記「1.FGF18の活性阻害物質」及び/又は「3. FGF18の発現抑制物質」で説明した物質は、例� ��ば、皮膚適用向けに適合化された溶液、ク� ��ーム、軟膏、ゲル、ローシヨン、シャンプ� ��又はエアゾールといった形態で製剤化され� ��毛髪成長促進剤、発毛促進剤又は脱毛症治� ��剤として提供される。
 特に、毛髪成長促進剤、発毛促進剤又は脱� ��症治療剤は、局所投与用に適合化された薬� ��学上許容されるキャリアと共にFGF18活性阻� �物質及び/又は発現抑制物質を含んだ医薬組� ��物の形で投与される。FGF18活性阻害物質及� �/又は発現抑制物質を含有する毛髪成長促進� ��、発毛促進剤又は脱毛症治療剤は、薬学上� ��容されるキャリア中に通常約0.01~約100μg/日/ cm ² 、好ましくは約0.1~約10μg/日/cm ² の活性化合物を含有している。言い換えると 、FGF18の濃度は薬学上許容されるキャリア中� ��通常約0.01~約100μg/日/cm ² 、好ましくは約0.1~約10μg/日/cm ² の活性化合物である。
 さらにまた、局所投与用に適合化された薬� ��学上許容されるキャリアとしては、特に限� ��されないが、親水ワセリン又はポリエチレ� ��グリコール軟膏のような軟膏、キサンゴム� ��ようなゴム等のペースト、アルコール、水� ��又は緩衝液のような溶液、水酸化アルミニ� ��ム又はアルギン酸ナトリウムゲルのような� ��ル、ヒト又は動物アルブミンのようなアル� ��ミン、ヒト又は動物コラーゲンのようなコ� ��ーゲン、アルキルセルロース、ヒドロキシ� ��ルキルセルロース及びアルキルヒドロキシ� ��ルキルセルロースのようなセルロース、メ� ��ルセルロース、ヒドロキシエチルセルロー� ��、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキ� ��プロピルメチルセルロース及びヒドロキシ� ��ロピルセルロース、プルロニックF-127で例� �されるプルロニック(Pluronic(商標))ポリオ-ル� ��ようなポリマ-;テトロニック1508のようなテ� ��ロニック(tetronic)、アルギン酸ナトリウムの ようなアルギン酸塩を挙げることができる。
 本発明に係るFGF18の活性阻害物質としては� �FGF18部分ペプチドなどのFGF18の活性阻害タン� ��ク質、ペプチドをコードするDNAを組み込ん� ��発現ベクターを用いることができるが、そ� ��場合は、通常の遺伝子治療の形態で提供す� ��ことができる。発現ベクターとしては、動� ��細胞においてFGF18部分ペプチドなどを発現� �せるためのプロモーターなどの配列を備え� �が、特に限定されるものではない。発現ベ� �ターとしては、例えば、プラスミドベクタ� �、ウイルスベクターなどが利用可能である� �、これらに限定されない。

 また、本発明に係る毛髪成長促進剤、発毛� ��進剤又は脱毛症治療剤は、FGF18発現抑制物� �を有効成分として含有するものであっても� �い。すなわち、本発明に係る毛髪成長促進� �、発毛促進剤又は脱毛症治療剤は、FGF18に対 するsiRNA発現ベクターを用いた遺伝子治療と� ��て提供することができる。発現ベクターと� ��ては、動物細胞においてsiRNAを発現するた� �のプロモーターなどの配列を備えるが、特� �限定されるものではない。発現ベクターと� �ては、例えば、プラスミドベクター、ウイ� �スベクターなどが利用可能であるが、これ� �に限定されない。また、FGF18発現抑制物質は 、FGF18に対するsiRNA発現ベクターに限定され� �い。
 遺伝子治療用の毛髪成長促進剤、発毛促進� ��又は脱毛症治療剤を細胞内に導入する方法� ��しては、ウイルスベクターを利用した遺伝� ��導入方法、非ウイルス性の遺伝子導入方法( 日経サイエンス,1994年4月号,20-45頁、実験医学 増刊,12(15)(1994)、実験医学別冊「遺伝子治療  の基礎技術」,羊土社(1996))のいずれの方法も� ��用することができる。
 ウイルスベクターによる遺伝子導入方法と� ��ては、例えばレトロウイルス、アデノウイ� ��ス、アデノ関連ウイルス、ヘルペスウイル� ��、ワクシニアウイルス、ポックスウイルス� ��ポリオウイルス、シンビスウイルス等のDNA� ��イルス又はRNAウイルスに、TR4あるいは変異T R4をコードするDNAを組み込んで導入する方法� ��挙げられる。このうち、レトロウイルス、� ��デノウイルス、アデノ関連ウイルス、ワク� ��ニアウイルスを用いた方法が、特に好まし� ��。非ウイルス性の遺伝子導入方法としては� ��発現プラスミドを直接筋肉内に投与する方� ��(DNAワクチン法)、リポソーム法、リポフェ� �ション法、マイクロインジェクション法、� �ン酸カルシウム法、エレクトロポレーショ� �法等が挙げられ、特にDNAワクチン法、リポ� �ーム法が好ましい。

5.インビトロ毛髪再生系への応用
 FGF18の活性阻害物質及び/又は発現抑制物質� ��用いて、再生された皮膚組織における毛髪� ��インビトロ再生系を構築することができる� ��ここで、皮膚組織とは、分離した皮膚幹細� ��を培養することによって得られる、皮膚の� ��種の細胞からなる組織を意味する。皮膚の� ��種の細胞とは、特に限定されないが、皮膚� ��皮の上皮細胞、皮膚上皮基底層の細胞、毛� ��を構成する各種細胞、真皮の細胞及び脂肪� ��胞等を意味する。皮膚組織を再生する際に� ��用される細胞は、異種細胞、同種他家細胞� ��び同種自家細胞のいずれであっても良い。
 先ず、皮膚幹細胞からの皮膚の各種細胞へ� ��分化を制御する方法としては、特に確立さ� ��た技術がないため、本発明においては特に� ��定されない。例えば、自然分化(spontaneous di fferentiation)が起きた段階において異なる発現� ��示す増殖因子受容体を利用し、それぞれに� ��応するリガンド増殖因子を培地中に加える� ��とにより、異なった分化方向を有する細胞� ��選択的に増幅することができる。異なった� ��化方向を有する細胞を選択的に増幅した後� ��皮膚組織を作製することができる。
 人工皮膚組織の作製方法としては、特に定� ��った技術はないため、本発明においては限� ��されないが、例えば、上皮細胞だけを培養� ��層状に仕上げる方法、繊維芽細胞など真皮� ��構成細胞により真皮層を形成した後、上皮� ��胞を重層させて一体化する方法、その後上� ��細胞の表面を空気に暴露することにより表� ��化を促進させる方法、真皮層の変わりに、� ��物分解が可能な成分により形成された層状� ��ィルムを用いる方法、など、様々な方法を� ��ることができる。また、本発明は、ヒトか� ��採取した皮膚組織から皮膚幹細胞を分離し� ��分離した皮膚幹細胞を用いて皮膚組織を作� ��するといった、いわゆる再生医療における� ��膚組織の作製方法も適用される。このとき� ��新たに作製した皮膚組織は、採取したヒト� ��同一人に対して治療のために戻すことを前� ��としても良いし、採取したヒトと異なる他� ��に対して治療のために移植することを前提� ��るものであってもよい。
 このような皮膚組織の作製方法において、� ��地中にFGF18の活性阻害物質及び/又は発現抑� ��物質を適当な時期に添加することによって� ��再生した皮膚組織において毛包の成長を促� ��することができ、当該皮膚組織における毛� ��の成長或いは発毛を促進することができる� ��さらに、皮膚組織の作製方法において、培� ��中にFGF18活性阻害物質及び/又は発現抑制物� ��を適当な時期に添加することによって、皮� ��細胞の増殖を促進することができ、皮膚組� ��全体の体積の増大を図ることができる。

6.ゴーヤー抽出物
 本発明の前記2.のスクリーニング方法によ� �得られたFGF18活性阻害物質はゴーヤー抽出物 であり、実施例に示すようにその発毛促進効 果も確認された。
 ゴーヤー抽出物の原料となるゴーヤーは、� ��リ科ツルレイシ属の植物で、学名はMomordica� �charantiaであり、ニガウリ、または、ツルレ� �シとも呼ばれている。
 ゴーヤーからその抽出物を得るに当たって� ��、植物体の全部位が使用可能であり、各部� ��を単独に、或いは適宜混合して抽出原料に� ��いることができる。また、原料となる植物� ��の性状は、乾燥状態のもの、非乾燥状態の� ��の、いずれも用いることができる。

 ゴーヤーから、本発明に用いる抽出物を� ��るには、これらの原料を必要により細切な� ��し粉砕し、適当な溶媒を用いて、一般に用� ��られる抽出法で抽出すれば良い。抽出に用� ��られる溶媒は、特に限定されないが、例え� ��水、無水或いは含水有機溶媒を例示するこ� ��ができる。無水或いは含水有機溶媒として� ��、1価アルコール、多価アルコールまたはそ の誘導体、ケトン、エステル、エーテル、石 油エーテル、脂肪族炭化水素、またはハロゲ ン化合物、芳香族炭化水素より選択された一 種または二種以上を例示することができる。 具体的な溶媒としては、水、メタノール、エ タノール、ブタノール、アセトン、酢酸エチ ルエステルが例示され、これらは一種または 二種以上を組み合わせて用いることができる 。このうち、特に水、或いはメタノールやエ タノール等の1価アルコールを用いることが� �ましい。抽出に当たって、上記溶媒の使用� �は特に限定されないが、抽出原料であるゴ� �ヤーに対して、0.1-1000重量倍、好ましくは1-1 00重量倍、更に好ましくは2-50重量倍である。

 上記溶媒による抽出法は、常法に従って� ��なうことができる。例えば抽出温度につい� ��は、室温程度の温度で抽出しても良く、ま� ��用いられる溶媒の沸点付近の温度で抽出し� ��も良い。また、抽出操作についても、ゴー� ��ーの乾燥粉砕物もしくは粉砕物を室温下で1 -30日間浸漬することにより抽出する方法や、 抽出溶媒の沸点程度の温度において還流抽出 する方法等を用いることができる。

 下記の実施例において示されるように、� ��発明のゴーヤーの抽出物からなる物質は、F GFR4遺伝子を発現したBa/F3細胞に対して、FGF18� ��よる細胞増殖を阻害するFGF18阻害活性を有� �る。実施例では、FGFレセプターの1つであるF GFR4を遺伝子発現操作により細胞表面に強制� �に発現させた細胞を用いたときに、FGF18の存 在下で、FGF18による細胞増殖に対して、ゴー� ��ー抽出物の添加により濃度依存的に阻害す� ��ことが示された。ゴーヤー抽出物のこの作� ��は、同時に行われたFGF18非存在下の細胞増� �に対しては増殖阻害作用を示さなかったこ� �から、細胞障害作用ではなく、FGF18活性阻害 作用であることが示された。

 すなわち、本発明のゴーヤーの抽出物か� ��なる物質は、FGF18による細胞増殖を阻害す� �FGF18活性阻害物質である。